Control de la neurotraducción hipotalámica por los ... · "control de la neurotraduccion...

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRIDFACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

TESIS DOCTORAL

MEMORIA PARA OPTAR AL GRADO DE DOCTOR

PRESENTADA POR

Ignacio Torres Alemán

DIRECTOR:

Aniceto Charro Salgado

Madrid, 2015

© Ignacio Torres Alemán, 1982

Control de la neurotraducción hipotalámica por los

neurotransmisores cerebrales : regulación de la

somastostatina hipotalámica por las catecolaminas

y!,??.!!?A D COMPLUTENSETOKC on

5310049719

"CONTROL DE LA NEUROTRADUCCION HIPOTALAMICA POR LOS

NEUROTRANSMISORES CEREBRALES; REGULACION DE LA

SOMATOSTATINA HIPOTALAMICA POR LAS CATECOLAMINAS".

A u to r : IGNACIO TORRES ALEMAN

D i r e c t o r : DR. ANICETO L. CHARRO SALGADO

DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA ANIMAL

EACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID

ANO 1982.

CbTECA

t ? 2 5

A u to r ; IGNACIO TORRES ALEMAN

T f t u l o ; "CONTROL DE LA NEUROTRADUCCION HIPOTALAMICA POR

LOS NEUROTRANSMISORES CEREBRALES; REGULACION DE

LA SOMATOSTATINA HIPOTALAMICA POR LAS CATECOLAMINAS"

D i r e c t o r ; Dr. D. A n i c e t o L. C h a r ro S a lg ad o

P r o f e s o r Adj u n t o de P a t o l o g f a G e n e r a l . F a c u l t a d de M e d i c i n a . U n i v e r s i d a d C o m p lu te n se de M a d r id .J e f e d e l S e r v i c i o de M e tab o l i sm o y N u t r i c i d n . H o s p i t a l C l f n i c o de San C a r l o s . F a c u l t a d de M e d i c i n a . U n i v e r s i d a d C om p lu te n se de M a d r id .

UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID

F a c u l t a d de C i e n c i a s B i o l d g i c a s .

D e p a r tam e n to de F i s i o l o g f a Anim al .

Ano 1982.

II

D i r e c t o r de l a T e s i s

P d o . : ANICETO L. CHARRO

SAIGADO

E l P o n e n t e de l a T e s i s

E d o . : ARSEHIO PRAILE

OVEJERO

T r a b a j o que p a r a o p t a r a l g r a d e de D o c t o r en C i e n c i a s

B i o l ( 5 g i c a s p e r l a U n i v e r s i d a d C o m p lu t e n s e de M a d r id

p r é s e n t a :

IGNACIO TORRES ALET̂ AN

1982MADRl

I l l

AGRADECIMIENTOS.

E s t e t r a b a j o no h u b i e r a s i d o p o s i b l e s i n e l apoyo c o n s

t a n t e , no s 6 l o c i e n t i f i c o , s i n o humano, d e l d i r e c t o r d e l mismo,

Dr. A.L. C h a r ro S a l g a d o .

A g radezco t a m b ié n a l P r o f . A. F r a i l e O v e je r o su a m a b i l i d a d ,

i n t e r n s y apoyo a l a c c e d e r s e r mi P o n e n te en l a d e f e n s a de e s t a

t e s i s d o c t o r a l .

Asf mismo, hago p a t e n t e mi r e c o n o c i m i e n t o a l a s p e r s o n a s

con c u y a i n d i s p e n s a b l e ayu d a he p o d id o l l e v a r a cabo e s t e t r a

b a j o ; D r a s . R. F e r n a n d e z Durango y C. G uaza , y Dr. J . B o r r e l l ,

y e x -c o m p a n e ra F. M o n t i e l . Ademas, a g r a d e z c o l a a y u d a , c o m e n ta -

r i o s y a m i s t a d de t o d o s mis com paheros d e l l a b o r a t o r i o d e l S e r

v i c i o de M e tab o l i sm o y N u t r i c i d n : E. B o rd i i l , A. C a l l e , L. C a b r e -

r i z o , G. Ldpez d e l Campo, A. Ldpez M a c iâ , V. P é r e z I n f a n t e , M.

P u e n t e , S. Romeo y M.C. Romero, de cuyo apoyo y a m i s t a d me he

b e n e f i c i a d o t o d o s e s t o s a h o s .

A g radezco a l P a t r o n a t o de I n v e s t i g a c i o n e s E n d o c r i n o - M e ta b d -

l i c a s de l a F u n d a c ié n G e n e r a l M e d i t e r r a n e a y a l a C a j a de A h o r ro s

de M a dr id e l apoyo econdmico r e c i b i d o .

Ademas, doy l a s g r a c i a s a l d e p a r t a m e n t o de g r a f i c a s d e l

V e t e r a n s A d m i n i s t r a t i o n H o s p i t a l (Nueva O r l e a n s , USA) p o r su

e s t u p e n d a l a b o r i c o n o g r a f i c a , y mi m u j e r . Concha , p o r su ayuda

en l a r e d a c c i d n m e c a n o g r a f i c a de e s t e t r a b a j o .

P o r u l t i m o , a g ra d e z c o a mi amigo Dr. J . O r e l l a n a t o d a s l a s

g e s t i o n e s r e a l i z a d a s p a r a que e s t a t e s i s p u d i e r a s e r l e f d a .

I N D I C E .

INDICE.

C a p f t u l o P a g i n a

INTRODUCCION

1. E l e j e S i s t e m a N e r v io s o C e n t r a l E x t r a h i p o t a l a m i c o -

- H ip o tâ l a m o - H i p é f i s i s . ....................................................................... 1

2 . S o m a t o s t a t i n a . 6

2 . 1 . L o c a l i z a c i é n de l a S o m a t o s t a t i n a ................................................... 7

2 . 2 . F i s i o l o g f a de l a S o m a t o s t a t i n a ..................................................... 10

2 . 2 . 1 . F i s i o l o g f a de l a S o m a t o s t a t i n a

en e l S i s t e m a N e r v io s o C e n t r a l ..................................... 10

2 . 2 . 2 . La S o m a t o s t a t i n a como hormona

h i p o f i s i o t r o p a ............................................................................ 14

2 . 2 . 3 . P a p e l f i s i o l d g i c o de l a S o m a t o s t a t i n a

en l o s d r g a n o s p e r i f é r i c o s ............................................... 17

2 . 3 . R e g u l a c i d n de l a s e c r e c i é n de S o m a t o s t a t i n a . . . .............. 22

2 . 3 . 1 . R e g u l a c i d n de l a S o m a t o s t a t i n a p o r e l

S i s t e m a N e r v io s o C e n t r a l .................................................... 23

2 . 3 . 2 . R e g u l a c i d n de l a S o m a t o s t a t i n a p e r i f é r i c a 27

3 . C a t e c o l a m i n a s y Hormona de C r e c i m i e n t o ................................................. 30

OBJETO DEL TRABAJO. 38

VI


MATERIAL Y METODOS.

1. A n im a le s . ....................................................... 42

2 . P a u t a e x p e r i m e n t a l . ....................................................... 42

2 . 1 . A d m i n i s t r a c i d n de d i f e r e n t e s d r o g a s

m o d i f i c a d o r a s d e l m e ta b o l i sm o y / o l a

f u n c i d n c a t e c o l a m i n é r g i c a ............................................................... 43

2 . 2 . E s t u d i o d e l c o n t e n i d o de S o m a t o s t a t i n a

y C a t e c o l a m i n a s h i p o t a l é m i c a s y de

Hormona de C r e c i m i e n t o p l a s m a t i c a a

l o l a r g o de un c i c l o u l t r a d i a n o ................................. 45

3. P r o c e s a d o de l a s m u e s t r a s de t e j i d o h i p o t a l é m i c o

p a r a d e t e r m i n a r e l c o n t e n i d o de S o m a t o s t a t i n a 47

4 . D e te rm inac i (5n de S o m a t o s t a t i n a p o r R a d io in m u n o e n s a y o . . . . 48

4 . 1 . l o d a c i d n de S o m a t o s t a t i n a ................................................................. 48

4 . 1 . 1 . P u r i f i c a c i d n de l a hormona m a r c a d a ......................... 49

4 . 1 . 2 . C r i t e r i o de p u r e z a de l a hormona

m a rc a d a . 49

4 . 1 . 3 . A c t i v i d a d e s p e c f f i c a de l a hormona

m a r c a d a . 51

4 . 2 . T i t u l a c i d n de l o s A n t i c u e r p o s .................................................... 52

4 . 3 . C u rv a P a t r d n . 53

4 . 4 . Método de RIA. 53

4 . 5 . C a l c u l e de l o s r e s u l t a d o s . ................................................. 55

4 . 6 . C o n t r o l de c a l i d a d d e l RIA. ................................................. 56

V II


MATERIAL Y METODOS.

5 . P r o c e s a d o de l a s m u e s t r a s p a r a d e t e r m i n a t i o n

de C a t e c o l a m i n a s . 57

6 . A n O l i s i s f l u o r i m é t r i c o de C a t e c o l a m i n a s . .................................. 57

6 . 1 . C o n t r o l de c a l i d a d d e l método

f l u o r i m é t r i c o . 59

7 . R ad io in m u n o en say o de Hormona de C r e c i m i e n t o ........................... 61

7 . 1 . l o d a c i O n de l a ho rm ona . 62

7 . 2 . Método de RIA. 63

8 . E s t u d i o e s t a d f s t i c o de l o s r e s u l t a d o s .......................................... 64

RESULTADOS.

1 . P u e s t a a p u n to d e l RIA de S o m a t o s t a t i n a ..................................... 68

1 . 1 . l o d a c iO n de S o m a t o s t a t i n a . 68

1 . 1 . 1 . E f i c a c i a de l a r e a c c i O n

de i o d a c i O n . 70

1 . 2 . T i t u l a c i O n de l o s a n t i c u e r p o s .................................................. 71

1 . 3 . C urva p a t r O n . 74

1 . 4 . S e n s i b i l i d a d , p r e c i s i o n y e s p e c i f i c i d a d

d e l RIA de S o m a t o s t a t i n a . 76

2 . C a t e c o l a m i n a s c e r e b r a l e s , S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a

y Hormona de C r e c i m i e n t o p l a s m a t i c a ............................................... 79

2 . 1 . E v i d e n c i a s de u n a r e l a c i é n e n t r e C a t e c o l a m i n a s ,

S o m a t o s t a t i n a y Hormona de C r e c i m i e n t o .............................. 79

V I I I


RESULTADOS.

2 . 2 . C o n t r o l de l a S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a

y l a Hormona de C r e c i m i e n t o p l a s m é t i c a

p o r l a Dopamina. 82

2 . 3 . C o n t r o l de l a S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a

y de l a Hormona de C r e c i m i e n t o p l a s m a t i c a

p o r l a N o r a d r e n a l i n a . 85

2 . 3 . 1 . A c t i v i d a d de l a s v i a s a l f a - a d r e n é r g i c a s

y S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l é m i c a . ................................... 89

2 . 3 . 2 . A c t i v i d a d de l a s v i a s b e t a - a d r e n é r g i c a s

y S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l â m i c a ..................................... 92

2 . 4 . E v i d e n c i a s de l a e x i s t e n c i a de u n a i n t e r a c c i d n

e n t r e Dopamina y N o r a d r e n a l i n a s o b r e e l c o n t r o l

de l a S o m a t o s t a t i n a . 95

3 . C o n te n id o a l o l a r g o de un c i c l o u l t r a d i a n o de

S o m a t o s t a t i n a y C a t e c o l a m i n a s en e l h i p o ta l a m o y

de Hormona de C r e c i m i e n t o en p l a s m a ..................................................... 100

DISCUSION.

1 . P u e s t a a p u n to d e l r a d io in m u n o e n s a y o de S o m a t o s t a t i n a . . . 107

2 . M o d u la c id n de l a s C a t e c o l a m i n a s c e r e b r a l e s ; E f e c t o s

s o b r e l a S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a y l a Hormona de

C r e c i m i e n t o p l a s m é t i c a . 110

3 . V a r i a c i o n e s u l t r a d i a n a s de S o m a t o s t a t i n a , C a t e c o l a m i n a s

y Hormona de C r e c i m i e n t o . 124

IX


CONCLUSIOHES 129

REFERENCIAS BIBIIOGRAFICAS 133

A b r e v i a t u r a s mas f r e c u e n t e s . -

BSA - Albiîmina B o v in a (FraccicSn V de Cohen)

CA - C a t e c o l a m i n a s

DA - Dopamina

EDTA - Acido e t i l e n - d i a m i n o - t e t r a - a c é t i c o

GH - Hormona de C r e c i m i e n t o

GRF - F a c t o r h i p o t a l é m i c o l i b e r a d o r de l a Hormona de C r e c i m i e n t o

NA - N o r a d r e n a l i n a

p / p - p e s o / p e s o

RIA - R a d io inm unoensayo

SNC - S i s t e m a N e r v io s o C e n t r a l

SNP - S i s t e m a N e r v io s o P e r i f é r i c o

SRIH, SRIF - Hormona h i p o t a l é m i c a i n h i b i d o r a de l a s e c r e c i d n de

Hormona de C r e c i m i e n t o o S o m a t o s t a t i n a

vs - " v e r s u s "

v / v - vo lum en /vo lu m en

I N T R O D U C C I O N .

- 1 -

INTRODUCCION.

1 . E l e.ie S i s t e m a N e r v io s o C e n t r a l E x t r a h i p o t a l a m i c o - H i p o t a

lamo - H i p é f i s i s .

La c o n c e p t u a l i z a c i ( 5 n de e s t e e j e f u n c i o n a l c o n s t i t u f d o p o r

e l S i s t e m a N e r v io s o C e n t r a l E x t r a h i p o t a l a m i c o (SNC), e l H i p o t â

lamo y l a H i p â f i s i s , su p o n e u n a j e r a r q u i z a c i â n de e s t r u c t u r a s

q u i z â s e x c e s i v a m e n t e s i m p l i s t a . De h e c h o , u n a l i n e a r i z a c i â n f u n

c i o n a l donde se c o n te m p le a l SNC como â rg a n o r e c t o r de l a a c t i v i

dad h i p o t a l a m i c a que a su v e z o r i g i n a r â u n a r e s p u e s t a h i p o f i s a r i a

c o n c r e t a , e s u n a e s q u e m a t i z a c i â n m e t o d o l â g i c a .

La c a n t i d a d de i n t e r r e l a c i o n e s e n t r e l a s t r è s e s t r u c t u r a s

f u n c i o n a l e s e s t a n g r a n d e , y é s t a s t a n c o m p l é t a s , que hoy en d f a ,

c u e s t i o n e s t à n fund am en t a l e s como quâ e s u n a hormona y quâ un n e u -

r o t r a n s m i s o r son m o t iv o de d i s c u s i â n . S in embargo, y p o r m o t iv o s

p r â c t i c o s , e s t a e s t r u c t u r a j e r a r q u i z a d a s e m a n t i e n e como v a l i d a .

C o n o c id a d e sd e h a c f a t ie m p o l a i n f l u e n c i a a m b i e n t a l s o b r e l a

a c t i v i d a d de l a g l â n d u l a h i p o f i s a r i a , e r a é v i d e n t e l a e x i s t e n c i a

de un c o n t r o l n e r v i o s o s o b r e â s t a , aun no e n c o n t r â n d o s e u n a i n e r -

v a c i â n s u f i c i e n t e que l a j u s t i f i c a r a . Ademâs, d i s t i n t a s e v i d e n c i a s

e x p é r i m e n t a l e s d e m o s t r a b a n que e l h i p o t â l a m o , zona v e n t r a l d e l

D i e n c é f a l o , e j e r c f a un c o n t r o l p o s i t i v o s o b r e l a s e c r e c i â n de C o r -

t i c o t r o p i n a (ACTH), G o n a d o t r o p i n a s (LH y FSH), T i r o t r o p i n a (TSH)

y Hormona de C r e c i m i e n t o (GH), y n e g a t i v o s o b r e l a P r o l a c t i n a

(PRL) y M e l a n o t r o p i n a (MSH).

- 2 -

A c tu a lm e n te se c o n s i d é r a a l h i p o t â l a m o como e l nexo de u n i â n

e n t r e e l SNC y l a h i p â f i s i s . En é l s e l o c a l i z a n y s i n t e t i z a n u n a

s e r i e de n e u ro h o rm o n a s de t i p o p e p t f d i c o que o r i g i n a n dos compo-

n e n t e s f u n c i o n a l e s p r i n c i p a l e s : e l s i s t e m a h i p o t â l a m o - n e u r o h i p o -

f i s a r i o , con d e s t i n o f i n a l en l a " P a r s N e r v o s a ” de l a g l â n d u l a , y

e l s i s t e m a h i p o t â l a m o - a n t e r o h i p o f i s a r i o , que c o n e c t a con l a h i

p â f i s i s a n t e r i o r a t r a v â s de un mecanismo n e u r o - h e m a l .

C o n s i d e r a d o e n t o n c e s a l SNC como p r i m e r r e c e p t o r - e f e c t o r de

e s t e e j e , u n a v e z que h a r e c o g i d o l o s e s t f m u l o s p r o c é d a n t e s d e l

a m b i e n t e e x t e r n o e i n t e m o , l o s i n t e g r a en u n a r e s p u e s t a que e s

c o n d u c i d a a t r a v â s de l a s d i s t i n t a s v i a s de n e u r o t r a n s m i s i â n h a s -

t a l a s n e u r o n a s h i p o t a l â m i c a s de n a t u r a l e z a p e p t i d â r g i c a .

Se h a n d e s c r i t o v i a s a f e r e n t e s y e f e r e n t e s i n t r a - h i p o t a l â m i -

c a s p a r a c a s i t o d o s l o s n e u r o t r a n s m i s o r e s c e n t r a l e s , y a l g u n o s de

e l l e s so n mas a b u n d a n t es en e s t a zona d i e n c e f â l i c a que en c u a l -

q u i e r o t r a p a r t e d e l c e r e b r o ( 1 ) . E s to p a r e c e i n d i c a r que e l me

can ism o de r e g u l a c i â n de l a a c t i v i d a d h i p o t a l â m i c a p o r e l SNC es

muy a b i g a r r a d o , y que e l h i p o t â l a m o se c o m p o r ta p o r t a n t o como un

c e n t r e i n t e g r a d o r de l a a c t i v i d a d e x t r a h i p o t a l â m i c a . Sus n e u r o n a s

p e p t i d â r g i c a s c o n s t i t u i r â n u n a v i a f i n a l comân d e l SNC.

Una vez i n t e g r a d a l a i n f o r m a c i â n p r o c é d a n t e d e l SNC, e l h i p o

tâ la m o o r i g i n a u n a r e s p u e s t a " n e u r o t r a d u c t o r a ” p o r medio de su s

f a c t o r e s h i p o t a l â m i c o s . A e s t a â r e a de a c t u a c i â n h i p o t a l â m i c a se

l a c o n o ce como h i p o t â l a m o e n d o c r i n e ( 2 ) .

- 3 -

A su v e z , e s t o s f a c t o r e s u horm onas h i p o t a l â m i c a s , l i b e -

r â n d o s e en l a E m in e n c i a M ed ia (EM), l l e g a n a l a h i p â f i s i s ,

e j e r c i e n d o un c o n t r o l de l a s c â l u l a s a n t e r o h i p o f i s a r i a s , p o r

l o que s e l a s denom ina horm onas h i p o f i s i o t r o p a s ( v e r F i g u r a 1 ) .

La m ay o r fa de e s t a s horm onas t i e n e n u n a e x i s t e n c i a h i p o t â -

t i c a p o r q u e aân no se h a n p o d id o a i s l a r y c a r a c t e r i z a r q u i m i c a -

m e n te . S â l o c u a t r o , l a hormona l i b e r a d o r a de TSH o TRH, l a h o r

mona l i b e r a d o r a de LH y FSH o LHRH, l a hormona l i b e r a d o r a de

ACTH o CRH y l a horm ona i n h i b i d o r a de l a l i b e r a c i â n de GH o So-

m a t o s t a t i n a (SRIH), h a n p o d id o s e r i d e n t i f i c a d a s y s e c u e n c i a d a s ,

y a que l a hormona A n t i d i u r â t i c a ( ADH) y l a O x i t o c i n a (OX), a

p e s a r de s e r de o r i g e n h i p o t a l â m i c o , s e acum ulan fu n d a m e n ta lm e n -

t e en l a h i p â f i s i s p o s t e r i o r y no t i e n e n un p a p e l h i p o f i s i o t r o p o

d e m o s t ra d o ( a p e s a r de que l a ADH t i e n e a c t i v i d a d l i b e r a d o r a de

ACTH y se h a l o c a l i z a d o t a m b iâ n en e l s i s t e m a p o r t a h i p o f i s a r i o )

( 3 ) .

Un pun to c l a v e de e s t e e j e f u n c i o n a l l o c o n s t i t u y e l a Emi

n e n c i a M ed ia , e s t r u c t u r a s i t u a d a e n t r e l a zona v e n t r a l d e l h i p o

tâ la m o y encima d e l t a l l o h i p o f i s a r i o . A e l l a no s â l o l l e g a n t o

das l a s e f e r e n c i a s p e p t i d â r g i c a s h i p o t a l â m i c a s , s i n o m u l t i t u d de

t e r m i n a c i o n e s n e r v i o s a s no p e p t i d â r g i c a s de o r i g e n i n t r a y e x t r a -

- h i p o t a l â m i c o , e i n c l u s e m o l â c u l a s de o r i g e n i n c i e r t o como l a

a n g i o t e n s i n a I I , c o l e c i s t o q u i n i n a , g a s t r i n a y o t r a s muchas r e -

c i e n t e m e n t e d e s c r i t a s , r e s u l t a n d o e l c o n j u n t o un c e n t r e i n t e g r a

d o r n e u r o e n d o c r i n e de e x t r a o r d i n a r i a c o m p l e j i d a d ( v e r F i g u r a 2 ) .

AC PV H.M.B.

SO

QuiasmaHP

HAFigura 1

F i g u r a 1. S e c c i d n s a g i t a l s i r a p l i f i c a d a d e l h i p o t a l a m o . Se d e s c r i b e n

l a s d o 8 r u t a s c l a s i c a s de c o n t r o l de l a a c t i v i d a d h i p o f i

s a r i a . L f n e a de p u n t o s ; h a z N e u r o h i p o f i s a r i o ; I f n e a con

t i n u a ; h a z T u b e r o i n f u n d i b u l a r . H .M .B . : h i p o t a l a m o medio

b a s a l , AC: c o m i s u r a a n t e r i o r , PV; n d c l e o p a r a v e n t r i c u l a r ,

SO; n . s u p r a d p t i c o , HA; h i p d f i s i s a n t e r i o r , HP; h i p d f i s i s

p o s t e r i o r , EM; e m i n e n c i a m ed ia . (Tomado de 4)

Receso InfundibularCapaEpendl-maria

C. Fibrosa

0. Externavase portal

Pars Tuberalis

Figura 2

F i g u r a 2 . R e p r e s e n ta c i ( 5 n e s q u e m a t i c a de l a o r g a n i z a t i o n de l a

E m in e n c ia M ed ia . A: c é l u l a e p e n d im a l ( t a n o c i t o ) .

B: c é l u l a g l i a l . A l a d e r e c h a de l a f i g u r a se r e p r e -

s e n t a n dos t e r m i n a c i o n e s n e r v i o s a s , un a p e p t i d é r g i c a

y o t r a no p e p t i d é r g i c a . (M o d i f i c a d o de 5)

Los axones que t e r m i n a n en l a c a p a e x t e r n a pueden e s -

t a b l e c e r s i n a p s i s e n t r e e l l e s ( ax o -ax O n icam e n t e ) e i n

c l u s e con l a s c é l u l a s A y B.

La c a p a F i b r o s a es r i c a en t e r m i n a c i o n e s y c o n e x i o n e s

cuyo p u n to de d e s t i n o e s l a h i p O f i s i s p o s t e r i o r .

— 6 —

2 . S o m a t o s t a t i n a .

Las p r i m e r a s e v i d e n c i a s de un c o n t r o l de l a Hormona de C r e

c i m i e n t o p o r e l h i p o t â l a m o s u p o n f a n l a e x i s t e n c i a de un f a c t o r

l i b e r a d o r de GH o GRF, h a s t a que e l g ru p o de McCann en 1968 ( 6 )

o b s e r v â u n a a c t i v i d a d i n h i b i d o r a de l a GH a l i n t e n t a r c a r a c t e r i

z a r a l GRF. En 1973, e l g ru p o de G u i l l e m i n l o g r a b a a i s l a r y s e -

c u e n c i a r un t e t r a d e c a p â p t i d o , r e b a u t i z a d o como S o m a t o s t a t i n a , a

p a r t i r de h i p o t â l a m o s o v i n o s , con a c t i v i d a d i n h i b i d o r a de l a s e -

c r e c i O n de GH en c u l t i v e s de c â l u l a s h i p o f i s a r i a s ( 7 , 8 ) . Mas t a r

d e , S c h a l l y y c o l . h a c f a l o mismo en h i p o t â l a m o s p o r c i n e s ( 9 ) , de-

m o s t r â n d o s e u n a misma s e c u e n c i a de a m in o â c id o s p a r a t o d a s l a s e s -

p e c i e s e s t u d i a d a s ( 1 0 ) .

D i v e r s e s a u t o r e s h a n d e m o s t r a d o r e c i e n t e m e n t e ( 1 0 , 1 1 ) , que

j u n t e a e s t a f o rm a m o l e c u l a r o r i g i n a l c o e x i s t e n d i v e r s a s p r o h o r -

monas o p r e c u r s o r e s ( p r e - p r o h o r m o n a s ) de mayor tamaho m o l e c u l a r

( S o m a t o s t a t i n a 25 , 2 8 . . ) , como o c u r r e con l a m a y o r f a de l a s h o r

monas p r o t e i c a s c o n o c i d a s , y c u y a s i g n i f i c a c i â n f u n c i o n a l en e s t e

c a s e e s t â aân p o r e s c l a r e c e r .

E x i s t e un s i s t e m a de c a t a b o l i z a c i â n r â p i d a de l a m o l â c u l a de

SRIH; a m i n o p e p t i d a s a , c a t e p s i n a D y M, como o c u r r e t a m b iâ n con a l

gunos n e u r o p â p t i d o s . E s t e s i s t e m a a p a r e c e t a n t o en t e j i d o s c e r e

b r a l e s y p e r i f â r i c o s como en e l p l a s m a . De a h f , que e l t e t r a d e c a

p â p t i d o t e n g a u n a v i d a m ed ia en p la s m a muy c o r t a , de uno a dos mi

n u t e s ( 1 2 ) .

- 7 -

2 . 1 . L o c a l i z a c i â n de l a S o m a t o s t a t i n a .

Al i g u a l que o c u r r e con o t r o s p ê p t i d o s h i p o t a l â m i c o s , l a

SRIH no s â l o se s i n t e t i z a y l o c a l i z a en e s t a zona c e r e b r a l ,

s i n o en o t r a s m uchas . Su d i s t r i b u c i â n en e l o rg a n i s m e e s p a r -

t i c u l a r m e n t e p r o f u s a , d e s d e a r e a s p r é c i s a s d e l SNC h a s t a e l

c o n d u c to g a s t r o i n t e s t i n a l , p a sa n d o p o r â r g a n o s como e l pan

c r e a s y e s t r u c t u r a s como l a r e t i n a y e l t i r o i d e s . Se h a b l a

e n t o n c e s de u n a d i s t r i b u c i â n " c e n t r a l " y o t r a " p e r i f â r i c a "

p a r a e s t a ho rm ona .

E s t a u b i c u i d a d de l a SRIH p e r m i t e e n c u a d r a r l a en e l s i s

tem a APUD p r o p u e s t o p o r P e a r s e ( 1 3 ) , d e f i n i d o a p a r t i r de u n a s

c a r a c t e r f s t i c a s b i o q u f m i c a s p a r t i c u l a r e s de un d e te r m i n a d o g r u

po c e l u l a r de p o s i b l e o r i g e n e m b r i o l â g i c o comân, en un i n t e n t o

de s i s t e m a t i z a r e l fenâmeno r e c i e n t e m e n t e o b s e r v a d o de l a e x i s

t e n c i a de p â p t i d o s c e r e b r a l e s en d i v e r s a s zo n as p e r i f â r i c a s ,

fu n d a m e n ta im e n t e c o n d u c to g a s t r o i n t e s t i n a l , y de p â p t i d o s g a s

t r o i n t e s t i n a l e s en p r i n c i p l e , d e n t r o d e l SNC.

La SRIH h i p o t a l â m i c a supone un 30% apro x i raad am en te d e l con

t e n i d o c e r e b r a l t o t a l de e s t a horm ona ( 1 4 ) . Todos l o s a u t o r e s

c o i n c i d e n en s i t u a r l a s n e u r o n a s " s o m a t o s t a t i n â r g i c a s " i n t r a -

- h i p o t a l â m i c a s en l a zona a n t e r o p e r i v e n t r i c u l a r d e l h i p o t â l a m o

( 1 5 , 1 6 ) , como se puede v e r en l a F i g u r a 3 .

E s t e a r e a p r o y e c t a t e r m i n a c i o n e s n e r v i o s a s f u n d a m e n ta lm e n te

a l a EM ( c a p a i n t e r n a y e x t e r n a ) y n e u r o h i p â f i s i s ( 1 , 1 7 , 1 8 ) , exis*

t i e n d o o t r a s e f e r e n c i a s h a c i a l o s c u e r p o s m a m i l a r e s ( z o n a s i t u a d a

c a u d a lm e n te t r a s e l h i p o t â l a m o ) . E x i s t e n t a m b i â n t e r m i n a c i o n e s

Fornix

AC

PVAPO

DM Mamilar

OVLT s ^ H A

ARC

HIPOFISIS

Figura 3

F i g u r a 3. R e p r e s e n t a c i ( 5 n e s q u e m a t i c a de l a l o c a l i z a c i d n i n t r a

h i p o t a l a m i c a de l a s n e u r o n a s s o m a t o s t a t i n é r g i c a s

( a r e a s o m b r e a d a ) . Q; q u ia s m a , ARC: n d c l e o a r c u a t o ,

VM: n . v e n t r o m e d i a l , HA: a r e a h i p o t a l â m i c a a n t e r i o r ,

SC: n , s u p r a q u i a s m a t i c o , APO: a r e a p r e â p t i c a , AC: co

m i s u r a a n t e r i o r , PV: n . p a r a v e n t r i c u l a r , DM: n . d o r -

s o m e d i a l , P: n . p o s t e r i o r . ( M o d i f i c a d o de r e f . 1 5 ) .

- 9 -

en l o s n â c l e o s h i p o t a l â m i c o s A r c u a t o y S u p r a q u i a s m â t i c o , e i n -

c l u s o en e l Organo V a s c u lo s o de l a L f n e a T e r m i n a l , s i e n d o p a r -

t i c u l a r m e n t e p r o f u s a s en e l n â c l e o V e n t r o m e d i a l ( 1 9 ) .

Se h a o b s e r v a d o l a p r e s e n c i a de n e u r o n a s p r o d u c t o r a s de

SRIH en z o n a s e x t r a h i p o t a l â m i c a s que i n c l u y e n l a A m fgdala , H i -

pocampo, C â r t e x t e l e n c e f â l i c o . S t r i a t u m , N d c le o s b a s a l e s t e l e n -

c e f â l i c o s e I n t e r p e d u n c u l a r m e s e n c e f â l i c o ( 5 , 1 9 , 2 0 - 2 2 ) , y l a

p r e s e n c i a de t e r m i n a c i o n e s s o m a t o s t a t i n â r g i c a s en l a G o r t e z a

c e r e b r a l . P i n e a l , N d c le o s b a s a l e s , Am fgdala y m e s e n c â f a l o , p e r -

t e n e c i e n t e s a v i a s de t o p o g r a f f a d e s c o n o c i d a , p e ro cuyo o r i g e n

e s e x t r a h i p o t a l a m i c o . E s t o se ded u ce de d i v e r s a s e x p e r i e n c i a s

donde l a s l e s i o n e s p r o d u c i d a s en e l a r e a a n t e r o p e r i v e n t r i c u l a r

h i p o t a l â m i c a no p r o d u j e r o n a l t e r a c i o n e s en e l c o n t e n i d o de e s t a s

t e r m i n a c i o n e s ( 1 6 , 1 9 , 2 3 ) , a l i g u a l que o c u r r e con d i v e r s a s t e r

m i n a c i o n e s s o m a t o s t a t i n â r g i c a s en e l n d c l e a V e n t r o m e d ia l a l

d e a f e r e n t a r s e e l h i p o t â l a m o d e l r e s t o d e l c e r e b r o ( 1 9 ) .

E x i s t e n n e u r o n a s y t e r m i n a c i o n e s r i c a s en SRIH ta m b iâ n en

e l S i s t e m a N e r v io s o P e r i f â r i c o (SNP), t a n t o a n i v e l de l a mâdu-

l a e s p i n a l ( a s t a s d o r s a l e s y v e n t r a l e s ) , como en g a n g l i o s s im p â -

t i c o s , n e u r o n a s s e n s o r i a l e s p r i m a r i a s y t e r m i n a c i o n e s v e g e t a t i v a s

como e l vago y e l c i â t i c o ( 2 4 - 2 9 ) . En l a s n e u r o n a s de l o s g a n g l i o s

p a r a v e r t e b r a l e s p a r e c e c o e x i s t e r con o t r o s n e u r o t r a n s m i s o r e s , l o

c u a l p a r e c e i n v a l i d e r l a t e o r f a de D ale de u n a n e u r o n a - un s o l o

n e u r o t r a n s m i s o r ( 3 0 ) .

P o r â l t i m o , se h a d e t e c t a d o l a p r e s e n c i a de c â l u l a s p r o d u c t o

r a s de SRIH a l o l a r g o d e l c o n d u c to g a s t r o i n t e s t i n a l ; e s tcm ago

- 10 -

( c â l u l a s d ) , i n t e s t i n e (d u o d e n o , y e y u n o , f l e o y c o lo n ) y en l a s

g l â n d u l a s s a l i v a r e s ; en e l p a n c r e a s ( c â l u l a s D), en e l t i r o i d e s

( c â l u l a s f o l i c u l a r e s y p a r a f o l i c u l a r e s ) , en l a p l a c e n t a y en l a

r e t i n a ( c â l u l a s a m a c r i n a s ) y pulmân ( c â l u l a s e n d o c r i n a s ) ( 1 4 , 2 1 ,

3 1 -3 6 )

2 . 2 . F i s i o l o g f a de l a S o m a t o s t a t i n a .

Se h a d e s c r i t o a l a SRIH como un p â p t i d o de c a r â c t e r i n h i b i -

t o r i o en g e n e r a l , de a h f e l nombre p r o p u e s t o p o r McCann de P a n i n -

h i b i n a . En t o d a s l a s e s t r u c t u r a s donde se h a l o c a l i z a d o se l a

a t r i b u y e u n a i n f l u e n c i a n e g a t i v e s o b r e l o s p r o d u c t o s de s e c r e c i â n

(exo y e n d o c r i n e s ) p r o p i o s de c a d a a r e a .

Dada su a m p l i a d i s t r i b u c i â n , d i s t i n g u â m e s t r è s n i v e l e s de

a c t u a c i â n ; como n e u r o p â p t i d o c e n t r a l , como hormona h i p o f i s i o t r o p a

y como horm ona p e r i f â r i c a p r o b a b l e m e n t e de t i p o p a r a c r i n e en a l g u -

no de e s t o s u l t i m e s c a s e s .

La t a b l a I ( v e r s i g u i e n t e p a g i n a ) s u m a r i z a e l am pl io e s p e c t r o

de a c c i â n de l a SRIH.

2 . 2 . 1 . F i s i o l o g f a de l a S o m a t o s t a t i n a en e l S i s t e m a N e r v io s o

C e n t r a l .

E l hech o de que se h a y a n l o c a l i z a d o n e u r o n a s c e n t r a l e s con

i n m u n o f l u o r e s c e n c i a p o s i t i v a p a r a l a SRIH a n i v e l de sema, d e n d r i -

t a s y a x ân ( 1 ) , y de que â s t a se l i b é r é de p r e p a r a c i o n e s de s i n a p -

to som as o b t e n i d o s de t e j i d o c e r e b r a l ( 3 7 ) , p a r e c e s u g e r i r que l a

— 1 1 —

T a b l a I . E f e c t o s i n h i b i t o r i o s de l a S o m a t o s t a t i n a en su s d i s t i n t a s

a r e a s de l o c a l i z a c i â n .

SNC

SNP

H i p o t â l a m o - H i p â f i s i s

P e r i f e r i a

- A c t i v i d a d e l â c t r i c a e s p o n t a n e a e i n - d u c i d a de n e u r o n a s c e n t r a l e s .

- A c t i v i d a d m o to r a y cam bios en g e n e r a l en e l c o m p o r t a m ie n to .

- M o v i l i d a d g â s t r i c a y b i l i a r .

- F l u j o s a n g u f n e o e s p l â c n i c o .

- A c t i v i d a d de l a s n e u r o n a s m i o e n t â r i c a s

- I n h i b i c i â n de l a l i b e r a c i â n de A c e t i l - c o l i n a de l a s n e u r o n a s d e l p l e x o m io - e n t â r i c o .

- S e c r e c i â n de GH y TSH " i n v iv o " e " i n v i t r o " , b a s a i o e s t i m u l a d a .

- S e c r e c i â n de ACTH en c o n d i c i o n e s p a t o - l â g i c a s , a l i g u a l que l a de PRL.

- S e c r e c i â n de LH y FSH en a n im a l e s o v a -

r i e c t o m i z a d o s .

- L i b e r a c i â n de TRH de p r e p a r a c i o n e s de h i p o t â l a m o s .

- S e c r e c i â n de I n s u l i n a , G lu c a g â n y Po- l i p â p t i d o p a n c r e â t i c o en c o n d i c i o n e s b a s a l e s o e s t i m u l a d a s .

- T odas l a s horm onas g a s t r o i n t e s t i n a l e s

c o n o c i d a s ( G a s t r i n a , S e c r e t i n a . . . . ) .

- S e c r e c i â n de C a l c i t o n i n a .

- S e c r e c i â n de R e n in a .

- 12 -

T a b l a I . C o n t i n u a c i â n ; e f e c t o s i n h i b i t o r i o s de l a S o m a t o s t a t i n a

en s u s d i s t i n t a s a r e a s de l o c a l i z a c i â n .

P e r i f e r i a - E s t f m u lo de l a s e c r e c i â n de T^ y T^t r a s TSH.

- S e c r e c i â n de â c i d o g â s t r i c o , p e p s i n a , a m i l a s a s a l i v a r y jugo e x o c r i n e p an c r e â t i c o .

- A b s o r c i â n de d i v e r s e s n u t r i e n t e s (g lu - c o s a , a m i n o â c i d o s , t r i g l i c â r i d o s e io- n e s ) a n i v e l de l a p a r e d i n t e s t i n a l .

- Como â n i c o e f e c t o p o s i t i v o comunicado h a s t a a h o r a ; a c e l e r a c i â n de l a v e l o c i - dad de a g r e g a c i â n p l a q u e t a r i a .

SRIH h a de t e n e r un p a p e l f i s i o l â g i c o a c t i v e a n i v e l c e n t r a l . Nu-

m erosos d a t e s p a r e c e n a p o y a r e s t a p o s i b i l i d a d .

La e s t i m u l a c i â n p r o d u c i d a p o r e l aumento de l a c o n c e n t r a c i â n

de i o n e s K"*" en e l medio de i n c u b a c i â n o r i g i n a u n a l i b e r a c i â n de

SRIH en p r e p a r a c i o n e s de s i n a p t o s o m a s y c u l t i v e s n e u r o n a l e s de

d i v e r s a s a r e a s c e r e b r a l e s (A m fg d a la , H i p o t â l a m o , C â r t e x , EM) de

m anera d e p e n d i e n t e de l a c o n c e n t r a c i â n p r e v i a de Ca"’"*’ ( 3 8 - 4 1 ) .

E l mismo e f e c t o s e o b s e r v a t r a s l a e s t i m u l a c i â n e l â c t r i c a de d e t e r -

m in ad as zon as c e n t r a l e s : un aumento de SRIH en s a n g r e p o r t a - h i p o f i -

s a r i a (4 2 ) o u n a d i s m i n u c i â n de GH que se b lo q u es , p o r l a a d m i n i s -

t r a c i â n p r e v i a de a n t i - S R I H ( 4 3 ) .

- 13 -

E s t a c a p a c i d a d de l i b e r a c i ( 5 n p o r e s t f m u l o s d e s p o l a r i z a n t e s

e s p r o p i a de c u a l q u i e r s u s t a n c i a n e u r o a c t i v a c l â s i c a , y j u n t o

con e l h e ch o de que e x i s t e n e n z im a s que d e s a c t i v a n r â p i d a m e n t e

a l a m o l é c u l a de SRIH ( 4 , 1 2 , 4 4 ) , se pued e c o n s i d e r a r que e s t a

n e u ro h o rm o n a cumple l o s c u a t r o r e q u i s i t e s p r o p u e s t o s p o r l o s

n e u r o f i s i ( 5 l o g o s p a r a c o n s i d e r a r l a un n e u r o t r a n s m i s o r ( 2 ) . E s t o s

so n : l o c a l i z a c i d n c u a l i t a t i v a ( p o r i n m u n o f l u o r e s c e n c i a e inmuno-

c i t o q u f m i c a ) y c u a n t i t a t i v a ( p o r r a d i o i n m u n o e n s a y o ) i n t r a n e u r o -

n a l , l i b e r a c i d n t r a s e s t i m u l a c i d n de t e j i d o s n e u r o n a l e s , s i s t e -

ma e n z i m â t i c o p r o p i o ( p r o s o m a t o s t a t i n a i n t r a n e u r o n a l como p r e c u r

s o r y p e p t i d a s a s e s p e c f f i c a s ) y p o r i l l t i m o , a c t i v i d a d a n i v e l de

r e c e p t o r p o s t s i n â p t i c o •

E s t e l î l t im o r e q u i s i t e l e cumple a m p l i a m e n te , como l a s s i g u i e n -

t e s e v i d e n c i a s e x p é r i m e n t a l e s d e m u e s t r a n . La a d m i n i s t r a c i d n de

SRIH i n t r a c e r e b r o v e n t r i c u l a r m e n t e p r o d u c e cam bios en l a c o n d u c t a

de l o s a n i m a l e s de e x p e r i m e n t c i d n ( 4 5 , 4 6 ) . Déprimé l a a c t i v i d a d de

d e t e r m i n a d a s n e u r o n a s c e n t r a l e s ( 4 7 - 4 9 ) y p e r i f é r i c a s (5 0 ) a l s e r

a d m i n i s t r a d a i o n t o f o r é t i c a m e n t e . I n t e r a c c i o n a con s i s t e m a s de n e u -

r o t r a n s m i s i d n c l a s i c o s como l a A c e t i l c o l i n a (51) y N o r a d r e n a l i n a

( 5 2 , 5 3 ) , y con o t r o s p é p t i d o s n e u r o a c t i v o s como l o s o p i £ c e o s (55)

y e l TRH (56) en e s t u d i o s " i n v iv o " e " i n v i t r o " ,

Ademas, m odu la l o s e f e c t o s de d i v e r s e s d r o g a s y n e u r o p i p t i d o s

con a c t i v i d a d c e n t r a l ( 5 6 , 5 7 ) . T odas e s t a s a c c i o n e s c e n t r a l e s de

l a SRIH p r o b a b l e m e n t e e s t é n m e d ia d a s p o r r e c e p t o r e s p r o p i o s que se

ban l o c a l i z a d o a l o l a r g o de to d o e l SNC, s i e n d o e s p e c i a l m e n t e abun-

d a n t e s en l a c o r t e z a c e r e b r a l ( 2 4 , 5 8 , 5 9 ) . E l %ero hecho de p o s e e r

— 14 —

r e c e p t o r e s i n d i c a que a l g u n a f u n c i d n c e n t r a l h a de c u m p l i r .

Su p r e s e n c i a en i n e r v a c i o n e s d e l p l e x o n e r v i o s o m e s e n t é r i c o

( 3 4 ) y o t r a s a r e a s d e l SNP, j u n t o con su a c t i v i d a d m o d u la d o ra

d e l miisculo l i s o , f l u j o s a n g u f n e o y m o v i l i d a d g & s t r i c a ( 6 0 ,6 1 ) ,

h a c e p e n s a r en v i a s s o m a t o s t a t i n é r g i c a s p e r i f ë r i c a s .

2 . 2 . 2 . La S o m a t o s t a t i n a como horm ona h i p o f i s i o t r o o a .

S i n em bargo , t a n t a informaci<5n d e m o s t r a t i v a de u n a f u n c i d n

n e u r o a c t i v a de l a SRIH no h a l o g r a d o aiîn c o n c l u i r su p a p e l f i s i o -

l(5gico c o n c r e t e en s u s d i s t i n t o s n i v e l e s de a c t u a c i d n , s i e x c e p -

tuam os e l de i n h i b i d o r f i s i o l d g i c o de l a s e c r e c i d n de GH h i p o f i - -

8a r i a , y q u i z a s , segi în l a s l î l t i m a s p r o p u e s t a s , de l a TSH t a m b i é n .

Desde su p r i m i t i v a c a r a c t e r i z a c i d n como hormona i n h i b i d o r a

de l a s e c r e c i d n b a s a i o e s t i m u l a d a de l a GH en s i s t e m a s " i n v i t r o "

o e s t u d i o s " i n v iv o " ( 8 , 6 2 - 6 4 ) , se h an id o acumulando mayor ndmero

de e v i d e n c i a s a f a v o r de u n a f u n c i d n a c t i v a en l a f i s i o l o g f a de

l a GH.

Ya en 1978 M a r t i n y c o l . (65 ) p r o p o n f a n un p a p e l c o n c r e t e de

l a SRIH: e j e r c e r f a u n a a c c i d n i n h i b i d o r a t d n i c a s o b r e l a s c é l u l a s

s o m a t o t r o p a s h i p o f i s a r i a s , s i e n d o r e s p o n s a b l e j u n t e con e l GRE de

l a p u l s a t i l i d a d c i r c a d i a n a t f p i c a de l a GH.

E s t a p r o p o s i c i ( 5 n v e n f a a p o y ad a p o r num erosos d a t e s a n t e r i o r e s

( 6 6 - 6 8 ) y se c o n f i r m é en e s t u d i o s p o s t e r i o r e s ( 4 3 , 6 9 - 7 1 ) , u t i l i -

zando a n i m a l e s p r e t r a t a d o s con s u e r o a n t i - S R I H , en l o s que se ob -t

t e n f a n e l e v a c i o n e s t a s a l e s de l a GH, 0 en r e s p u e s t a a d i v e r s e s e s

t f m u l o s , no p e r d i ë n d o s e s i n embargo l a p u l s a t i l i d a d ; e s d e c i r , a

- 15 -

p e s a r de que l a s e c r e c i ( 5 n de GH s e e n c o n t r a b a a u m e n ta d a , s e g u f a n

d â n d o se p i c o s de s e c r e c i d n (^ m e d ia d o s p o r e l GRE?).

Se h a d e s c r i t o adem&s, l a e x i s t e n c i a de un s i s t e m a de r e t r o -

a l i m e n t a c l d n c o r t o de l a GH h i p o f i s a r i a s o b r e l a SRIH, como i n d i

c a e l i n c r e m e n t o en l o s n i v e l e s de SRIH h i p o t a l â m i c a t r a s l a admi-

n i s t r a c i d n de GH i n t r a c e r e b r o v e n t r i c u l a r m e n t e ( 7 2 , 7 3 ) o e l descen-

80 o b s e r v a d o de SRIH en h i p o t â l a m o t r a s h i p o f i s e c t o m f a ( 7 3 , 7 4 ) .

M a r t i n p r o p o n e e l s i g u i e n t e esquema de c o n t r o l de l a s e c r e -

ci(5n de l a GH h i p o f i s a r i a ( 7 5 ) :

SNC C a t e c o l a m i n a s , S e r o t o n i n a

H ip o ta la m o GRE SRIH\ / !H i p d f i s i s GH------------- --

La secrec i<5n d e l GRE y l a SRIH e s t â c o n t r o l a d a p o r i n f l u e n

c in g p r o v e n i e n t e s de c e n t r e s c e r e b r a l e s s u p e r i o r e s y m ed iad a s

f u n d a m e n ta lm e n te p o r v i a s m o n o a m in ë r g i c a s . E s t a s dos hormonas a

su v e z , r e g u l a n l a s e c r e c i d n de GH en l a h i p d f i s i s , l a c u a l es

c a p a z a su vez de e j e r c e r u n a r e t r o a l i m e n t a c i < 5 n n e g a t i v a s o b r e

s i misma v f a SRIH.

La SRIH no s(5lo t i e n e un p a p e l en e l c o n t r o l de l o s n i v e l e s

b a s a l e s de GH, s i n o que p a r e c e e s t a r i n v o l u c r a d a en l a r e s p u e s t a

de e s t a hormona a m u l t i t u d de e s t f m u l o s f i s i o l d g i c o s , como e l

e s t r e s ( 6 3 , 7 6 , 7 7 ) o e l ayuno ( 7 8 ) , y f a rm a c o l (5 g ic o s como l a h i p o -

g l u c e m i a i n s u l f n i c a , l a a r g i n i n a , L -d o p a , m o r f i n a , p e n t o b a r b i t a l

y c l o r p r o m a c i n a ( 6 2 , 6 5 , 7 0 , 7 1 ) , o l a e s t i m u l a c i d n e l ë c t r i c a ( 4 3 ) .

— 16 —

En c u a n t o a su n i v e l de a c t u a c i d n en l a c é l u l a s o m a t o t r o p a

h i p o f i s a r i a p a r a i n h i b i r l a s e c r e c i d n de GH, p a r e c e s e r que t r a s

i n t e r a c c i o n a r con su r e c e p t o r e s p e c f f i c o se da u n a a l t e r a c i d n en

e l f l u j o de i o n e s Ca*^ y u n a d i s m i n u c i d n en l o s n i v e l e s de cAMP

i n t r a c e l u l a r , s i n s a b e r s e aiîn con e x a c t i t u d qué mecanismo m o le cu

l a r e s e l que p r i m e r o a c t d a ( 6 4 ) .

Poco s e h a e s c l a r e c i d o h a s t a e l momento e l s i g n i f i c a d o f i s i o -

I d g i c o d e l e f e c t o de l a SRIH s o b r e l a s e c r e c i d n de o t r a s hormonas

a n t e r o h i p o f i s a r i a s . A lgunos a u t o r e s han p r o p u e s t o que t e n d r f a un

p a p e l a c t i v o en l a r e g u l a c i d n de l a TSH h i p o f i s a r i a j u n t o con e l

o t r o f a c t o r h i p o t a l l m i c o r e s p o n s a b l e d e l c o n t r o l de e s t a horm ona,

e l TRH ( 7 9 ) , en b a s e a l e f e c t o que se o b s e r v a de TSH b a s a i o e s t i

m u la d a p o r e l TRH o e l f r f o , i n c r e m e n t a d a t r a s l a a d m i n i s t r a c i d n

de s u e r o a n t i - S R I H ( 7 0 , 8 0 ) ; o de TSH d i s m i n u f d a t r a s l a a d m i n i s t r a -

ci(5n de SRIH ( 6 3 , 6 6 , 6 7 , 8 1 - 8 3 ) , o d e l e f e c t o i n h i b i t o r i o que e j e r c e

l a 8RIH s o b r e l a l i b e r a c i d n de TRH en c u l t i v e s de h i p o t â l a m o s ( 5 5 ) ,

0 d e l aumento o b s e r v a d o en e l c o n t e n i d o de SRIH en r a t a s h i p o t i r o i -

d e a s que e x p l i c a n l o s mismos a u t o r e s como d e b id o a u n a d e f i c i e n c i a

en T 3 y T 4 , y a que o b s e r v a n un aumento en l a l i b e r a c i d n de SRIH en

r a t a s t r a t a d a s con T3 ( 7 9 ) .

Su c a p a c i d a d de i n h i b i r l a LH y FSH en r a t a s o v a r i e c t o m i z a d a s

( 8 4 ) , o PRL en s u j e t o s a c r o m e g a l i c o s ( 8 5 ) , 0 ACTH en e l s fnd rom e

de N e l s o n ( 8 5 ) , o de e s t a misma hormona p r e v i a m e n t e e s t i m u l a d a con

i o n e s K*’’ en c u l t i v e s de c é l u l a s h i p o f i s a r i a s ( 8 6 ) , c o n t r i b u y e a

a r a p l i a r un poco mas e l y a g r a n d e e s p e c t r o de a c t u a c i é n de e s t a h o r

mona, p e r o no a c l a r a su p a p e l h i p o f i s i o t r o p o , s i excep tu am os a l a

GH.

- 17 -

Q u iz â s e s t o s e f e c t o s de l a SRIH p u e d an a t r i b u f r s e a s i t u a -

c i o n e s p a t o l é g i c a s o a n o r m a l e s , en donde l a h i p é f i s i s pued e e s -

c a p a r a l c o n t r o l que n o rm a lm e n te e j e r c e e l h i p o t a l a m o , como de

h echo o c u r r e en a l g u n o s t u m o r e s h i p o f i s a r i o s que dan l u g a r a

r e s p u e s t a s p a r a d é j i c a s a l a e s t i m u l a c i d n h i p o t a l a m i c a (ac ro m eg a

l i a , h i p e r p r o l a c t i n e m i a s . . . ) .

2 . 2 . 3 . P a p e l f i s i o l é g i c o de l a S o m a t o s t a t i n a en l o s é r g a n o s n e r i -

f é r i c o s .

De l o poco que se s a b e s o b r e e l s i g n i f i c a d o f u n c i o n a l que

p u e d a t e n e r l a SRIH en l o s é r g a n o s de l a p e r i f e r i a , p r â c t i c a m e n t e

l a t o t a l i d a d de l a i n f o r m a c i é n que se p o s e e s e c e n t r a en su f i s i o -

l o g f a p a n c r e â t i c a y d i g e s t i v a , p r i n c i p a l m e n t e p o r su p o s i b l e im-

p o r t a n c i a en l a a p l i c a c i é n de t e r a p i a s e t i o l é g i c a s en p a t o l o g f a s

t a i e s como l a d i a b e t e s , t u m o r e s p a n c r e é t i c o s y g â s t r i c o s o l î l c e r a s

g a s t r i c a s .

P a n c r e a s ; Las c é l u l a s D p a n c r e a t i c a s , que c o n s t i t u y e n e l 20% d e l

c o n t e n i d o c e l u l a r d e l i s l o t e de L a n g e r h a n s ( 2 4 ) , s e d i s p o n e n en

l a p e r i f e r i a d e l mismo en amalgama con l a s A ( p r o d u c t o r a s de G-lu-

cag é n ) y PP ( p r o d u c t o r a s de P o l i p é p t i d o p a n c r e a t i c o , v e r 24) y

a l g u n a s e s c a s a s B ( p r o d u c t o r a s de I n s u l i n a ) , s i e n d o e s t a s u l t i m a s

e l com ponen ts c e l u l a r p r i n c i p a l d e l n d c l e o d e l i s l o t e ( 8 7 ) .

E s t a d i s p o s i c i é n a n a t é m i c a h a p e r m i t i d o s u g e r i r a a lg u n o s

a u t o r e s l a p o s i b i l i d a d de que l a SRIH t e n g a un p a p e l r e g u l a d o r

d e l G lu c a g é n f u n d a m e n ta l m e n te , a p e s a r de que no se h a y a demos-

t r a d o p o r e l momento d i f e r e n t e s s e n s i b i l i d a d e s de l a s c é l u l a s A

y B a l e f e c t o de l a SRIH ( 8 7 ) .

— 1 8 “

La SRIH i n h i b e l a s e c r e c i é n b a s a i de I n s u l i n a y G lu c a g é n

y l a r e s p u e s t a de e s t a s horm onas a d i f e r e n t e s s e c r e t a g o g o s ( 8 8 -

- 9 2 ) . I n h i b e ademas a l P o l i p é p t i d o p a n c r e a t i c o ( P P ) , hormona

ailn poco c o n o c i d a .

E s t a i n h i b i c i é n g e n e r a l p a r e c e t e n e r un s i g n i f i c a d o f i s i o l é -

g i c o , y a que l a a d m i n i s t r a c i é n de a n t i - S R I H a c u l t i v e s de i s l o t e s

de L a n g e r h a n s p r o d u c e un aumento en l a l i b e r a c i é n de I n s u l i n a y

G lu c a g é n ( 9 3 ) , no h a b i é n d o s e d e t e r m i n a d o e l e f e c t o s o b r e e l PP

ailn. Ademas, e l p é n c r e a s t i e n e l a c a p a c i d a d de s e c r e t a r SRIH de

u n a fo rm a b a s a i y c o n t i n u a ( 9 4 ) , t a n t o en s i s t e m a s " i n v i t r o " ,

como " i n v i v o " , y de b i o s i n t e t i z a r l a p o r f o r m a c i é n p r e v i a de un

p r e c u r s o r de mayor peso m o l e c u l a r e i d é n t i c o en s e c u e n c i a a l a

p r o s o m a t o s t a t i n a de o r i g e n n e u r a l ( 9 5 ) .

P a r e c e s e r que e s t e e f e c t o de l a SRIH s o b r e l a s c é l u l a s A

y B p a n c r e a t i c a s s e r f a de t i p o p a r a c r i n o , e s d e c i r , a c t u a r f a de

m a n e ra l o c a l a t r a v é s de desmosomas o u n i o n e s e s p e c i a l i z a d a s que

p o s e e n l a s c é l u l a s d e l i s l o t e , s o b r e l a s e c r e c i é n de I n s u l i n a y

G lu c a g é n ( 8 7 ) . E s t a a c c i é n r e g u l a d o r a l o c a l v i e n e ap o y ad a p o r

e l hecho de que l a s c é l u l a s D p a n c r e a t i c a s (y e s t o m a c a l e s ) p a r e c e n

e m i t i r p r o l o n g a c i o n e s c i t o p l a s m i c a s , en e s t e c a s o a l a s c é l u l a s

A, B y PP y a l o s v a s o s s a n g u f n e o s d e l i s l o t e , p u d i e n d o , a t r a v é s

de e s t o s c o n t a c t o s , y q u i z a s m e d i a n t e r e c e p t o r e s de membrana, i n c i -

d i r en l a a c t i v i d a d de e s t a s c é l u l a s d i r e c t a y l o c a l m e n t e ( 9 6 ) .

O t r a s o b s e r v a c i o n e s que apoyan e s t a a c t i v i d a d p a r a c r i n a son

e l que l a SRIH p l a s m a t i c a , que e x i s t e en fo rm a de d e s -A la ^ -S R IH ,

p o s e e u n a v i d a m ed ia muy c o r t a ( 9 7 ) , l o que l a i n c a p a c i t a r f a p a r a

a c t u a r a d i s t a n c i a , y que adem as , se h a a i s l a d o u n a p r o t e f n a t r a n s -

- 19 -

p o r t a d o r a de SRIH en e l c i t o p l a s m a de l a s c é l u l a s p a n c r e a t i c a s

( 8 7 ) .

De c u a l q u i e r modo, p a r e c e c i e r t a u n a a c c i é n r e g u l a d o r a de

l a SRIH s o b r e l a a c t i v i d a d e n d o c r i n a p a n c r e a t i c a , como i n d i c a n

m u l t i t u d de d a t e s . Las p e r f u s i o n e s en p r e p a r a c i o n e s " i n v i t r o "

e " i n v iv o " de SRIH p r o d u c e n u n a i n h i b i c i é n de l a I n s u l i n a y e l

G lu c a g é n , j u n t o con u n a h i p o g l u c e m i a ( 9 8 ) . Se o b s e r v a t a m b ié n

u n a r e l a c i é n i n v e r s a , e s d e c i r , e l G lu c a g é n , l a I n s u l i n a y l a

g l u c o s a son e s p a c e s de e s t i m u l a r l a l i b e r a c i é n de SRIH ( 8 7 , 9 4 , 9 9 ) .

Ademas, d i v e r s e s e s t f m u l o s de l a a c t i v i d a d e n d o c r i n a d e l p a n c r e a s

p r o d u c e n t a m b i é n un e s t f m u l o en l a l i b e r a c i é n de SRIH, como l a

a r g i n i n a , d i v e r s e s n e u r o t r a n s m i s o r e s y n e u r o p é p t i d o s ( 1 0 0 - 1 0 2 ) ,

a l i g u a l que s e p r o d u c e u n a i n h i b i c i é n de l a SRIH p o r e s t i m u l a c i é n

de l a i n e r v a c i é n p a n c r e é t i c a c o l i n é r g i c a y a l f a - a d r e n é r g i c a ( 1 0 3 ) .

La a d m i n i s t r a c i é n i n t r a v e n o s a de SRIH p r o d u c e u n a h i p o g l u c e

m ia i n i c i a l d e b i d a q u i z a s , a l a i n h i b i c i é n de l a s hormonas h i p e r -

g l u c e m i a n t e s GH y G lu c a g é n , y a l a d i s m i n u c i é n de a b s o r c i é n i n t e s

t i n a l de c a r b o h i d r a t o s a n i v e l i n t e s t i n a l ( 3 4 , 9 8 ) , o r i g i n a n d o mas

t a r d e u n a h i p e r g l u c e m i a m e d ia d a p r o b a b l e m e n t e p o r l a m arc ad a h i p o -

i n s u l i n e m i a que p r o d u c e en p a r a l e l o ( 1 0 4 ) . E s t e e f e c t o de l a SRIH

s o b r e l a h o m e o s t a s i s de l a g l u c o s a es d i s c u t i d o p o r muchos a u t o r e s

en u n a u o t r a fo rm a , p e r o es muy p r o b a b l e que l a SRIH i n c i d a s o b r e

é s t a a t r a v é s d e l c o n t r o l de l a s horm onas p a n c r e é t i c a s .

P a r e c e p o r t a n t o , que u n a p a r t e i m p o r t a n t e de l a f i s i o l o g f a

d e l i s l o t e de L a n g e r h a n s e s t é c o n t r o l a d a - p o r l a SRIH; e l hecho de

que e l G lu c a g é n aumente l a s e c r e c i é n de SRIH, s u g i e r e que e s t a h o r -

— 20 —

mona p u e d a c o n t r o l a r su p r o p i a s e c r e c i é n a t r a v é s de l a SRIH;

e i n c l u s e que l a SRIH e s t é mediando e l e f e c t o s u p r e s o r de l a

g l u c o s a s o b r e e l G l u c a g é n , y a que l a g l u c o s a e s t i m u l a l a s e

c r e c i é n de SRIH.

E l e f e c t o e s t i m u l a d o r de l a g l u c o s a s o b r e l a I n s u l i n a o

d e l p r o p i o G lu c a g é n s o b r e e s t a misma horm ona , no s e puede e x -

p l i c a r s i n embargo , como m ediado p o r l a SRIH, y a que ambos e s t i -

m ulan a l a p r o p i a SRIH, y é s t a a su vez i n h i b e a l a I n s u l i n a . Se

h a d e m o s t r a d o p o r o t r a p a r t e , que l a g l u c o s a y l a SRIH a c t i î a n de

m ane ra c o m p e t i t i v a s o b r e l a c é l u l a B, de fo rm a que a d e t e r m i n a d a s

d o s i s de g l u c o s a e l e f e c t o i n h i b i d o r de l a SRIH s o b r e l a I n s u l i n a

d e s a p a r e c e , p r o d u c i é n d o s e un i n c r e m e n t o en l a s e c r e c i é n de e s t a

hormona ( 1 0 5 ) .

Conducto g a s t r o i n t e s t i n a l ; Las c é l u l a s D de l a zona a n t r a l d e l

e s tém ago p r o d u c e n SRIH, e s t a n d o e n t r e m e z c l a d a s con a q u e l l a s p r o

d u c t o r a s de P e p s i n a , G a s t r i n a y a c i d o g a s t r i c o en l a mucosa e s -

t o m a c a l . T r è s t i p o s de s e c r e c i é n g a s t r i c a i n f l u f d o s de m anera

n e g a t i v a p o r l a SRIH ( 1 4 , 3 4 , 8 8 , 8 9 ) .

De i g u a l f o r m a , l a s zonas p r o d u c t o r a s de SRIH i n t e s t i n a l

(d u o d e n o , y e y u n o , f l e o y c o lo n ) s u e l e n s e r r i c a s en su s t r a m o s

a l t o s (duodeno y y ey u n o ) en M o t i l i n a , P é p t i d o I n t e s t i n a l V a so a c -

t i v o (V IP ) , P é p t i d o G a s t r i c o I n h i b i t o r i o (G IP ) , C o l e c i s t o q u i n i n a -

p a n c r e o z i m i n a , S e c r e t i n a y G lu c a g é n e n t é r i c o , s u s t a n c i a s t o d a s

a l l a s i n h i b i d a s t a m b i é n p o r l a SRIH ( 3 4 , 1 0 6 ) .

La SRIH no s é l o i n h i b e l a p r o d u c c i é n e n d o c r i n a g a s t r o i n t e s

t i n a l , s i n o t a m b i é n l a p r o d u c c i é n de jugo p a n c r e a t i c o con su s

— 21 —

c o r r e s p o n d ! e n t e s e n z im a s , l a a m i l a s a de l a s g l a n d u l a s s a l i v a r e s ,

l a s y a m e n c io n a d a s p e p s i n a y HCl e s t o m a c a l e s y d e s c i e n d e l a movi

l i d a d g a s t r o i n t e s t i n a l y b i l i a r , y e l f l u j o s a n g u f n e o e s p l a c n i c o

( 3 4 , 8 8 , 8 9 ) .

E s t o s e f e c t o s pu ed en s e r d i r e c t e s s o b r e l a c é l u l a d i a n a , o

b i e n a t r a v é s de u n a i n h i b i c i é n p r e v i a de l a G a s t r i n a , o de l a

M o t i l i n a o s o b r e e l m éscu lo l i s o de l o s v a s o s s a n g u f n e o s . . . e t c .

Todas e s t a s a c c i o n e s de l a SRIH a n i v e l p a n c r e é t i c o y g a s t r o

i n t e s t i n a l , j u n t o con e l hecho de que se h a o b s e r v a d o que r e t a r d a

l a a b s o r c i é n de l o s n u t r i e n t e s , b i e n s e a p o r un e f e c t o d i r e c t o

s o b r e l a m ucosa i n t e s t i n a l o p o r r e d u c i r e l f l u j o s a n g u f n e o i n

t e s t i n a l , l a h a c e n c a n d i d a t a a t e n e r un p a p e l i m p o r t a n t e en l a

h o m e o s t a s i s de l a i n g e s t a de n u t r i e n t e s ( 1 0 4 , 1 0 7 - 1 0 9 ) , s u p u e s t o

que v i e n e a v a l a d o p o r e l hecho de que p a r e c e i n f l u i r en e l a p e -

t i t o , d i s m in u y é n d o lo a l s e r a d m i n i s t r a d a a r a t a s o monos ( 1 4 , 1 0 8 ) ,

También p a r e c e f a c i l i t a r l a m o v i l i z a c i é n de l o s a c i d o s g r a s o s

d e l a d i p o c i t o ( 1 1 0 ) .

A p e s a r de l a m u l t i p l i c i d a d de a c c i o n e s que se d e s c r i b e n

p a r a l a SRIH a l o l a r g o d e l c o n d u c to g a s t r o i n t e s t i n a l , su p a p e l

f i s i o l é g i c o en e s t e a r e a aén e s poco c l a r o ; p a r e c e c o m p o r t a r s e

como un m o d u la d o r l o c a l de t i p o p a r a c r i n o en l o s p r o c e s o s e n do -

c r i n o s y e x o c r i n o s d e l a p a r a t o d i g e s t i v e , d e b ie n d o p o r t a n t o

a f e c t a r de a l g u n a m an e ra l o s p r o c e s o s de d i g e s t i é n y a s i m i l a c i é n

de l o s n u t r i e n t e s . A e s t e r e s p e c t e , s e h a d e s c r i t o un p a p e l e s t i

m u la d o r de l a SRIH a n i v e l de l a c é l u l a o x f n t i c a , p r o d u c t o r a de

a c i d o g a s t r i c o , s o b r e l a s e c r e c i é n de HCl ( i l l ) , que a p o y a r f a

un e f e c t o p a r a c r i n o de l a SRIH a e s t e n i v e l , y a que en e s t u d i o s

- 22 -

" i n v iv o " su e f e c t o e s e l c o n t r a r i o , i n h i b e l a s e c r e c i é n de HCl,

p r o b a b l e m e n t e a t r a v é s de u n a i n h i b i c i é n de l a G a s t r i n a , de u n a

fo rm a que en e s t e caso s e r f a t f p i c a m e n t e h o rm o n a l .

En c u a n t o a su a c c i é n en l u g a r e s como e l t i r o i d e s , se h a

d e s c r i t o un b l o q u e o de l a e s t i m u l a c i é n de y t r a s TSH p o r

l a SRIH, y que e x i s t e n tu m o r e s p r o d u c t o r e s de SRIH y C a l c i t o n i n a

en e s t a g l é n d u l a ( 3 4 , 1 1 2 ) .

En e l r i n é n i n h i b e l a s e c r e c i é n de R e n in a e s t i m u l a d a p o r l a

f u r o s e m i d a (34) y aum en ta l a d i u r e s i s ( 1 1 3 ) . Todas e s t a s a c c i o n e s

no so n c a p a c e s p o r s i mismas de e x p l i c a r qué f u n c i é n puede c u m p l i r

l a SRIH en e s t a s a r e a s .

2 . 3 . R e g u l a c i é n de l a s e c r e c i é n de S o m a t o s t a t i n a .

No s é l o e s n e c e s a r i o s a b e r qué a c c i o n e s e j e r c e l a SRIH en

s u s d i f e r e n t e s a r e a s de l o c a l i z a c i é n , s i n o t a m b ié n cémo e s t a

i n f l u f d a p o r l o s d i f e r e n t e s s i s t e m a s de r e g u l a c i é n ( n e u r o n a l e s

y h u m o r a l e s ) en c a d a u n a de d i c h a s z o n a s , p a r a p o d e r a c l a r a r su

f i s i o l o g f a .

E l hecho de que s e a u n a n eu ro h o rm o n a de r e l a t i v a r e c i e n t e

c a r a c t e r i z a c i é n , y que su c u a n t i f i c a c i é n h a y a p l a n t e a d o p r o b l è

mes t é c n i c o s ( i l 4 ) , h a c o n d u c id o a un d e s c o n o c i m i e n t o de su r e

g u l a c i é n en t é r m i n o s g é n é r a l e s . Aiîn a s f , en l o s u l t i m o s ahos l a

l i t e r a t u r a a l r e s p e c t o e s a b u n d a n t e , s o b r e to d o a n i v e l p e r i f é -

r i c o . E s t o e s d e b i d o , como y a apun tam os con a n t e r i o r i d a d , a l

enorme i n t e r é s que h a d e s p e r t a d o en l o s d i a b e t é l o g o s e l e s t u d i o

de e s t a horm ona.

- 23 -

Como r e g i a g e n e r a l , s e pued e d e c i r que l a SRIH s e ve r e g u l a d a

p o r d i s t i n t o s a g e n t e s segi ln e l l u g a r donde se p r o d u z c a ; a s f , un

e s t i m u l a d o r a n i v e l h i p o t a l a m i c o , puede r e s u l t a r s e r i n h i b i d o r a

n i v e l p a n c r e a t i c o . P o r e l l o , d i s t i n g u i m o s t a m b i é n d i s t i n t o s n i v e l e s

de r e g u l a c i é n de l a s e c r e c i é n de SRIH. E s t e fenémeno a p o ya t a m b ié n

e l que l a SRIH t e n g a un p a p e l f i s i o l é g i c o que d en o m in ar fam o s de

" a m p l i o e s p e c t r o " ( 1 1 5 ) .

2 . 3 . 1 . R e g u l a c i é n de l a S o m a t o s t a t i n a n o r e l S i s t e m a N e r v io s o

C e n t r a l .

Debido a que l a s C a t e c o l a m i n a s son l o s n e u r o t r a n s m i s o r e s me-

j o r c o n o c i d o s en c u a n t o a su i n f l u e n c i a s o b r e l a s e c r e c i é n de GH

h i p o f i s a r i a , y que su d i s t r i b u c i é n i n t r a h i p o t a l é m i c a a p o y a un a

p o s i b l e i n t e r a c c i é n a n a t é m i c a con l a s n e u r o n a s s o m a t o s t a t i n é r g i c a s ,

s u s e f e c t o s s o b r e l a SRIH son l o s que mas se h an e s t u d i a d o , a p e

s a r de que l o s d a t o s s u e l e n s e r c o n t r a d i c t o r i e s . E s t o é l t i m o s e

h a j u s t i f i c a d o en p a r t e a l a s d i s t i n t a s m e t o d o l o g f a s u s a d a s en

c a d a c a s o .

La Dopamina (DA) es c a p a z de p r o v o c a r l a l i b e r a c i é n de SRIH

en c u l t i v e s de EM, h i p o t a l a m o s , y en s a n g r e p o r t a h i p o f i s a r i a en

r a t a s a n e s t e s i a d a s ( 1 1 6 - 1 1 8 ) , p e r o no en c u l t i v e s de. f r a g m e n t e s h i -

p o t a l a m i c o s ( 1 1 9 ) . R e c i e n t e m e n t e se h a o b s e r v a d o un e f e c t o i n h i b i

d o r de l a DA en c u l t i v e s de t e j i d o c e r e b r a l e x t r a h i p o t a l a m i c o s o

b r e l a l i b e r a c i é n de SRIH, l o c u a l s u ^ e r i r f a un e f e c t o d i f e r e n c i a l

de l a DA s o b r e l a s n e u r o n a s SRIH segun l a l o c a l i z a c i é n de é s t a s

d e n t r o d e l SNC ( 1 2 0 ) .

— 24 —

E l e f e c t o de l a N o r a d r e n a l i n a (NA) p a r e c e aén mas c o n t r o -

v e r t i d o , P o r u n a p a r t e se h a e n c o n t r a d o un e f e c t o e s t i m u l a d o r

s o b r e l a l i b e r a c i é n de SRIH en c u l t i v o s de EM o en s a n g r e * p o r

t a h i p o f i s a r i a de r a t a s a n e s t e s i a d a s ( 1 1 6 - 1 1 8 , 1 2 1 ) , p e ro no

p a r e c e t e n e r e f e c t o a lg u n o s o b r e l a l i b e r a c i é n de e s t a hormona

en c u l t i v o s de h i p o t â l a m o s ( 1 1 7 , 1 1 9 ) . E s t u d i o s p r e l i m i n a r e s

en r a t a s a n e s t e s i a d a s s u g i e r e n u n a i n f l u e n c i a p o s i t i v a de l a s

v i a s b e t a - a d r e n â r g i c a s s o b r e l a SRIH y n e g a t i v a de l a s a l f a en

su l i b e r a c i é n a l a s a n g r e p o r t a i ( l 2 l ) , aunque o t r o s a u t o r e s

no han pod ido c o n f i r m a r l o ( 1 1 9 ) .

O t r o s n e u r o t r a n s m i s o r e s , t a i e s como e l a c id o Gamma-aminobu-

t f r i c o (GABA) o l a A c e t i l c o l i n a , p a r e c e n m o d u la r de a l g u n a ma

n e r a a l a SRIH de l o c a l i z a c i é n c e n t r a l . E l p r im e ro de e l l o s ,

p a r e c e i n c r e m e n t a r e l c o n t e n i d o h i p o t a l a m i c o de SRIH a l a vez

que p r o d u c e u n a d i s m i n u c i é n de l a l i b e r a c i é n de e s t a hormona a

l a v a s c u l a t u r a p o r t a h i p o f i s a r i a ( 1 2 2 , 1 2 3 ) . Algunos a u t o r e s han

e x p l i c a d o a s f e l e f e c t o i n h i b i d o r d e l GABA s o b r e l a GH ( 1 2 2 ) , a

p e s a r de que o t r o s a u t o r e s no han pod ido c o r r o b o r a r l o ( 1 1 9 - 1 2 4 ) .

La A c e t i l c o l i n a p a r e c e e j e r c e r u n a i n f l u e n c i a p o s i t i v a s o b r e

l a l i b e r a c i é n de SRIH en s a n g r e p o r t a h i p o f i s a r i a de r a t a s a n e s

t e s i a d a s , p e ro no modula de fo rm a c l a r a l a l i b e r a c i é n de e s t a

hormona en c u l t i v o s m a n te n id o s en un s o l o b lo q u e o en f r a g m e n te s

( 1 1 7 - 1 1 9 ) , e i n c l u s e se h a comunicado un e f e c t o i n h i b i t o r i o s o b r e

l a SRIH de e s t e n e u r o t r a n s m i s o r ( 1 2 5 ) .

La S e r o t o n i n a (5HT), cuyos e f e c t o s s o b r e l a GH no e s t â n

a c l a r a d o s , no p a r e c e a f e c t a r l a s e c r e c i é n de SRIH n i en a n im a le s

v i v e s , n i en c u l t i v o s de h i p o t â l a m o s ( 1 1 7 - 1 1 9 ,1 2 4 ) .

- 25 -

S i n embargo, se h a e n c o n t r a d o un e f e c t o i n h i b i d o r de l a

5HT s o b r e l a l i b e r a c i é n de SRIH en c u l t i v o s de f r a g m e n t e s h i -

p o t a l â m i c o s ( 1 4 2 , 1 4 3 ) . Ademas, l a d i s m i n u c i é n de l a s e c r e c i é n

de GH que se o b s e r v a t r a s l a a d m i n i s t r a c i é n de m e t e r g o l i n a ( a n -

t a g o n i s t a s e r o t o n i n é r g i c o a n i v e l d e l r e c e p t o r ) se ve p a l i a d a

p o r l a i n y e c c i é n s i m u l t â n e a de a n t i - S R I H , con l o que se supone

que e s t a monoamina t e n d r a un e f e c t o i n h i b i d o r t é n i c o s o b r e l a

SRIH, a l a v i s t a de e s t o s r e s u l t a d o s ( 1 2 7 ) . Por e l c o n t r a r i o ,

l a M e l a t o n i n a p a r e c e t e n e r un e f e c t o p o s i t i v e s o b r e su l i b e r a

c i é n ( 1 2 5 ) .

Se h a e s t u d i a d o ta m b ié n l a p o s i b l e i n f l u e n c i a de d i v e r s e s

n e u r o p é p t i d o s de l o c a l i z a c i é n c e n t r a l s o b r e l a SRIH. E l VIP,

p a r e c e t e n e r un e f e c t o n e g a t i v e s o b r e l a SRIH ( 1 2 4 ) , m i e n t r a s

que l a N e u r o t e n s i n a e l c o n t r a r i o , é s t a é l t i m a en c u l t i v o s h i p o -

t a l â m i c o s ( 1 1 7 , 1 2 8 ) . E s t o s u l t i m o s a u t o r e s comunican i g u a l m e n t e

un e f e c t o p o s i t i v e de l a Bom bes ina s o b r e l a l i b e r a c i é n de SRIH

a l a s a n g r e p o r t a h i p o f i s a r i a .

La l l a m a d a S u s t a n c i a P p a r e c e e s t i m u l a r su l i b e r a c i é n en

h i p o t a l a m o s m a n te n id o s en c u l t i v e , p e ro no p a r e c e e f e c t a r l a en

su l i b e r a c i é n a l a s a n g r e d e l s i s t e m a p o r t a 0 en f r a g m e n te s h i -

p o t a l é m i c o s ( 1 2 4 , 1 2 8 , 1 2 9 ) . Los o p i â c e o s endégenos ( e n d o r f i n a s

y e n c e f a l i n a s ) p a r e c e n no a f e c t a r l a l i b e r a c i é n de SRIH en c u l

t i v o s de t e j i d o h i p o t a l a m i c o o a l a s a n g r e p o r t a en r a t a s a n e s

t e s i a d a s ( 1 2 8 , 129 ) , p e ro s i b lo q u e a n e l i n c r e m e n to en su l i b e

r a c i é n p r o d u c id o p o r e s t f m u l o s d e s p o l a r i z a n t e s en c u l t i v o s " i n

v i t r o " ( 1 3 0 ) . Su l i b e r a c i é n b a s a i en c u l t i v o s de t e j i d o c e r e b r a l

e x t r a h i p o t a l a m i c o e s t a i n h i b i d a p o r l a M o r f i n a ( 1 2 0 ) , y l a admi-

— 26 —

n i s t r a c i é n de SRIH a su v e z , b l o q u e a l a r e s p u e s t a de GH aum enta

da p r o d u c i d a p o r l a M o r f i n a ( 1 3 2 ) . E s t o s d l t i m o s d a t o s s u g i e r e n

l a p o s i b i l i d a d de l a e x i s t e n c i a de r e c e p t o r e s o p i â c e o s e n f l a s

n e u r o n a s s o m a t o s t a t i n é r g i c a s , e s d e c i r , u n a a c c i é n d i r e c t a de

l o s o p i â c e o s p r o b a b l e m e n t e a t r a v é s de r e c e p t o r e s "mu" ( n a l o x o -

n a d e p e n d i e n t e s ) , y a que l a N a lox o na a n t a g o n i z a e l b lo q u e o p r o

d u c id o en l a e s t i m u l a c i é n de SRIH en c u l t i v o s " i n v i t r o " de cé

l u l a s h i p o t a l â m i c a s ( e x p u e s t a s en e l a n im a l v iv o a l e s t f m u l o p o r

f r f o ) p o r l o s o p i â c e o s ( 1 3 1 ) .

P a r a l a s a c c i o n e s de o t r o s n e u r o p é p t i d o s como l a N e u r o t e n

s i n a o l a Bom bes ina , se h a p o s t u l a d o u n a m e d i a c i é n h i s t a m i n é r g i -

c a en v i s t a de que su e s t f m u l o s o b r e l a SRIH se b l o q u e a p o r l o s

a n t a g o n i s t as de l a H i s t a m i n a ( 1 2 9 ) .

Se h a e s t u d i a d o l a i n t e r a c c i é n de l a SRIH con d i v e r s e s h o r

monas, como e l TRH, que a p e s a r de e s t a r modulado p o r e s t a n e u r o

hormona ( 5 5 ) , no p a r e c e a su vez a f e c t a r l a ( 1 2 9 ) . La GH s i n embar

g o , m o d i f i c a c l a r a m e n t e l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t â l a m o , i n c r e -

m e n t â n d o l o s , 0 b i e n su d e f e c t o p o r p r e v i a h i p o f i s e c t o m f a p r o v o c a

un d e s c e n s o de l a SRIH en h i p o t â l a m o ( 7 2 - 7 4 , 1 3 3 ) . I g u a l m e n t e , e l

d e s c e n s o en l a l i b e r a c i é n de GH que se o b s e r v a t r a s l a a d m i n i s t r a

c i é n de GH i n t r a v e n t r i c u l a r m e n t e se puede e x p l i c a r como mediado

p o r un aumento p r e v i o de l a SRIH ( 1 3 4 ) .

- 27 -

2 . 3 . 2 . R e g u l a c i é n de l a S o m a t o s t a t i n a u e r i f é r i c a .

S i l a SRIH se l o c a l i z e a l o l a r g o d e l c o nd u c to g a s t r o i n t e s -

t i n a l y t e j i d o p a n c r e é t i c o , e i n f l u y e en l a s s e c r e c i o n e s humora

l e s de e s t a s a r e a s , es p o r q u e puede t e n e r a l g é n p a p e l f i s i o l é g i

co en e l c o n t r o l de l a h o m e o s t a s i s de l o s n u t r i e n t e s . P o r l a m is

ma r a z é n , su s e c r e c i é n se h a de v e r a f e c t a d a e n t o n c e s p o r l o s d i -

v e r s o s f a c t o r e s que r e g u l a n l a a c t i v i d a d d i g e s t i v a .

Se h a comprobado que e f e c t i v a m e n t e l o s d i f e r e n t e s componen-

t e s de l a d i e t a , c a r b o h i d r a t o s , p r o t e f n a s y g r a s a s , a f e c t a n p o s i -

t i v a m e n t e l a s e c r e c i é n de SRIH ( 1 3 5 ) , a l i g u a l que l a g l u c o s a ,

a r g i n i n a , l e u c i n a o u n a m e z c l a de a m in o â c id o s y m e t a b o l i t e s como

e l l a c t a t o o l o s c u e r p o s c e t é n i c o s ( 1 3 6 , 1 3 7 ) . Al mismo t i e m p o , se

h a o b se rv a d o que e s a f e c t a d a t a m b ié n p o r a q u e l l a s hormonas g a s t r o

i n t e s t i n a l e s que i n f l u y e n s o b r e l a s c é l u l a s A y B p a n c r e a t i c a s ,

como son l a S e c r e t i n a , VIP, GIP y C o l e c i s t o q u i n i n a - p a n c r e o z i m i n a ,

e i n c l u s e l a G a s t r i n a ( 1 4 , 1 3 6 , 1 3 8 ) , e j e r c i e n d o t o d a s e l l a s un

e f e c t o e s t i m u l a d o r s o b r e su l i b e r a c i é n ( 1 3 9 ) .

E s to s u g i e r e un d o b le p a p e l de l a SRIH a n i v e l p e r i f é r i c o ,

p o r u n a p a r t e a c t u a r é como s u s t a n c i a p a r a c r i n a a n i v e l -de l a s c é

l u l a s p a n c r e a t i c a s , y p o r o t r a como hormona p r o p ia m e n te d i c h a en

a q u e l l o s é r g a n o s s i t u a d o s a l r e d e d o r de l o s l u g a r e s de p r o d u c c i é n

de SRIH, e s t o e s , p a n c r e a s y c o n d u c to g a s t r o i n t e s t i n a l ( 1 1 5 ) .

R e s p e c to a e s t o é l t i m o s e h a p r o p u e s t o un a f u n c i é n de l a s

c é l u l a s D: l a SRIH c o n t r o l a r â l a a b s o r c i é n y u t i l i z a c i é n de l o s

n u t r i e n t e s a l c o n t r o l a r l o s p r o c e s o s que i n t e r v i e n e n en e s t e f e

némeno, d i r e c t a o i n d i r e c t a m e n t e , y a su v e z , e x i s t i r â un meca-

— 28 —

nismo de c o n t r o l p o r r e t r o a l i m e n t a c i é n de e s t o s mismos nu

t r i e n t e s y de l a s horm onas d i g e s t i v a s s o b r e l a SRIH, f a v o r e -

c ie n d o su a c c i é n de m anera que e l p r o c e s o g e n e r a l se p o d r f a

d e s c r i b i r como se d e t a l l a a c o n t i n u a c i é n . Se c o n s i d e r a r l a

p o r t a n t o a l a SRIH como un s e n s o r d e l " s t a t u s " n u t r i c i o n a l

(8 8 ) .

NUTRIENTES

HORMONAS GASTROINTESTINALES

SOMATOSTATINA

- S i s t e m a de r e t r o a l i m e n t a c i é n p r o p u e s t o en l a h o m e o s t a s i s

de l o s n u t r i e n t e s -

Se p i e n s a t a m b ié n que l a SRIH l o c a l i z a d a y p r o d u c i d a en e l

e s tém ago es capaz de r e g u l a r l a s e c r e c i é n a c i d a e s t o m a c a l m ed ian

t e un mecanismo de r e t r o a l i m e n t a c i é n de l a s i g u i e n t e m anera ;

tHCl f : , - - : ^ tSRIH ----------► G a s t r i n a i -------- ^ HCli

que se b a s a en e l hecho de que l a c é l u l a D p r o d u c t o r a de SRIH se

h a y a en f n t im o c o n t a c t e con l a s p r o d u c t o r a s de G a s t r i n a y con

l a s c é l u l a s p a r i é t a l e s s é c r é t e r a s de HCl ( 9 6 , 1 3 9 ) . Ademas, t o

d as a q u e l l a s hormonas g a s t r i c a s c a p a c e s de i n h i b i r l a s e c r e c i é n

de HCl ( V I P j G I P . , . ) son t a m b ié n c a p a c e s de e s t i m u l a r a l a SRIH.

De l a misma fo rm a , l a c é l u l a D p a n c r e é t i c a p a r e c e e s t a r

s o m e t i d a a una r e g u l a c i é n r e t r o a l i m e n t a d o r a p o r p a r t e d e l G lu -

— 29 —

c ag é n y l a I n s u l i n a , y a que ambas e s t i m u l a n su l i b e r a c i é n ( 1 4 ,8 7 ,

9 7 ) , e i n c l u s e l a p r o p i a SRIH p a r e c e c ap az de a u t o r r e g u l a r s e como

o c u r r e en p a r t e con l a I n s u l i n a ( 1 1 5 ) . P a r e c e e s t a r r e g u l a d a tam

b i é n p o r l a i n e r v a c i é n au ténom a d e l p a n c r e a s , a l i g u a l que l a s

c é l u l a s A y B.

En t é r m i n o s g é n é r a l e s , s e h a o b s e rv a d o que e l S i m p a t i c o y e l

P a r a s i m p a t i c o e j e r c e n u n a a c c i é n i n h i b i d o r a s o b r e l a l i b e r a c i é n

b a s a i de SRIH d e l p a n c r e a s en e s t u d i o s " i n v i t r o " ( 1 0 3 , 1 4 0 ) . Es

d e c i r , . e l c o n t r o l de l a s e c r e c i é n de SRIH e s t a l l e v a d o a cabo p o r

f a c t o r e s n e u r a l e s y e n d o c r i n e s .

Segén a lg u n o s a u t o r e s , l a e s t i m u l a c i é n c o l i n é r g i c a d e l pan

c r e a s p r o d u c e un d e s c e n s o en l a l i b e r a c i é n de SRIH p o r l a c é l u l a

D, a l i g u a l que l a e s t i m u l a c i é n a l f a - a d r e n é r g i c a ( 8 7 , 1 0 1 , 1 0 3 , 1 4 0 ) .

O t r o s , comunican un e f e c t o e s t i m u l a d o r de l a A c e t i l c o l i n a , j u n t o

con l a s v i a s b e t a - a d r e n é r g i c a s ( 1 4 , 9 7 , 1 0 0 ) . Como se h a o b se rv a d o

que l a SRIH a su vez es c ap az de i n h i b i r l a l i b e r a c i é n de A c e t i l

c o l i n a , s e h a p o s t u l a d o l a p o s i b i l i d a d de que e x i s t a un s i s t e m a de

r e t r o a l i m e n t a c i é n e n t r e n e u r o n a s c o l i n é r g i c a s i n t e s t i n a l e s y l a

c é l u l a D p a n c r e a t i c a ( 9 7 ) .

I g u a l m e n t e , e l GABA, cuya p r e s e n c i a se h a d e t e c t a d o en i n e r

v a c i o n e s p e r i f é r i c a s , p a r e c e i n h i b i r l a l i b e r a c i é n de e s t a hormona

d e l p a n c r e a s ( l 4 l ) . La N e u r o t e n s i n a , p é p t i d o de o r i g e n c e n t r a l y

p e r i f é r i c o , e j e r c e u n a a c c i é n d u a l , a c o n c e n t r a c i o n e s b a j a s l a e s

t i m u l a , a c o n c e n t r a c i o n e s a l t a s l a i n h i b e ( 1 0 2 ) .

La l o c a l i z a c i é n de o p i â c e o s en l a c é l u l a D p a n c r e a t i c a j u n t o

con l a SRIH, y e l e f e c t o de é s t o s s o b r e l a s e c r e c i é n e n d o c r i n a p a n

c r e a t i c a , h a c e n p e n s a r en l a p o s i b i l i d a d de una i n f l u e n c i a de e s t o s

- 30 -

p é p t i d o s , q u i z é s p a r a c r i n a m e n t e , s o b r e l a SRIH p a n c r e é t i c a ( 1 4 2 ) .

De h e c h o , l a b e t a - e n d o r f i n a e s c ap az de i n h i b i r " i n v i t r o " a l a

SRIH d e l p é n c r e a s , y l a m e t i o n i n a - e n c e f a l i n a a l a g é s t r i c a 1 39 ) .

Los cam bios que se p r o d u c e n en e l t e j i d o p a n c r e é t i c o p o r l a

m a n i p u l a c i é n d e l h i p o t é l a m o , h a n hecho p e n s a r en u n a i n f l u e n c i a

c e n t r a l m ed iad a p o r e l SNP o a l g é n mecanismo n e u ro h u m o r a l , s o b r e

e l i s l o t e de L a n g e r h a n s , i n c l u y e n d o l a c é l u l a D ( 1 4 3 , 1 4 4 ) ; l a

g l u c o p r i v a c i é n c e n t r a l i n d u c i d a p o r l a a d m i n i s t r a c i é n de 2 - d e s -

o x i g l u c o s a p r o d u c e un aumento de l a SRIH en p la s m a , o l a o b e s i d a d

de o r i g e n h i p o t a l é m i c o p ro d u c e un in c r e m e n t o en l a SRIH d e l pén

c r e a s , j u n t o con a l t e r a c i o n e s en l a s cvélu las D ( 1 4 3 , 1 4 5 ) .

3 . C a t e c o l a m i n a s y Hormona de C r e c i m i e n t o .

Hay u n a a b u n d a n te l i t e r a t u r a documentando e l e f e c t o de l a s

C a t e c o l a m i n a s c e r e b r a l e s s o b r e l a GH h i p o f i s a r i a . Lo p r im e r o que

se o b s e r v a e s l a e x i s t e n c i a de d i f e r e n c i a s e s p e c f f i c a s . Lo que

h a s t a a h o r a , y q u i z é s p o r t r a b a j a r f u n d a m e n ta lm e n te con r o e d o r e s ,

no s e h a o b s e r v a d o con l a SRIH.

En su m a y o r f a , l o s e s t u d i o s que se h an hecho s o b r e Pas p o -

s i b l e s r e l a c i o n e s e n t r e C a t e c o l a m i n a s (CA) y GH s u e l e n s e r de t i

po f a r m a c o l é g i c o . P o r e je m p lo , s e d e d u jo que l a s CA e s t a b a n i n v o -

l u c r a d a s en e l c o n t r o l de l a s e c r e c i é n de GH po rqu e l a a d m i n i s t r a

c i é n de d r o g a s como l a R e s e r p i n a o l a a l f a - m e t i l - p - t i r o s i n a (AMT),

a l a vez que p r o d u c f a n u n a d r é s t i c a d i s m i n u c i é n en e l c o n te n id o

c e r e b r a l de e s t a s am in as , p r o v o c a b a n un a c a f d a en l o s n i v e l e s b a

s a l e s p l a s m é t i c o s de GH, o t r a s l a e s t i m u l a c i é n de e s t a hormona

- 31 -

p o r d e t e r m i n a d a s zonas c e r e b r a l e s en l a r a t a ( 146- 1 4 9 ) . 0 b i e n ,

l a a d m i n i s t r a c i é n de L -d o p a , p r e c u r s o r b i o s i n t é t i c o , p r o d u c f a

u n a e l e v a c i é n de l a s CA c e n t r a l e s y de l a GH p l a s m é t i c a en e l

hom bre , mono y p e r r o ( 1 5 0 - 1 5 2 ) , Es d e c i r , p a r e c f a a p a r e n t e un a

i n f l u e n c i a de l a s CA s o b r e l a GH en t o d a s l a s e s p e c i e s e s t u d i a d a s .

E s t a i n f l u e n c i a p o s i t i v a c a t e c o l a m i n é r g i c a p a r e c e e s t a r me«

d i a d a en t o d a s l a s e s p e c i e s f u n d a m e n ta lm e n te p o r v i a s a l f a - a d r e -

n é r g i c a s ( 6 5 , 153- 1 5 5 ) , y a que se h a o b s e r v a d o que e l e f e c t o de

l a AMT se c o n t r a r r e s t a p o r l a a d m i n i s t r a c i é n d e l a l f a - a g o n i s t a

C l o n i d i n a ( 1 4 6 ) . E s t e mismo fé rm aco p o r s i s o l o p o t e n c i a l a l i

b e r a c i é n de GH, e f e c t o que se b l o q u e a p o r l a a d m i n i s t r a c i é n p o s

t e r i o r de un a l f a - a n t a g o n i s t a como l a P e n t o l a m i n a o l a P e n o x i b e n -

zam ina ( 1 5 1 , 1 5 6 - 1 5 9 ) .

P o r o t r a p a r t e , e l s u b s i s t e m a b e t a - a d r e n é r g i c o p a r e c e t e n e r

un e f e c t o n e g a t i v o s o b r e l a s e c r e c i é n de GH, t a m b ié n en l a mayo

r f a de l a s e s p e c i e s e s t u d i a d a s , a p e s a r de que I ç s d a t o s a l r e s

p e c t o son a lg o mas c o n f u s o s ( 6 5 , 1 5 3 , 1 5 5 ) . A s f , s e h a o b se rv a d o

un e f e c t o i n h i b i d o r s o b r e l a GH d e l b e t a - a g o n i s t a I s o p r o t e r e n o l

en e l hombre ( 6 5 ) ; s i n embargo en l a r a t a no p a r e c e t e n e r un e f e c

to c l a r o s o b r e l a s e c r e c i é n de e s t a hormona ( l 6 0 ) , a l i g u a l que

e l P r o p a n o l o l , b e t a - a g o n i s t a a l que se l e h a d e s c r i t o como i n h i

b i d o r de l a s e c r e c i é n p u l s a t i l de GH, como f a v o r e c e d o r de l a r e s

p u e s t a de l a GH a d i v e r s e s e s t f m u l o s f a r m a c o l é g i c o s en l a r a t a y

en e l hombre, e i n c l u s e t a m b ié n como c a r e n t e de e f e c t o a lgu n o

s o b r e e s t a hormona h i p o f i s a r i a ( 6 5 , 160- 162 ) .

El e f e c t o g l o b a l de l a NA s o b r e l a GH es c o m p le jo . Los d i -

- 32 -

f e r e n t e s s u b s i s t e m a s n o r a d r e n é r g i c o s i n f l u y e n s o b r e l a h i p é f i s i s

de fo rm a v a r i a d a , h a b i é n d o s e i n c l u s o de a c t u a c i o n e s d i s t i n t a s a

n i v e l i n t r a h i p o t a l é m i c o que a n i v e l de l a EM ( 1 5 7 ) . En e l hbmbre ,

l a a d m i n i s t r a c i é n de é c i d o F u s é r i c o , i n h i b i d o r de l a D A - b e t a - h i -

d r o x i l a s a , enz im a r e s p o n s a b l e de l a s f n t e s i s de NA a p a r t i r de l a

DA, p r o d u c e un aumento de l a GH, l o que h a b l a r f a en f a v o r de un

e f e c t o n e g a t i v o de l a NA ( 1 6 3 ) , m i e n t r a s que en l a r a t a l a admi

n i s t r a c i é n de D i s u l f i r a m , b l o q u e a n t e de l a a c t i v i d a d de l a misma

e n z im a , p r o d u c e l o c o n t r a r i o , un d ec rem e n to de l a GH ( I 6 4 ) . En e l

mono, s e h a comunicado un e f e c t o e s t i m u l a d o r de l a s e c r e c i é n de

GH t r a s e l i n c r e m e n t o de l a NA c e r e b r a l p o r l a a d m i n i s t r a c i é n de

un p r e c u r s o r , e l DOPS ( 1 5 1 ) , m i e n t r a s que l a i n f u s i é n i n t r a v e n o s a

de e s t e mismo n e u r o t r a n s m i s o r no t e n f a e f e c t o s s o b r e l a GH ( 1 6 5 ) ,

q u i z é s d e b id o a l a i n c a p a c i d a d de p a s a r l a b a r r e r a h e m a t o - e n c e f é -

l i c a y p o r l o t a n t o a c t u a r a n i v e l c e n t r a l .

S i e l p a p e l de l a s v i a s b e t a - a d r e n é r g i c a s no p a r e c e e s t a r

p e r f e c t amente e s t a b l e c i d o , e l de l a DA, c a t e c o l a m i n a mas a b u n d a n te

en e l h i p o t é l a m o , es aén mas c o n f u s o . En c u a n to a l a a c c i é n de e s

t e n e u r o t r a n s m i s o r en e s p e c i e s como e l hom bre , e l p e r r o y l a o v e -

j a , p a r e c e h a b e r u n i d a d de c r i t e r i o s en l a l i t e r a t u r a , e n c o n t r é n -

d o se un e f e c t o p o s i t i v o s o b r e l a s e c r e c i é n de GH t r a s l a a d m i n i s

t r a c i é n ' de a g o n i s t a s d o p a m i n é r g i c o s como l a A pom orf ina o e l CB-154

0 e l M e t i l f e n i d a t o ( 1 5 6 , 1 6 6 - 1 7 0 ) .

S i n embargo, p a r a e s p e c i e s como e l mono o l a r a t a , se han

comunicado to d o t i p o de i n f l u e n c i a s , p o s i t i v a s , n e g a t i v a s o i n e x i s

t e n c e s , t r a s l a a d m i n i s t r a c i é n de a g o n i s t a s y a n t a g o n i s t e s dopami

n é r g i c o s (6 5 ,1 4 6 - 1 4 8 ,1 5 1 , 153-155 , 1 58 ,1 65 , 171 , 1 7 2 ) .

- 33 -

O t r o s muchos n e u r o t r a n s m i s o r e s y n e u r o p é p t i d o s a f e c t a n a l a

s e c r e c i é n de GH de m anera d i v e r s a , y en l a m ay o r fa de l o s c a s o s ,

s i excep tuam os a l o s o p i é c e o s y a l VIP, c o n t r a d i c t o r i a ( 1 5 ^ , 1 7 3 ) .

P r o b a b l e m e n t e , e s t o s e d e b a a l a s d i f e r e n t e s a c c i o n e s de e s t a s

s u s t a n c i a s s e g é n se e s t u d i e n c e n t r a l o p e r i f é r i c a m e n t e . De c u a l

q u i e r fo rm a , su i n f l u e n c i a no e s t é b i e n e s t u d i a d a como en e l c aso

de l a s CA.

La m a y o r fa de l o s a u t o r e s e s t é n de a c u e rd o en que e l e f e c t o

de l o s d i v e r s o s n e u r o t r a n s m i s o r e s y n e u r o p é p t i d o s a f e c t a n l a f u n

c i é n h i p o f i s a r i a a t r a v é s de l o s f a c t o r e s h i p o t a l é m i c o s y no d i r e c -

t a m e n t e . E s t a é l t i m a p o s i b i l i d a d no se puede d e s c a r t a r y a que se

h a comprobado l a e x i s t e n c i a de t e r m i n a l e s n e r v i o s o s a n i v e l de l a

c a p a e x t e r n a de l a EM no s é l o de o r i g e n p e p t i d é r g i c o (LHRH, SRIH

y TRH), s i n o t a m b ié n d o p a m i n é r g i c o s , a lg u n o s n o r a d r e n é r g i c o s , op ié -

c e o s , g a b a é r g i c o s , c o l i n é r g i c o s y v a s o p r e s i n é r g i c o s ( 1 , 1 9 ) , y j u n

t o con e l hecho de que se han l o c a l i z a d o r e c e p t o r e s DA en l a h i -

p é f i s i s a n t e r i o r ( 1 7 4 ) , y que e s t a amina s e s e g r e g a a l a v a s c u l a -

r i z a c i é n p o r t a h i p o f i s a r i a en c a n t i d a d e s s u f i c i e n t e s como p a r a 1 1 e-

v a r a cabo u n a f u n c i é n f i s i o l é g i c a ( 1 7 5 ) , y que de hecho se h a y a

l o c a l i z a d o en e l i n t e r i o r de l a c é l u l a l a c t o t r o p a ( 176 ) , h a ce po

s i b l e que t e n g a e f e c t o s t a m b ié n a n i v e l h i p o f i s a r i o . También se

han l o c a l i z a d o r e c e p t o r e s b e t a - a d r e n é r g i c o s y d o p a m in é r g i c o s en

e l l é b u l o i n t e r m e d i o h i p o f i s a r i o en l a r a t a ( 1 7 7 ) .

En c o n t r a de to d o e s t o , y a p e s a r de que aén se m a n t i e n e l a

p o s i b i l i d a d de que e f e c t i v a m e n t e l a DA s e a e l f a c t o r i n h i b i d o r

de l a PRL ( P I P ) , s o b r e l a c é l u l a s o m a to t r o p a no se han l o c a l i z a d o

- 34 -

r e c e p t o r e s p a r a l a DA. Asimismo, se p o s t u l a que t o d a s l a s s u s

t a n c i a s l i b e r a d a s a n i v e l de l a EM a c t i î e n de n e u r o t r a n s m i s o r e s

y / o n e u ro m o d u la d o r e s a n i v e l de l o s t e r m i n a l e s a x é n i c o s d é l i a s

n e u r o n a s p r o d u c t o r a s de horm onas h i p o t a l a m i c a s , m e d i a n t e c o n t a c

t o s de t i p o a x o - a x é n i c o s .

De h e c h o , s e h a comprobado u n a d i s t r i b u c i é n a n a t é m i c a d i

f e r e n c i a l p a r a l a s t e r m i n a c i o n e s d o p a m i n é r g i c a s y de LHRH que

apoyan l a p o s i b i l i d a d de c o n t a c t o s e n t r e ambas, e i n c l u s o de

t o p o g r a f f a s semej e n t e s p a r a l a s t e r m i n a c i o n e s s o m a t o s t a t i n é r g i c a s

y d o p a m i n é r g i c a s ( 1 9 ) , a p e s a r de que en e s t e é l t i m o c aso no se

h an e v i d e n c i a d o b o t o n e s s i n é p t i c o s . .Ademas, y aunque s é l o en l a

t o r t u g a de momento ( 1 5 7 ) , s e h an e n c o n t r a d o r e c e p t o r e s p a r a l a

DA en l a EM ( p u b l i c a c i o n e s a n t e r i o r e s no c o n f i r m an e s t e h e c h o ,

a l menos en o t r a s e s p e c i e s ) .

O t ro d a to que apoya un p a p e l m e d ia d o r de l o s f a c t o r e s h i p o -

t a l a m i c o s es e l hecho de que l a a d m i n i s t r a c i é n i n t r a v e n o s a de

u n a s e r i e de n e u r o f a r m a c o s , e n t r e e l l o s m im é t i c o s c a t e c o l a m i n é r -

g i c o s , a f e c t a n l a l i b e r a c i é n de GH ( 1 5 2 , 1 5 7 , 1 7 8 ) , p r o b a b le m e n te

a c tu a n d o a n i v e l de l a EM a t r a v é s de u n a i n t e r a c c i é n a x o - a x é n i c a

con l a s n e u r o n a s p e p t i d é r g i c a s , y a que e s t a s s u s t a n c i a s no son

c a p a c e s de a t r a v e s a r l a b a r r e r a h e m a t o - e n c e f â l i c a que j u s t a m e n t e

em pieza a e s t a b l e c e r s e a n i v e l de l a ET4, n i t i e n e n e f e c t o a lguno

d i r e c t o s o b r e l a h i p é f i s i s como se h a p o d id o comprobar en c u l t i

vos de c é l u l a s h i p o f i s a r i a s .

La u l t i m a e v i d e n c i a a f a v o r de que l a s hormonas h i p o t a l a m i c a s

h i p o f i s i o t r o p a s a c t é a n como m e d i a d o r a s , es e l hecho de que se p r o -

d uzcan c l a r a s i n t e r a c c i o n e s e n t r e l o s s i s t e m a s p e p t i d é r g i c o s h i p o -

- 35 -

f i s i o t r o p o s y l a s d i s t i n t a s s u s t a n c i a s n e u r o a c t i v a s p r é s e n t e s

en e l h i p o t a l a m o ; e s d e c i r , l a o b s e r v a d a c a p a c i d a d de e s t a s mo-

l é c u l a s de i n f l u i r en l a s e c r e c i é n de SRIH, LHRH, o TRH. ’*

De c u a l q u i e r fo rm a , no s e puede d e s c a r t a r u n a a c t i v i d a d

h i p o f i s i o t r o p a de a l g u n a s s u s t a n c i a s c o n s i d e r a d a s h a s t a h a c e

poco como n e u r o t r a n s m i s o r e s , y a que de h e c h o , l o s f a c t o r e s h i p o

t a l é m i c o s h i p o f i s i o t r o p o s p a r e c e n c o m p o r t a r s e t a m b ié n como n e u

r o t r a n s m i s o r e s , y e s p o r l o que en l a a c t u a l i d a d l o s a u t o r e s

t i e n d e n a u n i f i c a r l o s c o n c e p to s de n e u r o t r a n s m i s i é n , neurom o-

d u l a c i é n y n e u r o t r a d u c c i é n , c o n s i d e r é n d o l o s como d i s t i n t o s a s -

p e c t o s de un mismo y é n i c o feném eno.

Se h a d e s c r i t o un r i tm o de s e c r e c i é n u l t r a d i a n o p a r a l a

GH en l a r a t a , con p u l s o s de s e c r e c i é n méxima de aprox im adam en te

t r è s h o r a s de d u r a c i é n ( 1 7 9 ) . E s t e r i tm o a p a r e c e y a en l a s r a t a s

p r e p é b e r e s , y t i e n e l i g e r a s d i f e r e n c i a s s e x u a l e s ( 1 8 0 ) , d i s m i -

nuyendo c u a n t i t a t i v a m e n t e en l a s r a t a s v i e j a s ( I 8 l ) .

E s t e c i c l o es i n d e p e n d i e n t e d e l de l u z - o s c u r i d a d ( 1 7 9 ) , p e ro

su s i n c r o n i z a c i é n h o r a r i a s i que depende de l a l u m i n o s i d a d ambien

t a i a t r a v é s , a l p a r e c e r , d e l n é c l e o A rc u a to h i p o t a l é m i c o ( 1 8 2 ) .

P a r e c e p o r t a n t o , c o n t r o l a d o p o r un " r e l o j b i o l é g i c o " s i t u a d o en

e l h i p o t é l a m o a n t e r i o r ( 1 8 3 ) , cuya a c t i v i d a d e s t a r f a m ed iada p o r

l a SRIH y f u n d a m e n ta lm e n te p o r e l GRF, a n i v e l h i p o t a l é m i c o (75 ,

1 84 ) .

A sf mismo, d i v e r s o s n e u r o t r a n s m i s o r e s , fu n d a m e n ta lm e n te l a s

CA, y en p a r t i c u l a r l a s v i a s a l f a - a d r e n é r g i c a s ( 1 4 6 ) , son c a p a c e s

de m o d u la r e s t e p a t r é n de s e c r e c i é n . O t r o s a u t o r e s han i n t e n t a d o

- 36 -

r e l a c i o n a x a l a DA con e s t e ' c i c l o , d a d a l a c i c l i c i d a d u l t r a d i a n a

que p r e s e n t a n l o s n i v e l e s de e s t a amina en e l h i p o t â l a m o , fenâmeno

que no o b s e r v a n en l a NA ( 1 8 6 ) ,

- R e l a c i o n e s p o s i b l e s e n t r e C a t e c o l a m i n a s , F a c t o r e s h i p o t a l â m i c o s

r e g u l a d o r e s de l a Hormona de C r e c i m i e n to y Hormona de C r e c i m i e n t o .

S i s t e m a N e rv io s o C e n t r a l C a te c o l a m in a s

CAH ip o tâ lam o G-RF ^ ■ » CA ^ ------------ ►SRIH

H i p â f i s i s

O B J E T O D E L T R A B A J O .

— 38 —

OBJETO DEL TRABAJO

Como p a r a e l r e s t o da l a s hormonas h i p o f i s a r i a s , se h a b l a

de un a r e a ( f u n c i o n a l y anat<5mica) h i p o f i s i o t r o p a h i p o t a l & m i c a

r e g u l a d o r a de l a Hormona de C r e c i m i e n t o ; a r e a que c o n t e n d r f a

dos f a c t o r e s h i p o t a l a m i c o s , e l y a d e s c u b i e r t o i n h i b i d o r de l a

s e c re c i (5 n b a s a l y e s t i m u l a d a de l a Hormona de C r e c i m i e n t o , y

e l r e c i é n y p a r c i a l m e n t e c a r a c t e r i z a d o y s e c u e n c i a d o ( 1 8 7 , 1 8 8 )

e s t i m u l a d o r de l a l i b e r a c i d n de e s t a hormona h i p o f i s a r i a , SRIF

y GRF r e s p e c t i v a m e n t e .

A p e s a r de e l l o , l a mayor p a r t e de l a in fo rm aci(5n que se

p o se e s o b r e l a r e g u l a c i d n p o r e l S i s t e m a N e r v io s o C e n t r a l de

l a s e c r e c i d n de Hormona de C r e c i m i e n to h a c e r e f e r e n c i a a l p a p e l

de l o s d i v e r s e s n e u r o t r a n s m i s o r e s ( g e n e r a l m e n t e de a m p l i a d i s -

t r i b u c i d n en e l S i s t e m a N e r v io s o ) en e l c o n t r o l de e s t a hormona

h i p o f i s a r i a , o m i t i ë n d o s e l a p r o b a b l e f u n c i d n m e d ia d o r a de ambos

f a c t o r e s h i p o t a l a m i c o s e n t r e l a s e s t r u c t u r a s s u p e r i o r e s d e l c e -

r e b r o y l a g l â n d ù l a h i p o f i s a r i a . S in embargo, t a l " om is id n" e r a

i n e v i t a b l e , h a b i d a c u e n t a que l a S o m a t o s t a t i n a h a s i d o c a r a c t e -

r i z a d a muy r e c i e n t e m e n t e , y que e l GRF aun pe rm anece s i n c a r a c -

t e r i z a r p o r c o m p le te .

G r a c i a s a l d e s a r r o l l o en l o s u l t i m e s anos de t ë c n i c a s c u a n -

t i t a t i v a s (RIA) y c u a l i t a t i v a s ( i n m u n o h i s t o q u f m ic a s f u n d a m e n t a l -

m en te) p a r a l a de terminaci<5n de l a S o m a t o s t a t i n a , se h a pod ido

s a b e r a lg o mas so b r e e l p a p e l m ed iad o r de e s t a neu rohorm ona e n t r e

e l S i s t e m a N e rv io s o C e n t r a l y l a h i p d f i s i s .

- 39 -

E l o b j e t o y p l a n t e a m i e n t o de e s t e e s t u d i o h a s i d o p r e c i s a -

mente e l i n t e n t e de p r o f u n d i z a r m£s en l a r e l a c i d n e n t r e l a s

e s t r u c t u r a s e x t r a - h i p o t a l â m i c a s , e l h i p o t^ l a m o y l a h i p d f i s i s ,

a t r a v ë s de l a s r e l a c i o n e s e n t r e l a s G a t e c e l a m in a s c e n t r a l e s

( n e u r o t r a n s m i s o r e s y a c l â s i c o s , con r u t a s i n t r a c e r e b r a l e s d e f i -

n i d a s ) , l a S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l â m i c a y l a Hormona de C r e c im ie n

t o h i p o f i s a r i a ( d e t e r m i n a d a é s t a corao n i v e l e s de hormona en s a n -

g r e p e r i f é r i c a ) .

M u l t i t u d de t r a b a j o s r e l a c i o n a n a l a f u n c i d n c a t e c o l a m i n ë r -

g i c a con l a s e c r e c i d n de Hormona de C r e c i m i e n to ( v e r I n t r o d u c c i d n ) ,

p e ro muy poco se s a b e t o d a v f a de l a r e l a c i d n e n t r e C a te c o l a m i n a s

y S o m a t o s t a t i n a , y de qué p a p e l , s i e f e c t i v a m e n t e t i e n e a lg u n o ,

puede e j e r c e r l a S o m a t o s t a t i n a en l a r e l a c i d n C a te c o l a m i n a s - Hor

mona de C r e c i m i e n t o . Ademas, c o n s i d e r â n d o s e l a S o m a t o s t a t i n a no

s(5lo un a hormona h i p o t a l a m i c a h i p o f i s i o t r o p a , s i n o muy p r o b a b l e -

mente t a m b ié n u n a s u s t a n c i a n e u ro m o d u la d o r a , o a l menos n e u r o a c -

t i v a a n i v e l e x t r a - h i p o t a l a m i c o , es muy p o s i b l e l a e x i s t e n c i a de

u n a i n t e r r e l a c i ( 5 n e n t r e l a s C a te c o la m in a s y l a S o m a t o s t a t i n a , c o -

mo se h a d e s c r i t o p a r a o t r o s n e u r o t r a n s m i s o r e s . De hechOj d i v e r s a s

p u b l i c a c i o n e s r e c i e n t e s s e h a l a n l a i n f l u e n c i a de l a S o m a t o s t a t i n a

de o r i g e n h i p o t a l â m i c o s o b r e l a N o r a d r e n a l i n a , l a Dopamina y o t r o s

n e u r o t r a n s m i s o r e s .

Heraos d i s e h a d o dos t i p o s de a p ro x im a c io n e s a l e s t u d i o de l a

r e l a c i d n C a te c o l a m i n a s - S o m a t o s t a t i n a . En l a p r i m e r a , heraos u t i -

l i z a d o u n a s e r i e de fa rm a c o s m o d i f i c a d o r e s de l a a c t i v i d a d c a t e -

c o l e m i n ë r g i c a ( y a s e a p o r a f e c t a r su m e tab o l i sm o o su a c t u a c i d n a

n i v e l de r e c e p t o r ) p a r a d e t e r m i n a r l o s p o s i b l e s e f e c t o s de e s t o s

— 40 —

cam bios s o b r e l a S o m a t o s t a t i n a en e l h i p o t â l a m o y l a Hormona de

C r e c i m i e n to en p l a s m a . En e l s e g u n d o , d a d a l a e x i s t e n c i a de un

c i c l o u l t r a d i a n o en l a l i b e r a c i d n de l a Hormona de C r e c i m i e n to

a l a s a n g r e y o t r o u l t r a d i a n o en l o s n i v e l e s h i p o t a l â n i c o s de

Dopamina d e s c r i t o s ambos en l a l i t e r a t u r a ( 1 7 9 , 1 8 6 ) , se estudic5

l a p o s i b i l i d a d de l a e x i s t e n c i a de un c o m p o r ta m ien to s i m i l a r en

n i v e l e s de S o m a t o s t a t i n a en e l h i p o t a l a m o , que f u e r a r e s p o n s a b l e

en p a r t e d e l o b s e r v a d o p a r a l a Hormona de C r e c i m i e n t o , como a l -

gunos a u t o r e s h a n p r o p u e s t o ( 1 8 4 ) , y que p u d i e r a v e n i r - i n f l u f d o

ta m b ië n en p a r t e p o r e l e x i s t a n t e de Dopamina.

P a r a e l l o se e s t u d i d e l c o n t e n i d o de C a t e c o l a m i n a s , Som atos

t a t i n a y Hormona de C r e c i m i e n t o a l o l a r g o de un c i c l o u l t r a d i a n o

comprend ido e n t r e 9 , 3 0 de l a mahana a 2 , 3 0 de l a t a r d e (como e l

d e s c r i t o p a r a l a Dopamina) , p a r a a s f i n t e n t a r e s t a b l e c e r r e l a c i o

n e s c a u s a l e s e n t r e l a s p o s i b l e s f l u c t u a c i o n e s h o r a r i a s de l o s dos

n e u r o t r a n s m i s o r e s , l a S o m a t o s t a t i n a y l a Hormona de C r e c i m i e n t o .

P a r a to d o e s t o , f u e n e c e s a r i o e l c o n t a r con u n a t é c n i c a de

c u a n t i f i c a c i d n de S o m a t o s t a t i n a en t e j i d o h i p o t a l â m i c o que f u e r a

f i a b l e , y p o r t a n t o se n e c e s i t d m o n te r un método de RIA de Soma

t o s t a t i n a cuyo d e s a r r o l l o t a m b ié n se d e t a l l a en l o s s i g u i e n t e s

c a p f t u l o s de e s t e t r a b a j o .

M A T E R I A L Y M E T O D O S .

- 42 -

MATERIAL Y METODOS

1. A n im a le s .

Se u t i l i z a n r a t a s W i s t a r a d u l t a s con un peso de 29446 g r . y

8 - 1 2 semanas de e d a d . Se s i t u a r o n en u na h a b i t a c i d n con i l u m i -

naci(5n c o n t r o l a d a (14 h o r a s l u z y 10 o s c u r i d a d ) y t e m p e r a t u r a

c o n s t a n t e (2 0 - 2 2 C ) . R e c i b i e r o n u n a d i e t a e s t a n d a r c o m p lé t a y

agua ”ad l i b i t u m ” . Desde e l p r i m e r mes de edad se l a s m anejd a s i -

duamente p a r a a c o s t u m b r a r l a s a l a m a n i p u l a c i d n humana de m anera

que en e l d f a d e l e x p e r im e n to no se p r o d u j e r a n i n t e r f e r e n c i a s

d e b i d a s a l e s t r e s s . P a r a l o s e x p e r i m e n t o s con d r o g a s se u t i l i z a -

r o n s i e m p re m achos , y p a r a l o s de r i t m o s u l t r a d i a n o s ambos s e x o s

i n d i s t i n t a m e n t e .

2. P a u t a e x p e r i m e n t a l .

Se r e a l i z a r o n dos t i p o s de p r o t o c o l e s b â s i c o s . En e l p r im e -

r o se e m p lea ro n a n im a l e s t r a t a d o s con d i v e r s a s d r o g a s n e u r o a c t i -

v a s y se d e t e r m i n d e l c o n t e n i d o de S o m a t o s t a t i n a en h i p o t â l a m o ,

de C a te c o l a m i n a s en c e r e b r o y de Hormona de C r e c i m i e n to en p l a s

ma. En e l se g u n d o , a n i m a l e s s o m e t id o s a c o n d i c i o n e s a m b i e n t a l e s

c o n s t a n t e s p e ro s i n manipulaci<5n p r e v i a a l g u n a . En e s t e caso se

determin<5 e l c o n t e n i d o h i p o t a l â m i c o de S o m a t o s t a t i n a y de C a te

c o la m in a s y de Hormona de C r e c i m i e n to en s a n g r e .

- 43 -

2 . 1 . A d m i n i s t r a c i â n de d i f e r e n t e s d r o g a s m o d i f i e a d o r a s d e l

m e tab o l i sm o v / o l a f u n c i â n c a t e c o l a m i n â r g i c a .

En t o d a s l a s e x p e r i e n c i a s l a s d r o g a s se i n y e c t a r o n i n t r a -

p e r i t o n e a l m e n t e en un volumen f i n a l de 1 m l . d i s u e l t a s en s u e -

ro s a l i n o (ClNa 0 ,9% ), e x c e p to e l D i s u l f i r a m y l a L -dopa que

se a d m i n i s t r a r o n como u n a s u s p e n s i o n en Twen 80 (Sigma L a b s . ,

S t . L o u i s , u s a ) : HgO d e s t i l a d a 1 : 9 . Cada g rupo t e n f a su p r o p i o

c o n t r o l formado p o r a n i m a l e s de lar .misma edad y p e so i n y e c t a d o s

con s u e r o s a l i n o t a n t a s v e c e s como se i n y e c t a r a n d r o g a s a l g r u

po de " t r a t a d o s ” .

Drogas m o d i f i c a d o r a s d e l m e tab o l i sm o de l a s C a t e c o l a m i n a s :

- E x p e r im e n to 1. A d m i n i s t r a c i O n de a l f a - m e t i l - p - t i r o s i n a m e t i l -

O s t e r ( AMT, Sigma L a b s . ) , 250 mg/kg de p eso c o r p o r a l , s a c r i f i -

c â n d o se a l o s a n im a l e s a l a s c u a t r o h o r a s d e s p u é s de l a i n y e c -

ciOn de l a d ro g a o s u e r o s a l i n o .

- E x p e r im e n to 2. A d m i n i s t r a c i â n de L -d op a ( L - 3 , 4 - d i h i d r o x i f e n i l -

a l a n i n a , Sigma L a b s . ) , 150 m g/kg , m a tân d o se a l a s t r è s h o r a s

de su a d m i n i s t r a c i â n .

- E x p e r im e n to 3. A d m i n i s t r a c i â n de D i s u l f i r a m ( D i e t i l t i o c a r b a m i l

d i s u l f a t o . Sigma L abs ) 400 mg/kg , matando c u a t r o h o r a s d e s p u â s .

- E x p e r im e n to 4. A d m i n i s t r a c i â n de D , L - t r e o - d i h i d r o x i f e n i l s e r i n a

(DOPS, Sigma L a b s . ) , 50 y 100 m g/kg , s a c r i f i c â n d o s e l o s anima

l e s un a h o r a d e s p u â s en ambos c a s o s .

- E x p e r im e n to 5. A d m i n i s t r a c i â n de D i s u l f i r a m + L -dopa a l a s m is -

raas d o s i s y a m e n c io n a d a s , i n y e c t â n d o s e l a L -d o p a t r è s h o r a s des-

p u âs d e l D i s u l f i r a m y m atând o se una h o r a mas t a r d e .

- E x p e r im e n to 6 . R e p e t i c i â n de l a e x p e r i e n c i a 5, d e ja n d o a c t u a r

- 44 -

en e s t e caso a l a L -dopa dos h o r a s , e s d e c i r , s e s a c r i f i c d a l o s

a n i m a l e s c in c o h o r a s d e s p u â s d e l D i s u l f i r a m y dos h o r a s t r a s l a

L—d o p a . 1»

Drogas m o d i f i c a d o r a s de l a f u n c i â n c a t e c o l a m i n â r g i c a ;

- E x p e r im e n to 7 . A d m i n i s t r a c i â n de AMT (misma d o s i s que en e l ex

p e r im e n to 1 ) 4 C l o n i d i n a HCl ( 2 , 6 - d i c l o r o - N - 2 - i m i d a z o l - i d i n i l -

i d e n b e n z a m in a , B S e h r i n g e r Sohn, A l e m a n i a ) , 300 y 500 p g / k g , de

mande a c t u a r a l a AMT t r è s h o r a s , t r a s l o c u a l se i n y e c t â l a

C l o n i d i n a , m a tân d o se a l o s 30-40 m in u to s d e s p u é s .

- E x p e r im e n to 8 . A d m i n i s t r a c i â n de C l o n i d i n a , 500 p g / k g , m a tân d o -

s e a l o s 3 0 - 4 0 m in u to s de l a i n y e c c i â n de l a d r o g a .

- E x p e r im e n to 9 . A d m i n i s t r a c i â n de AMT (misma d o s i s ) + A pom orf ina

HCl (S igma L a b s . ) , 300 p g /E g , con t i e m p o s de a d m i n i s t r a c i d n y

a c t u a c i d n i g u a l e s a l e x p e r im e n to 7 .

- E x p e r im e n to 10. A pom orf ina CLH, misma d o s i s , matando a l o s

3 0 -4 0 m i n u t o s .

- E x p e r im e n to 11. AMT (misma d o s i s ) + I s o p r o t e r e n o l ( 1 - ( 3 T 4^ -

- d i h i d r o x i f e n i l ) - 2 - i s o p r o p i l a m i n o e t a n o l , Sigma L a b s . ) , 2 y

3 mg/Kg, s i g u i e n d o l a p a u t a d e l e x p e r im e n to 7 .

- E x p e r im e n to 12 . I s o p r o t e r e n o l 3 mg/Kg, matando a l o s 30-40

m i n u t o s .

- E x p e r im e n to 13. F e n t o l a m i n a ( 2 - ( ( N - ( m - h i d r o x i f e n i l ) - p - t o l u i -

d i n o ) - m e t i l - ) 2 - i m i d a z o l i n a , " R e g i t i n a " de C ib a - G e ig y , S u i z a ) ,

5 mg/Kg, s a c r i f i c a n d o a l o s 30-45 m i n u t o s .

- E x p e r im e n to 14. P r o p a n o l o l ( i s o p r o p i l a m i n o 3 - ( n a f t i l o x i ) p r o -

p a n o l - 2 , " S u m i a l ” de I c i - F a r r a a , E s p a h a ) , 2 , 5 mg/Kg, matando a

l o s 30-45 m i n u t o s .

- 45 -

Todas e s t a s d r o g a s a c t u a n a d i s t i n t o s n i v e l e s de l a r u t a b i o -

s i n t â t i c a i n t r a n e u r o n a l de l a s C a t e c o l a m i n a s , m o d i f i c â n d o l a ; o

b i e n a n i v e l de r e c e p t o r e s p r e - y p o s t s i n â p t i c o s de l a Dopamina y

N o r a d r e n a l i n a , a l t e r a n d o e n t o n c e s l a a c t i v i d a d d e l n e u r o t r a n s m i s o r .

Los p u n t o s de a c t u a c i â n de t o d a s e l l a s se e s p e c i f i c a n en e l e s q u e -

ma de l a p a g i n a s i g u i e n t e , a l i g u a l que su modo de a c c i d n .

2 . 2 . E s t u d i o d e l c o n t e n i d o de S o m a t o s t a t i n a y C a t e c o l a m i n a s h i n o -

t a l â m i c a s y Hormona de C r e c i m i e n to p l a s m â t i c a a l o l a r g o de

un c i c l o u l t r a d i a n o .

P a r a e l l o se s a c r i f i c a r o n l o s a n im a l e s a t i e m p o s f i j o s con

i n t e r v a l o s de 1 /2 h o r a d e sd e l a s 9 , 0 0 h . de l a mahana h a s t a l a s

3 ,0 0 h . de l a t a r d e . Se r e a l i z â en d i s t i n t o s d f a s a l s e r un nu

méro de r a t a s dem asiado g r a n d e p a r a h a c e r l o en uno s o l o . De e s t a

m an e ra , l o s v a l o r e s m edios o b t e n i d o s p a r a c a d a t ie m p o p r o v i e n e n

de r a t a s s a c r i f i c a d a s a l a misma h o r a p e ro en d i s t i n t o s d f a s ,

t o d o s e l l o s d e l mismo p e r i o d o e s t a c i o n a l d e l aho (un mes a p r o x i -

madamente, en p r i m a v e r a ) . Los a n im a l e s e s t a b a n s o m e t i d o s a i d â n -

t i c a s c o n d i c i o n e s a m b i e n t a l e s y m a n i p u l a c i â n . F u e r o n s a c r i f i c a -

dos en una h a b i t a c i â n a p a r t é y l o mas r â p i d a m e n t e p o s i b l e . A

t o d o s se l e s e x t r a j o e l h i p o t â l a m o y se r e c o g i â l a s a n g r e d e l

t r o n c o .

— 46 —

N iv e l de a c t u a c i d n de l o s f a rm a co s empleados en l a r u t a

b i o s i t â t i c a de l a s C a t e c o l a m i n a s . -

TIROSINA

L-dopa

" T i r o s i n a h i d r o x i l a s a " ^f .

AMT

L-DOPA( 3 , 4- d i h i d r o x i f e n i l a l a n i n a )

"MAO"

"Dopa d e s c a r b o x i l a s a "

DO PAMINA--------------------------------------

( 3 , 4- d i h i d r o x i f e n i l e t i l a m i n a )O '

DOPS

^ ’MAO"

"Dopamina b e t a - h i d r o x i l a s a "

-NORADRENALINA( 3 , 4- d i h i d r o x i f e n i l e t a n o l a m i n a )

.Apomorfina

D i s u l f i r a m

^ C l o n i d i n a ^

^ F e n t o l a m i n a ^

^ I s o p r o t e r e n o l ^ P r o p a n o l o l ^

a . Enzima l i m i t a n t e de l a s e c u e n c i a b i o s i n t â t i c a

b. I n h i b i d o r de l a a c t i v i d a d de l a T i r o s i n a h i d r o x i l a s a

c. P r e c u r s o r de l a b i o s f n t e s i s de C a te c o l a m i n a s

d. A g o n i s t a d o p a m in â r g ic o

e . I n h i b i d o r de l a a c t i v i d a d de l a Dopamina b e t a - h i d r o x i l a s a

f . P r e c u r s o r d i r e c t o de l a N o r a d r e n a l i n a p o r d e s c a r b o x i l a c i â n

g. A g o n i s t a a l f a - a d r e n â r g i c o

h. A n t a g o n i s t a a l f a - a d r e n é r g i c o

i . A g o n i s t a b e t a - a d r e n â r g i c o

j . A n t a g o n i s t a b e t a - a d r n é r g i c o

- 47 -

3 . P r o c e s a d o de l a s m u e s t r a s de t e . i i d o h i p o t a l â m i c o p a r a

d e t e r m i n a r e l c o n t e n i d o de S o m a t o s t a t i n a .

Los a n i m a l e s f u e r o n s a c r i f i c a d o s en t o d o s l o s e x p e r i m e n t o s

m e d i a n t e d e c a p i t a c i â n en g u i l l o t i n a ( H a r v a r d A p p . , USA). A con

t i n u a t i o n se a b r iO l a c a j a c r a n e a n a y se e x t r a j o e l c e r e b r o ,

p r e v i a r o t u r a de l o s n e r v i o s O p t i c o s . E l t e j i d o h i p o t a l â m i c o se

se p a rO d e l r e s t o con u n a s p i n z a s de m i c r o c i r u j f a s i g u i e n d o unos

l i m i t e s p r e c i s o s : r o s t r a l m e n t e , e l q u iasm a O p t i c o ; c a u d a lm e n t e ,

l o s c u e r p o s m a m i l a r e s ; l a t e r a l m e n t e , l o s s u r c o s h i p o t a l â m i c o s ,

y con u n a p r o f u n d i d a d de ap rox im adam en te 1 mm. I m m é d ia tamente

s e congelO l a m u e s t r a en Ng I f q u i d o . Toda l a o p e r a c i O n , de sd e l a

d e c a p i t a c i O n h a s t a l a c o n g e l a c iO n , durO 1 m inu to con e l f i n de

m i n i m i z a r l a s a l t e r a c i o n e s p o s tm o r te m . E l t e j i d o c o n g e la d o se

homogeneizO manuaime n t e en t r è s p a s o s con 1 ,5 ml de Acido A c â t i c o

2 N y se c a l e n t â en bano de agua en e b u l l i c i O n d u r a n t e 10 m in u to s

p a r a e l i m i n a r l a a c t i v i d a d de p r o t e a s a s . A c o n t i n u a c i O n se r e p a r

t i t e l volumen en dos t u b o s , 0 , 5 y 1 ml r e s p e c t i v a m e n t e , y se

c 4 n g e l â a - 2 0 G, p e rm a n ec ie n d o a s i g u a r d a d o s . Las m u e s t r a s de

0 , 5 ml se l i o f i l i z a r o n ( V i r t i s C o . , USA) y r e c o n s t i t u y e r o n con

1 ml de tampOn F o s f a t o s â d i c o s a l i n o 0 ,01 M - EDTA 0 ,0 2 5 N c o n t e -

n i e n d o Albumina b o v i n a (BSA, F r a c c i O n V de Cohen, Sigma L a b s . ) a l

1% y m e r t i o l a t o a l 0,01% pH=7,6 . A n te s de su d e t e r m i n a c i â n p o r

r a d io in m u n o e n s a y o l a s m u e s t r a s se d i l u y e r o n 1 :1 0 y 1 : 2 0 ( v / v ) en

e l tam pân de e n s a y o . Las m u e s t r a s de 1 ml se u t i l i z a r o n p a r a cuan-

t i f i c a c i â n de p r o t e f n a s p o r c o l o r i m e t r f a s i g u i e n d o e l mâtodo de

Lowry (1 89 ) y como r é s e r v a e v e n t u a l .

— 48 —

4 . D e te rm in a c iO n de S o m a t o s t a t i n a p o r R a d io in m u n o e n s a y o .

Al s e r l a S o m a t o s t a t i n a u n a hormona de r e c i e n t e a i s l a m i e n t o

y s f n t e s i s en e l l a b o r a t o r i o , l a t O c n i c a de v a l o r a c i O n c u a n t i t a -

t i v a p o r r a d io in m u n o e n s a y o (RIA) no e s t a b a p e r f e c t a m e n t e e s t a -

b l e c i d a , y p o r l o t a n t o f u e n e c e s a r i a u n a p u e s t a a p u n to d e l mO-

t o d o , que d e s c r i b i m o s a c o n t i n u a c i O n .

4 . 1 . l o d a c iO n de S o m a t o s t a t i n a .

Se u t i l i z O hormona s i n t O t i c a N - t i r o s i n - s o m a t o s t a t i n a donada

p o r e l Dr. A. S c h a l l y (Nueva O r l e a n s , USA). E l p r o c e d i m i e n t o u t i --i p c

l i z a d o p a r a l a i n t r o d u c c i O n de a tomos r a d i a c t i v o s de I en e l

r e s i d u e t i r o s i l de l a m olO cula s i n t O t i c a ( l a hormona n a t u r a l no

c o n t i e n e n ing i ln r e s i d u e de t i r o s i n a ) f u e e l denominado "mOtodo

e n z i m a t i c o de l a L a c t o p e r o x i d a s a " ( 1 9 0 ) , con a l g u n a s m o d i f i c a c i o -

n e s ( 1 9 1 ) .

La r e a c c i O n de io d a c iO n se r e a l i z O a n a d ie n d o l o s s i g u i e n t e s

r é a c t i v é s en un tu b e de ensayo (12x75 mm) p o r e s t e o r d e n :

- 20 p i de A c e t a t e sOdico 0 , 4 M pH=5,6

- 5 p i de N - t i r - s o m a t o s t a t i n a (1 p g / p l en Acido A c â t i c o 2 N)

- 10 p i de s o lu c iO n de L a c t o p e r o x i d a s a (S igma L a b s . , 10 n g / p l en

A c e t a t e sOdico 0 ,1 M p H = 5 ,6 ) .1 P R

- 0 , 5 mCi de INa (Amersham, I n g l a t e r r a ) .

- 5 p i de HgOg d i l u f d a 1 :15x10^ ( v / v ) en H^O d e s t i l a d a

- Se i n c u b a l a m e z c la 10 m in u to s a t e m p e r a t u r a am b ien te

- 5 p i de l a misma s o lu c iO n de H2O2

- Se i n c u b a o t r o s 10 m in u to s

— 49 —

A c o n t i n u a c i â n se t r a n s f i e r e l a m e z c la de r e a c c i â n a una

columna (1x25 cm) p r e p a r a d a con c a r b o x i m e t i l c e l u l o s a (CM 22,

Whatman L td . I n g l a t e r r a ) p a r a c r o m a t o g r a f f a de cambio i â n f p o .

De e s t a m an e ra se s é p a r a l a hormona m arc ad a r a d i a c t i v a m e n t e s i n

d e t e r i o r a r de l o s p r o d u c t o s de l a r e a c c i â n d e t e r i o r a d o s p o r e x -

c e s i v a o x i d a c i â n y d e l I g l i b r e que h a y a quedado s i n r e a c c i o n a r .

4 . 1 . 1 . P u r i f i c a c i â n de l a hoimona m a r c a d a .

La r é s i n a c a m b ia d o ra de i â n se é q u i l i b r a con tampân A c e ta to

Amânico 2 mM pH = 4 ,6 y se s a t u r a con BSA a l 3% en e l mismo tam

pân p a r a e v i t a r l a a d s o r c i â n i n e s p e c l f i c a de l a hormona a l a s

p a r e d e s de l a co lumna ( 1 9 2 ) .

Una v e z p u e s t a l a m e z c la en e l f r e n t e de l a co lum na, e l I 2

l i b r e se e lu y e con e l tampân m enc ion ad o , r e c o g i â n d o s e un volumen

de 10-15 m l . A c o n t i n u a c i â n , l a hormona m a rc a d a se e lu y e con Ace

t a t o Amânico 0 ,1 5 M pH = 4 ,6 r e c o g i â n d o s e 40 f r a c c i o n e s , a p r o x i

madamente , de 1 ml en un c o l e c t o r de f r a c c i o n e s G i l s o n 1AMTDC.

De c a d a f r a c c i â n d e l e l u a t o se toman 10 p l que se c u e n t a n

en un c o n t a d o r Gamma de c e n t e l l e o ( P a c k a r d , USA) d u ran te ^ 0 ,1 mi

n u t e s . E l p e r f i l de e l u c i â n a s i o b t e n i d o se e x p r e s a g r â f i c a m e n t e

e n f r e n t a n d o e l volumen de e l u c i â n con l a r a d i a c t i v i d a d de cada

f r a c c i â n e x p r e s a d a como c u e n t a s / 0 , 1 m in u t o s .

4 . 1 . 2 . C r i t e r i o de p u r e z a de l a hormona m a r c a d a .

E x i s t e n v a r i e s m âtodos p a r a d e t e r m i n a r l a p u r e z a de l a h o r

mona m a rc a d a . Hemos u t i l i z a d o e l denominado " i n m u n o l â g i c o " , que

- 50 -

c o n s i s t e en h a c e r u n a p r u e b a de u n i â n maxima e s p e c f f i c a e i n e s -

p e c f f i c a a l a n t i c u e r p o , de c a d a u n a de l a s f r a c c i o n e s de l a pu -

r i f i c a c i â n c r o m a t o g r â f i c a . P a r a e l l o , se s i g u i â e l s i g u i e n t e

p r o t o c o l e de t r a b a j o ;

- En un t u b e de e n say o se pone 0 ,1 ml de hormona m arcada p r o c é

d a n t e de c a d a f r a c c i â n ( c o n t e n i e n d o aprox im adam ente 10^ C .p .m . )

4 0 ,1 ml d e l a n t i c u e r p o a n t i - s o m a t o s t a t i n a ( a un a c o n c e n t r a -

c i â n f i n a l de 1 / 28x10^) 4 0 , 5 ml de tampân EDTA 0 ,0 5 M - F o s

f a t o s â d i c o s a l i n o 0 ,01 M c o n t e n i e n d o BSA a l 1% y a z i d a s â d i c a

a l 0 ,1%, pH= 7 , 6 . Se i n c u b a a 4®C/24 h .

- Se ahade 1 ml de c a r b â n a c t i v a d o ( c h a r c o a l . Sigma L a b s . ) -

d e x t r a n o T70 10:1 ( p / p ) d i l u f d o a l 0,25% en tampân F o s f a t o

s â d i c o s a l i n o 0 ,01 M pH= 7 , 6 a g i t â n d o s e e in cu band o a 4*0/40

m i n u t o s . A c o n t i n u a c i â n se c e n t r i f u g a a 1000 x g / l 5 m in u to s /4 * C

( S e r v a l , DuPont I n s t . , USA).

- Se d e c a n t a e l s o b r e n a d a n t e y s e c u e n t a e l p r e c i p i t a d o en e l

c o n t a d o r gamma d u r a n t e 1 m i n u t e .

P a r a e s t u d i a r l a u n i â n i n e s p e c f f i c a de l a hormona m arcada

a l c a r b â n p r é c i p i t a n t e , se p u s i e r o n t u b o s en p a r a l e l o a l o s a n -

t e r i o r e s , en donde en v e z de a n t i c u e r p o se puso 0 ,1 ml de tampon

de e n s a y o . E s t a u n i â n i n e s p e c f f i c a o " r a d i a c t i v i d a d i n e s p e c f f i c a "

e s mayor c u a n to mayor e s l a d e g r a d a c i â n de l a hormona m arc ad a .

Por t a n t o l a p u r e z a ho rm ona l v e n d r a e x p r e s a d a en f u n c i â n d i r e c t a

a l p o r c e n t a j e de c o m p le jo hormona m a r c a d a - a n t i c u e r p o fo rm ad o , y

en f u n c i â n i n v e r s a a l a r a d i a c t i v i d a d i n e s p e c f f i c a h a l l a d a p a r a

c a d a f r a c c i â n , l a c u a l h a b r â que r e s t a r de l o s t u b o s que c o n t i e n e n

a n t i c u e r p o p a r a p o d e r d e t e r m i n a r e l p o r c e n t a j e de u n i â n maxima a l

- 51 -

a n t i c u e r p o , f r a c c i â n que se u t i l i z a r â en e l RIA como hormona

m arc ad a en b u e n a s c o n d i c i o n e s i n m u n o l â g i c a s .

La u n i â n e s p e c f f i c a de l a hormona m arc ad a se e x p r e s a en

p o r c e n t a j e en r e l a c i â n a l a r a d i a c t i v i d a d i n i c i a l i n t r o d u c i d a

( t u b o s de " c u e n t a s t o t a l e s " , c o n t e n i e n d o s â l o tampân de e n s a

yo y hormona m a r c a d a ) .

4 . 1 . 3 . A c t i v i d a d e s p e c f f i c a de l a hormona m a r c a d a .

E l f n d i c e de l a e f i c a c i a de l a r e a c c i â n de i o d a c i â n l o da1 P Re l p o r c e n t a j e de u t i l i z a c i â n d e l ^ I , que se c a l c u l a p o r :

r a d i a c t i v i d a d "p" ^ ^qq

r a d i a c t i v i d a d " t "

- r a d i a c t i v i d a d " p " : e x p r e s a d a en " c u e n t a s p o r m inu to" ( c . p . m . ) ,

e s a q u e l l a c o n t e n i d a en e l p i c o d e l p e r f i l

de e l u c i â n c r o m a t o g r â f i c o y que c o n t i e n e l a

hormona m arc ad a de mayor p u r e z a i n m u n o l â g i c a .

- r a d i a c t i v i d a d " t " : e x p r e s a d a en c . p . m . , es a q u e l l a u t i l i z a d a en

e l t o t a l de l a r e a c c i â n , d e s p r e c i a n d o l a que

s e h a y a p e r d i d o en l o s u t e n s i l i o s empleados

( p i p e t a s , c o l u m n a s . . . ) , que s i e m p re f u e me

n e r d e l 10%.

E l io d o i n c o r p o r a d o a l a m o l â c u l a ho rm o n a l v i e n e dado p o r l a

A c t i v i d a d E s p e c f f i c a de l a hormona m arc ad a , que se c a l c u l a p o r

l o s p a s o s s i g u i e n t e s :

c . p . m . " p " / E = d .p .m .

- 52 -

donde E e s " e f i c a c i a de c o n t a j e " d e l c o n t a d o r gamma u t i l i z a d o ,

que en n u e s t r o c a so f u e de 0 , 7 ; y d .p . m . son " d e s i n t e g r a c i o n e s

p o r m i n u t o " , u n i d a d e s que son t r a n s f o r m a b l e s d i r e c t a m e n t e en

C u r i o s a t r a v â s de l a s i g u i e n t e r e l a c i â n :

d . p . m . " p " / d . p . m . ( 1 C u r i o ) x 1 C u r io = r a d i a c t i v i d a d en C u r i o sde l a hormona m arcad a

C o n o c id a l a c a n t i d a d de r a d i a c t i v i d a d que h ay en e l p i c o

c o r r e s p o n d i e n t e a l a hormona m arc ad a en b u e n a s c o n d i c i o n e s i n

m u n o lâ g i c a s y s a b i e n d o l a c a n t i d a d de hormona que se h a e m p lea -

do p a r a l a r e a c c i â n de i o d a c i â n , a p l i c a m o s l a f â r m u l a de l a Ac

t i v i d a d E s p e c f f i c a :

A.E. = U n id ad es de r a d i a c t i v i d a d / U n id ad es de hormona

que en n u e s t r o c aso v e n d r a d a d a en pC i / / ig de horm ona.

4 . 2 . T i t u l a c i â n de l o s A n t i c u e r n o s .

Los dos a n t i c u e r p o s a n t i - S o m a t o s t a t i n a e m p le a d o s , "Ab 6"

o b t e n i d o en n u e s t r o l a b o r a t o r i o a p a r t i r de c o n e j o s (193) y e l

p r o c é d a n t e de Immuno N u c l e a r Corp . (USA) "Ab M", f u e r o n e n s a y a -

dos a d i f e r e n t e s c o n c e n t r a c i o n e s p a r a d e t e r m i n a r e l t f t u - l o i d e a l

a u t i l i z a r en e l RIA en t â r m i n o s de maxima s e n s i b i l i d a d d e l mâ

t o d o . Con l o s p o r c e n t a j e s de u n i â n o b t e n i d o s p a r a l a s d i s t i n t a s

c o n c e n t r a c i o n e s de a n t i c u e r p o e m p le a d a s , se o b t i e n e n l a s denomi-

n a d a s " c u r v a s de t i t u l a c i â n " d e l a n t i c u e r p o .

- 53 -

4 . 3 . C urva P a t r â n .

E l r a n g o de c o n c e n t r a c i o n e s u t i l i z a d o como c u r v a p a t r â n

e s de 5 .1 2 0 a 10 p g / m l . Como hormona de r e f e r e n c i a se empleâ

S o m a t o s t a t i n a c f c l i c a s i n t â t i c a do nada p o r e l Dr. D. Coy (New

O r l e a n s ) a lm ac en a d a en u n a s o l u c i â n de 1 mg/ml en Acido Acâ

t i c o 2 N a 4*C. Los d i s t i n t o s p u n t o s de l a c u r v a p a t r â n se

o b t i e n e n p o r d i l u c i â n de e s t a s o l u c i â n en tampân EDTA 0 ,0 5 M

con BSA a l 1% pH» 7 , 4 .

4 . 4 . Mâtodo de RIA.

E l p r o t o c o l e de RIA se r e a l i z a s e g ân se d e t a l l a en l a

T a b l a I I . En c ad a e n s a y o , y j u n t o con l a s d i s t i n t a s c o n c e n t r a

c i o n e s de l a c u r v a p a t r â n y l a s m u e s t r a s a v a l o r a r , se ponen

t u b o s de " c u e n t a s t o t a l e s " con 0 , 6 ml de tampân de e nsayo

( F o s f a t o s â d i c o s a l i n o 0 ,01 M - EDTA 0 ,0 5 M - BSA 1%, pH- 7 , 4 )

y 0 ,1 ml de hormona m a rc a d a , mas o t r o s t u b o s de " r a d i a c t i v i d a d

i n e s p e c f f i c a " c o n te n i e n d o t o d o s l o s r é a c t i v é s d e l ensayo menos

e l a n t i c u e r p o . Por u l t i m e , o t r o s t u b o s " b l a n c o " s i n hormona

f r f a que c o m p i t a con l a m arc ad a y que p o r t a n t o nos i n d i c a r â

l a maxima u n i â n de l a hormona m arc ad a a l a n t i c u e r p o p o s i b l e en

l a s c o n d i c i o n e s de r e a c c i â n u t i l i z a d a s .

T r a s l a p r e c i p i t a c i â n con c a r b â n a c t i v a d o - d e x t r a n o , se cen

t r i f u g a a 3 .5 0 0 rpm/15 min . ( S e r v a l , DuPont I n s . , USA) a 4*0 y

se d e c a n t a e l s o b r e n a d a n t e , c o n tâ n d o s e e l p r e c i p i t a d o en e l con

t a d o r gamma d u r a n t e 1 minute,.

- 54 -

T a b l a I I . Esquema d e l p r o t o c o l e d e l RIA de S o m a t o s t a t i n a .

No. Tube C o n te n id o Tampân de e nsay o

C urvap a t r â n

Ab H^ ''Carbân

A B C D

1-3 C u e n ta st o t a l e s

0 , 6 ml - - 0 ,1 Çll -

4 -6 R a d i a c t i v i d a di n e s p e c f f i c a

0 , 5 ml - - II 1 ml

7 -9 B lan co 0 , 4 ml - 0 ,1 ml II n

10-12 Punto 1 ( 5 .1 2 0 p g /m l) 0 , 3 ml 0 ,1 ml II II II

13-45 Punto 2 H II II II II

40 ,41 C o n t r o lI n t e r e n s a y o ^

II (M)tII II II

4 2 ,4 3 M u e s t r a p ro b le m a 1

II II II II II

a . C o n s i s t a n t e en u n a m e z c la de h i p o t â l a m o sb . 0 ,1 ml de m u e s t r a en l u g a r de l o s p u n t o s de l a c u r v a p a t r â n

Tiempos de i n c u b a c i â n : A-B;24 h . / 4 * C ; 0 :4 8 h . / 4 * C ; D : 4 0 m i n . / 4 * C

Ab- A n t i c u e r p o

H - Hormona m arcada

- 55 -

4 . 5 . C â l c u l o de l o s r e s u l t a d o s .

Comparando l a s c . p . m . m éd ia s de l o s t u b o s B lanco con l a s

de l o s de C u e n ta s t o t a l e s o b ten d re m o s e l p o r c e n t a j e de u n i â h

de l a hormona m arcad a a l a n t i c u e r p o , que tomaremos como p o r

c e n t a j e mâximo o 100% de u n i â n ( 1 9 4 ) .

Los p u n t o s de l a c u r v a p a t r â n se h a l l a n a p l i c a n d o l a s i

g u i e n t e f â r m u l a :

( I ) B - RI X 100

Bo- RI

B- c . p . m . m éd ia s de c a d a pun to p a t r â n .

R I - r a d i a c t i v i d a d i n e s p e c f f i c a .

B^- c . p . m . m éd ias de l o s p u n t o s b l a n c o .

Con l o s v a l o r e s p e r c e n t u a l e s o b t e n i d o s se c o n s t r u y e l a c u r

v a p a t r â n e n f r e n t â n d o l o s a l a s d i f e r e n t e s c o n c e n t t r a c i o n e s de

hormona f r f a que se p u s i e r o n , en c u a n t i f i c a c i â n l o g a r f t m i c a ,

o b t e n i â n d o s e a s f una r e p r e s e n t a c i â n " s e m i - l o g a r f t m i c a " . Se p u e -

den o b t e n e r r e p r e s e n t a c i o n e s l i n e a l e s de l a c u r v a p a t r â n a p l i

cando e l l la m ad o s i s t e m a " l o g i t - l o g " , donde:

L o g i t B/Bg = I n B/B^

I - B /B q

P a r a h a l l a r l a c o n c e n t r a c i â n de hormona en c ad a m u e s t r a

p ro b le m a se s u s t i t u y e en I l a B p o r l a s c . p . m . m édias de l o s

d u p l i c a d o s de c ad a m u e s t r a , l e y â n d o s e e l v a l o r p e r c e n t u a l ob

t e n i d o en l a c u r v a p a t r â n .

- 56 -

4 . 6 . C o n t r o l de c a l i d a d d e l RIA.

E x i s t e n u n a s e r i e de p a r a m é t r é s que d e f i n e n l a v a l i d e z

d e l mâtodo de RIA ( 1 9 5 ) . E l p r i m e r o , S e n s i b i l i d a d , se e n t i e h -

de como l a minima d o s i s d e t e c t a b l e p o r e l m âtodo . P a r a e s t a -

b l e c e r l a se pueden u t i l i z a r d i v e r s e s m â to d o s . En n u e s t r o c a so

comparâmes l o s v a l o r e s de l o s p u n t o s mas b a j o s de l a c u r v a

p a t r â n con l o s v a l o r e s B l a n c o , a p l i c a n d o un t e s t de s i g n i f i -

c a n c i a e s t a d f s t i c a .

E l s e g u n d o , denominado R e p r o d u c i b i l i d a d o P r e c i s i â n , ,,

v i e n e d e f i n i d a p o r e l c o e f i c i e n t e de v a r i a c i â n :

D e s v i a c i â n e s t a n d a r / Media x 100 = %C.V.

P a r a d e l i m i t a r l o , se emplean dos t i p o s de c o e f i c i e n t e s

de v a r i a c i â n ; e l " i n t e r - e n s a y o " , que s e r a a q u e l que se e n c u e n -

t r e p a r a un a misma m u e s t r a l e f d a en d i s t i n t o s e n s a y o s , y e l

" i n t r a - e n s a y o " , que v e n d r a dado p o r e l c o e f i c i e n t e de v a r i a

c i â n e n c o n t r a d o p a r a u n a misma m u e s t r a l e f d a en e l mismo e n s a

yo una s e r i e de v e c e s ( en n u e s t r o c aso medimos l a m u e s t r a en e l

mismo ensayo d i e z v e c e s ) .

P a r a d e t e r m i n a r l a v a r i a b i l i d a d d e b i d a a l a d i l u c i â i r de

l a s m u e s t r a s , se d i l u y e un a m u e s t r a de t e j i d o h i p o t a l â m i c o y se

comparai! l o s v a l o r e s o b t e n i d o s g r â f i c a m e n t e con l a c u rv a p a t r â n ,

d e b ie n d o c o m p o r t a r s e de m anera semej a n t e .

E l u l t i m o p a r â m e t r o p o r d é f i n i r se conoce como E s p e c i f i c i d a d

y se e n t i e n d e como l a c a p a c i d a d d e l a n t i c u e r p o empleado de d i s c e r -

n i r s e l e c t i v a m e n t e e n t r e v a r i o s a n t f g e n o s p o t e n c i a l e s , como o t r a s

hormonas h i p o t a l â m i c a s e h i p o f i s a r i a s e i n c l u s o p r o t e f n a s no r e -

- 57 -

l a c i o n a d a s , e l i m i n â n d o s e a s f p o s i b l e s i n t e r f e r e n c i a s . P a r a e l l o

se i n c u b â u n a s e r i e de hormonas (TRH, LHRH, A D H .. . ) con e l a n t i

c u e rp o a n t i - S o m a t o s t a t i n a em pleado .

5 . P r o c e s a d o de l a s m u e s t r a s p a r a d e t e r m i n a c i â n de C a t e c o l a m i n a s .

La e x t r a c c i d i de l a s m u e s t r a s de c e r e b r o e h i p o t a l a m o se

r e a l i z â de i g u a l fo rm a a l a d e s c r i t a en e l a p a r t a d o p a r a Soma

t o s t a t i n a . E l c e r e b r o se e x t r a j o e n t e r o , se d i s e c c i o n â e l h i p o

t a l a m o , y se c o n g e l â i n m e d i a t a m e n t e en I f q u i d o . Las m u e s t r a s

de h i p o t a l a m o se c o r t a r o n en dos t r o z o s s i g u i e n d o e l c o n to r n o d e l

v e n t r f c u l o , g u a rd a n d o s e uno p a r a d e t e r m i n a c i â n de SRIh y e l o t r o

p a r a C a t e c o l a m i n a s , p r e v i a c o n g e l a c i â n con Ng.

6 . A n a l i s i s f l u o r i m â t r i c o de C a t e c o l a m i n a s .

La t â c n i c a se h a d e s a r r o l l a d o en c o l a b o r a c i â n con e l l a b o

r a t o r i o de e s t e r o i d e s d e l I n s t i t u t e " G r e g o r io Marahân" d e l C .S .

I . e . (D r . J . B o r r e l l ) . Se s i g u i â e l mâtodo de S c h e l l e m b e r g e r e t

a l . ( 1 9 6 ) , m o d i f i c a d o ( 1 9 7 ) . E l ensayo se r e a l i z a en l o s s i g u i e n

t e s p a s o s ;

1. H o m o g e n e iza c iâ n d e l t e j i d o .

2 . E x t r a c c i â n de l a s C a te c o l a m i n a s en Acido P e r c l â r i c o .

3 . De una a l f c u o t a d e l e x t r a c t o â c i d o se e x t r a e n l a s ara inas me

d i a n t e a b s o r c i â n en a lu m in a a pH a l c a l i n o .

4. Las am inas se d e s p l a z a n de l a a lu m in a con Acido P e r c l â r i c o

d i l u f d o , pasando a l a f a s e â c i d a de donde se toman a l f c u o t a s

p a r a l a r e a c c i â n f l u o r i m â t r i c a .

— 58 —

E l t e j i d o se h o m o g en e iz a en 3 voliîmenes (g /m l ) de Acido P e r -

c l â r i c o 0 , 4 N c o n t e n i e n d o M e t a b i s u l f i t o s â d i c o a l 0,1% y EDTA a l

0,05%. Se c e n t r i f u g a a 15x10^ rpm /30 m in . /4 * C en u l t r a c e n t r f f u g a

( S o r v a l ) . Se s é p a r a e l s o b r e n a d a n t e , y e l s e d im e n to se rebom oge-

n e i z a de nuevo en l a s mismas c o n d i c i o n e s . Se r e â n e n l o s s o b r e n a -

d a n t e s , l l e v â n d o s e a un volumen f i n a l de 6 vo lum enes con â c i d o

p r e c l â r i c o .

A c o n t i n u a c i â n se toman 6 ml d e l e x t r a c t o a c id o y se ahade

s o l u c i â n de t r i c i n a (NaOH 0 ,5 N con t r i c i n a a l 1,8% y EDTA a l

2,5%) h a s t a a l c a n z a r un pH de 9 - 9 , 2 . Se ah aden 350 mg de a l â m in a

a c t i v a d a ( â x i d o de a l u m i n i o n e u t r o g ra d o I h e r v i d o en CIH 2 N/20

m i n . , l a v a d o con HCl y HgO b i d e s t i l a d a h a s t a c o n s e g u i r un pH d e l

agua de 3 - 3 , 5 , y c a l e n t a d o en e s t u f a a 2 0 0 * C / I 2 h . , m a n te n i e n d o s e

en d e s e c a d o r ) y se a g i t a l a m e z c la 20 m i n u t o s . Se c e n t r i f u g a a

2 .0 0 0 rpm/ 5 m i n . , se d e s e c h a e l s o b r e n a d a n t e y se l a v a e l p r e c i

p i t a d o de a lu m in a con 20 ml de H^O b i d e s t i l a d a , a g i t a n d o 1 m i n . ,

c e n t r i f u g a n d o de nuevo en l a s mismas c o n d i c i o n e s y d esec h an d o e l

a g u a . E s t e l a v a d o se r e p i t e 2 v e c e s . A c o n t i n u a c i â n se ahaden 3

ml de Acido P e r c l â r i c o 0 ,0 5 N a l a a lu m in a y se a g i t a de nuevo

20 m in . Se c e n t r i f u g a a 2 ,0 0 0 rpm/5 mjjn . , y d e l s o b r e n a d a n t e se

toman dos p a r t e s a l f c u o t a s de 1 ml p a r a b l a n c o y p ro b le m a , so b re

l a s que se r e a l i z a l a r e a c c i â n f l u o r i m â t r i c a .

La r e a c c i â n se l l e v â a cabo de l a s i g u i e n t e fo rm a; a h a d ie n d o

a una s e r i e de t u b o s con 1 ,5 ml de tampân Fosfato-EDTA 0 ,0 5 N,

pH=7 l o s s i g u i e n t e s r e a c t i v o s ;

-1 ml d e l e x t r a c t o a c i d o

- 0 , 2 ml de so luc iÆ n de Ig 0 ,1 M (May & B a k e r , I n g * t e r r a )

- 59 —

- I n c u b a r 2 m in u to s

- 0 , 5 ml de s o l u c i â n a l c a l i n a de S u l f i t e s â d i c o (2,5% en OHNa

5 N)

- I n c u b a r o t r o s dos m in u to s

- 0 , 4 ml de Acido A c â t i c o g l a c i a l , a l c a n z â n d o s e un pH de 4 , 4 -

- 4 , 8

- C a l e n t a r en e s t u f a a 100*0 /4 m in u to s

- E n f r i a r en h i e l o 5 m in u to s

- Se l e e n l a s m u e s t r a s de N o r a d r e n a l i n a a t e m p e r a t u r a a m b ien te

a u na a c t i v a c i â n de 390 mp. y u n a e m i s i â n de 490 mp.

- Se l l e v a n l a s m u e s t r a s de nuevo a l a e s t u f a a 100*0/40 minu

t o s , e n f r i â n d o s e en h i e l o

- Se l e e n l a s m u e s t r a s p a r a Dopamina s i n d e j a r que l o s t u b o s

a l c a n c e n l a t e m p e r a t u r a a m b i e n t a l .

A lo l a r g o d e l mâtodo son l l e v a d o s p a t r o n e s de 400 ng de

Dopamina y N o r a d r e n a l i n a p a r a e l c â l c u l o de l a r e c u p e r a c i â n .

Los t u b o s B lanco se l l e v a n a cabo i n v i r t i e n d o e l o rd e n de a d i -

c i â n de l o s r e a c t i v o s .

6 . 1 . C o n t r o l de c a l i d a d d e l mâtodo f l u o r i m â t r i c o .

P a r a e l l o se d e f i n e n l o s mismos p a r â m e t r o s de S e n s i b i l i

dad y R e p r o d u c i b i l i d a d y ademâs e l de R e c u p e r a b i l i d a d , e n t e n -

d i â n d o s e e s t e u l t i m o como l a c a n t i d a d de b io a m in a que se r é

c u p é r a d e s p u â s de h a b e r s e s e g u id o t o d o s l o s p a s o s d e l e n s a y o .

El mâtodo p e r m i t e d e t e r m i n a r m u e s t r a s de h a s t a 50 ng ,

t a n t o p a r a l a N o r a d r e n a l i n a como p a r a l a Dopamina ( p < 0 , 0 0 l )

( 1 9 7 ) .

— 60 —

La v a r i a c i â n i n t r a - e n s a y o f u e d e l 1,8%, t a n t o p a r a l a

Dopamina como p a r a l a N o r a d r e n a l i n a , como se puede c a l c u l a r

a p a r t i r de l o s d a t o s de l a s i g u i e n t e t a b l a .

T a b l a I I I . V a l o r e s de Dopamina y N o r a d r e n a l i n a en u na m u e s t r a

e n s a y a d a p o r q u i n t u p l i c a d o en un mismo e x p e r i m e n t o .

MUESTRA^ NORADRENALINA DOPAMINA

( n g / g t e j i d o )

1 337 975

2 330 995

3 344 1016

4 344 975

5 344 975

1 - D.S . - E .S.M. 339 - 6 i 2 , 8 987 - 18 - 8 ,1

a . La m u e s t r a c o r r e s p o n d e a u n a m e z c l a de c e r e b r o s p r o c é d a n t e s de 10 r a t a s n o r m a l e s .

La v a r i a c i â n i n t e r - e n s a y o f u e d e l 8,9% p a r a l a Dopamina y

d e l 10,7% p a r a l a N o r a d r e n a l i n a , como se c o n c lu y e de l o s d a t o s

de l a t a b l a IV.

— 61 —

T a b l a IV. V a l o r e s de Dopamina y N o r a d r e n a l i n a de una misma

m u e s t r a v a l o r a d a en d i s t i n t o s e n sa y o s ( n = 6 ) .

MUESTRA NORADRENALINA DOPAMINA

( n g / g t e j i d o )

1 217 479

2 245 501

3 206 405

4 270 507

5 209 426

6 240 484

1 i D .S . - E .S.M. 231 i 24 - 10 467 - 41 - 17

7. R ad io inm unoensayo de Hormona de C r e c i m i e n t o .

E s t a t â c n i c a se h a l l e v a d o a cabo con m a t e r i a l b i o l â g i c o

donado p o r e l NIAMND (Dr. P a r lo w , USA). E l p r o c e s o s e g u id o f u e ,

en e s e n c i a , e l i n d i c a d o p o r d i c h a i n s t i t u c i â n , con l i g e r a s mo-

d i f i c a c i o n e s que a c o n t i n u a c i â n i n d i c a m o s .

— 62 —

7 . 1 . I o d a c i â n de l a ho rm o n a .

Se s i g u i â e l p r o c e d i m i e n t o de Greenwood ( 1 9 8 ) , m o d i f i c a d o

en a lg u n o s a s p e c t o s . F u e ro n dos l a s t â c n i c a s de i o d a c i â n em plea

d a s ; u n a s i g u i e n d o e s t r i c t a m e n t e l a s i n s t r u c c i o n e s d e l Dr. P a r

low y o t r a l i g e r a m e n t e d i s t i n t a con e l f i n de eco n o m iz a r c a n t i -

d a d e s a p r e c i a b l e s de r e a c t i v o s , que no d i â l o s r e s u l t a d o s a p e t e -

c i d o s a l o b t e n e r s e a c t i v i d a d e s e s p e c f f i c a s p o r d e b a jo de 30 )iCi/ / p g de GH, con l o que l a s e n s i b i l i d a d d e l e nsayo no e r a l a r e q u e -

r i d a ( l 9 4 ) . Po r t a n t o , se d e s c r i b e a c o n t i n u a c i â n s â l o l a que

u t i l i z a m o s de m anera r u t i n a r i a .

Se ahaden l o s r e a c t i v o s p o r e l s i g u i e n t e o r d e n en un tu b o

de e n say o (10x75 mm);

- 100 p l de tam pân F o s f a t o s â d i c o 0 , 5 M pH=7,6

- 2 mCi de ^^^INa (Amersham, I n g l a t e r r a )

- 20 pg de NIAMND-GH-1-4, d i s u e l t a en NaHCO^ 0 ,01 M, 1 mg/ml

- 15 p i de C lo ram ina-T (BDH, I n g l a t e r r a ) d i s u e l t a en F o s f a t o s â

d i c o 0 ,0 5 M pH=7,6, 3,5 mg/ml

- Se i n c u b a l a m e z c la 45 seg u n d o s y se l l e v a a una columna de

Sephadex G-50 ( P h a r m a c ia , S u e c i a ) con e l f i n de s e p a r a r l o s

d i s t i n t o s p r o d u c t o s de l a r e a c c i â n p o r c r o m a t o g r a f f a de e x c l u -

s i â n m o l e c u l a r .

La columna se e n c o n t r a b a p r e v i a m e n t e s a t u r a d a con Albâm ina

b o v i n a a l 30% en tampân de e l u c i â n ; B a r b i t a l 0 ,0 5 M pH=8,6 y l a -

v a d a con e l mismo tam pân , r e c o g i â n d o s e f r a c c i o n e s de 0 ,5 m l , h a s

t a c o m p l e t a r un volumen de e l u c i â n de unos 25 ml.

E l c r i t e r i o de p u r e z a u t i l i z a d o f u e t a m b ie n e l i n m u n o l â g i c o ,

o b t e n i â n d o s e l a maxima c a n t i d a d de hormona m arcada en b u e n a s con-

- 63 -

d i c i o n e s en e l - p r i m e r p i c o d e l p e r f i l de e l u c i d n ( a l r e d e d o r

de l o s 4-6 m l ) , con un 60% de u n i d n a l a n t i c u e r p o ( d i l u f d o

1 /2 0x 1 0 ^ ) y u n a r a d i a c t i v i d a d i n e s p e c i f i c a p e r d e b a jo d e l 40%.

La a c t i v i d a d e s p e c f f i c a m ed ia o b t e n i d a f u e de a p ro x im a d a -

mente 60 p C i / u g de horm ona, con un p o r c e n t a j e de u t i l i z a c i d n

d e l r a d i a c t i v o d e l 60%.

7 . 2 . M itodo de RIA.

Se u t i l i z e s e l mëtodo d e l d o b l e a n t i c u e r p o y s i g u i e n d o e l

esquema de t r a b a j o que a c o n t i n u a c i d n se d e t a l l a :

En e l tu b o de e n sa y o se a n ad e n l o s s i g u i e n t e s r e a c t i v o s

p o r e s t e o rd e n :

- 300 p.1 de tampdn de ensayo ( F o s f a t o s a l i n o 0 ,01 M - EDTA 0 ,0 2 5

M c o n t e n t e n d o A lbdm ina b o v i n a a l 1% y a z i d a seSdica a l 0,1%,

p H = 7 ,6 ) .

- 100 ^ 1 de c ad a p u n to de l a c u r v a patrcSn ( c o n un r an g o de c o n -

c e n t r a c i o n e s de 0 , 8 - 100 n g /m l ) o b i e n , 50 p i de m u e s t r a a

v a l o r a r + 50 p i d e l tampdn de e nsay o p a r a i g u a l a r v o lum en es .?

- 100 p i de hormona m arc ad a con 8x10 cpm/100 p i ap rox im adam ente ,

- 100 p i de P r im e r a n t i c u e r p o (NIAMND a n t i - r a t OH-serum-4) con

un t i t u l o de 1/ 35x10^ f i n a l .

- Se i n c u b a 3 d i a s / 4 ^ C .

- 25 p i de h e p a r i n a s<5dica ( 1 0 .0 0 0 U/ml, R o v i , E s p a h a ) .

- 100 p i de u n a m e z c l a de s u e r o s humanes d i l u f d a 1 /300 i n i c i a l

en e l tampdn de e n s a y o .

- 100 p i de Segundo a n t i c u e r p o (Gamma g l o b u l i n s , de c a b r a a n t i -

— 64 —

- P r i m e r a n t i c u e r p o , A n t i b o d i e s I n c . , USA) con u n a d i lu c i (5 n

i n i c i a l de 1 /1 2 .

- Se i n c u b a 1 d f a a 4°C, se d e c a n t a e l s o b r e n a d a n t e y se c u e n t a

1 m in u te en e l c o n t a d o r Gamma.

- En p a r a l e l o se d i s p o n e n t u b o s de " C u e n ta s t o t a l e s " , " R a d ia c

t i v i d a d i n e s p e c f f i c a " y " B l a n c o " .

Se o b t i e n e n c u r v a s p a t r d n como l a de l a F i g u r a 4, con una

s e n s i b i l i d a d de 1 ,6 n g /m l de p la s m a ( p < 0 ,0 2 ) y un a var iac i<5n

i n t r a - e n s a y o de 3 , 7 y 2,1% p a r a l o s p u n t o s 100 y 50 n g /m l r e s -

p e c t i v a m e n t e , y u n a va r iac i<5n i n t e r - e n s a y o de 3,1% p a r a u n a do-

s i s de 45 n g /m l .

E l p e r c e n t a g e de uni(5n m£xima a l a n t i c u e r p o , d e te r m in a d o p o r

l o s t u b o s " B lanco " f u e d e l 23 - 4,2% (2 - E .S .M . ) y e l de u n i d n

i n e s p e c f f i c a o RI d e l 5 ,1 - 1,2%.

8 . E s t u d i o e s t a d f s t i c o de l o s r e s u l t a d o s .

En l a s e x p e r i e n c i a s de a n im a l e s t r a t a d o s con d r o g a s d i v e r s a s , e l

e s t u d i o e s t a d f s t i c o f u e r e a l i z a d o a p l i c a n d o e l t e s t de l a " t de

S t u d e n t " , comparando c a d a g rupo t r a t a d o con su r e s p e c t i v e , c o n t r o l .

Se c o n s i d e r # un v a l o r de "p" menor de 0 ,0 5 como e s t a d f s t i c a m e n t e

s i g n i f i c a t i v o .

En l a s e x p e r i e n c i a s de e s t u d i o d e l r i tm o u l t r a d i a n o , se a p l i -

co en c i e r t a s o c a s i o n e s e l c o e f i c i e n t e de c o r r e l a c i # n e n t r e l o s •-

d i v e r s o s p a r a m e t r o s e s t u d i a d o s .

% B/Bo

100-

90 -

8 0 -

70-

6 0 -

5 0 -

4 0 -

3 0 -

20 -

10 -

— 1------------------1 1 1 1 1 1-------------- 1—

0 .8 1.6 3.1 6.2 12.5 25 50 ,1 0 0

Figura 4

ng/mlR P -I-G H(N iAM D)

F i g u r a 4. C u rv a patr<5n c a r a c t e r f s t i c a o b t e n i d a en e l RIA de GH,

— 66 —

N o t a s .

1. En t o d o s l o s e x p e r i m e n t o s , s e r e c o g i # l a s a n g r e d e l t r o n c o

in m e d i a t a m e n t e t r a s l a d e c a p i t a c i ( 5 n y se puso en t u b o s man-

t e n i d o s en baho de h i e l o , c o n t e n i e n d o EDTA d i s d d i c o (1 mg/ml

de s a n g r e ) p a r a d e t e r m i n a r e l c o n t e n i d o de GH en p la s m a .

T r a s c e n t r i f u g a r s e , se g u a r d a r o n l a s m u e s t r a s a -40^C h a s t a

su d e te rm in a c i (5 n p o r RIA.

R E S U L T A D O S .

— 68 —

RESULTADOS,

1. P u e s t a a p u n to d e l RIA de S o m a t o s t a t i n a .\

Se d e s c r i b e n a c o n t i n u a t i o n l o s r e s u l t a d o s o b t e n i d o s en

c a d a une de l o s p a s o s de l a p u e s t a a p u n to d e l mOtodo de RIA

p a r a l a S o m a t o s t a t i n a ^ .

1 . 1 . l o d a c iO n de S o m a t o s t a t i n a .

La F i g u r a 5 n os m u e s t r a e l p e r f i l de e lu c iO n de dos c roma-

t o g r a f i a s en CM-22 de l a m e z c l a de r e a c c i O n de l a io d a c iO n p o r

e l mOtodo de l a L a c t o p e r o x i d a s a .

E l p r i m e r p i c o (p u n to O), c o r r e s p o n d e a l I ^ l i b r e que h a

quedado s i n u t i l i z a r en l a r e a c c i O n y que se h a é lu f d o con tam -

pOn A c e t a t o AmOnico 2 mM pH=4,6 . La hormona d e g ra d a d a p o r ex ce so

de o x id a c iO n se e n c u e n t r a en e l p i c o I I , y l a hormona m arc ad a en

b u e n a s c o n d i c i o n e s in m u n o lO g ic as en e l p i c o I I I . La c a l i d a d de l a

hormona m arc ad a en c a d a u n a de l a s f r a c c i o n e s de l o s p i c o s I I y

I I I se d e t e r m i n # p o r e l método de u n i # n maxima e s p e c f f i c a a l an

t i c u e r p o .

E l mayor p o r c e n t a j e de uni<5n ( e x p r e s a d o como B/T) se en co n -

t r # en l o s dos p u n t o s p o s t e r i o r e s a l p i c o I I I ( v e r esquema de l a

p a g i n a s i g u i e n t e ) . Por t a n t o , f u e r a n e s t a s l a s f r a c c i o n e s e l e g i d a s

p a r a u t i l i z a r en e l RIA, g u a rd a n d o s e a -2 0 °C .

70-

40-I ACETATO AMONICO

0.15M , pH 4.65 30-no

X

(0CO

20 -

c

o= 10-

0 10 20 30 mlB

70-

Ir - 40-

coIo 30-X

(A

I 20-Ü

10 -

3020

Figura 5

F i g u r a 5. R e p r e s e n t a c i d n de dos p e r f i l e s t f p i c o s o b t e n i d o s

p o r c r o m a t o g r a f f a en CM-22 de l a m e z c l a de r e a c c i d n

de iodac i (5n de 0 , 5 mg de N -T ir-SR IH con 0 , 5 mCi de

i o d o - 1 2 5 . En A. l a a c t i v i d a d e s p e c f f i c a de l a h o r

mona m arc ad a ( p i c o I I I ) f u e de 62 u C i / u g de p é p t i d o ,

m i e n t r a s que en B. f u e un poco m ayor , 8 6 .7 u C i / u g .

- 70 -

F r a c c i d n % Unidn (B/T) R a d i a c t i v i d a d I n e s p e c f f i c a

(2 - E .S .M . )

1 P o s t - p i c o I I I 4 3 ,2 - 5 , 2 7 ,5 - 3 ,2

2 " 3 6 ,9 - 7 , 6 5 , 7 - 3 ,7

1 . 1 . 1 . E f i c a c i a de l a reacc i (5n de iodac i<5n.

125D e te r m in a d a como p o r c e n t a j e de u t i l i z a c i d n d e l INa en l a

r e a c c i (5 n y como c a n t i dad i n c o r p o r a d a de ês te a l a m o lé c u l a h o r

monal o A c t i v i d a d E s p e c f f i c a de l a horm ona, v i e n e d e s c r i t a en l a

t a b l a V, con c in c o m a r c a j e s (de un t o t a l de q u in c e r e a l i z a d o s ) .

E s t a s a c t i v i d a d e s e s p e c f f i c a s n o s p e r m i t e n u t i l i z a r c a n t i d a -

d e s muy p e q u e h a s de hormona r a d i a o t i v a ( ap ro x im ad am en te 2 pg en

1 0 .0 0 0 cpm), lo c u a l supone o b t e n e r u n a a d e c u a d a s e n s i b i l i d a d d e l

RIA ( 1 9 4 ) .

La hormona m arc ad a t i e n e u n a v i d a m ed ia de un mes y , medio a

dos m e s e s , s i e n d o r e p u r i f i c a d a en l a misma columna de cambio i(5-

n i c o a l cabo de un mes ap ro x im ad a m en te , cuando l a s r a d i a c t i v i d a -

d e s i n e s p e c f f i c a s h a l l a d a s en e l . e n s a y o empezaban a e l e v a r s e a un

- 71 -

T a b l a 7 . P a r â n e t r o s d é t e r m i n a n t e s de l a e f i c a c i a de l a r e a c c i d n

de iodac i (5n de S o m a t o s t a t i n a .

% U t i l i z a c i ( 5 n d e l A c t i v i d a d E s p e c f f i c a ( j iC i / j ig )

90 90

8 6 , 7 8 6 , 7

62 ,1 62 ,1

4 8 ,6 4 8 ,6

7 4 , 4 7 4 , 4

2 - E . S . M . : 7 2 ,3 - 7,7% 7 2 ,3 i 7 , 7 MCi/jig SRIH

1 . 2 . T i t u l a c i ( 5 n de l o s a n t i c u e r o o s .

La F i g u r a 6 n o s m u e s t r a l a s c u r v a s de t i t u l a c i c 5 n d e l a n t i

cu e rp o numéro 6 , o b t e n i d o en n u e s t r o l a b o r a t o r i o , y e l a n t i c u e r

po M p r o v e n i e n t e de f u e n t e s c o m e r c i a l e s , en c o n c e n t r a c i o n e s v a r i a

b l e s de l o s mismos, p e rm a n ec ie n d o c o n s t a n t e s l o s demas e le m e n to s

d e l e n s a y o .

Se e l i g i ( 5 l a d i l u c i d n 1 /28x10^ p a r a e l a n t i c u e r p o 6 y l a

1 /35x10^ p a r a e l a n t i c u e r p o M, p o r d a r u n a uni(5n a l a n t f g e n o de

a l r e d e d o r d e l 30%, con l a c u a l se o b t i e n e l a s e n s i b i l i d a d (5ptima

d e l e n s a y o .

La F i g u r a 7 m u e s t r a l a s c u r v a s p a t r o n o b t e n i d a s con e l a n -

% B/T

60 - —• Ab n = 6 Ab M

50 -

40-

30-

2 0 -

10 -

Factor de Dilucion

Figura 6

F i g u r a 6. C u rv a de t i t u l a c l ( 5 n d e l a n t i c u e r p o o b t e n i d o en

n u e s t r o l a b o r a t o r i o , Ab 6, y e l o b t e n i d o de f u e n t e s

c o m e r c i a l e s ( im m un o n u c le a r C o r p . , Ab M) .

Ab:M 1 /35 .000à r — A Ab.6 1 /28 .000

^ Ab.5 1 /2 8 .0 0 0 # - - # Ab.101 1 /7 .000

% B/Bo

100-

90-

80-

70-

60-

50-

40-

30-

20 -

10 -

10 20 40 80 160 320 640 1280 2560 5120 SRiH(pg/ml)

Figura 7

F i g u r a 7. R e p re se n ta c ic 5 n de c u a t r o c u r v a s p a t r d n o b t e n i d a s

con d i s t i n t o s a n t i c u e r p o s . Ab M ( i m m u n o n u c l e a r ) ,

Ab 5 y 6 ( n u e s t r o l a b o r a t o r i o ) y Ab 101 (Dr. Ari-

m ura , Nueva O r l e a n s , USA).

— 74- —

t i c u e r p o numéro 5 d i l u f d o 1 /28x10 y e l mîmero 6 t a m b ié n d i l u f d o

1 /28x10^ de n u e s t r o l a b o r a t o r i o , e l a n t i c u e r p o M 1 /35x10^ y e l

a n t i c u e r p o mîmero 101 1 /7x10^ donado p o r e l Dr. A r im u ra (Nuëva

O r l e a n s , USA). Como se puede o b s e r v a r , l a s c u r v a s mas p r é c i s a s

y s e n s i b l e s son l a s c o r r e s p o n d i e n t e s a l mîmero 6 y a l M, y a que

s o n l a s que se e n c u e n t r a n mas d e s p l a z a d a s a l a i z q u i e r d a de l a

g r â f i c a y l a s de p e n d i e n t e mas p r o n u n c i a d a . Cuanto mayor pend ien-

t e t e n g a u n a c u r v a p a t r d n , mayor p r e c i s i o n t i e n e en d e t e r m i n a r

l a c o n c e n t r a t i o n de hormona de r e f e r e n c i a que l e c o r r e s p o n d e a

un v a l o r de B/B^ dado . Es p o r l o que se e l i g i O e l a n t i c u e r p o mî

mero 6 p a r a e l RIA, u s â n d o s e e l M t r a s h a b e r s e a g o ta d o e l p r im e r

r o .

1.-3. C u rv a p a t r O n .

La F i g u r a 8 r e f i e j a u n a c u r v a p a t rO n de S o m a t o s t a t i n a s i n -

t O t i c a que c o r r e s p o n d e a l a m ed ia o b t e n i d a de 10 c u r v a s (d e un

t o t a l de 43 r e a l i z a d a s ) h e c h a s a l o l a r g o de dos ahos y medio .

En l a s c o n d i c i o n e s de ensayo d e s c r i t a s , e l p o r c e n t a j e de

uniOn maxima, dado p o r l o s t u b o s B la n c o , f u e de 39 - 3,8%-(% -

- S .E .M .) y l a RI d e l 7 , 7 - 0,6%.

% B/Bo

100-

9 0 -

8 0 -

70-

60-

50-

4 0 -

30 -

20 -

10 -

~ r10

“ 1--------1--------r20 40 80 160 320 640 1280 2560 5120

TSRiH

(pg/ml)

Figura 8

F i g u r a 8 . C u rv a patrc5n o b t e n i d a en e l RIA de SRIH, Cada p u n to

r e p r é s e n t a l a m ed ia (± e r r o r e s t a n d a r ) de d i e z p u n t o s

o b t e n i d o s en d i s t i n t o s e n s a y o s .

— 76 —

1 . 4 . S e n s i b i l i d a d . p r e c i s i o n y e s p e c i f i c i d a d d e l RIA de Som atos

t a t i n a .

La s e n s i b i l i d a d , c a l c u l a d a segu n l o s d a t o s de l a t a b l a ' V I ,

f u e de 10 pg /m l ( p < 0 , 0 l ) , s u f i c i e n t e p a r a l o s r e q u e r i m i e n t o s de

n u e s t r o s p r o t o c o l e s . Las m u e s t r a s se l e y e r o n g e n e r a l m e n t e en l a

zona m ed ia de l a c u r v a patrc5n, id(5nea p o r s e r l a de mayor pen

d i e n t e , p a r a l o c u a l d e b fa n s e r d i l u f d a s en e l tampdn de RIA

h a s t a 1 : 4 0 . Ademas, e s t a s e n s i b i l i d a d n o s p e r m i t e t r a b a j a r con

un r an g o am pl io de c o n c e n t r a c i o n e s .

T a b l a V I . S e n s i b i l i d a d d e l RIA de S o m a t o s t a t i n a .

B lanco 20 pg /m l 10 p g /m l

P o r c e n t a j e de unic5n (B/T)

34 3 2 ,9 3 3 ,9

2 9 ,8 2 7 ,6 2 9 ,8

3 5 ,4 3 3 ,6 3 4 ,4

4 8 ,7 4 5 ,6 4 7 ,2

33 3 0 ,7 31 »7

3 4 ,4 33 3 5 ,5

3 2 ,2 2 8 ,6 31

48 4 6 ,2 47

3 1 ,8 2 8 ,3 2 9 ,2

51 47 5 0 ,2

Blanco vs B lanco vs

20 p g /m l ; 10 p g /m l ;

t= 7 , 8 . p<0,001 t= 4 , 5 . p<0.01

- 77 -

Se apl ic(5 un t e s t de s i g n i f i c a n c i a e s t a d f s t i c a ( “-t a p a r e a -

d a ” ) a l o s d i s t i n t o s v a l o r e s B/T o b t e n i d o s p a r a l o s p u n t o s 0

(que denorainamos B l a n c o ) , 10 y 20 p g / m l .

La r e p r o d u c i b i l i d a d d e l e n s a y o , d e f i n i d a p o r l o s c o e f i c i e n -

t e s de v a r i a c i ( 5 n i n t e r e i n t r a - e n s a y o , se c a l c u l # a p a r t i r de

l o s d a t o s de l a s t a b l a s V I I y V I I I .

Como c o n t r o l i n t e r - e n s a y o se u t i l i z # u n a m e z c l a de h i p o t a -

lamos de r a t a g u a rd a d o s en a l f c u o t a s a -20^C , d e t e r m i n a n d o s e su

c o n t e n i d o en S o m a t o s t a t i n a en c a d a une de l o s e n s a y o s r e a l i z a d o s .

La t a b l a V II d e s c r i b e l o s v a l o r e s o b t e n i d o s p a r a d i c h a m e z c l a a

l o l a r g o de 10 d i f e r e n t e s e n s a y o s , y con l o s dos a n t i c u e r p o s u t i -

l i z a d o s . Se d e t e r m i n # e l c o e f i c i e n t e de v a r i a c i # n de l o s v a l o r e s

o b t e n i d o s .

Los c o e f i c i e n t e s de v a r i a c i ( 5 n i n t r a - e n s a y o se c a l c u l a r o n

p a r a d i f e r e n t e s c o n c e n t r a c i o n e s c o n o c i d a s de horm ona de r e f e r e n

c i a , t a m b ié n en 10 e n s a y o s d i s t i n t o s .

Los v a l o r e s o b t e n i d o s en ambos c a s o s , e s t a n p o r d e b a jo de

l o s l i m i t e s de v a r i a c i # n que se a d m i t e n como # p t im o s (20% p a r a

l a i n t e r - e n s a y o y 5% p a r a l a i n t r a - e n s a y o ) .

P a r a d e t e r m i n a r l a e s p e c i f i c i d a d d e l a n t i c u e r p o a n t i - S o m a -

t o s t a t i n a se e s t u d i # l a p o s i b l e i n t e r f e r e n c i a de a l g u n a s hormo

n e s : TRH, ADH, LHRH, g l u c a g # n e i n s u l i n e , en l a f o r m a c i# n d e l

co m p le jo S o m a t o s t a t i n a - a n t i - S o m a t o s t a t i n a . Se o b s e r v # que con

d o s i s de h a s t a 100 p.g de e s t a s h o rm o n es , e l p o r c e n t a j e de u n i # n

f u e s i e m p re menor que 0 ,001%, l o c u a l i n d i c e que e l a n t i c u e r p o

no r e a c c i o n a con e s t a s hormones de fo rm a a p r e c i a b l e , y p o r l o

t a n t o e s e s p e c f f i c o p a r a l a S o m a t o s t a t i n a f r e n t e a e s t a s horm ones .

— 78 —

T a b l a V I I . R e p r o d u c i b i l i d a d i n t e r - e n s a y o d e l RIA de S o m a t o s t a t i n a *

A n t i c u e r p o 6

Ensayo 1

2

3

4

5

1 - E . S . M . :% C .V . :

A n t i c u e r p o M

Ensayo 1

2

3

4

5

V a l o r o b t e n i d o (p g /m lJ

240

300

320

360

380

320 - 2 4 ,4 16,8%

V a l o r o b t e n i d o (p g /m l )

370

350

320

300

260

1 i E .S .M . : 320 i 19% C . V . : 13,4%

T a b l a V I I I . V ar iac i (5n i n t r a - e n s a y o p a r a t r è s d o s i s de hormona.

DOSIS ( p g /m l ) % V a r i a c i d n Media

640 5; 1 ,4 ; 0 , 9 ; 1 , 8 ; 1 ,5 ; 0 , 6 ; 2 , 1 ; 0 , 6 ; 3 ,1 1,8%

320 6 , 4 ; 2 ; 1 ,1 ; 1 ,2 ; 1; 3 , 6 ; 0 , 8 ; 1 ,2 ; 1 , 6 ; 0 , 9 1,9%m160 6 , 8 ; 2 , 6 ; 1 ,3 ; 3; 4 , 8 ; 2 , 2 ; 2 , 8 ; 2 , 6 ; 2 , 2 ; 2 , 3 3%

- 79 -

La i n f l u e n c i a d e l f a c t o r de d i l u c i # n empleado en l a s m u e s t r a s

a v a l o r a r s e e s t u d i # comparando l o s v a l o r e s o b t e n i d o s p a r a u n a mez

c l a de h i p o t â l a m o s de r a t a d i l u f d a h a s t a 1:40 con u n a c u r v a p a t r # n ;

o b t e n i e n d o s e un p a r a l e l i s m o e n t r e ambas ( F i g u r a 9B). Ademas, l a r e

p r e s e n t a t i o n g r a f i c a de d i l u c i o n e s p r o g r e s i v a s de d i c h a m u e s t r a d i #

u n a i f n e a r e c t a ( F i g u r a 9A), i n d i c a n d o l a e x i s t e n c i a de u n a r e l a c i O n

l i n e a l e n t r e f a c t o r de d i l u c i O n y c o n t e n i d o v a l o r a d o de l a hormona.

2 . C a t e c o l a m i n a s c e r e b r a l e s , S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a y Hormona

de c r e c i m i e n t o p l a s m O t i c a .

2 . 1 . E v i d e n c i a s de u n a r e l a c i O n e n t r e C a t e c o l a m i n a s , S o m a t o s t a t i n a

y Hormona de c r e c i m i e n t o .

Los r e s u l t a d o s de l o s e x p e r i m e n t o s 1 y 2 , a n i m a l e s t r a t a d o s

con AI4T y con L -dopa r e s p e c t i v a m e n t e , m u e s t r a n un a r e l a c i O n e n t r e

e l c o n t e n i d o c e r e b r a l de C a t e c o l a m i n a s (Dopamina y N o r a d r e n a l i n a ) ,

h i p o t a l a m i c o de S o m a t o s t a t i n a (SRIH) y p l a s m â t i c o de Hormona de

c r e c i m i e n t o (G-H), como se s e h a l a en l a s F i g u r a s 10A y 10B.

Cuando ambas c a t e c o l a m i n a s se e n c u e n t r a n d i s m in u f d a g en e l

c e r e b r o ( e n un 50% a p ro x im a d a m e n te , p < 0 , 0 0 l ) p o r a c c i d n de l a AT4T,

i n h i b i d o r a de l a T i r o s i n a h i d r o x i l a s a , e l c o n t e n i d o h i p o t a l a m i c o

de SRIH se i n c r e m e n t a de 20 a 30 p g /p g p r t . , p ( 0 , 0 1 , m i e n t r a s que

e l de OH en s a n g r e d i sm in u y e de 55 a 25 n g / m l . En e s t e d l t i m o c a -

so no se o b s e r v # u n a s i g n i f i c a n c i a e s t a d f s t i c a en l a d i s m i n u c i f n

de G-H d e b id o a l a g r a n v a r i a b i l i d a d en l o s v a l o r e s o b t e n i d o s p a r a

Logit B /Bo

0 -

SRIH(pg /m l)

6 0 0 -

4 0 0 -

200 -

- 2 -

' '0

Dilucion

2 0 4 0 8 0 160 3 2 0 6 4 0 1 2 8 0 SRiH (pg/m l)

Figura 9

F i g u r a 9. En A: r e p r e s e n t a c i ( 5 n de l a r e l a c i d n l i n e a l e n t r e f a c t o r

de d i l u c i d n y c o n t e n i d o de SRIH en u n a m e z c la de h i p o t a -

l a m o s . B; P a r a l e l i s m o de u n a m e z c l a de t e j i d o h i p o t a l a m i

co ( i f n e a c o n t i n u a ) y u n a c u r v a p a t r d n de SRIH s i n t é t i c a

( l i n e a d i s c o n t i n u a ) t r a s l i n e a r i z a t i o n L o g i t B/B^.

SRIHpg/wg prt.

*p<0,001; **p < 0 ,0 1

SRIH pg/wg prt.

40-

30-

2 0 -

10 -

GHng/ml pL

40-

* *30-

2 0 -

10 -

Saiino AMT

GH ng/ml pi.

100

SaNno L-Oopa

* p < 0 ,0 0 1 ;* * p < 0 ,0 1 ; + * * p < 0 ,0 5

CAÙ % control

100 -

AMTSalino

100

CA û% control

Salino L-Oopa

Figura 10

DA NA

100 -

DA NA

F i g u r a 10. E f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i d n de A: AMT y B: L -d o p a

s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t a l a m o , GH en

p la s m a y CA en c e r e b r o . Los v a l o r e s h a l l a d o s p a r a

l a s CA s e e x p r e s a n como i n c r e m e n t o s o d e c r e m e n to s

p e r c e n t u a l e s de l o s v a l o r e s c o n t r o l , tomando é s t o s

como 100%. A. AMT: n=17, s a l i n o : n=11 . B. L -d o p a :

n=5, s a l i n o : n=10.

N o ta : e s t e mismo s i s t e m a de r e p r e s e n t a t i o n se man- t i e n e h a s t a l a F i g u r a 16.

— 82 —

l a s r a t a s c o n t r o l , y a que l o s n i v e l e s b a s a l e s de e s t a hormona s u e -

l e n s e r muy d i s p e r s e s d e b id o a l a e x i s t e n c i a de un r i t m o p u l s a t i l

c i r c a d i a n o p a r a e s t a hormona ( 1 7 9 ) . De c u a l q u i e r f o rm a , n u e s t r o s

r e s u l t a d o s c o n c u e rd a n con l o s de o t r o s a u t o r e s . Ademas, e s t e e f e c

t o de l a AMT s o b r e l a GH e s t a am p l iam en te documentado en l a l i t e -

r a t u r a ( 6 5 ) .

P o r e l c o n t r a r i o , l a a d m i n i s t r a t i o n de L - d o p a , p r e c u r s o r de

l a b i o s f n t e s i s de c a t e c o l a m in a s . , p r o d u j o e f e c t o s c o n t r a r i e s : a u -

mento de l a dopamina en un 190% ( p < 0 , 0 0 l ) , de l a n o r a d r e n a l i n a en

un 150% ( p < 0 ,O l ) y d i sm in u c iO n de l a SRIH h i p o t a l a m i c a de 17 a

9 , 5 p g / p g p r t . ( p < 0 , 0 0 l ) . Al mismo t i e m p o , se obse rvO un aumento

en l a l i b e r a t i o n de GH de 13 a 120 n g /m l ( p ( 0 , 0 5 ) , s i g n i f i c a t i v e

en e s t e caeo p o r l a p e q u e h a d e s v i a c i O n de l o s v a l o r e s c o n t r o l

P o r t a n t o , e s t e s d a t o s s u g i e r e n l a p o s i b i l i d a d de que e x i s t a

u n a r e l a c i O n i n v e r s a e n t r e C a t e c o l a m i n a s y S o m a t o s t a t i n a y d i r e c t a

e n t r e O s ta s y l a GH.

2 . 2 . C o n t r o l de l a S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a y l a Hormona de

c r e c i m i e n t o p l a s m a t i c a p o r l a Dopamina.

Una vez que se comprobO que e x i s t f a una r e l a c i O n e n t r e l a s

C a t e c o l a m i n a s c e r e b r a l e s y l a SRIH h i p o t a l a m i c a , s e p l a n t e O cOmo

l a s dos c a t e c o l a m i n a s p r i n c i p a l e s en e l S i s t e m a n e r v i o s o c e n t r a l ,

e s t o e s l a Dôpamina y l a N o r a d r e n a l i n a , i n t e r v e n d r f a n en p a r t i c u

l a r en e l c o n t r o l de e s t a hormona h i p o t a l a m i c a .

P a r a e s t u d i a r e l e f e c t o de l a Dopamina (DA) s e l e c t i v a m e n t e ,

se p l a n t e O e l e x p e r im e n to nOmero 6, en e l que l a a d m i n i s t r a c i O n

— 83 —

de L -d o p a t r a s e l D i s u l f i r a m p r o d u j o n i v e l e s a l t o s de DA (262%

d e l c o n t r o l ) , p e rm a n ec ie n d o l a N o r a d r e n a l i n a (NA) en n i v e l e s n o r

m a le s

L a ' F i g u r a 11A n o s m u e s t r a como t r a s e s t a e l e v a c iO n de l a DA

c e r e b r a l , e l c o n t e n i d o de SRIH en h ipo tO lam o b a j a d r a s t i c a m e n t e

de 1 8 ,5 a 8 , 5 p g /p g p r t , . a l i g u a l que l a GH p l a s m O t i c a ( de 10 ,8

a menos de 0 , 8 n g /m l )

E s t o s u g e r f a que l a DA a c t u a r f a de fo rm a n e g a t i v a s o b r e l o s

n i v e l e s de SRIH en e l h ipo tO lam o y s o b r e l a l i b e r a c i O n de GH de

l a h i p O f i s i s .

P a r a c o n f i r m a r l o , se l l e v a r o n a cabo l o s e x p e r i m e n t o s 9 y 10.

En e l p r im e r o de e l l o s l a a d m i n i s t r a c i O n de AMT p r o d u j o u n a d e -

p l e c c i O n t a n t o de DA como de NA de ap rox im adam en te e l 75 y 60%

en e l c e r e b r o ; p e ro l a s u b s i g u i e n t e i n y e c c iO n de A pom orf ina ( a g o -

n i s t a dopam inO rg ico ) i n c r e m e n t a r f a l a a c t i v i d a d d o p a m in O rg ica a l

m i m e t i z a r l o s e f e c t o s de l a DA en l o s r e c e p t o r e s p r e - y p o s t s i -

n a p t i c o s . En l a F i g u r a 11B se o b s e r v a que l o s n i v e l e s de DA y NA,

t a n t o t r a s AMT sOlo como t r a s AMT + A po m orf in a , se e n c u e n t r a n muy

d i s m i n u f d o s (no e x i s t i endo a p e n a s d i f e r e n c i a s e n t r e ambos t r a t a -

m ie n t o s p o rq u e e l e f e c t o de l a A pom orf ina s o b r e e l " r e c a m b io me-

t a b O l i c o " de l a DA es a t i e m p o s mas l a r g o s ) , m i e n t r a s que l a SRIH

h i p o t a l O m i c a t r a s AMT se e n c u e n t r a a l t a (33 P g /p g p r t . ) r e s p e c t e

a l o s n i v e l e s c o n t r o l de o t r o s e x p e r i m e n t o s ( v e r c o n t r ô l e s de

l a s f i g u r a i 6 y 7 ) , como se h a b f a v i s t o y a en e l e x p e r im e n to 1.

P o r e l c o n t r a r i o , l a s r a t a s t r a t a d a s con AMT+Apomorfina t i e n e n

d i s m i n u i d a s i g n i f i c a t i v a m e n t e l a SRIH h i p o t a l a m i c a r e s p e c t e a

l a s t r a t a d a s con AMT (20 p g /p g p r t . ) , a lc an z& n d ose n i v e l e s n o r m a l e s .

SRiH pg/MQ prt.

40-

30-

20

10

GHng/mi p i

Saiino

* p < 0 .0 0 l,* * p < 0 .0 1

Oisuifiram + L-Dopa

10T

♦ *1 1

Saino Diauifiram

CAcontrol

300-

200

100-

+ L-DopaDA NA

SRiH pg/ng prt.

AMT

GH ng/ml p i

40-

30-

2 0 -

1 0 -

AMT + Apomorfina

* p < 0 ,0 0 l;* * p < 0 ,0 2

50

AMT

CAcontrol

AMT + Apomorfina

100-

AMTAMTAMT +AMT +

Apomorfina Apomorfina

DA NAFigura 11

F i g u r a 11. E f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i d n de A: D i s u l f i r a m (5 h o r a s )

+ L -d o p a (2 h o r a s ) y B: AMT y AMT -i- A p o m o rf in a s o b r e

l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t £ l a m o , GH en p l a s m a y CA

en c e r e b r o . A. D i s u l f i r a m + L -d o p a ; n=4, s a l i n o : n=5.

B. AMT; n=8 , AMT + A p o m o rf in a ; n=5.

— 85 “

En c u a n to a l a GH p l a s m a t i c a , l o s a n i m a l e s t r a t a d o s con

AMT+Apomorfina t e n f a n l o s n i v e l e s mas b a j o s que l o s t r a t a d o s con

AMT s(5lo (12 f r e n t e a 39 n g / m l ) , p e ro no de raanera s i g n i f i c a t i v a .

En l a e x p e r i e n c i a mîmero 10 se i n y e c t d l în ic am en te Apomor

f i n a , i n c r e m e n t â n d o s e l a a c t i v i d a d d o p a m i n ê r g i c a s i n a l t e r a r l o s

n i v e l e s c e r e b r a l e s de DA y NA (IIO y 120% d e l c o n t r o l , r e s p e c

t i v a m e n t e ) . La F i g u r a 12A n os m u e s t r a que en p a r a l e l o a unos

n i v e l e s de DA y NA l i g e r a m e n t e a l t o s , p e ro no s i g n i f i c a t i v a m e n

t e , se o b t u v i e r o n c o n c e n t r a c i o n e s de SRIH b a j a s en l o s a n im a l e s

t r a t a d o s con l a d r o g a d o p a m i n é r g i c a (9 p g / ^ g p r t . ) r e s p e c t o a

l o s c o n t r o l ( 1 5 , 8 p g /p g p r t . ) , y a l mismo t ie m p o l a GH p la s m a

t i c a disminuy(5 ta m b ië n de 60 a 44 n g / m l .

Es d e c i r , ambos e x p e r i m e n t o s v i e n e n a c o n f i r m a r l o o b s e r v a -

do en e l mîmero 6, l a DA p a r e c e d i s m i n u i r l o s n i v e l e s h i p o t a l â -

m icos de SRIH y de a l g u n a m anera t a m b ië n a f e c t a l o s de GH en

p la s m a .

2 . 3 . C o n t r o l de l a S o m a t o s t a t i n a H i p o t a l a m i c a v de l a Hormona de

c r e c i m i e n t o en p la s m a o o r l a N o r a d r e n a l i n a .

E l p l a n t e a m i e n t o de l o s e x p e r i m e n t o s 3 y 4 f u e e l d e t e r -«

m in a r e l e f e c t o de l a d i s m in u c i d n y aumento de l a NA en c e r e b r o ,

r e s p e c t i v a m e n t e , s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t a l a m o y de

GH en p la s m a .

La F i g u r a 12B m u e s t r a que t r a s u n a b a j a d a de l a NA d e l 40%

d e l c o n t r o l p r o v o c a d a p o r l a a d m i n i s t r a c i O n de D i s u l f i r a m , b l o -

SRIHpg/ugprt.

40

30-

2 0 -

10-

Salino

*p<0.01

GHng/ml pi.

Apomorfina

CAcontrol

100 -

ApomorfinaSalino

100-

DA NA

SRIH pg/ng prt.

40-

30-

2 0 -

10

Salino (Twen 80)

GH ng/ml pi.

* *

Disulfiram

*p<0,001;**p<0,01

10 -

SaUno

CAA % control

Disulfiram

Figura 12

100-

DA NA

F i g u r a 12. E f e c t o de l a a d m in i s t r a c ic S n de A: A p o m o rf in a y B:

D i s u l f i r a m s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t a l a m o ,

GH en p l a s m a y CA en c e r e b r o . A. A po m o rf in a ; n=9,

s a l i n o : n=6. B. D i s u l f i r a m : n=11, s a l i n o : n=11.

— 87 —

q u e a n t e de l a a c t i v i d a d de l a dopamina b e t a - h i d r o x i l a s a , p e r

m anec iendo l a DA a lg o a l t a (120% d e l c o n t r o l , no s i g n i f i c a t i

v e ) , l a SRIH en e l h i p o t â l a m o d i sm in u y e t a m b ié n de 24 a 1 6 , ^ g /

/ p g p r t . Lo mismo o c u r r e con l a GH, de 13 a 0 , 8 n g / m l , p e ro

s i n s e r s i g n i f i c a t i v e . E s t o s e x p e r i m e n t o s c o i n c i d e n con l o

e n c o n t r a d o en e l e x p e r im e n to 6, en e l que l a a d m in is t r ac i< 5 n

de D i s u l f i r a m como c o n t r o l f r e n t e a l a a d m i n i s t r a c i d n de D i s u l

f i r a m + L -dopa p r o d u j o u n a b a j a d a de l a SRIH de 1 8 ,4 a 11 p g /p g

p r t . ( d a t o s no r e p r e s e n t a d o s g r â f i c a m e n t e ) .

En l a F i g u r a 13A se o b s e r v a que e l aumento p r o d u c id o p o r l a

a d m i n i s t r a c i O n de DOPS s o b r e l o s n i v e l e s de NA c e r e b r a l ( p r e c u r

s o r d i r e c t o de l a NA p o r d e s c a r b o x i l a c i O n ) causO un aumento en

p a r a l e l o de l a SRIH, t a n t o a l a d o s i s de 50 como de 100 mg/kg

( e s t a O l t im a d o s i s no se r e p r é s e n t a g r a f i c a m e n t e p o r o b t e n e r s e

r e s u l t a d o s i d O n t i c o s ; SRIH de 15 sube a 24 p g / p g p r t . y l a GH

b a j a de 100 a 5 ,5 n g / m l ) , y u n a b a j a d a en l o s n i v e l e s de GH en

s a n g r e .

E s t o s r e s u l t a d o s p a r e c e n i n d i c a r que l a r e l a c i O n e n t r e NA

y SRIH es l a c o n t r a r i a a l a o b s e r v a d a p a r a l a DA, e s d e c i r , l a

NA p a r e c e t e n e r un e f e c t o p o s i t i v o s o b r e l o s n i v e l e s de â’RIH

en h i p o t a l a m o , m i e n t r a s que s o b r e l a GH su e f e c t o no e s t a n

c l a r o , p r o b a b l e m e n t e p o r e x i s t i r i n t e r a c c i o n e s c o m p lé t a s ( v e r

d i s c u s i O n ) .

SRIHpg/fO prt.

40

30

20

10 -

GHng/m< pi.

Salino OOPS

* p < 0 ,0 1 ;* * p < 0 ,0 5

CAcontrol

100 -

* *

Salino OOPS

100

DA NA

SRIH pg/«g prt.

40

30-

20 -

10

AMT

*p<0,001

GH ng/ml pL

AMT + Cionldina

CAà% control

180?

100-

AMT AMT +Cionldina

100-

AMT AMT

Figura 13

AMT + Cionldina DA

AMT + Clonidina NA

P i g u r a 13. S f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i ( 5 n de A: DO PS y B: AI''IT -i-

+ C l o n i d i n a y AMT s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en

h i p o t a l a m o , GH en p l a s m a y CA en c e r e b r o . A. DOPS:

n=4, s a l i n o : n=4. B. AMT: n=8 , AMT 4- C l o n i d i n a : n=5.

— 89 —

2 . 3 . 1 . A c t i v i d a d de l a s v i a s a l f a - a d r e n é r g i c a s y S o m a t o s t a t i n a

h i p o t a l a rn ica .

G r a c i a s a l a e x i s t e n c i a de f ârm acos que i n t e r a c c i o n a n s e -

l e c t i v a m e n t e s o b r e l a s v i a s a l f a - a d r e n e r g i c a s , se pudo p r o f u n

d i z a r s o b r e e l p a p e l de e s t e s u b s i s t e m a a d r e n é r g i c o en e l con

t r o l de l a SRIH h i p o t a l a m i c a , u n a vez e s t a b l e c i d a l a p o s i b l e

i n f l u e n c i a de l a NA s o b r e e s t a .

P a r a e l l o se p l a n t e a r o n l o s e x p e r i m e n t o s 7 , 8 y 13. En l a

F i g u r a 13B se m u e s t r a e l e f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i d n de AMT y

de AMT + C l o n i d i n a ( a g o n i s t a a l f a - a d r e n e r g i c o ) so b r e l o s n i v e l e s

de DA, NA, SRIH y GH.

M i e n t r a s que ambas Ca t e c o l a m i n a s se e n c u e n t r a n muy d e p l e c -

c i o n a d a s ( a l r e d e d o r d e l 30% d e l c o n t r o l p a r a l a DA y d e l 40%

p a r a l a NA), l a SRIH en e l h i p o t£ l a m o b a j a aprox im adam en te un

33% ( l o c u a l no e s s i g n i f i c a t i v e ) y l a GH p l a s m a t i c a se i n c r e -

m en ta c a s i c in c o v e c e s (d e 38 a 180 n g / m l ) . E s to o c u r r e t a n t o

p a r a l a d o s i s de 300 }ig como p a r a l a de 500 p g / k g ( e s t a u l t i m a

d o s i s no se r e p r é s e n t a g r â f i c a m e n t e p o r c o i n c i d i r l o s r e s u l t a -

dos : SRIH b a j d de 33 a 25 p g /p g p r t . , GH s u b i d s i g n i f i c a t i v a -

mente de 25 a 125 n g / m l ) .

E l e x p e r im e n to 8 , cuyos r e s u l t a d o s se i n d i c a n en l a F i g u r a

14A, n os m u e s t r a c6mo t r a s l a e s t i m u l a c i d n de l a s v i a s a l f a -

- a d r e n é r g i c a s p r o d u c i d a p o r l a a d m i n i s t r a c i ( 5 n de C l o n i d i n a (500

p g / k g ) se p r o d u jo un g r a n aumento de l a GH p l a s m a t i c a (d e 5 a

158 n g /m l ) s i n a p e n a s m o d i f i c a c i d n de l a SRIH h i p o t a l a m i c a (de

13 a 15 ,8 pg/p.g p r t . ) . A l a v e z , ambas C a te c o l a m i n a s p e r m a n e c i e -

SRIH PQ/mq prt.

QH ng/ml pi

40-

10 -

Saiino Clonidina

CAcontrol

100 -

ClonidinaSalino

100

DA NA

♦ p<0,001

B

SRIH pg/ag prt.

GH ng/ml pi.

40-

30-

20 -

10 -

SaWno Fentolamlna

*p < 0 ,0 0 1 ;* * p < 0 ,0 1

CAcontrol

100-

SaWno

100

DA NA

Figura 14

F i g u r a 14. E f e c t o de l a a d r a i n i s t r a c i ( 5 n de A; C l o n i d i n a y B:

F e n t o l a m i n a s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t a l a m o ,

G-H en p l a s m a y CA en c e r e b r o . A. C l o n i d i n a ; n=5,

s a l i n o : n=8. B. F e n t o l a m i n a : n=5, s a l i n o : n=7.

- 91 -

r o n p r a c t i c a m e n t e i n a l t e r a d a s : 120% d e l c o n t r o l p a r a l a DA y

93% p a r a l a NA.

F i n a l m e n t e , e l e x p e r im e n to 13, cuyos r e s u l t a d o s se e x p r e -

sa n en l a F i g u r a H B , nos v i e n e a c o n f i r m a r l a a p a r e n t e funci<5n

de l a s v i a s a l f a - a d r e n e r g i c a s s o b r e l a secreci<5n de GH. E l uso

de l a F e n t o l a m i n a como a g e n t e a l f a - a n t a g o n i s t a d e b e r f a de r e

p o r t â m e s r e s u l t a d o s en c o n c o r d a n c i a con l o s dos e x p e r im e n to s

a n t e r i o r e s ; y e f e c t i v a m e n t e , l a GH en p la sm a baj(5 de m anera

s i g n i f i c a t i v a de 64 a 2 0 ,5 n g /m l , p < 0 , 0 1 , y s i n embargo, l a

SRIH h i p o t a l a m i c a se e l e v d de 11 a 2 3 ,5 p g /p g p r t . , p < 0 ,0 0 1 .

A1 mismo t i e m p o , l o s n i v e l e s de C a t e c o l a m i n a s a p e n a s se ven

m o d i f i c a d o s : 83 y 91% d e l c o n t r o l p a r a DA y NA r e s p e c t i v a m e n t e .

Las v i a s a l f a - a d r e n e r g i c a s , a p e s a r de e s t a r c l a r a m e n t e

i n v o l u c r a d a s en e l c o n t r o l de l a GH, como s u g i e r e n e s t o s r e

s u l t a d o s y l o s de o t r o s a u t o r e s , p a r e c e n a f e c t a r a l a Som atos

t a t i n a h i p o t a l a m i c a de m anera no t a n c o n s i s t a n t e , y a que e l

e f e c t o de l a C l o n i d i n a no p a r e c e muy e s p e c f f i c o , en e l e x p e r i

mento 7 b a j a un poco l a S o m a t o s t a t i n a , y en e l e x p e r im e n to 8

l a s u b e , m i e n t r a s que l a F e n t o l a m i n a l a e l e v a c l a r a m e n t e .

— 92 —

2 . 3 . 2 . A c t i v i d a d de l a s v i a s b e t a - a d r e n é r g i c a s y S o m a t o s t a t i n a

h i n a t a l a rn ica .

P a r a e s c l a r e c e r l a p o s i b l e re lac i< 5 n e n t r e e l s u b s i s t e m a

b e t a - a d r e n é r g i c o y l a SRIH h i p o t a l â m i c a se u t i l i z a r o n f â rm a c o s

e s t i m u l a d o r e s o i n h i b i d o r e s de l a a c t i v i d a d de e s t a s r u t a s f u n -

c i o n a l e s .

Los e x p e r i m e n t o s 11 y 12, cuyos r e s u l t a d o s se e x p r e s a n en

l a s F i g u r a s 15A y 15B nos i n d i c a n que l a e s t i m u l a c i d n de l a s

v i a s b e t a - a d r e n é r g i c a s p o r e l I s o p r o t e r e n o l , y a s e a en r a t a s

p r e t r a t a d a s con AMT o p o r s i s o l o , no p ro d u jo a l t e r a c i o n e s s i g -

n i f i c a t i v a s en e l c o n t e n i d o de SRIH h i p o t a l a m i c a , y a que a p e

s a r de que en e l e x p e r im e n to 11 é s t a b a j a b a s t a n t e , de 33 a

24 p g /u g p r t . , en e l e x p e r im e n to 12 l o s n i v e l e s b a s a l e s y p o s t -

- I s o p r o t e r e n o l son s e m e j a n t e s ( 1 2 ,9 y 10 ,6 r e s p e c t i v a m e n t e ) .

La d o s i s de 3 mg/kg t r a s AMT p r o d u jo e f e c t o s s i m i l a r e s : l a SRIH

disminuyc5 a 2 4 , 4 p g /p g p r t .

En c u a n to a l e f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i d n d e l a g e n te b e t a -

- a g o n i s t a s o b r e l a GH p l a s m a t i c a , e s t a disminuyc5 p o r d e b a j o de

l o s v a l o r e s " c o n t r o l " , p e ro ho de m an e ra s i g n i f i c a t i v a ( 0 ,0 5 4 P

< 0 , l ) . P o r o t r a p a r t e , l o s n i v e l e s de C a te c o l a m i n a s no v a r i a r o n

r e s p e c t o a sus c o n t r ô l e s ( e l e x p e r im e n to 12 p e r d i t l o s v a l o r e s

de C a t e c o l a m i n a s p o r a c c i d e n t e ) .

En l a e x p e r i e n c i a ndmero 14 s e u t i l i z d P r o p a n o l o l como an

t a g o n i s t e b e t a - a d r e n é r g i c o , y en e s t e c a s o , como se puede v e r en

l a F i g u r a 16A, l a SRIH h i p o t a l a m i c a d i sm inu y d de 16 a 8 p g /p g p r t . ,

p < 0 ,0 2 , s i n a l t e r a r s e de m anera s i g n i f i c a t i v a n i l a GH n i l a s Ca

t e c o l a m i n a s .

SRIHpg/»ig prt.

+ P<0,001

GHng/ml pi.

40.

30-

20 -

10-

AMT AMT +

100

IsoproterenolAMT

CA6% control

AMT -t Isoproterenol

100 -

AMTAMT+

IsoproterenolDA

AMTAMT+

IsoproterenolNA

SRIH pg/wg prt.

40

30-

20 -

10 -

GH ng/ml pi.

Salino isoproterenol

100 -

Salino Isoproterenol

Figura 15

F i g u r a 15. E f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i ( 5 n de A: AMT y AMT + I s o

p r o t e r e n o l y B; I s o p r o t e r e n o l s o b r e l o s n i v e l e s de

SRIH en h i p o t â l a m o , GH en p l a s m a y CA en c e r e b r o .

A. AMT; n=8, AMT + I s o p r o t e r e n o l : n=5. B. I s o p r o

t e r e n o l : n=5, s a l i n o : n=4.

Los v a l o r e s de CA en B s e p e r d i e r o n p o r a c c i d e n t e .

SRIHpg/Mg prt.

40-

30-

20 -

10 -

SaNno Propanolol

*p< 0 ,02

B

SRIH pg/ng prt.

Salino

*p<0,001

GHng/ml pi.

1 0 0 -

Salino

GH ng/ml pi.

40-

30-

20

10 -

100

Oisulfiram + L-Dopa

SaKno

CAcontrol

Propanolol

CA à% control

Oisulfiram +L-Oopa

100 -

NADA

236-

100 -

NADA

Figura 16

F i g u r a 16. E f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i o n de A; P r o p a n o l o l y B

D i s u l f i r a m (4 h o r a s ) + L -d o p a (1 h o r a ) s o b r e l o s

n i v e l e s de SRIH en h i p o t a l a m o , GH en p la s m a y CA

en c e r e b r o . A. P r o p a n o l o l ; n=5 , s a l i n o : n=6.

B. D i s u l f i r a m + L -d o p a : n=4, s a l i n o : n=4.

- 95 -

E l c o n j u n t o de e s t o s e x p e r i m e n t o s p a r e c e i n d i c a r que l a s

v i a s b e t a - a d r e n é r g i c a s p o d r f a n t e n e r un p a p e l e s t i m u l a d o r t 6 -

n i c o s o b r e l a SRIH, como se puede c o n c l u i r d e l hecho de que»

e l b lo q u e o de e s t a s v i a s p o r e l P r o p a n o l o l p r o d u z c a un d e s c e n -

so dé l o s n i v e l e s de SRIH en e l h i p o t â l a m o ( v e r d i s c u s i d n ) ,

m i e n t r a s que s o b r e l a GH p l a s m â t i c a p o d r f a n e j e r c e r un p a p e l

i n h i b i t o r i o q u i z a s mediado p o r l a SRIH.

2 . 4 . E v i d e n c i a s de l a e x i s t e n c i a de u n a i n t e r a c c i d n e n t r e

Dopamina y N o r a d r e n a l i n a s o b r e e l c o n t r o l de l a Soma

t o s t a t i n a .

E s t a b l e c i d a l a e x i s t e n c i a de u n a r e l a c i d n c o n c r e t a de l a

DA y l a NA con l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t â l a m o , se p l a n t e #

e l e x p e r im e n to 5 con e l f i n de e s t u d i a r e l e f e c t o de u n a v a -

r i a c i # n s i m u l t a n e a y antag<5nica de l a DA y l a NA s o b r e l a SRIH,

de m anera que se p u d i e r a d e t e r m i n a r e l e f e c t o corabinado de am-

bos n e u r o t r a n s m i s o r e s , y a que l a s e x p e r i e n c i a s a n t e r i o r e s se

h a b f a n d i s e n a d o de m anera que se a l t e r a r a n ambas b io a m i n a s de

i g u a l fo rm a , o u n a s o l a de e l l a s , d e ja n d o l a o t r a i n a l t e r a d a .

En e s t a o c a s i d n , l a a d m i n i s t r a c i # n de D i s u l f i r a m + L -dopa

(1 h o r a ) , p r o d u j o n i v e l e s b a j o s de NA y a l t o s de DA. La F i g u r a

16B m u e s t r a l o s r e s u l t a d o s de e s t a e x p e r i e n c i a . J u n t o a n i v e l e s

d e l 236% de in c r e m e n t o de l a DA y 45% de dec rem e n to de l a NA,

l a SRIH h i p o t a l a m i c a p e rm a n e c i# s i n a l t e r a r : 2 3 ,5 c o n t r o l t r e n

t e a 2 6 ,5 p g /p g p r t . , de l a s t r a t a d a s , m i e n t r a s que l a GH d i s -

rainuy# l i g e r a r a e n t e .

- 96 -

E r a de e s p e r a r , a l a v i s t a de l o s r e s u l t a d o s a n t e r i o r e s ,

que l a SRIH d i s m i n u y e r a d r a s t i c amente p o r e l e f e c t o combinado

de u n a DA e l e v a d a y u n a NA b a j a , y s i n embargo l a SRIH pernpa-

n e c i # a p e n a s a l t e r a d a .

E s t o p a r e c e i n d i c a r que e s n e c e s a r i a l a e x i s t e n c i a de un

e q u i l i b r i a DA/NA p a r a m a n te n e r l o s n i v e l e s de SRIH, y que s # l o

cuando e s t e e q u i l i b r i a se rompe, como t r a s u n a g r a n e l e v a c i # n

o d ism inuc i(5n de ambas C a t e c o l a m i n a s o de u n a de e l l a s s e l e c t i -

v a m e n te , l o s n i v e l e s de SRIH s e ven m o d i f i c a d o s .

En c u a n to a l o s n i v e l e s de GH, e s p o s i b l e a p l i c a r e l m is

mo r a z o n a m i e n t o , quedando l a p o s i b i l i d a d de que e s a d i s m in u c i d n

l i g e r a . s e a d e b i d a a u n a a l t e r a c i # n en e l GRP.

Las t a b l a s IX y X s u m a r iz a n l o s r e s u l t a d o s o b t e n i d o s t r a s

e l t r a t a m i e n t o de d i v e r s e s d r o g a s m o d i f i c a d o r a s d e l rae tabo l ism o

c a t e c o l a m i n é r g i c o y de a q u e l l a s m o d i f i c a d o r s de su f u n c i # n (ago-

n i s t a s y a n t a g o n i s t e s ) s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t a l a m o

y de GH en p la sm a .

- 97 —

T a b l a IX. E f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i ( 5 n de d r o g a s m o d i f i c a d o r a s

d e l m etab o l i sm o de l a s C a t e c o l a m i n a s s o b r e l a Soma

t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a y l a Hormona de C r e c i m i e n to

p l a s m a t i c a .

TRATAMIENTO N SRIH ( p g / p g p r t . ) GH ( n g / m l )

(2 - E .S .M .)

S a l i n o

AMT

11

17

2 0 . 7 - 1 ,2

3 0 .7 - 3 , 1 *

55 - 2 4 ,2

2 5 ,6 - 8 ,1

S a l i n o

L-dopa

10

5

17 - 1 ,9

9 , 7 - 1̂ )

12 ,7 - 6 ,3

119 - 4 6 ,7 °

S a l i n o 5

D i s u l f i r a m + 4L -d op a (2 h . )

1 8 ,4 - 1 ,2

8 , 5 - 1 ,1 ^

10 ,7 - 1 ,8

0 ,8 - 0 ^

S a l i n o

DOPS

17 ,3 - 0 , 8

2 6 ,2 i 1 ,5 *

135 - 4 2 ,7

5 - 4 ,6 °

S a l i n o

D i s u l f i r a m

11

11

2 4 , 4 - 2 , 4

16 ,3 - 2®-

1 3 ,4 - 11 ,4

0 ,8 - 0

S a l i n o

D i s u l f i r a m +

2 3 .5 - 5

2 6 .5 - 4 , 7

10,2 : 2 , 4

4 ,6 t 0 , 9

a . p < 0 ,0 1 ; b . p< 0 ,0 0 1 ; c . p<0,05

— 98 —

T a b l a X. E f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i d n de d r o g a s m o d i f i c a d o r a s

d e ' l a funci(5n c a t e c o l a m i n é r g i c a s o b r e l a S o m a to s ta

t i n a h i p o t a l a m i c a y l a Hormona de C r e c i m i e n t o plas»-

m â t i c a .

TRATAMIENTO N SRIH (p g / | ig p r t . ) GH ( n g /m l )

{1 i E .S .M .)

AMT

AMT +A p om o rf in a

3 3 ,7 - 3 , 4

20,6 i 2,9&

3 8 ,9 - 17 ,5

12 , 6 ± 5 , 3

S a l i n o

A pom orf ina

15 ,8 t 1 ,5

9 - 1 ,7^

60 - 20

4 4 ,7 - 2 1 ,3

AMT

AMT + C l o n i d i n a

3 3 ,7 - 3 , 4

2 2 ,3 - 0 ,5

3 8 ,9 - 17,5

1 82 ,4 - 18°

S a l i n o

C l o n i d i n a

13 - 0 , 6

15 ,8 î 1 ,2

5 - 0 , 7

158 i 13 ,3°

S a l i n o

F e n t o l a m i n a

11 - 0 , 5

2 3 ,5 - 0 , 6 °

64 - 28

2 0 ,5 - 6^

AMT 8

AMT + 5I s o p r o t e r e n o l

3 3 ,7 i 3 , 4

2 4 ,5 - 3 ,2

3 8 ,9 - 17,5

10 î 6

- 99 -

T a b l a X. C o n t i n u a c i d n : e f e c t o de l a a d m i n i s t r a c i ( 5 n de d r o g a s

m o d i f i c a d o r a s de l a funci(5n c a t e c o l a m i n é r g i c a s o b r e

l a S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a y l a Hormona de C r e ô ï -

m ien to p l a s m a t i c a .

TRATAMIENTO N SRIH ( P ë / p g p r t . )

(X ± E.

GH ( n g /m l )

S .M .)

S a l i n o 4 12,9 i ' 1 3 9 ,5 - 15 ,6

I s o p r o t e r e n o l 5 ^ 0 , 4 13 - 8 , 9

S a l i n o 6 16 —. 1 » 8 ̂ 12 ± 6

P r o p a n o l o l 5 8 ,1 1 1^ 7 ,2 - 2 ,8

a . p < 0 ,0 2 ; b . p < 0 ,0 1 ; c . p<0,001

- 100 -

3 . C o n te n id o a l o l a r g o de un c i c l o u l t r a d i a n o de S o m a t o s t a t i n a

y C a t e c o l a m i n a s en e l h i p o t a l a m o y de Hormona de C r e c i m i e n to

en p l a s m a .

La F i g u r a 17 m u e s t r a e l p e r f i l de v a r i a c i ( 5 n h o r a r i a de l o s

n i v e l e s p l a s m a t i c o s de GH e h i p o t a l # m i c o s de SRIH a l o l a r g o d e l

i n t e r v a l o 9 ,3 0 - 14 ,30 h o r a s .

En l a t a b l a XI se d e t a l l a n l o s v a l o r e s n u m ë r ic o s p a r a c a d a

p u n to de l a s f i g u r a s 17 y 18. Se a p r e c i a u n a c i c l i c i d a d de l a

GH en s a n g r e , con r i t m o s de 1-2 h o r a s : 9 ,3 0 a 11, 11 a 12 y 12 ,30

a 1 4 ,3 0 ; y p i c o s de se c re c i (5 n mâxima a l a s 1 0 ,3 0 , 11 ,30 y 13 h o r a s ,

m i e n t r a s que e l c o n t e n i d o de SRIH h i p o t a l a m i c a no t i e n e u n a v a r i a -

ci(5n c f c l i c a o b v i a a l o l a r g o de e s t e mismo p e r f o d o .

En l a F i g u r a 18 se s e h a l a n l o s n i v e l e s de NA y DA h i p o t a l â m i -

c a s d u r a n t e e l mismo t i e m p o , o b s e r v a n d o s e un c i c l o de a p ro x im a d a

mente dos h o r a s de d u r a c i d n p a r a l a DA, de 10 a 12 y 12 a 14 h o r a s ,

y maximos a l a s 11 y 14 h o r a s . La NA s i n embargo, no p a r e c e t e n e r

u n a r i t m i c i d a d é v i d e n t e a l o l a r g o de e s t e mismo p e r f o d o de t i e m

p o .

Se r e a l i z a r o n p r u e b a s de R e g r e s i d n L i n e a l s e p a r a d a s ^ p a r a l o s

s i g u i e n t e s p a r a m e t r o s : t iem po y n i v e l e s de SRIH, t iem po y n i v e l e s

de DA, t iem po y n i v e l e s de NA. Se o b s e r v # u n a c o r r e l a c i d n i n v e r s a

s i g n i f i c a t i v a e n t r e e l t iem po 9 , 3 0 - 11 ,30 y l o s n i v e l e s de SRIH

en h i p o t a l a m o : C o e f i c i e n t e de C o r r e l a c i # n (CC)= - 5 , 8 ; t = 3 , 4 y u n a

p ( 0 , 0 1 ; y u n a c o r r e l a c i # n d i r e c t a e n t r e l o s t i e m p o s 12 - 1 4 ,3 0 y

e l c o n t e n i d o h i p o t a l a m i c o de SRIH, CC= 5 , 2 ; t= 8 , 6 y u n a p < 0 ,0 0 1 .

G3H

80 "

40

20 -

SRIHprt.

25 -

2 0 -

15-

1 0 -

rrr

Figura 17

F ' i g u r a 17. C o n c e n t r a c i o n e s de GH an p la s m a y SRIH en h i p o t a l a m o

m ed id as a l o l a r g o de c in c o h o r a s ( p a r a h a c e r p a t e n t e

mas de un c i c l o u l t r a d i a n o de GH). Cada p u n to r e p r é

s e n t a l a m e d ia t e r r o r e s t â n d a r de 4 - 13 a n i m a l e s .

La i f n e a h o r i z o n t a l d i s c o n t i n u a es l a m ed ia de t o d o s

l e s v a l o r e s o b t e n i d o s de 9 ,3 0 a 1 4 ,3 0 .

NA% x ■'501

125*

100 -

75-

50-

DA% X 1501

125

100-

75-

50-

I I ' - --------- I-------------1--------------- 1-------------n --------------- 1--------- -— ,---------------1---------------- ,------------------------9 .30 10.00 10.30 11.00 11.30 12.00 12.30 13.00 13.30 14.00 14.30 HORA

Figura 18

F i g u r a 18. N i v e l e s de N o r a d r e n a l i n a (NA) y Dopamina (DA) en

h i p o t a l a m o a l o l a r g o de c i n c o h o r a s . Los r e s u l

t a d o s s e e x p r e s a n como i n c r e m e n t o o d e c rem en to

p e r c e n t u a l r e s p e c t o a l a m ed ia de t o d o s l o s v a

l o r e s o b t e n i d o s , tom ada é s t a como 100%. 21 t r a z o

d i s c o n t f n u o que c i r c u n d a l a s v a r i a c i o n e s en l a

c o n c e n t r a c i d n de DA r e p r é s e n t a e l c i c l o i d e a l

u l t r a d i a n o p a r a e s t a b i o a m i n a .

- 103 -

P a r a e l t i e m p o 12 - 14 h o r a s , se o b s e r v é u n a c o r r e l a c i d n

d i r e c t a con l o s n i v e l e s de DA, CC= 3 0 , 5 ; t= 3 ,2 y u n a p < 0 ,0 2 ;

y e n t r e e l t iem p o 10 ,30 - 1 2 ,3 0 y l o s n i v e l e s de NA, CC= 2 ? , 3 ;

t= 2 , 3 y u n a p < 0 ,0 2 .

A p l i c a n d o e l mismo t e s t de r e g r e s i d n l i n e a l a l o s c in c o

p a r a m e t r o s ( t i e m p o , SRIH, DA, NA y G-H) tornados dos a d o s , no se

ha l l (5 u n a c o r r e la c i< 5 n s i g n i f i c a t i v a p a r a n ing u n o de e l l e s , l o

c u a l no q u i e r e d e c i r que no se dë u n a r e l a c i d n e n t r e l a s C a t e

c o l a m i n a s , l a GH y l a SRIH, p e ro que en l a s c o n d i c i o n e s e x p é r i

m e n t a l e s d a d a s , ë s t a no s e h a hecho a p a r e n t e .

P r o b a b l e m e n t e , ademas , e s t o puede q u e r e r d e c i r que l a s f l u c -

t u a c i o n e s p u l s a t i l e s de l a GH y l a b a j a d a y s u b i d a de l o s n i v e l e s

i n t r a - h i p o t a l a m i c o s de SRIH no son c o n s e c u e n c i a e x c l u s i v a de l a s

f l u c t u a c i o n e s de l a s C a t e c o l a m i n a s c e n t r a l e s , s i n o que o t r o s f a c -

t o r e s ( d i s t i n t o s n e u r o t r a n s m i s o r e s , n e u r o p é p t i d o s , e l G R P . . . ) en

t r a n t a m b ië n en j u e g o .

De c u a l q u i e r fo rm a , no se pueden d e s c a r t a r a l g u n a s r e l a c i o -

n e s mas o menos a p a r e n t e s que se d i s c u t i r a n mas a d e l a n t e .

- 104 -

T a b l a XI. N i v e l e s de S o m a t o s t a t i n a y C a t e c o l a m i n a s en h i p o t a l a m o

y de Hormona de C r e c i m i e n t o en p la s m a a l o l a r g o d e l

p e r f o d o 9 ,3 0 - 14 ,30 h o r a s . „

HORA N SRIH GH • DA NA

( p g / u g p r t . ) ( n g / m l ) (% C o n t r o l )

(.1 - E .S .M . )

9 , 3 0 6 • 22,1 + 3 , 4 2 , 6 + 1 ,4 106 + 35 9 3 ,5 + 46

10 6 13,3 1 ,8 2 9 ,3 + 6,1 78 + 2 1 ,8 79 + 16

10 ,30 7 10 ,7 + 1 73,1 + 2 4 ,5 102 + 40 5 9 ,8 + 13

11 10 11,6 + 2 ,3 5 ,5 +1,1 109 + 11 112 + 17

11 ,3 0 7 8 , 5 + 1,5 64,1 + 29 100 + 3 8 ,9 100 + 9

12 11 12,9 + 2 ,3 12 ,3 + 6 53 + 17 117 + 22

1 2 ,3 0 13 14,5 + 2,1 1 0 ,7 + 4 ,5 85 + 13 122 + 38

13 12 2 1 ,2 + 1,8 9 2 ,3 + 29,1 76 + 30 81 -f 13

1 3 ,3 0 6 2 0 ,3+ 2 ,3 65 + 18,2 89 + 25 + 41

14 7 23 + 2 , 4 5 2 ,4 + 28 129 + 22 85 + 38

1 4 ,30 4 2 5 ,6 + 0 ,5 0 , 8 + 0 _a—

a . Las m u e s t r a s de C a t e c o l a m i n a s p a r a e s o s t i e m p o s se p e r d i e r o n p o r a c c i d e n t e .

- 105 -

N o t a s .

1. E l d e s a r r o l l o de e s t a t é c n i c a h a s u p u e s t o su u t i l i z a c i d % en p r o t o c o l o s de i n v e s t i g a c i d n p a r a l e l o s l l e v a d o s a cabo en e s t e mismo l a b o r a t o r i o .

2 . Se o b s e r v a n d i f e r e n c i a s en l o s n i v e l e s b a s a l e s e n t r e e l e x p e r im e n to 1 y 2 d e b id o a l a y a m en c ion ad a p u l s a t i l i d a d en l a s e c r e c i d n de e s t a horm ona.

3 . Los e f e c t o s d e l D i s u l f i r a m s e d i s c u t e n mas a d e l a n t e .

4. C o n v e n c io n a lm e n te r e p r é s e n t â m e s l o s v a l o r e s i n d é t e c t a b l e s como m enores de 0 , 8 n g / m l , l i m i t e i n f e r i o r de s e n s i b l i d a d de n u e s t r a c u r v a p a t r o n en e l RIA de GH.

D I S G U S I O N .

- 107 -

DISGUSION.

1. P u e s t a a p u n to d e l r a d io in m u n o e n s a y o de S o m a t o s t a t i n a . '

E l método de i o d a c i d n m e d ia n te l a c t o p e r o x i d a s a p e r m i t s o b t e n e r

u n a hormona m arcad a r a d i a c t i v a menos a l t e r a d a que con o t r o s m ëtodos

de m a r c a j e r a d i a c t i v o en donde se u t i l i z a n o x i d a n t e s mas d r a s t i c o s

(como l a c lo r a m in a - T d e l método Greenwood) que s u e l e n a l t e r a r tam -

b i ë n en ex ce so l a i n m u n o r r e a c t i v i d a d de l a hormona r a d i a c t i v a p o r

ox idac i(5n de a lg u n o de l o s r e s i d u e s que p a r t i c i p a n en l a i n t e r a c -

ci(5n con e l a n t i c u e r p o . De a h f que e l p e r f i l de e l u c i d n c ro m a to -

g r a f i c a en CM-22 m u e s t r e un p i c o de hormona d a n ad a menor que e l de

hormona en b u en aa c o n d i c i o n e s i n m u n o l o g i c a s .

En d e f i n i t i v a , l o que i n t e r e s a e s que l a hormona m arcad a s e a

c ap a z de r e a c c i o n a r con e l a n t i c u e r p o de fo rm a a n a l o g a a como l o

h a r a l a fo rm a enddgena de l a horm ona, de t a l m anera que p u ed a com-

p e t i r con é s t a . E s to se d e m u e s t r a m e d ia n t e l a o b t e n c i d n de u n a c u r

v a p a t r d n donde c a n t i d a d e s c r e c i e n t e s de hormona " f r f a " son e s p a

c e s de d e s p l a z a r p r o g r e s i v a m e n t e a c a n t i d a d e s c o n s t a n t e s de hormo

n a m arc ad a .

Se e l i g e como método de p u r i f i c a c i d n de l a m e z c la de r e a c c i d n

de iodac i(5n l a c r o m a t o g r a f f a de cambio i d n i c o p o rq u e e s mas r a p i -

da y no se p ro d u c e n i n t e r f e r e n c i a s con l a r é s i n a como o c u r r e con

l o s g e l e s de c r o m a t o g r a f f a p o r e x c l u s i o n m o l e c u l a r ( 1 9 9 ) .

Todas e s t a s p r e c a u c i o n e s , no s i e m p r e o b s e r v a d a s con o t r a s

hormonas p e p t f d i c a s , s e toman p o r l a i m p o r t a n c i a que t i e n e e l que

l a hormona m arcada s e a l o mas p u r a y e s t a b l e p o s i b l e , p a r a o b t e n e r

— 108 —

s e n s i b i l i d a d e s a d e c u a d a s ( eri n u e s t r o RIA se t r a b a j a con r a n g o s de

c o n c e n t r a c i ( 5 n de p g / m l ) .

E s t e f a c t o r de l a s e n s i b i l i d a d d e l mëtodo v i e n e t a m b ie n d e -

t e r m in a d o p o r l a a c t i v i d a d e s p e c f f i c a de l a hormona r a d i a c t i v a ,

que a l s e r de 72 p C i / p g N -T i r -S R IH , e s t a muy p o r enc im a de l o s

mfnimos e s t a b l e c i d o s de 30 p C i / u g de hormona ( 1 9 4 ) .

Es i m p o r t a n t e t a m b ie n que e l a n t i c u e r p o se p u e d a u t i l i z a r l o

mas d i l u f d o p o s i b l e p a r a e v i t a r i n t e r a c c i o n e s no d e s e a b l e s e n t r e

l a s m o lë c u l a s d e l a n t i c u e r p o y l a s de horm ona. E s t a s i n t e r a c c i o

n e s s e r f an d e b i d a s a un e x c e s i v o niîmero de m o lé c u l a s de a n t i c u e r

po en comparaci(5n con l a s de horm ona, que p o d r f a n d a r l u g a r a p r e -

c i p i t a c i o n e s i n e s p e c f f i c a s . En l a p r a c t i c a , l a s c o n c e n t r a c i o n e s

de a n t i c u e r p o d p t im a s v a r f a n se gu n l a c a l i d a d de ë s t e y de l a h o r

mona en c u e s t i d n . N u e s t r o s t f t u l o s de 1 /2 8 .0 0 0 y 1 /3 5 .0 0 0 p a r a e l

Ab 6 y Ab M r e s p e c t i v a m e n t e , quedan d e n t r o de l o no rm al p a r a o t r o s

r a d io in m u n o e n s a y o s d e s c r i t o s (200 2 0 1 ) .

E l r a h g a que se o b t i e n e p a r a n u e s t r a c u r v a patrc5n, de 10 a

5 .1 2 0 p g /m l es s u f i c i e n t e y a que a b a r c a h o lg a d a m e n te l o s v a l o r e s

n o r m a le s b a s a l e s o e s t i m u l a d o s de SRIH en h i p o t a l a m o ( d i l u f d o s

p r e v i a m e n t e ) .

Po r o t r a p a r t e , e l hecho de que l a s m u e s t r a s de h ip o t a l a m o

de r a t a en c o n c e n t r a c i o n e s c r e c i e n t e s den r e c t a s p a r a l e l a s a l a

de l a c u r v a p a t r o n , n o s i n d i c a que l o que es taraos d e te rm in a n d o en

e l t e j i d o h i p o t a l a m i c o es i d é n t i c o a l a hormona de r e f e r e n d a u t i -

l i z a d a , a l menos en c u a n to a su c a p a c i d a d p a r a r e a c c i o n a r con e l

a n t i c u e r p o , o l o que e s l o mismo, su i n m u n o r r e a c t i v i d a d .

- 109 -

O t r a p r u e b a de l a i d e n t i d a d e n t r e hormona enddgena y hormona

e s t a n d a r e s e l que ambas p o se e n un c o m p o r tam ien to c r o m a t o g r a f i c o

seme j a n t e en c r o m a t o g r a f f a en Sephadex G-25', como m u e s t r a n x d a t o s

p u b l i c a d o s p o r n u e s t r o l a b o r a t o r i o ( 2 0 2 ) .

En d e f i n i t i v a , hemos d e s a r r o l l a d o un método de RIA p a r a so

m a t o s t a t i n a que nos p e r m i t s v a l o r a r e l c o n t e n i d o de e s t a hormona

en e l h i p o t a l a m o de r a t a (y o t r o s t e j i d o s ) con e n t e r a f i a b i l i d a d

y r e p r o d u c i b i l i d a d de a c u e rd o con l o s c o n t r ô l e s de c a l i d a d d e l

método de RIA que se d e s c r i b e n en l a l i t e r a t u r a (1 9 4 , 195) .

— 110 —

2. Modulaci(5n de l a s C a t e c o l a m i n a s c e r e b r a l e s ; E f e c t o s s o b r e l a

S o m a t o s t a t i n a h i p o t a l a m i c a y l a horm ona de c r e c i m i e n t o p l a s

m a t i c a .

La s e r i e de e x p e r i m e n t o s r e a l i z a d o s con e l i n h i b i d o r (AMT)

y e l p r e c u r s o r (L -d o p a ) de l a b i o s f n t e s i s de DA y NA (2 0 3 , 2 0 4 ) ,

p a r e c e n e s t a b l e c e r una r e l a c i d n i n v e r s a e n t r e n i v e l e s en c e r e b r o

de c a t e c o l a m i n a s e h i p o t a l a m i c o s de SRIH; m i e n t r a s que con l a GH,

como y a han d em o s trad o o t r o s a u t o r e s en l a r a t a y o t r a s e s p e c i e s

( 1 4 6 - 1 4 8 , 1 5 0 -1 5 2 ) , l a r e l a c i d n es d i r e c t a : un i n c r e m e n to de c a

t e c o l a m i n a s en c e r e b r o p r o d u c e un i n c r e m e n t o en l a GH p l a s m a t i c a

y v i c e v e r s a .

E s to p a r e c e s u g e r i r que e l e f e c t o g l o b a l de l a s v i a s c a t e c o -

l a m i n é r g i c a s s o b r e e l c o n t e n i d o h i p o t a l a m i c o de SRIH es de t i p o

n e g a t i v o . Ahora b i e n , e l que e s t a i n f l u e n c i a s e a a n i v e l de s f n -

t e s i s y / o l i b e r a c i c 5 n de SRIH es mas d i f f c i l de a c l a r a r : £,se a c u -

m ula SRIH en e l h i p o ta l a m o t r a s e l t r a t a m i e n t o con AMT p o r un a

mayor s f n t e s i s y / o p o r u n a menor l i b e r a c i d n ? , y es mas, &una ma

y o r s f n t e s i s p r o d u c i r i a u n a mayor l i b e r a c i ( 5 n , y v i c e v e r s a ? .

S i o bse rv âm es que a l a vez s e p r o d u c e un d e s c e n s o en l o s .

n i v e l e s p l a s m a t i c o s de GH, hemos de c o n s i d e r a r que d i f i c i l m e n t e

puede h a b e r u na menor l i b e r a c i d n de SRIH a l a s a n g r e p o r t a - h i p o -

f i s a r i a t r a s AMT. E l mismo fendm eno, p e r o a l a i n v e r s a , s e o b s e r v a

t r a s l a a d m i n i s t r a c i o n de L -d o p a .

E x i s t e n v a r i a s e x p l i c a c i o n e s p o s i b l e s . Se h a o b se rv a d o que

l a a d m i n i s t r a c i O n de GABA p r o d u c e un aumento en e l c o n t e n i d o h i

p o t a l a m i c o de SRIH y de GH en s a n g r e en r a t a s ( 1 2 2 ) , y que e s t e

- 111 -

mismo n e u r o t r a n s m i s o r i n h i b e l a l i b e r a c i O n de O s ta hormona h i p o

t a l a m i c a en c u l t i v e s de c e l u l a s h i p o t a l â m i c a s ( 1 2 3 ) . E s to s e pu e

de i n t e r p r e t a r como que e l GABA t i e n e un e f e c t o i n h i b i d o r s o b r e

l a l i b e r a c i O n de SRIH, l o que a su v e z p ro d u c e un aumento en e l

c o n t e n i d o h i p o t a l a m i c o de e s t a hormona y u n a d e s i n h i b i c i O n de l a

GH ( 1 2 2 ) .

S i a p l i c a m o s e l mismo r a z o n a m i e n t o p a r a e x p l i c a r e l e f e c t o

de l a AMT y l a L -do p a s o b r e l a GH, nos en co n t ram o s con que s 6 l o

s i invocamos l a e x i s t e n c i a de un segundo f a c t o r en j u e g o , e l GRE,

s e puede a c l a r a r e s t e m écanism e: no e s p o s i b l e que l a SRIH se

e n c u e n t r e aum en tada en e l h i p o t a l a m o p o rq u e su l i b e r a c i d n en l a

EM se h a l l e d i s m i n u f d a y a l a vez e s t é i n h i b i e n d o mas a l a GH.

P o r t a n t o , e s t e e f e c t o de l a AMT s e r f a d e b id o a que e l GRE

se e n c o n t r a r é d i s m in u f d o en su a c t i v i d a d , l o que s u p o n d r f a u n a

l i b e r a c i é n de GH t a m b ie n d i s m i n u f d a . En e f e c t o , a lg u n o s a u t o r e s

han d em o s tra d o que e s t e GRE e s c a t e c o l a m i n a s - d e p e n d i e n t e : s i se

a d m i n i s t r a AMT o c l o r p r o m a c i n a a r a t a s c o n s c i e n t e s , e l p u l s o r f t -

mico de GH d e s a p a r e c e , y no se r e s t a b l e c e p o r a d m i n i s t r a c i é n de

a n t i -S R IH ( 2 0 5 ) , i n d i c a n d o que e s e l GRE e l que se e n c u e n t r a d i s

minufdo p o r d e f e c t o de c a t e c o l a m i n a s , y que p o r t a n t o no e s po

s i b l e m a n te n e r l a p u l s a t i l i d a d . Un hecho que c o r r o b o r a que e s t a

p u l s a t i l i d a d depende de l a i n t e g r i d a d f u n c i o n a l d e l GRE e s que

l a a d m i n i s t r a c i é n de a n t i - S R I H es i n c a p a z de a b o l i r l a ( 6 6 ) . P o r

t a n t o , y seg un e s t o , se p o d r f a c o n c l u i r que e l e f e c t o de d i s m i -

n u c i é n y aumento de GH t r a s AMT y L -d o p a r e s p e c t i v a m e n t e , e s t a

mediado p o r e l GRE, t e n i e n d o l a SRIH u n a s i g n i f i c a c i é n f u n c i o n a l

s e c u n d a r i a como m e d ia d o r a de l o s e f e c t o s de l a s c a t e c o l a m i n a s

- 112 -

s o b r e l a GH en l a h i p é f i s i s .

E x i s t e t a m b ie n l a p o s i b i l i d a d de que l a p r o p i a SRIH i n f l u y a

s o b r e e l GRE de fo rm a n e g a t i v a (7 0 ) como se h a d e s c r i t o p a r a e l

TRH ( 5 5 ) . Hay d a t o s a n a t é m i c o s que p e r m i t e n e s t a h i p é t e s i s : en e l

n u c l e o v e n t r o m e d i a l h i p o t a l a m i c o , zona donde a lg u n o s a u t o r e s han

l o c a l i z a d o l a a c t i v i d a d b i o l é g i c a de GRE ( 7 5 , 2 0 6 ) , hay u n a g r a n

i n e r v a c i é n s o m a t o s t a t i n é r g i c a cuy a s i g n i f i c a c i é n f u n c i o n a l se d e s -

co n o ce (19 ) que p o d r f a m e d i a r u n a i n f l u e n c i a de l a SRIH s o b r e l a s

n e u r o n a s p r o d u c t o r a s de GRE. De e s t a fo rm a , l a SRIH, m o du lada p o r

l a s c a t e c o l a m i n a s a f e c t a r f a a su v e z a l GRE ( e l c u a l puede v e r s e

i n f l u f d o p o r l a s c a t e c o l a m i n a s ) , o r i g i n a n d o e s t e c o n j u n t o de i n

t e r a c c i o n e s u n a r e s p u e s t a c o n c r e t a de l a c e l u l a s o m a t o t r o p a h i p o -

f i s a r i a .

S i n embargo, s e puede a r g ü f r que u n a mayor c o n c e n t r a c i é n h i

p o t a l a m i c a de SRIH t r a s AMT no s i g n i f i c a n e c e s a r i a m e n t e e l que

h a y a u n a menor l i b e r a c i é n , puede s e r d e b i d a a u n a mayor s f n t e s i s

que a su v e z p rovoque u n a mayor l i b e r a c i é n , es d e c i r , que l a t r a n s -

m i s i é n p e p t i d é r g i c a de t i p o s o m a t o s t a t i n é r g i c o se e n c u e n t r e a c t i -

v a d a a l d e s a p a r e c e r l a i n h i b i c i d n c a t e c o l a m i n é r g i c a t r a s l a AT4T,

y que o c u r r a l o c o n t r a r i o cuando se a d m i n i s t r a L-dopa.-

Se h a o b s e r v a d o que l a l i b e r a c i é n de SRIH de c u l t i v e s n e u -

r o n a l e s p r o d u c i d a p o r e s t f m u l o s d e s p o l a r i z a n t e s (K*) sc5lo supone

a l r e d e d o r de un 2% d e l c o n t e n i d o t i s u l a r t o t a l ( 1 1 9 ) , l o c u a l

puede q u e r e r d e c i r que u n a mayor l i b e r a c i é n no t i e n e p o r qué a -

f e c t a r a p r e c i a b l e m e n t e l o s n i v e l e s h i p o t a l a m i c o s de SRIH, d i s m i -

n u y é n d o lo s o s t e n s i b l e r a e n t e . Po r e l c o n t r a r i o , un mayor acumulo

p o r una mayor s f n t e s i s s i que p o d r f a a f e c t a r l a l i b e r a c i é n b a s a i

- 113 -

de e s t a hormona a t r a v é s de m écanism es de a u to r r e g u la c i< 5 n i n t r a -

n e u r o n a l .

E s t a p r o p u e s t a v i e n e apoy ad a ademas p o r l a o b s e r v a t io n ? de que

l a i n y e c c iO n de r e s e r p i n a , i n i i i b i d o r de l a fu n c iO n c a t e c o l a m i n é r -

g i c a (y s e r o t o n i n O r g i c a ) , p r o v o c a un a d i sm in u c iO n de l a G-H que se

b l o q u e a p o r l a a d m i n i s t r a c i O n de a n t i - S R I H , l o que i n d i c a que es

l a SRIH l a que e s t a mediando e l e f e c t o de l a r e s e r p i n a ( 2 0 5 ) . Lo

mismo puede o c u r r i r cuando l a a c t i v i d a d c a t e c o l a m i n é r g i c a e s t é

b l o q u e a d a p o r l a AMT: que l a l i b e r a t i o n de SRIH e s t é aum en tad a

t a m b ie n y p r o d u z c a u n a d i sm in u c iO n de G-H. No se puede d e s t a r t a r un

e f e c t o de l a s e r o t o n i n a en l a acc iO n de l a r e s e r p i n a s o b r e l a GH a

p e s a r de que se h a d e m o s trad o que l a a c t i v i d a d de e s t a s o b r e l a GH

depende de s u s p r o p i e d a d e s a n t i c a t e c o l a m i n é r g i c a s y no a n t i s e r o -

t o n i n é r g i c a s ( l 4 8 ) ,

Ambas e x p l i c a c i o n e s no son i n c o m p a t i b l e s , y p o r t a n t o es po-

s i b l e e x p l i c a r e l mecanismo p o r u n a de l a s dos fo rm as o p o r ambas;

que l a a c t i v i d a d de GRE se e n c u e n t r e d i s m i n u f d a en p a r t e , y que

l a de SRIH se e n c u e n t r e aum entada en p a r t e a l a vez t r a s l a admi-

n i s t r a c i O n de AMT y que o c u r r a l o c o n t r a r i o cuando se a d m i n i s t r e

L -d op a .

En e l s i g u i e n t e cu ad ro se s u m a r iz a n e s t a s c o n c l u s i o n e s ;

C ATEG OLAMINAS^^^^^^^^^

^^^^TSRIH

+ GH

— 1 1 4 "

La a c t i v i d a d d o p a m i n é r g i c a p a r e c e a su vez e j e r c e r u n a i n f l u -

e n c i a n e g a t i v a s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t é l a m o , como i n d i -

c an n u e s t r o s r e s u l t a d o s , Hemos o b se rv a d o t a m b ie n u na d ism in u c iO n

de l o s n i v e l e s p l a s m O t i c o s de GH (aunque no s i g n i f i c a t i v a ) • Ambos

d a t o s s u g i e r e n que l a DA e s t i m u l a l a l i b e r a c i O n de SRIH a l a s a n -

g r e p o r t a y que é s t a i n h i b e l a l i b e r a c i O n de GH.

E f e c t i v a m e n t e , d i v e r s e s a u t o r e s han e n c o n t r a d o un e f e c t o e s -

t i m u l a d o r de l a DA s o b r e l a l i b e r a c i O n de SRIH en c u l t i v o s " i n

v i t r o " 0 en a n i m a l e s a n e s t e s i a d o s , que e x p l i c a r f a e s t e e f e c t o i n -

h i b i d o r de l a DA s o b r e l a GH, como o t r o s a u t o r e s h an s e h a l a d o tam

b i e n ( 1 1 6 - 1 1 8 , 15 3 ) .

S in embargo, d e b id o a que un e s t f m u l o l i b e r a d o r s o b r e l a s

n e u r o n a s SRIH no p a r e c e a f e c t a r t a n t o a l o s n i v e l e s i n t r a h i p o t a l a -

m icos de e s t a hormona como y a se h a i n d i c a d o ( 1 1 9 ) , y que no t o d o s

l o s a u t o r e s h an e n c o n t r a d o un e f e c t o c l a r o de l a DA s o b r e l a GH o

l a SRIH ( 6 5 , 146, 147, 172) , c abe s u g e r i r o t r a e x p l i c a c i O n a e s t o s

r e s u l t a d o s , quizOs un poco mas c o m p lé t a , p e ro mas p l a u s i b l e : l o s

t e r m i n a l e s d o p a m in é r g i c o s a n i v e l de l a EM t e n d r f a n un e f e c t o e s -

t i m u l a d o r s o b r e l o s ax o n es s o m a t o s t a t i n é r g i c o s a e se mismo n i v e l ,

y a l a v e z , u n a i n f l u e n c i a n e g a t i v a a n i v e l de t e r m i n a c i o n e s DA en

e l h i p o t alamo a n t e r i o r , s o b r e l a s n e u r o n a s SRIH, de t a l m ane ra que

l a suma de ambos e f e c t o s p r o d u j e r a un d e s c e n s o n e t o en l a c o n c e n t r a -

ci(5n i n t r a h i p o t a l a m i c a de SRIH.

E s t e mecanismo d u a l l o h a n p r o p u e s t o t a m b ie n o t r o s a u t o r e s

p a r a e x p l i c a r e l e f e c t o de l a NA s o b r e l a GH segiîn s e a d m i n i s t r e

c e n t r a l o p e r i f é r i c a m e n t e ( 1 5 7 ) , y ademâs, e s t a apoyado p o r l a

- 115 -

e v i d e n c i a a n a t é m i c a de u n a i n e r v a c i é n d o p a m i n é r g i c a no s<5lo a n i

v e l de l a EM s i n o t a m b ie n en l a zona h i p o t a l é m i c a a n t e r i o r ( 1 9 ) .

I g u a l m e n t e , u n a i n f l u e n c i a n e g a t i v a de l a DA s o b r e l a a c t i v i d a d

GRE como a lg u n o s a u t o r e s h a n p r o p u e s t o ( 2 0 7 ) , p o d r f a e s t e r i n c i -

d i e n d o en e s t e e f e c t o de l a DA s o b r e l a s e c r e c i é n de GH.

P o r t a n t o , podemos d e c i r que e l e f e c t o de l a s v f a s DA s o b r e

l o s n i v e l e s de SRIH en e l h i p o t é l a m o es de t i p o n e g a t i v e , y que

l a d i s m u n u c ié n de l a s e c r e c i é n de GH que se o b s e r v a puede e s t a r

m e d ia d a p o r un e f e c t o l i b e r a d o r de l a DA s o b r e l o s t e r m i n a l e s SRIH

a n i v e l de l a EM y / o de u n a i n h i b i c i é n de l a a c t i v i d a d d e l GRP.

S i n em bargo , a l no d a r s e u n a d i s m i n u c i é n de l a l i b e r a c i é n de GH de

f o rm a é v i d e n t e , e l p o s i b l e e f e c t o que p u d i e r a e j e r c e r l a DA b i e n a

t r a v é s de l a SRIH p o r s i s o l a o en c o n j u n t o con e l GRF, no es f a -

c i l m e n t e d e f i n i b l e con l o s p r é s e n t e s d a t o s .

E l e f e c t o que e j e r c e l a NA s o b r e l a SRIH p a r e c e c o n t r a r i o a l

e j e r c i d o p o r l a DA. La d i s m i n u c i é n de l o s n i v e l e s de NA c e r e b r a l

p r o d u c i d a p o r e l i n h i b i d o r de su s f n t e s i s e l d i s u l f i r a m ( 2 0 8 ) , y

e l i n c r e m e n t o de NA que s i g u e a l a a d m i n i s t r a c i é n de DOPS ( l 5 l ) ,

p r o d u c e n una d i s m i n u c i é n y u n a e l e v a c i d n de l a SRIH h i p o t a l a m i c a

r e s p e c t i v a m e n t e , i n d i c a n d o u n a r e l a c i d n d i r e c t a e n t r e n i v e l e s en

c e r e b r o de NA e h i p o t a l a m i c o s de SRIH.

En c u a n to a l o s e f e c t o s s o b r e l o s n i v e l e s de GH de e s t a s mo-

d i f i c a c i o n e s en l o s n i v e l e s de NA, l o s r e s u l t a d o s no p a r e c e n

c l a r o s . Ambas d r o g a s , a p e s a r de que a l t e r an de fo rm a c o n t r a r i a

a l a NA, p ro d u c e n e f e c t o s s i m i l a r e s s o b r e l a GH, d i s m in u y é n d o l a

— 116 —

en ambos c a s o s , aunque p a r a e l d i s u l f i r a m e l e f e c t o no s e a e s t a d f s -

t i c a m e n t e s i g n i f i c a t i v o . Una p o s i b l e e x p l i c a c i é n a e s t e r e s p e c t e

e s que e l i n c r e m è n t o de NA p r o d u z c a no s o l o u n a a c u m u la c i é n ,4© SRIH

en e l h i p o t a l a m o , s i n o t a m b ie n u n a mayor l i b e r a c i é n como a lg u n o s

a u t o r e s h a n p o d ido co m probar en e x p e r i e n c i a s " i n v i t r o " o en a n i

m a le s a n e s t e s i a d o s (1 1 6 , 1 1 8 ) , donde a l a d m i n i s t r a r s e NA se p r o -

d u c f a un in c r e m e n t o en l a l i b e r a c i é n de SRIH (aunque no t o d o s l o s

a u t o r e s h an p o d ido c o r r o b o r e r e s t e e f e c t o , v e r 117, 1 19 ) ; con l o

que e s t e i n c r e m e n t o de SRIH d e s m i n u i r é l o s n i v e l e s de GH.

P o r e l c o n t r a r i o , e l e f e c t o d e l d i s u l f i r a m d ism inuyendo l o s

n i v e l e s de GH y a l a vez de SRIH s d l o se puede e x p l i c a r s i s u p o n e -

mos que e l GRF s e e n c u e n t r a i n f l u f d o p o s i t i v a m e n t e p o r l a NA y

n e g a t i v a m e n t e p o r l a DA (2 0 5 , 2 0 7 ) , y cuya d i s m i n u c i é n , p r o d u c i d a

p o r l a d e p l e c c i é n de NA y e l l i g e r o aumento en p a r a l e l o de l a DA

( v e r r e s u l t a d o s de l a a d m i n i s t r a c i é n de d i s u l f i r a m ) en e s t e c aso

p r o d u c e u n a s e c r e c i é n d i s m i n u f d a de GH a p e s a r de que l a SRIH

p u d i e r a e s t a r t a m b ie n d i s m i n u f d a en c u a n to a su l i b e r a c i é n a l a

s a n g r e p o r t a . De h e c h o , se h a o b s e rv a d o u n a d i s m i n u c i é n de l a GH

t r a s e l d i s u l f i r a m en r a t a s macho (2 0 9 , 210) y en hem bras o v a -

r i e c t o m i z a d a s cuyos h i p o t é l a m o s no l i b e r a b a n SRIH a l s e r l e a h a -

d i d o s NA en e l medio de i n c u b a c i é n , l o c u a l i n d i c a r f a que l a d i s -

m in u c i é n de l a GH e s t a r f a m ed iad a fu n d a m e n ta im e n te p o r u n a i n h i -

b i c i é n d e l GRF ( l 6 4 ) .

De c u a l q u i e r fo rm a , e s é v i d e n t e que l o s e f e c t o s de l a m odi-

f i c a c i é n de l a NA d e l c e r e b r o s o b r e l a GH no se pueden e x p l i c a r

u n i c a m e n te p o r l a s m o d i f i c a c i o n e s que se h a c e n a p a r e n t e s p a r a l a

- 117 -

SRIH, s i e n d o n e c e s a r i o i n v o l u c r a r a l GRF en e s t e e f e c t o .

Hemos o b s e r v a d o u n a i n f l u e n c i a p o s i t i v a de l a s v i a s a l f a - a d r e -

n é r g i c a s s o b r e l a s e c r e c i é n de GH, e f e c t o que e s t é am p l iam en te do-

cumentado en l a l i t e r a t u r e , y que p a r e c e comiîn a t o d a s l a s e s p e c i e s

e s t u d i a d a s ( 6 5 , 71 , 147, 151, 152, 153, 154, 157, 15 8 ) . D i v e r s e s

a u t o r e s s o s t i e n e n que e s t e e f e c t o e s t é mediado p o r e l GRF a p a r t i r

de l a s s i g u i e n t e s o b s e r v a c i o n e s : e l de c rem e n to p r o d u c id o en l a l i -

b e r a c i é n de GH p o r l a a d m i n i s t r a c i é n de r e s e r p i n a se b l o q u e a , e

i n c l u s e s e p ro d u c e u n a e s t i m u l a c i é n de l a GH p o r l a a d m i n i s t r a c i é n

de c l o n i d i n a ; e f e c t o que s e m a n t i e n e s i s e a d m i n i s t r a p r e v i a m e n t e

a l a c l o n i d i n a un s u e r o a n t i - S R I H a e s t o s a n im a l e s " r e s e r p i n i z a d o s " ,

i n d i c a n d o que con o s i n SRIH e l e s t f m u l o a l f a - a d r e n é r g i c o se man

t i e n e ( 2 0 5 ) . Es més, e l d e c re m e n to p r o d u c id o p o r l a y o h im b in a

( a n t a g o n i s t a a l f a ) s o b r e l a GH no s e ve a n t a g o n iz a d o p o r una admi-

n i s t r a c i é n p o s t e r i o r de a n t i - S R I H ( 1 2 7 ) , l o que p a r e c e a p o y a r que

l a SRIH no m ed ia e l e s t f m u l o a l f a - a d r e n é r g i c o s o b r e l a GH, y que

es é n i came n t e e l GRF e l r e s p o n s a b l e de su e f e c t o p o s i t i v o . Ademés,

l a e s t i m u l a c i é n e l é c t r i c a de d e t e r m i n a d a s zonas de l a a m fg d a la

que p r o d u c e n un aumento en l a l i b e r a c i é n de GH, s i s e ve a n t a g o -

n i z a d a p o r b l o q u e a n t e s a l f a como l a f e n o x i b e n z a m i n a , p e ro no o -

c u r r e l o mismo cuando se e s t i m u l a e l n d c l e o V e n t ro m e d ia l h i p o t a -

l é m ic o ( n é c l e o donde a lg u n o s a u t o r e s han l o c a l i z a d o l a a c t i v i d a d

de GRF), l o que s u g i e r e que e s t a e s t i m u l a c i é n e x t r a h i p o t a l a r a i c a

de t i p o a l f a - a d r e n é r g i c o p u d i e r a e s t a r m ed iada p o r un GRF s i t u a d o

en e s t e n d c l e o ( 4 3 ) . De hech o e x i s t en a b u n d a n te s t e r m i n a c i o n e s NA

— 118 —

en e l n i îc leo V e n t r o m e d ia l que p u d i e r a n j u s t i f i c a r e s t e e f e c t o

( 1 9 ) .

N u e s t r o s r e s u l t a d o s p a r e c e n c o n f i r m e r l o a n t e r i o r m e n t g d i c h o ,

Los n i v e l e s de SRIH en e l h i p o t é l a m o no se a l t e r a n de m anera é v i

d e n t e p o r l a e s t i m u l a c i é n a l f a - a d r e n é r g i c a , a l a v e z que l a GH se

i n c r e m e n t a de fo rm a é v i d e n t e , l o que p o d r f a i n d i c a r que l a SRIH

no p a r e c e m e d i a r e s t e e s t f m u l o . La a d m i n i s t r a c i é n de f e n t o l a m i n a

como d e p r e s o r de l a a c t i v i d a d de l a s v f a s a l f a - a d r e n é r g i c a s p o r

e l c o n t r a r i o s i p a r e c e a f e c t a r l o s n i v e l e s de SRIH h i p o t a l a m i c a ,

a u m e n ta n d o l o s , a l a v ez que l a GH p l a s m é t i c a , como e r a de e s p e -

r a r , d i s m in u y e .

E s to p u d i e r a i n d i c a r un t o n o a l f a - a d r e n é r g i c o i n h i b i d o r s o

b r e l a s n e u r o n a s s o m a t o s t a t i n é r g i c a s , como e s t u d i o s p r e l i m i n a r e s

h a n s o s t e n i d o ( l 2 l ) . Es p o s i b l e p o r t a n t o , que e l s u b s i s t e m a a l f a

i n f l u y a s o b r e l a s e c r e c i é n de SRIH h i p o t a l é m i c a de m anera que c o n -

t r i b u y a a l e f e c t o n e t o s o b r e l a s e c r e c i é n de GH. De c u a l q u i e r

fo rm a , l a m e d i a c i é n d e l GRE en e l e s t f m u l o a l f a p a r e c e mas im por

t a n t e que l a s o m a t o s t a t i n é r g i c a , p u d iend o s e r e s t a de c a r a c t e r

s e c u n d a r i o .

E l p a p e l de l a s v f a s b e t a - a d r e n é r g i c a s a l a v i s t a de n u e s t r o s

r e s u l t a d o s p a r e c e s e r c o n t r a r i o a l de l a s a l f a , p r o d u c i e n d o una

e s t i m u l a c i é n t é n i c a s o b r e l a s n e u r o n a s de SRIH como i n d i c a e l h e

cho de que e l p r o p a n o l o l ( b e t a b l o q u e a n t e ) p r o d u z c a un d e s c e n s o

s i g n i f i c a t i v o de l o s n i v e l e s de SRIH en h i p o t a l a m o .

E x i s t e n e v i d e n c i a s aén p r e l i m i n a r e s , de que e s t o puede s e r

— 119 —

a s f ( 1 2 1 ) ; s i n embargo, e l i s o p r o t e r e n o l ( b e t a a g o n i s t a ) , a l i g u a l

que o c u r r f a con e l a l f a a g o n i s t a c l o n i d i n a no p a r e c e a f e c t a r de

fo rm a c l a r a l o s n i v e l e s de SRIH, s u g i r i e n d o que en c o n d i c i o n e s

n o r m a le s l a n e u r o n a SRIH se e n c u e n t r a maximamente e s t i m u l a d a p o r

l a s v f a s b e t a , de t a l fo rm a que u n a mayor a c t i v i d a d de e s t a s v f a s

no puede a l t e r a r l a f u n c i é n s o m a t o s t a t i n é r g i c a més.

En c u a n to a l o o b s e r v a d o en e s t o s e x p e r i m e n t o s r e s p e c t e a l a

GH, e l b e t a a g o n i s t a i s o p r o t e r e n o l p a r e c e d i s m i n u f r l a , p e ro no de

fo rm a s i g n i f i c a t i v a , y e l p r o p a n o l o l no l a a f e c t a . Ambos r e s u l t a

dos c o n c u e rd a n con l o o b s e r v a d o p o r d i v e r s e s a u t o r e s ( 16O, 162) ,

p e ro s i g u e n s i n a c l a r a r e l p o s i b l e p a p e l de e s t a s v f a s b e t a en e l

c o n t r o l de l a s e c r e c i é n de GH en l a r a t a , y a que en o t r a s e s p e c i e s

como e l hombre y l o s p r i m a t e s , s i p a r e c e n t e n e r un e f e c t o i n h i b i

d o r ( 6 5 , 160, 1 5 3 ) . P o r l o t a n t o , e s d i f f c i l b a s a r s e en l o s p r é

s e n t e s d a t o s s o b r e l a GH p a r a i n t e n t a r i n f e r i r e l e f e c t o de l a s

v f a s b e t a - a d r e n é r g i c a s s o b r e l a SRIH h i p o t a l é m i c a .

E s t o s r e s u l t a d o s un poco c o m p l e j o s , no s e p u ed en e x p l i c a r

en b a s e a l a f a r m a c o c i n é t i c a de l a s d r o g a s u t i l i z a d a s y a que l a s

d o s i s y t i e m p o s de a c t u a c i é n em pleados se h a n e l e g i d o s i g u i e n d o

l o s e s t u d i o s de l a b i b l i o g r a f f a , t e n i e n d o e s p e c i a l c u id a d o a l a

h o r a de e l e g i r l o s t i e m p o s de a c t i v i d a d , en no d e j a r i n c i d i r a

l o s d i s t i n t o s a g o n i s t a s y a n t a g o n i s t a s c a t e c o l a m i n é r g i c o s u s a d o s ,

s o b r e e l r ec am b io m e t a b é l i c o de l a s CA, como se h a d e s c r i t o (2 11 -

- 2 1 4 ) .

- 120 -

Es n e c e s a r i o i n v o c a r l a e x i s t e n c i a de u n a r e l a c i é n f u n c i o n a l

o i n t e r a c c i é n e n t r e l a s n e u r o n a s DA y NA p a r a i n t e n t a r e x p l i c a r

e l hecho de que l a SRIH h i p o t a l a m i c a no se a l t é r é cuando l â ' p r i

m era e s t a muy aum entada y l a s e g u n d a d i s m i n u f d a , y a que p o r s f

misma, u n a r e l a c i é n d i r e c t a e i n d e p e n d i e n t e de ambas v f a s c a t e c o

l a m i n é r g i c a s s o b r e l a n e u r o n a SRIH no l a a c l a r a . De h e c h o , a l a

v i s t a de l o s r e s u l t a d o s o b t e n i d o s a n t e r i o r m e n t e , y s u p u e s t a u n a

i n f l u e n c i a n e t a de l a NA y de l a DA, se t e n d r f a que e n c o n t r a r u na

d i s m i n u c i é n de l a SRIH, y a que ambos f a t o r e s , a c tu a n d o i n d e p e n -

d i e n t e m e n t e l a p r o v o c a n .

E s t a p o s i b l e i n t e r a c c i é n e n t r e ambas v f a s CA p o d r f a e s t a b l e -

c e r s e , de u n a m anera p o r c o m p lè te h i p o t é t i c a y que l o s p r é s e n t e s

r e s u l t a d o s no p e r m i t e n mas que e s p e c u l a r , de l a s i g u i e n t e fo rm a;

l a a c t i v i d a d de l a s n e u r o n a s NA c e n t r a l e s m o d u l a r f a en c i e r t a ma

n e r a l a a c t i v i d a d de l a s d o p a m i n é r g i c a s en e l h i p o t a l a m o en c u a n -

t o a su i n f l u e n c i a s o b r e l a s n e u r o n a s SRIH a l menos, de t a l fo rm a

que en d e t e r m i n a d a s s i t u a c i o n e s , l a suma de e s t a s i n t e r a c c i o n e s

d e t e r m i n e n l a r e s p u e s t a s o m a t o s t a t i n é r g i c a c o n c r e t a . En e l s i

g u i e n t e cu ad ro se m u e s t r a como s e r f a e s t a r e l a c i é n : a un a a c t i

v i d a d NA d i s m i n u f d a p o r e l d i s u l f i r a m l e s e g u i r f a u n a a c t i v i d a d

d o p a m i n é r g i c a t a m b ie n d i s m i n u f d a que a su v e z se v e r f a c o n t r a r r e s -

t a d a p o r un i n c r e m e n t o en e l c o n t e n i d o de DA p r o d u c id o p o r l a

a d m i n i s t r a c i é n de L -d o p a , de m anera que e l r e s u l t a d o f u e r a una

a c t i v i d a d de DA i n a l t e r a d a : p o r un l a d o r e c i b i r f a un to n o NA

d i s m in u f d o que d i s m i n u i r f a su p r o p i a a c t i v i d a d , y p o r o t r o , e l

i n c r e m e n to de su b i o s f n t e s i s p r o d u c i r f a un in c r e m e n to en su a c -

- 121 -

t i v i d a d s i e n d o e l r e s u l t a d o n e t o de e s t a i n t e g r a c i d n de f a c t o r e s

a n t a g g n i c o s u n a a c t i v i d a d n i e x a g e r a d a n i d i s m i n u f d a de l a n e u r o

n a DA, con l o que l a SRIH no se a l t e r a r f a . "

- P o s i b l e s r e l a c i o n e s f u n c i o n a l e s e n t r e l a s n e u r o n a s

N o r a d r e n é r g i c a s y D o p a m in é rg ic a s en e l c o n t r o l de

l a a c t i v i d a d de l a s n e u r o n a s s o m a t o t a t i n é r g i c a s .

SNC E x t r a h i p o t a l é m i c o

H ip o ta la m o

E m in e n c ia Media

N eurona NA

N eurona SRIH

a x o n es SRIH.

^ ^ N e u r o n a DAk^axones NA -̂^ _______ ^ -------- a x o n e s DA

- P o s i b l e s i n t e r a c c i o n e s e n t r e l a N o r a d r e n a l i n a y l a

Doparaina s o b r e l a l i b e r a c i é n de S o m a t o s t a t i n a en e l

h i p o t a l a m o .

T r a t a m i e n t o


L -d o p a (1 h . )

A c t i v i d a d n e u r o n a l

NAi -+DA*DA=

DA*

L i b e r a c i é n de SRIH

SRIH=


L -d o p a (2 h . )

NA= ——————#DA=

DA*DA*

SRIH*

- 122 -

E s t e esquema h i p o t é t i c o p e r m i t e e x p l i c a r l o s r e s u l t a d o s o b t e

n i d o s , no e x c lu y e n d o o t r a s p o s i b l e s i n t e r p r e t a c i o n e s .

E x i s t e una b a s e a n a t é m i c a que a p o ya e s t e p o s i b l e mecani'Smo. Se

han d e s c r i t o i n e r v a c i o n e s n o r a d r e n é r g i c a s a l n i î c l e o A r c u a to y A rea

h i p o t a l é m i c a A n t e r i o r ; e s d e c i r , a l a s é r e a s donde se l o c a l i z a e l

s i s t e m a TIDA (g ru p o c e l u l a r A 12) y l a s n e u r o n a s SRIH r e s p e c t i v a

m en te , y ademés, como y a se h a i n d i c a d o , e s t a s n e u r o n a s d e l n é c l e o

A rc u a to no s o l o i n e r v a n l a EM s i n o t a m b ié n e m i t e n t e r m i n a c i o n e s a

e s a misma zona a n t e r i o r donde s e s i t é a n l a s n e u r o n a s de SRIH ( 1 9 ) .

E s t a s i n t e r a c c i o n e s e n t r e l o s t r è s s i s t e m a s p u e d en s e r a n i v e l

a x o - d e n t r f t i c o , a x o - s o m é t i c o o a x o - a x é n i c o . La c o n f i r m a c i é n o no

de e s t e modelo t e é r i c o s u p o n d r é nuevos r e s u l t a d o s .

P o r t a n t o , s e g é n l o s r e s u l t a d o s o b t e n i d o s , s e puede e s t a b l e c e r

u n a r e l a c i é n e n t r e c a t e c o l a m i n a s y s o m a t o s t a t i n a que g l o b a l m e n t e

s e r f a de t i p o i n h i b i d o r s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH. La DA t e n d r f a

un e f e c t o t a m b ie n i n h i b i d o r s o b r e e l c o n t e n i d o h i p o t a l é m i c o de e s

t a horm ona, m i e n t r a s que e l e f e c t o n e t o de l a s v f a s n o r a d r e n é r g i -

c a s s e r f a e s t i m u l a d o r , e j e r c i e n d o e l s u b s i s t e m a a l f a un t o n o i n h i

b i d o r y e l b e t a uno e s t i m u l a d o r . E l hecho de que l a i n f l u e n c i a de

l a s v f a s NA c o n s i d e r a d a s g l o b a l m e n t e s e a de t i p o e s t i m u l a d o r v i e n e

a c o n f i r m e r e l c a r é c t e r s e c u n d a r i o de l a i n h i b i c i é n a l f a s o b r e l a

SRIH.

E s t a i n f l u e n c i a c a t e c o l a m i n é r g i c a s o b r e l a SRIH no b a s t a p a r a

e x p l i c a r p o r s f misma l o s e f e c t o s que se o b s e r v a n en l a s e c r e c i é n

de G-H, h a c i e n d o s e n e c e s a r i a l a i n v o l u c r a c i é n d e l GRE en l a m ed ia -

c i é n de l o s e f e c t o s de l a s CA s o b r e l a GH.

- 125 -

E s t a u l t i m a c o n c l u s i o n p a r e c e v e n i r a v a l a d a p o r l o s r e s u l t a d o s

o b t e n i d o s en e l e s t u d i o d e l c o n t e n i d o u l t r a d i a n o de SRIH, GH y CA.

- 124 -

3 3 . Y a r i a c i o n e s u l t r a d i a n a s de S o m a t o s t a t i n a . C a t e c o l a m i n a s v

Hormona de c r e c i m i e n t o .

E l r i t m o de s e c r e c i é n p u l s a t i l que s e o b s e r v a en l a GH p l a s -

n m a t i c a c o n c u e r d a b a s i c a m e n t e con l o o b t e n i d o p o r o t r o s a u t o r e s

( ( 1 7 9 , 1 8 3 ) , a p e s a r de que e l p r o t o c o l e l l e v a d o a cabo en e s t e e s -

t t u d i o v a r f e l i g e r a m e n t e con e l empleado en d i c h a s p u b l i c a c i o n e s .

Hemos d e t e r m i n a d o e l c o n t e n i d o de GH en p la s m a a u n a h o r a

c d e t e r m i n a d a s a c r i f i c a n d o p r e v i a m e n t e a l a n i m a l , m i e n t r a s que o t r o s

E a u t o r e s h a n e s t u d i a d o l a v a r i a c i é n de l a GH a l o l a r g o d e l d f a en

i u n mismo a n im a l c a n u la d o p a r a p o d e r e x t r a e r l e l a s a n g r e de fo rm a

( c o n t i n u a . Hemos r e c u r r i d o a e s t e método p o r s e r e l l în ico que p e r

il m i t e d e t e r m i n e r s i m u l t a n e a m e n t e e l c o n t e n i d o h i p o t a l é m i c o de SRIH

2 y CA, p a r a l o que e s n e c e s a r i o s a c r i f i c a r a l a n i m a l . Es p o r l o que

( en l a b i b l i o g r a f f a se o b t i e n e n c i c l o s de 2 -3 h o r a s y n o s o t r o s l o s

( e n c o n t r a m o s de 1 ,3 0 - 2 h o r a s , p r o b a b le m e n te p o r e l s o l a p a m i e n t o

( e n t r e l o s d i f e r e n t e s v a l o r e s p a r a c a d a a n im a l i n d i v i d u a l , p o rq u e

c' a p e s a r de que l o s a n i m a l e s m a n te n id o s en i d é n t i c a s c o n d i c i o n e s

a m b i e n t a l e s p o s e e n un r i tm o de GH s i n c r o n i z a d o , e s t a s i n c r o n i z a -

( c i é n no e s p e r f e c t a , e n c o n t r é n d o s e d i f e r e n c i a s de m ed ia a u n a h o r a

t en l a a p a r i c i é n de l o s p i c o s raéximos de s e c r e c i é n de u n a r a t a a

( o t r a ( 6 5 ) .

I g u a l m e n t e se h a o b s e r v a d o un p a t r é n p u l s é t i l en e l c o n t e n i d o

} h i p o t a l é m i c o de DA a l o l a r g o d e l t iem po e s t u d i a d o , que c o n c u e r d a

- en e s t e caso p e r f e c t a m e n t e con lo e n c o n t r a d o p o r o t r o s a u t o r e s que

j h a n u t i l i z a d o un esquema de t r a b a j o s e m e j a n t e a l n u e s t r o ( 1 8 6 ) .

- 125 -

E s t o s mismos a u t o r e s no e n c u e n t r a n s i n embargo un p a t r é n p u l s é t i l

en e l c o n t e n i d o de NA en e l h i p o t é l a m o , fenémeno as imismo o b s e r

vado p o r n o s o t r o s , y han q u e r i d o r e l a c i o n a r a l a DA como po’è i b l e

r e s p o n s a b l e en p a r t e de l a p u l s a t i l i d a d en l a s e c r e c i é n de GH, a

p e s a r de que e l p a p e l de e s t a am ina en l a r e g u l a c i é n de l a GH en

l a r a t a no e s p e r f e c t a m e n t e e s t a b l e c i d o .

A p a r t i r de e s t o s d a t o s hemos i n t e n t a d o e s t u d i a r e l p o s i b l e

p a p e l de l a SRIH cono m e d ia d o r a e n t r e c i c l i c i d a d de l a DA y p u l s a

t i l i d a d de l a GH, no e n c o n t r a n d o u n a c o r r e l a c i é n e s t a d f s t i c a m e n t e

s i g n i f i c a t i v a e n t r e d i c h o s p a r é m e t r o s . Segén e s t o s r e s u l t a d o s , es

d i f f c i l e n t o n c e s p o d e r l e a t r i b u i r a l a DA u n a f u n c i é n en l a ap a

r i c i é n de l a p u l s a t i l i d a d de l a GH a p a r t i r de su s p r o p i a s f l u c -

t u a c i o n e s u l t r a d i a n a s , y mucho menos r e l a c i o n a r a l a SRIH como

m e d ia d o r a é f e s t e e f e c t o como han s u g e r i d o a lg u n o s a u t o r e s , ( 1 8 6 ) ,

a l menos en l a s c o n d i c i o n e s e x p é r i m e n t a l e s em p leadas p o r n o s o t r o s .

P o r o t r a p a r t e , es p o s i b l e que en un e s t u d i o mas p r o l o n g a d o

que a b a r c a r a e l d f a e n t e r o p o r e j e m p l o , s f s e p u d i e r a a p r e c i a r

u n a r i t m i c i d a d en l o s n i v e l e s de SRIH y NA (de hecho se o b s e r v a

u n a c o r r e l a c i é n e n t r e d e t e r m i n a t e s t i e m p o s y n i v e l e s de SRIH y NA

en e l h i p o t é l a m o ) , p e ro e s t a s e r f a de c i c l o s mas l a r g o s n e c e s a r i a -

mente y p o r l o t a n t o d i f f c i l m e n t e c o r r e l a c i o n a b l e s con l o s de GH

y DA, a l menos en u n a e s c a l a t e m p o r a l .

No puede d e s c a r t a r s e l a p o s i b i l i d a d de que e l GRE p u e d a e s t a r

mediando e l e f e c t o de l a p u l s a t i l i d a d de l a DA p a r a p r o v o c a r una

p u l s a t i l i d a d s e m e j a n t e en l a GH a t r a v e s de u n a r i t m i c i d a d p r o

p i a . De h e c h o , e l r e s p o n s a b l e de l o s p i c o s de s e c r e c i é n méxima

— 126 —

de l a GH p a r e c e s e r e l GRF y no l a SRIH, e j e r c i e n d o é s t a i l n i c a -

m ente un e f e c t o i n h i b i t o r i o t é n i c o , a l p a r e c e r r e s p o n s a b l e de l a s

b a j a d a s p e r i o d i c a s en l o s n i v e l e s de GH en s a n g r e (2 0 5 , 182', 4 3 ) .

Todo e s t o nos l l e v a a s u g e r i r que l a s r e l a c i o n e s e n t r e DA,

NA y SRIH d e m o s t r a d a s p o r l o s r e s u l t a d o s o b t e n i d o s a n t e r i o r m e n t e ,

no s e h a c e n a p a r e n t e s a t r a v é s de u n a v a r i a c i é n p u l s a t i l y p a r a -

l e l a en e l t ie m p o en l o s n i v e l e s de e s t a s t r è s s u s t a n c i a s en e l

h i p o t é l a m o , y que p o r t a n t o no pueden j u s t i f i c a r c l a r a m e n t e l a

a p a r i c i é n de un r i t m o de s e c r e c i é n p u l s é t i l en l a GH. P o r o t r a

p a r t e , e s d i s t i n t o h a b l a r de c o n te n id o h i p o t a l é m i c o que de s e c r e

c i é n a l a s a n g r e , p u d ie n d o l a DA o l a NA i n f l u i r en l a l i b e r a c i é n

de SRIH a l a s a n g r e p o r t a p a r a a s f i n c i d i r en l a s e c r e c i é n de GH,

de m anera que no se a l t é r é a p r e c i a b l e m e n t e e l c o n t e n i d o t i s u l a r

de e s t a hormona h i p o t a l é m i c a . Se d a r f a p o r t a n t o u n a c i c l i c i d a d

en l a s u e l t a de SRIH a l a s a n g r e p o r t a s i n h a c e r s e a p r e c i a b l e a

n i v e l c e l u l a r p o r s e r s é l o un pequeho p o r c e n t a j e de hormona l a

que se l i b e r a r é . De h e c h o , muy r e c i e n t e m e n t e se h a o b s e r v a d o que

l a SRIH se l i b e r a a l a EM en p u l s o s i n t e r m i t e n t e s con un r i t m o de

ap ro x im ad am en te u n a h o r a y un rango de c o n c e n t r a c i o n e s de 1 a 10

pg m in . ( l o que su pone u n a c a n t i d a d mfnima d e l c o n t e n i d o t i s u l a r ) .

E s t o s p i c o s p a r e c e n r e s p o n d e r a un s i s t e m a de r e t r o a l i m e n t a c i é n

c o r t o e n t r e GH y SRIH, s i n h a c e r s e é v i d e n t e un a m e d i a c i é n c a t e

c o l a m i n é r g i c a en e s t e e f e c t o . Por t a n t o , se p o d r f a d e s c r i b i r un

s i s t e m a h i p o t é t i c o de i n t e r r e l a c i é n de l a s i g u i e n t e m anera : e l

GRF y l a SRIH m o d u la r f a n a l a GH de fo rm a que d e t e r m i n a r f a n una

s e c r e c i é n p u l s é t i l de e s t a hormona d e b i d a a su vez p r o b a b le m e n te

- 127 -

a l a p r o p i a p u l s a t i l i d a d en l a s e c r e c i é n de SRIH y GRF. E s t e pa

t r é n de s e c r e c i é n de l a SRIH y e l GRF v e n d r f a p r o d u c id o p o r u n a

m o d u la c i é n p r o v e n i e n t e de c e n t r e s n e r v i o s o s s u p e r i o r e s . E s t ’a a c

t i v i d a d c e n t r a l p a r e c e s e r l l e v a d a a cabo no en e x c l u s i v a p o r

s i s t e m a s c a t e c o l a m i n é r g i c o s , como l o s p r é s e n t e s r e s u l t a d o s i n d i -

c a n , h a c i e n d o s e n e c e s a r i a l a i n v o l u c r a c i é n de o t r a s v f a s de n e u -

r o t r a n s m i s i é n p a r a e x p l i c a r e l fenémeno de l a p u l s a t i l i d a d .

N o ta : P a r t e s de e s t e t r a b a j o h an s i d o p u b l i c a d a s ( 2 1 5 ) .

C O N C L U S I O N E S .

- 129 -

CONCLUSIONES.

1- Las c a t e c o l a m i n a s i n f l u y e n de m an e ra n e g a t i v a s o b r e l o s n i v e l e s

de SRIH en e l h i p o t é l a m o como se puede o b s e r v e r t r a s l a admi

n i s t r a c i é n de AMT y L -d o p a .

2 - La r e s p u e s t a de l a GH a l a s v a r i a c i o n e s en e l c o n t e n i d o de c a

t e c o l a m i n a s en c e r e b r o puede e s t a r m e d ia d a p o r l a SRIH, s i

b i e n l o s d a t o s de l a l i t e r a t u r a p e r m i t e n s u g e r i r que e l GRF

p u d i e r a e s t a r i n v o l u c r a d o t a m b i e n , p o s i b i l i d a d que n u e s t r o s

r e s u l t a d o s no d e s c a r t a n .

3- E l e f e c t o de l a dopamina s o b r e l o s n i v e l e s de SRIH en e l h i

p o té la m o p a r e c e s e r de t i p o i n h i b i d o r .

4 - E l p a p e l de l a dopamina en e l c o n t r o l de l a s e c r e c i é n de GH

no e s t é e s t a b l e c i d o , n i n u e s t r o s d a t o s son c o n c l u y e n t e s a l

r e s p e c t o . S i n embargo, l o s p r é s e n t e s r e s u l t a d o s apoyan l a h i -

p é t e s i s de que l a SRIH m ed ia e l e f e c t o de l a dopamina s o b r e l a

GH. No se e x c l u y e u n a p a r t i c i p a c i é n 'm e d ia d o ra d e l GRF.

5- E x i s t e u n a r e l a c i é n d i r e c t a e n t r e n i v e l e s de n o r a d r e n a l i n a en

c e r e b r o y SRIH en h i p o t é l a m o .

- 130 -

6 - S é lo e l p a p e l m e d ia d o r d e l GRF p o d r f a a c l a r a r e l e f e c t o de l a s

v f a s n o r a d r e n é r g i c a s s o b r e l a s e c r e c i é n de GH h i p o f i s a r i a .

7 - E l e f e c t o e s t i m u l a d o r de l a f e n t o l a m i n a s o b r e l a SRIH p a r e c e

i n d i c a r un to n o i n h i b i d o r de l a s v f a s a l f a - a d r e n é r g i c a s s o b r e

l a a c t i v i d a d s o m a t o s t a t i n é r g i c a de t a l m anera que l a c l o n i d i

n a e s i n c a p a z de i n h i b i r l a a c t i v i d a d SRIH p o rq u e e s t a se

e n c u e n t r a y a maximamente i n h i b i d a p o r e l to n o a l f a - a d r e n é r g i -

00 end ég en o .

8 - Las v f a s a l f a - a d r e n é r g i c a s modulan l a a c t i v i d a d de l a GH s i n

u n a C l a r a i n t e r v e n c i é n m e d ia d o r a de l a SRIH, f a v o r e c i e n d o s e un

p a p e l p r i n c i p a l d e l GRF como m e d ia d o r de e s t e e f e c t o .

9 - E l e f e c t o de l a s v f a s b e t a - a d r e n é r g i c a s s o b r e l o s n i v e l e s de

SRIH en e l h i p o ta l a m o p a r e c e c o n t r a r i o a l de l a s a l f a , s u g i -

r i é n d o s e un e s t f m u l o t é n i c o de é s t a s s o b r e l a n e u r o n a SRIH.

De e s t a fo rm a , e l i s o p r o t e r e n o l s e r f a i n c a p a z de e s t i m u l a r l a

a c t i v i d a d de l a SRIH p o rq u e é s t a se e n c o n t r a r f a y a maximamente

e s t i m u l a d a p o r e l to no en d égeno .

10- Con l o s d a t o s d i s p o n i b l e s no se puede e s c l a r e c e r e l p a p e l de

l a s v f a s b e t a - a d r e n é r g i c a s en e l c o n t r o l de l a s e c r e c i é n de GH.

- 131 -

11- Los r e s u l t a d o s o b t e n i d o s con l o s t r a t a m i e n t o s combinados c i -

s u l f i r a m + L - d o p a p e r m i t e n e s t a b l e c e r l a e x i s t e n c i a h i p o t é t i c a

de u n a r e l a c i é n f u n c i o n a l e n t r e v f a s n o r a d r e n é r g i c a s y ‘à o j a -

m i n é r g i c a s en e l c o n t r o l de l a s e c r e c i é n de s o m a t o s t a t i n a h i

p o t a l a m i c a .

12- El e s t a b l e c i d o c a r a c t e r p u l s é t i l de l a s e c r e c i é n de GH h i p o

f i s a r i a en l a r a t a no p a r e c e e s t a r mediado p o r u n a c i c l i c i d a d

s e m e j a n t e en e l c o n t e n i d o h i p o t a l é m i c o de SRIH, n i e s t e p a r e c e

e s t a r c o r r e l a c i o n a d o con e l e n c o n t r a d o en l o s n i v e l e s de co-

pamina en h i p o t é l a m o .

R E F E R E N C I A S B I B L I O S R A P I C A S .

- 133 -

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