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LEUCEMIAS Y LINFOMAS.Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares

CD103 clon EPR4166TcR gamma M1 clon gamma 3.20

CD163 clon MRQ-26 SOX11 clon MRQ-58

Introducción .3Técnicas Inmunohistoquímicas .5 - Nuevos Anticuerpos .5 - Paneles de Anticuerpos disponibles .7 - Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica de los linfomas de células B más frecuentes - Anticuerpos útiles en el diagnóstico de los linfomas T - Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica de la celularidad de la médula ósea - Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímica de las neoplasias de células histiocíticas y dendríticas más frecuentes. - Listado de anticuerpos disponibles frente a antígenos linfoides .10Técnicas Moleculares .18 - CISH (Hibridación in situ cromogénica) .18 - PCR .19 Referencias .22

Índice

I 3 I

Los informes epidemiológicos más recientes indican un aumento en la incidencia mundial de los linfomas aunque los datos disponibles sobre la etiología concreta de cada caso aún no son suficientemente demostrativos. No obstante y conforme se acumula información sobre la gran diversidad de subtipos patológicos existentes el conocimiento se ha incrementado exponencialmente, sobre todo desde que el uso estandarizado de la clasificación de la OMS de los Tumores del Sistema Hematopoyético y Linfoide se ha convertido en norma por parte de hematólogos clínicos, oncólogos y anatomopatólogos. Y precisamente uno de los motivos fundamentales de este progreso ha sido el uso inmunohistoquímico de amplios paneles de anticuerpos mono- y policlonales para poner de manifiesto rasgos celulares poco aparentes o que pueden pasar desapercibidos en la valoración de rutina. Al fin y al cabo, la característica fisiopatológica principal de los linfomas es que son proliferaciones clonales de linfocitos detenidos en su diferenciación hacia células efectoras inmunes a lo largo del proceso de maduración de los linfocitos normales. De este modo, las determinaciones inmunohistoquímicas realizadas con diversos anticuerpos mono- y policlonales permiten identificar el linaje celular del que cada linfoma se deriva así como la fase de desarrollo linfoide específica en la que se encuentran detenidas las células que lo integran.

Además de su importante papel en el diagnóstico, la positividad de las células tumorales frente a algunos anticuerpos puede ser utilizada como indicador de pronóstico en linfomas y así mismo, otros anticuerpos pueden confirmar la presencia de moléculas diana para terapia personalizada mediante anticuerpos específicos.

No obstante las técnicas inmunohistoquímicas tienen sus limitaciones y han de ser valoradas lo más objetivamente posible sin olvidar que los patrones aberrantes de tinción pueden constituir un indicio clave para el diagnóstico. De igual manera no debe olvidarse que antes de tomar una decisión diagnóstica y de la aplicación de un panel u otro de anticuerpos, la correlación clínico-patológica y la morfología celular de estas neoplasias deben ser escrupulosamente consideradas. Finalmente y si los parámetros anteriormente mencionados aún son insuficientes para alcanzar el diagnóstico, es muy conveniente aplicar cuantas técnicas moleculares sean necesarias para identificar los cambios patológicos a nivel genético.

En definitiva, este folleto informativo que le facilita la compañía Máster Diagnóstica, además de presentar el amplio panel de anticuerpos disponibles en su catálogo, pretende sugerir los paneles de anticuerpos a considerar para el diagnóstico anatomopatológico de las neoplasias linfoides más comunes.

Introducción

Leucemias y Linfomas. Paneles de técnicas inmunohistoquímicas y moleculares

I 4 I

I 5 I

SOX11 clon MRQ-58 MAD-000581QD

· Marcador de los linfomas del manto folicular Ciclina D1 negativos, que aproximadamente suponen el 5-10% de estas neoplasias.

· Positivo en la variante blástica de linfoma del manto folicular. · Positivo en casos aislados de leucemia/linfoma linfoblástico de células T y B, linfoma de Hodgkin clásico, linfoma de Burkitt o leucemias prolinfocíticas de células T.

· Ausente en el mieloma múltiple y plasmocitomas así como en la mayor parte de las leucemias de células peludas, neoplasias ambas que pueden sobreexpresar Ciclina D1.

TcR gamma M1 clon gamma 3.20 MAD-000608QD

· Reconoce la cadena gamma del receptor TcR de los linfocitos T.

· En tejidos linfoides los linfocitos gamma delta representan aproximadamente el 15% de los linfocitos T del bazo, del 2 a 4% en los ganglios linfáticos, el 1% en la cortical timica y entre el 3 y 5% en la medular.

· Está generalmente aceptado que los heterodímeros alfa, beta y gamma delta de los receptores TcR son mutuamente excluyentes.

· Potencial herramienta para el diagnóstico de los linfomas T gamma delta positivos, que en general están caracterizados por un peor pronóstico.

CD163 clon MRQ-26 MAD-000587QD

· Presente en la superficie y citoplasma de los monocitos (expresión baja) y macrófagos maduros (expresión alta) y elementos celulares derivados.

· Por su mayor especificidad este anticuerpo es superior a CD68.

· Positivo en neoplasias con diferenciación monocítica e histiocítica no habiéndose observado positividad en los restantes tejidos normales, linfomas y carcinomas ni en la mayoría de las neoplasias mesenquimales, incluyendo los tumores de células foliculares dendríticas.

· Positividad constante en los histiocitos S100 positivos de la enfermedad de Rosai-Dorfman, el sarcoma histiocítico y las células constituyentes del angioma esplénico de células litorales.

· Positivo en histiocitomas fibrosos atípicos, histiocitomas fibrosos benignos, fibroxantomas atípicos y tumores de células gigantes tenosinoviales.

Técnicas Inmunohistoquímicas

Nuevos anticuerpos


I 6 I

CD43 clon DF-T1 MAD-000606QD CD4 clon EP204 MAD-000600QD

CD5 clon EP77 MAD-000602QD

CD7 clon EP132 MAD-000603QD

CD103 clon EPR4166 MAD-000615QD

· Presente en los linfomas T asociados a enteropatía de tipo I. · Marcador de la leucemia de células peludas. · Raramente presente en el linfoma esplénico del área marginal y con poca frecuencia en el linfoma B difuso de células pequeñas de la pulpa roja esplénica.

· Marca los linfocitos intraepiteliales de los casos de enfermedad celiaca refractaria de tipo 2 con peor pronóstico.

I 7 I

CD19 CD20 PAX-5 CD79a Bcl-2

Bcl6 CD10 CD21* CD23* CD5 Ciclina D1 TdT Otros

LF + + + - - - - -Bcl-2 negativo en el 10-15% de los casos; negativo también en hiperplasia linfoide

LMF + - - - - + + -SOX11 positivo en casos Ciclina D1 negativos independientemente de la presencia o no de la translocación BCL-1

LMGF + - - - - - - -

LLC + - - - + + - - CD38 y ZAP70 con valor pronóstico

LLP + - - - - - - - PAX5+

LBDCG + +/- +/- - - - - -CD10, Bcl-6 y MUM1 – algoritmo de Hans** EBV+ en algunos casos

LB + + + - - - - - Mutación del gen MYC

LL +/- - - - - - - +

* permiten la valoración de las células dendríticas foliculares.

** Algoritmo de Hans para la clasificación inmunofenotipica de los LBDCG

- Tipo centro germinalCD10+CD10-/Bcl6+/MUM1-

- Tipo non-centro germinalCD10-/Bcl6-CD10-/Bcl6+/MUM1+

LF-linfoma folicular; LMF-linfoma del manto folicular; LMGF-linfoma del área marginal folicular; LLC-leucemia linfática crónica; LLP- linfoma linfoplasmocítico; LBDCG-linfoma B difuso de células grandes; LB-linfoma de Burkitt; LL-linfoma linfoblástico

Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímicade los linfomas de células B más frecuentes

Paneles de Anticuerpos disponibles

Anticuerpos útilesen el diagnóstico de los linfomas T

CD2 Positividad muy constante en linfomas T CD3 negativos

CD3 Marcador general de los linfocitos T

CD4 Marcador general de los linfocitos T ayudantes. Preponderante en Micosis fungoides

CD5 Marcador general de los linfocitos T con expresión constante en leucemia linfática crónica

CD7 Frecuentemente pierde la expresión en linfomas pero también en algunos trastornos inflamatorios cutáneos


I 8 I

CD8Marcador general de los linfocitos T citotóxicos/supresores. Positivos en algunos casos de Micosis fungoide, linfomas primarios cutáneos CD8 positivos

CD56Marcador de los linfocitos NK. Positivo también en linfomas T asociados a enteropatías de tipo II y linfoma T hepatoesplénico (CD4 y CD8 negativo, TIA1 positivo)

TiA1PerforinaGranzima B

Marcadores de citotoxicidad

CD30 Positivo en todos los trastornos linfoproliferativos CD30 positivos primarios de la piel

PD-1Positivo en la mayoría de los linfomas angioinmunoblásticos (tinción intensa; rosetas alrededor de las células similares a las de Reed-Sternberg), linfomas de células T periféricos NOS de tipo folicular y linfomas T de células medianas-pequeñas CD4+ cutáneos. Abundante en el síndrome de Sézary

TcRgammaTeóricamente negativo en linfomas subcutáneos similares a paniculitis pero positivo en los linfomas cutáneos primarios gamma delta (CD5-), asociados a enteropatías de tipo II o hepatoesplénico

Ki67 Marcador del índice mitótico

EBER1 Algunos linfomas angioinmunoblásticos, todos los linfomas NK/T extranodales de tipo nasal y sus variantes

ALK Linfomas anaplásicos de células grandes ALK positivos

Tdt Linfomas linfoblásticos

CD16 Marcador de los linfocitos NK. Positivo en leucemia de células NK.

CD57 Marcador de los linfocitos NK; negativo en el linfoma T/NK extranodal de tipo nasal

CD25 Positivo en linfoma/leucemia de células T del adulto

FOXP3 Positivo en linfoma/leucemia de células T del adulto

CD43 Marcador general de los linfocitos T pero con frecuente expresión aberrante en linfomas B

CD45RO Marcador general de los linfocitos T

CD103 Positivo en los linfomas T asociados a enteropatía de tipo I

Bcl6Positivo en linfomas de células T periféricos NOS de tipo folicular y linfomas T de células medianas-pequeñas CD4+ cutáneos

CXCL13 Positivo en el linfoma angioinmunoblástico

CD21CD35CD23

Marcadores generales de las células dendríticas foliculares – dibujan arquitectura folicular restante o demuestran disposición perivenular en los linfomas angioinmunoblásticos

EMA (MUC1) Marcador frecuente en linfoma anaplásico ALK+

CD15 Marcador de células de Reed-Sternberg. Presencia ocasional en linfomas T periféricos NOS

CD68 Marcador de histiocitos. Muy útil para valorar la presencia de estas células en linfomas T

Bcl2 Negativo en linfomas anaplásicos ALK+

PAX5Como marcador general de los linfocitos B; leve tinción en casos de linfomas anaplásicos de células grandes ALK negativos

CD10Positivo en algunos casos de linfoma angioinmunoblástico (rosetas alrededor de las células similares a las de Reed-Sternberg) y en los linfomas T de células medias-pequeñas CD4+

Clusterina Presente en los casos de linfomas anaplásicos de células grandes ALK+

I 9 I

CD20

CD3

CD38 ± cadenas ligeras Kappa/Lambda

Glicoforina A

CD71 (receptor de trasferrina)

· Más sensible y específico que la Glicoforina A. · Positivo en precursores eritroides en la médula ósea normal o diseritroyética.

· Positivo en la leucemia eritroblástica. · Disminución en precursores eritroides displásicos. · Positivo en un grupo de tumores de mama con genotipo · luminal (más frecuentemente en carcinoma medular) y de células basales.

Mieloperoxidasa

CD42b o CD61

CD34

CD117

Sarcoma histiocitico Histiocitosis/sarcoma de células de Langerhans

Sarcoma de células dendríticas foliculares

Sarcoma de células dendríticas interdigitantes

CD68 + + más de 50% >50%

CD163 + + escasos >50%

Lisozima + <50% - <30%

CD21 - - + -

CD35 - - + -

Langerina - + - -

CD1a - + - -

S100 variable + escasos +

Fascina - + + +

CD4 + escasos - -

Clusterina - escasos + +

Otros CD33, CD11c D2-40

Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímicade la celularidad de la médula ósea

Panel recomendado para la valoración inmunohistoquímicade las neoplasias de células histiocíticas y dendríticas más frecuentes


I 10 I

ALK/p80 Clon 5A4 MAD-001720QD

· Linfomas anaplásicos T ALK+. · Linfomas B difusos de células grandes ALK+. · Tumores inflamatorios miofibroblásticos. · Adenocarcinomas no microcíticos de pulmón. · Plasmocitomas extramedulares. · Neuroblastomas. · Carcinomas anaplásicos tiroideos y otros más infrecuentes de riñón, esófago, colon y mama.

· Algunos sarcomas (casos raros de rabdomiosarcoma, tumores lipogénicos, sarcoma de Ewing/PNET y leiomiosarcoma).

Clon SP8 MAD-000312QD

Anexina A1 clon 29 MAD-000425QD

BCL10 clon SPM520 MAD-000538QD

BCL2 clon 100/D5 MAD-004002QD

BCL6 clon BL6.02 MAD-004023QD

BOB-1 policlonal MAD-000231QD

· Expresado principalmente en los núcleos de los linfocitos B del centro germinal, con menor intensidad en el manto folicular y de forma dispersa en linfocitos B interfoliculares.

· Positivo en los linfomas B y en las células de tipo L&H de la enfermedad de Hodgkin predominio linfocítico nodular.

· Moderada positividad en el linfoma de Burkitt. · Negativo en las células de Hodgkin y Reed-Sternberg del linfoma de Hodgkin variante clásica y los linfomas T.

· Su sobreexpresión en el mieloma múltiple está asociada con un pronóstico favorable.

Cadena J de las inmunoglobulinas Clon SP105 MAD-000547QD

· Presente en los estadios iniciales de diferenciación de los linfocitos B y se mantiene durante la maduración de los que van a secretar IgM e IgA.

· Una proporción significativa de los depósitos mesangiales de inmunoglobulinas en la nefropatía IgA son diméricas y positivas frente a este anticuerpo.

· Expresión en las células de tipo L&H de la enfermedad de Hodgkin predominio linfocítico nodular.

Listado disponible de anticuerpos frente a antígenos linfoides

I 11 I

Cadena LAMBDA (IHQ+CISH) Clon K22-Y MAD-005078QD IHQ

Cadena KAPPA (IHQ+CISH) Clon A21-Y MAD-005076QD IHQ

Cadherina E Clon EP700Y MAD-000051QD

CD10 Clon 56C6 MAD-002022QD

CD103 Clon EPR4166 MAD-000615QD

CD117 (C-KIT) Clon YR145 MAD-000215QD

CD11b/ITAM Clon EP1345Y MAD-000354QD

CD11c Clon 5D11 MAD-000441QD

CD123 Clon 7G3 MAD-000189QD

CD138 Clon MI-15 MAD-000921QD

CD15 Clon MMA MAD-005151QD

CD15 Clon SP159 MAD-000596QD

CD16 Clon 2H7 MAD-000912QD

CD163 Clon MRQ-26 MAD-000587QD

CD19 Clon MRQ-36 MAD-000920QD

CD1a Clon O10 MAD-001558QD

CD2 Clon 2CO2 MAD-000908QD

CD20 Clon L26 MAD-002037QD

CD21 Clon 2G9 MAD-000380QD


CD23 Clon 1B12 MAD-005339QD

CD25 RECEPTOR ALPHA Clon IL2R.1 MAD-004006QD

CD27 Clon 137B4 MAD-000480QD


CD3 EPSILON Clon EP449E MAD-000325QD

CD3 Clon EP41 MAD-000621QD

CD30 Clon BER-H2 MAD-002045QD

CD33 Clon PWS44 MAD-000135QD

CD34 Clon QDEND/10 MAD-001613QD

CD35 Clon RLB25 MAD-002053QD

CD38 Clon 38C03 MAD-004033QD


CD42b Clon 42C01 MAD-000125QD

CD43 Clon DF-T1 MAD-000606QD

CD45 LCA Clon 2B11&PD7/26 MAD-002066QD

CD45 RA Clon 4KB5 MAD-000544QD

CD45 RB Clon MEM-55 MAD-000519QD

CD45 RO Clon UCLH-1 MAD-005035QD


I 12 I


CD54/ICAM-1 Clon 23G12 MAD-002082QD

CD56/NCAM-1 Clon 56C04 MAD-000218QD

CD57 Clon NK1 MAD-002084QD

CD61 Clon 2F2 MAD-000133QD

CD68 Clon KP-1 MAD-002097QD


CD71 / RECEP. TRANSFERRINA Clon 10F11 MAD-000528QD

CD79a Clon SP18 MAD-000320QD


CDK1 Clon A17.1.1 MAD-000232QD

CDK2 Clon 2B6 MAD-000142QD

Ciclina D1 Clon SP4 MAD-000321QD

Ciclina E Clon 13A3 MAD-005433QD

C-MYC Clon Y69 MAD-000487QD

CLUSTERINA Clon 7D1 MAD-000152QD

· Marcador inmunohistoquímico específico de los tumores de células dendríticas foliculares ya que no se expresa en el resto de neoplasias de células dendríticas (histiocitosis de células de Langerhans y tumores de células dendríticas interdigitantes).

· Está sobrexpresada en carcinomas de mama, colon, páncreas y próstata.

CXCL13 policlonal MAD-000275QD

· Expresado en células foliculares dendríticas de ganglios linfáticos, amígdala y otros territorios linfoides.

· Identifica los linfomas T angioinmunoblásticos facilitando su diagnóstico diferencial con el linfoma T periférico.

· Facilita el diagnóstico de los linfomas B primarios del sistema nervioso central (el tejido nervioso no expresa esta quimiocina).

· Colabora en el diagnóstico de los linfomas MALT y la gastritis crónica secundaria a infección por Helicobacter pylori así como en biopsias de pacientes con artritis reumatoide y síndrome de Sjögren.

· Herramienta útil para evaluar el grado de actividad de la afectación renal en lupus eritematoso sistémico.

EMA Clon E29 MAD-001100QD

I 13 I

Fascina Clon FCN01 MAD-000250QD

· Expresada fundamentalmente por las células reticulares, incluyendo a las dendríticas medulares del timo, las células reticulares interdigitantes y las células foliculares dendríticas de los ganglios reactivos y la pulpa blanca del bazo.

· Los linfocitos, células mieloides en general y las células plasmáticas son negativos.

· Las células de Reed-Sternberg en el linfoma de Hodgkin son positivas para tinción con fascina.

· El virus de Epstein-Barr puede inducir la expresión de fascina en células B.

· Su expresión en diversas neoplasias epiteliales está asociada con peor pronóstico.

FOXP3 Clon SP97 MAD-000536QD

· Importante papel en la regulación de la respuesta inmune. · En neoplasias mamarias, prostáticas, pancreáticas y melanocíticas la presencia de numerosas células positivas está asociada a peor respuesta a la quimioterapia.

· Inversamente, su sobreexpresión en carcinomas de cabeza y cuello está correlacionada con tumores de crecimiento locorregional limitado.

· Los linfomas MALT gástricos asociados a infección por Helicobacter pylori con un mayor número de células FOXP3 positivas muestran mejor respuesta al tratamiento antibacteriano.

· En gliomas de bajo grado la expresión de FOXP3 es mayor que en glioblastomas.

GATA3 Clon L50-823 MAD-000632QD

Glicoforina A Clon GA-R2 MAD-000568QD

Glicoforina A Clon JC159 MAD-000819QD

Granzima B Clon GZB01 MAD-000406QD

Hemoglobina A Clon EPR3608 MAD-000053QD

IgA policlonal MAD-005025QD

IgD policlonal MAD-005073QD

IgE policlonal MAD-000163QD

IgG policlonal MAD-005027QD


I 14 I

IgG4 Clon MRQ-44 MAD-000579QD

· Imprescindible en el diagnóstico de enfermedades vinculadas con la secreción aumentada de IgG4 tales como enfermedad de Mikulicz, síndrome de Sjögren, pancreatitis autoinmune de tipo 1, colangitis esclerosante, sialoadenitis crónica esclerosante de la glándula submandibular o tumor de Küttner, tiroiditis con hipotiroidismo incluyendo la tiroiditis de Riedel, fibrosis retroperitoneal y pseudotumores inflamatorios.

· Algunos casos de enfermedad de Castleman con buena respuesta a los corticoides pueden ser considerados linfadenopatías relacionadas con IgG4.

· La positividad diagnóstica incluye la presencia de más de 30-50 células plasmáticas positivas por CGA.

IgM policlonal MAD-005029QD

Ki67 Clon SP6 MAD-000310QD

Langerina Clon 12D6 MAD-000167QD

· Proteína codificada por el gen CD207 y expresada exclusivamente por las células de Langerhans de la epidermis y mucosas.

· Herramienta útil para distinguir las células de Langerhans de las restantes células dendríticas.

Lisozima policlonal MAD-001200QD

Marcador Macrófagos Clon MAC387 MAD-005047QD

Antígeno histocompatibilidad (MHC) de clase I Clon EPR1394Y MAD-000472QD

Mieloperoxidasa policlonal MAD-005857QD

MUM1 Clon MUM1p MAD-000470QD

· MUM1/IRF4 se expresa en centrocitos maduros y en linfocitos B postgerminales comprometidos en la diferenciación hacia células de memoria o plasmáticas.

· También está expresado en melanocitos normales. · Los mielomas múltiples son invariablemente positivos. · La expresión de MUM1 en los linfomas de células B junto con CD10 y Bcl-6 representa la base de la clasificación de Hans para los linfomas difusos de células grandes B. Su positividad en estos casos sugiere fenotipo no de centro germinal.

· Positivo en más del 70% de los linfomas de células grandes B variantes mediastínica y de tipo “leg”.

· Los linfomas primarios asociados a derrames cavitarios así como la mayoría de los linfomas primarios del sistema nervioso cerebral son MUM1 positivos.

· Positivo en aproximadamente el 20% de los linfomas del área marginal; por el contrario, los linfomas de pequeños linfocitos presentan positividad heterogénea.

· También se expresa en las células de Reed-Sternberg de la enfermedad de Hodgkin clásica mientras que es negativo en las células L&H de la variante nodular de predominio linfocítico.

I 15 I

OCT2 policlonal MAD-000236QD

· Expresado principalmente en los núcleos de los linfocitos B del centro germinal, con menor intensidad en el manto folicular y de forma dispersa en los linfocitos B interfoliculares.

· Positivo en los linfomas B y en las células de tipo L&H de la enfermedad de Hodgkin predominio linfocítico nodular.

· Moderada positividad en el linfoma de Burkitt. · En general es negativo en las células de Hodgkin y Reed-Sternberg del linfoma de Hodgkin variante clásica y los linfomas T.

· Una sobreexpresión en mieloma múltiple está asociada a un peor pronóstico.

Parvovirus B19 Clon R92F6 MAD-000476QD

· Anticuerpo que reconoce específicamente células eritroides infectadas por Parvovirus B19 y que junto con técnicas moleculares por PCR es de utilidad en el diagnóstico de hidrops fetal no inmune.

· En pacientes inmunodeprimidos el Parvovirus B19 puede producir infecciones oportunistas con afectación de la médula ósea y depleción de la celularidad eritroide.

PAX5 policlonal MAD-005661QD

· Marcador pan B presente incluso en la recidiva de linfomas B tratados con anticuerpos anti CD20 (Rituximab) .

· Leve tinción nuclear en las células de Reed-Sternberg. · Facilita el diagnóstico del linfoma linfoplasmacítico y del linfoma del área marginal con diferenciación plasmocitoide (positivo) frente al diagnóstico de plasmocitoma (negativo).

· Intensa positividad en el linfoma de Burkitt. · Positivo en carcinomas de células de Merkel y algunos carcinomas neuroendocrinos de alto grado de malignidad .

PD-1 Clon MRQ-22 MAD-000352QD

· Marcador de los linfocitos T ayudantes de los centros germinales.

· Muy útil en el diagnóstico de los linfomas T angioinmunoblásticos.

· Contribuye a diferenciar los linfomas primarios cutáneos de células medianas/pequeñas CD4 positivos y los pseudolinfomas T cutáneos (normalmente PD-1 positivos) de otros tipos de linfomas T cutáneos (normalmente PD-1 negativos).

· Está expresado en más del 50% de las células tumorales del síndrome de Sézary (eritrodermia, adenopatías generalizadas y linfocitos T clonales con núcleos cerebriformes).


I 16 I

Perforina Clon 5B10 MAD-000182QD

PU-1 Clon EPR3159Y MAD-000052QD

· PU.1 es un factor de trascripción restringido al sistema hematopoyético y expresado en la serie mieloide (monocitos, histiocitos, y células dendríticas) y los linfocitos B.

· El linfoma de Hodgkin predominio linfocitico nodular es consistentemente positivo para PU.1 a diferencia del linfoma de Hodgkin clásico.

· Marcador adecuado para identificar neoplasias cutáneas originadas en histiocitos o de células dendríticas.

Retinoblastoma/pRb Clon 1F8 MAD-000900QD

SOX-11 Clon MRQ-58 MAD-000581QD

T-BET/T-box Clon 4B10 MAD-000492QD

· T-bet se expresa en todos los linfomas originados a partir de linfocitos T maduros, sobre todo en los linfomas T periféricos, y es constantemente negativo en los linfomas de sus precursores (linfomas linfoblásticos).

· La mayoría de los linfomas NK/T de tipo nasal expresan T-bet a nivel nuclear de forma independiente a la presencia o no del virus de Epstein-Barr o de reordenamiento clonal del receptor TCR.

· Entre las neoplasias derivadas de los linfocitos B, T-bet puede estar expresado en linfomas del área marginal, leucemia linfoblástica B y leucemia de células peludas.

TCL-1 Clon EP105 MAD-000573QD

· En la hiperplasia linfoide reactiva está expresado en la mayoría de los linfocitos B del manto folicular y en escasos linfocitos T del área interfolicular.

· Además está presente en numerosas neoplasias de células B como linfomas linfoblásticos, leucemia linfática crónica, linfomas del manto, linfomas foliculares y linfomas cutáneos primarios.

· Su expresión en neoplasias con origen conocido en los linfocitos T es específica pero no sensible para la leucemia prolinfocítica de células T.

· Junto con CD38 se sobreexpresa en los linfomas de Burkitt con translocación del gen MYC.

TdT Clon SEN28 MAD-000909QD

TIA1 Clon 2G9 MAD-007056QD

TRAF1 Clon H3 MAD-000438QD

Triptasa Mastocitaria Clon AA1 MAD-005020QD

Proteína LMP-1 del Virus de Epstein-Barr Clon CS1-CS4 MAD-001619QD

I 17 I

Virus herpes simplex de tipo 8 Clon 13B10 MAD-000266QD

ZAP-70 Clon 2F3.2 MAD-000353QD

· Se expresa en linfocitos T y células NK. · Su presencia se encuentra correlacionada con el estatus de hipermutación somática de la región variable (IGHV) del gen de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas en pacientes con leucemia linfocítica crónica (LLC) y se asocia a mayor progresión de la leucemia y pobre respuesta al tratamiento.

· Positividad adicional en casos aislados de otros tipos de linfomas B y T.


I 18 I

Técnicas Moleculares

CISH ( Hibridación in situ cromogénica)

EBER1 MAD-001893QK

· Linfomas y trastornos linfoproliferativos en pacientes inmunodeprimidos

· Neoplasias mesenquimales · Neoplasias epiteliales

· La expresión restringida de cadenas ligeras kappa o lambda sugiere monoclonalidad y un proceso neoplásico. · Importante apoyo diagnóstico de linfoma frente a hiperplasia linfoide u otras linfadenitis reactivas. · Importante herramienta en el diagnóstico de discrasias y leucemias de células plasmáticas, mieloma múltiple o plasmocitomas.

· Hibridación en 1 hora · Duración de la técnica 2h 30 min. · Método manual o automatizado · Sensible y específico

CADENA LIGERA LAMBDA MAD-001894QK CADENA LIGERA KAPPA MAD-001895QK

I 19 I

Kits para análisis molecular por PCR del reordenamiento clonalde los genes de las inmunoglobulinas (Ig) y receptores de los linfocitos T (TCR)

KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR DEL GEN IgH MAD-003994BP (20 DETERMINACIONES)

· Sistema para la detección de clonalidad en procesos linfoproliferativos de células B, mediante la amplificación de los segmentos reordenados VDJ de la región hipervariable de la cadena pesada de las inmunoglobulinas (IgH), empleando múltiples cebadores consenso que hibridan con regiones conservadas dentro de dichos genes.

La detección de clonalidad mediante análisis molecular por PCR de reordenamientos de los genes de las inmunoglobulinas (Ig) y TCR, es un instrumento de gran valor en el diagnóstico de los procesos linfoproliferativos B y T y representa en muchas ocasiones herramientas claves para el diagnóstico.

Procesos Linfoproliferativos de Células B

· Kit para análisis molecular del gen IgH


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KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR DEL GEN TCRgamma MAD-003994TP (20 DETERMINACIONES)

· El gen TCRgamma es una diana preferencial para análisis de clonalidad T, ya que se reordena muy tempranamente durante el desarrollo linfoide T, probablemente justo después de TCRdelta, tanto en los precursores TCRγδ como TCRαβ.

· Este kit permite detectar la clonalidad en procesos linfoproliferativos de origen T, mediante la amplificación de los segmentos reordenados VJ del gen TCRgamma. empleando múltiples cebadores dirigidos frente a regiones conservadas que flanquean los segmentos V y J.

Procesos Linfoproliferativos de Células T

· Kit para análisis molecular del gen TCRgamma

KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR DE LAS CADENASLIGERAS IgK-IgL

MAD-003999M (20 DETERMINACIONES)

· El estudio complementario de reordenamientos de las cadenas ligeras kappa y lambda de las inmunogobulinas (IgK e IgL respectivamente) permitiría mejorar la sensibilidad de detección de clonalidad B, resultando esencial su análisis en la rutina diagnóstica de estudio de clonalidad de linfomas B.

· Este kit permite la amplificación de los segmentos reordenados Vk-Jk y de los dos tipos de reordenamientos Kde (Vk-Kde e intrón-RSS-Kde) para IgK, así como segmentos reordenados Vλ-Jλ de IgL, mediante múltiples cebadores consenso que hibridan con regiones conservadas dentro de dichos genes.

· Kit para análisis molecular de las cadenas ligeras IgK-IgL

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KIT PARA ANÁLISIS MOLECULAR GEN TCRbeta MAD-003993TP (20 DETERMINACIONES)

· El gen TCRβ se encuentra reordenado en todas las células con fenotipo TCRαβ, y también en muchas TCRγδ y en consecuencia el análisis por PCR de los reordenamientos del gen TCRβ representa un estudio complementario a realizar cuando exista una sospecha razonable de linfoma de células T con resultados de PCR-TCRγ no concluyentes.

· La combinación de ambos estudios permitiría la detección de clonalidad T en un elevado porcentaje de las muestras de linfomas de células T.

· Este kit permite detectar la clonalidad en procesos linfoproliferativos de origen T, mediante la amplificación de los segmentos reordenados VβJβ y DβJβ del gen TCRβ. Dada la diversidad de secuencias de estos genes TCR, se emplean múltiples cebadores dirigidos frente a regiones conservadas que flanquean los segmentos V, D y J, con objeto de detectar el mayor número posible de reordenamientos clonales.

Notas

· Todas las mezclas de amplificación se presentan en formato “monotest” e incluyen la enzima Phire® Hot Start II ADN Polimerasa y controles positivos de ADN clonal y policlonal.

· Todas las mezclas de PCR incluyen cebadores marcados en su extremo 5’ con el fluorocromo 6-FAM, lo que permite hacer un análisis automático de fragmentos por electroforesis capilar (compatible con ABI PRISM® 310 Genetic Analyzer, AB 3130, 3130xl, 3500 y 3500xL Genetic Analyzers).

· Todas las amplificaciones se pueden realizar con un único programa en el termociclador, permitiendo su análisis simultáneo.

· No obstante la técnica se puede realizar tanto en geles de agarosa como de poliacrilamida disponibles en el catalogo de Máster Diagnostica SL en formato “listos para

uso” y que incluyen además todos los reactivos necesarios para llevar a cabo la electroforesis. (MAD-003980M y MAD-003990M respectivamente).

· Kit para análisis molecular del gen TCRbeta


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Referencias

· Cho RJ, McCalmont TH, Ai WZ, Fox LP, Treseler P, Pincus LB. Use of an expanded immunohistochemical panel to distinguish cutaneous Hodgkin lymphoma from histopathologic imitators. J Cutan Pathol. 2012 Jun;39(6):651-8

· Herbeck R, Teodorescu Brînzeu D, Giubelan M, Laz�r E, Dema A, Ioni�� H. B-cell transcription factors Pax-5, Oct-2, BOB.1, Bcl-6, and MUM1 are useful markers for the diagnosis of nodular lymphocyte predominant Hodgkin lymphoma. Rom J Morphol Embryol. 2011;52(1):69-74

· Toman I, Loree J, Klimowicz AC, Bahlis N, Lai R, Belch A, Pilarski L, Reiman T. Expression and prognostic significance of Oct2 and Bob1 in multiple myeloma: implications for targeted therapeutics. Leuk Lymphoma. 2011 Apr;52(4):659-67

· Valbuena JR, Herling M, Admirand JH, Padula A, Jones D, Medeiros LJ. T-cell prolymphocytic leukemia involving extramedullary sites. Am J Clin Pathol. 2005 Mar;123(3):456-64

· Rodig SJ, Vergilio JA, Shahsafaei A, Dorfman DM. Characteristic expression patterns of TCL1, CD38, and CD44 identify aggressive lymphomas harboring a MYC translocation. Am J Surg Pathol. 2008 Jan;32(1):113-22

· Hans CP, Weisenburger DD, Greiner TC, Gascoyne RD, Delabie J, Ott G, Müller-Hermelink HK, Campo E, Braziel RM, Jaffe ES, Pan Z, Farinha P, Smith LM, Falini B, Banham AH, Rosenwald A, Staudt LM, Connors JM, Armitage JO, Chan WC. Confirmation of the molecular classification of diffuse large B-cell lymphoma by immunohistochemistry using a tissue microarray. Blood. 2004 Jan 1;103(1):275-82

· Taylor CR. IHC and the WHO classification of lymphomas: cost effective immunohistochemistry using a deductive reasoning “decision tree” approach. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2009 Oct;17(5):366-74

· Taylor CR. The WHO classification of lymphomas: cost-effective immunohistochemistry using a deductive reasoning “decision tree” approach: part II: the decision tree approach: diffuse patterns of proliferation in lymph nodes. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2009 Dec;17(6):470-82

· Kremer M, Quintanilla-Martínez L, Nährig J, von Schilling C, Fend F. Immunohistochemistry in bone marrow pathology: a useful adjunct for morphologic diagnosis. Virchows Arch. 2005 Dec;447(6):920-37

· Orazi A. Histopathology in the diagnosis and classification of acute myeloid leukemia, myelodysplastic syndromes, and myelodysplastic/myeloproliferative diseases. Pathobiology. 2007;74(2):97-114

· Wilkins BS. Pitfalls in lymphoma pathology: avoiding errors in diagnosis of lymphoid tissues. J Clin Pathol. 2011 Jun;64(6):466-76

· Boyd SD, Natkunam Y, Allen JR, Warnke RA. Selective immunophenotyping for diagnosis of B-cell neoplasms: immunohistochemistry and flow cytometry strategies and results. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2013 Mar;21(2):116-31

· Jaffe ES, Harris NL, Stein H, Isaacson PG. Classification of lymphoid neoplasms: the microscope as a tool for disease discovery. Blood. 2008 Dec 1;112(12):4384-99

· Harris NL. Shades of gray between large B-cell lymphomas and Hodgkin lymphomas: differential diagnosis and biological implications. Mod Pathol. 2013 Jan;26 Suppl 1:S57-70

· Said JW. Aggressive B-cell lymphomas: how many categories do we need? Mod Pathol. 2013 Jan;26 Suppl 1:S42-56

· Jaffe ES, Nicolae A, Pittaluga S. Peripheral T-cell and NK-cell lymphomas in the WHO classification: pearls and pitfalls. Mod Pathol. 2013 Jan;26 Suppl 1:S71-87

· Quintanilla-Martinez L, Jansen PM, Kinney MC, Swerdlow SH, Willemze R. Non-mycosis fungoides cutaneous T-cell lymphomas: report of the 2011 Society for Hematopathology/European Association for Haematopathology workshop. Am J Clin Pathol. 2013 Apr;139(4):491-514

· Song SX, Willemze R, Swerdlow SH, Kinney MC, Said JW. Mycosis fungoides: report of the 2011 Society for Hematopathology/European Association for Haematopathology workshop. Am J Clin Pathol. 2013 Apr;139(4):466-90

· Pileri SA, Grogan TM, Harris NL, Banks P, Campo E, Chan JK, Favera RD, Delsol G, De Wolf-Peeters C, Falini B, Gascoyne RD, Gaulard P, Gatter KC, Isaacson PG, Jaffe ES, Kluin P, Knowles DM, Mason DY, Mori S, Müller-Hermelink HK, Piris MA, Ralfkiaer E, Stein H, Su IJ, Warnke RA, Weiss LM. Tumours of histiocytes and accessory dendritic cells: an immunohistochemical approach to classification from the International Lymphoma Study Group based on 61 cases. Histopathology. 2002 Jul;41(1):1-29

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