CHƯƠNG 8 - FLAVONOID - DƯỢC LIỆU CHỨA FLAVONOID

116
- Hoa He* - Artisô* - Hong cm* - Râu mo* - Hng hoa* - Cc gai* - Bch qu* - Các Citrus* - Dây mt* - Diếp cá - Tô mc

description

Dược liệu

Transcript of CHƯƠNG 8 - FLAVONOID - DƯỢC LIỆU CHỨA FLAVONOID

- Hoa Hoe* - Artisô*

- Hoang câm* - Râu meo*

- Hông hoa* - Cuc gai*

- Bach qua* - Các Citrus*

- Dây mât* - Diếp cá

- Tô môc

2

1. Đăc điêm thưc vât hoc

2. Bô phân dung – Cách chế biến

3. Thanh phân hoa hoc chinh

4. Đinh tinh – Đinh lương hoat chât

5. Tác dung – Công dung

Trinh bay đươc

cua 10 dươc liêu trong chương trinh.

4

5

6

PHÂN BÔ – TRÔNG TROT

- Moc nhiêu ơ Trung quôc, Han, Nhât,

- cung thây ơ châu Âu.

- Viêt Nam cung co trông (tư canh, hat)

- Cây ≥ 3 tuôi se cho hoa (hoa Hoe)

- Căt chum hoa, tuôt lây hoa, phơi/sây ngay

- hoa chưa nơ (Hoe mê) >> hoa đa nơ (Hoe hoa)

> 90% < 10%

7

8

trên 90% la nu hoa chưa nơ (DĐVN III)

9

1. Hoa hoe

a. Flavonoid : chu yếu la Rutin

DĐVN III : Rutin ≥ 20% !

b. Triterpenoid (betulin, sophoradiol)

2. Các bô phân khác

a. Lá : Flavonoid (6.6%) # 4.7% Rutin

b. vo qua : Flavonoid (10.5%) # 4.3% Rutin

c. gô, thân, hat : Flavonoid (it, không quan trong)

10

= Rutoside

(C27H30O16 = 610.51)

O

OH

HO

O

O

OH

OH

Rutinose

Đâu tiên: tư Ruta graveolens. Hiên nay: chu yếu tư

- nu Hoe (Sophora japonica).

- Bach đan (E. macrorhyncha).

Cung co / Lua mach ba goc (Polygonum fagopyrum),

Táo ta (Zizyphus jujuba), Ich mâu (Leonurus spp.) …

11

- Bôt tinh thê hinh kim nho, vang luc, không mui vi,

- sây 96OC : ngâm 3H2O; ơ 110OC 12h/10 mmHg khan

- Dưới ánh sáng va không khi bi oxy-hoa nâu.

- Rutin khan : ơ 125OC se mau nâu,

ơ 196OC se hoa deo; huy ơ 215OC

- UV (MeOH, max) : 259, 359.0 nm (266 sh, 299 sh).

- UV (EtOH, max): 258, 362.5 nm.

- D = +13O82 (EtOH), 39O43 (pyridin)

12

trong d.môi ơ tO nguôi ơ tO sôi

MeOH ≈ 1/350 1/7

EtOH 1/650 1/60

nước 1/8000 1/200

- dê tan / kiêm loang, pyridin, formamid,

- tan châm / aceton, EtOAc,

- không tan / Bz, CS2, CHCl3, Et2O, d.dich acid.

13

- tăng mau vang / dung dich kiêm loang,

- cho mau đo đâm với phan ưng cyanidin,

- cho mau xanh luc (rôi nâu) với dung dich FeCl3,

- phát quang vang cam hơi nâu / UV 366 nm.

O

OH

HO

O

O

OH

OH

Rutinose

14

1,2. Lông che chơđơn & đa bao

3. hat phân co 3 lô nẩy mâm

4. biêu bicánh hoa

5. biêu bi đai hoa+ lô khi

6. mach vach,mach xoăn

15

bôt hoa Hoe

dich chiết côn

mau đo đâmtăng mau vang xanh luc nâu

NaOH loang

FeCl3 loang

Mg* / HCl

EtOH 95%, đun, loc

1. Phan ưng mau

16

2. SKLM : Ban silica gel G / F254

- dung môi :

EtOAc – ForOH – H2O (8 : 1 : 1)

EtOAc – MeOH – H2O (100 : 17 : 13)

n-BuOH – AcOH – H2O (4 : 1 : 5; )

- hiên mau :

AlCl3 1% / MeOH, EtOH / UV 365 nm

hơi NH3 (rutin cho mau vang)

UV 365 (rutin phát quang mau nâu)

So sánh với Rutin chuẩn

17

2. Phương pháp so mau

4. Phương pháp HPLC : thông dung

3. Phương pháp cân

1. Phương pháp UV-Vis

E1%

1cmBiết ơ λ = 362.5 nm; Rutin co = 325

- sau phan ưng Cyanidin (Vis)

- sau phan ưng với AlCl3 (UV 365 nm)

- chiết rutin = EtOH nong, thuy phân với H2SO4

- thu tua aglycon (quercetin); suy ra [rutin]

18

200 300 400 nm250 350

258

362.5

Tai λ = 362.5 nm; với cuvet 1 cm

- dd.1% rutin/MeOH : Abs = 325

- dd.C1 rutin / MeOH : Abs = A1

- dd.C2 rutin / MeOH : Abs = A2

325

A1

A2

Abs.

Cn

(PHƯƠNG PHÁP UV-Vis)

biết An

19

nu hoa Hoe

dich chiết côn

dich thuy phân

tua quercetin

EtOH 95% Δ

+ H2SO4 2% Δ

loc thu tua

quercetin % rutin %

1 quercetin (M = 302.24) # 2,02 rutin (M = 610.51)

thu hôi côn

HCl 0.5%

lam lanh, lăng,

cân

(PHƯƠNG PHÁP CÂN)

20

(PHƯƠNG PHÁP HPLC)

Côt : Silica RP-18 Lichrosphere 250 x 4.6 mm; 5 µm

Pha đông: AcCN – H2O (20 : 80) (40 : 60);

đêm pH 2.5 (TFA); 20 μl; 1 ml / phut

Detector: UV 365 nm

Côt: Silica RP-18 Lichrosphere 250 x 4.6 mm; 5 μm

Pha đông: AcOH 0.28%– MeOH – AcCN (7 : 1 : 2)

20 μl; 1.5 ml/min.

Detector: UV 350 nm.

21

(1) rutin, (2) quercetin-3-glc, (3) quercitrin,

(4) myricetin, (5) luteolin, (6) quercetin,

(7) apigenin, (8) kaempferol (9) isorhamnetin.

5 10 15 20 25 phut0

Detector UV 365 nm

22

3418

2984

16561605

1493

1360 1202

1466

1295

PHÔ IR (KBr) CUA RUTIN

O

OH

HO

O

O

OH

OH

Rutinose

23

100%

200 300 400 500 600100

50%

0 m/z

303

465

611

[M+H]+

[M+H]+- Rha

[M+H]+- Rha - Glc

Sư phân manh / khôi phô cua rutin (M = 610)

quercetin O glc O rha

303

H+611 = [M+H]+

465

146(162+146)

[quercetin+H]+

–162

–146

303

24

Phô 13C-NMR cua Rutin

quercetin (15 C)

2 C/rutinose

ppm

rutinose

47

5

2

9

4’

3’

86

O

OH

HO

O

O

OH

OH

Rutinose

4

3

1’

6’

5’ 2’

10

25

- lam bên va giam tinh thâm cua mao mach, hông câu

- chông co thăt, giam trương lưc cơ tim.

- phong chưng xơ vưa đông mach,

- tri xuât huyết (chay máu cam, băng huyết, ho ra máu).

- tri các rôi loan vê vân mach

(tri, chân năng, di cam đâu chi, đau nhưc chi, phu chi,

đôm xuât huyết dưới da, rôi loan tuân hoan vong mac...).

- tri các thương tôn ngoai da do bưc xa, giup mau lanh seo.

26

Tư Rutin các Δ’ dê tan co tác dung tri liêu hơn:

- trihydroxyethyl-rutosid (Troxerutin*, Solurutin*),

- morpholylethyl-rutosid, sulforutin, ethoxazo-rutosid...

O

O

O

O

O

O

OH

C2H4OH

C2H4OHC2H4OH

Rutinose

trihydroxyethyl-rutosid

27

Artichaut

28

29

Bô phân dung:

Lá / cum hoa

đa phơi / sây

30

San lương Artisô toan câu # 1.000.000 tân (2005)

Châu My : Arg. 100.000 tân (10%)

Châu Âu : 85%. Trong đo, Italia 500.000 tân (50%)

Spain 300.000 tân (30%)

Pháp 50.000 tân (05%).

Ơ VN, chu yếu trông ơ Sapa, Lâm Đông (vô tinh).

Dung lam thưc phẩm va lam thuôc

(cao đăc, cao long, tra thuôc, viên bao đương)

Food Chemistry, 4/2007

31

Trông bằng chôi non. Thu hoach lá sau khi hái cum hoa

(nhưng khi chưa ra hoa, thu hoach lá tôt nhât).

Lá mong nước : Tránh u đông. Cân loai bo sông lá,

chỉ giư phiến lá (lá non tôt hơn lá gia).

Sau đo:

- Chiết cao hay bôt đông khô Artisô ngay, hoăc

- Bao quan lá tươi ơ nhiêt đô lanh 4OC, hoăc

- Diêt men oxydase + phơi khô nhanh (hoăc sây < 40OC)

đê bao quan

32

acid 1,5-dicaffeoyl-quinic = (1 tiên chât * cua cynarin)

acid 1,3-dicaffeoyl-quinic = cynarin ** (0.5%)

acid 3-caffeoyl-quinic = acid chlorogenic ** (1%)

acid 4-caffeoyl-quinic = acid iso-chlorogenic

acid 5-caffeoyl-quinic = acid neo-chlorogenic

acid 1-caffeoyl-quinic, acid caffeic, acid cichoric

1. Các Δ’ acid (#11 hơp chât)

33

- Cynarosid (Luteolin 7-O-glc)

- Scolymosid (Luteolin 7-O-rut)

- Cynarotriosid (Luteolin 7-O-rut; 4’-O-glc)

- Narirutin

2. Các Flavonoid (# 8 hơp chât)

3. Các thanh phân khác

- phytosterol (-sitosterol, stigmasterol)

- triterpenoid (taraxerol, cynarogenin)

- chât đăng (cynaropicrin)

34

acid caffeic (C6 – C3)

COOH

OH

OH

OH

HO

12

3

45

6

65

43

2

1

COOH

OOH

HOO

Caffeoyl

Caffeoyl

cynarin

= acid 1,3-dicaffeoyl-quinic

COOH

HO

HO

COOH

OHOH

HOOH

1

23

4

56 acid quinic

Caffeoyl

35

cynarin

65

43

2

1

COOH

OOH

HOO

Caffeoyl

Caffeoyl

65

43

2

1

COOH

OOH

HOO

CO

OH

OH

CO

OH

OHdây nôi depsid

dây nôi depsid

36

Lá Artisô (4oC)

Lá đa x l

Dich côn nước Dich nước

Dich EtOAc

Căn EtOAc

các Polyphenol

côn - nước

thu hôi côn

diêt men

lăc EtOAc

đông khô

săc k

37% la polyphenol (HPLC)

trong đo # 1/2 la cynarin

37

Phương pháp Fratianni (2007)

(Dung đê chuẩn bi mâu đinh lương, mâu th sinh hoc)

• Lá Artisô đông lanh đươc ngâm 1 giơ với 5 V dung môi

Me2CO – EtOH – MeOH (70 : 15 : 15) ơ 4OC.

• Cô thu hôi dung môi, lăc với 5 V EtOAc ơ 4OC.

• Cô dich EtOAc đến khô, hoa vao MeOH ( mâu th )

38

Cao đăc tư lá Artisô trên thi trương chưa khoang

2.5% - 5% cynarin

15% acid chlorogenic

13% - 18% Δ’ acid caffeyolquinic

tinh theo acid chlorogenic (HPLC)

Thương bi trôn đương mach nha hay maltose

Trên thưc tế, ngoai các tiêu chuẩn / DĐVN; cao Artisô

thương đươc bô sung tiêu chuẩn đinh tinh bằng HPLC.

Săc đô mâu th phai cho các peak # các chât chuẩn

(cynarin, acid chlorogenic, acid caffeic …)

39

Dich chiết côn

Dich chiết nước

lăc với CHCl3

Ph.đoan (02) Pđ. (03 – 16)

cynarin1-caffeoylquinic acid

cynarosidluteolin

7-rutosidacid

chlorogenic

Phân đoan (21 – 38) Pđ. (44 - 46)

**

SKC RP-18, thu 50 ph.đoan

Lá Artisô khô (50 g)

MetOH 70% (2 x 1000 ml)

Lây lớp nước

SKC Si-gel NP

40

• manh biêu bi phiến lá gôm nhưng tế bao đa giác,

mang lô khi & rât nhiêu lông che chơ

• nhiêu khôi nhưa nâu, kich thước thay đôi

căn côn 96% +NaNO2 10%

HCl(10OC x 20 phut)

NaOH 10%

mau hông cánh sen

41

Phan ưng xác đinh polyphenol

polyphenol +th’th Folin-Ciocalteu

ddich Na2CO3

mau xanh(760 nm)

polyphenol +FeCl3 1%

kali fericyanid 1%mau xanh

(th’th Barton)

42

Thành phần thuốc thử Folin-Ciocalteu

SODIUM TUNGSTATE, DIHYDRATE 10213−10−2 10%

SODIUM MOLYBDATE 7631−95−0 3

LITHIUM SULFATE, MONOHYDRATE 10102−25−7 15

HYDROCHLORIC ACID 7647−01−0 12

PHOSPHORIC ACID 7664−38−2 9

BROMINE 7726−95−6 -

Water 7732−18−5 50

43

Ban mong : Si-gel F 254 / Si-gel G

Dung môi : BuOAc – ForOH –H2O (14 : 5 : 5)

Phát hiên : NaNO2 / NaOH (cynarin mau hông)

So sánh với cynarin chuẩn.

Dung môi : HCl 0.1N; chiêu khai triên:

Phát hiên : thuôc th Barton

Cynarin : Rf ~ 0.30-0.35 (mau xanh)

44

a ph c

ao Ar isô

dung ch

cynarin / MeOH

AcOH + H2SO4

dd. acetat

MeOH

đo Abs. 325 nm; A1 = 6161

Đinh lương ortho-dihydroxyphenol / Artisô (DĐVN III)

45

• Đinh lương polyphenol toan phân

Dung ph.pháp Folin-Ciocalteu, tao mau xanh, so mau,

tinh theo quercetin hay catechin.

• Đinh lương tưng hơp chât riêng biêt (cynarin …)

Dung phương pháp HPLC RP-18 (250 x 4 mm, 5 μm)

Pha đông: MeCN-nước /đêm phosphoric (pH 2.6)

Detector PDA (210 va 330 nm)

So sánh (Rt, S) với các chât chuẩn

46

• Trôn (800 μl nước) + (50 μl th.th FC) + (10-50 μl mâu)

• Sau 1’ va trước 8’, thêm 100 μl dung dich Na2CO3 20%,

• bô sung nước vưa đu 1 ml. Trôn đêu.

• U 2 giơ, đo Abs. ơ 760 nm. Lam 3 lân lăp lai.

• So sánh với đương cong chuẩn cua quercetin / catechin.

• Polyphenol toan phân trong lá # 1.2%

Đinh lương polyphenol toan phân (Folin – Ciocalteu)

47

Caftaric acid 7.73 Chlorogenic acid 15.63

Caffeic acid 19.57 Cynarin 29.34

Cichoric acid 37.23 Echinacosid 42.41

Rutin 53.36 Acteosid 57.07

acidchlorogenic

cynarin

rutin

acidcaffeic

acidcichoric

echinacosid

acid caftaric

acteosid

Đinh lương băng HPLC

48

Thương dung dang tra thuôc, nước săc, cao mêm.

Con co dang viên bao đương (BAR, Chophytol …)

Tác dung chinh

• lơi mât, thông mât; trơ tiêu hoá

• antioxidant; giai đôc gan, phuc hôi chưc năng gan-mât

• ha cholesterol/máu; ngưa xơ vưa đông mach

• lơi tiêu; tri phu thung, soi tiết niêu

49

50

51

Rê đa phơi hay sây khô

cua cây Hoang câm

(Scutellaria baicalensis).

- Khô câm (rê gia)

- Điêu câm (rê con)

52

Ngâm nước, u mêm, xăt lát rôi phơi hay sây khô.

Con chế thanh:

• T u hoang câm : tẩm rươu, sao qua, phơi sây khô

• Hoang câm thán : sao cháy xem, phun nước, phơi sây khô

Chu yếu la các Flavonoid

baicalein, baicalin

scutellarein, scutellarin

wogonin . . . (~ 40 chât)

ngoai ra con co tannin pyrocatechic.

53

scutellarein

scutellarin

baicalein

baicalin

O

OOH

HO

HO

OH

O

OOH

HO

OH

OglcA

O

OOH

HO

HO

O

OOH

HO

OglcA

O

OOH

HO

OMe

wogonin

54

• Dich chiết EtOH + dd. Chi acetat tua vang

• Dich chiết EtOH + Mg** / HCl mau đo

• Căn Et2O / EtOH + dd. FeCl3 luc xám

nâu tia

55

Dung phương pháp quang phô UV-Vis :

Dich chiết MeOH / EtOH, đo quang ơ 279 ± 1 nm

tinh theo baicalin (E = 673)11

Hoang câm phai chưa ≥ 4% baicalin

Dươc điên Trung quôc, DĐVN III:

56

• Kháng khuẩn, ha nhiêt

• Tăng co bop, lam châm nhip tim.

• Giam co thăt cơ trơn ruôt.

• Chưa cao huyết áp, nhưc đâu, mât ngu

• Baicalin ester phosphat : kháng di ưng

57

Bô phân dung

Toan cây trư rê.

Thu hái khi cây băt đâu ra hoa

59

Thân con non Thân gia

60

1. Các Flavonoid

Chu yếu: sinensetin, eupatorin, tetramethyl-scutellarein

(~ 10 chât thuôc nhom polymethoxy-flavon (PMF)

Ngoai ra con các glycosid cua kaempferol, quercetin

2. Các dân chât cua acid caffeic

Chu yếu : acid rosmarinic, acid cichoric . . .

(nhom nay đươc goi la các tannin cua ho Lamiaceae)

61

3. Các diterpenoid (> 50 chât)

- các orthosiphol, neo-orthosiphol, seco-orthosiphol

- các orthosiphonon, neo-orthosiphonon

- các staminol, nor-staminol, nor-staminon

- các staminolacton, nor-staminolacton

- các siphonol

4. Các nhom hơp chât khác

- triterpenoid (acid oleanolic, ursolic, betunilic)

- phytosterol, (-sitosterol, stigmasterol, campesterol)

- carotenoid, coumarin (esculetin) . . .

62

O

O

OMe

OMe

OMe

MeO

MeOO

O

OH

OH

OMe

MeO

MeO

eupatorin sinensetin

O

O

OMe

OMe

MeO

MeO

tetramethyl-scutellarein

Lưu :

Các polymethoxy-flavonoid thương KHÔNG CHO mau đo với

ph.ưng cyanidin (Mg* + HCl đđ) như nhiêu Flavonoid khác.

63

Mâu th : dich CHCl3 cua cây Râu meo

Ban mong : Si-gel G (sây 120OC x 1 h)

Dung môi : toluen – ethyl acetat – aceton – acid formic

(5 : 2 : 2 : 1)

Hiên mau : ac. boric 10% – ac. oxalic 10% (2 : 1) + Δ

Kết qua : co 6 vết co mau

– hông – xanh lá – hông tim

– vang – hông – nâu nhat

366 nmphát quang xanh lá ma sáng

64

bôt cây Râu meo

Dich nước đâm đăc

Dich n-BuOH Căn n-BuOH / MeOH

SKLM / CHCl3-MeOH (9:1)

≥ 5 vết mau hông tim /VS

65

DĐVN III, 2002:

• không co chỉ tiêu đinh lương hoat chât / cây Râu meo

• chỉ co chỉ tiêu “ham lương chât chiết đươc” trong 2 dmôi :

- trong nước : CCĐ không dưới 20%.

- trong EtOH : CCĐ không dưới 10%.

Nhiêu tai liêu hiên s dung HPLC với chuẩn la sinensetin,

eupatorin, tetramethoxyflavon hay acid rosmarinic.

66

• Râu meo co tác dung lơi tiêu,

thông mât.

• Dung tri các chưng bênh

vê thân (soi thân !),

• Dung tri chưng soi mât,

viêm tui mât.

67

68

Dươc liêu la cánh hoa; đang tư mau vang chuyên sang đo,

đươc phơi hay sây khô. Mau đo tươi, mêm mai.

69

Ngâm Hông hoa trong nước : nước nhuôm mau vang

70

Săc tô đo : carthamin, carthamon (tan trong kiêm)

Săc tô vang : safflor yellow A, B; safflomin A (tan / nước)

• Hoat huyết, tri chưng huyết khôi (nghen mach),

• Tri chưng đau thăt ngưc, hep mach vanh.

• Lam tăng co bop cơ trơn (t cung . . .) Kỵ thai !!!

• Lam thuôc điêu kinh; chưa chưng bế kinh, đau kinh

71

O

OH

O O

HO

glcO

carthamin**(bis-chalcon)

carthamon**(chalcon)

OH

OH

O O

glc OH

HOO

OHglc

OO

HO

HO

O

OOH

OH

Oglc

7-glucosid luteolin

73

Dây leo lớn, dai # 10 m, thương moc thanh bui lớn.

Lá kep lông chim le, phiến lá lớn, khi non: mêm, vang luc

Hoa nho, mau hông tim. Qua kiêu đâu, dai 4-8 cm

Moc hoang / Châu Á. Hiên đươc trông khá nhiêu / ĐNÁ

Trông bằng cách giâm canh (sau khi thu hoach rê).

Bô phân dung: Toan bô rê. Con dung thân gia

74

Chu yếu la các isoflavonoid thuôc phân nhom Rotenoid

rotenon (4 – 8% / rê)

rotenon*

sumatrol

elliptinol

O

O

O

O

OMe

OMe

E

D

deguelin

toxicarol

tephrosin

1

O

O

O

A

B

C D

2

1

4

3

6

5

7

9

8

11

10 12

75

• Rotenon la 1 isoflavonoid kem phân cưc :

• tan / dmhc kpc > EtOH > nước (/nước : T = 1.6 ppm)

• Rotenon kem bên / ánh sáng, không khi.

• Rotenon rât kem bên / kiêm, d.dich Oxy-hoá (KMnO4)

rotenon vang cam mau timbôt NaNO2H2SO4 đđ

(rotenon/aceton) + HNO3 loangNH4OH

xanh kO bên

Co thê đinh tinh hoá mô với phan ưng tao mau xanh (sau)

76

Bôt rê Thuôc cá

Căn CHCl3

phưc [Rotenon – CCl4]

Rotenon / EtOH

Rotenon : cân tinh R%

± CHCl3

± CCl4

± EtOH 96% sôi

đê lanh, thu tinh thê

77

• Xác đinh nông đô tôi thiêu lam cho cá mât thăng bằng.

• Xác đinh % ruôi bi chết khi tiếp xuc với dd. Rotenon

• Rotenon không đôc / đông vât máu nong khi tiếp xuc.

• Khi uông, tiêm : đôc (chết vi liêt hô hâp)

• Dây thuôc cá & Rotenon chu yếu đươc dung đê

- diêt côn trung (phun lên cây, trôn vao đât, 250 ppm)

- diêt cá tap (trong hô nuôi tôm): Rotenon 0.02 ppm !

78

Xuât xư : Viên Ung thư Quôc gia Hoa Kỳ

(National Cancer Institute – NCI)

Phương pháp : Xác đinh LD50 (pha loang)

Muc đich : Tim chât đôc đ/v âu trung → thuôc

Quy mô : Sang loc lưu lương cao

(High Throughput Screening – HTS)

Dung cu : Khay 96 giếng

Sinh vât th : Ấu trung Artemia salina (Brine Shrimp)

Môi trương : Nước biên nhân tao

79

Artemia salina

Artemia salina

80

Artemia salina

81

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A

B

C

D

E

F

G

H

A

B

C

D

E

F

G

H

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Khay 96 giếng, dung cho th nghiêm Artemia salina

82

83

• Cây Cuc gai (Silybum marianum, Asteraceae)

co 1-2 năm, cao 0.2 – 1.5 m, moc hoang va trông nhiêu

ơ châu Âu, tư lâu đa đươc dung lam thuôc bao vê gan.

• Đa di thưc vao VN (2000, Trai dươc liêu Lâm Đông).

• Bô phân dung : Qua (Semen Silibi).

• Hoat chât chinh : Silymarin = hôn hơp 3 flavolignan

(silybin + silychrystin + silydianin)

• Silymarin: antioxidant, bao vê gan, phuc hôi gan,

chưa các chưng bênh vê gan mât (LEGALON !)

84

O

O

O

OOH

HO

OH

OH

OMe

CH2OH

- Silymarin : bôt vô đinh hinh, vang vang nâu,

mui thơm diu đăc biêt

- không tan / nước; kho tan / MeOH.

Tinh chât cua Silymarin

Silybin

(C25H22O10.H2O; M = 500)

Silymarin = (Silybin + Silychrystin + Silydianin …)

85

86

87

88

• cô thưc vât, la loai duy nhât

/ Ginkgoaceae con sot lai

• đươc coi la hoa thach sông.

• cây lớn; cây đưc & cái riêng biêt

• lá co 2 thuy đăc biêt (biloba)

• cây cái mới cho qua (Ngân hanh, Bach qua)

• moc nhiêu ơ Trung quôc, Nhât, châu Âu.

• Viêt Nam : mới di thưc (vung Tây Băc)

• Bô phân dung: Hat, Lá

89

- chât beo (# 1.7%)

- acid phenol (acid ginkgolic, hydroginkgolic, ginkgol…)

- sesquiterpen lacton (bilobalid)

- diterpen lacton (các ginkgolid A, B, C, M, J)

- flavonoid (tư kaempferol, quercetin, isorhamnetin)

- biflavonoid (amentoflavon, bilobetin, ginkgetin...)

- tannin (gallocatechin, epigallocatechin)

90

PHƯƠNG PHÁP HPLC

• côt : RP-18.

• Pha đông : AcCN – acid formic 0.3% (1 : 4)

• Chât chuẩn : rutin, quercitrin, quercetin,

kaempferol va isorhamnetin

• Detector : PDA (350 nm).

91

8.94

14.13

19.88

28.21

31.62rutin

quercitrin

quercetin

kaempferol

isorhamnetin

92

Hat Bach qua va lá Bach qua co tác dung

- antioxidant; bao vê gan, phuc hôi chưc năng gan

- tri thiêu năng tuân hoan nao, rôi loan tâp tinh / ngươi gia

- lam bên thanh mach; chưa tri

- ngăn chân tinh trang phu nao.

Các chế phẩm : TANAKAN, GINKOR FORT, OP-CAN

93

94

Citrus grandis Osbeck

Rutaceae

95

96

97

98

Citrus sinensis Osbeck

Rutaceae

99

100

Citrus reticulata Blanco

Rutaceae

101

102

Citrus aurantifolia Swingle

Rutaceae

103

104

Fortunella japonica (Thunb.) Swingle

Rutaceae

105

106

• Ơ nước ta các cây thuôc chi Citrus đươc trông ơ các đia

phương sau: Phu tho, Ha giang, Ha tinh, Huế, Biên hoa,

My tho, Cân thơ, Bến tre,…

• Trên thế giới, Citrus đươc trông ơ các nước châu Á:

Trung quôc, Nhât, Han quôc, Indonesia, Malaysia, Thái

lan; các nước châu Âu: Pháp, Đưc, ,...; các nước châu

My: My, Canada, Brazil, Mehico,…

Ngoai ra con co ơ Australia, các nước châu Phi va Trung

đông.

107

Dich qua, vo qua ngoai, vo qua giưa, hat, lá

Ngoai tinh dâu/vo qua ngoai (với limonen la thanh phân

chinh), carotenoid, coumarin, vitamin C, acid hưu cơ (a.

citric) va pectin, vo qua va dich qua Citrus con chưa nhiêu

flavonoid.

Phân lớn các flavonoid cua chi Citrus thuôc nhom flavanon:

108

Bưởi:

@. Flavanon glycosid

Naringin (naringenin-7-O-neohesperidosid)

Naringin–4'–glucosid

Naringin–6"–malonat

Neoeriocitrin (eriodictyol–7–O–neohesperidiosid)

Neohesperidin (hesperetin–7–O–neohesperidiosid)

Hesperidin (hesperetin–7–O–rutinosid)

Poncerin (isosakuranetin–7–O–neohesperidiosid)

@. Flavon glycosid

Luteolin–7–O–neohesperidosid

Rhoifolin (apigenin–7–O–neohesperidosid)

109

Cam@. Flavanon glycosid

Hesperidin (hesperetin–7–O–rutinosid)

Didymin (isosakuranetin–7–O–rutinosid)

Eriocitrin (eriodictyol–7–O–rutinosid)

Narirutin (naringenin–7–O–rutinosid)

@. Flavon aglycon

5–O–Desmethyl–nobiletin

3,5,6,7,8,3',4'–Heptamethoxyflavon

Nobiletin (3’,4’, 5, 6, 7, 8-hexamethoxyflavon)

Tangeritin (4’, 5, 6, 7, 8-pentamethoxyflavon)

Sinensetin (3’,4’, 5, 6, 7-pentamethoxyflavon)

@. Flavon glycosid

Diosmin (diosmetin–7–O–rutinosid)

Isorhoifolin (apiginin–7–O–rutinosid)

Rutin (quercetin–3–O–rutinosid)

@. C–glycosylflavon

Diosmetin–8–glucosid

Vitexin–2"–xylosid

110

Quít

@. Flavanon aglycon

Citromitin

5–O–Desmethyl–citromitin

@. Flavanon glycosid

Hesperidin, Didymin, Narirutin, Neoeriocitrin, Neohesperidin

@. Flavon aglycon

Auranetin

5–O–Desmethyl–nobiletin

5,4'–Dihydroxy–6,7,8,3'–tetramethoxyflavon

3,5,6,7,8,3',4'–Heptamethoxyflavon

5–Hydroxy–auranetin

Nobiletin, Tangeritin, sinensetin, Xanthomicrol

@. Flavon glycosid

Diosmin, Isorhoifolin, Rhoifolin

111

Chanh

Eriocitrin (eriodictyol–7–O–rutinosid)

Hesperidin (hesperetin–7–O–rutinosid)

Diosmin (diosmetin–7–O–rutinosid)

Tắc

3’,5’-Di-C--glucopyranosylphloretin

Tangeretin, Nobiletin

112

Dang flavonoid toan phân phôi hơp với vit. C co tác dung lam

bên thanh mach, chông xuât huyết dưới da.

Diosmin + hesperidin (= Daflon) đươc dung đê chưa rôi loan

tuân hoan tinh mach, gian tinh mach, tri.

Naringin đươc dung trong nhan khoa đê chưa sung huyết kết

mac, rôi loan tuân hoan vong mac. Naringenin đươc dung đê

chưa loet da day.

Các polymethoxyflavon (tangeretin, nobiletin,…) co tác dung

kháng viêm va kháng ung thư khá manh trên các mô hinh thưc

nghiêm.

113

* The grapefruit flavonoid naringenin as a Hepatitis Cvirus therapy : efficacy, mechanism and delivery

* Product Name: Naringenin

Naringenin is a flavonoid that contributes to the taste of

grapefruit and has a bioactive effect as an antioxidant, anti-

inflammatory, carbohydrate metabolism promoter, free radical

scavenger and an immune system builder. In addition to being

useful in lowering LDL and vLTL (the “bad” cholesterols,

Naringenin has also been shown to reduce the production of

the Hepatitis C Virus in infected hepatocytes (liver cells).

114

* A study published in the journal “Hepatology” in June,2008, reported that “Stimulation with naringenin reducesHCV secretion in infected cells by 80%” by inhibiting thesecretion of vLDL.

* Citrus unshiu peel and its active ingredient nobiletinexhibit anti-hepatitis C activity.

* Citrus unshiu pericarpium is a good candidate for thetreatment on high cholesterol diet-induced blood circulatorydisorders, obesity and hyperlipidemia.

* Grapefruit Compound (naringenin) may help combatHepatitis C infection

115

* Grapefruit fights hepatitis C

* Naringenin compound in Grapefruit Inhibits HCVReplication in Laboratory Study

* HCV is bound to very low-density lipoprotein (vLDL, a so-

called “bad” cholesterol) when it is secreted from liver cells

and that the viral secretion required to pass infection to

other cells may be blocked by the common flavonoid

naringenin.

* The hepatitis C virus is actively secreted by the liver of

infected patients while bound to very low density

lipoprotein (vLDL). The grapefruit flavonoid naringenin

could be used to block vLDL secretion and lower the

circulating viral titer.