Clase 4.- Pelicula Adquirida.
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Dr. Héctor Monardes
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Película adquirida Capa amorfa acelular de menos de 1 mm de espesor
constituida por la adsorción sobre superficies dentales de componentes salivales como glucoproteinas, proteínas y en menor grado productos secretados por M.O.
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Formación del Biofilm
Película adquirida Cutícula sub-superficial Cutícula superficial Película manchada
Colonización primaria Gérmenes específicos
Colonización secundaria - Maduración bacteriológica y estructural
Capa formada por microorganismos y polímeros extracelulares
Placa madura o Clímax
•Formación de la película adquirida
• Adherencia a la película adquirida (colonización primaria)
• Agregación y Multiplicación interbacteriana (colonización secundaria)
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Cubiertas adquiridas después de la erupción
1. Película Adquirida “Unidad ecológica vital en un constante y dinámico cambio, por adsorción y desorción de moléculas precursoras o micelas que contienen enzimas provenientes
de las glándulas salivales”.
Film orgánico, amorfo, homogéneo de 0.3 a 5.0 μm de espesor
Formación sitio-específica: Más gruesa en sitios vestibulares que en sitios palatinos
A las 2 horas: 100 a 700 nm
A las 24 horas: ~ 1.000 nm
Alto contenido enzimático: Saliva
Fluido crevicular
Bacterias
Mucosas
Tracto respiratorio
Dieta
Archives of Oral Biology 45 (2000) 277±291 y Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-139
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Placa 2 días
Película
Esmalte
Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607
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Formación de película sobre HA
Archives of Oral Biology 45 (2000) 277 - 291
Depósitos globulares formados en la superficie
Previo 5 min 20 min
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Gluco- proteínas salivales acídicas, fosforiladas y de bajo PM (45 – 50 %)
Alta afinidad con HA
IgA-S: Defensa específica del hospedero
α-Amilasa inmovilizada:
Enzima salival ( glándula parótida) Menor afinidad por el sustrato que la libre Cataliza la hidrólisis del almidón en glucosa (20%) y Maltosa (80%) Proporciona sustrato para las bacterias cariogénicas Facilita la adherencia de microorganismos a las superficies dentales Se une selectivamente a especies del estreptococo, tales como S.Sanguis., S. Gordonii, S. Mitis, S. Parasanguis, S.
Christa, y S. Salivarius. Junto con MG1son precursores tempranos en la formación de la película (2horas) Se une firmemente a la HA Componente estructural principal, por su adsorción temprana, adhesión bacteriana y actividad enzimática.
Mucinas MG1: Mucina más abundante en la película Se une firmemente a la HA Complejo MG1/Amilasa son precursores tempranos en la formación de la película (2horas)
•Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-139 Biochemical and Biophysical Research Communications 320 (2004) 342–346
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Lisozima: Enzima salival (glándula submandibular y sublingual) Precursora de la película (5 minutos) Defensa independiente del anticuerpo Regula actividad bacteriana
Aumenta la permeabilidad de las membranas bacterianas Cambios osmóticos y de electrolitos S. Mutans, resistente a hidrólisis directa Enlace entre el ácido N-acetil murámico y el N-acetilglucosamina,.
Es policatiónica, lo que inhibe la actividad aniónica de la GTF Actividad enzimática mayor unida a la película que cuando está libre Es el principal componente bacteriolítico de los unidos a la película
Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Glucosil Transferasa (GTF) Enzima bacteriana con 3 isoformas B – C Y D
GTF C y GTF D potencian su actividad inmovilizadas GTF de S Sanguis mayor afinidad al substrato (sacarosa) cuando la enzima está libre GTF D causa la mayor disminución de la actividad amilasa comparada con las otras isoformas
Facilita la adhesión de los microorganismos ( S Mutans dependiente de glucano) Sintetiza glucanos extracelulares Interacción amilasa y GTF modulan la formación de glucanos Amilasa proporciona sustrato (glucosa)
Amilasa y GTF compiten por los sitios de unión en la película
Ej. de adaptación bacteriana a los biofilms fisiológicos del hospedero, para facilitar la colonización
Fructosil Transferasa: Forma fructopolisacáridos (transfiere grupos fructosil) De menor significación que los glucopolisacáridos en la formación de la placa Menos importante que GTF en modificación bacteriana
Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Peroxidasas Dos especies:
Peroxidasa salival (acino glandular) Mieloperoxidasa (leucocitos del fluido crevicular o mucosa)
Principal mecanismo de defensa:
Proteína antioxidante Disminuyen el stress oxidativo
Catalizan: Reducción del H2O2
Oxidación del thiocianato (SCN -) a Hipothiocianato (OSCN -)
Inhibe crecimiento bacteriano:
Por formación de OSCN – Inhibición de glicólisis bacteriana ( hexokinasa)
•Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Anhidrasa Carbónica 8 iso-enzimas (I – VIII) Acino glandular seroso Homeostasis de pH en diversos tejidos Alta capacidad Buffer, remineralización Cataliza reacción
En cavidad bucal: VI inmovilizada Conserva su actividad biológica Protege los dientes por neutralización de iones hidrógeno y ácidos
Altos niveles de actividad en saliva de niños carie-libres
•Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13
CO2 + H2O HCO3 - + H+
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Fosfatasas: Hidrolizan monoesteres orgánicos del ácido fosfórico Hay dos subespecies:
Fosfatasa ácida: mineralizaciòn
Fosfatasa alcalina: en pelìcula
PRPs: (proteínas acídicas ricas en prolina) Un tercio de las proteínas presentes en la saliva Son parte integral de la película Se unen a la HA por su extremo N- terminal negativo Actividad en la adherencia bacteriana Remineralización Mantención de integridad del cristal de HA
(Biochemical and Biophysical Research Communications 320 (2004) 342–346)
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Elastasas:
Remueven la región N-terminal de PRPs Productos de su digestión tienen menor afinidad por la HA PRPs intactas, incorporadas ya en la película, son resistentes Acción antibacteriana
Estaterinas - Aglutinina Parotídea - Seroalbúmina
Carbohidratos: Glucosa Fructosa Galactosa Manosa Galactosamina y Glucosamina
Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13
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1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente
Proteasas o Peptidasas: Actividad hidrolasa Hay cuatro subgrupos:
Serine- proteinasas Cisteine- proteinasas Asparragina ácido-proteinasas Metaloproteinasas (EC 3.4.24).
Proteasa de S. Sanguis Degrada IgA1-S Interfiere con actividad anti-bacteriana IgA1- secretora es parte integral de la película e inhibe la adherencia del S. mutans
Metaloproteinasas de matriz : Rol importante en la progresión de la caries dentinaria
Histatinas salivales: Inhiben las proteasas del huésped y las bacterianas Protege actividad de la amilasa de los efectos inhibitorios de los taninospor ej.
Cistatinas:
Enzima salival Regula actividad bacteriana y degradación proteica en sitios de inflamación o infección. Remineralización y mantención de integridad del cristal de HA Moléculas precursoras de la película y aparentemente inhibidoras de proteasas.
Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13
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Dra C De L M
Interacción
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1. Película Adquirida Funciones Protección:
Lubrica y protege al diente del medio ambiente Controla la composición de la microflora
Adhesión no específica y selectiva de bacterias Provee proteínas antibacterianas
Induce el desarrollo de la placa
Adsorción selectiva de bacterias
Soporte físico y químico: Adsorción y andamiaje
Barrera permeable:
De / Remineralización Almacena iones y selecciona su transporte
Enzimas de importancia Amilasa, lisozima, anhidrasa carbónica, GTF, Peroxidasa
Archives of Oral Biology (2005) 50, 821—828
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Hipótesis sobre las Placas Se plantea dos teorías sobre la relación entre las placas
dentales y la génesis de las patologías infecciosas orales.
Teoría de la placa inespecífica
Teoría de la placa específica.
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Placa Inespecífica Todas las bacterias que forman la placa participan en
la génesis de las patologías infecciosas.
Un incremento cuantitativo sería el principal causante de las patologías.
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Problemas No explica el porqué grandes acumulaciones de placa
no siempre producen caries ni destrucción de los tejidos periodontales.
No explica el porqué una placa escasa si produce patologías
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Placa Específica Sólo ciertas bacterias que componen la placa
participan en la génesis de las patologías infecciosas
Por lo tanto cambios cualitativos en la placa generan los procesos patológicos infecciosos.