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1ConferenciaValidacin de MtodosTegucigalpa Repblica de Honduras3 de diciembre de 2014.

Docente: Lic. Sergio Gustavo Chesniuk

Email: sergio@chesniuk.com Telfono: +54 351 4710602Mvil: +549 351 5915918Skype: sergio.chesniukUniversidad Nacional Autnoma de HondurasFacultad de IngenieraDepartamento de Ingeniera QumicaEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1Sitio de Descargas Dropboxhttp://ow.ly/FbqZr

(respetar minsculas y MAYUSCULAS)EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2Validacin de Mtodos3EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos34

Fuente: Analytical chemistry at the interface between metrology and problem solving. M. Valcarcel , B. Lendl. Trends in Analytical Chemistry, Vol. 23, No. 8, 2004Calidad metrolgica vs resolver un problemaEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos45Calidad

ComparabilidadConfianzaValidacin de MtodosControl de calidad internosAcreditacin de laboratoriosEjercicios de intercomparacinValidacin y Calidad AnalticaEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos56Definicin de ValidacinDefinicinReferenciaConfirmacin, a travs de la aportacin de evidencia objetiva, de que se han cumplido los requisitos para una utilizacin o aplicacin especfica prevista.ISO 9000:2005Confirmacin mediante examen y presentacin de evidencia objetiva de que se cumplen los requisitos particulares para un uso especfico previsto.ISO/IEC 17025:2005Verificacin, donde los requisitos especificados son adecuados para un uso previsto.(VIM), JCGM 200:2012EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos67Confirmacin mediante la aportacin de evidencia objetiva de que se han cumplido los requisitos especificados.ISO 8402:1994.Definicin de Verificacin (Validacin Parcial | Validacin Secundaria)Definicin de VerificacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos78Grado de Validacin RequeridoMtodo desarrollado internamenteMtodo estandarizadoMtodo estandarizadomodificadoVerificacinValidacincompletaValidacincompletaGrado de ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos89Qu expresa por ejemplo el OAA (Argentina)?

Que parmetros validarEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos910

Porque se hace necesario validar un mtodo?Es un elemento importante de control de calidad.

La validacin ayuda a proporcionar garanta de confiabilidad en las mediciones.

En algunos campos, la validacin de mtodos es un requisito legal.Por que validar?EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1011

Una iniciativa en el Reino Unido para promover las buenas prcticas en la medicin analtica ha identificado seis principios de la prctica analtica que, en conjunto, se considera que constituye la mejor prctica. Deben realizarse las mediciones analticas para satisfacer un requisito de acuerdo." (Es decir, a un objetivo definido).Las mediciones analticas deben realizarse utilizando mtodos y equipos que han sido probados para garantizar que son aptos para el propsito."El personal que realiza las mediciones analticas debe ser a la vez calificado y competente para llevar a cabo la tarea." (Y demostrar que pueden realizar el anlisis correctamente).Debe haber una evaluacin independiente peridica del rendimiento tcnico de un laboratorio."Las mediciones analticas realizadas en un solo lugar deben ser coherentes con las realizados en otros lugares.""Las organizaciones que hacen las mediciones analticas deben tener el control de calidad y procedimientos de garanta de calidad bien definido."Los seis principios de buenas prcticas en el laboratorio analticoEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1112Suposiciones al momento de desarrollar una validacin

El equipamiento a utilizar para las mediciones es adecuado a la aplicacin. Est limpio, bien mantenido y en estado de calibracin .

El personal que lleva a cabo la validacin es competente en el trabajo involucrado

No existen fluctuaciones inusuales en el laboratorio ni tampoco interferencias de otras actividades vecinas

Las muestras empleadas en al validacin son suficientemente establesSuposiciones EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1213Cmo debe validarse un mtodo?

Definir los requerimientos analticosPlanificar los experimentosEjecutar los experimentosEmplear los datos para evaluar el ajuste del mtodo a propsitoGenerar un informe de validacin donde se establezca el alcance la validacinPasos a seguirEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1314RecomendacionesEstablecimiento de las condiciones por cumplir.Determinacin de los parmetros estadsticos del procedimiento.Evaluacin de los resultados de la validacin por comparacin de los parmetros estadsticos obtenidos con las condiciones establecidas previamente y toma de decisin sobre la validez del procedimiento para el propsito establecidoPasos a seguirEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1415Las herramientas para la validacinBlancos. Blancos de reactivos. Blancos de muestras.Materiales de referencia preparados In House y spikesMuestras de rutina.Materiales incurridos

Herramientas estadsticas

Sentido comn Las herramientasEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1516

MTODOS ANALTICOS ADECUADOS A SU PROPSITOGua de Laboratorio para la Validacin de Mtodos y Temas RelacionadosLa Validacin en el camino analticoEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1617Condiciones que el mtodo debe cumplir para ser vlidoDefinidas por el clienteDefinidas en el mismo mtodo estndarDefinidas por el mismolaboratorioCondiciones de aceptacin (especificaciones)Condiciones de aceptacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos17Mtodos de Ensayos Fisicoqumicos18EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1819Caractersticas de desempeoCaractersticasSelectividadLmite de deteccin y lmite de cuantificacinRango de trabajoSensibilidad analticaVeracidad. Sesgo, recuperacinPrecisin. Repetibilidad, precisin intermedia y reproducibilidadIncertidumbre de medida (Estrictamente, la incertidumbre de medicin no es una caracterstica de rendimiento de un procedimiento de medicin particular, sino una propiedad de los resultados obtenidos utilizando este procedimiento de medicin)Robustez (solidez)EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos1920Condiciones de aceptacinPreguntas que pueden plantearse en la formalizacin de un requisito de anlisisSe aplican limitaciones de recursos (y cmo?) al personal, tiempo, dinero, equipos y reactivos, medios para el laboratorio?Se requiere muestreo y submuestreo?(y es responsabilidad del laboratorio?)Hay restricciones respecto de la muestra (tamao y disponibilidad?Cual es la naturaleza qumica, biolgica y fsica de la matriz?El analito est disperso o localizado?No todos los requerimientos analticos estn vinculados a la validacin del mtodoEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2021Condiciones de aceptacinPreguntas que pueden plantearse en la formalizacin de un requisito de anlisisPreguntaCaracterstica de desempeoLa respuesta es cuantitativa o cualitativa?Selectividad. LOD y LOQCuales son los analitos presentes y sus probables niveles? Estn presentes en ms que una forma qumica?. Es necesario distinguir entre las formas?Selectividad. LOD y LOQ. Rango de trabajo y rango lineal.

Cul es el mensurando?Es de inters la concentracin "total" de la sustancia analizada o la 'cantidad extrada' bajo las condiciones especificadas?Recuperacin.Qu veracidad y precisin se requieren? Cul es el la incertidumbre objetivo de cmo debe expresarse?Veracidad y recuperacin. Repetibilidad, precisin intermedia, reproducibilidad. IncertidumbreCules son las posibles interferencias al analito (s)?SelectividadSe han establecido los lmites de tolerancia para todos los parmetros fundamental para la realizacin del anlisis?RobustezEs necesario comparar los resultados con los de otros laboratorios?IncertidumbreDeben compararse los resultados con especificaciones externas?IncertidumbreEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2122Cuando se efecten una o mas modificaciones sobre el mismo, que generen la sospecha de variacin en la calidad de los datos analticosCundo debe revalidarse un mtodo?RevalidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2223PrecisinIncertidumbre especficaErrores aleatorios o indeterminadosFluctuantesDistribucin NormalErrores sistemticos o determinadosAlteraciones operacionales bien definidasDesviaciones de signo determinadoPuedendepender o no del mensurandoErrores crasos o espuriosCaractersticas similares a los errores sistemticos con excepcin de la magnitudErrores en qumica analtica o parmetros de calidadEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos23

A lo sumopuede minimizarse

Mi valor individualValor verdaderoMi media24Errores Aleatorios y sistemticosaleatoriosistemticoPuede corregirseLos errores aleatorios son acumulativos a diferencia de los sistemticos que pueden compensarseEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2425Se recomienda que cada resultado vaya acompaado de dos parmetros de calidad bsicosTrazabilidadIncertidumbreTrazabilidad e incertidumbreEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2526Valor 1 Valor 2TrazabilidadEstimacin del valor verdaderoIncertidumbreTrazabilidad e incertidumbre. EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2627

Exactitud vsPrecisinVeracidad vsPrecisinExactitud. Precisin y Veracidad.EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos27

1)2)Correccin

Aseguramos la veracidadSesgo significativoSesgo no significativo

Mi valor individualValor verdaderoMi media28Errores Sistemticos. Veracidad. EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2829Los diferentes parmetros de performance. Veracidad

EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos2930Cadena ininterrumpida de comparaciones Incertidumbres determinadas Documentacin Competencia Referencia al S.I.RecalibracionesElementos de la trazabilidad. CalibracionesEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos30Mtodos primarios o definitivosMateriales de referencia certificadosMtodos de referenciaEjercicios de intercomparacinMateriales de referencia de trabajoLaboratorios de referenciaInstrumentos de referenciaElaboracin de materiales de referenciaMuestras adicionadasTcnicas alternativasDiseminacinMnima incertidumbreMxima incertidumbre31Veracidad. Con que REFERENCIAS comparamos?Mxima jerarqua metrolgicaMnima jerarqua metrolgicaEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos3132CRMs, Metodos Referencia, Ejercicios interlaboratorios, etc.Mtodo analticosFuturas medidasUnidad base S.I.Kilogramo BIPMMximo nivelNivel mnimoIncertidumbre0u1(u21 + u22 )1/2(u21 + u22 + u23)1/2Nivel de trazabilidadTrazabilidad e incertidumbre. PMQs.EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos3233Parmetro no negativo que caracteriza la dispersin de los valores atribuidos a un mensurando, a partir de la informacin que se utiliza (VIM 2008)Los diferentes parmetros de performance. Incertidumbre analtica.EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos3334La incertidumbre es el primer ndice de calidad de una medida, que es tanto mayor cuanto menor es aquellaIncertidumbre y Calidad.EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos3435Lmite legalResultados sin incertidumbreImportancia de conocer la incertidumbreEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos3536Lmite legalResultados con incertidumbreImportancia de conocer la incertidumbreEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos3637Resultados sin incertidumbreLaboratorio 1Laboratorio 2Importancia de conocer la incertidumbreEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos3738Resultados con incertidumbreLaboratorio 1Laboratorio 2Importancia de conocer la incertidumbreEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos38

39Efecto de modificaciones al mtodo de ensayo (OAA) EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos39

40Parmetros tpicos a validar (OAA) EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos40Mtodos de Ensayo Microbiolgicos41EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos41

Probabilidad estadstica

42EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos42Transformacin de la escalaTransformacin de escalaLogaritmo base 1043EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos43Detector Medio nutriente en su recipienteLquidos(P/A MPN)Slidos(Recuento de Colonias)Enfoque de la Validacin en MicrobiologaComparacin de DetectoresDetectores44EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos44Caractersticas de Performance del Mtodos Cualitativos45Deben ser validados estimando, cuando sea apropiado:

Lmite de deteccinSensibilidadEspecificidadDesviacin negativa y desviacin positiva (P. intermedia)Efecto matrizExactitud relativa Repetibilidad y reproducibilidad (precisin intermedia)EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos45Caractersticas de Performance del Mtodos Cuantitativos46Deben ser validados estimando, cuando sea apropiado:

Lmite de cuantificacinVeracidadRepetibilidad y reproducibilidad (P. intermedia)Desviacin negativa y desviacin positivaSensibilidad EspecificidadEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos46Caractersticas categricas referidas a especificidad y selectividadSensibilidad = a/(a + b), fraccin de positivos totales correctamente asignados en el recuento presuntivo

Especificidad = d/(c + d), fraccin de negativos totales correctamente asignados en el recuento presuntivo

Tasa de falsos positivos = c/(a + c), fraccin de positivos observados errneamente asignados

Tasa de falsos negativos = b/(b + d), fraccin de negativos observados errneamente asignados

Eficiencia E es un parmetro simple y general, el cual da la fraccin de colonias o tubos correctamente asignados: E = (a + d) / n

n = a + b + c + d Determinacin y expresin de las caractersticas de comportamiento47EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos47Caractersticas categricas referidas a especificidad y selectividadSelectividadPuede definirse a la selectividad como:

Donde (a + c) son positivos presuntivos

El limite superior del rango de trabajo es afectado de manera importante por la selectividad.

Poseen mas valor cientfico la selectividad real (presuntos confirmados).

La selectividad varia estacionalmente por ello no existen criterios disponibles.

Determinacin y expresin de las caractersticas de comportamiento48EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos48Para la trazabilidad biolgica, el OHA cuenta con requisitos especficos.

Cuando el OEC utilice cepas o cultivos bacteriolgicos o micolgicos dentro del alcance a acreditar, debe demostrar la trazabilidad de las mismas, utilizando como primera opcin, cultivos o cepas de referencia (tambin llamados cultivos tipo) ejemplo; cultivos provenientes de ATCC, ECACC, entre otras.De no ser posible la opcin anterior, se pueden utilizar cultivos o cepas comerciales siempre que sean trazables a los cultivos de referencia, y vengan acompaados de un documento que indique el cultivo de origen.El laboratorio debe conservar registros de los certificados u otra evidencia de la trazabilidad de los cultivos o cepas.Los cultivos de trabajo no deben ser sub-cultivados en el laboratorio, si el laboratorio no puede presentar evidencia documental de que las propiedades clave se mantienen y conservan inmutadas.Los cultivos de trabajo no pueden ser subcultivadas para reemplazar cultivos de referencia.

TrazabilidadEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos49Validacin de Mtodos de Ensayo CualitativosEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos50En el laboratorio existen mtodos

CuantitativosSemi-cuantitativosCualitativosIntroduccinTambin denominados de screeningEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos51 Existen guas claramente definidas para lavalidacin de mtodos cuantitativos, No existen lineamientos claros para losmtodos cualitativos y semi-cuantitativos. Los parmetros de calidad que caracterizan a los mtodos cualitativos son distintos.IntroduccinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos52DefinicionesMtodos Cualitativos

"Aseguran la presencia o ausencia de uno o ms analitos en una muestra considerando sus propiedades fsicas, biolgicas o qumicas"."Mtodos de anlisis cuya respuesta es la presencia o ausencia de un analito, detectado en forma directa o indirecta en una muestra".

Se emplean para saber si una muestra contiene uno o msanalitos. Presencia/ausencia con respecto a un nivel de concentracin. Por debajo de ese lmite la concentracin del analito seconsidera despreciable.EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos53Definiciones Puede ser necesario un instrumento para la deteccin del analito o se puede aplicar nicamente los sentidos.

La respuesta de estos mtodos suele ser binaria (ms all del tipo de deteccin)-SI / NO-POSITIVO / NEGATIVO-REACTIVO / NO REACTIVO

Existen otros tipos de respuesta-POSITIVO / Zona Gris / NEGATIVO-REACTIVO / Zona Gris / NO REACTIVOEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos54DefinicionesMtodos Semi-cuantitativos Se encuentran entre los mtodos cualitativos ycuantitativos. Ofrecen una cuantificacin somera con una incertidumbreimportante. Los resultados se terminan agrupando en clases:- Positivo (+ + +)- Positivo Dbil (+)- Zona Gris (+ / -)- Negativo (-)EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos55Definiciones"Los mtodos cualitativos o semi-cualitativos seemplean como mtodos de screening"

Mtodos (tests) de "Screening

Separan o discriminan muestras de un grupo ms grande.Uno o ms analitos por encima o por debajo de un valor preestablecido.Este valor preestablecido puede haber sido establecido de distintas formas:1) Organismo oficial2) Control de Calidad Interno3) Requerimientos del Cliente

EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos56Definiciones

EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos57Clasificacin Existen distintos criterios de clasificacin.

EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos58Clasificacin Deteccin sensorial A travs de la vista Ejemplos :?

Deteccin Instrumental La respuesta instrumental se transforma en respuesta binaria Se trabaja con la respuesta del lmite de especificacin o valor de corte Ejemplos: ?EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos59Validacin

EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos60

Establecer parmetros de desempeo.

Los mismos que en los mtodos cuantitativos?ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos61 Verificar o Validar los parmetros de desempeo

TrazabilidadSensibilidadEspecificidadTasa de falsos positivosTasa de falsos negativosLmite de corte y su incertidumbreLmite de deteccinValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos62Trazabilidad y Veracidad - Algunas consideraciones

1) - Por lo general no existen CRMs para mtodos cualitativos2) - El uso de CRMs en mtodos cualitativos es complicado3) - Comparacin frente a Mtodos de Referencia4) - Los mtodos de referencia suelen ser mtodos cuantitativos5) - Participacin en esquemas interlaboratorioValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos63

Valor de corte "Cut Off"

IdealRealValidacin

OptimaEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos64 Falso Positivo (FP)"Muestras (+) por el "test de screening"y (-) por el mtodo de referencia

Falso Negativo (FN)"Muestras (-) por el "test de screening"y (+) por el mtodo de referencia"ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos65 Positivo Verdadero (TP)"Muestra (+) por el "test de screening" y (+) por el mtodo de referencia

Negativo Verdadero (TN)"Muestra (-) por el "test de screening" y (-) por el mtodo de referencia"ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos66 Tasa de Falsos Negativos

"Probabilidad de que una muestra con valor verdadero positivo d un valor negativo por el test de screening"

ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos67 Sensibilidad

"Capacidad o habilidad de un test de screening de detectar muestras positivas cuando realmente son positivas"

ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos68 Especificidad

"Capacidad o habilidad de un test de screening de detectar muestras negativas cuando realmente son negativas"

ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos69 Zona de Incertidumbre

"Corresponde a la regin en la cual se obtienen respuestasfalsas (falso negativo o falso positivo)"

ValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos70 Lmite de Deteccin y Cut Off

Error Beta: Tasa de FNError Alfa: Tasa de FP"Menor cantidad de analito que puede ser detectada en una matrizError: Tipo Beta 5 %Mximo nivel de concentracin permitidoLmite superior de la zona de incertidumbreSensibilidad 95%

Si consideramos el caso de mnima concentracin permitidaError Alfa: 5 %Lmite inferior de la Zona de incertidumbreValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos71 Cut Off

"Nivel de concentracin en el cual el test de screeningdiferencia las muestras con una probabilidad de error aceptable (5%)

Si hablamos de mximo nivel permitido:- Cut Off se relaciona con sensibilidad- Corresponde a la concentracin donde la sensibilidad es del 95 %y el error de tipo Beta (Falso negativo) ha sido fijado al 5%

Error Beta: Tasa de FNError Alfa: Tasa de FPValidacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos72Evaluacin de Mtodos Cualitativos Bsicamente existen varias formas de evaluar losparmetros de desempeo de los mtodos cualitativos.

Destacamos cuatro, todas ellas con ventajas y desventajas:

- Tablas de Contingencias- Teorema de Bayes- Test Estadsticos de Hiptesis- Curvas Caractersticas de DesempeoEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos73PARTICULARIDADES DE LA VALIDACON EN EL CAMPO DE LAS CALIBRACIONES74EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos7475Campo de las CalibracionesExisten una serie de actividades que se encuentran ciertamente emparentadas con el concepto que el trmino validacin encierra para el caso de los ensayos Est sujeto a una validacin permanente

Incertidumbre declarada como capacidad ptima de medida. EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos7576Campo de las Calibraciones

EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos7677Campo de las CalibracionesUn estudio de la documentacin destinado a convalidar que los procedimientos, los patrones de referencia, los equipos, las instalaciones y la capacidad e idoneidad tcnica del personal responsable sean adecuadas para el propsito establecido. Existen tambin diversos procedimientos no normalizados La tarea de evaluacin que se realiza para la acreditacin incluye: EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos7778Campo de las CalibracionesLas comparaciones interlaboratorios.

A nivel internacional, se realizan las llamadas key comparisons cuyos resultados satisfactorios convalidan las capacidades de medicin y calibracin declaradas al BIPM por los laboratorios nacionales de metrologa. Debe agregarse: EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos7879Campo de las CalibracionesMuchos instrumentos modernos se presentan asistidos por un software de procesamiento de datos, o laboratorios que desarrollan programas informticos para facilitar esta tarea en el proceso de las calibraciones. Debe agregarse: En estos casos corresponder una validacin del softwareEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos79

80Que debe contener un Informe de validacinEscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos80Calidad

ComparabilidadConfianzaValidacin de MtodosControl de calidad internosAcreditacin de laboratoriosEjercicios de interlaboratorioConclusiones81EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos81ConclusionesNuestro mtodo de ensayos se ajusta a propsito, posee validezA pesar del paso del tiempoA pesar de las modificaciones que pudieren ocasionar desvos respecto de las especificaciones predeterminadas durante la validacin primaria.A pesar de la deriva o fluctuacin natural que ocurre en todo proceso.82EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos82Conclusiones

CONFIANZA83EscribirUNAH, Tegucigalpa, Honduras Diciembre de 2014 Lic. Sergio G. Chesniuk - www.MetroQuimica.Net Conferencia: Validacin de Mtodos8384Ms informacin y cursos en lnea en:Docente: Lic. Sergio Gustavo Chesniuk

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