CULTIVO IN VITRO DE PAPA Solanum tuberosum

CULTIVO IN VITRO DE Solanum tuberosum

INTRODUCCION :

El cultivo de tejidos vegetales o cultivo in vitro de tejidos vegetales, es una tcnica de reproduccin en condiciones totalmente aspticas, en la que a partir de un pequeo segmento inicial de tejido es posible regenerar en poco tiempo miles o millones de plantas genticamente iguales a la planta madre, cuando a este tejido le es aplicado un estmulo por medio de variables fsicas y qumicas controladas en un medio de cultivo. A diferencia de las tcnicas tradicionales de cultivo, esta poderosa herramienta permite la propagacin de grandes volmenes de plantas en menor tiempo; as como el manejo de las mismas en espacios reducidos. Por otro lado, la tcnica es de gran utilidad en la obtencin de plantas libres de patgenos; plantas homocigotas, en la produccin de plantas en peligro de extincin, en estudios de ingeniera gentica, etc. El enorme potencial que posee esta metodologa ha propiciado que en los ltimos 25 aos se haya incrementado el nmero de laboratorios de cultivo de tejidos en el pas para la produccin comercial de plantas ornamentales y frutales al lo que ha motivado que algunos floricultores la estn utilizando como una alternativa viable en sus programas de produccin.

Solanum tuberosum :

La papa (Solanum tuberosum) es una planta originaria de la regin andina. En el siglo XVI lleg a Europa donde, despus de vencer la resistencia de la poblacin, se transform en uno de los pocos alimentos consumidos por la poblacin ms pobre. A mediados del siglo XIX, el hongo Phytophtora infestan infect la papa, desencadenando en Irlanda un terrible perodo de hambruna, que provoc la muerte de un milln de personas y la emigracin de buena parte de la poblacin. En la actualidad, la papa es el cuarto cultivo ms importante del mundo. En muchos pases, la poblacin depende de la papa y otros tubrculos, como la batata (boniato), para su alimentacin. El cultivo in vitro de la papa permite la multiplicacin rpida de plantas sanas y la produccin de tubrculos libres de virus.OBJETIVO: Cultivar papa (Solanum tuberosum) a partir de yemas brotadas, in vitro.

MATERIALES: 40 tubos de ensayo Gradillas Matraces Vasos de precipitados Pipetas graduadas Balones de laboratorio Mecheros Incubadora Papel aluminio Hipoclorito de sodio ( clorox ) Gillet Autoclave Goteros Placas Petri

Reactivos : Nitrato de potasio KNO 3 Cloruro de magnesio MnSO4.7H2O Nitrato de Calcio Ca (NO3)2. 4H2O Fosfato acido de Sodio NH4 H2 PO4 Acido Trioxoborico H3 BO3 Cloruro de manganeso tetrahidratado MnCl2.4H2O Acido gibelerico

PROCEDIMIENTO :

Eleccion de Tratamiento : Se realizo la eleccin de tratamientos para el cultivo , teniendo lo siguiente : Tratamiento 1 : Medio de cultivo Tratamiento 2 : Medio de cultivo + Acido Giberilico 1mg /L Tratamiento 3 : Medio de cultivo + Acido Giberelico 10mg/L Tratamiento 4 : Medio de cultivo + Acido Giberelico 100mg/L

Eleccion de la planta madre : Se realizo la eleccin de papa Solanum tuberosum, a las cuales se realiza la extraccin de yemas, luego colocarlas en un vaso de precipitado con agua destilada y Clorox ( hipoclorito de sodio ) , agitar suamente por 5 minutos y repetir 3 veces . Sumergir las yemas en otro vaso de precipitado conteniendo agua destilada con unas gotas de jabon liquido , agitando suavemente por 5 minutos .

Medio de cultivo y Micro propagacin Esterilizar 1 matraz con alcohol al 70 % y agua destilada, lavar el matraz por 30 segundos, agregar al matraz 20ml Hipoclorito de sodio ( leja ) al 20 % y 80 ml de agua destilada , luego colocar las yemas previamente desinfectadas y lavarlas durante 15 minutos .

Realizar este paso cerca de mecheros para evitar el ingreso de microorganismos, posteriormente desechar el lquido dejando las yemas, para luego lavarlas con agua esteril por 4 minutos , realizando 3 repeticiones Preparar el medio de cultivo con los siguientes reactivos: Nitrato de potasio KNO 3 , Cloruro de magnesio MnSO4.7H2 , Nitrato de Calcio Ca (NO3)2. 4H2O, Fosfato acido de Sodio NH4 H2 PO4, Acido Trioxoborico H3 BO3, Cloruro de manganeso tetrahidratado MnCl2.4H2O. En un vaso de precipitado agregar 100 ml de agua destilada y agregar todos los reactivos anteriormente mencionados y disolverlos bien, pasar esto a un matraz y aforarlo hasta 200 ml. Luego traspasar el contenido en 4 matraces con 50 ml de la muestra cada uno.

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Diluir el Acido Giberelico

Colocar en la incubadora

RESULTADOS :

TRATAMIENTO 1 :

TRATAMIENTO 2 :

TRATAMIENTO 3 :

TRATAMIENTO 4 :