cc.vv

COLECCIN Y EVALUACIN DEL SEMEN DE ALPACAS HUACAYA (Vicugna pacos) DE LA FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA MEDIANTE EL USO DE UN MANIQU

Ctedra de San. Y Prod. De

Camlidos Sudamericanos

COLECCIN Y EVALUACIN DEL SEMEN DE ALPACAS HUACAYA

(Vicugna pacos) DE LA FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS DE LA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA MEDIANTE EL USO DE UN

MANIQU

I. INTRODUCCIN

La alpaca es uno de los CSAs ms importantes en nuestro pas desde

el punto de vista social, econmico, cultural y cientfico (VARGAS

2011).

El comportamiento sexual vara de acuerdo a la especie, y en el caso

particular de los camlidos sudamericanos, se presentan

caractersticas muy peculiares (Curie & Ivn 2008). Las circunstancias

de la posicin coital y su temperamento nervioso hacen que la

obtencin de semen presente serias dificultades (Bustinza, 2001) y

esto provoc que durante varias dcadas se investigue una tcnica

ptima para poder extraer este semen y poder manejar los

espermatozoides sin que estos pierdan su capacidad fecundante

(Sols, 1997).

Los primeros trabajos de coleccin de semen en camlidos

sudamericanos se hicieron con el uso de fundas vaginales

(Mogrovejo, 1952), posteriormente se emple la electro eyaculacin

(Fernndez Baca y Caldern, 1965), vagina artificial con una crvix

simulada (Sumar y Leyva, 1981) y recientemente, el uso de un

maniqu equipado con una vagina artificial para la recoleccin del

semen (P. W. Bravo, U. Flores 1997).

II. OBJETIVOS

1. Colectar el semen de alpaca mediante el uso de una vagina

artificial dentro de un maniqu.

2. Evaluar la viabilidad espermtica de la alpaca Huacaya mediante

el uso de microscopa.

III. REVISION DE LITERATURA

1. Los Camlidos Sudamericanos y su importancia en la

sociedad altoandina

Los CSA constituyen un recurso gentico de gran importancia

social, econmica, cultural y cientfica para nuestro pas. En la

actualidad, constituyen el nico medio de utilizacin productiva de

las extensas reas de pastos naturales de las zonas alto andinas

donde no es posible la agricultura ni la crianza econmica de otras

especies de animales domsticos (FAO, 2005).

La crianza de alpacas en el Per se desarrolla en la regin

altoandina, en mayor proporcin en la sierra sur y central, en

altitudes que van de los 3800 hasta ms de 5000 metros sobre el

nivel del mar (FAO, 2005).

La alpaca es una especie que representa un factor importante de

la economa de nuestro pas, siendo el Per el pas con la mayor

poblacin de alpacas con aproximadamente 3 millones de cabezas

(Esponda et al., 2004).

La produccin alpaquera genera fuentes de ingreso para por lo

menos 1.5 millones de campesinos de ms de 1000 comunidades

de Apurmac, Arequipa, Ayacucho, Cusco, Huancavelica, Junn,

Lima y Puno (Esponda et al., 2004).

2. COLECCIN DE SEMEN EN CAMLIDOS SUDAMERICANOS

2.1. FUNDAS VAGINALES.

Mogrovejo (1952) realiz el primer ensayo de coleccin de

semen en alpacas, utilizando una funda de ltex colocada

intravaginalmente antes de la cpula; despus de la monta

se retiraba la funda que serva de recipiente de semen; con

esta tcnica se logr colectar semen, presentaba algunos

inconvenientes, ya que se interfera con la cpula normal y

alargaba el tiempo de monta ms all de los valores

normales; la colocacin de la funda dentro del tracto genital

y su fijacin ofreca serias dificultades y con frecuencia

provocaban lesiones que inhabilitaban a la hembra para su

uso posterior; existieron otros intentos de colectar semen

con fundas vaginales, realizadas por Palomino (1962) y

Jhonson, (1989). En 1991, Sucapuca, realiz un estudio

de coleccin de semen en alpacas mediante la tcnica del

preservativo, obteniendo pequeos volmenes y bajas

condiciones espermticas.

2.2. ESPONJAS VAGINALES.

Esta investigacin fue realizada por San Martn (1961) el

cual usa trozos de esponja que se introducen en la parte

anterior de la vagina y que absorbe el semen y otros fluidos

vaginales, sirviendo como contenedores; el inconveniente

de este mtodo es que logra obtener semen muy

contaminado y mezclado con los fluidos del tracto genital

femenino y esto diluye el semen y lo contamina con

bacterias, dificultando as su evaluacin, por lo que no se

recomienda su uso para fines de inseminacin artificial.

2.3. ELECTROEYACULACIN.

En 1966, Fernndez-Baca y Caldern reportaron el uso de

la electroeyaculacin para la coleccin de semen de

alpacas, utilizando un equipo de fabricacin nacional, con

una intensidad mxima de 40 voltios, se obtuvieron

muestras de semen con la ventaja de realizar la coleccin

sin la necesidad de tener hembras en celo, acortar el tiempo

de coleccin y realizarla a lo largo de todo el ao; tambin

se utiliz esta tcnica para obtener semen de vicuas y

pacovicuas (hibrido cruce de alpaca con vicua)

(Fernndez Baca y Novoa, 1968). Los resultados de

electroeyaculacin muestran gran variabilidad entre

animales y aun entre el mismo animal, adems de obtenerse

semen muy diluido con las secreciones de las glndulas

anexas, contaminado con semen y baja concentracin

espermtica; Jhonson (1989) obtuvo semen de llamas

anestesiadas sedadas, se obtuvo pequeas cantidades

(0.1 a 0.5 ml) con alta concentracin pero no todos los

intentos fueron exitosos. En 1987, Crdenas y Col.

realizaron un estudio comparativo de coleccin de semen

mediante las tcnicas de electroeyaculacin y vagina

artificial, se utiliz un electroeyaculador Plectron,

obtenindose buenos resultados con 60 cargas elctricas de

2 segundos de duracin, 14 voltios, 4 amperios, 25

ciclos/seg. y 2 seg. de descanso entre cada pulsacin, el

semen obtenido por este mtodo tuvo diferentes

caractersticas a las muestras obtenidas mediante vagina

artificial.

2.4. FSTULA URETRAL.

Este mtodo requiere realizar una fstula quirrgica en la

uretra peneana entre el ano y el escroto; el semen es

colectado durante la copula natural, esta tcnica se realiza

utilizando anestesia epidural y anestesia local para colocar

un catter plstico en la uretra desde el pene hasta la vejiga,

el cual sirve para guiar la ciruga y ayuda a identificar la

uretra; la incisin se realiza en la piel, el msculo

bulbocavernoso aislado y se separa la uretra del cuerpo

cavernoso; este mtodo no interfiere en la copula y las

secuelas post operatorias parecen no afectar al animal

(Kubiceck, 1974).

2.5. ASPIRACIN VAGINAL POSTCOITAL.

Muestras de semen pueden ser obtenidas por aspiracin del

fondo de la vagina despus de la cpula, ya que una

pequea cantidad de semen es eyaculada al momento de

llevar el pene de un cuerno al otro, este mtodo no es

invasivo ni tedioso pero la desventaja es que este semen es

incompleto, contaminado y diluido con las secreciones del

tracto genital femenino, se puede utilizar este semen para

realizar la evaluacin de espermatozoides como motilidad,

vitalidad, morfologa; estas muestras frecuentemente se

obtienen con residuos sanguinolentos y se ve de un color

rosado ya que el endometrio se encuentra inflamado y

lacerado por la cpula; la tcnica es introducir un especulo

por la vulva previamente aseada y con la ayuda de una

fuente de luz se ubica la crvix, inmediatamente se aspira

con una pipeta adosada a una jeringa, la utilizacin de este

tipo de semen para evaluar la fertilidad del macho es muy

cuestionada (Bravo, 2002; Neelly y Bravo, 1995).

2.6. VAGINA ARTIFICIAL.

Esta tcnica fue desarrollada por Sumar y Leyva (1981),

para lo cual construyeron un maniqu en forma de una

hembra sentada en posicin de cpula; la vagina artificial

fue una modificacin de la vagina artificial usada para

vacunos y ovinos, la cual consista en un tubo rgido de 7 cm

de dimetro por 25 cm. de largo con una funda interna de

ltex, un cono de ltex al que envolva un alambre en espiral

simulando la crvix de la alpaca y al final un frasco de

coleccin de semen de ovino un tubo de centrifuga, el

agua a 45 se coloca por una vlvula-espita; los machos

aceptaron el maniqu despus de un corto entrenamiento; la

copula se interrumpa cada 10 minutos aproximadamente

para renovar el agua caliente, el semen colectado vari,

dependiendo del macho, el color del eyaculado,

independientemente del volumen, fue de un blanco lechoso

a blanco claro, este semen no muestra motilidad masal por

lo espeso de su consistencia.

La utilizacin de vagina artificial en combinacin con una

hembra receptiva es la tcnica ms ptima de obtener

semen de buena calidad, el que se puede utilizar para fines

de inseminacin artificial, teniendo en cuenta de usar una

fuente de calor continuo y la caracterstica que imite a la

cervix (Vaughan y Col., 2003).

En un estudio llevado a cabo por Dvalos y Olazbal

(2002), se encontr que utilizando hembra receptiva al lado

del maniqu incrementaba la calidad del eyaculado obtenido

mediante vagina artificial a comparacin de solo utilizar el

maniqu solo, incrementando el tiempo de cpula de 15.9 a

16.8 minutos. En Bolivia se trat de mejorar la tcnica de la

vagina artificial utilizando un maniqu de grupa, el cual es un

aditamento que se le coloca a la hembra sin necesidad de

contar con un maniqu de cuerpo completo, la tcnica es

similar a la del maniqu con vagina artificial, adems se

evalu otra tcnica, que es la de colocar la vagina artificial

por desviacin del pene en el momento de la penetracin,

tal como se realiza en vacunos, al comparar las tres tcnicas

se tuvo una aceptacin por parte del macho del 20 % para

la tcnica del maniqu completo sin hembra receptiva, 80 %

para la tcnica del maniqu de grupa y un 90 % para la

tcnica de la desviacin del pene al inicio de la cpula,

segn el autor la ltima tcnica es la ms recomendable

pues evita la contaminacin del eyaculado (Delgado y Col.,

2003).

3. FACTORES RELACIONADOS CON LA COLECCIN

3.1. FRECUENCIA DE COLECCIN.

Se realiz un estudio para evaluar el efecto de la repeticin de

coleccin de semen usando el mtodo de la vagina artificial,

realizando hasta tres colecciones diarias por un periodo de 12

das seguidos, los resultados obtenidos indican que las

caractersticas ms afectadas por la frecuencia de coleccin

fueron la concentracin de espermatozoides, la cual desciende

significativamente en la tercera coleccin, as mismo el

porcentaje de anormalidades en la cola se incrementa pero la

motilidad, porcentaje de vitalidad y el porcentaje de

espermatozoides normales no fue afectada, se vio la diferencia

significativa en todas las caractersticas al hacer las

comparaciones entre individuos; pero a partir del da 10 de

coleccin, casi todos los machos tuvieron un descenso en todas

las caractersticas seminales e incluso algunos solo eyacularon

plasma seminal, especialmente en la tercera coleccin diaria

(Bravo y Col., 1997). En otro estudio similar, se trat de evaluar

el efecto de los intervalos de coleccin a determinadas horas,

cada 2, 4, 12 y 24 horas; la respuesta fue de 65, 85, 100 y 100

% respectivamente, el volumen vari de 0.18, 1.08, 0.19 y 1.64

respectivamente; en la concentracin: 9.2, 44.3, 36.3 y 107

millones/mm3 respectivamente; vitalidad de 4, 43, 55 y 59 %

(Galindo y Garnica, 1995), estos estudios podran indicar que

la frecuencia copulatoria en poca reproductiva podra ser una

causa de baja fertilidad por agotamiento de las reservas

espermticas en los machos.

3.2. DURACIN DE LA CPULA.

Las caractersticas del semen se relacionan con la duracin de

la cpula, esto ha sido descrito desde dos puntos de vista:

Primero el cambio del tubo colector cada 5 minutos y segundo:

La interrupcin de la cpula a 5, 10, 15 y 20 minutos, en general

no existen cambios considerables de volumen del eyaculado

pero si existen cambios substanciales en la concentracin y el

porcentaje de espermatozoides vivos, la concentracin se

increment a los 20 minutos de cpula, sumado a esto, la

interrupcin de la cpula incrementa el porcentaje de

espermatozoides muertos cuando se interrumpe a partir de los

15 minutos, por lo que no se recomienda interrumpir la cpula

ya que la ltima fraccin del eyaculado parece ser la que lleva

la mayor concentracin de espermatozoides vivos (Bravo y

Col., 2002)

3.3. POCA.

Se sabe que la poca as como la alimentacin juegan un papel

importante en la produccin espermtica y en la calidad del

semen colectado de acuerdo a la poca del ao, esto en

condiciones de la sierra sudamericana ya que gracias a la

geografa se presentan estaciones marcadas, problema que no

se presenta en el hemisferio norte por lo que no se orientan

estudios hacia este tema; un reporte de la sierra argentina en

llamas indica que la poca juega un papel importante en la

produccin espermtica, concentracin y porcentaje de

anormalidades, sobre todo de la cola, tenindose buenas

caractersticas seminales durante el verano y las

anormalidades se incrementa durante el invierno (Giuliano y

Col., 2006), en alpacas no se tiene un reporte escrito, pero se

ha visto que en la coleccin de espermatozoides realizada

mediante la tcnica de la desviacin de los conductos

deferentes, ya que dicha tcnica permite obtener semen a lo

largo del ao, se observ una disminucin en la concentracin

y en la vitalidad de los espermatozoides, sobre todo en los

meses de agosto y septiembre (Prez, 2006, comunicacin

personal).

3.4. EDAD.

En un trabajo realizado en llamas, para evaluar el efecto de la

edad de los animales en las caractersticas seminales

obtenidas mediante la tcnica de la vagina artificial, se utilizaron

llamas machos de 3, 4 y 5 aos de edad, se determin que esta

caracterstica no tiene influencia en las caractersticas

seminales (Fernndez y Col., 2003). En alpacas, la edad tiene

un efecto muy sutil en la produccin espermtica, ya que las

caractersticas mejoran ligeramente de acuerdo aumenta la

edad, pero dicha diferencia no es significativa (Bravo, 2002;

Quispe, 1987).

4. EVALUACION DE SEMEN

4.1. CARACTERISTICAS FISICAS

MACROSCOPICAS.- Las caractersticas macroscpicas del

semen de camlidos sudamericanos, entre las cuales se

consideran volumen, color, aspecto y pH. Estas caractersticas

del eyaculado dependern del tipo de coleccin y de la

manipulacin, as como de las caractersticas fisiolgicas de

cada animal.

Cuadro 1.- caractersticas macroscpicas del semen de camlidos

sudamericanos.

MICROSCPICAS.- Las caractersticas microscpicas ms importantes que

se evalan en el semen son concentracin, motilidad, vitalidad y porcentaje

de anormalidades.

Cuadro 2.- caractersticas microscpicas del semen de camlidos

sudamericanos.

IV. MATERIALES Y METODOS

1. MATERIALES

Maniqu hecho a base de madera y recubierto de espuma

ms lana de oveja.

Vagina artificial de ovino modificada a base de PVC.

Fundas de jebe o caucho.

Microscopio

2. MTODOS

Se utilizar el mtodo de la vagina artificial modificada (Bravo et

al., 1997), que consta de un tubo de PVC de 20 cm de largo por 4

cm de dimetro. La vagina artificial contendr aire a presin y agua

caliente que debe mantenerse entre 38 a 40 C, para permitir que

el macho no interrumpa la cpula.(Virgilio et al. 2012).

La vagina artificial se colocar dentro de un maniqu que ser a

base de madera y alambre. Las alpacas macho sern entrenadas

para que copulen con el maniqu por el lapso de 15 das y si se

presenta algn problema el entrenamiento cesar o ser ms

intensivo.

Una vez extrado el semen, ser llevado inmediatamente al

laboratorio para su estudio tanto a nivel macroscpico como

microscpico.

El semen ser estudiando en los siguientes aspectos:

V. CRONOGRAMA

RESULTADOS Y DISCUSIN

CONCLUSIONES

RECOMENDACIONES

RESUMEN

FECHA

ACTIV.

18-05-15 29-05-15 20-06-15 25-06-15 30-06-15 5-07-15 10-07-

15

31-07-15

Realizacin del

maniqu

Realizacin de la

vagina artificial

Entrenamiento

Coleccin de

semen

Presentacin de

resultados

BIBLIOGRAFIA

1. ALLER, J.F., REBUFFI, G.E., CANCINO, A.K. y ALBERIO, R.H. 2003.

Influencia de la criopreservacion sobre la motilidad, viabilidad y

fertilidad de espermatozoides de llama (Lama glama). Arch. Zootec.

52: 15-23.

2. BRAVO, W. 1998. Avances en la fisiologa reproductiva del macho

llama y alpaca. XXI Reunin Cientfica Anual APPA. FMVZ-UNA-Puno.

3. BRAVO, W., PACHECO, C., QUISPE, L, VILCAPAZA, L y ORDOEZ,

C. 1999. Degelification of alpaca semen and the effect of dilution rates

on artificial insemination outcome. Arch. Of Androl. Vol 43:239-246.

4. BRAVO, W., FLORES, D. and ORDOES, C. 2000 Effect of repeated

collection on semen characteristics of alpaca. Biol. of Reprod. 57: 520-

524.

5. BRAVO, W. SKIDMORE, J.A. and ZHAO X.X. 2000 reproductive

aspects and storage of semen in camelidae. Anim. Reprod. Sci. 62:

173-193.

6. BRAVO, W. 2002. The reproductive process of South American

camelids. Printed by Seagull Printing, Salt Lake City. USA.

7. BRAVO, W., MOSCOSO, R., ALARCON, V. y ORDOEZ. 2002.

Ejaculatory process and related semen characteristics. J. of Androl. 48:

65-72.

8. BRGEL, H. y GAULY, E. 1999. criopreservation of llama (lama

glama) semen. II Congreso Mundial sobre Camlidos. Cusco Per.

9. BUSTINZA, V., 2001. La Alpaca, primera edicin, Tomo I, Editorial

Universitaria. Puno Per.

10. CARDENAS, M., VIVANCO, M y BRAVO, W. 1987. comparacin de

dos mtodos de coleccin de semen en alpacas. X Reunin cientfica

anual del APPA. UNA - PUNO Per.

11. CCALLO, M., 1996. Efecto de la fibrinolisina, hialuronidasa,

colagenasa y tripsina sobre la viscosidad del semen de alpaca y llama.

Tesis FMVZ-UNA-Puno. Per.

12. COPA, S., GONZALES, V. y MACEDA, E. 2003. tcnica de

bulbouretrectomia en llamas machos. III Congreso mundial de

camlidos. Potos Bolivia.

13. DAVALOS, R. y OLAZABAL, J. 2002. Evaluacin de dos formas de

coleccin de semen en alpacas. Rev. Inv. Vet. Per. 13 (2): 98-99.

14. DELGADO, P., FLORES, F., FERNANDEZ, R., GONZALES, V.,

MACEDA, E., COPA, S. y MEDINA, J. 2003. Tcnicas de coleccin de

semen en llamas. III Congreso mundial de camlidos. Potos Bolivia.

15. DEZA, H. 2004. conservacin de espermatozoides obtenidos a travs

del conducto deferente de alpacas (lama pacos) y llamas (lama glama)

y su posterior viabilidad. Tesis FMVZ-UNA-Puno.

16. ENRIQUEZ, E., BRAVO, W. y ORDOEZ, C. 1997. Efecto de la

tripsina y tres dilutores en semen de alpaca. Rev. Allpaka. Vol. 6, n1

Puno - Per.

17. FERNANDEZ, R., COPA, S. y GUZMAN, J. 2003. Efecto de la edad y

periodicidad de coleccin sobre las caractersticas macro y

microscpicas del semen de llama. III Congreso mundial de camlidos.

Potos Bolivia.

18. FERNANDEZ BACA, S. y CALDERON, M. 1966. mtodos de

coleccin de semen de la alpaca. Rev. Fac. Med. Vet. UNMSM. 18-20:

13-26.

19. FERNANDEZ BACA, S y NOVOA, C. 1968. primer ensayo de

inseminacin artificial de alpacas (Lama pacos) con semen de vicua.

Rev. Fac. Med. Vet. UNMSM. 22: 9-18.

20. GALINDO, W. 1995. Efecto de eyaculaciones sucesivas sobre las

caractersticas del semen de alpacas. Tesis FMVZ-UNA-Puno. Per.

21. GIULIANO, S., DIRECTOR, A., GAMBAROTTA, M., TRASORRAS, V.

y MIRAGAYA, M. Caractersticas seminales de la especie lama glama:

efectos del mtodo de extraccin, del macho utilizado y de la estacin

del ao. Memorias del II Simposium internacional de investigaciones

sobre camlidos sudamericanos. Arequipa Per.

22. GONZALES, V y COPA, S. 2003. efecto de la bulbouretrectomia y

periodicidad de coleccin en las caractersticas macro y microscpicas

del eyaculado en llamas (Lama glama). Camlidos, trabajos de

investigacin. Universidad catlica Boliviana San Pablo. La Paz.

Bolivia.

23. HUANCA, W. y GAULY, M. 2001. Conservacin de semen refrigerado

de llamas. Rev. Inv. Vet. Per. 1: 460-464.

24. JHONSON, L.R. 1989. Llama reproduction, en: Llama medicine. The

veterinary clinics of north America. Food animal practice 5 (1) 159-182.

25. KUBICECK, J. 1974. sanementnahme beim alpaka durch eine

harnrihrenfistel. Z Tierzuechtung Zuechtungsbiologe 90:335.

26. MOGROVEJO, D. 1952. Estudios del semen de alpacas. Tesis FMV-

UNMSM-Lima Per.

27. NEELY, D and BRAVO, W. 1995. Reproductive evaluation and

infertility in the male llama and alpaca. In: Llama Theriogenology

Youngquist. Academy Press.

28. PALOMINO, H. 1962. Espermiograma y dimensiones de los

espermatozoides de la alpaca. Tesis Bach. FMV-UNMSM-Lima Per.

29. PARICAHUA, E. 2001. Evaluacin del eyaculado sin la secrecin de

las glndulas anexas en alpaca. Tesis FMVZ-UNA-Puno. Per.

30. POBLETE, P., VON BAER, A., VON BAER, L y DEL CAMPO, M.

2003. Evaluacin de la morfologa espermtica del semen de

camlidos sudamericanos tratado con tripsina. III Congreso mundial

de camlidos. Potos Bolivia.

31. QUINTANO, J. 2002. Determinacin de la sobrevivencia de los

espermatozoides de alpaca (lama pacos) colectados del conducto

deferente con el uso de tres dilutores. Tesis FMVZ-UNA-Puno. Per.

32. QUISPE, F. 1987. Evaluacin de las caractersticas fsicas del semen

de la alpaca durante la poca del empadre. Tesis FMVZ-UNA-Puno.

Per.

33. RATTO, M, WOLTER, M., GOMEZ, C y BERLAND, M. 1999.

Refrigeration of epididymal sperm from lama with three differents

extenders. II Congreso Mundial sobre Camelidos. Cusco Per.

34. RIVERA, E. 1998. Uso de la yema de huevo y la glicerina en la

sobrevivencia de los espermatozoides de alpaca. Tesis FMVZ-UNA-

Puno.Per.

35. SAN MARTIN, F. 1961. Fisiologa de la reproduccin de la alpaca. An.

Symp. Sobre problemas ganaderos. Lima Per.

36. SANTIANI, A., HUANCA, W., HUANCA, T., SEPULVEDA, N. y

SANCHEZ, R. 2005. Effects on the quality of frozen-thawed alpaca

(lama pacos) semen using two differents cryoprotectants and

extenders. J. Androl. 7:303-309.

37. SOLIS, R. 1997. Produccin de camlidos sudamericanos. Imprenta

Ros. Huancayo Per.

38. SUCAPUCA, V., 1991 Caractersticas fsicas del semen de la alpaca

obtenido por el mtodo del preservativo. Tesis FMVZ-UNA-Puno.

Per.

39. SUMAR, J. y LEYVA, C. 1981. Coleccin de semen mediante vagina

artificial en la alpaca (lama pacos). Memorias del IV convencin

internacional sobre camlidos sudamericanos. Punta Arenas. Chile.

40. VALDIVIA, M., RUIZ, M., BERMUDEZ, L., QUINTEROS, S.,

GONZALES, A., MANSALVA, I., PONCE, C., OLAZABAL, J. y

DABALOS, R. 1999. Criopreservacion de semen de alpaca. II

Congreso Mundial sobre Camlidos. Cusco Per.

41. VON BAER, L. y HELLEMANN M.V. 1998. Variables seminales en

llamas. Arch. Med. Vet. 30 (2). Valdivia. Chile.

42. Curie, P. & Ivn, J., 2008. Mtodos de de semen en camlidos

sudamericanos - Methods of semen collection in south american

camelids. Revista electrnica de Veterinaria, IX(4), pp.115. Available

at: http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n040408/040806.pdf.

43. P. W. Bravo, U. Flores, J. Garnica2 and C. Ordofiez Estacion, 1997.

COLLECTION OF SEMEN AND ARTIFICIAL INSEMINATION OF

ALPACAS. Elsevier, 2(97). Available at:

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0093691X97000204

#.

44. VARGAS, S.S.E., 2011. EVALUACIN DE LA EXPRESIN DEL GEN

DE LA Protena rica en Cistena asociada a Mitocondrias

Espermticas (SMCP) EN ALPACA (Lama pacos). Universidad

Nacional Mayor de San Marcos. Available at:

http://dspace.concytec.gob.pe/bitstream/concytec/46/1/evangelista_v

s.pdf.

45. Virgilio, A.B., Wilber, G. V. & Bravo, P.W., 2012. Inseminacin artificial

de alpacas con semen colectado por aspiracin vaginal y vagina

artificial. Revista de Investigaciones Veterinarias del Peru, 23(1),

pp.5864. Available at:

http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/veterinaria/articl

e/view/882.

ANEXOS