Centro Universitário de Brasília Faculdade de Ciências da ... · Os vírus são partículas que...

Centro Universitaacuterio de Brasiacutelia

Faculdade de Ciecircncias da Sauacutede

BIOLOGIA MOLECULAR DO VIacuteRUS PAPILOMA HUMANO

Edilamar Gonccedilalves

Brasiacutelia ndash 2001



Licenciatura em Ciecircncias Bioloacutegicas



Monografia apresentada agrave Faculdade de Ciecircncias da Sauacutede do Centro Universitaacuterio de Brasiacutelia como parte dos requisitos para a obtenccedilatildeo do grau de Licenciado em Ciecircncias Bioloacutegicas Orientador Prof MSc Claacuteudio Henrique Cerri e Silva Brasiacutelia - 2001

Agradecimentos

Agrave Deus que me capacitou para que se tornasse possiacutevel a realizaccedilatildeo de um dever cumprido Agrave minha matildee irmatildeos e cunhados pelo entusiasmo e incentivo agrave cada barreira sobreposta Ao meu marido e filhos pelo carinho e compreensatildeo nos momentos em que estive ausente para dedicaccedilatildeo agrave vida acadecircmica Ao professor Claacuteudio Cerri por sua paciecircncia e conhecimentos ministrados na orientaccedilatildeo desta Monografia

Resumo

Os viacuterus satildeo microrganismos submicroscoacutepicos de dimensotildees iacutenfimas medindo

entre 20 e 300 nm Satildeo destituiacutedos de metabolismo proacuteprio e por isso considerados

parasitas intracelulares obrigatoacuterios Reconhecidos como partiacuteculas filtraacuteveis Existem em

formas variadas Satildeo constituiacutedos por aacutecidos nucleacuteicos DNA ou RNA proteiacutenas e lipiacutedios

Satildeo encontrados em formas de simetria icosaeacutedrica e helicoidal Conseguem penetrar no

organismo atraveacutes de soluccedilotildees de continuidade na pele ou atraveacutes das membranas

mucoepiteliais Uma partiacutecula viral infecciosa liga-se agrave membrana celular e penetra na

ceacutelula hospedeira ocorre o desnudamento do genoma viral e posterior replicaccedilatildeo do viacuterus

As mutaccedilotildees do DNA e RNA viral que satildeo alteraccedilotildees na sequecircncia de bases do DNA

ocorrem pelo processo de substituiccedilatildeo de bases deleccedilatildeo e mudanccedila de fase de leitura Na

geneacutetica a recombinaccedilatildeo eacute um termo utilizado para descrever a troca de material geneacutetico

que venha a resultar num rearranjo de genes diferente do original Na recombinaccedilatildeo viral

quando dois viacuterus geneticamente diferentes infectam uma ceacutelula podem ocorrer os

fenocircmenos de recombinaccedilatildeo viral complementaccedilatildeo e mistura fenotiacutepica O viacuterus papiloma

humano ndash HPV conteacutem DNA de filamento duplo em configuraccedilatildeo circular Atualmente

mais de 70 genoacutetipos do HPV jaacute foram identificados O genoma do HPV conteacutem dois tipos

de molduras abertas de leitura (ORFs [o equivalente viral dos ldquogenesrdquo]) precoce e tardio

As ORFs precoces de transcriccedilatildeo (E1 E2 e E4 ateacute E7) regulam a replicaccedilatildeo viral e

transformaccedilatildeo da ceacutelula hoacutespede As duas ORFs tardias de transcriccedilatildeo (L1 e L2) codificam

as informaccedilotildees relativas agraves proteiacutenas capsides menores e maiores que recobrem o viacuterus A

replicaccedilatildeo dos HPVs ocorre nas camadas basais do epiteacutelio e tem acesso agraves ceacutelulas

permissivas atraveacutes de lesatildeo eou abrasatildeo Os HPVs mucosotroacutepicos satildeo encontrados

exclusivamente nos locais urogenitais ou bucorrespiratoacuterios As causas de condilomas

acuminados de exuberante proliferaccedilatildeo eacute a infecccedilatildeo por HPV-6 ou 11 considerados

subtipos de baixo risco Os subtipos de alto risco mais recorrentes satildeo o 16 e o 18 que

estatildeo relacionados ao carcinoma invasor do colo de uacutetero de pecircnis de pele A ciecircncia tem

avanccedilado e tem trazido inuacutemeros meacutetodos de detecccedilatildeo atraveacutes da biologia molecular tais

como captura hiacutebrida PCR southern blotting hibridizaccedilatildeo in situ

Sumaacuterio 1- INTRODUCcedilAtildeO 06

11- O QUE SAtildeO OS VIacuteRUS06

12- ESTRUTURA GERAL E ELEMENTOS BAacuteSICOS DA PARTIacuteCULA VIRAL07

13- CLASSIFICACcedilAtildeO E CATEGORIA DOS VIacuteRUS09 14- FORMAS DE INFECCcedilAtildeO NO ORGANISMO HUMANO10 15- REPLICACcedilAtildeO VIRAL12 16- MUTACcedilAtildeO VIRAL17 17- RECOMBINACcedilAtildeO VIRAL19

2- O PAPILOMA VIacuteRUS HUMANO - HPV 21

21- HISTOacuteRICO21

22- CARACTERIacuteSTICAS BIOLOacuteGICAS DO HPV23

23- EPIDEMIOLOGIA E FORMAS DE INFECCcedilAtildeO PELO HPV24 24- ESTRUTURA REPLICACcedilAtildeO E GENOMA VIRAL25 25- CLASSIFICACcedilAtildeO E TIPOS DE HPV29 26- MEacuteTODOS DE DETECCcedilAtildeO DO HPV32

261- PAPANICOLAU COLPOSCOPIA E PENISCOPIA32

262- TEacuteCNICA DE IMUNOHISTOQUIacuteMICA33

263- TEacuteCNICA SOUTHERN BLOTTING34

264- TEacuteCNICA DE HIBRIDIZACcedilAtildeO IN SITU34

265- TEacuteCNICA DE CAPTURA HIacuteBRIDA35

266- TEacuteCNICA PCR - REACcedilAtildeO EM CADEIA DE POLIMERASE35

3- RELACcedilAtildeO EXISTENTE ENTRE O HPV E AS DOENCcedilAS36

31- HPV E O CAcircNCER DE COLO UTERINO37

32- HPV E O CAcircNCER DE PEcircNIS39

33- HPV E O CAcircNCER DE PELE39 34- PAPILOMA ESCAMOSO DE ESOcircFAGO40 35- MECANISMOS DE INTERACcedilAtildeO HPV x HIV41

4- DOS AVANCcedilOS DA CIEcircNCIA43

1- Introduccedilatildeo

O papel dos viacuterus na histoacuteria da humanidade remonta aos registros preacute-

histoacutericos Evidecircncias de foacutesseis encontrados sugerem que formas de vida existem no

planeta haacute pelo menos 35 bilhotildees de anos A interpretaccedilatildeo de foacutesseis de primatas

considerados Homo sapiens caracteriza que naquela eacutepoca jaacute existiam doenccedilas virais

Quadros semelhantes ao da variacuteola foram encontrados e registrados em muacutemias

egiacutepcias (Couceiro 2001)

Hipoacutecrates (460-377 aC) registrou ocorrecircncias de viacuterus da caxumba e

possivelmente de influenza na ilha de Thasos Acredita-se que possivelmente as

primeiras tentativas registradas de controle de uma doenccedila viral foi na China no

seacuteculo XI onde curandeiros inoculavam extratos de puacutestula de variacuteola em crianccedilas

(Couceiro 2001)

11- O que satildeo os viacuterus

Veneno assim eacute traduzido do latim a palavra ldquoviacuterusrdquo Microrganismos sem

metabolismo independente constituiacutedo de corpo denominado viacuterion Numa tentativa de

definiccedilatildeo afirma-se que ldquoviacuterus satildeo partiacuteculas com estruturas caracteriacutesticas passiacuteveis de

subsistirem extracelularmente e formadas por complexos bioloacutegicos dotados de

informaccedilotildees geneacuteticas elementares Os viacuterus possuem a capacidade de adentrar ceacutelulas

vivas alterando-lhes os processos metaboacutelicos normais com a finalidade de recodificaacute-

las para sua proacutepria replicaccedilatildeordquo (Soares 1993 D Falke 1979)

Eacute reconhecido como forma extracelular do viacuterus a fase em que ele se encontra

simplesmente estaacutetico completamente inerte quando fora de ceacutelulas vivas porque os

viacuterus satildeo organismosparasitas intracelulares obrigatoacuterios que natildeo conseguem de

forma alguma se replicar fora da ceacutelula (Murray et al 1994 Falke 1979 Soares

1993)

No meio extracelular por demasiado tempo chega a ser comparado a um cristal

por isso natildeo pertencem agrave nenhum dos cinco reinos dos seres vivos existindo

controveacutersias em torno de sua existecircncia jaacute que o seu estado dinacircmico soacute eacute atingido no

momento em que se inicia o processo de replicaccedilatildeo no interior da ceacutelula ou seja

quando em contato com o hospedeiro utilizando para se multiplicar no interior da

6

ceacutelula a energia e equipamento quiacutemico da proacutepria ceacutelula hospedeira (Amabis et al

1974 Falke 1979)

12 - Estrutura Geral e Elementos baacutesicos da Partiacutecula Viral

Os viacuterus satildeo partiacuteculas que passam por filtros que reteacutem bacteacuterias por isso satildeo

reconhecidos como partiacuteculas filtraacuteveis Possuem um tamanho entre 20nm e 300nm

Suas estruturas geomeacutetricas satildeo simples e precisas apresentam-se em forma de esferas

bastonetes projeacuteteis e tijolos satildeo constituiacutedos por aacutecidos nucleacuteicos proteiacutenas e lipiacutedios

Satildeo organismos que contecircm apenas um tipo de aacutecido nucleacuteico RNA ou DNA de

acordo com o grupo a que pertencem mas nunca os dois ao mesmo tempo (Levinson et

al 1998 Burnett 1978)

As partiacuteculas virais satildeo compostas por trecircs elementos baacutesicos os aacutecidos

nucleacuteicos - satildeo como portadores de informaccedilatildeo geneacutetica Composto tambeacutem por

propriedades antigecircnicas a capside ou camada protetora dos aacutecidos nucleacuteicos - que eacute de

natureza proteacuteica e tambeacutem pode atuar como antiacutegeno e o envoltoacuterio - que eacute encontrado

em determinados tipos virais envolve a capside externamente como um envelope de

natureza proteacuteica glicoproteacuteica e lipiacutedica e tambeacutem apresenta propriedades antigecircnicas

Em suma o aacutecido eacute recoberto por um invoacutelucro formado por proteiacutenas

denominado capsiacutedeo composto por subunidades chamadas capsocircmeros Cada

capsocircmero consiste de uma ou mais proteiacutenas que visualizadas ao microscoacutepio

apresentam-se como partiacuteculas esfeacutericas algumas vezes com um orifiacutecio central O

arranjo dos capsocircmeros fornece ao viacuterus a sua simetria geomeacutetrica Haacute duas formas de

simetria nos capsiacutedeos virais

bull Icosaeacutedrica - na qual os capsocircmeros satildeo arranjados em 20 triacircngulos que

formam uma figura simeacutetrica com uma forma aproximada de esfera

bull Helicoidal - na qual os capsocircmeros satildeo arranjados em uma estrutura

helicoidal oca que tem a forma de bastatildeo A heacutelice pode ser riacutegida ou

flexiacutevel

As formas icosaeacutedricas e helicoidais podem existir como um nucleocapsiacutedeo nu

ou como uma camada externa de envelope como representado na figura 1 (Levinson et

al 1998)

7

Figura 1 capsocircmero aacutecido nucleacuteico capsiacutedeo matriz proteacuteica nucleocapsiacutedeo

envelope lipiacutedico protuberacircncias de glicoproteiacutenas

Fonte (Levinson et al 1998)

8

13 - Classificaccedilatildeo e Categoria dos Viacuterus

Os viacuterus estatildeo separados por categoria e satildeo classificados por criteacuterios quiacutemicos

e morfoloacutegicos tais como o peso e estrutura molecular dos aacutecidos nucleacuteicos tamanho

simetria e presenccedila ou natildeo de envelope e tambeacutem por tipos de viroses que podem

causar conforme mostrado nos quadros 1 e 2 respectivamente

Quadro 1 ndash Categoria e Classificaccedilatildeo dos viacuterus de DNA e RNA

Famiacutelia do viacuterus Envelope Simetria Tamanho (nm) Estrutura do DNARNA

Parvoviacuterus

Papovaviacuterus

Adenoviacuterus

Hepadnaviacuterus

Herpesviacuterus

Poxviacuterus

Picornaviacuterus

Caliciviacuterus

Reoviacuterus

Flaviviacuterus

Togaviacuterus

Retroviacuterus

Ortomixoviacuterus

Paramixoviacuterus

Rabdoviacuterus

Filoviacuterus

Coronaviacuterus

Arenaviacuterus

Bunyaviacuterus

Deltaviacuterus

Natildeo

Natildeo

Natildeo

Sim

Sim

Sim

Natildeo

Natildeo

Natildeo

Sim

Sim

Sim

Sim

Sim

Sim

Sim

Sim

Sim

Sim

Sim

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Complexa

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

22

55

75

42

1002

250x400

28

38

75

45

60

100

80x120

150

75x180

803

100

80x130

100

37

SS linear

DS circular supertorcido

DS linear

DS circular incompleto

DS linear

DS linear

SS linear natildeo-segmentado


DS linear 10 segmentos



SS linear dois segmentos

SS linear oito segmentos

SS linear natildeo segmentado




SS circular dois segmentos

SS circular trecircs segmentos

SS circular fechado

Fonte (Murray et al 1994)

Viacuterus com aacutecidos nucleacuteicos DNA

SS fita simples DS dupla fita

9

Quadro 2 ndash classificaccedilatildeo e tipos de viroses humanas

Classificaccedilatildeo dos viacuterus Viroses humanas

VIacuteRUS VISCEROTROacutePICOS Febre amarela Hepatite a viacuterus Dengue

VIacuteRUS DERMONEUROTROacutePICOS Encefalite Hidrofobia Poliomielite

VIacuteRUS PNEUMOTROacutePICOS Gripe Resfriado Pneumonia atiacutepica

VIacuteRUS LINFOTROacutePICOS Caxumba Mononucleose infecciosa

Linfo inguinal AIDS

VIacuteRUS DERMOTROacutePICOS Sarampo Rubeacuteola Variacuteola Varicela

Catapora

VIacuteRUS EPIDERMOTROacutePICOS Molluscum contagiosum verrugas

Fonte (Soares 1993)

14 ndash Formas de Infecccedilatildeo no Organismo Humano

Os viacuterus satildeo transmitidos por contato direto incluindo o contato sexual injeccedilatildeo

com liacutequidos contaminados sangue ou transplante de oacutergatildeos vias respiratoacuterias e

orofecal A via de transmissatildeo depende da fonte do viacuterus do local tecidual de replicaccedilatildeo

e secreccedilatildeo viral depende da capacidade do viacuterus de resistir agraves condiccedilotildees desfavoraacuteveis

do ambiente e do organismo durante o seu trajeto ateacute o tecido-alvo (Murray et al 1994

Burnett 1978)

Apesar da pele ser uma excelente barreira contra infecccedilatildeo e contar com proteccedilatildeo

especiacutefica para os orifiacutecios do corpo tais como laacutegrimas muco epiteacutelio ciliado aacutecido

gaacutestrico bile e imunoglobulina A os viacuterus penetram no organismo humano atraveacutes de

soluccedilotildees de continuidade1 na proacutepria pele ou atraveacutes das membranas mucoepiteliais que

revestem os orifiacutecios do corpo olhos vias respiratoacuterias boca genitaacutelia e trato

gastrointestinal sendo que a forma mais comum de infecccedilatildeo viral sem duacutevida eacute a

inalaccedilatildeo (Murray et al 1994 Levinson et al 1998)

1 Lesatildeo Ferida aberta na pele

10

Assim que penetram no organismo os viacuterus sofrem replicaccedilatildeo em ceacutelulas que

expressam receptores virais e que possuem o equipamento biossinteacutetico apropriado O

viacuterus pode replicar-se e permanecer em siacutetio primaacuterio ou pode trilhar outros caminhos

bull Disseminar-se para outros tecidos atraveacutes da corrente sanguumliacutenea

bull Disseminar-se atraveacutes do sistema mononuclear-fagociacutetico e linfaacutetico

bull sofrer disseminaccedilatildeo atraveacutes dos neurocircnios

O transporte do viacuterus no sangue eacute conhecido como viremia As vias

predominantes de transferecircncia viral no organismo satildeo a corrente sanguumliacutenea e o sistema

linfaacutetico O viacuterus tambeacutem pode ter acesso a ambos apoacutes lesatildeo tecidual atraveacutes do

processo da fagocitose ou em decorrecircncia de mecanismos de transporte ativo Muitos

viacuterus podem ser transportados por entre as ceacutelulas mucoepiteliais da orofaringe trato

gastrointestinal vagina e acircnus Murray e colaboradores (1994) explicam que ldquoo viacuterus

pode estar livre no plasma ou associado agrave ceacutelulas nos linfoacutecitos ou macroacutefagos Os viacuterus

capturados por macroacutefagos fagociacuteticos podem ser inativados podem replicar-se ou

podem ser liberados em outros tecidos atraveacutes do sistema mononuclear fagociacutetico

(exemplo linfonodos baccedilo fiacutegado outros tecidos)rdquo Eacute agrave partir desse ponto da

replicaccedilatildeo viral nos macroacutefagos que pode acontecer o que se chama de viremia

secundaacuteria que eacute basicamente a amplificaccedilatildeo da infecccedilatildeo jaacute que esta replicaccedilatildeo

envolve o revestimento endotelial dos vasos sanguumliacuteneos ou o fiacutegado

Aleacutem da corrente sanguumliacutenea os viacuterus tambeacutem podem chegar ao ceacuterebro ou ao

sistema nervoso central atraveacutes das meninges e liacutequido cefalorraquidiano infectado

migraccedilatildeo de macroacutefagos infectados ou por infecccedilatildeo dos neurocircnios perifeacutericos e

sensoriais (olfativos) O revestimento celular endotelial quando infectado pelo viacuterus

contido no sangue pode sofrer uma ruptura sair dos vasos sanguumliacuteneos atravessar a

barreira hematoencefaacutelica e infectar o sistema nervoso central (Murray et al 1994

Levinson et al 1998 Burnett 1978)

11

15 - Replicaccedilatildeo Viral

Atraveacutes dos processos anaboacutelicos de uma ceacutelula hospedeira acontece a

replicaccedilatildeo viral A partiacutecula invasora fornece instruccedilotildees especiacuteficas para construccedilatildeo

como se fosse um programa de siacutentese onde as instruccedilotildees que satildeo em forma de aacutecidos

nucleacuteicos que satildeo utilizados para codificar sua auto-replicaccedilatildeo O processo de

multiplicaccedilatildeo na verdade eacute executado por uma ceacutelula hospedeira a replicaccedilatildeo jamais se

daraacute pela simples multiplicaccedilatildeo de uma partiacutecula invasora (Levinson et al 1998

Alberts et al 1997)

A reproduccedilatildeo dos viacuterus eacute composta por uma fase replicativa inicial onde se

juntam todos os componentes que se fazem necessaacuterios para a formaccedilatildeo de novas

partiacuteculas virais Mais tarde estes componentes se unem em uma fase chamada de

montagem ou sincronizaccedilatildeo das fases de siacutentese (Levinson et al 1998 Murray et al

1994)

A unidade elementar infectante do viacuterus eacute o viacuterion Satildeo considerados como

partiacuteculas incompletas (natildeo maduras) os produtos intermediaacuterios do processo de siacutentese

viral que termina com a liberaccedilatildeo do viacuterion ou o excedente de tais produtos que

podem ocorrer em algumas fases da siacutentese viral (Falke 1979)

Resumindo existe praticamente uma ordem cronoloacutegica de acontecimentos

dentro da replicaccedilatildeo viral primeiro acontece os eventos precoces - ligaccedilatildeo penetraccedilatildeo

e desnudamento depois os eventos intermediaacuterios - expressatildeo gecircnica e replicaccedilatildeo do

genoma e por uacuteltimo os eventos tardios - montagem e liberaccedilatildeo

As partiacuteculas virais penetram na ceacutelula apoacutes serem envolvidas em uma vesiacutecula

pinociacutetica onde inicia o desnudamento Este desnudamento do genoma viral nada mais

eacute do que o momento em que ocorre a remoccedilatildeo das proteiacutenas do capsiacutedeo liberando o

genoma Eacute o baixo pH na vesiacutecula pinociacutetica que favorece o desnudamento A ruptura

da vesiacutecula ou a fusatildeo da camada exterior do viacuterus com a membrana da vesiacutecula faz

com que o cerne do viacuterus penetre o citoplasma (Levinson et al 1998)

Logo apoacutes o desnudamento viral ocorre os chamados eventos precoces que eacute o

momento em que o mRNA e as proteiacutenas precoces (enzimas necessaacuterias para a

replicaccedilatildeo do genoma viral) satildeo sintetizadas As proteiacutenas na superfiacutecie do viacuterion

ligam-se a proteiacutenas receptoras especiacuteficas na superfiacutecie celular por ligaccedilotildees fracas natildeo-

covalentes Esta especificidade determina o espectro de hospedeiro do viacuterus porque

12

alguns viacuterus satildeo restritos enquanto outros satildeo muito amplos com relaccedilatildeo a hospedeiros

as diferenccedilas de siacutentese de RNA tais como fita simples fita dupla polaridade positiva

ou negativa explicam porque o aacutecido nucleacuteico purificado eacute infectivo e pode driblar o

espectro de especificidade de hospedeiro determinado pela interaccedilatildeo proteiacutena viral-

receptor celular Todos os viacuterus satildeo infectivos mas nem todo RNA ou DNA viral

purificado eacute infectivo (Levinson et al 1998 Albert et al 1997 )

Na realidade o primeiro passo na expressatildeo gecircnica viral eacute a siacutentese de mRNA Eacute

neste ponto que o viacuterus pode seguir diferentes caminhos dependendo da natureza de seu

aacutecido nucleacuteico e do local onde ocorreraacute a replicaccedilatildeo viral intracelular

Uma vez que o mRNA de um viacuterus DNA ou RNA eacute sintetizado este eacute traduzido

em proteiacutenas virais por ribossomos da ceacutelula hospedeira algumas da quais satildeo as

proteiacutenas precoces necessaacuterias para a replicaccedilatildeo do genoma viral A mais importante de

todas as proteiacutenas precoces em muitos viacuterus de RNA eacute a polimerase que sintetizaraacute

diversas coacutepias do material geneacutetico para as partiacuteculas da progecircnie do viacuterus Natildeo

importa como o viacuterus faz o seu mRNA quase todos os viacuterus produzem uma polimerase

codificada pelo viacuterus (uma replicase) que replica o genoma isto eacute produz muitas coacutepias

do genoma parental que por sua vez vai ser o genoma da progecircnie A replicaccedilatildeo do

genoma viral segue o princiacutepio da complementariedade a qual requer que uma fita com

uma sequumlecircncia de bases complementares seja sintetizada esta fita entatildeo serviraacute como

molde para a siacutentese do genoma viral (Murray et al 1994 Levinson et al 1998)

Agrave medida que a replicaccedilatildeo do genoma viral acontece (figura 2) as proteiacutenas

estruturais do capsiacutedeo a serem usadas na progecircnie satildeo sintetizadas ou seja agora em

uma segunda etapa o mRNA e as proteiacutenas tardias satildeo sintetizadas (as proteiacutenas tardias

satildeo proteiacutenas estruturais e do capsiacutedeo) e em alguns casos os genomas virais receacutem-

replicados podem servir como moldes para o mRNA tardio fazer as proteiacutenas capsiacutedicas

(Levinson et al 1998)

13

Figura 2 Esquema do ciclo replicativo viral de um Adenoviacuterus Fonte (Levinson et al 1998)

O DNA viral replica no nuacutecleo e usa a RNA polimerase DNA dependente

necessitando da ceacutelula hospedeira para sintetizar seu proacuteprio mRNA O DNA genocircmico

de fita simples eacute convertido em dupla fita pela DNA-polimerase da ceacutelula hospedeira

Uma DNA polimerase codificada pelo viacuterus sintetiza o DNA da progecircnie Com exceccedilatildeo

do parvoviacuterus todos os viacuterus de DNA codificam sua proacutepria DNA polimerase que

replica o genoma Eles natildeo usam a DNA polimerase da ceacutelula hospedeira Os poxviacuterus

satildeo exceccedilatildeo porque replicam-se no citoplasma onde natildeo tem acesso a RNA polimerase

da ceacutelula hospedeira Eles portanto transportam sua proacutepria polimerase na partiacutecula

viral O genoma de todos os viacuterus de DNA consiste de DNA dupla fita exceto os

parvoviacuterus que possuem um genoma de DNA de fita simples Com relaccedilatildeo ao viacuterus de

14

RNA eles replicam-se no citoplasma A exceccedilatildeo eacute o viacuterus influenza onde grande parte

da replicaccedilatildeo ocorre no nuacutecleo o RNA genocircmico eacute sintetizado neste local entretanto a

finalizaccedilatildeo da replicaccedilatildeo ocorre no citoplasma (Levinson et al 1998 Alberts et al

1997)

Apoacutes a replicaccedilatildeo do material geneacutetico e associaccedilatildeo com novas proteiacutenas

capsiacutedicas os viacuterions satildeo formados e liberados da ceacutelula A chamada fase de montagem

eacute quando as partiacuteculas da progecircnie satildeo montadas pelo empacotamento do aacutecido nucleacuteico

viral nas proteiacutenas do capsiacutedeo

As partiacuteculas virais satildeo liberadas da ceacutelula por dois processos Um eacute pela ruptura

da membrana celular e pela liberaccedilatildeo de partiacuteculas maduras isto ocorre frequumlentemente

com viacuterus sem envelope O outro que ocorre em viacuterus com envelope eacute a liberaccedilatildeo do

viacuterus por brotamento atraveacutes da membrana celular externa O processo de brotamento

inicia quando as proteiacutenas especiacuteficas do viacuterus satildeo inseridas na membrana celular em

locais especiacuteficos (Levinson et al 1998)

O nucleocapsiacutedeo viral interage com siacutetios especiacuteficos na membrana mediado

pela proteiacutena de matriz A membrana celular se evagina nesses locais e partiacuteculas com

envelope brotam da membrana O brotamento frequumlente natildeo causa dano a ceacutelula e em

certas ocasiotildees a ceacutelula sobrevive enquanto produz um grande nuacutemero de partiacuteculas

virais (Murray et al 1994)

Existem quatro aspectos interessantes do mRNA viral e sua expressatildeo em

ceacutelulas eucarioacuteticas

Os mRNAs virais tem trecircs atributos em comum com os mRNAs na extremidade

5rsquo haacute um capacete que eacute uma guanina metilada no nitrogecircnio da posiccedilatildeo 7 que

servem para dar maior estabilidade agrave moleacutecula de mRNA (transcrito primaacuterio) o qual eacute

ligado por uma ponte invertida (3rsquopara 5rsquo) ao inveacutes da ligaccedilatildeo 5rsquo para 3rsquo no final 3rsquo haacute

uma cauda de 100-200 resiacuteduos de adenosina [poli(A)] e o mRNA eacute gerado pelo

processamento de um grande transcrito do genoma Na verdade essas trecircs modificaccedilotildees

foram primeiro observadas em estudos dos mRNAs virais e entatildeo aplicadas aos RNAs

celulares

Alguns viacuterus usam seu material geneacutetico completo produzindo mais de um tipo

de mRNA da mesma porccedilatildeo do DNA pela mudanccedila da janela leitura Isto eacute feito pelo

iniacutecio da transcriccedilatildeo a uma ou duas bases apoacutes o siacutetio de iniciaccedilatildeo original (Falke

1979 Murray et al 1994 Levinson et al 1998)

15

Em alguns viacuterus de DNA haacute um controle temporal sob a regiatildeo do genoma que

eacute transcrito em mRNA Durante os estaacutegios iniciais do ciclo replicativo antes do iniacutecio

da replicaccedilatildeo do DNA somente as regiotildees iniciais do genoma satildeo transcritas e

portanto somente certas proteiacutenas precoces satildeo produzidas uma das proteiacutenas precoces

e uma repressora dos genes tardios isto previne a transcriccedilatildeo ateacute o momento apropriado


Existem trecircs processos diferentes que satildeo usados para gerar um mRNA

monocistrocircnico2 que codificaraacute uma uacutenica proteiacutena do genoma viral policistrocircnico3

bull 1 - mRNA individuais satildeo transcritos pelo iniacutecio em muitos pontos de iniciaccedilatildeo

diferentes ao longo do genoma que eacute o mesmo mecanismo usado pelas ceacutelulas

eucarioacuteticas e por herpeviacuterus adenoviacuterus e viacuterus tumorais de RNA e DNA

bull 2 ndash Nos retroviacuterus e viacuterus influenza o genoma eacute segmentado em muacuteltiplos

fragmentos e cada um codifica para um uacutenico mRNA

bull 3 ndash N- polioviacuterus RNA genocircmico inteiro eacute traduzido em um longo polipeptiacutedeo o

qual eacute entatildeo clivado por uma protease nas proteiacutenas especiacuteficas (Murray et al

1994)

Os viacuterus causam doenccedilas quando transpotildeem as barreiras protetoras naturais do

organismo escapam do controle imunoloacutegico e matam ceacutelulas de um tecido importante

(por exemplo ceacuterebro) ou deflagram uma resposta imune e inflamatoacuteria destrutiva A

evoluccedilatildeo de uma infecccedilatildeo viral pode possuir trecircs tipos potenciais abortiva ( fracasso da

infecccedilatildeo) liacutetica (morte celular) e persistente (sem morte celular) e eacute determinada pela

natureza da interaccedilatildeo entre viacuterus e hospedeiro e pela resposta do hospedeiro agrave

infecccedilatildeo A replicaccedilatildeo do viacuterus pode iniciar alteraccedilotildees nas ceacutelulas resultando em

citoacutelise ou em alteraccedilotildees na aparecircncia propriedades funcionais ou antigecircnicidade da

ceacutelula Os efeitos sobre a ceacutelula podem resultar do controle da siacutentese macromolecular

assumido pelo viacuterus do acuacutemulo de proteiacutenas ou partiacuteculas virais ou de uma

modificaccedilatildeo ou ruptura das estruturas celulares (Murray et al 1994 Levinson et al

1998)

2 Mono (hum) ciacutestron (unidade fisioloacutegica do DNA que corresponde agrave menor porccedilatildeo do mesmo capaz de codificar uma cadeia polipeptiacutedica completa) 3 Poli (vaacuterios) ciacutestron

16

16 ndash Mutaccedilatildeo Viral

As mutaccedilotildees podem ser causadas por substacircncias quiacutemicas radiaccedilotildees ou viacuterus

Certos viacuterus como o viacuterus bacteriano Mu (bacterioacutefago mutagecircnico) causam uma

frequecircncia alta de mutaccedilotildees quando seu DNA eacute inserido no cromossomo bacteriano

Devido a esse fato do DNA do viacuterus bacteriano poder ser inserido em muitos siacutetios

diferentes mutaccedilotildees em vaacuterios genes bacterianos podem ocorrer Essa mutaccedilotildees satildeo

frameshift ou deleccedilotildees (Alberts et al 1997 Murray et al 1994 )

As mutaccedilotildees no DNA e RNA viral ocorrem como no caso das bacteacuterias pelo

processo de substituiccedilatildeo de bases deleccedilatildeo e mudanccedila de fases de leitura Uma mutaccedilatildeo

eacute uma alteraccedilatildeo na sequecircncia de bases do DNA que normalmente resulta na inserccedilatildeo de

um aminoaacutecido diferente em uma proteiacutena e no aparecimento de um fenoacutetipo alterado

Essas mutaccedilotildees resultam de trecircs tipos de alteraccedilotildees moleculares

Substituiccedilatildeo de bases ocorre quando uma base eacute substituiacuteda por outra Acontece no

momento da replicaccedilatildeo devido a erros introduzidos pela DNA polimerase ou a accedilatildeo de

um agente mutagecircnico que altera as partes de hidrogecircnio de uma fita que estaacute sendo

utilizada como molde de tal forma que uma base errada eacute incorporada Resulta em

mutaccedilatildeo missense (um coacutedon4 que simplesmente causa a substituiccedilatildeo por um

aminoaacutecido diferente) ou mutaccedilatildeo nonsense (um coacutedon de terminaccedilatildeo que determina o

final da siacutentese proteacuteica prematuramente)

Frameshift ocorre quando um ou mais pares de bases satildeo adicionados ou deletados o

que altera a fase de leitura no ribossomo resultando na incorporaccedilatildeo de aminoaacutecidos

errados a partir deste ponto de mutaccedilatildeo e na produccedilatildeo de uma proteiacutena inativa

Transposiccedilatildeo ou sequecircncia de inserccedilatildeo tipo de mutaccedilatildeo que ocorre quando transposiccedilatildeo

ou sequecircncia de inserccedilatildeo satildeo integradas no DNA Os novos segmentos de DNA

inseridos podem acarretar profundas mudanccedilas nos genes localizados no ponto de

inserccedilatildeo e nos genes adjacentes (Murray et al 1994 Alberts et al 1997)

4 Cada conjunto de 3 nucleotiacutedeos que se fazem identificar por suas bases nitrogenadas puriacutenicas ou pirimidiacutemicas no RNAm Cada coacutedon do RNAm deve ser complementado depois por um anticoacutedon de um RNAt na ocasiatildeo da siacutentese proteacuteica ndash fenocircmeno do coacutedigo geneacutetico

17

As mutaccedilotildees condicionais5 letais satildeo extremamente valiosas na determinaccedilatildeo da

funccedilatildeo dos genes virais Funcionam normalmente sob condiccedilotildees permissivas mas

falham ao replicar ou ao expressar um gene mutante sob condiccedilotildees restritivas Os

mutantes condicionais letais sensiacuteveis agrave temperatura expressam seu fenoacutetipo a baixas

temperaturas (permissiva) mas em altas temperaturas (restritivas) o produto do gene

mutante eacute inativo O mutante sensiacutevel agrave temperatura do viacuterus do sarcoma Rous pode em

temperaturas permissivas de 37 0C transformar ceacutelulas normais em ceacutelulas malignas

Quando as ceacutelulas transformadas crescem em temperaturas restritivas de 410C o

fenoacutetipo reverte agrave aparecircncia e comportamento normais O fenoacutetipo maligno eacute restaurado

quando a temperatura permissiva eacute restaurada (Alberts et al 1997 Murray et al 1994)

Alguns mutantes por deleccedilatildeo tem a prioridade incomum de serem partiacuteculas

interferentes defectivas Satildeo defectivas porque podem replicar-se a menos que a funccedilatildeo

deletada seja substituiacuteda por um viacuterus auxiliar Esses mutantes tambeacutem alteram no

crescimento dos viacuterus normais se eles infectarem primeiro e esgotarem as funccedilotildees

celulares necessaacuterias Estas partiacuteculas defectivas podem ter uma funccedilatildeo na recuperaccedilatildeo

de infecccedilotildees virais pois podem intervir com a produccedilatildeo da progecircnie do viacuterus limitando

a difusatildeo dos viacuterus para as outras ceacutelulas (Levinson et al 1998 Alberts et al 1997)

Existem dois tipos de mutantes considerados de maior interesse cientiacutefico as

mutaccedilotildees variantes antigecircnicas como aquelas que ocorrem frequumlentemente com o viacuterus

influenza que apresentam alteraccedilotildees nas proteiacutenas de superfiacutecie e portanto natildeo podem

mais ser inibidos pelos anticorpos preacute-existentes no hospedeiro proporcionando que a

variante cause doenccedila enquanto que a linhagem original natildeo o faz O outro tipo satildeo os

mutantes resistentes a drogas que satildeo insensiacuteveis agraves drogas antivirais porque o alvo da

droga que eacute uma enzima antiviral foi modificada (Levinson et al 1998 Murray et al

1994 )

5 A palavra ldquocondicionalrdquo indica que a mutaccedilatildeo eacute expressa apenas em determinadas condiccedilotildees As mutaccedilotildees condicionais letais mais importantes satildeo sensiacuteveis agrave temperatura e podem resultar em vacinas uacuteteis

18

17ndash Recombinaccedilatildeo Viral

Recombinaccedilatildeo eacute um termo utilizado para descrever uma troca de material

geneacutetico entre cromossomos que resulta num rearranjo de genes diferentes do original

Na recombinaccedilatildeo viral quando dois viacuterus geneticamente distintos infectam uma ceacutelula

podem ocorrer trecircs tipos de fenocircmenos recombinaccedilatildeo complementaccedilatildeo ou mistura

fenoacutetipa (Murray et al 1994 Levinson et al 1998 Alberts et al 1997)

A recombinaccedilatildeo eacute a troca de genes entre dois cromossomos baseada no

entrecruzamento dentro de regiotildees com significante homologia de sequumlecircncia de bases A

recombinaccedilatildeo pode ser facilmente demonstrada para viacuterus que possuem DNA de dupla

fita com material geneacutetico e tem sido usada para determinar seu mapa geneacutetico

Entretanto recombinaccedilatildeo por viacuterus de RNA ocorre em baixa frequumlecircncia Rearranjo eacute o

termo usado quando viacuterus com genoma segmentado como o viacuterus influenza troca

segmentos resultando em trocas gecircnicas mais frequumlentes do que a recombinaccedilatildeo O

rearranjo dos segmentos de RNA do viacuterus influenza estaacute envolvido nas principais

mudanccedilas antigecircnicias dos viacuterus responsaacuteveis pelas epidemias recorrentes de influenza

Com Relaccedilatildeo ao DNA uma propriedade importante eacute sua capacidade de sofrer

rearranjos que pode variar uma combinaccedilatildeo particular de genes presentes em um

genoma individual no momento exato e o niacutevel de expressatildeo destes genes Satildeo

reconhecidas duas classes de recombinaccedilatildeo geneacutetica a recombinaccedilatildeo geral que eacute a

troca geneacutetica que ocorre entre qualquer par de sequumlecircncias homoacutelogas de DNA e a

recombinaccedilatildeo siacutetio-especiacutefica que eacute a troca que ocorre entre pequenas sequecircncias de

nucleotiacutedeos especiacuteficos (Alberts et al 1997 Murray et al 1994 Levinson et al

1998)

No caso da complementaccedilatildeo pode ocorrer quando um ou ambos viacuterus que

infectam a ceacutelula apresentam uma mutaccedilatildeo que resulta em uma proteiacutena natildeo-funcional

O viacuterus que natildeo sofreu mutaccedilatildeo ldquocomplementardquo o viacuterus mutado produzindo uma

proteiacutena funcional que serve para ambos A complementaccedilatildeo eacute um meacutetodo importante

pelo qual um viacuterus auxiliar permite a replicaccedilatildeo de viacuterus defectivos Um exemplo de

complementaccedilatildeo clinicamente importante eacute o viacuterus da hepatite B que fornece seu

antiacutegeno de superfiacutecie ao viacuterus dele que eacute defectivo na sua habilidade de produzir sua

proacutepria proteiacutena de capsiacutedeo Este fenocircmeno eacute a base para o teste de complementaccedilatildeo

que pode ser utilizado para determinar como os genes estatildeo presentes no genoma viral

O teste eacute feito para determinar se um viacuterus mutante pode complementar outro viacuterus

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mutante Se for possiacutevel as duas mutaccedilotildees estatildeo presentes em genes separados porque

produzem proteiacutenas complementares diferentes Se natildeo for possiacutevel as duas mutaccedilotildees

estatildeo no mesmo gene e ambas proteiacutenas satildeo funcionais Realizando vaacuterios desses testes

com diferentes mutaccedilotildees eacute possiacutevel determinar os domiacutenios funcionais dos grupos de

complementaccedilatildeo que correspondem aos genes Controles apropriados satildeo necessaacuterios

para evidenciar os efeitos da recombinaccedilatildeo (Murray et al 1994)

A mistura fenotiacutepica eacute quando o genoma de um viacuterus pode ser recoberto com as

proteiacutenas da superfiacutecie de outro viacuterus Este viacuterus fenotiacutepicamente misturado pode

infectar ceacutelulas como determinado pela proteiacutena de revestimento do segundo viacuterus

Entretanto a progecircnie desta infecccedilatildeo teraacute proteiacutena de revestimento do tipo do primeiro

viacuterus que eacute codificada somente pelo material geneacutetico do primeiro viacuterus Podemos citar

como exemplo de mistura fenotiacutepica os pseudotipos o qual consiste do nucleocapsiacutedeo

de um viacuterus e do envelope do outro Pseudotipos compostos do nucleocapsiacutedeo do viacuterus

da estomatite vesicular que eacute um rabdoviacuterus e do envelope do viacuterus da

imunodeficiecircncia humana ndash HIV que eacute um retroviacuterus estatildeo sendo usados para estudar a

resposta imune ao HIV (Murray et al 1994)

20

20 - O PAPILOMA VIacuteRUS HUMANO - HPV

21- Histoacuterico

Papiloma viacuterus humano (HPV) eacute um viacuterus que pertence agrave categoria papovaviacuterus

famiacutelia papovaviridae Eacute conhecido e descrito haacute milecircnios por gregos e romanos como

sendo verrugas genitais Em 1879 chegou-se a relacionar o HPV com a siacutefilis ou

gonorreacuteia jaacute que acreditava-se numa etiologia comum para as doenccedilas sexualmente

transmissiacuteveis ldquoveneno veneacutereordquo (Meisels et al 1981 Pires amp Gouvecirca 2001)

Ainda no seacuteculo XIX acreditava-se que as lesotildees provocadas pelo HPV eram

causadas por irritaccedilatildeo do epiteacutelio por descargas genitais sujeira e outros agentes e esta

ideacuteia foi aceita ateacute o iniacutecio do seacuteculo XX (Oriel 1971 Pires amp Gouvecirca 2001) Nesta

mesma eacutepoca chegaram a relacionar as verrugas genitais com as natildeo-genitais o que foi

chamada de ldquoteoria unitaacuteriardquo devido agraves evidencias histoloacutegicas de que normalmente

pacientes com verrugas genitais tambeacutem apresentavam verrugas natildeo genitais Fizeram

experimentos com extratos de verrugas penianas onde as mesmas foram inoculadas na

pele de outras aacutereas do corpo e ocasionaram o desenvolvimento nos siacutetios inoculados

de verrugas planas ou comuns Foram estes experimentos que estabeleceram uma

etiologia viroacutetica para as verrugas mas sem contestar a ldquoteoria unitaacuteriardquo e sem levar em

consideraccedilatildeo a alta frequecircncia da transmissatildeo sexual das verrugas genitais

diferentemente dos outros tipos de verrugas

Agrave partir de 1949 a etiologia viroacutetica das verrugas natildeo genitais foi comprovada

por vaacuterios autores atraveacutes da identificaccedilatildeo de partiacuteculas viroacuteticas esfeacutericas

intranucleares nas camadas mais superficiais de epiderme com auxiacutelio da microscopia

eleacutetrocircnica As informaccedilotildees eram conflitantes sendo de etiologia viroacutetica incerta ateacute que

em 1970 Oriel amp Almeida identificaram partiacuteculas viroacuteticas esfeacutericas intranucleares

semelhantes agraves da verruga vulgar em 13 dentre 25 verrugas genitais examinadas (Pires

amp Gouvecirca 2001)

Concluiu-se em 1954 atraveacutes de estudos epidemioloacutegicos que as verrugas eram

doenccedila veneacuterea de etiologia viroacutetica independente das verrugas natildeo genitais Isso foi

possiacutevel devido a observaccedilatildeo de que em um periacuteodo de quatro a seis semanas apoacutes os

soldados veteranos voltarem da guerra da Coreacuteia e Japatildeo suas mulheres teriam

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aparecido infectadas com as mesmas verrugas penianas que estes apresentavam (Oriel

1971 Pires amp Gouvecirca 2001)

Em 1978 conseguiu-se definir a presenccedila de partiacuteculas morfologicamente

idecircnticas ao HPV em ceacutelulas infectadas agrave partir do estudo de esfregaccedilos e cortes

histoloacutegicos de lesotildees condilomatosas mas a presenccedila do HPV soacute ocorreu em 1980

atraveacutes da identificaccedilatildeo de antiacutegenos pela teacutecnica peroxidase-antiperoxidase

Meisels e colaboradores (1981) ao correlacionarem os achados citopatoloacutegicos

colposcoacutepicos e histopatoloacutegicos de lesotildees condilomatosas da ceacutervice e vagina de

pacientes com diagnoacutestico citopatoloacutegico preacutevio de lesatildeo condilomatosa obtiveram uma

discrepacircncia entre os achados Foi neste ponto que se descreveu a lesatildeo da infecccedilatildeo

subcliacutenica pelo HPV clinicamente menos evidente que o condiloma acuminado

portanto pouco visiacutevel a olho nu e colposcopicamente discreta mas que

citologicamente exibia as mesmas caracteriacutescas da lesatildeo da infecccedilatildeo cliacutenica (Pires amp

Gouvecirca 2001)

A identificaccedilatildeo do HPV atraveacutes de meacutetodos de imuno-histoquiacutemica e

microscopia eletrocircnica natildeo elucidou a origem da coilocitose (vacuolizaccedilatildeo perinuclear

acompanhada de hipercromasia e aumento do volume nuclear) somente demonstrou

relaccedilatildeo entre os dois (Pires amp Gouvecirca 2001)

Atualmente se sabe que o HPV eacute um viacuterus com mais de 70 tipos identificados

alguns responsaacuteveis por verrugas vulgares outros por verrugas anogenitais e ainda

papilomas da nasofaringe (Murray et al 1994 Pires amp Gouvecirca 2001)

Sabe-se que a infecccedilatildeo por HPV eacute capaz de causar infecccedilotildees liacuteticas crocircnicas

latentes e transformadoras dependendo da ceacutelula hospedeira Pode causar doenccedilas

como o cacircncer de colo de uacutetero cacircncer de pecircnis cacircncer de pele papiloma escamoso do

esocircfago aleacutem de ser uma porta aberta para infecccedilatildeo pelo viacuterus HIV

22

22 ndash Caracteriacutesticas Bioloacutegicas do HPV

A caracteriacutestica mais especiacutefica do HPV eacute que o genoma viral eacute preservado

como DNA epissomal que natildeo eacute integrado ao genoma hoacutespede na maioria dos tumores

benignos de HPV A capacidade epissomal torna o HPV um vetor de terapia geneacutetica

um vetor que jaacute foi testado em camundongos e pode ser experimentado em humanos A

infecccedilatildeo subcliacutenica por papilomaviacuterus eacute o tipo de HPV que aparenta ser menos

prejudicial poreacutem o que apresenta o pior prognoacutestico (Pires amp Gouvecirca 2001)

Verrugas planas invisiacuteveis macroscopicamente frequumlentemente podem se tornar

neoplaacutesicas costumam surgir na mucosa genital ou na superfiacutecie da pele e nos casos de

tumores malignos de HPV constantemente detecta-se que o DNA viral estaacute integrado

(Carvalho et al 2000)

Uma verruga ou tumoraccedilatildeo benigna eacute a manifestaccedilatildeo patoloacutegica da infecccedilatildeo por

HPV Essas manifestaccedilotildees agraves vezes progridem para uma condiccedilatildeo maligna portanto o

HPV eacute um bom modelo para o estudo da progressatildeo de tumores Os viacuterions do HPV

infectam as ceacutelulas epideacutermicas germinais na camada celular basal Essas ceacutelulas natildeo

permitem a replicaccedilatildeo do HPV Agrave medida que as ceacutelulas germinais se dividem e se

deslocam para a superfiacutecie elas disseminam o viacuterus a todas as ceacutelulas irmatildes Essas

ceacutelulas se transformam e proliferam de forma displaacutesica Essa camada celular fica mais

grossa e cada ceacutelula passa a ficar vacuolizada tomando uma aparecircncia claacutessica de

verruga poreacutem a aparecircncia de uma verruga deve-se agrave proliferaccedilatildeo de ceacutelulas e natildeo agrave

destruiccedilatildeo de ceacutelulas (Neto 1999)

Agrave medida que as ceacutelulas infectadas passam por um processo de diferenciaccedilatildeo e

ceratinizaccedilatildeo elas permitem a replicaccedilatildeo viral Os viacuterions infectivos satildeo agrupados e

liberados por essas ceacutelulas Os viacuterions podem reinfectar as ceacutelulas adjacentes razatildeo pela

qual as verrugas serem contagiosas e aparecerem agrupadas Se vaacuterias ceacutelulas basais

diferentes proacuteximas umas das outras satildeo infectadas suas colocircnias em sobreposiccedilatildeo

adquiriratildeo a aparecircncia de uma verruga em forma de couve-flor (Neto 1999)

23

23 - Epidemiologia e formas de infecccedilatildeo pelo HPV

Atualmente a infecccedilatildeo genital pelo papilomaviacuterus humano (HPV) eacute a doenccedila

sexualmente transmissiacutevel (DST) viral mais frequumlente na populaccedilatildeo sexualmente ativa


O HPV resiste agrave inativaccedilatildeo e pode ser transmitido sexualmente e raramente ateacute

atraveacutes de fomites6 A eliminaccedilatildeo assintomaacutetica do viacuterus pode promover a sua

transmissatildeo As infecccedilotildees por HPV satildeo transmitidas por contato direto e adquiridas

atraveacutes de pequenas soluccedilotildees de continuidade da pele ou mucosa Pode ocorrer

inoculaccedilatildeo durante a relaccedilatildeo sexual durante passagem do receacutem-nascido por um canal

do parto infectado ou em consequumlecircncia da mastigaccedilatildeo de verrugas o que normalmente

eacute um haacutebito infantil (Murray et al 1994 Levinson et al 1998)

As verrugas comuns plantares e planas satildeo mais comuns em crianccedilas e adultos

jovens A menor incidecircncia observada em adultos pode resultar da imunidade adquirida

Ocorrem papilomas lariacutengeos em crianccedilas de baixa idade e adultos de meia-idade


Os papilomas orais e solitaacuterios constituem os tumores epiteliais mais benignos

da cavidade oral satildeo pediculados com uma haste fibrovascular e sua superfiacutecie

geralmente possui aspecto papilar rugoso Podem ocorrer em indiviacuteduos de qualquer

grupo etaacuterio em geral satildeo solitaacuterios e raramente sofrem recidiva apoacutes excisatildeo ciruacutergica

Os papilomas lariacutengeos estatildeo comumente associados aos HPV-6 e HPV-11 e constituem

os tumores epiteliais mais comuns da laringe Entretanto a papilomatose lariacutengea eacute

geralmente considerada uma condiccedilatildeo potencialmente fatal em crianccedilas devido ao risco

de obstruccedilatildeo das vias aeacutereas pelos papilomas Em certas ocasiotildees os papilomas podem

estender-se pela traqueacuteia e atingir os brocircnquios (Murray et al 1994 Carvalho et al

2000)

6 Objetos de qualquer natureza e substacircncias ou materiais natildeo alimentiacutecios que servem para promover contaacutegio de uma doenccedila infecto-contagiosa Compreende desde diminutas partiacuteculas de saliva ldquogotiacuteculas Fluggerdquo ou material das vias aeacutereas expelidas pelo doente ao falar tossir expirrar ateacute roupas iacutentimas toalhas de banho de uso comum contaminados pelo contato dos infectados

24

24 - Estrutura Replicaccedilatildeo e Genoma Viral

O viacuterus papiloma humano possui um genoma de DNA de cadeia dupla

combinado com histonas7 formando um complexo semelhante a um cromossoma

contido num capsiacutedeo externo de proteiacutena viroacutetica Esse capsiacutedeo eacute formado por 72

subunidades (capsocircmeros) com arranjo icosaeacutedrico sendo por este motivo de

aparecircncia esfeacuterica agrave microscopia eletrocircnica (Pires amp Gouvecirca 2001)

O capsiacutedeo icosaeacutedrico dos HPV mede 50 a 55 nm de diacircmetro e consiste em

duas proteiacutenas estruturais que formam os 72 capsocircmeros O genoma do HPV eacute circular

e constitiiacutedo de 7800 a 8000 pares de bases (Pires amp Gouvecirca 2001)

O HPV eacute constituiacutedo por dois tipos de proteiacutena estrutural L1 (proteiacutena maior)

que eacute gecircnero-especiacutefica sendo sua presenccedila correlacionada agrave presenccedila de HPV intacto

nos tecidos que serve como medidor indireto de infectividade e L2 (proteiacutena menor)

que eacute altamente tipo-especiacutefica (Lorincz et al 1992)

O genoma do viacuterus eacute constituiacutedo por dois segmentos principais sendo cada um

desses segmentos constituiacutedos por uma seacuterie de regiotildees ou ORFs (ldquoopening reading

framesrdquo) que codificam as proteiacutenas virais O segmento E (ldquoearlyrdquo) que representa 45

do genoma eacute constituiacutedo por oito ORFs e codifica proteiacutenas relacionadas com

replicaccedilatildeo e controle do genoma O segmento L (ldquolaterdquo) que representa 40 do genoma

eacute responsaacutevel por codificar as proteiacutenas estruturais do capsiacutedeo do viacuterus Entre os

segmentos L e E existe um outro segmento que representa 15 do genoma que conteacutem

elementos regulatoacuterios (Lorincz et al 1992)

O DNA do HPV codifica sete ou oito genes precoces (E1 a E8) dependendo do

viacuterus e dois genes tardios ou estruturais (L1 e L2) e tambeacutem uma origem de transcriccedilatildeo

e replicaccedilatildeo todos localizados em um filamento positivo conforme mostra figura 3

(Lorincz et al 1992 )

7 (histos) tecidos (ona) aumentativo O DNA eucarioacutetico eacute replicado natildeo como um DNA nu mas como uma cromatina onde o DNA eacute complexado a proteiacutenas firmemente ligadas denominadas histonas que formam estruturas em forma de disco em torno das quais o DNA eacute enrolado criando o nucleossomo

25

Figura 3 genoma do papiloma viacuterus humano E1 a E7 e L1 e L2 correspondem aos

genes precoces e genes tardios respectivamente Fonte Link Internet (UCT Departament of Medical Microbiology University of Cape Town)

A replicaccedilatildeo do HPV como visto nos viacuterus em geral depende do equipamento

transcricional da ceacutelula hospedeira O viacuterus permanece latente na forma de plasmiacutedio na

camada basal de ceacutelulas poreacutem replica-se nas ceacutelulas epiteliais em diferenciaccedilatildeo da

pele ou mucosa Os fatores nucleares especiacuteficos expressos nas diferentes camadas e

tipos de pele e mucosa controlam a transcriccedilatildeo dos genes virais e a replicaccedilatildeo dos

genomas (Murray et al 1994 Pires amp Gouvecirca 2001)

26

Em funccedilatildeo do fato do viacuterus depender inteiramente do maquinaacuterio bioloacutegico da

ceacutelula do hospedeiro para se replicar ocorre replicaccedilatildeo epissomal junto com o DNA da

ceacutelula basal mitoticamente ativa A replicaccedilatildeo viral depende do estaacutegio de diferenciaccedilatildeo

das ceacutelulas epiteliais onde eacute persistente na camada basal e ativa nos ceratinoacutecitos8

diferenciados ou seja a replicaccedilatildeo dos viacuterus correlaciona-se com a expressatildeo de

queratinas especiacuteficas (Carvalho et al 2000 Murray et al 1994)

Com a migraccedilatildeo da ceacutelula para a superfiacutecie cessa a multiplicaccedilatildeo celular mas

natildeo a do HPV sendo produzidas milhares de coacutepias por ceacutelula Os genes tardios (ldquolaterdquo)

satildeo expressos nas ceacutelulas escamosas maduras e eacute nelas que se daacute a formaccedilatildeo de

partiacuteculas virais completas (HPV-DNA e proteiacutenas do capsiacutedeo) Eacute isso que forma o

vacuacuteolo do coiloacutecito (produccedilatildeo e saiacuteda do viacuterus com destruiccedilatildeo do citoesqueleto) (Pires


Na fase inicial conhecida com fase de inoculaccedilatildeo o viacuterus penetra no novo

hospedeiro atraveacutes de microtraumatismos Os viacuterions entatildeo progridem ateacute a camada

basal atravessando a membrana citoplasmaacutetica O genoma viral eacute transportado para o

nuacutecleo onde eacute traduzido e transcrito Duas classes de proteiacutenas satildeo codificadas

proteiacutenas transformadoras que induzem funccedilotildees na ceacutelula hospedeira e proteiacutenas

reguladoras que controlam a expressatildeo dos genes virais (Carvalho et al 2000)

Na segunda fase acontece o periacuteodo de incubaccedilatildeo O periacuteodo de incubaccedilatildeo do

condiloma acuminado varia de 2-3 semanas a 8 meses e parece estar relacionado com a

competecircncia imunoloacutegica individual Questiona-se se o grau de infectividade estaria

relacionado ao tempo de duraccedilatildeo ou ao tipo de lesatildeo ndash carga viral ou seja o tipo do

HPV (Carvalho et al 2000)

A terceira fase eacute conhecida como fase precoce onde trecircs meses apoacutes o

surgimento das primeiras lesotildees tem iniacutecio uma resposta imune adquirida que pode

conter a infecccedilatildeo (regressatildeo) ou ser insuficiente para eliminaacute-la que eacute a fase de

expressatildeo ativa (Carvalho et al 2000)

Na maioria dos carcinomas o HPV-DNA de alto risco estaacute integrado no genoma

celular Esta integraccedilatildeo ocorre em siacutetios fraacutegeis do genoma celular de forma randocircmica

mas consistentemente resulta na desrupccedilatildeo da regiatildeo E1E2 com resultante diminuiccedilatildeo

da transcriccedilatildeo de E2 Uma vez que o produto deste gene reprime a expressatildeo dos

oncogenes E6 e E7 passa a haver superproduccedilatildeo dos mesmos Como a integraccedilatildeo 8 Ceacutelulas que podem produzir queratina

27

interrompe o genoma viral a produccedilatildeo de partiacuteculas virais completa natildeo ocorre

(Howard amp Burnett 1990)

O produto do gene E6 destroacutei o produto do anti-oncogene p53 e tambeacutem inibe a

expressatildeo aumentada do gene p53 que eacute supressor de tumores e que ocorre usualmente

apoacutes agressatildeo celular Desta forma afirma-se que a infecccedilatildeo por HPV pode promover

divisatildeo celular descontrolada e o desenvolvimento de mutaccedilotildees somaacuteticas herdaacuteveis ou

seja a degeneraccedilatildeo da proteiacutena p53 resulta no bloqueio das respostas celulares aos

danos sofridos pelo DNA (figura 4) permitindo assim a acumulaccedilatildeo de alteraccedilotildees

geneacuteticas e a criaccedilatildeo de um genoacutetipo maliacutegno (Howard amp Burnett1990)

Figura 4 mecanismo do gene p53 em uma ceacutelula hospedeira A proteiacutena E6 liga-se agrave proteiacutena p53 Fonte Link Internet (UCT Departament of Medical Microbiology University of Cape Town)

Igualmente o produto da proteiacutena E7 do HPV combina-se com o produto do

gene retinoblastoma (Rb) supressor de tumores (figura 5) e pode causar depressatildeo ainda

maior nas defesas contra o desenvolvimento de malignidade O produto do gene E7 se

liga ao produto do gene supressor de tumor Rb e interage com ciclinas e outras

proteiacutenas envolvidas na regulaccedilatildeo do ciclo celular (Silverberg 1997)

28

Figura 5 Proteiacutena E7 do HPV interagindo com o gene retinoblastoma Fonte Link Internet (UCT Departament of Medical Microbiology University of Cape Town)

25 - Classificaccedilatildeo e Tipos de HPV

A classificaccedilatildeo dos HPVs baseia-se em sua relaccedilatildeo do DNA ou seja jaacute que

estes viacuterus natildeo podem crescer facilmente em cultura de tecido Com base na homologia

de sequumlecircncia exibida por diferentes HPV foram identificados pelo menos 70 tipos com

genoacutetipos diferenciados onde cada genoacutetipo eacute considerado uacutenico se a hibridizaccedilatildeo de

fase liacutequida de seu DNA digerido demonstra ter um niacutevel de homologia menor que 50

com outros genoacutetipos de HPV (Coordenaccedilatildeo Nacional de DST 1999 Halbe 2000)

Sua classificaccedilatildeo estaacute distribuiacuteda em grupos cutacircneos que infecta a pele e

grupos mucosos que infectam as regiotildees urogenitais e bucorespiratoacuterias Um subgrupo

dos HPVs cutacircneos eacute responsaacutevel pelas verrugas encontradas nas extremidades de

pessoas sadias um nuacutemero maior de tipos conhecidos de HPV constitui um subgrupo

que somente pode ser isolado da pele de pessoas com comprometimento imunoloacutegico

Os HPVs mucosotroacutepicos geralmente satildeo encontrados exclusivamente nos locais

urogenitais ou bucorespiratoacuterios (Murray et al 1994)

Na argumentaccedilatildeo taxonocircmica pretende-se com os agrupamentos mostrar que a

principal base para eles eacute anaacutelise filogeneacutetica das sequumlecircncias de codificaccedilatildeo L1

29

Distribuiacutedos em grupos o grupo F compreende os diversos tipos de HPVs que natildeo

podem ser classificados satisfatoriamente na estrutura filogeneacutetica ateacute o momento As

sequecircncias cutacircneas foram colocadas em grupos conforme suas propriedades fenotiacutepicas

(Bernard et al 1994)

Recentes estudos discutem as extensotildees agraves quais as relaccedilotildees filogeneacuteticas

coincidem de alguma forma com as observaccedilotildees cliacutenicas fenotiacutepicas (Villiers 1994)

O grupo A consiste dos tipos de papiloma viacuterus 16 31 33 35 35h 52 58 e 67

um subconjunto de viacuterus anogenitais de ldquoalto risco e risco intermediaacuteriordquo conforme

classificado por Lorincz e colaboradores (1994) Os estudos e pesquisas de Lorincz

utilizaram testes de 15 tipos de HPV anogenitais Os dados obtidos foram utilizados

para se determinar o potencial carcinogecircnico de cada um dos 15 tipos de HPV

estudados O HPV-16 o uacutenico tipo de ldquoalto riscordquo neste grupo eacute predominantemente

associado com o cacircncer invasivo A hibridizaccedilatildeo positiva para o DNA HPV-16 ocorreu

em 47 de todos os cacircnceres invasivos 47 das lesotildees de alto grau (CIN II ou III) e

16 das lesotildees de baixo grau (CIN I ou condiloma) Risco intermediaacuterio de espeacutecies de

HPV 31 33 35 35H 52 e 58 satildeo os mais prevalecentes nas lesotildees da auto grau

intraepitelial e diferentemente do HPV-16 satildeo menos predominantes em cacircnceres

invasivos Vaacuterios estudos japoneses indicam que a predominacircncia dos tipos HPV-52 e

HPV-58 em carcinomas cervicais invasivos eacute maior do que o reportado nos estudos

americanos (Villers 1994)

Os viacuterus do grupo A infectam predominantemente os tecidos cervicais e outros

locais anogenitais a vulva a vagina o pecircnis o periacuteneo e o acircnus Aleacutem destes locais o

HPV-16 tem sido mais frequumlentemente detectado em carcinomas da cavidade oral

laringe e menos frequumlentemente em lesotildees da pele (Lorincz et al 1994)

Sequumlecircncias genocircmicas completas satildeo disponiacuteveis em todos os membros do

grupo A exceto o HPV-67 que foi sequumlenciado apenas sobre a regiatildeo de L1 Das

sequumlecircncias deste grupo o HPV-35 e HPV-35h satildeo variante e HPV-33 e HPV-58 satildeo

tipos proacuteximos ndash sequumlecircncias que qualificam tipos distintos pelo criteacuterio de dez porcento

de similaridade no niacutevel nucleotiacutedeo mas entre as quais a maioria das diferenccedilas satildeo

despercebidas causando uma visatildeo de nenhuma diferenccedila no niacutevel de aminoaacutecidos

(Lorincz et al 1994)

Os HPVs detectados ateacute o momento estatildeo classificados em subtipos de baixo e

alto risco que estatildeo associados a condiloma acuminado e carcinoma invasor

respectivamente conforme mostrado resumidamente no quadro 3

30

Quadro 3 ndash Classificaccedilatildeo e tipos de HPV

Tipos de HPV Local de Patologia Tipos de Lesatildeo

14 Palma da matildeo e planta do peacute Verrugas palmaresplantares

2 Extremidades Verrugas comuns

superioresinferiores

310 Matildeos e rosto Verrugas planares

7 Matildeo Verrugas de Butcher

58912141517 Testa braccedilos e tronco Verrugas e cacircncer de pele em

19-2936-38 pacientes com

19-2936-38 comprometimento

imunoloacutegico

e epidermodisplasia

verruciforme

611 Urogenital anal Condilomas acuminados

ororrespiratoacuterio

161830313335 Urogenital anal e Displasia e cacircncer invasivo

3941-4551-5961 ororrespiratoacuterio

626468

1332 Cavidade bucal Hiperplasia

3040 Laringe Cacircncer

Fonte (Carvalho et al 2000)

Os subtipos de HPVs de baixo risco satildeo os 6 11 42 43 e 44 e o subtipo de

meacutedio e alto risco satildeo os 16 18 31 33 35 39 45 51 52 56 5859 e 68

31

26 - Meacutetodos de Detecccedilatildeo do HPV

A infecccedilatildeo do HPV se desenvolve de modo silencioso Um estudo do National

Istitute of Allergy and Infected Diseases (NIAD) nos Estados Unidos demonstrou que

cerca de metade das pessoas infectadas natildeo apresentam nenhum sintoma e por isso natildeo

procuram tratamento e continuam espalhando o viacuterus por meio dos contatos sexuais

(Viana amp Martins 1998)

A uacutenica forma visiacutevel deste viacuterus satildeo as verrugas que aparecem nas regiotildees

genitais dos homens e mulheres no entanto como o viacuterus pode se manifestar de trecircs

formas cliacutenica subcliacutenica e latente somente os tipos mais suaves de HPV

desenvolvem sintomas sendo que aqueles que atuam de maneira mais secreta satildeo os

que podem produzir problemas mais seacuterios (Oliveira 1994)

261 - Papanicolau colposcopia e peniscopia

O meacutetodo mais simples de detecccedilatildeo de infecccedilatildeo genital por HPV eacute a observaccedilatildeo

das verrugas genitais a olho nu Entretanto estima-se que apenas 5 das pessoas

infectadas apresentam condilomas tiacutepicos outros 10 das pessoas infectadas somente

satildeo identificadas atraveacutes de exame cliacutenico utilizando uma teacutecnica que expotildee lesotildees de

cor aceto-branco Essa teacutecnica consiste em cobrir com gaze saturada com uma soluccedilatildeo

de 5 de aacutecido aceacutetico a aacuterea genital durante 3 a 5 minutos e depois examinar a aacuterea

sob magnificaccedilatildeo no caso o colposcoacutepico com aumento de 9 a 16x Esse exame no

caso das mulheres eacute feito por um ginecologista e eacute o chamado colposcopia No caso dos

homens eacute feito por um urologista e eacute chamado peniscopia devendo ser realizado

normalmente apoacutes resultado de exame papanicolau da parceira sexual com indicativo de

virose inespeciacutefica (Silverberg 1997 Pires amp Gouvecirca 2001 Carvalho et al 2000)

A aplicaccedilatildeo de aacutecido aceacutetico resulta num niacutetido contraste entre o tecido normal e

o tecido anormal o tecido anormal toma uma tonalidade esbranquiccedilada bem

demarcada As verrugas planas de cor branco-aceacutetico compotildeem mais de um terccedilo dos

casos de infecccedilotildees penianas detectaacuteveis por HPV as quais ao contraacuterio dos

condilomatas facilmente visiacuteveis conteacutem tipos de HPV de alto risco Essa simples

teacutecnica de consultoacuterio pode detectar lesotildees invisiacuteveis que abrigam tipos oncogecircnicos de

HPV (Silverberg 1997 Pires amp Gouvecirca 2001)

32

Apoacutes a colposcopia comprovada a presenccedila do HPV deve-se partir para outras

teacutecnicas de detecccedilatildeo onde seraacute determinado o tipo de HPV infectante Considera-se que

a coilocitose9 observada no exame histoloacutegico dessas lesotildees eacute patognomocircnica10 da

infecccedilatildeo por viacuterus HPV Os coiloacutecitos estatildeo presentes nas infecccedilotildees por HPV onde as

partiacuteculas virais se encontram em processo de agrupamento e normalmente encontram-

se em lesotildees clinicamente aparente (Silverberg 1997)

O azul de toluidina eacute um corante vital que se fixa em regiotildees ricas em DNA

tambeacutem pode ser utilizado com o objetivo de aumentar a sensibilidade do meacutetodo As

lesotildees tiacutepicas ou suspeitas devem ser biopsiadas e submetidas a exame microscoacutepico

Podem ser empregadas teacutecnicas de biologia molecular que aumentam a especificidade

do diagnoacutestico e permitem tipagem do HPV (Carvalho et al 2000)

262 - Teacutecnica de Imunohistoquiacutemica

A imunohistoquiacutemica pode detectar o revestimento proteacuteico das partiacuteculas virais

que se encontram nessas lesotildees ao contraacuterio das displasias de alto grau e os carcinomas

invasivos que precisam de coiloacutecitos O DNA de HPV pode estar presente nessas lesotildees

mas a atividade de transcriptase talvez natildeo resulte na produccedilatildeo de viacuterions que satildeo

detectaacuteveis atraveacutes de microscopia de luz ou imunohistoquiacutemica (Carvalho et al

2000)

O meacutetodo ideal de detecccedilatildeo do HPV deve se basear na presenccedila de DNA de

HPV jaacute que o viacuterus natildeo precisa estar intacto para induzir a doenccedila A detecccedilatildeo

molecular inicial de DNA de HPV foi efetuada atraveacutes do uso de teacutecnicas de

hibridizaccedilatildeo de aacutecido nucleacuteico como a hibridizaccedilatildeo Southern (ou blotting) Esse foi o

meacutetodo original de primeira escolha para a detecccedilatildeo de DNA de HPV devido agrave seu

elevado grau de especificidade e sensibilidade Esse meacutetodo permite uma diferenciaccedilatildeo

precisa dos diferentes tipos de HPV (Helberg 1994 )

9 Alteraccedilatildeo celular causada por viacuterus A coilocitose observada na infecccedilatildeo por HPV indicativa de infecccedilatildeo ativa apresenta-se como grandes cavidades que tomam quase totalmente o citoplasma da ceacutelula afetada O coiloacutecito verdadeiro tem trecircs caracteriacutesticas atipia nuclear extenso halo peri-nuclear e espessamento das bordas deste vacuacuteolo 10 Sinal caracteriacutestico especiacutefico para determinada doenccedila

33

263 - Teacutecnica Southern blotting

A teacutecnica ldquoSouthern blottingrdquo eacute a mais sensiacutevel e especiacutefica considerada o

ldquopadratildeo ourordquo Em experimentos cientiacuteficos fragmentos celulares individuais satildeo

gerados por uma teacutecnica de restriccedilatildeo atraveacutes de digestatildeo enzimaacutetica separados em gel

por eletroforese e transferidos a um filtro inerte De acordo com os tamanhos dos

fragmentos tipos especiacuteficos de HPV satildeo reconhecidos apoacutes hibridizaccedilatildeo com sonda

radioativa ou biotinilada Nesta teacutecnica o DNA total eacute imobilizado em um suporte

inerte por aplicaccedilatildeo direta Pode-se quantificar o DNA acuradamente e muacuteltiplas

amostras podem ser examinadas usando-se dispositivo de muacuteltipla filtragem A

principal desvantagem eacute que se analisa o DNA total e natildeo fragmentos digeridos por

restriccedilatildeo por endonucleases ndash natildeo haacute como distinguir hibridizaccedilotildees cruzadas com outros

aacutecidos nucleacuteicos presentes na amostra (Helberg 1994 )

264 - Teacutecnica de Hibridizaccedilatildeo ldquoin siturdquo

Atraveacutes de uma teacutecnica modificada conhecida como hibridizaccedilatildeo in situ eacute

possiacutevel se identificar DNA de HPV nas ceacutelulas com a garantia de que o HPV

detectado natildeo eacute um contaminante extracelular que se encontra na superfiacutecie epitelial Eacute

uma teacutecnica executada em fragmentos de tecidos e permite um alto grau de localizaccedilatildeo

espacial nesse meacutetodo sondas virais satildeo acopladas a biotina ou digoxigenina em vez de

um radioisoacutetopo como foacutesforo radioativo A moleacutecula de biotina eacute entatildeo detectada por

uma seacuterie de reaccedilotildees citoquiacutemicas que resultam na ligaccedilatildeo de um complexo enzimaacutetico

(avidina-peroxidase) A enzima pode ser visualizada devido a sua habilidade em

converter um substrato incolor em um pigmento insoluacutevel marrom no siacutetio da formaccedilatildeo

do hiacutebrido Eacute realizada em material jaacute biopsiado em bloco de parafina e detecta a

presenccedila de viacuterus na lesatildeo retirada sendo utilizado portanto como meacutetodo de escolha

para confirmaccedilatildeo da histologia Entretanto a sensibilidade do exame eacute sacrificada com

essa teacutecnica porque o DNA do viacuterus estaacute presente apenas em pequenas quantidades em

cada ceacutelula ao inveacutes de encontrar-se isolado e concentrado como no caso do Southern

blotting (Helberg 1994 )

34

265 - Teacutecnica de Captura hiacutebrida

Captura hiacutebrida eacute uma teacutecnica que detecta uma sequumlecircncia viral em meio a ateacute dez

ceacutelulas podendo ser utilizada para identificar a presenccedila de um viacuterus na lesatildeo ou caso

a lesatildeo jaacute tenha sido extirpada verificar se persistem viacuterus na mucosa (Pires amp Gouvecirca

2001)

O sistema de captura hiacutebrida eacute um teste que usa como sonda ou explorador

sequumlecircncias de RNA que satildeo hibridizaacuteveis com alvos DNA provenientes da desnaturaccedilatildeo

(separaccedilatildeo das duas cadeias) do DNA viral Todo o genoma do viacuterus eacute alvo rotineiro de

escolha e exploradores RNA de cadeia uacutenica satildeo utilizados para hibridizar eficazmente

todos os 8000 nucleotiacutedeos do genoma HPV-DNA A sensibilidade do teste deriva de

vaacuterios fatores Os hiacutebridos RNA-DNA satildeo mais estaacuteveis do que os hiacutebridos DNA-DNA

e o uso de exploradores RNA de cadeia uacutenica evita reaccedilotildees colaterais indesejaacuteveis

como reanelamento (Pires amp Gouvecirca 2001)

Fonte adicional de sensibilidade eacute o uso de anticorpos RNA-DNA que satildeo

conjugados com muacuteltiplas moleacuteculas de fosfatase alcalina Este conjugados reconhecem

porccedilotildees curtas do hiacutebrido RNA-DNA de maneira especiacutefica e independente de

sequumlecircncia de modo que milhares de conjugados podem revestir um uacutenico hiacutebrido RNA-

DNA Cada enzima fosfatase alcalina imobilizada reage com numerosas moleacuteculas do

substrato dioxetano quimioluminescente por minuto produzindo um fluxo estaacutevel de

foacutetons que satildeo contados em um tubo fotomultiplicador de um luminocircmetro (Carvalho et

al 2000)

A intensidade de luz emitida eacute proporcional agrave quantidade de DNA-alvo no

espeacutecime e geralmente eacute expressa como uma proporccedilatildeo do sinal em relaccedilatildeo ao controle

positivo (Helberg 1994 )

266 - Teacutecnica Reaccedilatildeo em Cadeia de Polimerase

Polimerase Chaining Reaction (PCR) eacute a aplicaccedilatildeo da mais recente teacutecnica

bioloacutegica molecular com diagnoacutestico de precisatildeo para o HPV Com essa teacutecnica

segmentos de DNA podem ser amplificados ateacute um milhatildeo de vezes em questatildeo de

horas transformando minuacutesculas quantidades de DNA de HPV em quantidades que

podem ser facilmente detectaacuteveis Aleacutem da sua maior simplicidade em comparaccedilatildeo ao

35

ldquoSouthern blottingrdquo a PCR tem o benefiacutecio de uma sensibilidade sem paralelo na

detecccedilatildeo do HPV com quase a mesma especificidade Eacute uma teacutecnica desenhada para

detectar um uacutenico tipo especiacutefico de HPV ou ateacute 25 tipos diferentes em uma reaccedilatildeo o

que pode acelerar em muito as buscas de HPV (Helberg 1994 )

30 - Relaccedilatildeo Exitente entre o HPV e as doenccedilas

Com base nos postulados de Koch11 haacute relaccedilatildeo etioloacutegica entre um agente

infeccioso e uma doenccedila especiacutefica quando certos criteacuterios satildeo preenchidos e o HPV

natildeo eacute capaz de satifazer todos os postulados de Koch porque natildeo pode se multiplicar em

cultura A maior parte das evidecircncias de que o HPV eacute um agente etioloacutegico do cacircncer

humano envolve a detecccedilatildeo de HPV em tumores Outras evidecircncias que sustentam a

ideacuteia da oncogenicidade do HPV proveacutem de experimentos moleculares e celulares que

mostram as capacidades de transformaccedilatildeo do viacuterus (Pires amp Gouvecirca 2001)

Estudos de transformaccedilatildeo demonstraram que a inserccedilatildeo de um genoma completo

de HPV-16 induzia transformaccedilatildeo maliacutegna em fibroblastos de roedores Dessa mesma

forma a transfecccedilatildeo de DNA de HPV 16 ou 18 em ceacutelulas epiteliais humanos do colo

uterino e em ceratinoacutecitos de prepuacutecio neonatal conferiu imortalizaccedilatildeo o contraacuterio natildeo

ocorreu com o DNA de HPV 6 de baixo risco (Murray et al 1994)

A transfecccedilatildeo de DNA de HPV em enxertos teciduais humanos transformou de

forma confiaacutevel alguns tecidos (colo uterino 100 prepuacutecio 100 cordas vocais

88 uretra 73) mas outros tecidos natildeo foram tatildeo sensiacuteveis ao HPV (esocircfago 37

bexiga 0 pele abdominal 0) (Carvalho et al 2000)

ORFs molduras abertas de leitura E6 e E7 foram necessaacuterias para a

transformaccedilatildeo de ceacutelulas humanas mas apenas quando colhidas de HPVs de tipo 16 e

18 E6 e E7 de HPV 6 e 11 foram pouco ou nada transformadores (Silverberg 1997)

Os tipos de HPV 6 e 11 satildeo encontrados em condilomas benignos Essas lesotildees

satildeo normalmente autolimitantes exceto nos raros casos de conversatildeo para tumores

maliacutegnos (carcinomas verrucosos) HPV 16 18 e 31 satildeo frequumlentemente encontrados

em neoplasias intra-epiteliais cervicais e cacircnceres invasivos12 Entre estes o tipo 18 11 Bacteriologista alematildeo Roberto Koch ndash estudo dos bacilos da tuberculose (bacilos de Koch 1843-1910) 12 Fase em que o cacircncer invade outras camadas celulares do oacutergatildeo e ganha a capacidade de se disseminar para outras parte do corpo

36

parece ser o que mais se relaciona as lesotildees de alto grau e estaacute associado a uma maior

rapidez de transiccedilatildeo ao carcinoma (Howard et al 1990 Halbe 2000)

31 - HPV e o cacircncer de colo uterino

O diagnoacutestico das formas cliacutenicas de infecccedilatildeo pelo HPV eacute simples Os

condilomas acuminados (o termo kondylos deriva do grego e quer dizer excrescecircncia

carnosa tumor) dos oacutergatildeos genitais externos satildeo bem conhecidos e transmitidos

sexualmente (Pires amp Gouvecirca 2001)

O aspecto macroscoacutepico dos condilomas eacute de neoformaccedilotildees seacutesseis papilares

muacuteltiplas cobertas por epiteacutelio queratoacutetico Localizam-se nas aacuterea uacutemidas

particularmente naquelas expostas ao atrito durante o coito (Carvalho et al 2000)

O condiloma acuminado eacute mais frequumlentemente encontrado na forma de

excrescecircncia papilar uacutenica ou muacuteltipla Alguma variedades tem longas projeccedilotildees

digiformes com alccedilas capilares Cliacutenica e colposcoacutepicamente se assemelham agravequelas do

cacircncer invasivo exceto pelo seu tamanho e distribuiccedilatildeo regular (Muto 1998)

Apoacutes aplicaccedilatildeo de aacutecido aceacutetico a maioria das verrugas embranquece e seus

vasos tornam-se menos proeminentes O teste de Schiller eacute particularmente uacutetil na

diferenciaccedilatildeo de verrugas acuminadas e cacircncer (Carvalho et al 2000)

A atraccedilatildeo da soluccedilatildeo de lugol pelas verrugas acuminadas eacute muitas vezes parcial

e focal enquanto o cacircncer exofiacutetico13 eacute uniformemente iodo-negativo As verrugas

exofiacuteticas podem crescer em qualquer lugar do epiteacutelio maduro da zona de

transformaccedilatildeo ou na junccedilatildeo escamocolunar (JEC) Aleacutem disso podem coexistir com

lesotildees planas dentro da zona de transformaccedilatildeo ou mesmo crescer dentro delas Verrugas

acuminadas estatildeo invariavelmente associadas a infecccedilatildeo por HPV 6 e 11 (Carvalho et

al 2000)

13 Cacircncer que se projeta para fora

37

A infecccedilatildeo subcliacutenica eacute a forma mais frequumlente de infecccedilatildeo pelo HPV no colo

uterino e diagnosticada apenas com o uso do colposcoacutepio apoacutes aplicaccedilatildeo de aacutecido

aceacutetico a 5 No trato genital inferior pode estar associada agrave neoplasia intra-epitelial e

histologicamente podem ser encontradas em presenccedila de neoplasia intra-epitelial com

evidecircncias de infecccedilatildeo por HPV superpostas e presenccedila contemporacircnea em aacutereas

separadas mas contiacuteguas de neoplasia intra-epitelial cervical (NIC) e de infecccedilatildeo pelo

HPV (Silverberg 1997)

A mulher pode se infectar com os tipos de HPV de baixo risco esses tipos

muitas vezes satildeo remissivos podendo desaparecer espontaneamente apoacutes alguns meses

Outro destino apesar de raro eacute a transformaccedilatildeo direta para neoplasia sem passar pela

fase produtiva ou latente Os organismos que desenvolvem infecccedilatildeo recidivante que natildeo

melhoram espontaneamente podem ter doenccedila persistente por longo periacuteodo ou no caso

dos infectados pelos grupos de alto risco progressatildeo para NIC (neoplasia intra-epitelial

escamosa) de alto grau e cacircncer

Quando uma lesatildeo progride de baixo para alto grau ocorre alteraccedilatildeo na relaccedilatildeo

infecccedilatildeo-hospedeiro e o viacuterus da forma epissomal (circular) passa para linear e se

incorpora ao DNA da ceacutelula epitelial Nesse processo estatildeo envolvidas as proteiacutenas E1 e

E2 ORF que se separam permitindo o aumento das proteiacutenas E6 e E7 levando agrave

transformaccedilatildeo neoplaacutesica (inibindo o antioncogene p53) mantendo o viacuterus em seu

estado linear incorporado (Silverberg 1997)

Enquanto ocorrem essas mudanccedilas em niacutevel molecular no niacutevel morfoloacutegico

tambeacutem haacute alteraccedilotildees A principal delas e que parece ser marcador altamente preditivo

de transformaccedilatildeo neoplaacutesica eacute a aneuploidia geralmente acompanhada de aumento na

atividade mitoacutetica das ceacutelulas (Murray et al 1994)

Resumindo o HPV parece ser a causa central do cacircncer cervical Fatores

hormonais parecem interagir com o HPV na progressatildeo de infecccedilatildeo autocontrolada

para neoplaacutesica O que parece ser relevante e tem sido investigado com muito cuidado

satildeo fatores como idade precoce e talvez alguma outra circunstacircncia na eacutepoca da

gravidez ou uso de contraceptivo oral Jaacute a imunossupressatildeo constitui fator de risco

super importante muitas vezes isoladamente (Carvalho et al 2000)

Quanto mais precoce a exposiccedilatildeo ao HPV maior o risco de desenvolver lesatildeo

Tambeacutem a ordem em que a infecccedilatildeo ocorre pode ser importante Assim HPV de baixo

risco poderia conferir imunidade para infecccedilotildees subsequentes por HPV de alto risco

38

O tipo carga viral e a detecccedilatildeo persistente do HPV satildeo compeendidos como

marcadores importantes para o risco de progressatildeo para cacircncer invasivo Lesotildees por

HPV 16 possuem risco significativamente aumentado para progressatildeo quando

comparadas com infecccedilotildees por HPV de baixo risco 6 e 11 Quando a doenccedila

precurssora de alto grau (NIC IIIII) ocorre com HPV de alto risco isso acontece em

curto periacuteodo de tempo (dentro de um ou dois anos) A taxa de regressatildeo em pacientes

com esfregaccedilos repetidamente anormais eacute menos comum (Carvalho et al 2000 Viana

amp Martins 1998)

32 - HPV e o cacircncer de pecircnis

As lesotildees causadas pelo HPV no homem podem afetar o trato geniturinaacuterio

desde a genitaacutelia externa ateacute o trato urinaacuterio superior e a regiatildeo perianal Entretanto

concentra-se mais frequumlentemente no pecircnis Geralmente sua localizaccedilatildeo eacute no prepuacutecio

interno corpo glande e escroto (Carvalho et al 2000 Pires amp Gouvecirca)

A uretra eacute um reservatoacuterio natural para o HPV A infecccedilatildeo uretal ocorre mais

frequumlentemente nos 2 cm distais incluindo a fossa navicular Pode apresentar-se

clinicamente como maacutecula ou verruga que se exterioriza pelo meato Estudos de

citologia uretal e biologia molecular em homens cujas parceiras apresentam NIC ou

infecccedilatildeo pelo HPV revelam prevalecircncia de 9 a 21 (Carvalho et al 2000)

Vaacuterios estudos apontam uma associaccedilatildeo de cacircncer de pecircnis com o HPV em

especial o tipo 16 em 30 a 50 dos casos O cacircncer de pecircnis eacute uma neoplasia rara em

naccedilotildees desenvolvidas correspondendo a cerca de 04 dos tumores do homem em

paiacuteses da Europa e da Ameacuterica do Norte Nos paiacuteses em desenvolvimento essa

incidecircncia chega ao surpreendente iacutendice de 12 (Uganda) No Brasil as cifras

estimadas variam de 1 a 4 nas regiotildees Sul e Sudeste e de 5 a 16 no Norte e

Nordeste (Carvalho et al 2000)

33 - HPV e o cacircncer de pele Os HPVs podem desativar as defesas naturais contra certos tipos de cacircncer de

pele causados por radiaccedilatildeo ultravioleta (UV) (Carvalho et al 2000 Pires amp Gouvecirca)

Recentemente Alan Storey e sua equipe do Laboratoacuterio de Tumor de Pele do

Fundo Imperial de Pesquisa de Cacircncer em Londres Reino Unido descobriram que o

HPV age para prevenir a apoptose que eacute um mecanismo de morte celular programada

39

Um tipo de suiciacutedio celular usado pelas ceacutelulas quando estas ficam sem reparo (Pires amp

Gouvecirca 2001)

Uma proteiacutena conhecida como Bak normalmente atua como um alarme no

mecanismo protetor de ceacutelulas normais Quando uma ceacutelula da pele fica muito

danificada para continuar trabalhando adequadamente geralmente devido agrave radiaccedilatildeo

UVB a proteiacutena Bak alerta a ceacutelula enviando comandos para prosseguir com a morte

celular programada ndash apoptose Matando a si mesma a ceacutelula previne quaisquer

alteraccedilotildees danosas futuras que depois podem fazer com que ela se torne cancerosa

(Carvalho et al 2000 Pires amp Gouvecirca)

Uma proteiacutena produzida pelo HPV causa destruiccedilatildeo da proteiacutena Bak em ceacutelulas

da pele fazendo com que natildeo consigam morrer para evitar que se tornem um cacircncer

Este mecanismo acaba por explicar como o HPV promove sua proacutepria sobrevivecircncia em

ceacutelulas infectadas (Carvalho et al 2000 Pires amp Gouvecirca)

Em pacientes transplantados de oacutergatildeos cujo sistema imunoloacutegico estaacute

comprometido e estatildeo sob alto risco de desenvolver um tipo de cacircncer chamado de

carcinoma de ceacutelulas escamosas (SCC) o HPV estaacute presente em mais 80 dos casos

(Pires amp Gouvecirca 2001)

34 - Papiloma escamoso de esocircfago

A presenccedila de muacuteltiplos papilomas encontrados principalmente em esocircfago

proximal falam a favor de infecccedilatildeo pelo HPV enquanto que lesotildees isoladas

encontradas classicamente em esocircfago distal tendem a ter relaccedilatildeo com a presenccedila de

refluxo gastro-esofaacutegico (Lombardi et al 1980 Quintadamo amp Benson 1988)

O papiloma de ceacutelulas escamosas do esocircfago normalmente eacute um achado

incidental tendo em vista que a evoluccedilatildeo cliacutenica ser quase sempre silenciosa

(Quintadamo amp Benson 1988)

No quadro cliacutenico pode existir sintomas inespeciacuteficos como dor epigaacutestrica e

desordens gatrointestinais aacutecido peacutepticas como presenccedila de refluxo gastro-esofaacutegico e

doenccedila ulcerosa (Lombardi et al 1980 Quintadamo amp Benson 1988)

Entretanto todos estes apesar de apresentar correlaccedilatildeo com a patogenia do

papiloma quando controlados ou tratados natildeo trazem nenhum benefiacutecio quanto a

regressatildeo histoloacutegica do papiloma O curso cliacutenico dos papilomas esofaacutegicos associados

40

ao HPV tende a ser mais agressivo que o papiloma que estaacute relacionado ao refluxo

gastro-esofaacutegico (Politoske 1992)

Alguns autores afirmam que os papilomas satildeo muitas vezes passiacuteveis de se

desenvolverem em vista da ingestatildeo de agentes carcinogecircnicos toxinas de meio

ambiente e irritantes quiacutemicos para a mucosa do esocircfago (Duranceau 1988 Nakamura

et al 1974)

O desenvolvimento de lesotildees malignas eacute um fenocircmeno multifatorial que aleacutem

de contar com a presenccedila do papilomaviacuterus tem se relacionado ainda com uma interaccedilatildeo

complexa de carcinoacutegenos (aacutelcool fumo nitrosaminas e aflatoxinas) todos estes agindo

em conjunto Uma nova visatildeo dos possiacuteveis mecanismos de transformaccedilatildeo maligna

induzida pelo HPV tem advogado o fato de existir gens relacionados ao HPV por

exemplo E6 e E7 capazes de realizar essa transformaccedilatildeo atraveacutes de uma interaccedilatildeo com

alguns gens que tem funccedilatildeo de suprimir o desenvolvimento tumoral como a proteiacutena

p53 e o gen Rb A perda deste equiliacutebrio funcional de supressatildeo leva a uma

incontrolaacutevel proliferaccedilatildeo celular de ceacutelulas infectadas induzindo ativamente a uma

formaccedilatildeo neoplaacutesica quando associada aos fatores carcinogecircnicos jaacute previamente

aumentados (Toet et al 1985)

35 - Mecanismos de interaccedilatildeo HPV X HIV Ceacutelulas Cultivadas em laboratoacuterios comprovaram que a contaminaccedilatildeo pelo viacuterus

HPV pode acelerar a progressatildeo ou ateacute mesmo facilitar a infecccedilatildeo por HIV (Pires amp

Gouvecirca 2001 Carvalho et al 2000)

Ceacutelulas infectadas com HPV liberam fatores de crescimento e proteiacutenas

estimuladoras do sistema imunoloacutegico que tenham a capacidade de despertar novamente

a infecccedilatildeo com HIV latente nas ceacutelulas do sistema imunoloacutegico (Pires amp Gouvecirca 2001

Carvalho et al 2000)

Em resposta aos fatores de crescimento induzidos pelo HPV as ceacutelulas

infectadas pelo HIV comeccedilam a produzir novas coacutepias do viacuterus (Pires amp Gouvecirca 2001

2001 Carvalho et al 2000)

Como a infecccedilatildeo genital pelo papilomaviacuterus eacute uma doenccedila de transmissatildeo sexual

(DST) interage de alguma maneira com as demais afecccedilotildees que apresentam a mesma

via de transmissatildeo Tal interaccedilatildeo ocorre na forma cliacutenica condilomatosa da infeccedilatildeo pelo

41

HPV ou ainda na forma subcliacutenica em que as lesotildees satildeo identificadas pela colposcopia

(Pires amp Gouvecirca 2001 Carvalho et al 2000)

A presenccedila de infecccedilotildees associadas por exemplo a candidiacutease natildeo apenas

dificulta o diagnoacutestico do HPV por propiciar lesotildees falso-acetobrancas como interfere

no tratamento As infecccedilotildees genitais associadas devem sempre ser tratadas previamente

ao HPV Entre os pontos de inter-relaccedilatildeo a oncogecircnese eacute o tema mais pesquisado

Neste ponto algumas infecccedilotildees podem funcionar como coadjuvante no papel

oncogecircnico do HPV sobressaindo-se a inter-relaccedilatildeo HPV-HIV Contata-se maior

prevalecircncia dos HPVs oncogecircnicos entre pacientes que apresentam alguma DST

associada (Pires amp Gouvecirca 2001)

Os condilomas acuminados e as formas subcliacutenicas de infecccedilatildeo pelo HPV estatildeo

entre as doenccedilas anogenitais mais comuns em pacientes HIV positivo Tem transmissatildeo

sexual e satildeo causados pelos HPVs tipo 6 11 16 18 31 33 e 35 (Carvalho et al 2000)

O HIV causa alteraccedilatildeo da imunidade celular representando um importante fator

de risco para a infecccedilatildeo pelo HPV e para o desenvolvimento de lesotildees da regiatildeo

anogenital aleacutem de modificar a histoacuteria natural da infecccedilatildeo por HPV preexistente


Essas lesotildees satildeo mais agressivas e difiacuteceis de erradicar em pacientes HIV

positivo embora os tipos de HPV sejam os mesmos da populaccedilatildeo soronegativa

Apresentam no entanto evoluccedilatildeo mais raacutepida tanto nas suas formas exofiacuteticas como

nas alteraccedilotildees precursoras de cacircncer do trato genital inferior (neoplasias intra-epiteliais

cervical vulvar vaginal peniana rerianal e anal) sendo as lesotildees vulvares e perianais

as mais comuns em indiviacuteduos infectados pelo HIV (Pires amp Gouvecirca 2001 2001


Riscos de indiviacuteduos com HIV desenvolver cacircncer do colo uterino encontra

relaccedilatildeo direta com o grau de imunodeficiecircncia causada pelo HIV no momento da

infecccedilatildeo pelo HPV Jaacute estaacute comprovado que as lesotildees intra-epiteliais natildeo estatildeo

diretamente associadas ao HIV por si soacute mas ao grau de imunossupressatildeo que ele

desencadeia (Pires amp Gouvecirca 2001)

A contagem de ceacutelulas CD4 tambeacutem influencia a associaccedilatildeo entre as duas

viroses visto que doentes com valores inferiores a 200mm apresentam maior

incidecircncia de infecccedilatildeo pelo HPV (Carvalho et al 2000)

42

40- Dos Avanccedilos da Ciecircncia

No Brasil o Instituto Ludwing de Pesquisas sobre o cacircncer em Satildeo Paulo vem

investindo desde 1999 em produtos profilaacuteticos contra os males causados pelo HPV no

caso uma vacina que jaacute foi testada em bovinos mas que soacute estaraacute apta a ser

experimentada em humanos por volta de 2002 O Ministeacuterio da Sauacutede atraveacutes do

Instituto Nacional do Cacircncer desde 1998 lanccedilou campanha para que meacutetodos de

detecccedilatildeo de HPV fossem incorporados agrave rotina meacutedica de consultas ginecoloacutegicas e

uroloacutegicas Pesquisadores dos Estados Unidos Alemanha e Austraacutelia tambeacutem vem

estudando vacinas que tambeacutem jaacute foram testadas em catildees e bovinos mas o objetivo

maior de todos eacute desenvolver uma vacina que seja eficaz principalmente contra o

HPV-16 que acaba sendo o responsaacutevel por mais de 50 dos casos de cacircncer de colo

uterino no mundo (Muto1998) Apesar do diagnoacutestico do condiloma acuminado ser frequumlentemente oacutebvio a

escolha do melhor tratamento pode ser difiacutecil Deveraacute sempre ser analisada a extenccedilatildeo e

duraccedilatildeo da virose antes que se inicie qualquer tratamento Jaacute existe no mercado

aprovado pela Food and Drug Administration (administraccedilatildeo e

abastecimentofornecimento de drogas) ndash FDA agecircncia que regula a comercializaccedilatildeo de

remeacutedios nos EUA o medicamento interferon alfa-3 intralesatildeo para tratamento de

verrugas genitais extensas e recorrentes Como natildeo haacute ainda disponibilidade de vacinas

ou agentes antimicrobianos eficazes contra o HPV o alfa interferon natural que eacute uma

substacircncia de muacuteltiplas espeacutecies derivada de leucoacutecitos humanos tem sido o tratamento

disponiacutevel mais utilizado (Carvalho et al 2000)

O interferon eacute uma substacircncia natural que desempenha um papel no mecanismo

de defesa imunoloacutegica em resposta a infecccedilotildees viroacuteticas O interferon alfa natural age

ligando-se a receptores na membrana celular especiacuteficos para ele e altera o metabolismo

celular pois enquanto ligado agrave membrana celular possui atividade antiviroacutetica

antiproliferativa antitumoral e imunomodulatoacuteria sem contudo saber-se qual eacute

exatamente o mecanismo envolvido na erradicaccedilatildeo de verrugas genitais O que existe eacute

a hipoacutetese de que as injeccedilotildees de interferon ajudam a direcionar a droga para o viacuterus

alvo e a estimular resposta no hospedeiro (Carvalho et al 2000 Murray et al 1994)

Portadores de HPV com uma uacutenica ou vaacuterias verrugas genitais frequumlentemente

satildeo faacuteceis de tratar com aplicaccedilotildees repetidas semanalmente de podofilina aacutecido

43

bicloraceacutetico aacutecido tricloraceacutetico ou crioterapia com nitrogecircnio liacutequido Pacientes com

quadro recorrente ou com envolvimento mais extensivo podem precisar de terapias de

segunda linha entre as quais se encontram a cirurgia excisional a cirurgia a laser CO2 14

e a administraccedilatildeo de alfa interferon (Carvalho et al 2000 Murray et al 1994)

Um workshop organizado pela Internacional Agency for Research on Cancer ndash

(IARC) - (Agecircncia Internacional para Pesquisa do Cacircncer) e a Fundaccedilatildeo Marcel

Meacuterieux em Veyrier du Lac perto de Annecy (Franccedila) em dezembro de 1994 reuniu

40 cientistas de 9 paiacuteses diferentes que decidiram em vista dos nuacutemeros alarmante de

doenccedilas relacionadas ao HPV a IARC dedicaria grandes esforccedilos agrave pesquisa dos

agentes causadores implementando estudos epidemioloacutegicos de papilomaviacuterus humano

e cacircncer de colo uterino em 24 paiacuteses Os resultados apresentados nessa reuniatildeo

enfatizaram os trabalhos experimentais com as vacinas contra o papilomaviacuterus humano

conduzido em bois catildees e coelhos os quais mostraram que as vacinas profilaacuteticas (para

a prevenccedilatildeo da infecccedilatildeo por HPV) e terapecircuticas (para regressatildeo de lesotildees induzidas

pelo viacuterus) satildeo eficazes no combate contra tumores associados ao papilomaviacuterus

presente nesses animais e eacute este incentivo da IARC que tem estimulado no

desenvolvimento de vacinas similares para uso humano (Carvalho et al 2000 Murray

et al 1994)

Apesar de saber que o desenvolvimento de vacinas profilaacuteticas seguras e

eficazes ainda precisa de avanccedilos em vaacuterias aacutereas da pesquisa sobre o HPV estima-se

que em 3 a 4 anos a vacina estaraacute disponiacutevel comercialmente e a imunizaccedilatildeo em massa

dentro de no maacuteximo 10 anos (Carvalho et al 2000 Murray et al 1994)

14 Os mais empregados em Medicina satildeo os de anidrido carbocircnico (CO2) neodiacutemio YAG e o argocircnio Seu comprimento de onda eacute de 106 micra sendo altamente absorvido por tecidos ricos em aacutegua

44

50- Bibliografia

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QUINTADAMO M BENSON J Squamous Cell Papiloma of the Esophagus Case

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VILLIERS D Tipos de Papiloma Viacuterus em Patologia Humana

Uma Reciclagem e Atualizaccedilatildeo Berlin 1994 Editora Springer-Verlag

47



Licenciatura em Ciecircncias Bioloacutegicas



Monografia apresentada agrave Faculdade de Ciecircncias da Sauacutede do Centro Universitaacuterio de Brasiacutelia como parte dos requisitos para a obtenccedilatildeo do grau de Licenciado em Ciecircncias Bioloacutegicas Orientador Prof MSc Claacuteudio Henrique Cerri e Silva Brasiacutelia - 2001

Agradecimentos


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Sim

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Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Complexa

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

Helicoidal

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Linfo inguinal AIDS


Catapora


Fonte (Soares 1993)







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Alberts et al 1997)





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50- Bibliografia



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Satildeo Paulo

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Scipione









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Parvoviacuterus

Papovaviacuterus

Adenoviacuterus

Hepadnaviacuterus

Herpesviacuterus

Poxviacuterus

Picornaviacuterus

Caliciviacuterus

Reoviacuterus

Flaviviacuterus

Togaviacuterus

Retroviacuterus

Ortomixoviacuterus

Paramixoviacuterus

Rabdoviacuterus

Filoviacuterus

Coronaviacuterus

Arenaviacuterus

Bunyaviacuterus

Deltaviacuterus

Natildeo

Natildeo

Natildeo

Sim

Sim

Sim

Natildeo

Natildeo

Natildeo

Sim

Sim

Sim

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Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

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Complexa

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

Icosaeacutedrica

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Helicoidal

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50- Bibliografia



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Satildeo Paulo

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Scipione









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Parvoviacuterus

Papovaviacuterus

Adenoviacuterus

Hepadnaviacuterus

Herpesviacuterus

Poxviacuterus

Picornaviacuterus

Caliciviacuterus

Reoviacuterus

Flaviviacuterus

Togaviacuterus

Retroviacuterus

Ortomixoviacuterus

Paramixoviacuterus

Rabdoviacuterus

Filoviacuterus

Coronaviacuterus

Arenaviacuterus

Bunyaviacuterus

Deltaviacuterus

Natildeo

Natildeo

Natildeo

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Natildeo

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