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Coccídios: Isospora belli
Cryptosporidium spp. Cyclospora cayetanensis
Profa. Alessandra Barone Prof. Archangelo Fernandes
www.profbio.com.br
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Coccídios
• Parasitos encontrados em várias espécies de aves e outros animais como o gado, cordeiros, etc.
• Algumas espécies podem parasitar o homem sendo pouco patogênicas para indivíduos imunocompetentes e fatal para indivíduos imunocomprometidos
• Para o homem, parasitam as células epiteliais do intestino.
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Coccídios
• Espécies que parasitam o homem :
– Isospora belli
– Cryptosporidium spp.
– Cyclospora cayetanensis
– Sarcocystis hominis
– Sarcocystis suihominis
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Ciclo Vital dos coccídios
• Ciclo assexuado e sexuado
– Esporozoíta – adesão pelo complexo apical – invasão celular – esquizogonia – esquizonte – merozoítos
– Merozoítas: podem gerar novo ciclo assexuado ou produzir ciclo sexuado.
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Ciclo Vital dos coccídios
• Ciclo sexuado:
– Merozoítos – diferenciação em gametócitos – microgametócitos (masculino) e macrogametócitos (feminino) – fecundação – ovo ou zigoto – oocisto
– Oocisto – liberação de esporozoítos – início de um novo ciclo.
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Isospora belli
• Filo: Apicomplexa
• Classe: Sporozoea
• Subclasse: Coccidia
• Ordem: Eucoccidiida
• Subordem: Eimeriina
• Família: Eimeriidae
• Genero: Isospora
• Espécie: Isospora belli
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Isospora belli
• Ingestão de oocistos esporulados e liberação dos esporozoítos na luz intestinal
• Invasão das células epiteliais da mucosa do intestino delgado - íleo
• Diferenciação em trofozoítos e divisão por esquizogonia com produção de meronte
• Lesão celular, liberação dos merozoítos e nova invasão celular
• Diferenciação em gametócitos e formação do oocisto
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Isospora belli
• A célula única divide-se em duas com produção do esporoblasto
• No solo: – Esporogonia. Os esporoblastos produzem
membrana cística produzindo o esporocisto.
– Maturação completa ocorre quando cada esporocisto produzir 4 esporozoítos.
– Processo que ocorre entre 1 e 3 dias
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Isospora belli
• Oocistos
– Elípticos com extremidades estreitas
– Medem 30 x 12 μm
– Parede cística dupla
– Encontrados nas fezes na forma imatura com presença de massa citoplasmática nucleada e cheia de granulações, com regiões polares livres
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Ciclo evolutivo
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Oocisto de Isospora belli
Ilustração disponível em Rey, 2010
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Oocisto imaturo
Ilustração disponível em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/ImageLibrary/Cystoisosporiasis_il.htm
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Oocisto imaturo
Ilustração disponível em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/ImageLibrary/Cystoisosporiasis_il.htm
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Oocisto de I. belli visualizados em microscopia com U.V
Ilustração disponível em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/ImageLibrary/Cystoisosporiasis_il.htm
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Patologia
• Podem ser assintomáticas em imunocompetentes
– Cura espontânea em aproximadamente 40 dias
• Patogenia caracterizada por:
– Infecções benignas com invasão de células epiteliais e das criptas de Lieberkuhn do ID com reação inflamatória da mucosa
– Destruição das células epiteliais, atrofia das vilosidades, hiperplasia das criptas e infiltração de células plasmáticas, linfócitos e leucócitos polimorfonucleares
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Oocisto de Isospora belli em corte de duodeno
Ilustração disponível em http://pathology5.pathology.jhmi.edu/micro/v18n09.htm
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Ilustração disponível em http://www.annals.org/content/121/9/663/F1.expansion.html
Merozoítos e gametócitos presentes nas células intestinais
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Patologia
• Sinais e sintomas
– Desenvolvimento de síndrome de má absorção.
– Perda do apetite, astenia, dor de cabeça, náusea, evacuações com cólicas e dores abdominais.
– Início pode ser súbito com febre e diarreia
– Cura espontânea e completa
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Patologia
• AIDS:
– Desidratação e acentuada perda de peso
– Diarreia debilitante que pode levar a morte.
– Podem parasitar além do ID, a vesícula biliar.
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Diagnóstico
• Pesquisa de oocisto não esporulado nas fezes
– Método de safranina /azul de metileno
• Métodos de concentração pela dificuldade de encontro dos oocistos nas fezes
• Aparecimento dos parasitos após duas semanas de infecção.
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Tratamento
• Sulfametoxazol- trimetropima
• Metronidazol e quinacrina
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Epidemiologia
• Registrado em diversos países mundiais
• Brasil
– Frequência registrada em SP: 1 em 1000 exames
– RJ: Portadores de SIDA apresentaram 10,5% de resultados positivos
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Cryptosporidium spp
• Filo: Apicomplexa
• Classe: Sporozoa
• Subclasse: Coccidia
• Ordem: Eucoccidiida
• Subordem: Eimiriina
• Família: Criptosporidiidae
• Gênero: Cryptosporidium
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Cryptosporidium spp.
• Parasitos encontrados em grande número de animais: mamíferos, aves, répteis e peixes
• As espécies de aves e mamíferos podem contaminar o homem.
• Protozoário causador da diarreia
• São álcool-ácidos resistentes
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Espécie Principais hospedeiros
C. parvum Humanos e muitas espécies de mamíferos silvestres e domésticos
C. hominis Humanos e macacos
C. canis Cão, homem
C. felis Gato, homem
C. baileyi Frangos de corte, aves
C. muris Camundongo, rato, homem
C. andersoni Bovinos
C. crotali Répteis
C. nasorum Peixes
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Ciclo evolutivo
• Ingestão de oocisto esférico contendo 4 esporozoítos
– Aproximadamente 5,0 x 4,5 µm
• Liberação dos esporozoítos no intestino delgado
– desencistamento e exposição à temperatura corporal, ao ácido gástrico, à tripsina e a sais biliares.
• Invasão do esporozoíto na membrana celular sem invasão citoplasmática.
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Ciclo evolutivo
• Formação de vacúolo parasitóforo intracelular e extracitoplasmático
• Diferenciação em trofozoíto
• Reprodução assexuada dentro do vacúolo com produção de meronte 1º – liberação de 8 merozoítos 1º - invasão celular -meronte 2º – liberação de 4 merozoítos 2º.
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Ciclo evolutivo
• Merozíto 2º – micro e macrogameta – zigoto – esporocisto de parede delgada e esporocisto de parede espessa
• Esporocisto de parede espessa: 80% eliminado nas fezes
• Esporocisto de parede delgada: 20 % eliminado nas fezes. Rompimento do esporocisto dentro do intestino causando auto-infecção.
• O ciclo biológico de aproximadamente 12 e 14 horas, varia de acordo com o hospedeiro e a espécie de Cryptosporidium
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Oocistos presentes nas células epiteliais - intestinais. ID de ovelha
Ilustração disponível em www.coccidia.icb.usp.br
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Meronte de Cryptosporidium com membrana externa destruída, expondo merozoítos.
Intestino delgado de ovelha – micrografia eletrônica de varredura
Ilustração disponível em www.coccidia.icb.usp.br
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Ilustração disponível em www.coccidia.icb.usp.br
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Ilustração disponível em http://www.coccidia.icb.usp.br/disciplinas/BMP222/aulas/Sarcocystis_Cryptosporidium_2011.pdf
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Ilustração disponível em www.dpd.cdc.gov
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Ilustração disponível em www.dpd.cdc.gov
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Oocistos de Cryptosporidium sp. visualizados com imunofluorescência
Ilustração disponível em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/ImageLibrary/Cryptosporidiosis_il.htm
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Transmissão
• Pessoa a pessoa
• Animal a pessoa
• Ingestão ou inalação de oocistos esporulados
• Recreação em áreas contaminadas
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Patologia
• Criptosporidiose – Oocistos aderidos a microvilosidades: sindrome de má
absorção com destruição das microvilosidades sem lise celular.
– Enterocolite aguda com cura espontânea de 1 a 2 semanas
– Sintomas mais severos em crianças
– Imunocompetentes: quadro benigno e autolimitante com duração de 10 dias.
– Dor abdominal, anorexia, febre, dor de cabeça, náusea e vômito
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Patologia
• Imunodeficientes: – Diarreia crônica que pode durar meses
– Evacuação frequente e volumosa
– Desequilíbrio eletrolítico
– Cólicas, flatulência, dor epigástrica, náusea, vômito, anorexia e mal estar
– Desidratação e caqueixa
– Mortalidade elevada
– Resistência a antimicrobianos
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Diagnóstico
• Pesquisa de oocisto nas fezes
– Métodos de concentração: centrífugo-flutuação em solução de sacarose, método de formol-éter
• Pesquisa de oocisto em material de biópsia intestinal
– Coloração especial de Kinyon, Ziehl-Neelsen modificado, auramina , safranina e azul de metileno.
• Pesquisa de anticorpos circulantes: Elisa e IFI
• PCR
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Epidemiologia
• Encontrada em todos os continentes
• Prevalência dependente de: – idade,
– hábitos e costumes das populações,
– época do ano,
– área geográfica,
– densidade populacional,
– estado nutricional da população e o estado de imunocompetência dos indivíduos.
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Epidemiologia
• 250 a 500 milhões de casos anuais de infecção por Cryptosporidium spp. na Ásia, África e América Latina.
• Ampla distribuição geográfica no Brasil
• Oocistos resistentes a desinfetantes
• Pacientes com AIDS eliminam grande quantidade de oocistos
• Prevalência maior em crianças de 6 meses a 3 anos
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Tratamento
• Cura espontânea para imunocompetentes
• Sem tratamento eficaz para imunodeficientes
• Nitazoxanida: eficácia no tratamento da criptosporidiose em crianças e adultos imunocompetentes
• Espiramicina, paramomicina e azitromicina diminuem a gravidade da infecção
• Reidratação
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Cyclospora cayetanensis
• Filo: Apicomplexa
• Classe: Sporozoea
• Subclasse: Coccidia
• Ordem: Eucoccidiida
• Subordem: Eimeriina
• Família: Eimeriidae
• Genero:Cyclospora
• Espécie: Cyclospora caeytanensis
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Cyclospora cayetanensis
• Tipo de reprodução:
– Assexuda: esquizogonia
– Sexuada: gametogonia e esporogonia
• Reservatório:
– Homem
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Cyclospora cayetanensis
• Formas evolutivas:
– Esporozoítos
– Trofozoítos
– Merozoítos
– Gametócitos
– Oocisto
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Cyclospora cayetanensis
• Ciclo evolutivo – Ingestão de cistos esporulados contendo 2
esporocistos com 2 esporozoítos – Liberação dos esporozoítos e invasão celular (ID) – Diferenciação em trofozoítos e multiplicação por
esquizogonia – Formação do esquizonte e liberação dos merozoítos – Novo ciclo ou produção de gametócitos – Formação de oocisto não esporulado eliminado nas
fezes – Esporulação ocorre em dias a semanas a temperatura
de 22 a 32ºC.
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Cyclospora cayetanensis
• Oocisto semelhante o oocisto de Cryptosporidium
• Esférico, membrana dupla , apresentando 8-10 µm de diâmetro (2x maiores do que os oocistos de Cryptosporidium)
• Utilização de morfometria com micrômetro ocular para identificação das espécies
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Ilustrações disponíveis em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/ImageLibrary/Cyclosporiasis_il.htm
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Oocisto de C. cayetanensis corado com safranina
Oocisto de C. cayetanensis visível à microscopia de UV
Ilustrações disponíveis em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/ImageLibrary/Cyclosporiasis_il.htm
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Ilustração disponível em www.dpd.cdc.gov
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Transmissão
• Ingestão de oocistos esporulados através da água e alimentos contaminados
• Sem transmissão direta pela necessidade de esporulação no ambiente
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Patologia
• Assintomáticos
• Sintomáticos:
– Diarreia: autolimitada que dura 3 a 4 dias com aproximadamente 4 a 10 evacuações diárias e explosivas;
– Podem ocorrer recaídas frequentes durante um período de 2 a 3 semanas
– Evacuação de aspecto não sanguinolento, mas com presença de fleuma
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Patologia
• Outros sintomas:
– dor abdominal, náuseas e vômitos, perda de peso, fadiga e febre baixa
• Em indivíduos imunocomprometidos o quadro diarreico é crônico e intermitente
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Epidemiologia
• O primeiro caso de infecção humana por Cyclospora foi descrito em 1979
• Crescente número de casos de ciclosporose em vários países incluindo Guatemala, Venezuela, Nova Guiné, Cuba, Brasil, Estados Unidos, Canadá, Haití, Colombia, Turquía, Peru, Nepal, Egito, entre outros.
• Tem sido observados surtos relacionados ao consumo de framboesas e manjericão nos EUA e Canadá
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Epidemiologia
• Nas áreas endêmicas, é frequente a presença de portadores assintomáticos
• Período de incubação de aproximadamente 7 dias quando os sintomas de diarreia intensa começam a aparecer.
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Diagnóstico
Diagnóstico parasitológico:
• Pesquisa de oocistos (imaturos) nas fezes pelo método de concentração de Ritchie (o número de oocistos eliminados nas fezes é muito baixo)
• Microscopia por contraste de fase ou luz UV: autofluorescência
– Filtro: 330-365 nm (oocistos de coloração azul )
– 450-490 nm (oocistos de coloração verde)
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Diagnóstico
• Técnicas de coloração: – Kinyoun (coloração vermelha): oocisto ácido
resistente-variável
– Safranina-azul-de-metileno
• Diagnóstico diferencial com C. Parvum : – tamanho do oocisto / ácido-resistência-variável /
necessidade de esporulação
• Outros métodos: – Biópsia de jejuno
– PCR
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Tratamento
• Adultos
– Trimetoprim (TMP)- 160 mg
– Sulfametoxazol (SMX)- 800 mg
• Para crianças, a dose deve ser mais baixa e para imunocompetentes, a dose deve ser mais alta e o tratamento mais longo
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Controle
• Notificação de surtos
– Identificação de fontes
– Controle da transmissão
• Medidas preventivas
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Espécie
Forma encontrada nas fezes
Tamanho
Estrutura do oocisto
Isospora belli Oocisto não esporulado
30 x 12 2 esporocistos com 4 esporozoítos
Cryptosporidium parvum
Oocisto esporulado
4 – 5 4 esporozoítos
Cyclospora cayetanensis
Oocisto não esporulado
8 -10 2 esporocistos com 2 esporozoítos cada
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Referência bibliográfica
• DE CARLI, Geraldo Attílio. Parasitologia Clínica.2.Ed.São Paulo: Ed. Atheneu, 2207. 906p
• NEVES, David Pereira. Parasitologia humana. 11.Ed.São Paulo: Editora Atheneu, 2005. 494p.
• REY, Luis. Bases da Parasitologia Médica. 3.Ed.Rio de Janeiro: Guanabara Koogan.2010.391p.
• PEREIRA, J. T.; SOCCOL, V. T.; COSTA, A. O.; CASTRO, E. A.; OSAKI, S. C.; PAULINO, R. C..Cryptosporidium spp.: para controlar é necessário conhecer. Departamento de Patologia Básica – Universidade Federal do Paraná. Revista Saúde e Ambiente / Health and Environment Journal, v. 10, n. 2, dez. 09
• www.dpd.cdc.gov • www.coccidia.icb.usp.br • http://pathology5.pathology.jhmi.edu/micro/v18n09.htm