Cromatina y Cromosomas Citogenetica 2014 DFMC

7/22/2019 Cromatina y Cromosomas Citogenetica 2014 DFMC

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DNA, Cromatina y

Cromosomas


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CONSIDERACIONES La vida depende de la capacidad de las clulas para almacenar,

reparar y traducir las instrucciones genticas para formar ymantener un organismo vivo.

Esta informacin heredable se transfiere de una clula a otra

mediante la divisin celular, y de una generacin a la siguientemediante la reproduccin.

Los GENES almacenan la instrucciones que determinan las

caractersticas de los organismos.

Qu mecanismos encontr la clula para guardar lasinstrucciones, y para transmitirlas a la siguiente generacin?


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Buscamos responder Cul es el mecanismo de transmisin de la informacin

gentica?

Que significa que la informacin se copia y transmite de unaclula a una clula hija millones de veces?

Qu tipo de molcula podra ser capaz de una replicacintan precisa y casi ilimitada y adems, dirigir el desarrollo deun organismo y la vida de una clula?

Cmo se organizan fsicamente estas instrucciones de talmodo que tanta cantidad de informacin se almacene en unespacio tan pequeo como el de una clula?


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Micrografa de un cromosoma metafsico sin protenas

Hay 23 pares de cromosomas (46) en las clulas humanas diploidesUn cromosoma metafsico tiene en promedio ~1.3 X 108bp DNA


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Micrografa de un cromosoma metafsico sin protenas


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Curiosidades sobre el DNA

- Su estructura puede ser comparada a la de una escalera enespiral.

-- Se encuentra en todos los seres vivientes.

-

- Los anlisis de DNA son tiles para decenas de diferentes

usos, como diagnstico, pruebas de paternidad,criminalstica o incluso el estudio de fsiles y restosarqueolgicos.

- No todo el cdigo gentico presenta unautilidad aparente, hay zonas llamadas DNA

basura. An no es clara su funcin.


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Curiosidades sobre el DNA

- Los gemelos idnticos comparten el 100% de susgenes (un hijo cuyo padre posea un gemelo idnticono podr identificar cual de los dos gemelos es supadre mediante un anlisis de ADN).

- Tenemos unos 100,000 millones de clulas,c/u con 23 pares de cromosomas, cuyoDNA mide poco ms de dos metros.

- El DNA de todo nuestro cuerpo (unos 21millones de Kms), podra hacer el caminode la tierra al sol, unas 600 millones de

veces.


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Curiosidades sobreel DNA

El DNA de una clula humana mide unos 2.04 m.


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Curiosidades sobreel DNA

El genoma es la receta de la vida, no de la muerte (tambin?).

El ADN mitocondrial slo se hereda de la madre.

En 99.9% de los genes, cada humano es igual a losdems.

90% de nuestros genes es idntico al de un ratn.


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El DNA como memoria de computador

http://www.extremetech.com/extreme/134672-harvard-cracks-dna-storage-crams-700-terabytes-of-data-into-a-single-gram

Un bioingeniero y un genetista de Harvard (George Church and Sri Kosuri), lograronalmacenar 5.5 petabits (unos 700 terabytes) en un gramo de DNA (Ago, 2012)


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Estructuras de DNA A, B y Z


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Medidas del DNA


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Qu cantidad de DNA hay en el ncleo humano?

Cul es su longitud?

Cmo puede la clula asegurar que cada clula hija recibatodo el material gentico de la clula madre?

Cmo empaqueta la clula el material gentico?

Qu implicaciones tiene ese empaquetado en el

procesado de los genes?

Otras preguntas


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G R U P O ORGANISMO TAMAO

VIRUS Fago T4 165.000

PROCARIONTES Bacteria 1000.000

EUCARIONTES Hongos 10000.000

EUCARIONTES Mamferos 100000.000

TAMAOS DE LOS GENOMAS


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TAMAOS DE LOS GENOMAS POR ORGANISMO


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ORGANISMOP.M.

(Daltons)

PARES

BASES

LONGITUD

Escherichia coli 2.8 x 109 4.1 x 106 1.4 mm

Humanos 1.9 x 1012 2.75 x 109 100 cm

Ratn 1.45 x 1012 2.2 x 109 75 cm

Rana 1.4 x 1013 2.25 x 1010 7.65 m

Erizo de mar 5 x 1011 8 x 108 27.2 cm

Drosophila melanogaster 1.2 x 1011

1.75 x 108

5.95 cmLilium longiflorum 2 x 1014 3 x 1011 100 m

Zea mays 4.4 x 1012 6.6 x 109 2.24 m

Saccharomyces cerevisiae 1.2 x 1010 1.75 x 107 5.95 mm

CONTENIDO DE DNA POR GENOMA HAPLOIDE


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Qu cantidad de DNA hay en el ncleo humano?Unos 3000.000.000 de pares de bases.

Cul es su longitud?Todo el DNA de una clula humana, medira unos 2m.

Cmo puede la clula asegurar que cada clula hija recibatodo el material gentico de la clula madre?

Cmo empaqueta la clula el material gentico?

Qu implicaciones tiene ese empaquetado en el

procesado de los genes?

Respondiendo


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DNA EN EL NCLEO
http://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpg


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El DNA en el ncleo, se encuentra

empaquetado
http://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpg


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Visualizacin de divisin celular descontrolada en cncer


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Es una molcula de DNA muy condensada : DNA + Histonas

Es el mximo nivel de empaquetamiento del DNA.

Cromosoma


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Cmo se empaqueta el DNA en el

ncleo?

Usando un mecanismo para enrrollar el DNA

alrededor de un conjunto de protenas,formando un nucleosoma.

Los nucleosomas, a su vez se empaquetan y

empaquetan y emp hasta formar un

cromosoma.
http://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/Life.mpg


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Niveles de empaquetamiento del DNA

DNA libre Nucleosoma Cromatina Fibra 30nm Cromosoma activo Cromosoma Metafsico

Aislado Genes en transcripcin Genes menos activos Durante la interfase Durante la divisin.

C C ?


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Cromatina

Cul es la Cromatina?


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AMINOCIDOS

Alifticos

Aromticos (UV)

Alifticas Hidroxlicas

ConAzufre

Amdicos

cidos

Amino

Secundario

Bsicos

20Gly

Leu

Ala

ValIle

Thr

Ser

Gln

Asn

Pro

Cys

Met

Lys

His Arg

Asp

Glu

PheTyr Trp

Activo

i id i l
http://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Estructuras%20Moleculares/gly.pdbhttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Estructuras%20Moleculares/cys.pdbhttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Estructuras%20Moleculares/cys.pdbhttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Estructuras%20Moleculares/gly.pdb


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Aminocidos que interactan con elDNA en las histonas

CH2CH2CH

2

CH2NH2

COO--

HCH3N+

LisinaLysK

COO--

HCH3N+

CH2CH2CH2

NHC=NH2NH2

ArgininaArg

R

CH2

C--NH

CH

C--NHH

COO--

HCH3N+

Histidina

HisH

His pK cercano al pH intracelular.Amortiguador celular.

Lysune coenzimas a la estructura

Arg intermediario ciclo de la urea


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Conjunto de protenas histonas


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Nucleosoma


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200 pb

N U C L E O S O M AN U C L E O S O M A


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Conjunto de protenas histonas


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February 18, 2000 MBB 222/Lecture 19 41

dsDNA

HistonasdsDNA le da casidos vueltas al

nucleosoma


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Estructura del

nucleosoma Muy regular

Altamenteconservado

Se puede cristaliarpara estudios dedifraccin de Rayos X


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Organizacin de las Histonas en el Nucleosoma


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Estructura de la cromatina


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Estructura de la cromatina

Micrografa electrnica de la cromatinaCuentas de Collar


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d d l


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Condensacin del DNA Dplex de DNA 2nm dimetro.

Un nucleosoma tiene unos 11nm de dimetro.

Los nucleosomas forman fibras solenoides con 6nucleosomas por espiral, de 30nm

La fibra de 30nm se enrrolla para dar una fibra de

300nm.

Las fibras de 300nm se enrrollan para formar fibras de700nm que forman las cromtidas en meiosis/mitosis.


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Niveles decondensacin

del DNA

DNA

Fibra de 11nm

Fibra de 30nm

Fibra de 300nm

Fibra de 700nm


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CUENTASDE

COLLAR

11 nm


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4 nm


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30 nm


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Dos estructuras propuestas para la fibra de cromatina de 30nm


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Forma de empaquetarse en microfibrillas


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p q


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4 proposed structures of the 30nm chromatin filament for DNA

repeat length per nucleosomes ranging from 177 to 207 bp..png


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El DNA


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Estructura del cromosoma


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Estructura del cromosoma

Brazo corto

Un cromosoma tiene dos

brazos separados por uncentrmero.

Los extremos de los

brazos se llaman

telmeros.

Los brazos seencuentran divididos en

dos, cada una de las

partes se conoce como

cromtida.

Brazo largo

Telmero

Centrmero

Cromtidas

i d


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METACNTRICO

Elcentrmero

esta en la mitad

del cromosoma y

los dos brazostienen la misma

longitud.

SUBMETACNTRICO

La longitud de un

brazo es mayor que

la del otro. En la

divisin tomanaspecto de L al ser

arrastrados.

ACROCNTRICO

El centrmero esta

muy cerca del

extremo por lo que

la longitud de unbrazo es mucho

menor que la del

otro.

TELOCNTRICO

Elcentrmero se

sita en el extremo

del cromosoma,

presentando steun solo brazo.

Segn la posicin del centrmero se distinguen distintos tipos de

cromosomas:

Tipos de cromosoma


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EUCROMATINA

HETEROCROMATINA

Grandes cantidades en cromosomas1,9,15,16 y Y : secuencias altamente

repetidas, no se transcriben, condensadas en

la interfase se replican en fase S tarda


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FORMAS DE LOS CROMOSOMAS


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cromatidashermanas


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EMPAQUETAMIENTO DEL DNA

EN EUCARIOTES El grado de condensacin del DNA se expresa

como su razn matemtica de

empaquetamiento. RAZON DE EMPAQUETAMIENTO = la

longitud de la molcula de DNA dividida por

la longitud de la estructura deempaquetamiento. Ej.:


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Ejemplo:

El cromosoma humano ms pequeo

contiene 4.6 x 107 bp de DNA (aprox. 10

veces el tamao del genome deE. coli).Esto equivale a 14,000 m de DNA

extendido. En su estado de mxima

condensacin durante la mitosis, el

cromosoma tiene aprox. 2 m de longitud.

La razn de empaquetamiento es 7000

(14,000/2).


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BANDAS CROMOSOMICAS:


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BANDAS CROMOSOMICAS:G= tincin positiva con GIEMSA.Con cromatina ms condensada.Ricas en AT. Pocos genes.Replicacin tarda, en S

R= tincin negativa con GIEMSA(bandas plidas). Ricas en GC. Densidad alta de

Genes. Replicacin temprana en S.

Procedimiento: cultivo de glbulos blancos colchicina desnaturalizacin digesti

Enzimtica tincin observacin


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Loscromosomas

presentanbandas


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Bandeo G (Giemsa)

Mazen Zaharna Molecular Biology

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El colorante de Giemsa le da a los cromosomas unaapariencia bandeada, porque tie regiones de DNA ricasen A y T.


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NHGRI_human_male_karyotype.png


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NHGRI_human_male_karyotype.png


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Total Genes in Region: 2 46Myosin, light polypeptide 5, regulatory-- 4p16.3

MYL5
http://localhost/var/www/apps/PMGifs/Genomes/humansearch.html#ideogrhttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/maps.cgi%3fORG=hum&CHR=4&MAPS=cntg%5b0.000000:196955444.000000%5d,est%5b0.000000:196955444.000000%5d,loc%5b0.000000:196955444.000000%5d,ideogr%5b4pter:4qter%5dhttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/maps.cgi%3fORG=hum&CHR=4&MAPS=cntg%5b0.000000:196955444.000000%5d,est%5b0.000000:196955444.000000%5d,loc%5b0.000000:196955444.000000%5dhttp://localhost/var/www/apps/PMGifs/Genomes/humansearch.html#cntghttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/maps.cgi%3fORG=hum&CHR=4&MAPS=ideogr%5b4pter:4qter%5d,est%5b0.000000:196955444.000000%5d,loc%5b0.000000:196955444.000000%5d,cntg%5b0.000000:196955444.000000%5dhttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/maps.cgi%3fORG=hum&CHR=4&MAPS=ideogr%5b4pter:4qter%5d,est%5b0.000000:196955444.000000%5d,loc%5b0.000000:196955444.000000%5dhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_026996.8http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_022865.9http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_016407.10http://localhost/var/www/apps/PMGifs/Genomes/humansearch.html#esthttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/maps.cgi%3fORG=hum&CHR=4&MAPS=ideogr%5b4pter:4qter%5d,cntg%5b0.000000:196955444.000000%5d,loc%5b0.000000:196955444.000000%5d,est%5b0.000000:196955444.000000%5dhttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/maps.cgi%3fORG=hum&CHR=4&MAPS=ideogr%5b4pter:4qter%5d,cntg%5b0.000000:196955444.000000%5d,loc%5b0.000000:196955444.000000%5dhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=183706http://localhost/var/www/apps/PMGifs/Genomes/humansearch.html#lochttp://localhost/var/www/apps/Disco%203%20Presentaciones%201/Biolog%C3%ADa%20General/maps.cgi%3fORG=hum&CHR=4&MAPS=ideogr%5b4pter:4qter%5d,cntg%5b0.000000:196955444.000000%5d,est%5b0.000000:196955444.000000%5d


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Solute carrier famly 26 (sulfate transp)-- 4p16.3

msh homeo box homolog 1 (Drosphila)-- 4p16.3-p16.1

-- 4q32.3

RAB28, member RAS oncogene family-- 4p16.1

Phosphoribosyl pyrophosph amidotrnsf-- 4q12

-- 4q31.3

-- 4q31.22

-- 4q26

CCR4 carbon catabolite repression 4-

like

-- 4q26

-- 4q25

Adaptor of P-tyrosine and 3-P-inositide-- 4q25-q27

-- 4q22

-- 4q21.22

-- 4q13.3

hypothetical protein FLJ14431`

KIAA1450 protein

hypothetical protein BC004337

KIAA1223 protein

dickkopf homolog 2 (Xenopus laevis)

ATP-binding cassette, sub-family G

E-1 enzyme

disrupter of silencing 10

KIAA1500 protein-- 4q21.1

RNA-binding protein-- 4p13-p12

tec protein tyrosine kinase-- 4p12

SLC26A1

MSX1

FLJ12716-- hypoth prot FLJ12716

FLJ14431

RAB28

PPAT

KIAA14

LOC908

LIAA12

CCRN4L

DKK2

DAPP1

ABCG2

MASA

SAS10

KIAA15

FLJ20273

TEC

SOD3 superoxide dismutase 3, extracellular-- 4p16.3-q21
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_033076.1http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_006316.11http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_022751.10http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_016297.10http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_006303.11http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_006109.9http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_022844.7http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_023068.1http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_031780.4http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_031781.4http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_022753.11http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_022845.10http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_022832.8http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_022776.10http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_006198.11http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_033071.1http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/viewer.cgi?val=NT_025688.7http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=85100http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=157850http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=76118http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=184411http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=155421http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=79933http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=170311http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=313http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=75968http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=118797http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=119192http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=250895http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=103180http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=300711http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=77039http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=7645http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=351593http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=75431http://www.ncbi.nlm.nih.gov/UniGene/clust.cgi?ORG=Hs&CID=75360


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CROMTIDAS DURANTE LA SEGREGACIN

CLASIFICACIN SEGN LA POSICIN DEL CENTROMERO


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CENTROMERO


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CENTROMERO

Sitio de unin de las fibras del huso = cinetocoro (DNA+protena).

Localizacin diferente segn el cromosoma

CENDNA = secuencia centromrica(120 pb) consubdominios, CDE-I, CDE-IIy CDE-III. Sin efecto lasmutaciones en los dos primeros pero en el CDE-IIIelimina la segregacin mittica = implicado en la uninde fibras del huso al centrmero.

Proteinas Cbf-III: se unen al subdominio CDE-III susmutaciones eliminan segregacin.


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Principales proteinas del


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p p

CENTROMERO humano

CENP-A: en la placa externa del cinetocoro, esencialpara la vida y para dirigir CENP-C al cinetocoro

CENP-B: heterocromatina centromrica

CENP-C: en la placa interna del cinetocoro, esencialpara la funcin centrmero/cinetocoro

CENP-G: en la placa interna del cinetocoro, se une alsatlite

CENP-E(en corona fibrosa del cinetocoro) y CENP-F(en placa externa) yproteinas INCENP(heterocromatina cntrica), se vinculan de modo temporal.

TELOMERO: estructuras especializadas en los extremos


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p

de los cromosomas que contienen DNA y protenasHJ. Muller 1930-1940

contiene 5-TTAGGG-3, que se repite aprox. 2000veces en tandem :

5 '...TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG TTAGGG..... 3 '3 '... ..AATCCC AATCCC AATCCC AATCCC A..... 5

La cadena rica en guanosina corre en direccin 5' a 3',extendindose 12 a 15 nucletidos ms all de la

cadena rica en citosina, formando un apndice en unade las cadenas en cada extremo del cromosoma yentonces TELOMERASA (ENZIMA DE LAINMORTALIDAD ???) realiza su trabajo as


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TELOMEROS


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TELOMEROS

FUNCIONES:1. Colocacin del cromosoma: ayudan a la configuracin

tridimensional del ncleo y posicionamiento y apareamiento delos cromosomas.

2. Conservacin de la integridad estructural: estabilidad, proteccin

a nucleasas

3. Evitan fusion con otros cromosomas

4. Facilitan interaccin con la envoltura nuclear

5. Asegurar la replicacin completa del DNA ya que por el modo desntesis, algo de DNA se pierde durante la replicacin =inestabilidad cromosomica y muerte celular. (telomerasa)

1. El RNA de la Telomerasa se aparea con


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pel extremo 3 del DNA cromosomal ricoen G y

2. sirve como molde extender el extremo 3del telmero

3. El RNA se desliza y4. sirve como molde para la incorporacin

de nucletidos adicionales

5. El DNA 3adicional acta como moldepara un fragmento de Okazaki nuevo y

por actividad de -DNA pol que ademsposee actividad de primasa y el gap dela cadena 35 se llena

6. El telmero se extiende pero queda conun extremo en 3desapareado.

TELOMERASA (Elizabeth Blackburn, 1984)


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Cataliza the restauracion del DNA telomrico

Es una ribonucleoprotena, que provee un molde de AAUCCC quegua la insercin de la secuencia TTAGGG.es transcriptasareversa.

Las clulas con telomerasa activa pueden compensar elacortamiento de los telmeros durante la duplicacin del ADN.

La mayora de las clulas somticas carecen de telomerasa. Laenzima activa se encuentra solamente en:

1. Las clulas de la lnea germinal, incluyendoclulas troncales embrionarias

2. Eucariotas unicelulares

3. Clulas cancerosas

Cncer y envejecimiento

Mara Blasco, Madrid (2006)

Mariana De Lorenzo. Biloga. Ph.D. Univ de BuenosAires (2001). Medical College of Cornell Univ. NY.


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( ) g

Debora Bublik Biloga (U Maimnides).Becaria Doctoral (SISSA). Lab. Nazionale del Consorzio Interuniv. perle Biotecnologie.Trieste, Italy.

Monica Pomies Biotecnloga (UNQ)Biocientfica S.A, Buenos Aires, Arg.

Leticia Peche. Biotecnloga (UNQ). Becaria Doctoral(SISSA). Lab. Nazionale Consorzio Interuniv. per leBiotecnologie, Trieste, Italy.

Agueda Tejera. Biloga (UBA). Ph.D. Univ.de Buenos Aires.Centro Nal. de Invest.Oncolgicas. Madrid, Espaa.

Raquel Blanco. Biloga Univ. de MadridBecaria doctoral Centro Nal. de Invest.

Oncolgicas. Madrid, Espaa.

Cromosomas humanos = 46(44 autosomas y 2 sexuales)
http://www.lncib.it/http://www.lncib.it/


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Clasificacin en 7 grupos segn tamao y posicin delcentromero (Tincin con Giemsa o Wright no produce bandas).

Bandeo slido: rupturas de cromatidas y gaps. Satellites, constricciones secundarias ydicentrics, cromosomas en anillo, sitios frgiles, y morfometria cromosomal.


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TECNICAS BASADAS EN FISH


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A. Comparative Genomic Hybridization (CGH): ideal para diagnosticardesbalances cromosmicos. Requiere cultivo celular y clulasmetafsicas. Utiliza estrategia de hibridizacin reversa en la cual elmaterial gentico por ejemplo de tumor se marca como sonda y sehibridiza con preparaciones de cromosomas normales. Facilita lacaracterizacin de rearreglos complejos de cromosomas de tumores

B. MicroFISH: FISH seguido por microdiseccin de la sonda de DNA(hibridizacin reversa in s itu), la sonda procede de un cromosomaentero, de un brazo, de una banda especfica o de un marcador

c. PRlNS: primed in situ labeling permite la deteccin directa delcromosoma, con base en el apareamiento especfico deoligonucleticos especficos cebadores y la extensin del cebador porTaq polimerasa


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Cromatina y Cromosomas Citogenetica 2014 DFMC

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