Cytologie v tenké Cytologie v tenké vrstvěvrstvě

J. Kalenská, M. Tomšová, S. J. Kalenská, M. Tomšová, S. ŠtiplŠtipl

FÚP, FN Hradec KrálovéFÚP, FN Hradec Králové

CytodiagnostikaCytodiagnostika Diagnostická metoda pro téměř každý Diagnostická metoda pro téměř každý

lékařský obor – k odlišení maligních změn lékařský obor – k odlišení maligních změn od benigních a hodnocení účinku léčbyod benigních a hodnocení účinku léčby

Morfologická vyšetřovací metoda Morfologická vyšetřovací metoda Vychází z poznatků histologie a patologie Vychází z poznatků histologie a patologie

(rozdíl: vyšetřuje jednotlivé buňky natřené (rozdíl: vyšetřuje jednotlivé buňky natřené na sklíčku – dochází ke ztrátě kontinuity na sklíčku – dochází ke ztrátě kontinuity tkáně)tkáně)

Vztah ke klin. oborům - gynekologie, Vztah ke klin. oborům - gynekologie, pneumologie, urologie, mammologiepneumologie, urologie, mammologie

HistorieHistorie

19. století – urologie- Lambl19. století – urologie- Lambl 40. léta 20. st. – gynekologie – G. 40. léta 20. st. – gynekologie – G.

Papanicolau (metodika barvení nátěrů)Papanicolau (metodika barvení nátěrů) Po II. svět. válce – rozvoj gynekol. Po II. svět. válce – rozvoj gynekol.

cytologie u nás – J. Trampl, O. Nyklíček, cytologie u nás – J. Trampl, O. Nyklíček, F. Luksch, J. Herold, Z. Lojda a dalšíF. Luksch, J. Herold, Z. Lojda a další

Nedůvěra odborné veřejnosti k Nedůvěra odborné veřejnosti k diagnostice malignit z cytologických diagnostice malignit z cytologických nátěrů - ještě v roce 1947 (patologové i nátěrů - ještě v roce 1947 (patologové i gynekologové)gynekologové)

Gynekologická cytologieGynekologická cytologie Po II. sv. válce se využívá poševní cytologie Po II. sv. válce se využívá poševní cytologie

jako neorganizované screeningové metody jako neorganizované screeningové metody (tj. vyšetření žen bez příznaků)(tj. vyšetření žen bez příznaků)

Vhodnost jednoduché a rychlé metody pro Vhodnost jednoduché a rychlé metody pro hromadná vyšetření ženhromadná vyšetření žen

Usnadnění volby pro histologickou verifikaci Usnadnění volby pro histologickou verifikaci Význam v dětské endokrinologii – metoda Význam v dětské endokrinologii – metoda

posouzení hormonálních poruchposouzení hormonálních poruch Největší význam: dg. prekanceróz a ca Největší význam: dg. prekanceróz a ca

děložního hrdladěložního hrdla

Cervikální karcinomCervikální karcinom Jedna z nejčastějších malignit u násJedna z nejčastějších malignit u nás 2x vyšší incidence u nás oproti 2x vyšší incidence u nás oproti

západní Evropě a USAzápadní Evropě a USA Cytodiagnostika v gynekologii vedla Cytodiagnostika v gynekologii vedla

k dramatickému snížení malignity v k dramatickému snížení malignity v této oblastitéto oblasti

Standardní způsob Standardní způsob provedení nátěrůprovedení nátěrů

Podmínky správné diagnostiky:Podmínky správné diagnostiky: 1)gynekologem kvalitně provedený nátěr 1)gynekologem kvalitně provedený nátěr

(z odpovídajícího místa, v dostatečném (z odpovídajícího místa, v dostatečném množství, správně provedený nátěr na množství, správně provedený nátěr na sklíčko) – až 50 % falešně negativních sklíčko) – až 50 % falešně negativních cytologií díky nesprávnému odběrucytologií díky nesprávnému odběru

2) kvalitní vyhodnocení nátěru 2) kvalitní vyhodnocení nátěru screenérkou – až 30% falešně pozitivních screenérkou – až 30% falešně pozitivních výsledků (pacientku neohrožují –mohou výsledků (pacientku neohrožují –mohou však vést ke zbytečným operačním však vést ke zbytečným operačním výkonům a psychickému stresu výkonům a psychickému stresu vyšetřované ženy)vyšetřované ženy)

Kritické momentyKritické momenty Nekvalitní nátěr (příměs hlenu, krve Nekvalitní nátěr (příměs hlenu, krve

nebo špatné nanesení stěru na nebo špatné nanesení stěru na sklíčko) – vede až k sklíčko) – vede až k nediagnostickému závěrunediagnostickému závěru

Nemožnost použít specifické Nemožnost použít specifické markery pro dysplastické buňkymarkery pro dysplastické buňky

Cytologie v tenké vrstvěCytologie v tenké vrstvě(tzv. liquid based cytology)(tzv. liquid based cytology)

Cytologie v tenké vrstvěCytologie v tenké vrstvě

Cytologie v tenké vrstvěCytologie v tenké vrstvě

Cytologie v tenké vrstvěCytologie v tenké vrstvě

Výhody cytologie v tenké Výhody cytologie v tenké vrstvěvrstvě

Vyšší senzitivita oproti běžným stěrům Vyšší senzitivita oproti běžným stěrům (není kontaminace hlenem, krví a (není kontaminace hlenem, krví a zánětlivými elementy, nejsou přítomny zánětlivými elementy, nejsou přítomny netrasparentní silné a nehodnotitelné netrasparentní silné a nehodnotitelné partie)partie)

Redukce problémů s nízkou kvalitou Redukce problémů s nízkou kvalitou odběru a fixace (zaschnutí preparátů vede odběru a fixace (zaschnutí preparátů vede k eozinofilii a ke vzniku artefaktů, k eozinofilii a ke vzniku artefaktů, zejména jaderných)zejména jaderných)

Možnost využít stejný vzorek k dalším Možnost využít stejný vzorek k dalším vyšetřenímvyšetřením

Další testaceDalší testace Imunocytochemická vyšetření – p 16: Imunocytochemická vyšetření – p 16:

vysoce senzitivní a specifický marker pro vysoce senzitivní a specifický marker pro dysplastické dlaždicové i žlazové bb, dysplastické dlaždicové i žlazové bb, nepřímá imunocytochemická metoda za nepřímá imunocytochemická metoda za použití primární protilátkypoužití primární protilátky

Molekulárně patologická vyšetření (in situ Molekulárně patologická vyšetření (in situ hybridizační metody – CISH – chromogen hybridizační metody – CISH – chromogen in situ hybridizace) – využití genových in situ hybridizace) – využití genových sond značených chromogenem, velmi sond značených chromogenem, velmi senzitivní metoda, identifikuje 1-2 kopie senzitivní metoda, identifikuje 1-2 kopie HPV DNA v jádře infikované bbHPV DNA v jádře infikované bb

Nevýhody cytologie v tenké Nevýhody cytologie v tenké vrstvěvrstvě

Finanční nákladnost (1 kit cca 50Kč + Finanční nákladnost (1 kit cca 50Kč + přístrojové vybavení: homogenizační přístrojové vybavení: homogenizační zařízení, měřící jednotka, speciální zařízení, měřící jednotka, speciální centrifuga = cca 150 000,-Kč)centrifuga = cca 150 000,-Kč)

Technicky a časově náročnější Technicky a časově náročnější zpracování v laboratoři (+ zaučení zpracování v laboratoři (+ zaučení personálu)personálu)

Při malém množství odebraných Při malém množství odebraných nádorových bb se nemusejí dostat na nádorových bb se nemusejí dostat na sklo – nutnost opakování centrifugacesklo – nutnost opakování centrifugace

Cytologie v tenké vrstvě Cytologie v tenké vrstvě na FÚPna FÚP

Cílem bylo zejména využití k dalším Cílem bylo zejména využití k dalším vyšetřenímvyšetřením

Průkaz onkoprotein p-16Průkaz onkoprotein p-16 Detekce DNA high risk HPV pomocí Detekce DNA high risk HPV pomocí

chromogen in situ hybridizace (CISH) chromogen in situ hybridizace (CISH) V případech opakovaných hraničních V případech opakovaných hraničních

nálezů (ASC-US a ASC-H - u pacientek nálezů (ASC-US a ASC-H - u pacientek nad 35 let – další terapeutické nad 35 let – další terapeutické rozhodování) nebo při sledování pacientek rozhodování) nebo při sledování pacientek ( min. 1 rok) po výkonu pro dysplazii ( min. 1 rok) po výkonu pro dysplazii (dochází k perzistenci HPV infekce?)(dochází k perzistenci HPV infekce?)

Naše zkušenostiNaše zkušenosti Nepovažujeme za nutné tuto metodu používat Nepovažujeme za nutné tuto metodu používat

při rutinním screeningu (finanční nákladnost)při rutinním screeningu (finanční nákladnost) Za významné pokládáme možnost použití Za významné pokládáme možnost použití

imunohistochemie nebo molekulárních metod imunohistochemie nebo molekulárních metod v indikovaných případechv indikovaných případech

FÚP jediná laboratoř v ČR využívající FÚP jediná laboratoř v ČR využívající standardně tuto metodu pro všechny standardně tuto metodu pro všechny pacientky vyšetřené v poradně pro cervikální pacientky vyšetřené v poradně pro cervikální patologii a expertní kolposkopii Porodnicko-patologii a expertní kolposkopii Porodnicko-gynekologické kliniky FN HKgynekologické kliniky FN HK

Děkuji za pozornost