CALIFICACIÓN DE EQUIPOS HPLC Y VALIDACIÓN DE metodologias analiticas

7/27/2019 CALIFICACIN DE EQUIPOS HPLC Y VALIDACIN DE metodologias analiticas

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Universidad de ChileFacultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas

Departamento de Ciencia y Tecnologa FarmacuticaLaboratorios Bayer S.A.

CALIFICACIN DE EQUIPOS HPLC Y VALIDACIN DEMETODOLOGAS ANALTICAS

Validacin de metodologa Analtica de Aspirina 500mg

Unidad de Prctica Prolongada para optar al ttulo de Qumico-Farmacutico LVARO ANDR VSQUEZ ORTZ

Mara Teresa Andonaegui A Gustavo Parra N.Qumico Farmacutico Qumico FarmacuticoProfesor Gua Monitor de Prctica

Santiago Chile2006


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Dedicatoria

No existen palabras capaces de retribuir el continuo e infinito amor, apoyo,comprensin y tiempo entregado por mi familia sin la cual, no me hubiese sido posible

avanzar en este gran tablero que llamamos vida. Tengo el corazn hinchado dealegra, de dicha y serenidad ya que se que puedo contar incondicionalmente con ellos,

es por esto que dedico este trabajo a ellos como una pequea forma de retribuirles.No quisiera dejar de lado a todas esas personas que han marcado con fuego mi alma,

entregando su amor, amistad, consejos y buena voluntad.


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Agradecimientos

Estoy profundamente agradecido a la profesora Mara Teresa Andonaegui su entregade conocimientos, preocupacin y oportunidades otorgadas desinteresadamente,

adems del tiempo, apoyo y afecto que me entrego cuando ms lo necesit. Agradezco a Laboratorios Bayer S.A. el recibirme y permitir llevar a cabo este trabajo,al Sr. Q.F. Gustavo Parra N. por la ayuda que me presto, sus conocimientos, apoyo ytiempo y al gran equipo que con el trabaja, gente distinta entre si, pero con el comn

denominador de ser grandes y hermosas personas.


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Tabla de Contenido

Portada iDedicatoria ii

Agradecimientos iiiTabla de contenido ivndice de Ilustraciones vindice de Anexos vii

Resumen viiiIntroduccin 1Resea de la pasanta por Laboratorios Bayer Chile 7

Actividades desarrolladas durante la Prctica Prolongada 7Objetivos 8Objetivo general 8Objetivo especfico para la Calificacin 8Objetivo especfico para la Validacin 10

Metodologa 11Materiales y Mtodos para la calificacin 12

Descripcin del rea 12Requisitos previos para la Calificacin 12Mtodo utilizado para calificar los equipos HPLC 12

Materiales y Mtodos para la Validacin 13Requisitos previos para la Validacin 13Materiales y mtodos utilizados para la Validacin 13

Protocolo para la calificacin de los HPLC 14Procedimiento para la calificacin de los HPLC 16Procedimiento de Calificacin de Instalacin 16Procedimiento de Calificacin Operacional 19Procedimiento de Calificacin de Funcionamiento 22

Requisitos que deben cumplir los Equipos HPLC 25Protocolo de Validacin de la Metodologa Analtica 26

Breve descripcin del proceso a validar 26


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Tipo de Validacin 26Razn de la Validacin 26Responsables de la Validacin 27Revisin y aprobacin del Protocolo de Validacin 27

Metodologa 28 Anlisis a realizar 28Condiciones de anlisis 29Procedimiento de anlisis 29

Criterios de aceptacin para la Validacin 30Pruebas de adecuacin visual del sistema 30Lmite de deteccin 30Linealidad 30Precisin 30

Resultados y discusin para la Calificacin 31Conclusin de la calificacin 39Resultados y discusin para la Validacin 40

Conclusin de la validacin 47Conclusiones final 48Bibliografa 49


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ndice de ilustraciones

Figura N1 1C1 Cromatograma de la primera inyeccin de prueba (HPLC N3) 37C3 Resultados de la prueba HPLC N3 38C4 Cromatograma Blanco (Aspirina) 40C5 Cromatograma Lmite de cuantificacin (AS) 41C6 Cromatograma del estndar (AAS) 42

C7 Cromatograma Muestra (Aspirina 500mg) 43


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ndice de Anexos

Glosario 50


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Resumen

El presente trabajo trata de cmo se realiz la validacin de la metodologa analtica decontenido de dos medicamentos que actualmente se encuentran comercializados en elmercado nacional. Esta metodologa est validada y es utilizada actualmente en otrafilial de Bayer S.A. por lo que se hizo necesario validarla con las condiciones de trabajodel Laboratorio de Control de Calidad de Bayer S.A. Chile.Para esto fue necesaria la calificacin de los equipos en que se realiz la validacin de

las metodologas. Las calificaciones realizadas fueron: Calificacin de Instalacin (IQ),la Calificacin Operacional (OQ) y de la Calificacin Desempeo (PQ), las que sedesarrollaron en los equipos de Cromatografa Lquida de Alta Eficiencia (HPLC) en loscuales se realiz la validacin de la metodologa analtica.Esta validacin fue necesaria para garantizar que las metodologas de anlisis de losmedicamento a validar, son aplicables al Laboratorio de Control de Calidad, ademsfue imprescindible aplicar los criterios establecidos por este laboratorio (POSs), para lavalidacin del mtodo.

Antes de dar comienzo a las calificaciones de los equipos, y posterior validacin de lasmetodologas analticas, se realiz una revisin de la documentacin, tanto de losequipos a calificar como de los materiales e instrumentos que tambin seran utilizadosdurante la calificacin y validacin, comprobndose que los instrumentos a utilizar seencontrasen calibrados y contasen con sus respectivos certificados y adems severific que los estndares utilizados posean sus respectivos certificados de anlisis.Para comenzar la calificacin y posterior validacin fue necesario definir los puntoscrticos a controlar tanto en los equipos como tambin los puntos crticos de la

metodologa analtica, adems de determinar la factibilidad tcnica de los HPLC en sufuncionamiento para la realizacin de la validacin.La validacin de la metodologa se acot a las especificaciones de identificacin ycuantificacin del principio activo que compone al medicamento y no al anlisiscompleto de las especificaciones que ste debe cumplir.Los resultados obtenidos junto con los registros de la calificacin del equipo, permitenaseverar que los equipos HPLC se encuentran calificados para la realizacin, en ellos,de pruebas de las metodologas analticas.


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Con los datos obtenidos al final de las validaciones de las metodologas analticas delos medicamentos que se realizaron, se puede concluir que los mtodos de anlisis delos medicamentos analizados son factibles de realizar en los equipos, y se encuentranvalidados debido a que cumplen con los criterios de aceptacin establecidos por elLaboratorio de Control de Calidad.


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Introduccin

En esta primera dcada del siglo XXI, enormes avances en el bienestar humanocoexisten con privaciones extremas. En la salud mundial somos testigos de losbeneficios que estn aportando los nuevos medicamentos y tecnologas.La comunidad internacional cuenta con tecnologas y recursos econmicos suficientespara hacer frente a la mayora de los desafos sanitarios, pero hoy da muchossistemas de salud nacionales son endebles, indiferentes a las necesidades, no

equitativos e incluso inseguros. Lo que se necesita ahora es voluntad poltica paraponer en marcha planes nacionales, junto con medidas de cooperacin internacionalpara coordinar recursos, aprovechar los conocimientos y desarrollar sistemassanitarios robustos que traten y prevengan las enfermedades y promuevan la salud dela poblacin. Para superar los escollos que obstaculizan el logro de los objetivosnacionales y mundiales en materia de salud es fundamental formar trabajadoressanitarios competentes, motivados y bien respaldados. (1)

Como es posible de apreciar en la Figura 1, un aumento de trabajadores de la saludest estrechamente relacionado con la sobrevida de la poblacin y si estostrabajadores se encuentran bien capacitados la pendiente es an mayor. Lasupervivencia de la poblacin en general sigue esta tendencia, si cuenta con una


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poltica gubernamental, una autoridad sanitaria idnea, recursos y con profesionalessanitarios capaces de velar por la salud de la poblacin.En este contexto el profesional Qumico Farmacutico se encuentra suficientementecapacitado para atender y responder a las necesidades de la poblacin, la que cadada se encuentra ms vida de informacin y preocupada por la calidad de losmedicamentos que consume.Una pregunta que parece lgica plantear respecto a la morbilidad, mortalidad y uso engeneral de los medicamentos es la siguiente: quin es el responsable del uso

adecuado de los medicamentos? Tradicionalmente el mdico ha asumido laresponsabilidad del tratamiento farmacolgico sus pacientes. Sin embargo, la evolucinde los sistemas sanitarios en todo el mundo y los diversos estilos de vida de losconsumidores hacen que sea extremadamente difcil, si no imposible, que un mdicoasuma por s solo esta tarea cada vez ms compleja. Evidentemente, los mdicosdisponen cada vez de menos tiempo para dedicarlo a los pacientes, por lo que eltiempo necesario para afrontar los problemas de los medicamentos, reales opotenciales, se est reduciendo tambin (2).

Es rol fundamental del Profesional Qumico Farmacutico el asumir la responsabilidadde todos los eventos relacionados con los medicamentos, desde su gnesis hasta quees administrado al paciente (y si no es as, hasta su destruccin) pasando por laproduccin, almacenaje, distribucin, traslado y posterior venta del medicamento.

Adems de la obligacin y del deber que tiene, que es el de complementar al mdico yayudar en la orientacin a los pacientes, acerca del uso y/o consumo y cuidados quesiempre deben tener los medicamentos.Segn donde se encuentre ejerciendo el Qumico Farmacutico con respecto a la

produccin o elaboracin de un medicamento, se puede sealar como una de lasdiferencias ms notables en la preparacin de un medicamento en una farmacia y anivel industrial, es que en la primera, todas las operaciones son llevadas a cabo o a lomenos controladas por un Qumico Farmacutico, mientras que a nivel industrial lasoperaciones son en su mayora llevadas a cabo por operarios bajo la supervisin deun profesional (3). Es por esto, que los Qumicos Farmacuticos tienen una granresponsabilidad frente a las Autoridades Sanitarias locales, pero ms importante queello es la responsabilidad de velar por la buena calidad de los medicamentos.


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El Qumico Farmacutico que ejerce en la industria farmacutica se ha mantenido y semantiene en una posicin privilegiada, debido posiblemente al medio en que sedesempea. Sus funciones se mantienen y experimentan pocos cambios con eltiempo, a pesar que en los ltimos aos la mayora de las grandes compaasfarmacuticas transnacionales han cerrado sus plantas de produccin, dejando msreducido el campo para el Qumico Farmacutico (4).

A pesar de esto, la importancia y el valor del Qumico Farmacutico en los LaboratoriosFarmacuticos internacionales, no podr ser sustituido ya que contina cumpliendo y

ejerciendo labores de gran importancia en todos los aspectos que tienen relacin conla calidad de los medicamentos.Una pregunta muy importante que surge es: Quin asegura y como se asegura lacalidad de los medicamentos? Aparentemente puede verse muy simple, pero enrealidad presenta una complejidad tremenda responder el como a cabalidad, debidoal gran nmero de aristas que tiene ligada intrnsecamente esta pregunta. Pararesponder l quien, debemos pensar en un profesional que tenga slidosconocimientos en medicamentos, y quien ms apto que el Qumico Farmacutico, por

lo tanto es el, quien debe asegurar la calidad del medicamento, y no tan solo en unaocasin sino que en diferentes instancias y cada una independientes entre si, ya seaen el desarrollo de la formulacin, la produccin del medicamento, el Control deCalidad del medicamento, etc.

Ahora, para responder el cmo se asegura la buena calidad de los medicamentos sedebe conocer las Buenas Practicas de Manufactura (GMP siglas del ingles). Estastienen sus orgenes en Estados Unidos (1962) con la finalidad de crear una ley deproteccin al consumidor, con esta nueva reforma todos los establecimientos

farmacuticos deban registrarse ante la Food and Drug Administration (FDA), lo quepermiti a esta agencia actualizar el registro de los fabricantes de medicamentos einspeccionarlos cada dos aos.En 1963, la FDA public una reglamentacin que estableca requerimientos especficospara la elaboracin de medicamentos, primeras GMP, las que se divulgaron por todo elmundo, en un comienzo se tomaron como una recomendacin til de carcter prctico,sin fuerza ni efecto legal, slo interpretaba la responsabilidad del QumicoFarmacutico frente al medicamento (Cdigo de tica profesional). En el ao 1973 y


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debido a demandas presentados por la FDA ante las cortes, a algunas farmacuticas,la Corte Suprema de Justicia de los Estados Unidos, fall a favor de la FDA. A partir deeste fallo toda normativa adoptada por la FDA debera ser considerada con carcter yfuerza legal, por lo que todo medicamento que se fabricase fuera de estas normassera considerado como un medicamento adulterado. Por lo tanto la FDAresponsabiliz a los fabricantes de la calidad de sus productos y les exigi desarrollar procedimientos de manufactura y aseguramiento de la calidad para cada uno de ellos(3).

Entonces, las Buenas Prcticas de Manufactura (GMP) son un amplio rango deconceptos de Aseguramiento de Calidad que cubren todos los temas que individual ocolectivamente tienen influencia en la calidad de un producto. Es la suma de lasactividades llevadas a cabo para asegurar que los productos medicinales y losdispositivos mdicos para uso humano y animal son de la calidad requerida para suuso propuesto.Dentro de las GMP se encuentra contemplado un captulo o elemento de calidad decalificacin y validacin. Este elemento de Calidad trata de los requerimientos GMP

relativos a la calificacin de los equipos para la manufactura y control y utilitarios, ascomo de la validacin de mtodos analticos, procesos de manufactura, procesos delimpieza y sistemas computarizados (5).Con respecto a la calificacin se puede decir que se trata del establecimiento deevidencia documentada de las instalaciones, los sistemas utilitarios y otrosequipamientos tcnicos incluidos los sistemas computarizados han sido correctamenteencargados y que funcionan en forma confiable, dentro del rango especificado deoperacin. La calificacin de los equipos da los elementos para la validacin de

procesos.La calificacin consta de 4 procedimientos bsicos: Calificacin de Diseo (DQ) Se realiza slo a equipos nuevos Calificacin de Instalacin (IQ). Debe establecer por medio de evidencia objetiva,

que todos los aspectos claves del equipo y los necesarios para la instalacin, seencuentran conformes con la especificacin aprobada y las recomendacionesdadas por el fabricante.


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Calificacin de la Operacin (OQ). Debe demostrar que el equipo o la maquinariainvolucrada en el proceso en el estudio, opera como se defini en el diseo ydeterminar los valores ptimos de operacin para cada una de sus variables decontrol.

Calificacin del Funcionamiento (PQ). Corresponde al desafo al sistema encondiciones operacionales y en la situacin ms desfavorable para demostrar sufuncionamiento correcto y constante, con la aplicacin de las herramientas deldiseo estadstico de experimentos y del control estadstico de procesos para la

determinacin del ajuste ptimo de las variables de control. En otras palabraspodemos decir que la calificacin de funcionamiento corresponde a la validacin delproceso realizado por el equipo (6).

Acabamos de de ver a grandes rasgos lo que es la calificacin y en que consta, ahoraveremos aspectos generales de la validacin.La validacin es la accin documentada que demuestra que cualquier procedimiento,proceso o actividad conducir consistentemente a los resultados esperados. Esto

incluye la calificacin de sistemas y equipamiento.Como parte de los programas de calidad o del plan de calidad o de la poltica de lasempresas, se estn desarrollando o implementando nuevas metodologas y/o procesosenmarcado en las mejoras continuas, y para cumplir este fin es que todo nuevo mtododebe validarse, para demostrar documentadamente su idoneidad. Si el mtodo no esnuevo y se utiliza rutinariamente, entonces no es necesario el iniciar una validacindesde cero, por lo que para estos casos se puede definir una validacin retrospectivabasada en datos acumulados de produccin, pruebas y de control, donde se pueden

combinar nuevos criterios de validacin con la experiencia adquirida, o se puededesarrollar anlisis estadsticos de los registros arrojados por el mtodo durante eltiempo en que se ha utilizado. En contraposicin a este tipo de validacin se encuentrala validacin prospectiva que se desarrolla con un producto nuevo o producto hechobajo un proceso de fabricacin revisado, donde las revisiones pueden afectar lascaractersticas del producto. Por ltimo, se puede realizar la validacin concurrente quees utilizada cuando no hay datos disponibles del proceso y se lleva a cabo durante elproceso (7).


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En muchos casos un mtodo analtico es desarrollado y validado por un grupo detrabajo, tpicamente el Laboratorio de Desarrollo analtico y aplicado a otro grupo, comopor ejemplo el Laboratorio de Control de Calidad. Para asegurar que el laboratorio deaplicacin sea capaz de entregar resultados confiables, es conveniente realizar unatransferencia de validacin. En el caso de mtodos cromatogrficos, la transferencia devalidacin consiste en la comparacin de resultados de las pruebas de adecuacin yde anlisis en paralelo de, a lo menos, dos muestras homogneas de concentracionesconocidas, dentro de un rango de aceptacin del producto o dentro del rango de

aplicacin de la metodologa. Por otra parte, una revalidacin se hace necesaria conmtodos validados previamente, pero que deben volver a evaluarse por modificaciones, instrumentales, de la matriz que contiene la muestra o de la proporcinrelativa del analito.Una vez que es desarrollado un mtodo de anlisis por HPLC, al igual que toda tcnicaanaltica, deber validarse, es decir, se debe documentar que cualquier procedimiento,proceso o actividad conducir consistentemente a los resultados esperados.En lo referente a los productos farmacuticos codificados en la USP, se consideran

validados y el nico requerimiento es el cumplimiento del test de adecuacin indicadoen cada monografa: en general se inyecta una sustancia definida y se verifica que laresolucin entre el pico del analito y dicha sustancia sea superior a cierto valor indicado; adems se mide y controla la precisin, asimetra del pico y eficiencia y sepermite ajustar la fuerza de la fase mvil para cumplir con los requerimientos mnimos.Es importante destacar que la validez de estos mtodos es ampliamente discutible.Diferencia entre distintas formas farmacuticas, tipos y calidad de las materias primasempleadas por cada fabricante, hacen necesario validar la metodologa para cada

producto en particular, elaborado o semielaborado. (6)Se debe tener bien en claro que tanto o ms importante que las normas en s, son losprincipios y valores ticos y morales de cada profesional como tambin de cadapersona que est relacionada directa o indirectamente con los medicamentos para soloas, garantizar y asegurar la buena calidad de stos.


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Resea de la pasanta por Laboratorios Bayer Chile

Bayer Chile S.A. se encuentra constituido por diferentes divisiones, la divisin en lacual me desempe fue BayService, la cual se encuentra subdividida en: Laboratoriode Control de Calidad; Garanta de Calidad, Bodega BayService y Seccin Empaque.La gerente de esta divisin, junto con el Jefe de Control de Calidad y la Responsablede la Garanta de Calidad son los profesionales Qumicos Farmacuticos que laboranen esta divisin.

El Laboratorio se encuentra inserto en una poltica de mejora continua, por lo quetrabaja y cumple con polticas GMP. Estas polticas son dictadas por la casa matriz deBayer en Alemania (Bayer AG).

Durante el periodo de prctica prolongada realizado en el Laboratorio de Control deCalidad desarrolle las siguientes actividades:

Descripcin de los 4 equipos HPLC con que cuenta el Laboratorio de Controlde Calidad: esta actividad fue con el objeto de comprensin de los equipos

tanto en sus caractersticas como en el funcionamiento de sus distintosmdulos, con la informacin recavada se actualizaron los datos que semantenan, de los equipos.

Autocapacitacin en los POS (Procedimientos Operativos Estndar) que semanejan en el Laboratorio (medidas de seguridad, y manejo de materiales yequipos):

Manejo de los instrumentos y materiales utilizados en el Laboratorio. Manejo de los distintos equipos utilizados en el Laboratorio de Control de

Calidad (Balanzas, Durmetro, Equipo Carl Fisher, Desintegrador, Equipo deDisolucin, Espectrofotmetro, HPLC de diferentes configuraciones).

Aplicacin de Protocolos de anlisis de medicamentos: para el anlisis de losdistintos medicamentos se debieron seguir los protocolos de anlisis de cadamedicamento analizado respectivamente.

Calificacin de dos equipos HPLC (N 2 y N3) Validacin de dos metodologas de anlisis de contenido (Aspirina y Avelox)


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Es bueno mencionar la ayuda y apoyo que recib por parte del Jefe del Laboratorio deControl de Calidad y de las personas que con el trabajan que me permitieroninsertarme dentro de este gran equipo de trabajo en el Laboratorio de Control deCalidad, facilitndome el aprendizaje del manejo de los equipos e instrumentos queson empleados, tambin me permitieron conocer los procedimientos y normas querigen dentro de las instalaciones. Pero lo ms importante es que pude sentir la

confianza entregada por todas estas personas para desempear las diferentesactividades desarrolladas durante el periodo de mi prctica.


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Objetivos

Objetivo General Cumplir con el objetivo de mejora continua y con los estndares tanto nacionales comointernacionales en la aplicacin de normas GMP adems de proceder con el Plan deCalidad de Laboratorios Bayer S.A. lo que nos conduce a validar la metodologa

analtica de identificacin y cuantificacin de Aspirina comprimido y Avelox comprimido, lo que permitir la utilizacin de estas metodologas en el Laboratorio deControl de Calidad de Bayer S.A.

Objetivos especficos para la calificacin Recopilar la documentacin pertinente a los Equipo HPLC Shimadzu Establecer un Protocolo de Calificacin de los equipos HPLC Shimadzu (HPLC

N 2 y 3), que se encuentran actualmente emplazados y son utilizados por elLaboratorio de Control de Calidad.

Verificar que los materiales e instrumentos a utilizar durante la calificacin seanadecuados para este efecto. Instrumentos calibrados y los estndarescertificados.

Realizar la calificacin operacional a los equipos HPLC. Realizar la calificacin funcional de los equipos HPLC. Obtener resultados que permitan la calificacin de los equipos HPLC N 2 y 3


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Objetivos especficos para la validacin Contar con la documentacin pertinente a los Mtodos de Anlisis a validar,

tanto de Aspirina 500mg comprimido y Avelox 400mg comprimido. Establecer un Protocolo de Validacin de las Metodologas Analticas a validar

(Aspirina 500mg comprimido y Avelox 400mg comprimido), por el Laboratoriode Control de Calidad.

Verificar que los materiales a utilizar durante la validacin sean adecuados paraeste efecto. Instrumentos se deben encontrar calibrados y los estndares a

utilizar para la validacin deben contar con sus respectivos certificados deanlisis.

Realizar la validacin de las dos Metodologas Analticas (Aspirina comprimidoy Avelox comprimido).

Obtener resultados adecuados que permitan la validacin de las Metodologas Analticas de Aspirina comprimido y Avelox comprimido.


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Metodologa: Antes de realizar cualquier actividad referente a la validacin del mtodo de anlisis seacordaron los puntos crticos a considerar (tanto como para la calificacin como para lavalidacin) con el Jefe de Control de Calidad, y en base a las normativas delLaboratorio como tambin a los POS existentes.Para poder realizar la validacin del Mtodo de Anlisis de Aspirina comprimido y

Avelox comprimido, y teniendo en consideracin de que se realiza por HPLC fuenecesario, calificar previamente el equipo HPLC en donde se llevaron a cabo estas

validaciones, es as como tambin se realiz la calificacin de instalacin (IQ), lacalificacin operacional (OQ) y la calificacin de funcionamiento (PQ) de los equiposHPLC que se emplearon para las validaciones. Es por este motivo que se expondrnlos dos temas en este trabajo, el de calificacin de los equipos HPLC y seguido el devalidacin del mtodo de anlisis.El tipo de Calificacin fue una calificacin de equipo en uso, debido a que se calificaronHPLC en funcionamiento.Por otra parte, el tipo de validacin que se realiz fue Concurrente, es decir se realiz

durante el anlisis de rutina de uno o varios lotes de Aspirina 500mg comprimido o Avelox 400mg comprimido.


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Materiales y mtodos para la Calificacin

Descripcin del reaEl rea en donde se encuentran los equipos HPLC es la Sala de Instrumental, que seencuentra dentro del Laboratorio de Control de Calidad.El Laboratorio cuenta con acceso restringido y con temperatura controlada. Ademsesta sala cuenta con aire acondicionado independiente. La temperatura y la humedaddel Laboratorio son monitoreadas y registradas peridicamente.

Requisitos previos a la Calificacin Contar con los manuales de la Operacin de los Equipos HPLC. Utilizacin de Instrumentos con certificados vigentes. Estndares con certificados de anlisis vigentes. Utilizacin de reactivos apropiados (calidad HPLC).

Mtodo utilizado para calificar los equipos HPLC

Para la calificacin del los Equipo HPLC N 2 y 3 se utiliz el anexo N1 (Protocolo deCalificacin HPLC). Este protocolo fue elaborado durante el periodo de prctica ydescribe el procedimiento a seguir para realizar la Calificacin de los equipos HPLCShimadzu con que cuenta el Laboratorio, esto, como parte de la validacin y con el finde verificar el funcionamiento del equipo HPLC.En el Protocolo de Calificacin, se describe el equipo, el tipo de calificacin, el motivode la calificacin entre otros datos, y se encuentra aprobado por el Q.F. Jefe de Controlde Calidad y por el Q.F. Responsable de Aseguramiento de Calidad del Laboratorio.

Tambin se especifica en el Protocolo de Calificacin los procedimientos para realizar la calificacin de: Instalacin, Operacin y Funcionamiento del sistema HPLC. Ademsse encuentra el registro de los datos obtenidos. Estos registros fueron ingresados por escrito al Plan de Calificacin y otros debieron ser recolectados de la informacin queentrega el equipo o los instrumentos utilizados.


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Materiales y mtodos para la Validacin:

Requisitos previos a la Validacin Contar con los protocolos de anlisis de Aspirina 500mg comprimido y de

Avelox comprimido. El equipo en donde se desarrollar la validacin debe estar previamente

calificado. Los Instrumentos deben contar con certificados vigentes. Estndares con certificados de anlisis vigentes. Utilizacin de reactivos apropiados (calidad HPLC)

Mtodos utilizados para la validacinPara dar inicio a la validacin de las metodologas analticas se establecieron losprocedimientos a seguir durante la validacin y se dispusieron las secuencias deinyecciones a realizar en el equipo.Para la validacin de la metodologa analtica de Aspirina 500mg comprimidos y de

Avelox comprimido, se aplic la informacin entregada por la filial de LaboratoriosBayer S.A. (procedimiento 2.02.09 y 02.02-2 respectivamente, que se encuentrandisponibles en el Laboratorio de Control a Calidad) y se tomaron en consideracincomo puntos crticos de las metodologas de anlisis la cuantificacin e identificacinde los principios activos de los medicamentos a validar.


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Protocolo para la Calificacin de los HPLC

Para una mejor comprensin se revisar la calificacin de un solo equipo HPLC debidoa que los dos equipos son muy similares tanto en sus componentes como en sufuncionamiento.

A continuacin se muestra la informacin con que cuenta el Protocolo de Calificacin.Todas las firmas se encuentran en los documentos originales (Protocolo de CalificacinN QCCE001-01 y el Protocolo de Calificacin QCCE002-01). Estos documentos se

encuentran en el Laboratorio de Control de Calidad).

I.- Alcance

Equipo / Modelo: Shimadzu / L10 N de Serie: Varios mdulos

Sector / Ubicacin: Laboratorio de Control de Calidad / Sala de Instrumental

Tipo de Calificacin :

Calificacin Equipo

Calificacin Ambiente

Motivo de la Calificacin :

Calificacin Programada

Recalificacin

Observaciones: Se realizar la calificacin del Equipo HPLC N 2 en uso, con el

objetivo de verificar que el equipo cumple con las especificaciones del fabricantepor lo que es adecuado su uso para realizar anlisis de metodologas en ellaboratorio de Control de Calidad.

Plazo Previsto :

Fecha de Comienzo Programada: 13 / 12 / 2005

Fecha de Finalizacin Programada: 16 / 12 / 2005


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II.- Plan de Accin:a) Personal Involucrado:

Redaccin del Protocolo

(Nombre y Cargo): lvaro Vsquez O. Alumno Q.F. en Prctica

Ejecucin del Protocolo

(Nombre y Cargo): lvaro Vsquez O. Alumno Q.F. en Prctica

Revisin y Aprobacin del Protocolo:

______________________________ _______________________________

Responsable Garanta de Calidad Jefe Control de Calidad


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PROCEDIMIENTO PARA LA CALIFICACIN DE LOS HPLC

PROCEDIMIENTO DE CALIFICACIN DE INSTALACIN

1 Ubicacin del sistema1.1 Objetivo

Registrar en la planilla los datos del lugar donde se instal el sistema.

1.2 ProcedimientoRegistrar los siguientes datos en la planilla:

a Nombre de la empresa :b Filial :c rea :d Jefe de rea :e Responsable de equipo :

2 Control ambiental del lugar de instalacin2.1 Objetivo

Evaluar si el lugar donde se encuentra instalado el equipo cumple con losrequerimientos medioambientales e infraestructura indicados por el fabricante, lo queevala si el equipo funciona segn las especificaciones descritas.

2.2 Procedimiento

a Lugar de instalacin adecuado (libre de polvo, gases corrosivos ygrandes campos magnticos)

b Mesn adecuado (dimensiones y estabilidad)c T adecuada ( entre 5 y 35C)d Humedad ambiente adecuada (entre 45 y 87%)e Puesta a tierra adecuadaf Alimentacin elctrica adecuada (220V +-10%, 50 Hz)g Lnea de tierra adecuada


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3 Descripcin del sistema

3.1 Objetivo

Describir las caractersticas del sistema HPLC3.2 Procedimiento

a Registrar el modo de operacin y de mezclado del sistema HPLCb Identificar el sistema computacional, registrando las caractersticas de

ste.c Identificar el software registrando nombre y versin.

4 Identificacin de los mdulos del sistema4.1 Objetivo

Identificar los mdulos del sistema4.2 Procedimiento

a Identificar cada mdulo componente, registrando modelo y nmero deserie.

5 Registro de documentacin5.1 ObjetivoDescribir y registrar la documentacin recibida5.2 Procedimiento

a Registrar la documentacin existente tal como manuales de operacin ycertificados de cumplimiento, as como el idioma y la ubicacin de lamisma.

6 Entrenamiento de los usuarios6.1 Objetivo

Evaluar si los usuarios del HPLC tienen los conocimientos bsicos de laoperatoria del equipo6.2 Procedimiento

Registrar si los usuarios conocen:a Rutina de encendidob Operacin bsica de mdulosc Operacin del sistemad Mantenimiento bsico


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7 Calificacin de la instalacin

7.1 Objetivo

Verificar que el sistema se ha instalado de manera adecuada7.2 Procedimiento

a Inspeccionar la apariencia externa del sistema y verificar que nopresente signos de golpes, contaminacin y otras anormalidades.

b Encender el sistema y verificar que no se presentan problemas decomunicacin entre mdulos, ni aparecen mensajes de error.

8 Control de cambios y mantenimiento del sistema8.1 Objetivo

Mantener un registro de los cambios realizados al sistema8.2 Procedimiento

Registrar cambios de modulo o de software del sistema.


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PROCEDIMIENTO CALIFICACIN OPERACIONAL

1 Condiciones generales1.1 Material requerido

a Columna (ODS (C18) de 4.6mm DI y 25cm de largo u otra apropiadab Fase Mvil: ACN/agua 70:30 grado HPLCc Termmetro con indicacin de mxima y mnima (con sensor remoto)d Cronmetro certificado

1.2 Temperatura ambiente.Se recomienda que para realizar los ensayos la temperatura ambientese encuentre entre 15 y 30C y que la fluctuacin de esta sea menor a2C/hora.

1.3 Preparacina Colocar agua como fase mvil en la bombab Purgar el sistema

2 Configuracin del sistema2.1 Objetivo

Identificar los mdulos del sistema HPLC2.2 Procedimiento

Identificar cada mdulo, registrando en la planilla el modelo y el nmerode serie correspondiente.

3 Calificacin de Operacin3.1 Objetivo

Comprobar que el sistema opera normalmente3.2 Procedimiento

A Funcionamiento de los indicadores luminososa Encender los mdulos y verificar si durante el autodiagnstico encienden

todos los indicadores luminosos de los mismos.


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B Funcionamiento del controlador del sistema

a Observar si durante el autodiagnstico realizado anteriormente (punto A), el controlador del sistema arroja algn mensaje de falla en lamemoria: [ROM Failure], [RAM Failure].

b Ingresar mediante el teclado del controlador los siguientes valores paracada modulo del sistema:

Flow = 1.0 mL/min Wave = 237 nm Oven T = 40C

c Activar el sistema y observar que los valores ingresados hayan sidotransmitidos a los correspondientes mdulos.

d No deben aparecer mensajes de falla en la pantalla del controlador y losvalores de los parmetros deben ser transmitidos satisfactoriamente a loscorrespondientes mdulos.

C Exactitud del caudal

a Fijar el caudal de la bomba A en 1,0 mL/min.b Pesar un matraz aforado vaco con tapa, en la balanza analtica

calibrada.c Recoger en el matraz el volumen dispensado por la bomba en 3 min,

midiendo el lapso de tiempo con un cronmetro certificado.d Pesar el matraz aforado. Calcular el caudal bombeado por minuto,

dividiendo el peso obtenido por 3 y teniendo en cuenta la densidad delagua a la temperatura de la medicin. (Ver tabla 1).

e La diferencia entre el caudal obtenido y el fijado debe ser menor o igualque +-0,030 mL/min. (+-3,0%).

D Exactitud y estabilidad de la temperatura del horno de columnas

a Colocar el sensor del termmetro dentro del horno en la proximidad delsensor de temperatura del mismo.b Fijar la temperatura del horno a 50C y activarlo.c Permitir que alcance la condicin "Ready"d Presionar la tecla [VP] hasta visualizar [Validation] y luego la tecla

[Func] hasta encontrar la funcin [Temperature Test].e Presionar la tecla [Enter] y permitir que se ejecute el programa.f Registrar el mensaje indicado por el instrumento.


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g Presionar la tecla [Enter], ingresar el valor de la temperatura indicada por el termmetro y presionar la tecla [Enter].

h Los mensajes indicados por el instrumento deben ser : "Stability Good" y"Accuracy Good".

E Control de la longitud de onda y de la intensidad de la lmpara. Detector UV-Visible de longitud de onda variable.

a Fijar la longitud de onda en 237 nmb Fijar el valor 1 para la funcin [Lamp].c Visualizar la funcin [REFEN] y registrar en la planilla el valor indicado.d Visualizar la funcin [WaveCheck] y presionar la tecla [Enter].e Registrar el mensaje entregado por el instrumento.f El mensaje debe ser : "Check Good"

La intensidad de la lmpara de Deuterio [REFEN] debe ser mayor a 800.

F Funcionamiento del inyector.

a Para inyector automtico solamente: presionar la tecla [VP] para entrar alas funciones de autocalibracin y seleccionar "Validation". Presionar latecla [Func] hasta localizar el chequeo de memoria.

b Ejecutar el chequeo de memoria (ROM y RAM).c Ejecutar el chequeo de autodiagnstico para los sensores de posicin.d Registrar los mensajes obtenidose Al finalizar el chequeo de autodiagnstico de sensores de posicin,

deber observarse el mensaje "CHECK GOOD".


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PROCEDIMIENTO DE CALIFICACION DE FUNCIONAMIENTO

1 Condiciones Generales1.1 Materiales Requeridos

a Solucin de calibracin para equipos HPLC: (solucin G) Mezclade Nitrometano, Antraceno, Pireno y Perileno disueltos enmetanol, provista por Bayer Leverkusen (Block D207).

1.2 Condiciones Ambientales

Se recomienda que para realizar los ensayos, la temperatura ambientese encuentre entre 15 y 30C y que la fluctuacin sea menor a 2C/hr

1.3 Configuracin de los equipos HPLC

Nmero de equipo HPLC N 2

Marca / Modelo Shimadzu / LC10A - 10AVP

Mdulo Modelo Nmero de Serie

Bomba Isocratica LC10 AT VP C20973604094

Detector SPD-10AV VP C21003600695 LPModulo de Control SCL-10A VP C21014216556 LP

Desgasificador DGU-14A C20973604094

Sistema de GradienteCuaternaria FCV-10AL VP C21084104147

Autoinyector SIL-10AD VP C21054271145 US

Vlvula Conmutadora deColumna FCV-10AH C20434101896

Option Box L C20544001959Horno Para Columna CTO-10AS VP C21044264138 SS

Computador

Monitor Compaq 235CP28KB625

Impresora LASERJET 1100 USGB000398

SoftwareLC SOLUTIONVersion: 1,11SP1 L50574200191


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Marca / Modelo Shimadzu / LC10 6A - T VP


BOMBA ISOCRATICA A LC-10ATVP C20973604109LP

BOMBA ISOCRATICA B LC-10AS C20312901346KG

DETECTOR SPD-10A C20332901493

MODULO DE CONTROL SCL-10AVP C21014216541LPDESGASIFICADOR DGU-12A C20913602874TK

AUTOINYECTOR SIL-10A C2036367208KG

SAMPLER COOLER SAMPLE COOLER S C20472502885

ELU-SAVE 72.28.423

HORNO PARA COLUMNAS CTO-10AVP C21023601899 KL

COMPUTADOR HP Compaq MXJ452053M

MONITOR DELL N828FI 22794B190V69

IMPRESORA HP LASERJET 1100 USBB004182

SOFTWARE LC SOLUTION L50574200216

2 Procedimiento2.1 Objetivo

Definir criterios, frecuencia y controles que son necesarios realizar parademostrar el correcto funcionamiento de los equipos HPLC.

2.2 Frecuencia

Cada vez que sea necesario evaluar el funcionamiento del equipo.2.3 Procedimiento

2.3.1 Los controles que se realizaran al equipo HPLC son pre-requisito paralos anlisis cuantitativos y cualitativos de rutina. A continuacin sedetallan los controles que se realizaran en este procedimiento:

2.3.2 Despus de cada mantencin o trabajo de reparacin de los equipos,proceder a realizar algunas pruebas para evaluar el estado final delequipo, segn se seala a continuacin:

2.3.3 En caso de realizarse otro tipo de reparacin o cambio, consultar al Jefede Laboratorio para coordinar las medidas a seguir.


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2.3.4 Si alguna de las pruebas antes mencionada no cumple con lasespecificaciones, el sistema HPLC no debe ser usado para realizar anlisis y se debe informar al Jefe de Laboratorio para tomar lasmedidas correctivas pertinentes.

2.3.5 Sistema HPLC: Fase Mvil : metanol HPLCColumna : Lichrospher 100 RP 18, 125 x 4mm, 5m (la

columna debe utilizarse solo para este anlisis.Longitud de onda : 250nmTemperatura : 30CVolumen de inyeccin : 10L de solucin de prueba G.Solucin de prueba G : Mezcla de Nitrometano, Antraceno, Pireno y

Perileno disueltos en metanol.Las condiciones cromatogrficas pueden modificarse de acuerdo a lasposibilidades tcnicas del equipo.Cromatografiar y registrar 10 inyecciones de la misma solucin G. Evaluar lossiguientes parmetros: tiempos de retencin, reas de los picos y reasrelativas de los picos.

Estos procedimientos de Calificacin fueron los que se utilizaron para los dos HPLCN2 y N3 que fueron calificados.


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Requisitos que deben cumplir los Equipos HPLC:

Constancia de flujo a tiempo largo: se determina a travs del clculodel Coeficiente de Variacin (CV) de los tiempos de retencin de loscomponentes de la mezcla, despus de mltiples inyecciones. Ver frmula en anexo adjunto.

Promedio de los 4 valores de CV :


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Protocolo para la validacin de las metodologas analticas

En esta seccin se describir la validacin de Aspirina solamente, ya que las dosmetodologas de anlisis que se validaron, tienen mucho en comn, adems seexpondr as con el fin de simplificar la comprensin de la validacin.El Protocolo completo de Validacin de ambas metodologas se encuentra en elLaboratorio de Control de Calidad (Protocolo de validacin N: VCCM001-01 Avelox y

Protocolo de validacin N: VCCM002-01 Aspirina).Las firmas se encuentran en los documentos originales.

Breve descripcin del proceso a validar:Se validar el mtodo de anlisis de contenido e impurezas de Aspirina 0.5gcomprimido, el cual se basa en la cuantificacin de cido Acetilsaliclico (AAS) y de

cido Saliclico (AS), segn el mtodo de anlisis 2.02-09.

Tipo de Validacin:

Alcance:Validacin de Proceso Validacin de Mtodo Analtico Re-Validacin de Proceso Re-Validacin de Mtodo Analtico

Tipo:

Concurrente Prospectiva Retrospectiva

Razn de la Validacin:Se realiza la siguiente validacin con el fin de utilizar el mtodo de anlisis de Aspirina2.02-09 en el Laboratorio de Control de Calidad, la principal caracterstica de estemtodo es el anlisis de contenido, que se hace de manera anhidra, lo que permite unamayor flexibilidad en el manejo de las muestras.


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Responsable de:

Redaccin del Protocolo(Nombre y Cargo): lvaro Vsquez O. Alumno Q.F. en Prctica Ejecucin del Protocolo(Nombre y Cargo): lvaro Vsquez O. Alumno Q.F. en Prctica

Revisin y Aprobacin del Protocolo:

______________________________ _______________________________

Q.F. Responsable Garanta de Calidad Q.F. Jefe Control de Calidad


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MetodologaAnlisis a Realizar Metodologa analtica

Anlisis de Contenido:Para la identificacin y cuantificacin del AAS la metodologa es la siguiente:Longitud de onda: xxxnm

Reactivos: Reactivo 1

AguaReactivo 2Reactivo 3Reactivo 4

Equipos: Cromatgrafo lquido de alta presin con registrador e integrador.Bao de ultrasonido.Columna metlica de acero.

Largo xxcm., dimetro interno xxmm.Relleno con LiChrospher 100 RP xx.xum.

Solvente: Mezclar xx volmenes de Reactivo 1 con x volumen de Reactivo4.

Solucin de comparacin AAS (St A): Pesar con Exactitud alrededor de xx mg de AASen un matraz de xx mL. Disolver y llevar a volumen con solvente.

Solucin de comparacin Ac. Saliclico (AS): Pesar con exactitud alrededor de xxmg de AS en un matraz de xxmL. Disolver y llevar a Volumen consolucin St A. Diluir xxmL de la solucin anterior a xxmL consolucin St A.

Solucin de prueba: Determinacin de AS: Moler xx tabletas. Pesar con exactitudalrededor de xx mg en un matraz de xx mL.


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Adicionar xx mL de solvente.Llevar a volumen con solvente y filtrar por membrana.Determinacin de AAS: Diluir xx mL de la solucin anterior a xxmL con solvente.

Alternativamente se pueden elegir otros pesos y diluciones, mientras bajo lascondiciones utilizadas en la determinacin HPLC se cumpla conlas exigencias del test de aptitud del sistema en todos suspuntos.

Condiciones de anlisis:Condiciones HPLC: Las condiciones indicadas son orientativas y pueden ser

adecuadas a las posibilidades tcnicas del cromatgrafo y a lascaractersticas de la columna para optimizar la separacin.

Fase mvil: Disolver xx g de Reactivo 2 en xx mL de Agua. Adicionar xx mLde Reactivo 1 y ajustar el pH a xx 0.05

Flujo: xx ml / minuto.

Temperatura del horno: xx C.Deteccin: UV xxnm.Vol. de inyeccin: xx L.

Procedimientos de anlisis:Cromatografiar solucin de prueba y comparacin en las condiciones indicadas.Los cromatogramas de solucin de prueba y comparacin deben coincidir en lostiempos de retencin:

Ac. Saliclico = 8,0 min. Ac. Acetil Saliclico = 10,9 min.


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Criterios de Aceptacin para la Validacin

Pruebas de Adecuacin visual del sistema: comparar cromatogramas de losestndares con los de las muestras.

Criterio de aceptacin:El tiempo de retencin de las muestras debe encontrarse dentro de un20% en relacin a los tiempos indicados en el mtodo de anlisis.Todos los picos deben estar separados como se indica en el mtodo de

anlisis.

Lmite de Deteccin: Analizar un mximo de un 50% del lmite de liberacin de losproductos de descomposicin, inyectando un blanco previamente para eliminar elcarry-over del sistema de inyeccin.

Criterio de aceptacin:Los picos deben ser detectables

Linealidad: Se deber determinar con la preparacin de soluciones estndar al 50%,100% y 150% de la concentracin de la sustancia activa, la funcin de calibracin esobtenida por regresin lineal.

Criterio de aceptacin:Intercepto al eje no se debe desviar del origen ms de un 3%El coeficiente de correlacin r debe ser al menos de 0,99Coeficiente de variacin de los factores respuesta (CVf) < 5 %

Precisin: se encuentra determinada por 6 inyecciones de un mismo estndar al100%. El coeficiente de variacin es calculado segn el pico principal.

Criterio de aceptacin:Coeficiente de Variacin del estndar 1,5%Coeficiente de Variacin de la muestra 2,0%


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Resultados y DiscusinResultados y Discusin de la Calificacin del HPLC N2

REGISTRO DE CALIFICACION DE INSTALACION

1 Ubicacin del sistemaEmpresa : BAYER S.A.

Filial : Chile rea o Sector : Laboratorio Control de CalidadPas / Ciudad : Chile / SantiagoComuna : San JoaqunDireccin : Carlos Fernndez 260Jefe de Control de Calidad : Gustavo Parra N.Usuario del equipo : Analistas del laboratorio

2 Control ambiental del lugar de instalacin

Criterio de Aceptacin Corresponde NoCorresponde No Aplica

Lugar de instalacinadecuado

Libre de polvo ygases corrosivos X

Mesn adecuado Dimensionesestabilidad X

Temp. ambienteadecuada

Entre 5 y 35C;con dif. de T


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3 Descripcin del sistema

a Modo de operacin

Isocrtico G. Binario G. Ternario G. Cuaternario

X

b Modo de mezclado

Alta Presin Baja Presin No Aplica

X

4 Identificacin de los mdulos del sistema


Marca / Modelo Shimadzu / LC10A 10 ATVP


Bomba Isocrtica LC10 ATVP C20973604094

Detector SPD-10AVVP C21003600695 LP

Modulo de Control SCL-10AVP C21014216556 LP


Sistema de GradienteCuaternaria FCV-10ALVP C21084104147

Autoinyector SIL-10ADVP C21054271145 US


Option Box L C20544001959

Horno Para Columna CTO-10ASVP C21044264138 SS

Computador



SoftwareLC SOLUTIONVersion: 1,11SP1 L50574200191


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5 Registro de documentacinDocumentacin Recibida Idioma

LC-10ATVP Ingles

FCV-10 ALVP Ingles

DGU-14 A Ingles

CTO-10ASVP Ingles

SIL-10 A Ingles

SCL10 AVP Ingles

SPD 10 AVP/10 AVVP Ingles

Drain Tube Kit Ingles

6 Entrenamiento de los usuarios

Criterio de Aceptacin Corresponde

NoCorresponde

No Aplica

Rutina de encendido X

Operacin bsica de losmdulos X

Operacin del sistema X

Mantenimiento bsico X

Recomendaciones deseguridad

SeDebeConocer

X

7 Calificacin de instalacin

Criterio de

Aceptacin Corresponde

No

Corresponde

No

AplicaSignos de golpes,contaminacin uotras anormalidades

Inexistentes X

Conexin del cromatgrafoal suministro elctrico Adecuada X

Instalacin de accesorios Adecuada X

Encendido Correcto X


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REGISTRO DE CALIFICACION DE OPERACIN

1 Condiciones Generales1.1 Fecha de iniciacin

Fecha

Da Mes Ao

15 12 2005

1.2 Condiciones ambientalesT Ambiente (C) H.R.%

21 51

2 Ubicacin del sistemaEmpresa : Bayer S.A. ChileSector : Laboratorio Control de Calidad / Sala de

InstrumentalResponsable del sector : Gustavo Parra N.Usuarios del equipo : Analistas del Laboratorios

3 Configuracin del sistema

Numero de equipo HPLC N 2

Marca / Modelo Shimadzu / LC10A - 10AVP


Bomba Isocrtica LC10 AT VP C20973604094

Detector SPD-10AV VP C21003600695 LPModulo de Control SCL-10A VP C21014216556 LP


Sistema de GradienteCuaternaria FCV-10AL VP C21084104147

Autoinyector SIL-10AD VP C21054271145 US



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Continuacin:


Option Box L C20544001959

Horno Para Columna CTO-10AS VP C21044264138 SS

Computador



Software LC SOLUTIONVersion: 1,11SP1 L50574200191

4 Calificacin de operacin A Funcionamiento de los indicadores luminosos

MODULO Corresponde NoCorresponde No Aplica

Bomba A X

Bomba B X

Inyector automtico X

Detector X

Controlador del sistema X

Horno X

B Funcionamiento del controlador del Sistema

Corresponde No

CorrespondeNo Aplica

Mensajes de falla (ausencia) X

Transferencia de parmetros X


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C Exactitud del caudalCaudal medido: 2,995 mL/min

Modelo N de Serie

Cronmetro certificado utilizado VWR 62379-460 51045344

Balanza analtica utilizada LA 2305 16506808

Termmetro cerificado utilizado VWR 23609-206 51267748

Temperatura del agua y densidad 23 C 0,997536 g/mL

D Exactitud y estabilidad de la temperatura del horno de columna


NoCorresponde No Aplica

Estabilidad "Stability Good" X

Exactitud "Accuracy Good" X

Termmetro certificado utilizado: Modelo: VWR 23609 206N de Serie: 51267748

E Control de la exactitud de longitud de onda y de la intensidad de lalmpara. Detector UV-Visible de longitud de onda variable.

Corresponde NoCorresponde No Aplica

Mensaje Check good

Intensidad a 237nm X

[REFEN]: _807__ X

F Funcionamiento del inyector


NoCorresponde No Aplica

Mensaje CHECK GOOD X

indicador luminoso Enciende X


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REGISTRO DE FUNCIONAMIENTO

Corresponden a los resultados entregados por los equipos

Los registros obtenidos de la calificacin de funcionamiento del equipo son lossiguientes:C1. Cromatograma de la primera inyeccin de la prueba del HPLC N 3


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C3. Resultados de la prueba del HPLC N 3


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Conclusiones de la calificacin

Los resultados obtenidos de la calificacin de instalacin de los equipos cumplen conlos parmetros establecidos.Los resultados obtenidos por la calificacin operacional cumplen.Los resultados obtenidos por la calificacin de funcionamiento cumplen.Se tienen registros de todos los pasos realizados durante el proceso de calificacin, yde los certificados de los instrumentos y materiales utilizados.

Por lo tanto y en vista de toda la documentacin y registros obtenidos podemosconcluir que el equipo se encuentra apto para realizar validaciones y analisis.


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Resultados de la validacin:

C4. Cromatograma del Blanco


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C5. Cromatograma Lmite de cuantificacin:


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C6. Cromatograma estndar


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C7. Cromatograma muestra:


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Discusin de la validacin de aspirina

Lmite de Deteccin: como se puede apreciar en el cromatograma C4 la cantidad de

cido Saliclico es detectada por el sistema.

Prueba de adecuacin visual del sistema: al comparar los cromatogramas obtenidos

con los presentados en el mtodo de anlisis se puede apreciar su correspondencia.

Linealidad:

Curva de calibracin para cido acetilsaliclico en Aspirina

% Conc.Std rea

50 39539650 39563250 392979

100 808743100 806288100 807244100 811475100 812737100 807244150 1177011150 1172210150 1174468

Variable X 1 Curva de regresin ajustada y = 7949,1xR2 = 0,9976

0200000400000600000800000

100000012000001400000

40 60 80 100 120 140 160

Concentracion

r e a


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Factor de respuesta:

Concentracinmg/mL Respuesta

Factor derespuesta

0,254 395396 1556677,20,254 395632 1557606,30,254 392979 1547161,40,518 808743 1561279,90,518 806288 1556540,50,518 807244 1558386,10,518 811475 1566554,10,518 812737 1568990,30,518 807244 1558386,10,758 1177011 1552785,0

0,758 1172210 1546451,20,758 1174468 1549430,1

promedio 1556687,3desviacin std 7005,6

CV% factor derespuesta 0,450

Estadsticas de la regresinCoeficiente decorrelacin mltiple 0,999000406Coeficiente dedeterminacin R^2 0,998001811

R^2 ajustado 0,997801992Error tpico 13515,55488Observaciones 12

ANLISIS DEVARIANZA

Grados delibertad

Suma decuadrados

Promedio delos cuadrados F

Valor crticode F

Regresin 1 9,12352E+11 9,12352E+11 4994,53 7,84596E-15Residuos 10 1826702237 182670223,7Total 11 9,14179E+11


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Precisin:

Precisin del estndar

Muestra rea1 7932722 7953843 7974034 795704

5 7973346 801623

Promedio: 796787C.V.: 0,35 Mximo 1,5%

Precisin de la muestra

Muestra rea1 8002252 7869163 7989474 8144355 7965166 796444

Promedio: 798914C.V.: 1,12 Mximo 2,0%

Cumple con los criterios de aceptacin de la precisin tanto como para la muestracomo para el estndar.


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Conclusiones de la Validacin

Tras la realizacin de las calificaciones y una vez habiendo obtenido los resultados se

puede concluir que la metodologa analtica empleada por la filial de Laboratorios Bayer

S.A. es perfectamente aplicable al Laboratorio de Control de Calidad. Adems esta

nueva metodologa (Aspirina 500mg), permitir realizar el anlisis sin el apremio del

tiempo por ser anhidra (descomposicin rpida de la muestra en agua) y permite

optimizar el tiempo ya que permite una libertad mayor al analista, (agregar un lote al

anlisis, reanalizar las muestras, tirar una secuencia completa nuevamente, etc.)

Por lo tanto se establece que:

Los equipos cumplen con las calificaciones a las que fueron sometidos.

El mtodo de anlisis de Aspirina 500mg es factible de aplicar en el Laboratorio de

Control de Calidad de BayService.

Este mtodo se aplicar en adelante para analizar muestras de AAS 500mg que

requieran de identificacin y de cuantificacin.


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Conclusin General

Este trabajo permiti la calificacin de equipos HPLC y la posterior Validacin de lasmetodologas analticas de Aspirina 500mg y Avelox 400mg.

Todos los resultados obtenidos en la validacin de los mtodos de anlisis tanto de Aspirina 500mg como de Avelox 400mg permiten asegurar que son confiables, ya

que cumplen los criterios de validacin establecidos por Bayer S.A. Adems ambosmtodos pueden ser utilizados en el Laboratorio de Control de la Calidad en susanlisis de rutina.

Conclusin Personal

El mundo cambia constantemente y en muchos aspectos cambia muy rpido por lo quees nuestro deber de profesionales preocupados por la salud de la poblacin como el depersonas comunes, el mantenernos constantemente actualizados e interiorizados delas modificaciones que se van suscitando en las reas que nos competen. La vida esuna constante capacitacin y debemos estar abiertos a los cambios que puedan venir,tratando de tomarlos eficientemente con el fin de poderlos aplicar en nuestra vida,creando y/o optimizando y/o mejorando continuamente los procesos que realizamos adiario, para poder entregar lo mejor de cada uno por el bienestar general.


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Bibliografa

1. OMS Colaboremos por la salud, informe sobre la salud del mundo, OMS 2006.2. Robert J. Cipolle, Linda M. Strand, Meter C. Morley El Ejercicio de la Atencin

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prcticas de Manufactura QF Edith Ramrez Cox.4. Gonzles-Martn, G. Fundamentos de Farmacia Clnica y Atencin

Farmacutica. Ediciones Universidad Catlica de Chile, 1 ed. 2004.5. Bayer AG Manual del Sistema de Calidad Seccin: Buenas Prcticas de

Manufactura (GMP) Introduccin 1 ed 2005.6. Oscar Alberto Quattrocchi, Sara Ins Abelaria de Andrizzi, Ral Felipe Laba,

Introduccin a la HPLC Aplicacin y Prctica. Artes Grficas y Farro S.A.1992.

7. Arlene M. Badillo Validacin de Procesos Diplomado de Buenas Practicas deManufactura 2005.

8. Rosala Alzate de Saldarriaga Protocolo de Validacin Diplomado de BuenasPracticas de Manufactura 2005.

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10. OT 34/03 Prueba de adecuacin del sistema en cromatografa liquida de altaresolucin.

11. OT 29/02 Estructura de la secuencia en rutina de anlisis HPLC y medidas aseguir en caso de desviaciones.

12. Serie de Informes Tcnicos de la OMS, Comit de expertos de la OMS enespecificaciones para las preparaciones Farmacuticas, Informe 32, 1992.

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Anexo 1Glosario

Aseguramiento de Calidad: Es un amplio rango de conceptos que cubren todas lasactividades que individual o colectivamente influyen en la calidad de un producto. Lasuma total de las actividades llevadas a cabo para asegurar que los productosmedicinales y dispositivos mdicos de uso humano y animal son de la calidad

requerida para lo que fueron destinados.Buenas Prcticas de Manufactura: Estndares mnimos para los mtodos que van aser usados y las instalaciones o controles que van a ser usados, la manufactura, elproceso, el empaque o el mantenimiento de un producto medicinal para asegurar quedicha droga satisface los requerimientos de la ley en materia de seguridad y tiene laidentidad y la concentracin y cumple con su calidad y `pureza propuestas o quereferencian poseer.Calibracin: Es el conjunto de operaciones que establecen, bajo condiciones

especficas, la relacin entre los valores indicados por el instrumento o sistema demedicin (especialmente de peso), registro y control, o los valores representados por lamedida de un material y su valor conocido correspondiente a un estndar dereferencia. Los lmites de aceptacin de los resultados de las mediciones deben estar establecidos.Calificacin: Es el proceso de establecimiento de evidencia documentada de la quelas instalaciones, los sistemas utilitarios y otros equipamientos tcnicos incluidos lossistemas computarizados han sido correctamente encargados y que funcionan en

forma confiable, dentro del rango especificado de operacin.Control de Calidad: Es una parte de las GMP que conciernen al muestreo,especificaciones y anlisis y con la organizacin, documentacin y procedimientos deliberacin que aseguran que los anlisis que se estn llevando a cabo son necesarios yrelevantes y que los materiales no son liberados para su uso, tampoco para la venta osuministro antes de que la calidad sea juzgada como satisfactoria. El control de calidadno est confinado a las operaciones de laboratorio, pero debe estar involucrado entodas las decisiones concernientes a la calidad del producto.


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Criterio de Aceptacin: Las especificaciones que son utilizadas para tomar unadecisin para aceptar o rechazar un lote o batch de producto o aceptar una pieza deequipamiento que ha sido calificada.Crtico: Un material, etapa de proceso o condicin del proceso, requerimiento paraanlisis u otro parmetro relevante se considera crtico cuando no existen noconformidades con un criterio predeterminado que influencie directamente sobre losatributos de calidad de un API o producto con droga de una manera perjudicial.Especificacin: Descripcin detallada de la calidad o de los atributos crticos que debe

cumplir un material.Especificidad de un test analtico: Es la habilidad para calcular inequvocamente unanalito en presencia de de otros componentes que se espera que est presente.Tpicamente podran incluirse las impurezas, estereoismeros, productos dedegradacin, matriz, etc.La escasez de la especificidad de un procedimiento analtico individual puede ser compensada por otros procedimientos analticos que lo soporten. Esta definicinimplica lo siguiente:

Identificacin: para asegurar la identidad del analito Anlisis de pureza: para asegurar que todos los procedimientos analticos que

se llevan a cabo permiten una exacta declaracin del contenido de impureza deun analito, por ej. Anlisis de sustancias relacionadas, metales pesados,contenido de solventes residuales, etc.

Valoracin: (contenido o potencia): proveer un resultado exacto que permiteuna declaracin exacta del contenido o potencia de un analito en la muestra.

Exactitud: La exactitud de un procedimiento analtico expresa lo ms cercano a un

acuerdo entre el valor que es aceptado no como un valor verdadero convencional o unvalor de referencia aceptado y el valor encontrado.Lmite de cuantificacin: Es la cantidad ms pequea de analito en una muestra quepuede ser determinado en forma cuantitativa con precisin y exactitud. Este lmite esun parmetro del ensayo cuantitativo para bajos niveles de compuestos en muestrasmatrices y es usado particularmente para la determinacin de impurezas y/o productosde degradacin.


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Lmite de deteccin: Es La cantidad mnima de de analito en una muestra que puedeser detectado pero no necesariamente cuantificado como un valor exacto.Linealidad: La linealidad de un procedimiento analtico es su capacidad (dentro de unrango dado) para obtener resultados de anlisis que son directamente proporcionales ala concentracin (cantidad) de un analito en la muestra.Procedimiento Operativo Estndar (POS): Procedimiento escrito autorizado que dalas instrucciones para llevar a cabo operaciones no necesariamente especificas de unproducto dado, material o procedimiento pero de una naturaleza ms bien general.

Repetibilidad: Expresa la precisin bajo las mismas condiciones de operacin a travsde un corto intervalo de tiempo. Tambin significa una precisin entre ensayos.Estndar de referencia Primario: Una sustancia que ha sido reconocida por unconjunto extensivos de anlisis, para ser un autentico material de alta pureza. Esteestndar puede ser obtenido a travs de una fuente reconocida o preparado por mediode una sntesis independiente o por una purificacin sucesiva de un material existentede produccin.Estndar de referencia Secundario: Sustancia de pureza y calidad establecida que

ha sido comparada con un estndar de referencia primario, es utilizada como estndar de referencia para anlisis de rutina en el laboratorio.Validacin: Accin documentada que demuestra que cualquier procedimiento, procesoo actividad conducir consistentemente a los resultados esperados. Esto incluye lacalificacin de sistemas y equipamiento.

CALIFICACIÓN DE EQUIPOS HPLC Y VALIDACIÓN DE metodologias analiticas

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