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Biología molecular en el trasplante de
médula ósea
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Linus Pauling, padre de la biología molecular
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1990
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Biología molecular en TMO:
ü Selección de donador ü Seguimiento de quimerismo ü Identificación de infecciones
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En México se
trasplantan menos del 10% de los
pacientes quienes necesitan un TMO
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90%
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1988
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1996
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BBMT 2009; 15:1628
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2000
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El Método Mexicano: n Fármacos accesibles (BU, Cy, FLU) n Conducción extrahospitalaria n Número ajustado de aferesis (1-6 x 106/Kg
células CD34) n Pocas transfusiones n No uso de ganciclovir n No uso de Ig IV n No uso de factores de crecimiento n ILD sólo en caso necesario (< 5%)
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El Método Mexicano:
n BSF: 4 mg/Kg, días -6, -5 n Cy: 350 mg/m2, días -4, -3, -2 n FLU: 30 mg/m2, días -4, -3, -2 n CyA: 5 mg/Kg, días –1 a +180 n MTX: 5 mg/m2 días +1, +3, +5, +11
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403 alotrasplantes:
ü 13 días para > 500 granulocitos ü 12 días para > 20 000 plaquetas ü EICH aguda: 21% ü EICH crónica: 17% ü Mortalidad a 100 días: 17% ü Supervivencia a 150 meses: 48% ü Mediana de SV: 1350 días
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0 20 40 60 80 100
403 alotrasplantes (165)
Hematology 2012; 17:195
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1386 alotrasplantes
BBMT 2006; 12:422
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Months after BMT
Princess Margaret, Toronto
Supervivencia global
CHMI + HUNL
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TMO alogénico usando el “método Mexicano”
20 000 USD (300 000 USD en FHCC)
(500 000 USD en MDACC)
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ü Causa menos EICH ü Es menos nefrotóxico ü Se asocia menos a reactivación de CMV ü Se puede emplear en niños ü Se puede emplear en sujetos añosos ü Tiene menos morbimortalidad ü Requiere menos transfusiones
TMO con el “método Mexicano”
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ü “Cura” la misma proporción de pacientes ü No es una forma “sencilla” de trasplantar ü Necesita mucho apoyo de laboratorio ü No requiere de unidades especiales ü No requiere de un hospital ü Es mucho más barato
TMO con el “método Mexicano”
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TMO en México: P Más pacientes trasplantados P Más pacientes curados P Más trabajos publicados ü Mejor educación de médicos ü Mejor atención médica
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Biología molecular en TMO:
ü Selección de donador ü Seguimiento de quimerismo ü Decisión de trasplantar ü Definición de remisión ü Identificación de infecciones
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Selección del donador:
ü Antígenos HLA A, B y DR ü Los antígenos se estudian por biología molecular ü Tres del padre, tres de la madre ü Compatibilidad para TMO: 6 / 6 o 5 / 6
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Molécula HLA
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0 10 20 30 40 50 60
0
0.2
0.5
0.7
1
Time in months
Overall survival
6/6
5/6
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2004
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CTSP ± LD
Receptor Donador Quimera mixta
Quimera completa
R R R
RL RL RL
R R R
RL D D
D D D
D D D
D D D
D D D
D D
D D
D D
D D ! ! !QUIMERISMO
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Quimerismo post-trasplante:
P XX / XY P Microsatélites
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Enumeracion de cromosomas sexuales
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X
Y
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Microsatélites
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Microsatélites
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
MW O S TPOX FGA vW AMEL D5S818 D16S539
D R R O S O S O S O S
501 pb
404 pb 353 pb
242 pb
190 pb
147 pb
110 pb 89 pb
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CITOMETRÍA DE FLUJO PARA GRUPOS SANGUÍNEOS
ERITROCITOS A+
PMT2LO6
Eritrocitos A+ (19.5%)
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Respuestas en LGC: P Cariotipo
P BCR / ABL, PCR
P BCR / ABL, qPCR
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2005
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2008
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Rev Invest Clin Méx 2004; 53:235-239
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M3
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M2
M4Eo
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Reacción en cadena de la polimerasa
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Marcadores moleculares en LMA 1) PML / RARa 2) AML1 / ETO 3) inv16 4) cKIT 5) CEBPA 6) NPM-1 7) FLT3 8) BCR / ABL
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Marcador Riesgo Frecuencia
en LAM PML / RARa Favorable 12-25%
AML1 / ETO Favorable 7-8%
INV16 Favorable 7-9%
cKIT Desfavorable 5%
CEBPA Favorable 8%
NPM1 Favorable 25-35%
FLT3-ITD Desfavorable 18-20%
BCR / ABL1 Desfavorable 0.8-1.2%
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Riesgos en LMA a) Bajo
b) Intermedio
c) Alto
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Riesgos en LMA a) Bajo:
PML / RARa inv 16 AML1 / ETO
Excepto si tiene FLT3 mutado
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Riesgos en LMA b) Intermedio:
Cariotipo normal Trisomía 8 NPM-1 FLT3
CEBPA
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Riesgos en LMA b) Alto:
Monosomía 5 Monosomía 7 Cariotipos complejos NPM-1 FLT3
CEBPA
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Rev Invest Clin Méx 2005; 57:415
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Rev Invest Clín Méx 2011; 63:25-30
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Riesgo Hermano idéntico
ó compatible MUD, haploidéntico
ó cordón
Bajo, excepto: No No c-KIT Si Posible
Intermedio, excepto: Si Posible NPM1+/FLT3-ITD - Posible No CEBPA+/FLT3-ITD - Posible No FLT3-ITD + Si Si
Alto Si Si
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FLT3
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NPM1
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Leucemia mieloblástica
Pronóstico FLT3 NPM1 Malo Positivo Negativo Intermedio Negativo Negativo Bueno Negativo Positivo
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TMO en LMA
Hermano HLA compatible Cordón umbilical Haploidéntico MUD
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TMO en LMA
Mieloablativo Intensidad reducida
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2004; 45:1191 2004; 45:1191
2004
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2007; 12:193
2007
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2006
![Page 77: Biología molecular en el trasplante depatologiaclinicamexicana.org.mx/minisite/merida/... · Biología molecular (microsatélites) para demostrar que las células leucémicas son](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022050507/5f98882c9cfce72efb404483/html5/thumbnails/77.jpg)
![Page 78: Biología molecular en el trasplante depatologiaclinicamexicana.org.mx/minisite/merida/... · Biología molecular (microsatélites) para demostrar que las células leucémicas son](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022050507/5f98882c9cfce72efb404483/html5/thumbnails/78.jpg)
2006
![Page 79: Biología molecular en el trasplante depatologiaclinicamexicana.org.mx/minisite/merida/... · Biología molecular (microsatélites) para demostrar que las células leucémicas son](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022050507/5f98882c9cfce72efb404483/html5/thumbnails/79.jpg)
Biología molecular (microsatélites) para demostrar
que las células leucémicas son del donador
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2006
![Page 81: Biología molecular en el trasplante depatologiaclinicamexicana.org.mx/minisite/merida/... · Biología molecular (microsatélites) para demostrar que las células leucémicas son](https://reader034.fdocuments.net/reader034/viewer/2022050507/5f98882c9cfce72efb404483/html5/thumbnails/81.jpg)
CMV
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CMV en TMO
ü Antígeno pp 67 del CMV, definido por biología molecular, indica reactivación
ü Anti-CMV (IgG, IgM) indican exposición al virus
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2004
American Journal of Hematology, (2004) in press
1Centro de Hematología y Medicina Interna de Puebla. Puebla, Mexico2Laboratorios Clínicos de Puebla, Puebla, Mexico
3Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de Nutrición "Salvador Zubirán“, Mexico City4Departamento de Química y Biología, Universidad de las Américas-Puebla, Puebla Mexico
1,2Ruiz-Argüelles GJ, 1,2Gómez-Rangel JD, 3Ponce-de-León S, 3González-Déctor L, 2Reyes-Núñez V and 2,4Garcés-Eisele J.
The Mexican Schedule to Conduct AllogeneicStem Cell Transplantation Is Related to a Low Risk
Of Cytomegalovirus Reactivation And Disease.
American Journal of Hematology, (2004) in press
1Centro de Hematología y Medicina Interna de Puebla. Puebla, Mexico2Laboratorios Clínicos de Puebla, Puebla, Mexico
3Instituto Nacional de Ciencias Médicas y de Nutrición "Salvador Zubirán“, Mexico City4Departamento de Química y Biología, Universidad de las Américas-Puebla, Puebla Mexico
1,2Ruiz-Argüelles GJ, 1,2Gómez-Rangel JD, 3Ponce-de-León S, 3González-Déctor L, 2Reyes-Núñez V and 2,4Garcés-Eisele J.
The Mexican Schedule to Conduct AllogeneicStem Cell Transplantation Is Related to a Low Risk
Of Cytomegalovirus Reactivation And Disease.
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La biología molecular es crítica en
el trasplante de médula ósea
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