明海歯科医学会

第 20回学術大会抄録日時：2013年 6月 6日（木）9 : 00～

会場：明海大学歯学部第 1・第 2会議室

口内法 X 線撮影の最適化に関する研究

井澤 真希明海大学大学院歯学研究科歯学専攻

（理工系歯科器材研究群歯科放射線学）

【目的】2007年の医療法改正に伴い，どの施設でも医療機器の保守点検と安全使用が義務付けられ X 線撮影装置の品質管理（QC）が必要となった．国際放射線防護委員会（ICRP）は QC の一部として定期的に患者線量を測定し，その線量を診断参考レベルと比較して最適化を行うよう勧告している．そして，患者線量が常に診断参考レベルを超えていたときには，その線量が正当化されない限り，検査手法を見直すべきである．本研究では，口内法 X 線撮影の QC プログラムを確立するため，明海大学歯学部付属明海大学病院（以下当施設）における患者の撮影条件と線量を調査することおよび線量と写真画質の関係を視覚評価することから口内法 X 線撮影の最適化を図ることを目的とする．【材料と方法】実験は，以下の項目に沿って進めた．

1 ）3 台の口内法 X 線撮影装置 Heliodent 60 DS（Si-

rona）の管電圧，照射時間，焦点から 20 cm のコーン先端での空気カーマを ThinX RAD（Unfors Instru-

ments）を用いて測定し，撮影装置の特性を調査した．2）照射録から撮影条件が特定できた患者約 1,000名を抽出し，その撮影条件からコーン先端での空気カーマ即ち患者入射線量（PED）を算定した．

3）軟組織を模した 3 cm 厚さの水槽と 1 mm 間隔で 10

mm 厚さまでのアルミニウム階段を含んだ成人下顎骨臼歯部ファントムを作成し，管電圧 60 kV，管電流 7

mA の条件で当施設にて使用されている InSight フイルム（Kodak）を用い，同一の幾何学的配置で，照射時間を 0.16～0.80 s の間で 8段階変化させて撮影を行った．現像した写真を 12名の歯科放射線科医によって観察し，11評価項目を 5段階で画像評価し，回答結果を統計的に分析した．

【結果と考察】撮影装置の管電圧は 60±2 kV，タイマーの設定時間は 0.1～0.64 s の使用範囲で全ての装置が 1.7

％以内の誤差であり，コーン先端空気カーマは，公称管電流 7 mA での設定 mAs 値当たり平均 0.863 mGy であり，どの装置でも変動は 4.2％以内であった．18歳以上の成人患者に対する男女平均の PED 値は，上下顎の切歯部，小臼歯部，大臼歯部に対してそれぞれ，1.56,

1.09, 1.92, 1.27, 2.42, 1.59 mGy（標準偏差は約 20％）であった．英国では成人患者の下顎大臼歯部撮影に対する診断参考レベルとして，E グループ感度以上のフィルムと 60−70 kV を使用したときには 2.1 mGy と勧告されている．同部位の当施設平均 PED は標準偏差を考慮しても 1.59±0.20 mGy となり，その勧告値を下回っていた．また，各画像評価項目に対する平均評点は，線量とともに評価点が増大する，特定の線量範囲で評価点が極大に達する，線量とともに評価点が減少する，という 3群の傾向に分かれた．1枚の写真から全評価項目を最高点で満たすフィルムはなかったが，全評価項目で評点が上位となるフィルムでは，一般的な臨床上の診断治療目的を達成するのに十分な写真であると判断された．この写真範囲の PED は 1.51−3.02 mGy であった．【結論】ICRP の勧告に従って患者防護の最適化を推進するため口内法 X 線撮影における QC の一環として英国の診断参考レベルと比較した限りでは，当施設では撮影条件・線量・画質ともに適正に維持されていることがわかった．

抗菌光線力学療法を用いたインプラント周囲炎の治療法に関する in vitro 研究

寺西 麻里奈明海大学大学院歯学研究科歯学専攻（機能系病態機能研究群歯周病学）

【背景】インプラント周囲炎の有病率は 12～43％と報告されているが，その治療法は未だに確立されていない．近年，歯周炎患者に対する抗菌光線力学療法（antimicro-

bial Photodynamic Therapy : a-PDT）の有効性が示唆されている．a-PDT とは，細菌を光感受性薬剤で染色し，レーザーを照射することにより殺菌を行う方法で，人体に対する為害作用が少なく，非侵襲性であり，耐性菌を生じないことから，インプラント周囲炎の治療法としての臨床応用が検討されている．しかしながら，汚染されたインプラント体の殺菌法としての a-PDT の有効性に関する in vitro における研究は極めて少ない．そこで，本研究は in vitro において，汚染されたインプラント体

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S21

表面に対する a-PDT による殺菌効果について検討を行うことを目的とした．【材料および方法】インプラント体（Zimmer Dental 社製）は，表面にハイドロキシアパタイトブラスト酸処理を施してあるものを使用した．また歯周病原細菌としてPorphyromonas gingivalis ATCC 33277株と Aggregatibac-

ter actinomycetemcomitans ATCC 43718 株を使用し，培養液中にインプラント体を浸漬させ，付着処理を行った．a-PDT には，光感受性薬剤に 0.01％メチレンブルー溶液（MB）（オンダインバイオファーマ社製），低出力赤色半導体レーザー（ぺリオウェイブⓇ，ぺリオウェイブデンタルテクノロジー社製）を使用した．まず照射部位数による影響を検討した．照射を行わなかったものを Control とし，さらに 1, 2, 4, 6部位から照射を行い比較した．照射時間は 1部位につき 1分と設定した．次に殺菌処置を行わなかったものを Control 群とし，メチレンブルーのみ塗布を行った MB 群，レーザー照射のみを行った laser 群，MB 塗布後レーザー照射を行った a-

PDT 群の 4群を設定し比較した．評価法として，インプラント体表面を走査電子顕微鏡（SEM）により観察した．殺菌効果の評価として，インプラント体から細菌を剥離させ，寒天培地にて培養し Colony forming unit

を算定した．また，インプラント体表面に残存したLipopolysaccharide（LPS）残量は，エンドトキシン計測キット（GenScript USA 社製）を使用し計測を行った．全ての統計分析には，Kruskal-Wallis 検定および Mann-

Whitney U-test With Bonferroni 検定を用いた．【結果】SEM によるインプラント体表面の観察結果から，汚染処理後にインプラント体表面構造内に各菌が付着していること，また，各処置後ではインプラント体表面に変化が見られなかったことが確認された．照射部位数による残存生菌数の比較において，P.g が付着したインプラント体および A.a が付着したインプラント体は，照射部位数の増加に伴い殺菌効果が高まり，6部位は全ての群に対して残存生菌数が有意に減少したことが認められた．各処置後の残存生菌数の比較において，P.g が付着したインプラント体および A.a が付着したインプラント体は，a-PDT 群は全ての群と比較し，有意な生菌数の減少が認められた．MB 群は Control 群および Laser

群と比較して，有意な生菌数の減少が認められたが，a-

PDT 群より有意に生菌数が多かった．また，Laser 群はControl 群と比較して有意な差は認められなかった．LPS

残量の計測では，a-PDT 処置後のインプラント体表面からも LPS 残量が計測され，細菌を付着させてないイン

プラント体表面と比較して有意な高い値が認められた．【考察】本研究結果から，a-PDT は，インプラント周囲炎の治療法におけるインプラント体表面の殺菌において有効である可能性が示唆された．しかし，a-PDT の処置を行った後も，LPS は残存することが確認されたため，機械的清掃法と併用することが必要であると考えられる．

口腔扁平上皮癌におけるコクサッキー・アデノウィルス受容体（CAR/CXADR）の役割について

柳下 治男明海大学歯学部病態診断治療学講座口腔顎顔面外科学分野

膜貫通型糖タンパク質であるコクサッキー／アデノウィルス・レセプター（CAR/CXADR）は最初，上皮細胞表層のウィルス接着部位と見なされた．その後，タイトジャンクション複合体の構成要素であり，タイトジャンクション形成の調節因子として認識されるようになった．さらに CAR は接合部複合体の一部として生理学的に細胞間接着に関与している．機能的に CAR の欠失は細胞間接着が弱まり，細胞増殖を増大させ，癌細胞の浸潤および転移が促進する．これらの所見に基づいて，ヒトの癌における CAR の腫瘍抑制的な働きが想定されている．近年，多様な臓器における CAR の発現が観察されているが，口腔癌においては明らかではない．本研究では，口腔扁平上皮癌における CAR の役割について in vitro および in vivo の検索を行ったのでその概要を報告する．CAR は口腔扁平上皮癌由来株化細胞において自発的に発現していた．とりわけ，CAR は p53

遺伝子変異株において顕著に発現していたため，p53 遺伝子野生型である SAS 細胞を用い，p53 遺伝子をノックダウンした時の CAR の発現について検索した．その結果，p53の減少に伴って CAR の発現レベルは減少したが，nuclear factor-kappaB（NF-κB）は増大したため，CAR

の機能は p53と連動して腫瘍成長を抑制する可能性が考えられた．次に CAR 遺伝子をノックダウンしたところ，SAS 細胞数および NF-κB タンパク質の発現量において大きな変化は認められなかった．さらに CAR 遺伝子を過剰発現させた際，SAS 細胞数は顕著に減少し，最終的に caspase 9, 3 および 7 の活性化を介して SAS

細胞にアポトーシスを誘導することがわかった．これまでの結果から，SAS 細胞において CAR 遺伝子は変異し

S22 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

ており，増殖活性をコントロールしていないことが示唆された．加えて，口腔扁平上皮癌の生検組織を用いた免疫組織化学的検索を行った結果，p53陽性口腔扁平上皮癌 22例のうち 17例（77.3％）の，腫瘍細胞の細胞膜にCAR 陽性所見を認めた．特に p53の強陽性所見を示す症例において CAR 陽性所見が多く認められた．またNF-κB 陽性全例において CAR の発現も陽性を示した（100％）．これらの所見は，CAR が口腔癌増殖の抑制において重要な役割を担っている事を示唆している．

コラーゲンジペプチド（Pro-Hyp, Hyp-Gly）による骨代謝制御

関 勇哉明海大学大学院歯学研究科歯学専攻（機能系病態機能研究群口腔診断学）

【目的】コラーゲンの熱変性タンパク質がゼラチンであり，これを酵素などで加水分解したゼラチン加水分解物がコラーゲンペプチドとして機能性食品素材として用いられている．ヒトやラットにおいてコラーゲンを摂食すると，血中に複数のコラーゲン由来のジペプチドが検出される．これらのジペプチドのうち骨組織に多く含まれるⅠ型コラーゲンには Pro-Hyp（PO）と Hyp-Gly（OG）配列ともに多く存在する．ヒトⅠ型コラーゲン 1本鎖の中に PO 配列は 49 ヵ所，OG 配列は 127 ヵ所存在し，この 2つのジペプチドが機能性成分として注目されている．そこで本研究ではマウスを用いた実験系で PO, OG

の骨代謝および骨組織に与える影響について検討した．さらにマウス骨髄細胞由来破骨細胞，培養骨芽細胞株MC3T3-E1 を用いた実験系で骨吸収，骨形成に対するPO, OG の効果について検討した．【材料及び方法】C57 BL/6J 雄性マウス 10週齢に高リン食を摂食させたリン誘導性硬組織障害モデルマウスを用いた．飼育終了後，血清の骨代謝マーカーを測定した．また大腿骨を用い，pQCT による骨密度の測定および三点折り曲げ法による骨強度を測定した．さらに下顎骨を用い軟 X 線撮影および μCT により歯槽骨の石灰化度や形態学的な解析を行った．また脛骨および下顎骨のパラフィン切片を作製し，HE 染色により骨構造の比較検討を行った．さらに大腿骨の DNA マイクロアレイ法により骨代謝関連遺伝子の発現量を比較した．マウス骨髄由来破骨細胞を用いた実験では TRAP 染色により PO,

OG の TRAP 陽性多核細胞形成および数を測定した．

MC3T3-E1を用いた実験では増殖，分化や石灰化および骨形成関連遺伝子の発現量に対する PO, OG の影響を調べた．また細胞分化は ALP 染色で評価した．さらに石灰化は VonKossa 染色で評価した．また遺伝子発現量については骨芽細胞分化関連遺伝子の mRNA 発現量をRT-PCR 法で評価した．【結果】血清の骨代謝マーカーは PO あるいは OG 投与によっても有意な差は認められなかった．骨密度を測定した結果，PO は海綿骨（関節軟骨下骨，一次）を増加させ，OG はすべての骨密度を増加させていた．また高リン食摂取で低下していた骨強度も PO, OG 摂取により増加していた．さらに下顎骨軟 X 線写真では根分岐部域において PO, OG 摂取により歯槽骨石灰化度が増加していた．また μCT においても骨梁が増加していた．さらに脛骨および下顎骨組織像においても PO, OG 摂取により骨梁幅が増加していた．DNA マイクロアレイ解析では PO 群で発現上昇した遺伝子に Htr2b, Htr3a, Fgf2,

Msx1, Has3, Itga1があり，PO 群で発現減少した遺伝子に Rarg, Vdr, Rankl, Phex があった．OG 群で発現上昇した遺伝子に Fgf2, Msx1, Has3, Gata4, Cdh10 があり，OG 群で発現減少した遺伝子に Vdr, Rankl, Phex, Erα ,

Rank, Bmp2, Ctsk があった．またマウス骨髄細胞由来破骨細胞の TRAP 陽性多核細胞が，PO 添加では細胞数が増加し，OG 添加では細胞数が減少した．さらに PO, OG

は MC3T3-E1の増殖には影響を及ぼさなかった．しかし PO, OG を添加した MC3T3-E1は石灰化に関与する分化マーカーの ALP の活性，リン酸カルシウムの沈着が促進されていた．また遺伝子発現量の検討では MC3T

3-E1に PEPT1, PEPT2が発現していた．さらに PO, OG

を添加した MC3T3-E1において Runx2の mRNA 発現量が増加していた．【結論】以上の結果から PO, OG などのコラーゲンジペプチドは骨代謝を制御する新しい生理活性物質である可能性を明らかにした．これまで全く歯科領域では利用されることのなかったコラーゲンジペプチドを骨疾患の予防あるいは治療法の開発へ繋がることが期待される．

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S23

マウス骨端板軟骨の septoclast における表皮型脂肪酸結合タンパク（E-FABP）の発現

坂東 康彦明海大学大学院歯学研究科歯学専攻

（形態系正常形態研究群口腔解剖学Ⅱ）

【背景】疫学的および細胞生物学的研究により，DHA やEPA などの n-3系長鎖不飽和脂肪酸（PUFA）やビタミン A およびその誘導体であるレチノイン酸が，骨成長やリモデリングに影響を与えることが知られている．また，脂肪酸結合タンパク（FABP）は，水に不溶の PUFA

に結合し，細胞内への取り込みと細胞内輸送を担い，脂質代謝やエネルギー代謝に関与すると考えられている．しかし，骨組織における FABP の局在や役割は不明である．本研究では，n-3系 PUFA と親和性が高く，レチノイン酸の細胞質内輸送にも関与すると考えられている表皮型 FABP（E-FABP, FABP5）の，骨端板軟骨を含む骨組織における局在とその役割について調べた．【方法】実験 1：正常発育マウス骨端板における E-FABP

の発現：①免疫組織化学：胎生 16日（E16），生後 0週齢（P0w），P1w, P2w, P3w, P4w の ddy マウスを用いた．4％ paraformaldehyde 溶液で灌流・浸漬固定し，EDTA

溶液中で脱灰後，脛骨頭の矢状断連続凍結組織切片を作成した．抗 E-FABP 抗体による免疫組織化学と骨端板領域に存在する細胞マーカーの組織化学的染色およびE-FABP 免疫組織化学との二重染色を行った．②免疫電顕：Pre-embedding 法により抗 E-FABP 抗体を用いた免疫電子顕微鏡的観察を行った．③RT-PCR : Methacarn

固定後，レーザーマイクロダイセクションにより軟骨部，骨軟骨境界部，骨梁部の各領域の組織片を採取して，RNA 抽出を行った．RT-PCR により，領域間でのE-FABP 発現量の比較を行った．実験 2：ビタミン A・レチノイン酸の影響：①レチノイン酸受容体の局在：抗 E-FABP 抗体と抗レチノイン酸受容体（PPAR）抗体の二重免疫組織化学的染色を行った．②過剰投与・欠乏食実験：レチノイン酸を大豆油に希釈したものを過剰摂取させた P4w マウス，ビタミン A 欠乏食を離乳期より摂食させた P9w マウスおよび正常に飼育させた同週齢のマウスに対し，抗 E-FABP

抗体を用いた免疫組織化学的染色を行った．【結果】実験 1：①免疫組織化学：生後マウスの骨端板肥大層の直下に，E-FABP 免疫陽性の単核で小型の細胞が緊密に単層をなして配列していた．蛍光二重染色で，E-FABP 陽性細胞は cathepsin B および DBA レクチンに

も陽性を示した．しかし，破骨細胞マーカーの MAC-2，骨芽細胞マーカーのアルカリ性ホスファターゼ，血管内皮細胞マーカーの BSA レクチンには陰性であった．従って，E-FABP は非石灰化軟骨を吸収すると考えられている septoclast に局在することが分かった．E-FABP 陽性の septoclast は胎生期では軟骨骨境界から少し離れた部位にも散在していたが，生後は次第に密度の高い細胞層を軟骨骨境界部に形成した．②免疫電顕：E-FABP 陽性細胞は細胞質突起が非石灰化軟骨基質である骨端板横隔に伸び，さらに微絨毛が横隔の基質まで達していた．また，E-FABP は細胞質基質，ミトコンドリアおよび核に局在していた．③RT-PCR：骨端板の骨軟骨境界部において，軟骨部および骨梁部と比較して E-FABP mRNA

が有意に高く発現していることが確認された．実験 2：①レチノイン酸受容体の局在：E-FABP 陽性

の septoclast にレチノイン酸核内受容体である PPARβ/δの発現が認められた．②過剰投与・欠乏食実験：レチノイン酸過剰摂取マウス，ビタミン A 欠乏食摂食マウスともに，骨端板直下の E-FABP 陽性細胞の密度の減少と横隔に伸びる細胞質突起の欠失または形態不全が認められた．【考察・結論】軟骨内骨化の過程において，septoclast が

E-FABP を特異的に発現して有効なマーカーとなり得ること，E-FABP を介する n-3 PUFA やレチノイン酸の代謝経路が存在することが示唆された．また，septoclast

は，胎生期の一次骨化中心の発生直後から骨端板に存在することから，septoclast が軟骨内骨化の非石灰化軟骨基質の吸収過程に，重要な役割を担っていることが強く示唆された．さらに，ビタミン A は，レチノイン酸を介して septoclast による軟骨内骨化の軟骨基質吸収にも影響を与えることが分かった．

立効散の鎮痛作用と薬物動態の検討

長尾 隆英明海大学歯学部病態診断治療学講座薬理学分野

【目的】立効散は歯痛などに対して保険適用が認められている漢方薬である．甘草，細辛，竜胆，防風，升麻からななり，抜歯後疼痛，歯髄炎，歯周炎，舌痛症などの口腔内疼痛に幅広く利用されている．特に，歯科領域で頻用されるジクロフェナクナトリウムをはじめとした酸性非ステロイド性抗炎症 薬 （ non-steroidal anti-

inflammatory drugs : NSAIDs）が奏効しづらい抗悪性腫

S24 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

瘍薬の副作用で発現した重度の口内炎あるいはヘルペス性口内炎口腔内に対しても鎮痛効果が認められることから，立効散は患者の苦痛軽減に重要な役割を果たしている．しかしながら立効散は，マクロファージ系細胞に対し炎症時に産生が増加するとされる cyclooxygenase

（COX）-2タンパク質の発現を誘導する一方で，COX-2

活性抑制による prostaglandin E2産生抑制という複雑な働きを持つことが明らかになっているが，鎮痛効果発現機序の詳細は不明であり，鎮痛効果の定量評価もなされていない．また，立効散は作用発現が早いとされる漢方薬であるが，鎮痛効果の発現と薬物動態の関連性も明らかとされていない．そこで本研究では，立効散の鎮痛効果と体内動態の関連性を，マウスの仮性疼痛反応（Writh-

ing syndrome 法）観察と HPLC 法にて行った．【方法】立効散（200, 400, 600 mg/kg）を蒸留水に溶解しマウスに投与（0.1 ml /10 g, p.o.）し，20−90分後に 0.6

％酢酸を投与（0.1 ml /10 g, i.p.）し stretch movements の発現を他の行動指標（locomotion, rearing, grooming など）と併せて 45分間測定し，アセトアミノフェン，アスピリン（いずれも 300 mg/kg, p.o.）と比較した．同様に立効散の成分生薬（立効散 400 mg/kg 相当量）の鎮痛効果も検討した．薬物動態の測定のために，立効散を投与（400 mg/kg, p.o.）されたマウスに全身麻酔（ペントバルビタール 50 mg/kg, i.p.）を施し 10−90分後に採血（1 ml , 3.8％ クエン酸 0.1 ml 添加）を行った．血液は除タンパク後に HPLC にて解析した（254,280 nm）．【結果・考察】立効散の各生薬成分は投与 10分後から速やかな血中濃度の上昇を認め，20−30分をピークに 90

分後にはほぼ検出限界を下回ることが明らかとされた．鎮痛作用も投与 20 分後から用量依存的に有意（P

＜0.05）に認められ，アセトアミノフェンならびにアスピリンと同程度の鎮痛強度を有することが明らかになった．更に，前処置時間の延長（ 90 分）は有意（P

＜0.05）な鎮痛効果の増強を示し，立効散の鎮痛効果発現への代謝産物の重要な関与が示された．また，成分生薬のみの投与では有意な stretch movements の発現抑制は得られず，有効な鎮痛効果発現のためには各生薬の協力作用が不可欠である事が示された．

マウス咽頭喉頭筋における心筋型脂肪酸結合タンパクの局在－特に食餌のテクスチャーが内喉頭筋に及ぼす影響について－

横塚 裕二明海大学大学院歯学研究科歯学専攻

（形態系病態形態研究群口腔外科学Ⅱ）

【背景】誤嚥の防御機構は，喉頭蓋，喉頭前庭，および声帯閉鎖の 3重構造による食塊の気道への侵入を防いでいる．ヒトとマウスでは嚥下に関する咽頭・喉頭の解剖学的配置は異なるが，成獣マウスではヒトの新生児期との位置関係の類似性が高く，喉頭蓋が高く，軟口蓋と喉頭蓋が触れ合う位置にある．また，乳児期の特徴も一致する．咽頭・喉頭を構成する骨格筋はエネルギー代謝が大きい組織であり，糖代謝と脂肪酸代謝により賄われている．脂肪酸代謝では，水に不溶の長鎖不飽和脂肪酸は可溶性の脂肪酸結合タンパクと結合する．心筋型脂肪酸結合タンパク（H-FABP）は骨格筋のエネルギー代謝に重要な役割を担う．マウスでは，離乳期から液状飼料で飼育を行うと咀嚼および顎口腔諸器官の形態変化が生じると報告されている．しかし，嚥下運動における内喉頭筋の変化については，加齢に関する研究報告はあるが，離乳後の食餌形態（テクスチャー）が内喉頭筋に及ぼす影響と誤嚥防御に関する報告は少ない．本研究では，食餌のテクスチャーの違いにより，誤嚥防御に関するマウス内喉頭筋および咽頭収縮筋の H-FABP の局在，および誤嚥防御機構に関与する筋における差異を明らかにすることを目的として実験を行った．【方法】通常飼育した 20週齢オス ddY マウスと，対照群の固形食飼育群と，実験群の液体食飼育群に分けて飼育した離乳後の 3週齢オス ddY マウスを使用した．後者の飼育は 8週齢までの 6週間とした．麻酔後，生理食塩水，次いで 4％パラホルムアルデヒド溶液を左心室より注入して脱血・灌流固定し，頭頸部を摘出して同液に4℃で一晩浸漬した．EDTA 液で 4週間脱灰後，30％シュクロース含リン酸緩衝液（pH7.4）に浸漬し，クライオスタットを用いて，厚さ 20 μm の前頭断および矢状断の連続凍結切片を作成した．その後，ウサギ抗マウスH-FABP 抗体を一次抗体に使用して免疫組織化学を行った．また，筋線維の構成比較はウサギ抗マウス速筋型ミオシン重鎖（F-MHC）抗体を使用した．それぞれ LSAB

法と DAB を用いて検出・発色した．なお，比較する各

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S25

群の染色は同時に同条件で行った．【結果・考察】通常飼育の成獣マウスおよび固形食飼育群マウスでは，咽頭収縮筋，軟口蓋筋および内喉頭筋の多くが H-FABP に対する免疫活性が認められた．しかし，内喉頭筋である披裂間筋では H-FABP 免疫陽性の筋線維はほとんど認められなかった．一方，液体食飼育群では H-FABP の強い免疫活性が認められた．H-FABP

免疫活性はすべての筋線維の細胞質に均一に局在していた．また，F-MHC 免疫染色では，固形飼育群に比し液体飼育群にやや強い免疫活性が認められた．さらに免疫陰性と陽性の筋線維の混在が認められた．喉頭における誤嚥防止機構では，液状飼料が声門を侵入することがないように，披裂間筋によって強力に声門が閉鎖され，その結果として披裂間筋の脂肪酸代謝が活発になったものと考えられた．また，喉頭蓋の反転閉鎖は行われないことと，披裂間筋が主として誤嚥の防御に関与していることが示唆された．固形食飼育群の甲状披裂筋では，筋線維の細胞質に均一な H-FABP の強い免疫活性が認められた．また，F-

MHC 免疫活性はやや弱かった．一方，液体食飼育群では，H-FABP の弱い免疫活性が認められ，陰性と陽性の筋線維の混在が認められた．固形食飼育群の甲状披裂筋の H-FABP の強い免疫活性は，脂肪酸代謝が活発になったためと考えられた．【結論】誤嚥の防御機構において，食餌のテクスチャーによって，咽頭・喉頭の各筋の担う役割とエネルギー代謝に違いがあることがわかった．

精度の高い歯列画像を有す三次元顎顔面頭蓋画像の作製

三條 恵介明海大学大学院歯学研究科歯学専攻（理工系歯材応用研究群歯科矯正学）

【諸言】顎顔面頭蓋の三次元シミュレーションモデルの作製にあたり，CT の DICOM データとレーザにより採得した STL データを統合することが多い．このようなファイル形式の異なる 2種のデータの統合には，主として ICP（Iterative closest point）Algorithm 法が利用されているが，統合精度の評価法や統合化に際しての至適条件が確立されていない．統合精度に影響を与える因子として，画像の抽出法や煩雑なステップに起因した様々なエラーがあり，2種の画像の形態差が大きければ大きい

ほど精度は低下すると考えられる．そこで，本研究ではICP Algorithm 法を用いて DICOM データと STL データの 2種類の画像の統合を行い，その統合精度と作製されたモデルの再現性を検討した．【予備実験】顎矯正手術シミュレーションソフト（Sim-

Plant OMS，マテリアライズデンタルジャパン）を用いて，三次元レーザ計測器（R 700, 3 Shape）により採得した上顎歯列石膏模型の STL データと顎顔面頭蓋のDICOM データを統合した．この時，設定したリファレンスポイント（RP）の部位や数を変えて統合精度を検討した．その結果，前歯部では RP の設定範囲と数の増加により統合精度の向上がみられたが，前歯と比較して大臼歯部での統合精度は劣っていた．このように RP を広範囲に設定し，RP 数を増加させることが統合精度向上につながった．しかしながら，上記のような試みにもかかわらず一定以上の精度は得られず，今後は散乱線の減少や，歯列石膏模型の作製に伴うエラーを改善していくことが重要と考えられた．【本実験】（方法）①乾燥下顎骨の歯列から得られた DICOM データを基に，CT 値が異なる歯や骨に合わせて画像構築を行った．②乾燥下顎骨歯列を対象として直接レーザスキャンにより得られた STL データ（direct データ）または歯列の印象採得後に作製した石膏模型をレーザスキャンして得られた STL データ（imp データ）と，同部のDICOM データを各々統合した．歯列表面上に予備実験と同様に個別に RP 設定を行い，RP の範囲と数を変えてその影響を検討した．③上記②にあたり，三次元画像解析ソフト（Qualify, Geomagic）を用いて面状に設定した RP によるサーフェス画像重ね合わせ法と，個別に設定した RP による統合の精度を比較した．④上記②の di-

rect データと imp データを比較し，歯列模型作製に伴うエラーを検証した．（結果）①適切な CT 値により三次元画像構築を行うことで，DICOM モデルの形態精度が著しく向上した．②RP が広範囲で数が多いほど，direct データや imp データと，DICOM データとの統合精度が向上した．③サーフェス画像重ね合わせ法により，統合精度はさらに向上したものの，imp データを用いた大臼歯部の精度は高くなかった．④imp データと direct データ間には大臼歯部に形態差があった．【考察】歯と骨の双方を含む三次元顎顔面頭蓋モデルの作製にあたり，CT 値の至適化は不可欠であった．予備

S26 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

実験のように個別に RP を設定するよりも，サーフェス画像重ね合わせ法の統合精度は高かった．STL データの採得にあたり，印象採得や模型作製といったプロセスは，統合精度を低下させる要因であった．今後は矯正装置や散乱線の影響を受けにくい硬口蓋の特徴的な形態を利用し，サーフェス画像重ね合わせ法により精度向上を図る計画である．また，より直接的なSTL データの採得法として，三次元的に口腔内を直接スキャンできるレーザ計測器の導入を検討している．

慢性歯周炎患者に対する抗菌光線力学療法の有効性に関する臨床的研究

林 鋼兵明海大学大学院歯学研究科歯学専攻（機能系病態機能研究群歯周病学）

【背景】歯周治療における薬物療法は，ブラッシングやスケーリング・ルートプレーニング（SRP）を中心とした機械的プラークコントロールによりバイオフィルムを破壊した後に行う治療法である．この薬物療法には抗菌薬の経口投与や局所応用があるが，薬物アレルギーや連用による耐性菌の出現などの問題がある．一方，近年薬物療法の一つとして，抗菌光線力学療法（Antimicrobial

Photodynamic Therapy : a-PDT）が検討されつつある．この a-PDT はトルイジンブルー O やメチレンブルー（MB）などの光感受性物質に低出力半導体レーザーを照射し一重項酸素を発生させることにより，殺菌する方法である．本法は薬物耐性菌が出現しないことや副作用が少ないことがすでに報告されていることから，a-PDT

の歯周治療への応用について検討されつつあるが，その結果は未だ不明である．そこで，本研究の目的は慢性歯周炎患者の疾患活動性に対する a-PDT の有効性を，歯周病検査，歯肉溝滲出液，および細菌検査によって比較検討することである．【材料および方法】明海大学病院歯周病科に来院し，口頭および書面にて本研究に同意が得られた慢性歯周炎患者 15 名を目標に，現在までに 6 名（男性：1 名，女性：5名）を対象に処置および検査を行った．特記すべき全身疾患がなく，過去 3か月間抗菌薬を使用していない慢性歯周炎患者の同一口腔内の任意の上下顎前歯・小臼歯に対して，SRP のみ処置（cont 群），SRP 後 MB のみ投与（MB 群），SRP 後レーザー照射（laser 群），SRP

後 MB を投与し，レーザー照射（a-PDT 群）をそれぞ

れ行った．MB は 1歯あたり 200 μl 使用した．レーザー照射は，照射部位を頬舌（口蓋）側の近遠心中央 6部位に対し各 10秒ずつ，計 60秒照射した．評価は，SRP

処置前，処置後 4週，8週，12週に歯周組織検査と歯肉溝滲出液を用いた検査を実施した．また，処置前及び処置後 4週において細菌検査を実施した．歯周病検査は，plaque index（PlI），gingival index（GI），probing pocket

depth（PPD），bleeding on probing（BOP），vertical gingival

recession（VGR），clinical attachment level（CAL），およびデンタルエックス線写真から marginal bone loss

（MBL）を測定した．歯肉溝滲出液検査は，Periotron 8000

を用い歯肉溝滲出液量の測定，および滲出液中のアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）の酵素活性を測定した．細菌検査は，滅菌ペーパーポイントを対象歯のポケット内に 10秒挿入し得られた試料を RTPCR

法にて測定し，総菌数，歯周病原菌である P. gingivalis

（P. g），A. a ctinomycetemcomitance（A. a），T. denticola

（T. d），T. forsythia（T. f），P. intermedia（P. i）の菌数および対総菌数比率を求めた．尚，本研究は本学倫理委員会の承認（A 1012）を得て実施した．【結果】歯周病検査；PlI, GI, PPD, BOP, GR, CAL の各値は，術前と比較し術後 4週（4 w）で改善傾向を認めたが，群間の顕著な差異は認めなかった．総菌数・歯周病菌の対総菌数比率；術前と 4 w を比較すると 4群とも減少傾向を認めた．歯肉溝滲出液量・AST 量；術前と比較し，4 w で 4群共に減少傾向を認めた．各群間の差は現在検討中である．【考察】今後は，さらに検体数を増やし，統計学的解析を行い，a-PDT の有効性について検討したい．

歯肉溝滲出液中の Tannerella forsythiaforsythia detaching factor に対する分解酵素活性の治療効果判定への応用

小野 裕貴明海大学大学院歯学研究科歯学専攻（機能系病態機能研究群歯周病学）

【背景】Forsythia detaching factor（FDF）は Tannerella for-

sythia が保有する主要な病原因子の一つである．Naka-

jima らは，FDF を分離・精製し，60 kDa-FDF と 28

kDa-FDFc の 2つのフラグメントが存在することを報告した．また Onishi らは，FDF が慢性歯周炎患者の歯肉溝滲出液（GCF）により Lys268残基 C 末端側で切断さ

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S27

れ，FDFc が生じることを示唆している．また呂らは，GCF 中の FDF に対する分解酵素活性が健常者と比較して慢性歯周炎患者で有意に高く，プロービングポケット深さ（PPD）と当該酵素活性との間に正の相関関係が認められることを報告している．本研究では，呂らが合成した Ac-RAK-pNA を使用して，初診時および歯周治療後のメインテナンス期あるいはサポーティブ治療期（SPT 期）に入った慢性歯周炎患者における GCF 中の

FDF に対する分解酵素活性の測定を行い，歯周治療による当該酵素活性の変化を検討することで，簡易な歯周治療効果の判定指標としての有用性を評価することとした．【材料および方法】

1）被験者および歯肉溝滲出液（GCF）サンプル採取被験者は明海大学歯学部付属明海大学病院歯周病科に来院し，初診時（Baseline : BL）に本研究への協力に同意の得られた慢性歯周炎患者 20名とした．そのうち歯周治療が終了し，メインテナンス期および SPT 期（Post-Treatment : PT）に移行したのは 7名であった．BL

および PT に測定する臨床パラメーターとして，PPD，クリニカルアタッチメントレベル（CAL）を選択した．BL において PPD�3 mm の健常部位（CH），PPD�6 mm

かつ BOP 陽性部位（DB），PPD�6 mm かつ BOP 陰性部位（DNB）から GCF 採取を行い，DB, DNB に対して歯周治療を行った後，治療終了後 6か月以内に BL と同一部位から PT における GCF 採取を行った．2）FDF に対する分解酵素活性の定量

GCF を採取後，タンパク濃度を 0.5 mg/ml に標準化した．GCF と Ac-RAK-pNA 合成基質とを 37℃で 60分間反応させ，405 nm の吸収波長で測定し，FDF に対する分解酵素活性とした．本研究は本学倫理審査委員会の承認を得ている（承認番号 A 1002）．【結果および考察】現在までに，被験者 20名のうち 7名が歯周治療を終了し，メインテナンス期および SPT 期に移行している．各群の BL と PT における PPD の変化は DB 群（BL : 7.00± 1.63 mm, PT : 3.25± 0.50

mm），DNB 群（BL : 6.32±0.75 mm, PT : 2.67±1.21

mm），CH 群（BL : 2.05±0.89 mm, PT : 1.83±0.41

mm）であった．また CAL は DB 群（BL : 8.84±2.50

mm, PT : 5.00±1.63 mm），DNB 群（BL : 7.53±1.61

mm, PT : 3.67±1.51 mm），CH 群（BL : 2.90±1.17 mm,

PT : 2.83±0.75 mm）であった．今後はメインテナンス期および SPT 期に移行した被験者数を増やすとともに，FDF に対する分解酵素活性の定量を行っていく予定で

ある．

進行性骨化性線維異形成症から同定された変異 BMP 受容体（ALK2）の活性化機構の解析

藤本 舞明海大学大学院歯学研究科歯学専攻（理工系歯材応用研究群歯科矯正学）

【目的】硬組織の形成は，さまざまなホルモンや成長因子などにより制御される．このうち Bone Morphogenetic

Protein（BMP）は，脱灰骨より単離された骨誘導活性を持つ因子として発見された．BMP は，I 型と II 型に分類される 2種類の細胞膜貫通型セリン・スレオニンキナーゼ型受容体に結合し，細胞内に情報が伝達される．最近，骨格筋組織で異所性骨化が起こる進行性骨化性線維異形成症（FOP）の責任遺伝子が，I 型 BMP 受容体のALK2と同定され，その遺伝子変異（Arg206His ; R206

H）も報告された．さらに，このような典型的 FOP と異なる遅発性症例から，新規 ALK2変異（Gly325 Ala ;

G325A）も同定された．本研究では，このような異なった臨床症状をきたす 2種の変異 ALK2の活性化機構を解析し，FOP における異所性骨化の発症機序を解明することを目的とした．【方法・結果】マウス筋芽細胞株 C2C12に，ALK2の野生型または上記変異体を一過性に過剰発現させた．その結果，野生型と異なり R206H と G325A 変異は，BMP

非存在下であっても BMP 活性を誘導した．R206H 変異体は，II 型 BMP 受容体の BMPR-II との共発現で活性化されたのに対し，G325A 変異体は活性化されなかった．またマウス筋再生モデルにおいて，筋損傷によってBMPR-II の発現が一過性に亢進した．一方，G325A 変異体は，別の II 型 BMP 受容体である ActR-IIB との共発現により活性が亢進した．キナーゼ活性を欠失させたActR-IIB 変異体は，G325A 変異体を活性化しなかった．II 型 BMP 受容体によってリン酸化され得る ALK2内の9 つの Ser/Thr 残基のうち Thr203 を Val に置換すると，II 型 BMP 受容体存在下であっても R206H と G325

A 変異体のいずれも BMP 活性がみられなかった．一方，Thr203以外の 8つの Ser/Thr 残基を置換しても，BMP

活性は保持された．【考察】FOP で同定された R206H と G325A の ALK2変異は，いずれも BMP 非依存性に細胞内情報伝達系を活性化する機能獲得型であった．R206H 変異体は，筋損

S28 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

傷後に一過性に BMPR-II の発現を亢進し，急激な異所性骨化を誘導すると考えられる．一方，筋損傷後に異所性骨化を認めない遅発性患者から同定された G325A 変異体は，BMPR-II による活性化を受けなかった．またいずれの ALK2変異体も，Thr203残基が II 型 BMP 受容体によりリン酸化されることが不可欠と考えられる．以上の結果から，I 型 BMP 受容体である ALK2の 2

種の遺伝子変異は，II 型 BMP 受容体のキナーゼに対する感受性が異なるため，異所性骨化の発症時期や症状に多様性を生じると考えられる．学外共同研究者：片桐岳信（埼玉医科大学ゲノム医学研究センター）

睡眠時ブラキシズム発現に関わる神経機構の解析

安達 一典明海大学歯学部病態診断治療学講座薬理学分野

近年，我々はサルの舌刺激誘発開口反射と脳内微少刺激誘発顎運動の活動性のいずれもが，安静覚醒（quiet

awake : QW）時に比較して安静睡眠（quiet sleep : QS）時に低下することを報告した．しかしながら，その活動性変調に関わる神経機構は未だ解明されていない．加えて，睡眠時の運動活動性変化に関しては動物種や手法によって様々な結果が報告されているのが現状である．そこで本研究では，齧歯類において睡眠時の顎運動機能がサルと同様の抑制を受けるのかをラットにて検討した．また，本研究で用いたラットモデルは薬物投与が容易に行えるため，睡眠時の運動活動性変調に関わる受容体機構の検討を併せて行った．イソフルラン（5％：導入，1.5−2.0％：維持，1.0 l /

min）全身麻酔下の Splague-Dawley 系雄性ラット（5週齢）に心電図，筋電図（顎二腹筋前腹），脳波，眼電図記録用電極と舌刺激用電極（オトガイ舌筋）を留置し，1週間の回復期間の後に実験に用いた．QW 時にオトガイ舌筋に電気刺激（200 μs, 0.2 Hz, 5回）を加え，一過性の顎二腹筋活動を安定した潜時で 3/5以上発現させる刺激強度を開口反射誘発閾値とし 5分間隔で 3回計測した（QWB）．続いて，ラットの自発的睡眠（QS）時とその後の覚醒（QWA）時にも開口反射誘発閾値を求めた後，グリシン（150 mg/kg, i.p.）投与後に同様の検討を行った．また，刺激強度と開口反射応答性の相関を検討するために，開口反射誘発閾値の 1.5−2倍の刺激を与

えた．覚醒ならびに睡眠の判定は行動観察，心拍数，筋活動性，脳波，眼運動から判定した．QS の判定は 4秒のエポックにて睡眠時の生理学的データを解析（Spike

2 ver.6, Cambridge Electronic Design, Cambridge, UK）し，δ 波の発現頻度，眼運動の欠如，心拍数の低下，筋活動性の低下を指標として評価した．

QWB において開口反射誘発閾値は安定していたが，QS では有意に上昇（P＜0.05, 118.7±3.3％ vs QWB）し，QWA では QWB のレベルまで戻った（104.5±1.9

％ vs QWB）．また，QS では QWB と比較して開口反射潜時の延長と顎二腹筋 RMS（root mean square）の減少が各刺激強度で有意（P＜0.05）に認められた．グリシン投与は QWB の開口反射誘発閾値を上昇（P＞0.05,

105.1±3.5％ vs グリシン非投与）させたが，QS の開口反射誘発閾値を有意に上昇させることはなかった．これらの結果より，ラットの開口反射発現に関わる機構は睡眠時においてサルと同様の抑制を受けていることが明かとなった．また，ラットの睡眠時顎運動抑制はグリシン神経機構を介して行われていることが示唆された．

遊離端欠損症例における部分床義歯の設計の相違が咀嚼能率に及ぼす影響－リンガルバーとリンガルエプロンの比較－

栗原 美詠明海大学歯学部機能保存回復学講座歯科補綴学分野

【目的】下顎義歯における維持・安定を獲得するための義歯構成成分として，欠損部と支台装置を結ぶ大連結子の選択が重要であり，下顎義歯の設計・製作時において形態的要素である大連結子について十分に配慮される必要があると考えられる．すなわち，口腔内へ装着された義歯の安定度合いが咀嚼能率を向上させると仮定するならば，下顎義歯における大連結子の選択は，咀嚼能率に影響を及ぼすと考えられる．しかしながら，機能的要因である咀嚼能率と大連結子に関する報告は少なく，咀嚼能率を考慮した下顎義歯の設計・製作について解明することは，より生体に調和したに義歯製作に役立つと思われる．そこで，本研究は，下顎遊離端部の欠損症例に対して，下顎義歯の大連結子として用いられるリンガルエプロン（A-PD）とリンガルバー（B-PD）が咀嚼能率に及ぼす影響について，当分野で開発した篩分法に画像解析を応

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S29

用した咀嚼能率評価システムを応用することによって検討し，咀嚼能率に対して最適な大連結子の選択について解明することを目的とする．【材料及び方法】

1．被験者対照群－顎口腔系に異常を認めない天然歯列者 10名

（男性 8名，女性 2名）患者群－上顎天然歯列，下顎 KennedyⅠ級およびⅡ級の欠損形態を有する患者 4名（男性 3名，女性 1名）2．実験方法1）咀嚼値の測定（客観的評価法・直接的検査法）試料（ピーナッツ約 3 g）を 20回咀嚼後，咀嚼粉砕した試料片を 10 mesh の篩でふるい分けた．そして，当分野で開発した咀嚼試料評価システムを用いて残留試料の重量を算出し，咀嚼値を算出した．2）咬合力値の測定（客観的評価法・間接的検査法）咬合力計（オクルーザルフォースメーター GM10，長野計器）を対照群では習慣性咀嚼側，患者群では義歯装着側で咬合させ，3回計測し平均値を算出した．3）咀嚼スコアの測定（主観的評価法・直接的検査法）平井敏博ら（2005）が開発した摂食可能食品アンケート表を用いて，咀嚼スコアを算出した．4）計測スケジュール対照群は咀嚼値・咬合力・咀嚼値の計測を 1 度行っ

た．患者群は，1人の被験者に B-PD と A-PD の部分床義歯を作製した．2 種類の義歯の装着順序はランダムとし，計測時期は，装着直後および 1か月後とした．【結果】対象群：天然歯列者の平均値は咀嚼値 71.45±9.40％，

咬合力 46.67±248.39 N，咀嚼スコア 81.46±9.71点であった．咀嚼値，咬合力，咀嚼スコア，どの間においても相関が認められた．患者群：欠損形態を有する症例の咀嚼値の平均は B-

PD で装着時 46.89±11.05％，1 か月後で 51.83±11.05

％，A-PD で装着時 56.46±10.15％，1か月後で 65.57±8.49％．咬合力の平均は B-PD で装着時 113.92±59.90

N, 1 か月後 123.50±13.27 N, A-PD で装着時 129.00±71.81 N, 1 か月後 93.08±18.14 N．咀嚼スコアは B-PD

装着後 1か月で 60.53±9.57点，A-PD 装着後 1 か月で60.02±12.15点であった．【考察】対照群において，咀嚼値と咬合力，咬合力と咀嚼スコア，咀嚼値と咀嚼スコアの間に有意な相関が認められたため，咀嚼値，咬合力，咀嚼スコアは咀嚼能力の

測定に有用であることが示唆された．患者群では B-PD と A-PD 咀嚼値においてに A-PD は

B-PD より有意に高い値を示した．咬合力および咀嚼スコアでは B-PD と A-PD の間に有意な差は認められなかった．これは咬合力では，オクルーザルフォースメーターは咬合させた時に歯列の 1部しかに圧力が掛らない．そのため，義歯が転覆し計測器に咬合圧が十分に伝達されなかったためと考える．咀嚼スコアにおいては，計測する時期を装着後 1か月に設定したため，スコア表にある食物を摂取する機会が乏しかったため咀嚼能力が点数に反映されなかったものと推察される．以上より，本研究で得た咀嚼値の値から下顎遊離端欠損症例に対して咀嚼能率を向上させる上では B-PD よりも A-PD の方が有効となる可能性が示唆された．

CdTe（カドミウムテルライド）検出器を利用したインプラント周囲の経時的骨評価の定量的解析

井上 信行明海大学歯学部病態診断治療学講座歯科放射線学分野

【目的】現在パノラマエックス線撮影法は QR（クァンタム・ラジオグラフィー）が開発されエックス線のフォトン数による画像形成が可能となってきた．この QR

は微弱なフォトン数を電子データに直接変換できる高感度かつ高分解の可能な CdTe（カドミウムテルライド）を検出素子に備えたフォトンカウンティング型センサーを搭載したトモシンセシス技術の応用により，多層断層フォーカス撮影をすることで，低線量でありながらより鮮明で精密なレントゲン画像の取得が可能になった．我々はこの新型検出器を利用して新しい診断方法の一助として歯科用金属および骨梁・骨質の定量解析ができないかと考えた．今回は手始めにインプラント体で使用するチタン合金を含めた歯科用金属を用いて，特定が可能な定量的スペクトル解析が行えるかどうかを目的とし実験を行った．【材料と方法】デジタル式歯科用パノラマ X 線診断装置：QRmaster-P（テレシステムズ／大阪）撮影条件：80 kV, 4 mA

解析ソフト：QRMC（テレシステムズ／大阪）使用金属：10 mm×10 mm×1 mm 歯科用金属（坂巻

デンタルラボ／埼玉）コバルトクロム合金，歯科鋳造用銀合金，歯科鋳造用

S30 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

金合金（Type 3），歯科鋳造用金銀パラジウム合金，チタン合金，歯科鋳造用 14カラット金合金，歯科鋳造用18カラット金合金，歯科鋳造用 20カラット金合金，歯科メタルセラミック修復用貴金属（Type 1），歯科メタルセラミック修復用貴金属（Type 2）上記の金属 10種を縦に正中部に 1列に配列し断層厚

の中央及び前後 10 mm にそれぞれ位置づけ，人体の負荷を想定した銅板（2 mm 厚）を照射面に設置した条件および負荷のない条件で撮影を行い，その後 QRMC を用いて解析を行った．【結果】コバルトクロム合金及びチタン合金に関しては分布が他と比べ軽い傾向を示す結果となり歯科メタルセラミック修復用金属（Type 1）に関しては重い傾向の分布図になった．また銅を付加した場合は付加なしと同じような傾向になったが分布の広がりが全体的に各金属の断層間に変化が見られなかった．【結論】1 mm 厚の歯科用金属の定量的解析は一部の金属では有効なことが示唆された．しかし実際に生体を想定した際はビームハードニングによってその解析はより難易度が高く，より複雑になってくると思われる．今後インプラント体周囲の骨に関しても今後条件等を変化させ，より詳細・精密な解析を行っていく予定である．

光線力学療法を用いた慢性歯周炎の炎症症状緩和効果に関する臨床的検討

辰巳 順一明海大学歯学部口腔生物再生医工学講座歯周病学分野

【諸言】光線力学療法は，光感受性物質に特定の波長の光線を照射することにより，周囲細胞に作用する治療法の総称である．近年，光感受性物質の励起により産生される一重項酸素の殺菌作用に着目し，抗菌光線力学療法（Antimicrobial Photodynamic Therapy : a-PDT）として歯科領域で検討されつつある．その中で，a-PDT は歯周治療における新たな薬物療法として，スケーリングやルートプレーニングとの併用効果が報告されているが，その有効性については一様ではない．そこで，慢性歯周炎に対し a-PDT を用いた場合の炎症症状緩和効果を，臨床パラメータと歯肉溝滲出液量から評価すること本研究の目的とした．【材料および方法】明海大学病院歯周病科に来院し，口頭および書面にて本研究に同意が得られた慢性歯周炎患者 5名（男性：1名，女性：4名）を対象に処置および

検査を行った．特記すべき全身疾患がなく，過去 3か月間抗菌薬を使用していない慢性歯周炎患者の同一口腔内の任意の上下顎前歯・小臼歯に対して，SRP のみ処置（cont 群），SRP 後，光感受性物質であるメチレンブルー（MB）のみ投与（MB 群），SRP 後レーザー照射（la-

ser 群），SRP 後 MB を投与し，レーザー照射（a-PDT

群）をそれぞれ行った．MB は 1歯あたり 200 μl 使用した．レーザー照射は，照射部位を頬舌（口蓋）側の近遠心中央 6部位に対し各 10秒ずつ，計 60秒照射した．評価は，SRP 処置前，処置後 4週に歯周病検査を行った．歯周病検査は，plaque index（PlI），gingival index

（GI），probing pocket depth（PPD），bleeding on probing

（BOP），vertical gingival recession（VGR），および clinical

attachment level（CAL），を測定した．また，歯肉溝滲出液量を Periotron 8000を用い測定した．なお，本研究は歯学部倫理委員会の承認（A1012）のもとに実施された．【結果】歯周病検査；術前の PlI, GI, PPD, BOP, VGR，および CAL の平均値は 4 群間で有意差を認めなかった．術前，術後 4 週における比較では，各群共に GI.

PPD, BOP，および CAL で改善傾向を認めたが，各群間では差を認めなかった．PlI および VGR は処置前後で差を認めなかった．歯肉溝滲出液量；歯肉溝滲出液量については術前と術後 4週を比較し，a-PDT 群のみ減少傾向を認めた．【考察および結論】慢性歯周炎患者に対し，SRP 処置後に a-PDT を付加的に行うことによって，歯肉溝滲出液量に改善傾向を認めたが，その他の測定項目では有意な差はなかった．一般的に，歯周疾患の炎症程度が改善するとともに歯肉溝滲出液量は減少することから，本研究結果から a-PDT は SRP と併用することにより，炎症症状を緩和させる可能性が示唆された．今後さらに被験者数，観察期間や観察項目を増やし慢性歯周炎に対するa-PDT の有効性を詳細に検討する必要がある．

デジタルテクノロジーを用いた顔面エピテーゼの新しい製作方法

遠藤 聡明海大学歯学部機能保存回復学講座歯科補綴学分野

【緒言】エピテーゼを製作する際の顔面の形状取得法として，従来の顔面印象法に加え，様々な空間計測機器を応用した方法が提唱されている．近年，汎用デジタルカ

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S31

メラを用いた空間計測システムが実用化された．このシステムでは左右に 2つのレンズを有する汎用デジタルカメラおよび空間計測ソフトウェアを用いて，通常の写真と同様に撮影された画像をもとに 3次元データの構築を行うことができる．このシステムは主に工業界で遠隔対象物の測量に利用されているが，生体計測への応用例は少ない．また，2枚のステレオ画像から 3角測量の原理により対象物の奥行きを獲得するため，空間計測能は被写体や撮影環境の影響を受けやすいことが知られている．本発表では，このシステムを顔面形状計測に応用するにあたり，顔面計測に適した撮影条件の検討を行ったので報告する．【材料と方法】顔面石膏模型およびエピテーゼのワックスパターンを被写体とし，汎用デジタルカメラ（FinePix

REAL3D w3m, Fujifilm 社製）を用い，撮影条件を変えて撮影したステレオ画像から空間計測ソフトウェア（撮測 3D, Armonicos 社製）で 3次元点群データを構築し，比較を行った．撮影条件・カメラ設定：シャッタースピード，絞り（F 値），露出（背景色）撮影は時間帯や天候などの影響を受けない室内で行

い，感度はカメラ設定下限値である ISO100 に固定した．カメラ設定のパラメーターは画像の明るさ，露出は撮影時の背景色を変えることでカメラの自動補正機能の影響を検討した．・撮影環境：撮影方向，被写体へのパターン画像投影被写体の傾きおよびプロジェクターを用いたパターン光投影の有無および種類（白黒あるいはカラー，ランダムあるいはグリッド）の違いによる影響を検討した．結果と考察：暗すぎる画像からは点群を構築できなかったことから，点群構築能は画像の明るさに大きく影響されると考えられた．背景色の違いでは点群表面の粗れに差を生じなかった．3次元点群データの構築は，左右のステレオ画像内で画素の輝度を基準として対応点を決定し，画像間での位置のずれをもとに奥行を獲得する．この操作を画像内の全画素に対して行うことで被写体の立体情報を得ることができ，その際の対応点の探索方向は，左右の画像に対して水平となっている．また，対応点の識別精度を高めるためには，被写体表面の色調を補助的に不均一にすることや視差の少ない画像をもとにすることが有効であるとされる．そのため，被写体にパターン画像投影を行った場合，画像投影を行わなかったものと比べ，点群表面の粗れが著しく減少したものと思わ

れる．また，撮影方向が点群の構築部位だけでなく，表面の粗れにも影響を及ぼしたことは，被写体の色調や画像間の視差だけでなく，顔面特有の立体構造も影響することが示唆された．【結語】実験結果より，本システムを用いて顔面を想定した被写体の撮影を行う場合，カメラを固定する必要があること，撮影環境は明るい状態であることが望ましいと考えられた．また，点群表面の粗れとして観察された奥行の誤差を補正するための最適な撮影条件は，撮影距離を 30 cm 程度とすること，撮影方向はカメラの長軸と顔面の正中軸とを一致させること，および被写体に対してパターン画像を投影することであった．今後は，撮影条件のさらなる最適化をはかることに加え，点群データの精度検証および表面データへの変換に関する検討を行い，顔面形状計測へ応用していく予定である．

遺伝子編集酵素 AID を介したcadherin switching メカニズムの解析

宮崎 裕司明海大学歯学部病態診断治療学講座病理学分野

癌化あるいは癌進展は遺伝子異常の蓄積によって起こるとされているが，遺伝子変異の発生メカニズムに関しては未知な点が多い．近年，遺伝子変異を誘発する遺伝子編集酵素 AID（activation-induced cytidine deaminase）の存在が報告され，注目されている．この酵素は正常組織において活性化 B 細胞でのみ発現し，免疫グロブリンの可変領域に遺伝子変異を誘導して多様な抗原特異的抗体産生に寄与する他，クラススイッチにも関与することが知られている．また，炎症性病変を背景とした癌においての発現もみられることが報告されるとともに，癌抑制遺伝子の変異にも関与していることが報告され，この酵素が炎症状態からの発癌に関わっている可能性が高いことが示唆されている．口腔の上皮性異形成は癌化の前駆状態であるとされ，

遺伝子変異が生じている可能性が考えられる．本研究では様々な程度の上皮性異形成を伴う組織片を 2005年のWHO 分類を参考に SIN1から SIN3 に分類し，また口腔癌組織を用いて AID の発現を免疫組織学的に検索した．その結果，SIN1では半数近くの症例の有棘細胞および基底細胞に AID の陽性反応がみられ，SIN2では約4分の 1の症例の有棘細胞に陽性反応がみられた．これらに対し，SIN3では検索したすべての症例で陰性であ

S32 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

った．口腔癌組織では癌細胞の一部にその陽性反応が認められた．癌細胞での AID 発現の意義を調べるために，口腔癌

由来細胞株（HSC-2）を用いて AID の発現・機能解析を行った結果，本酵素は HSC-2 細胞において TNF-α刺激による NF-κB 活性化を介してその発現量を大幅に上昇させること，Snail の発現調節を介して N-cadherin

発現に関与していることが示唆された．以上の結果より，AID は口腔の上皮性異形成の発生並びに癌進展へ関与する可能性が示唆された．

血清カルシウム濃度降下因子カルデクリン遺伝子の発現解析

藤本 健吾明海大学歯学部口腔生物再生医工学講座生化学分野

【目的】近年，骨粗鬆症やリウマチなどに関する多くの治療薬の開発が進められている．カルデクリンは内因性の酵素タンパク質であり，破骨細胞の分化の抑制，それに伴う骨破壊の抑制によって血清カルシウム濃度を降下させる因子であり治療薬として期待される．我々は，カルデクリンが女性に多く見られる関節リウマチの進行を抑える効果があること，および骨粗鬆症モデルマウスを用いた実験でカルデクリンが閉経後に多く見られる骨粗鬆症の治療薬として有効であることを報告した．この様なカルデクリンの作用機構を十分に理解するためには，カルデクリンの詳細な発現分布の調査が必要である．本研究ではカルデクリン遺伝子や発現タンパク質が，発生や分化のどの時期に，どの組織で発現しているのか調べることを目的とした．【材料および方法】4～12 週齢のマウスの各組織からpolyA＋RNA を調整し，逆転写酵素により合成した cDNA

を鋳型にして LightCyclerTM を用いカルデクリン mRNA

の定量を行った．定量にはカルデクリン特異的プライマーを使用し G 3 PDH を標準に定量化した．また，カルデクリンに対するモノクローナル抗体を用いて，マウスの発生 8日目，10日目，12日目，14日目，16日目の胚切片を用い，マウスの胚発生時期におけるカルデクリンの発現分布を調査した．さらにマウス 8週齢の各組織におけるカルデクリンの発現も，カルデクリンに対するモノクローナル抗体を用いて調べた．【結果および考察】定量リアルタイム PCR 法でマウス各組織のカルデクリン mRNA の発現量の測定を行った

結果，胚発生の 7日目，10日目，12日目ではカルデクリンの mRNA 発現はほとんど見られなかったが，胚発生の 14日目で高い発現が見られた．この結果から，カルデクリンが胚発生の時期から重要な役割を果たしていると考えられる．また，胃，平滑筋，脾臓，胸腺，肝臓で多くのカルデクリン mRNA が発現していることが判明した．カルデクンのモノクローナル抗体による免疫発色でカルデクリン タンパク質の発現分布の調査の結果，胚発生におけるカルデクリン タンパク質の発現は，胚発生の 14日で顕著な免疫陽性反応が見られた．特に脊椎部位に多く発現していることが観察された．また，膵臓のランゲルハンス島には発現が認められず，小葉では発現量は少なく小葉間導管に集められたカルデクリン タンパク質が染色された．さらに胃では粘膜固有層に多く発現していた．腎臓では尿細管で発現していたが腎小体では発現していなかった．これらの結果は，カルデクリンが多くの組織で発現しており，酵素としての役目だけではなく骨吸収抑制など多目的な機能をもつことを裏付ける．

Porphyromonas gingivalis 菌体成分刺激による転写因子活性化に及ぼす抗酸化性フェノール関連化合物の制御機構を探る

村上 幸生明海大学歯学部病態診断治療学講座総合口腔診断学分野

【目的】優れた抗酸化剤であり香料，食品，化粧品，医薬品として広く応用されている天然の抗酸化性フェノール関連化合物は抗炎症作用や，口腔前癌病変の発癌予防効果を示すことが知られているが，これらの化合物は自動酸化しアレルギーや炎症反応などの生体為害反応を引き起こす．自動酸化しにくい構造のフェノール二量体化合物は炎症性サイトカイン発現の抑制作用を有することから，これらのフェノール関連化合物は酸化還元感受性の転写因子の活性化を negative に調節できる可能性を示唆した．一方，Porphyromonas gingivales は慢性歯周炎の主要な病原性細菌として知られている．とりわけ内毒素（LPS）や本菌の線毛は転写因子の直接的な活性化を介して炎症性サイトカインなどの産生に携わっている．近年，慢性歯周炎に関連した炎症性サイトカインや生理活性物質が 2型糖尿病や動脈硬化症，腎臓疾患，早産にも関与することが報告されている．これらのこと

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S33

は，本菌による宿主の転写因子活性化が炎症性サイトカインなどを介して顎口腔領域感染症だけでなく様々な全身疾患の発症に機能的役割を果たす可能性を示唆した．それゆえ今回の研究では抗酸化性フェノール化合物が，本菌の線毛による細胞の酸化還元感受性転写因子活性化と炎症メディエーターの発現を制御できるか否かについて検討した．【材料と方法】

1．試薬：Eugenol（東京化成工業社），magnolol, honokiol

（各キシダ化学社）を使用した．Eugenol 二量体（bis-

eugenol）は酸化的二量化反応で合成した．2 ．細胞傷害性試験：マウスマクロファージ様 RAW

264.7細胞を培養し試薬を添加後，cell counting kit-8（同仁化学社製）で測定した．3 ．刺激物：Porphyromonas gingivalis ATCC33277 株線毛（Yoshimura らの方法に準じて精製）を使用した．TNF-α は Miltenyi Biotec 製の組み換えタンパク質を使用した．4 ．COX-2遺伝子発現：Real-time PCR 法で検討した．

COX-2 タンパク質発現：抗 COX-2 抗体を使用したWestern blot 法で検討した．5．NF-κB 活性化：ELISA 様転写因子活性化 kit（Active

motif 社）を使用した NF-κB サブユニットの κB 配列への結合試験で検討した．IκB-α のリン酸化依存性タンパク質分解は抗 IκB-α 抗体，抗リン酸化 IκB-α 抗体（Ser 32）を用いた Western blot 法で検討した．【結果と考察】Eugenol 二量体と類似構造を持つ mag-

nolol, honokiol は低濃度で線毛誘導性 NF-κB の活性化を抑制した．しかし，eugenol と bis-eugenol は同じ濃度では活性化を抑制できなかった．線毛誘導性 COX-2発現は magnolol, honokiol で抑制された．一方，TNF-α 誘導性の COX-2発現も magnolol, honokiol で抑制された．今回の研究では magnolol と honokiol が RAW 細胞のNF-κB 活性化を抑制し，COX-2発現を制御した．このことは抗酸化性フェノール関連化合物が自身の持つ酸化還元力を介して酸化還元感受性転写因子活性化の調節し，慢性歯周炎に起因する全身疾患に対する primary な予防剤として機能しうる可能性を示唆した．

前癌病変における腫瘍関連 M2マクロファージの局在とその分化誘導機構の解析

森 一将明海大学歯学部病態診断治療学講座口腔顎顔面外科学分野

【緒言】近年，マクロファージはその機能的役割の違いから免疫系を活性化し，抗腫瘍活性を有する M1マクロファージおよび免疫系を抑制し，癌の浸潤・増殖に関与する M2マクロファージに大別されている．特に，M2

マクロファージは，腫瘍組織に浸潤している腫瘍関連マクロファージと類似した性質を持ち，癌細胞などに栄養を供給するための血管新生への関与や，増殖因子の産生を介して癌細胞の増殖を促進する働きがあると考えられている．これらの M1, M2マクロファージの誘導には T

細胞由来のサイトカインの関与が示唆されているが腫瘍組織におけるその分化誘導機構に関しては不明な点が多い．これまでに，口腔癌における腫瘍関連マクロファージの局在を検討した結果，口腔癌局所では CD163陽性M2マクロファージが存在するという知見を得た．そこで今回前癌病変におけるマクロファージの局在ならびにその分化に関わる CD4陽性ヘルパー T 細胞の関与について検討を行なった．【方法】明海大学歯学部付属明海大学病院口腔外科にて診療した口腔扁平上皮癌，口腔白板症，病理組織学的な正常粘膜について，初診時および治療前に病理組織診断を目的に採取した生検材料および切除病変を検体とした．これら試料について各種抗 CD 抗体［M2マクロファージ：CD163, M1マクロファージ：CD80，マクロファージ：CD 68，ヘルパー T 細胞：CD4，細胞傷害性 T

細胞：CD8，ヘルパー 1型 T 細胞（Th1）：CXCR3およびヘルパー 2型 T 細胞（Th2）：CCR4］を用いた免疫組織学的解析を行った（明海大学歯学部倫理委員会承認番号 A 0920号）．なお，病理組織学的分化度や上皮性異形成の程度については WHO の診断基準に従い分類し，陽性細胞の評価法は 100倍の光顕下で，それぞれの典型的な組織像を示す 5視野について陽性細胞数をカウントし陽性細胞の比率（陽性率）を算定し評価した．【結果】

1）白板症において CD163＋マクロファージの浸潤が認められた．特に moderate dysplasia において有意な増加が認められた．

2）CD4＋ T 細胞の上皮内浸潤が認められた．3）CD163＋マクロファージと上皮内 CD4＋ T 細胞の陽性率との間に正の相関関係が認められた．

S34 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

4）白板症において CCR4陽性細胞（Th2）は認められなかったが，CXCR3陽性細胞の浸潤は多くの症例で認められた．

【結論】これらの結果から，白板症局所で CD163陽性マクロファージが増加し，CXCR3陽性 Th1細胞が多く認められていることから，白板症局所における CD163陽性マクロファージの浸潤／分化に Th1細胞が関与している可能性が示唆された．現在，CD163陽性マクロファージの phenotype について詳細な検討行なっている．

新たな初代骨細胞培養法を開発し，骨細胞がinterferon-β によって破骨細胞形成を抑制することを示す

佐藤 卓也明海大学歯学部形態機能生育学講座口腔解剖学分野

骨形成と骨吸収からなる骨改造は，骨への加重によって調節される．この調節は歯列矯正での歯の移動，外傷性咬合による歯槽骨吸収等と密接に関係し，その調節機構の解明は歯科医学にとって重要である．骨組織は，骨基質表面に存在する骨芽細胞と破骨細胞，骨基質内部に存在する骨細胞の 3種の細胞系から構成され，その相互作用により骨改造は調節される．近年の遺伝子除去マウスを用いた研究から，骨細胞は荷重を感知し破骨細胞形成を調節するが，この調節には骨細胞が産生する破骨細胞形成促進因子 RANKL とそのデコイレセプターである OPG が重要であることが示唆されている．一方，骨細胞除去マウスを用いた実験から荷重による破骨細胞形成調節機構には，骨細胞が産生する RANKL

/OPG 以外の破骨細胞形成調節因子の関与も示唆されている．これまでに研究代表者らは，株化骨細胞 MLO-Y 4，

骨芽細胞，破骨前駆細胞及びコラーゲンゲルからなる 3

次元骨組織モデル培養系を開発，骨細胞が有する破骨細胞形成調節作用を検討してきた．その結果，株化骨細胞MLO-Y 4 が破骨細胞形成を抑制する因子として inter-

feron（IFN）-β を産生している可能性を見出した．今後さらに骨細胞が産生する IFN-β について検討するためには，高純度の初代骨細胞を解析することが必要である．しかし現在，高純度の初代骨細胞の培養法は確立されていない．そこで本研究ではまず，骨基質表面の細胞を除去し，

骨基質中の骨細胞のみを含む骨片を調製，その骨片を培

養することで高純度で多数の骨細胞を生体内に近い条件で解析するという，新たな視点に基づく方法の開発を行った．実際には，2～3 mm 四方に細切した大腿骨をコラゲ

ナーゼ・EDTA 処理し培養する方法について以下の検討を行った．コラゲナーゼ・EDTA 処理し得られた骨片をHE 染色または骨芽細胞マーカー alkaline phosphatase で染色，実体顕微鏡下で観察し骨細胞以外の細胞の有無を評価した結果，3回のコラゲナーゼ・EDTA 処理によってほぼ骨片表面の細胞を除去できることが確認された．この骨片の培養開始時及び培養後の骨片から RNA を回収，keratocan 等の骨芽細胞マーカー，dentin matrix

protein-1等の骨細胞マーカーの mRNA 発現を real-time

RT-PCR 法にて定量した結果，骨細胞を高純度で含む骨片であることが確認された．また得られた骨片に含まれる骨細胞の生細胞活性を評価する WST-1アッセイを行った結果，骨細胞のみを含む骨片は少なくとも 5日間は培養可能であることが示された．そこで次に，この骨片と骨髄細胞を共存培養し，破骨細胞形成に対する骨細胞の影響を検討した．その結果，骨片を破骨前駆細胞誘導期のみに共存培養するだけで，破骨細胞形成が抑制されることが示された．この作用は OPG 非依存的であると考えられる．この点をさらに確認するため Opg 欠損マウスからの骨細胞のみを含む骨片を用いた結果，OPG

非依存的破骨細胞形成抑制が示された．次に，この抑制作用に IFN-β が関与しているか否か

検討した．その結果，骨細胞による Ifn-β mRNA 発現が確認され，また骨細胞のみを含む骨片と骨髄細胞との共存培養系に IFN-β 中和抗体を添加すると，骨細胞のみを含む骨片による破骨細胞形成抑制は一部解除されることが示された．以上の結果から，骨細胞は IFN-β を産生し破骨細胞

形成を抑制する可能性が考えられた．

歯髄創傷治癒に及ぼす Enamel matrix derivativeの影響－免疫化学的検討と修復象牙質の形態学的特徴－

中村 裕子明海大学歯学部機能保存回復学講座歯内療法学分野

【諸言】Enamel matrix protein を含有する EMDOGAINⓇ

Gel（EMD）は，歯周組織再生療法などに広く臨床応用されており，垂直性骨欠損部の骨組織の回復において良

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S35

好な治療成績をあげている．歯内領域でも EMD を露出した歯髄創面に貼付することにより早期に修復象牙質の形成が認められており，生物学的直接覆髄剤としての有用性が示唆されている．さらに形成された象牙質様硬組織は，象牙芽細胞に連続した形態をとっていることが認められている．しかしながら，EMD による歯髄創傷面への硬組織形成メカニズムや創傷組織の再生に必要とされる血管形成のメカニズム等については，いまだ不明な点が多い．そこで本研究は，EMD の歯髄細胞に対する細胞増殖

能，石灰化物形成能と血管新生能さらに EMD 塗布後のラット歯髄創傷治癒の様相を免疫科学的および形態学的に観察することとした．【材料および方法】実験にはヒト歯髄細胞（4～5継代）を用いた．歯髄細胞に対する EMD の細胞増殖能は，Cell

counting Kit-8を用いて行った．石灰化物誘導能の検討は，骨芽細胞分化試薬（Takara osteoblast-inducer re-

agent）を予め添加した培養液中の歯髄細胞に対し，EMD

を添加後さらに培養し，培養液中の生成物に対してアリザリン染色を行うことで検討した．EMD の血管形成促進能は，ヒト血管内皮細胞（HMVECs）（KURABO）を用い，マトリゲルを含んだプレート上で評価した．さらに創傷部における形態学的な検討のため，Wistar 系ラット雌の上顎第一臼歯咬合面に直径 1 mm 程度の露髄面を形成し，EMD を静置してグラスアイオノマーセメントにて仮封した．その後 2週経過後の第一臼歯を周囲組織を含め摘出した．摘出した組織は，EDTA 脱灰後，パラフィン切片を作成し，H&A 染色を行い，電子顕微鏡にて観察した．【結果】ヒト歯髄細胞に対する EMD の細胞増殖能を検討した結果，50～100 μg/ml の添加したものが最も高い細胞増殖能を示した．石灰化物誘導能の検討では，EMD

の添加により，石灰化物の生成は上昇することが認められた．血管形成促進能を検討した結果，血管様管腔の形成とその分岐の形成率が高まることが認められた．ラットを用いた形態学的な観察から，4週経過後の EMD を静置した歯髄には，周囲組織の溶解とマクロファージ様細胞の浸潤が観察された．しかし，正常な象牙質様組織の形成は認められなかった．【考察および結論】歯髄創傷治癒に及ぼす Enamel matrix

derivative の影響EMD の組織再生のメカニズムは，失われた歯周組織

を復元させるための足場の形成が挙げられている．さらに，今回の研究結果から創傷部での初期におけるマクロ

ファージ様細胞の浸潤と血管新生を誘導することが認められた．これらのことから歯髄治癒に促進的に働く可能性が示唆された．しかし，今回の実験方法では，露髄処置を行うための作業において，根管内歯髄組織を強く損傷したものも多く認められ，規格化された露髄面を得ることができなかった．そのため歯髄創傷部における硬組織再生に対する EMD の効果を詳細に観察することはできなかった．このことから規格化した露髄面を形成し，さらなる検討する余地があると考えられた．

特別支援学校の歯周疾患・歯周疾患要観察者への個別指導が障害児の自立支援に及ぼす影響

深井 智子明海大学歯学部社会健康科学講座口腔衛生学分野

【目的】近年，日本の障害者に対する考え方は，国際生活機能分類（ICF）の障害観・健康観が大きく取り入れられ，障害者に金銭給付のみを充実させるのではなく，自立支援を目指す方針に変わってきている．従って，障害者自立支援法をはじめ障害者の自立支援を促す施策が，次々と打ち出されている．現在，特別支援学校や特別支援学級は，自立に向けた教育機関として重要な役割を果たしている．そこで，この学校や学級の児童・生徒が，歯科保健活動を通して，歯や口の健康状態に関心を持ち，一人できちんと歯をみがき，口腔内を清潔に保つということは，自立支援の観点から見ても極めて重要である．この歯と口の健康つくりは，自分の目で確かめながら進めることができるので，知的障害があっても指導することが可能であると考えられる．そこで，定期健康診断で歯周疾患要観察者（GO）と診断された知的障害の児童・生徒に対して，個別指導の効果を検討した．尚，通常の指導方法では，その効果を期待することは困難であることが推察されるので，養護教諭のサポートを受けながら研究を行うこととした．【方法】本人が理解できるように口腔内の状況の指導を，本人だけでなく養護教諭とともに行った．生活習慣全般については，質問紙（日本学校保健学会「歯肉と生活習慣調査」）に保護者が記入することで，実際の状況を把握することができる．質問紙の内容は，歯肉の状態，清潔・健康行動，歯みがき行動，食行動となっている．この質問紙には，質問項目ごとに点数付き例示回答があり，点数が高くなるほど理想的な状態になっている．対象者は，歯科健康診断時に GO と判定された生徒とし

S36 明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 明海歯学 42 2013

た．【結果】GO と判定され，新版 S-M 社会生活能力検査における社会生活年齢が 6.0歳～7.1歳の 6名に，養護教諭による個別指導を実施した．個別指導後において全員の歯肉の状態と生活行動等の改善傾向が示された．PMA

指数は，対象者全員の数値が有意に低くなった．歯みがきに対する行動評価においては行動可能項目が増加した．保護者からの感想によると，家族も子どもの自立に向けて歯みがきを意識するようになった．GO と判定された知的障害がある児童・生徒に対しても，社会生活年齢 6.0歳以上であれば養護教諭の個別指導は有効であることが示唆された．

【考察】特別支援学校の GO と評価された児童に対して養護教諭が個別指導を行うことで，自立に向けた行動変容が期待できると考えられた．この結果は，障害児だけではなく健常児においても担任や保護者が子どもと共に健康づくりに取り組むことによって，児童・生徒に「生きる力（自分で課題を見つけ，自ら学び，自ら考え，主体的に判断し，行動し，よりよく問題を解決する資質や能力．自らを律しつつ，他人とともに協調し，他人を思いやる心や感動する心など，豊かな人間性．たくましく生きるための健康や体力．中央教育審議会答申）」を確かな力として身につけることが可能であることを示唆していると考えられる．

明海歯科医学会第 20回学術大会抄録 S37