Curs Bioseguretat-Agents Biologics.ES v201710-161)Balanza 2)Cabina de flujo laminar o cabina de...

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CURSO DE BIOSEGURIDAD

Dr. Antoni Bennàsar FiguerasComitè de BioseguretatDepartament de Biologia

TEMA:Agentes biológicos: virus, bacterias, hongos y parásitos. Muestras de origen humano, animal o ambiental potencialmente contaminadas con agentes biológicos. Microorganismos modificados genéticamente.

Marco legal Español

www.uib.catCURSO DE BIOSEGURIDAD

Des del Comitè de Bioseguretat confiam que aquest curs us sigui d’utilitat.

17:30 – 18:00 MMG

ü

• 16:10 - 17:15

Dr. Antoni BennasarGrup de Recerca en Microbiologia

Marco legal EspañolLey 31/1995 Prevención de Riesgos Laborales

RD 39/1997 Reglamento de los Servicios de Prevención

RD 664/1997, sobre la protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajo

n Orden de 25 de marzo de 1998 por la que se adapta en función del progreso

técnico el RD 664/1997

Orden ESS/1451/2013, por la que se establecen disposiciones para la

prevención de lesiones causadas por instrumentos cortantes y punzantes

en el sector sanitario y hospitalario

Ley 15/1997, Ley 9/2003 Régimen jurídico de la utilización confinada,

liberación voluntaria y comercialización de OMG, a fin de prevenir los

riesgos para la salud humana y el medio ambiente

n RD 178/2004, desarrollo y ejecución de la Ley 9/2003


Protección de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajoü Disposiciones mínimas aplicables a las actividades en las que los

trabajadores estén o puedan estar expuestos a agentes biológicos debido a la naturaleza de su trabajo.

ü “Guía técnica para la evaluación y prevención de los riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos” en su 2ª Edición (1ª Impresión: noviembre 2014);

“El elemento básico de la bioseguridad es el cumplimiento estricto de unas prácticas de trabajo y técnicas microbiológicas adecuadas. Las personas que trabajan con agentes infecciosos o materiales potencialmente infectados han de conocer los posibles riesgos y han de

estar capacitados en las prácticas y técnicas requeridas para manipular dichos materiales de forma segura”.

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RD 664/1997 Agentes biológicos en el trabajo

http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Normativa/GuiasTecnicas/Ficheros/agen_bio.pdf

Situaciones y actividades que NO IMPLICAN la intención deliberada de manipular agentes biológicos; pero con respecto a las cuales existe incertidumbre acerca de la presencia o utilización en el trabajo de agentes biológicos que puedan causar una enfermedad en el hombre.ANEXO I

• Instalaciones depuradoras de aguas residuales

• Unidades de eliminación de residuos (incluídasplantas de compostaje)

• Actividades en las que existe contacto con animales y/o sus productos

• Centros de producción de alimentos• Trabajos agrarios

• Asistencia sanitaria, comprendidos servicios de aislamiento y anatomía patológica

• Laboratorios clínicos, veterinarios, de diagnóstico e investigación, con exclusión de los laboratorios de diagnóstico microbiológico.

RD 664/1997 Agentes biológicos en el trabajo


Situaciones de utilización deliberada que implican el cultivoy/o concentración de los agentes biológicos:• Investigación y/o trabajar con

animales/plantas infectados.• Procesos Industriales

Biotecnológicos:ü Alimentaciónü Farmacéutica

• Diagnóstico microbiológico

RD 664/1997 Definiciones

Artículo 2Los agentes biológicos se definen como «microorganismos, con inclusión de los genéticamente modificados, cultivos celulares y endoparásitos humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad».Microorganismo toda entidad microbiológica celular o no, capaz de reproducirse o de transferir material genético para lograrlo.


¿Qué es un microorganismo?…también llamado microbio• Griego científico,

ü μικρόβιος [microbios];o μικρός [micrós], ‘pequeño’, o βίος [bíos], ‘vida’; ser vivo diminuto.

”Es un ser vivo, o un sistema biológico, que solo puede

visualizarse con el microscopio”


MicroorganismosSe consideran 4 tipos básicos:

Bacterias,Hongos,Virus,Parásitos (protozoos, helmintos, etc.).


Incremento del tamaño

Incremento del grado de complejidad

Descenso del número por unidad de muestra ambiental

Número y Diversidad en Microbiología

Virus Bacteria Hongos Algas Protozoos y Helmintos

Acelular Procariotas Eucariotas

Algunos causan enfermedades (patógenos), la mayoría de microbios NO.1 gramo de suelo = 10 millones bacteriasHay más bacterias en nuestra nariz que personas en el mundoLas formas más antiguas vivas sobre el planeta tierra son las bacteriasØ más de 3,8 billones de años

Las bacterias constituyen la mayor parte de la biomasa de la tierra, pero sólo 1% han sido cultivadasØ La mayoría reciclan nutrientes

Sólo unas pocas son siempre perjudiciales,

La mayoría son beneficiosas o

neutras

Algunas bacterias pueden serbeneficiosas, neutras o dañinas;

dependiendo del ambiente,

Bacterias

Un inventario planetario de los microbios

Los Microorganismos están en todas partes

Un inmenso IMPERIO INVISIBLE de actividades que ayudaron a crear la biosfera y que continúan dando soporte a la vida sobre la tierra

El microbiomahumano

La Microbiota Normal

De hecho, ¡Nosotros somos parte de él!

El Enemigo Invisible

Toxicidad• Endotoxinas

• Exotoxinas

• Micotoxinas

Microorganismos - Efectos

Virus

Bacterias

Hongos

Parásitos

Infección

Alergias• Esporas


Aflatoxinas• Aspergillus flavus.

Ocratoxina• Aspergillus ochraceus, Penicilium viridicum.

T-2• Fusarium ssp.

Satratoxina• Stachybotrys chartarum,Trichoderma viridi.

Microorganismos - Micotoxinas


• Sistema vascular– Incremento de la fragilidad vascular,

hemorragia tisularo Aflatoxinao Satratoxina

• Sistema digestivo– Diarrea, vómitos, hemorragia intestinal, fibrosis

y necrosis hepáticao Aflatoxina

– Efectos cáusticos en membranas mucosaso T-2

– Anorexiao Vomitoxina

• Sistema urinario– Toxicidad renal

o Ocratoxina

Microorganismos - Micotoxinas• Sistema reproductor

– Infertilidad, cambios en el ciclo reproductoro T-2

• Sistema respiratorio– Alteración respiratoria, hemorragia pulmonar

o Tricotecenos• Sistema nervioso

– Temblores, descoordinación, depresión, dolor de cabeza

o Tricotecenos• Sistema cutáneo

– Erupción, quemazón, fotosensibilidado Tricotecenos

• Sistema inmunitario– Cambios, supresión

o Muchas micotoxinas


Requisitos de espacio y organización

El trabajo con microorganismosMás allá de dónde se lleven a cabo las pruebas microbiológicas, se les debe asignar un espacio físico.


Requisitos de espacio y organizaciónEl espacio del laboratorio: complejidad y tipo de microorganismos


1) Balanza2) Cabina de flujo laminar o cabina de

seguridad biológica3) Microscopio4) Estufa de cultivo5) Nevera con congelador

6) Congelador para mantenimiento de cepas de referencia a -80º Celsius.

7) Estufa de esterilización8) Autoclave de descontaminación9) Autoclave de esterilización10) Estufa de secado

Sala de lavado

Droguero Oficina

2Sala de preparación de muestras

Sala de preparación de material

3 4

5 7

10.2

1

9

Sala de siembra

Area de acceso restringido

8

6

10Sala de

productos y reactivos


RD 664/1997 – Clasificación según riesgo

Se distinguen 4 grupos de riesgo: Virulencia y la dosis infectiva del microorganismo,Disponibilidad de tratamiento,Modo de transmisión en el laboratorio,Riesgo de difusión en la comunidad,Viabilidad del microorganismo en el entorno.


RD 664/1997 – Clasificación según riesgoAgente biológico del grupo 1

• Aquel que resulta poco probable que cause una enfermedad en el ser humano.Agente biológico del grupo 2

• Aquel que puede causar una enfermedad en los humanos y puede suponer un peligro para los trabajadores, no obstante es poco probable que se propague a la colectividad y generalmente existen profilaxis o tratamientos eficaces.

Agente biológico del grupo 3• Aquel que puede causar infecciones graves en el ser humano y presenta un

serio peligro para los trabajadores, con riesgo variable de propagarse a la comunidad y generalmente se dispone de tratamiento o profilaxis eficaz.

Agente biológico del grupo 4• Aquel que causa una enfermedad grave en el ser humano, supone un serio

peligro para los trabajadores, pueden propagarse a la comunidad con mucha facilidad y generalmente no existe una profilaxis o un tratamiento eficaz.


RD 664/1997 – Clasificación según riesgoAgente biológico del grupo 1• Este grupo incluye microorganismos que no son patógenos para las

personas sanas.• Se trata de microorganismos ambientales, asociados a vegetales o

formando parte de la flora normal de los animales,ü Escherichia coli K12, ü Bacillus subtilis, ü Staphylococcus epidermidis,

• Microorganismos que se utilizan en la industria alimentaria,ü Saccharomyces cerevisiae.

• Este tipo de microorganismos es el recomendado para que los estudiantes de un curso de introducción a la microbiología realicen sus prácticas.




Agente biológico del grupo 2• Por lo tanto, se trata de un grupo cuyos agentes son capaces de causar infecciones de carácter moderado o

grave, • Se transmiten fundamentalmente por contacto o por ingestión, • Entre ellos se encuentran Staphylococcus aureus, Salmonella entérica, Neisseria gonorrhoeae, etc…

Agente biológico del grupo 3• En este grupo hay que incluir:

ü Bacterias: Mycobacterium tuberculosis, Yersinia pestis, brucelas, ü Virus: Hepatitis B y C o el de la inmunodeficiencia humana.

Agente biológico del grupo 4• En este grupo se incluyen virus como:

ü Ebola, ü Lassa, ü Marburg,ü Viruela (cepas de archivo).


Anexo II


• La Seguridad Biológica se fundamenta en tres elementos:1. Las técnicas de laboratorio,2. El equipo de seguridad (o barreras primarias)3. El diseño de la instalación (o barreras

secundarias)

Prevención del riesgo biológico (RD 664/97)

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Técnicas de laboratorio• El elemento más importante para contener los riesgos biológicos es el

seguimiento estricto de las prácticas y técnicas estándar microbiológicas.§ Las técnicas de laboratorio son los procedimientos de trabajo recomendados.§ Hay que tener en cuenta que un procedimiento ordenado de trabajo es

indispensable para la seguridad.• Como parte de estas prácticas está el desarrollo o adopción por parte de cada

laboratorio de un manual de operaciones (o Manual de Seguridad Biológica) en el que se identifiquen los riesgos que pueda sufrir el personal y que especifique los procedimientos que puedan minimizar esos riesgos.

Prevención del riesgo biológico (RD 664/97)

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• El término "contención" se emplea para describir los métodos que hacen seguro el manejo de materiales infecciosos en el laboratorio.

• El propósito de la contención es reducir al mínimo la exposicióndel personal de los laboratorios, otras personas y el entorno a agentes potencialmente peligrosos.

Bioseguridad - Contención

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Barreras Primarias• Pretenden la protección del personal y del ambiente del laboratorio

§ Prácticas estándar y específicas§ Equipamiento de seguridad

Barreras secundarias• Pretenden la protección del medioambiente

§ Diseño y construcción de la instalación§ Instalaciones del laboratorio


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• Equipos de protección individual (EPI): prendas de protección personal (guantes, mascarillas, batas, calzado...).

• Dispositivos o aparatos que garantizan la seguridad (por ejemplo, las cabinas de seguridad biológica).

• Separación zonas con acceso al público,• Disponibilidad de sistemas de

descontaminación (autoclaves),• Filtrar aire de salida al exterior,• Flujo de aire direccional, etc.

Ropa de protección EPI

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Guantes EPI

31


Guantes EPI

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Protección respiratoria EPI

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Gafas y pantallas faciales EPI

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Dispositivos de pipeteo

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Microincineradores y Asas de Siembra Desechables

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Laboratorio básico – Normas generales

Prácticas estándar y específicas


þ Nunca se pipeteará con la boca, empleándose los dispositivos de tipo mecánico.þ Deben utilizarse guantes adecuados en todos los trabajos que entrañen algún contacto con sangre, material

infeccioso o animales infectados.þ Hay que utilizar batas o uniformes de trabajo para evitar la contaminación de los vestidos de calle.

• No se utilizará la ropa de laboratorio fuera de éste (cafetería, biblioteca, etc.).• La bata se llevará abrochada• Llevar siempre ropa adecuada y calzado cerrado.

þ Siempre que haya peligro de salpicaduras se utilizarán gafas de seguridad, pantallas faciales u otros dispositivos de protección.

þ A fin de evitar los cortes accidentales, se preferirá el uso de material plástico al de cristal.þ En la zona del laboratorio no se permitirá comer, guardar alimentos, beber, fumar ni usar cosméticos.

• Tampoco almacenar alimentos y/o bebidas en el laboratorio.þ El uso de agujas hipodérmicas y de jeringas debe evitarse.

• Cuando ello no sea posible, las agujas se recogerán en recipientes adecuados que eviten los pinchazos accidentales.

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þ Nunca se pipeteará con la boca, empleándose los dispositivos de tipo mecánico.þ Deben utilizarse guantes adecuados en todos los trabajos que entrañen algún contacto con sangre, material

infeccioso o animales infectados.þ Hay que utilizar batas o uniformes de trabajo para evitar la contaminación de los vestidos de calle.

• No se utilizará la ropa de laboratorio fuera de éste (cafetería, biblioteca, etc.).• La bata se llevará abrochada• Llevar siempre ropa adecuada y calzado cerrado.

þ Siempre que haya peligro de salpicaduras se utilizarán gafas de seguridad, pantallas faciales u otros dispositivos de protección.

þ A fin de evitar los cortes accidentales, se preferirá el uso de material plástico al de cristal.þ En la zona del laboratorio no se permitirá comer, guardar alimentos, beber, fumar ni usar cosméticos.

• Tampoco almacenar alimentos y/o bebidas en el laboratorio.þ El uso de agujas hipodérmicas y de jeringas debe evitarse.

• Cuando ello no sea posible, las agujas se recogerán en recipientes adecuados que eviten los pinchazos accidentales.

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þ Acceso restringido al laboratorio: el acceso al laboratorio debe ser controlado.

þ Las superficies de trabajo se descontaminarán por lo menos una vez al día y siempre que haya un derrame.

• Una nota debe especificar el modo de empleo de los desinfectantes, la naturaleza del desinfectante a utilizar y su concentración.

þ Todos los desechos biológicos, ya sean líquidos o sólidos, tienen que ser descontaminados antes de su eliminación y se seguirán las normas existentes sobre la gestión de residuos contenidos en las reglamentaciones referentes a residuos sanitarios.

þ El material contaminado, que deba ser descontaminado en un lugar exterior al laboratorio, se colocará en un contenedor especial, y se cerrará antes de sacarlo del laboratorio.

þ Deberá existir un programa de lucha contra insectos y roedores que se pondrá en práctica.

þ Todo el personal se debe lavar las manos después de haber manipulado material o animales infecciosos, así como al abandonar el laboratorio.


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þHigiene personal estricta• Lavar las manos (antes de salir y siempre que haya contacto con productos

químicos o materiales biológicos).• Cabellos recogidos,• No llevar anillos, pulseras, etc.


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Prevención infecciones: higiene de manos

Las manos como mecanismo de transmisión• La CDC y la OMS consideran que una higiene de

las manos inadecuada o no realizada es uno de los factores más importantes que contribuyen en el desarrollo de infecciones; especialmente de Las infecciones asociadas a la asistencia sanitaria.

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Productos y técnicas para la higiene de manos• Fricción con productos de base alcohólica• Lavado de manos con jabón neutro o antiséptico


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Fricción de manos con productos de base alcohólica• Es la técnica de primera elección cuando las manos no

están visiblemente sucias.• Los productos de base alcohólica se aplican a través de

fricción.• No se necesita agua ni toallas.• Se friccionará toda la mano hasta que se seque el

producto (aprox. 30 segundos).• Elimina más y más rápidamente los microorganismos que

el agua y el jabón.• Requiere menos tiempo.• Estropea menos la piel de las manos.• Puede estar en cualquier punto del laboratorio.Lavado de manos con agua y jabón• Se llevará a cabo esta técnica si las manos están

visiblemente sucias.• Es preciso frotar las manos un mínimo de 20 segundos.• Se evitará el agua muy caliente.• Se utilizarán siempre toallas de papel para secar.• Se cerrará el grifo con ellas.• Nunca se deben utilizar toallas multiusos.


Cabinas de Seguridad Biológica (CSB)

Tres tipos básicos:• Classe I: no protegen la muestra o la persona.• Classe II: protegen el operario y la muestra. • Classe III: máxima protección (inhalación y

contacto).

Cabinas de Seguridad Biológica CSB

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• Clase I

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• Clase II Tipo A

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• Clase II Tipo B

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Cabinas de Seguridad Biológica

Clase III• Clase III

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Cabina de bioseguridad clase II-A

• Antes de iniciar el trabajo, ubicar el material necesario en el interior de la cabina y colocarlo en los laterales de la cabina.

• Ordenar los distintos elementos en su secuencia lógica con el fin de evitar cruces y/o movimientos de brazos innecesarios.• No bloquear las rejillas frontal y posterior de la cabina.

• Colocar los equipos que puedan generar aerosoles (mezcladores, centrífugas) en la parte posterior de la superficie de trabajo.

• Evitar el uso de mecheros Bunsen o similares en las CSB.

• Utilizar materiales de trabajo que no desprendan partículas (evitar el uso de papel, trapos o tapones de algodón).

• Disponer, en el interior de la cabina, de recipientes impermeables y aptos para la recogida de materiales desechables y para su esterilización.

• Descontaminar la superficie de los materiales que haya que introducir con alcohol al 70%.

• El trabajo puede realizarse sobre paños empapados de desinfectante.

Materiales y equipo


Procedimientos de trabajo• Es aconsejable realizar movimientos lentos de brazos y manos

en el interior de la cabina.• Debe mantenerse la integridad del flujo de aire al meter y sacar

los brazos.§ Este movimiento debe hacerse lo mínimo imprescindible, con

lentitud, manteniendo los brazos perpendiculares a la abertura frontal y esperando 1 minuto aproximadamente antes de empezar a trabajar.

• Es recomendable trabajar entre 5 y 10 cm sobre la mesa de trabajo y por detrás de la zona de partición de humos (8 cm).• Para la protección de los filtros HEPA, es aconsejable evitar

golpes, perforaciones, proyecciones o salpicaduras.

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Procedimientos de trabajo…• Es recomendable que las CSB estén en funcionamiento al menos 5

minutos antes de empezar el trabajo y después de finalizarlo.• Tras la introducción de material, es conveniente esperar entre 2 y 3

minutos, antes de iniciar o proseguir el trabajo.• Es aconsejable no colocar objetos entre el filtro HEPA y la zona de

trabajo que puedan interrumpir el flujo laminar.• Es conveniente mantener la actividad del local donde se encuentra la

cabina al mínimo (desplazamiento de personas, corrientes de aire, puertas, etc.).

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Seguridad Biológica: Limpieza y desinfecciónUna vez instalada la CSB es recomendable realizar:• Una limpieza a fondo para eliminar el polvo acumulado durante el transporte (aspirar

superficies, ventilador, cuadro eléctrico, rejillas de los filtros, etc.).• Una limpieza de las superficies de trabajo y paredes con un líquido desinfectante

(alcohol al 70%).• Una desinfección gaseosa de las partes herméticas e inaccesibles.

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La limpieza y desinfección se realizará:• Antes de cualquier trabajo de mantenimiento de la cabina (cambio de filtros).• Antes de efectuar un ensayo de control mecánico o biológico de la cabina.• Antes de empezar a trabajar en la cabina.• Siempre que se cambie de programa de trabajo.• Tras un derrame de líquido en la mesa de trabajo.

Niveles de Contención - Bioseguridad

Según el riesgo relativo que entrañan los microorganismos infectantes que se manipulan en el laboratorio, la construcción, el diseño y también los medios de contención, los laboratorios se clasifican en cuatro niveles de contención o seguridad biológica:• Laboratorio básico.• Laboratorio básico con cabina de seguridad biológica u otros dispositivos

apropiados de protección personal o contención física.• Laboratorio de contención.• Laboratorio de contención máxima.

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Nivel 1• Es el nivel de seguridad requerido para los agentes biológicos del grupo 1

• No se necesita ningún equipo especial de contención.

• Es el utilizado habitualmente en los laboratorios de prácticas de universidades o centros docentes donde se emplean cepas no patógenas

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Nivel 2

60


Es el obligado para agentes del grupo 2 como algunos que, perteneciendo a la propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patología infecciosa humana de gravedad moderada o limitada.

• Deben ser manipulados por personal especializado§ Técnicos de laboratorio,

§ Especialistas en Microbiología

• Son los que con más frecuencia se estudian en el Laboratorio de Microbiología Clínica:

§ Estafilococos,

§ Salmonella, etc.


Nivel 2

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Es el obligado para agentes del grupo 2 como algunos que, perteneciendo a la propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patología infecciosa humana de gravedad moderada o limitada.

• Sin requisitos especiales de ventilación• Acceso restringido aconsejable• Procedimientos de desinfección especificados• Control de vectores• Superficies impermeables, resistente a ácidos, disolventes y

desinfectantes• Almacenamiento de seguridad para agentes biológicos• Cabinas de Seguridad Biológica


Nivel 3

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Manipulación de agentes biológicos del grupo 3, microorganismos que cursan con patología grave, de difícil y largo tratamiento, que pueden curar con secuelas y ocasionalmente producir la muerte.

• El mayor y más frecuente peligro que entrañan éstos es la infección adquirida a través de aerosoles y por fluidos biológicos.§ Por ello, las principales medidas a tomar en este caso son la correcta manipulación y la utilización

de cabinas de seguridad.

• Ejemplos más típicos de este tipo de microorganismos son:§ M. tuberculosis,

§ Brucella,

§ Coxiella burneti.


Nivel 3

63


• El procesamiento de microorganismos sólo puede ser realizado por personal cualificado (acceso restringido) y en una zona con la infraestructura apropiada para dicho Nivel.

• Lugar de trabajo separado del resto,• Aire acondicionado independiente, sin recirculación de aire, filtros HEPA salida de aire,

• Local con gradiente de presión negativa respecto a la atmosférica,• Laboratorio con equipo propio,• Lugar de trabajo precintable para su desinfección,

• Superficies impermeables, resistente a ácidos, disolventes y desinfectantes (mesas y suelo),

• Almacenamiento de seguridad para agentes biológicos,• Cabinas de seguridad biológica (propagación aérea).


Nivel 4

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• Nivel requerido cuando se procesa con certeza o se sospecha de un agente especialmente patógeno e infecto-contagioso, exótico o no, que produce alta mortalidad y para el que no existe tratamiento y/o es poco fiable.

• Microorganismos de dosis infectiva baja y alta contagiosidad.

• Este nivel también puede utilizarse para trabajar con animales de experimentación infectados por microorganismos del grupo 4.

• Además, deben incluirse en este nivel de contención los microorganismos propios del grupo 3 que adquieran propiedades patógenas que los eleven al grupo 4.

• Un ejemplo, Mycobacterium bovis multirresistente que puede causar fallecimiento por fracaso terapéutico.

Nivel de contención Laboratorios

El procesamiento inicial de los especímenes clínicos y las pruebas serológicas pueden realizarse de forma segura en un nivel..,ü Nivel recomendado para trabajar con patógenos que se

transmiten por vía sanguínea como el virus de la hepatitis B y el VIH, a lo que habría que añadir las precauciones universales que deben ser tomadas con todas las muestras de sangre y otros materiales potencialmente infecciosos.

Casos excepcionales, por ejemplo: sospecha de fiebres hemorrágicas.

?2


Exposición a agentes infecciosos

Gravedad de efecto


Las vías de entrada al organismo

Cada microorganismo tiene su vía de entrada...

Mucosa Respiratoria

Dérmica

Digestiva

Parenteral

• Hepatitis A

• Hepatitis B

• Tuberculosis,• Gripe

Intradérmica


Respiratoria, por inhalación de aerosoles que transporten agentes biológicos; a partir de la inhalación de las gotitas de Flügge, y/o partículas de Wells, que pueden quedar suspendidas en el ambiente y son vehículo de gérmenes.

Dérmica, tanto por contacto directo con el foco como por contacto indirecto con objetos contaminados, incluyéndose en esta vía la penetración del agente a través de zonas mucosas del organismo, como son ojos, boca, etc.§ Depositado el agente infeccioso sobre la piel tiene

la capacidad de atravesarla en situaciones en las que la barreara dérmica está alterada, tales como heridas, fisuras, etc.

§ En las zonas mucosas la capacidad absortiva es muy amplia: son zonas muy vascularizadas.

Digestiva, fundamentalmente debida a contactos mano-boca sin la adopción previa de medidas higiénicas.

Parenteral (intradérmica), supone la penetración del agente en capas profundas de la piel a través de cortes o pinchazos con instrumentos contaminados, o por picaduras, arañazos o mordiscos de animales.

Fluidos biológicos y puertas de entrada

Fluidos biológicosimplicados en la

transmisión

Fluidos contaminados

con sangreSuero SANGRE Plasma Cultivos de

virus

Potencialmente infecciosos

LCR Sinovial Pleural Peritoneal Pericárdico Amniótico


El semen y las secreciones vaginales y uterinas se han relacionado con la transmisión sexual, pero no con la transmisión laboral.No se han vinculado con la transmisión ocupacional:

Secreciones nasales, Esputos, Sudor, Lágrimas, Orina, Saliva, Heces, Vómitos,Leche materna,

Fluidos biológicos y puertas de entrada


Toda muestra de SANGRE y/o

líquido orgánico es potencialmente

infecciosa

Atención especial a procedimientos

invasivos

Eliminación de residuos

biocontaminados

Protección barrera EPI’s

Higiene personal Vacunación

(VHB)

Precauciones estándar


Técnicas de laboratorio específicasTodas las técnicas que puedan producir aerosoles tales como la centrifugación, la trituración, las mezclas, las agitaciones enérgicas, las disrupciones sónicas, la apertura de envases de materiales infecciosos cuya presión interna pueda diferir de la presión ambiente, etc., se realizarán en cabinas de seguridad biológica.También se evitarán manipulaciones tales como la inserción de asas o agujas calientes en un cultivo, y se utilizarán asas desechables; se evitará también la inyección violenta de fluidos a partir de pipetas o jeringas ya que todas estas técnicas pueden generar aerosoles.Las puertas del laboratorio se mantendrán cerradas durante las manipulaciones.El personal se lavará las manos después de haber manipulado el material biológico, los animales y antes de dejar el laboratorio. Será obligatorio llevar guantes apropiados durante todas las técnicas que comporten un riesgo de contacto accidental directo con el material biológico infeccioso.se utilizarán agujas y jeringas de un solo uso, no se deberá reencapsular las agujas y se eliminarán directamente en recipientes rígidos, aptos para la esterilización o para la incineración

Bioseguridad Nivel 2 (BSL2)


Técnicas de laboratorio específicasPara la centrifugación de grandes concentraciones y volúmenes de agentes infecciosos, se utilizará una centrífuga herméticamente cerrada (sistema "aerosol free") y tubos de seguridad.El llenado, el cierre y la apertura de los tubos debe efectuarse en Cabinas de Seguridad Biológica.



Técnicas de laboratorio específicasFiltración fluidos biológicos y líquidos contaminados


FiltroHEPA

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Técnicas de laboratorio específicasLa señalización internacional de riesgo biológico se colocará en las puertas de acceso al laboratorio.También deben señalizarse los congeladores y refrigeradoresutilizados para guardar microorganismos del tipo de riesgo 2.


Señal de peligro biológico (Directiva 679/90)


Resumen de los niveles de bioseguirdad y barerras primarias y secundarias

BSL Agentes PrácticasEquipos de Seguridad (Barreras Primarias)

Instalaciones (Barreras Secundarias)

1 No se ha comprobado que produzcan enfermedad en adultos sanos

Prácticas microbiológicas estándar No se exige ninguna Se exigen mesas abiertas con pileta(s) en el laboratorio

2 Asociado con la enfermedad humana, riesgo igual a dañopercutáneo, ingestión, exposición de lamembrana mucosa

Práctica BSL-1 más: · Acceso restringido · Señales de advertencia de riesgo biológico · Precauciones para "objetos punzantes" · Manual de bioseguridad debe definir la descontaminación de los desechos o las políticas de control médico

CSB Clase I o II, u otros dispositivos de contención física para todas las manipulaciones de muestras o agentes que generen salpicaduras o aerosoles de materiales infecciosos. Delantal de laboratorio, guantes, protección del rostro cuando sea necesario

BSL-1 más autoclave

3 Agentes autóctonos o exóticos con potencial de transmisión por aerosol,enfermedad que puede derivar en consecuencias graves o letales

Práctica BSL-2 más: · Acceso controlado · Descontaminación de todos los desechos · Descontaminación de la ropa de laboratorio antes del lavado. · Muestras de suero base a todos los funcionarios del laboratorio y se almacenan

CSB Clase II, u otros dispositivos de contención física para todas las manipulaciones abiertas con las muestras o agentes. Delantal de laboratorio, guantes, Protección respiratoria necesaria

BSL-2 más: · Separación física de los corredores de acceso · Acceso de cierre automático con doble puerta · No se recircula el aire de escape · Flujo de aire negativo dentro del laboratorio

4 Agentes peligrosos/exóticos que presentan un alto riesgo de enfermedad, que pone en riesgo la vida, infecciones de laboratorio de transmisión por aerosol o agentes relacionados con riesgos de transmisión desconocidos y por los cuales no existe tratamiento ni vacunación

Prácticas BSL-3 más: · Cambio de ropa antes de ingresar · Ducha al salir · Descontaminación de todos los materiales a la salida de las instalaciones

Todos los procedimientos deben de realizarse en CSB III o de Clase I o II en combinación con un equipo de cuerpo entero con presión positiva y suministro de aire

BSL-3 más: · Edificio separado o zona aislada · Sistema de alimentación y escape, vacío y descontaminación exclusivos.

Anexo IV (RD 664/97) Niveles de contenciónMedidas de contención 2 3 41. El lugar de trabajo se encontrará separado de toda actividad que se desarrolle en el mismo edificio

No Aconsejable Sí

2. El aire introducido y extraído del lugar de trabajo se filtrará mediante la utilización de filtros de alta eficacia para partículas en el aire (HEPA) o de forma similar

No Sí, para la salida de aire Sí, para la entrada y salida de aire

3. Solamente se permitirá el acceso al personal designado Aconsejable Sí Sí, con esclusa de aire

4. El lugar de trabajo deberá poder precintarse para permitir su desinfección No Aconsejable Sí

5. Procedimientos de desinfección específicos Sí Sí Sí

6. El lugar de trabajo se mantendrá con una presión negativa respecto a la presión atmosférica

No Aconsejable Sí

7. Control eficiente de vectores, por ejemplo, roedores e insectos Aconsejable Sí Sí

8. Superficies impermeables al agua y de fácil limpieza Sí, para banco de pruebas y mesa de

trabajo

Sí, para banco de pruebas, mesa de trabajo y suelo

Sí, para banco de pruebas, mesa de trabajo, suelo, paredes y techos

9. Superficies resistentes a ácidos, álcalis, disolventes y desinfectantes Aconsejable Sí Sí

10. Almacenamiento de seguridad para agentes biológicos Sí Sí Sí, almacenamiento seguro

11. Se instalará una ventanilla de observación o un dispositivo alternativo en las zonas de manera que se pueda ver a sus ocupantes

Aconsejable Aconsejable Sí

12. Laboratorio con equipo propio No Aconsejable Sí

13. El material infectado, animales incluidos, deberá manejarse en una cabina de seguridad biológica o en un aislador u otra contención apropiada

Cuando proceda Si, cuando la infección se propague por el aire

Sí

14. Incinerador para destrucción de animales muertos Aconsejable Sí, disponible Sí, en el mismo lugar

• http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/index.htm

• http://www.who.int


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http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/index.htm

http://www.who.int/

Curs Bioseguretat-Agents Biologics.ES v201710-161)Balanza 2)Cabina de flujo laminar o cabina de...

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