BIOAKTIVITAS MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS...

BIOAKTIVITAS MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS MERAH

Alpinia purpurata K.SCHUM. TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI

Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli

SITTI RAHBIAH AKRAM

H41109277

JURUSAN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS HASANUDDIN

MAKASSAR

2013

i


Alpinia purpurata K.SCHUM. TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI


SITTI RAHBIAH AKRAM

H41109277

Skripsi ini dibuat untuk Melengkapi Tugas Akhir dan memenuhi Syarat untuk

Memperoleh Gelar Sarjana Sains Pada

Jurusan Biologi

JURUSAN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS HASANUDDIN

MAKASSAR

2013

ii

LEMBAR PENGESAHAN


Alpinia purpurata K.Schum. TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI


Disetujui Oleh :

Pembimbing Utama Pembimbing Pertama

Prof. Dr. Hj. Dirayah R. Husain, DEA Drs. Asadi Abdullah, M.Si,

Nip. 19600525 198601 2 001 Nip. 19620303 198903 1 007

iii

KATA PENGANTAR

Segala puji Bagi Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat, hidayah dan

perlindungan-Nya sehingga penulis merampungkan penelitian dan menyelesaikan

skripsi ini. Shalawat dan salam semoga senantiasa tetap tercurah kepada

Rasulullah SAW, kepada keluarganya, sahabatnya, dan orang-orang yang

senantiasa berada di jalan-Nya.

Dalam rentang waktu dan perjalanan panjang yang harus dilalui penulis,

tak terlepas dari uluran tangan yang datang dari orang-oarng disekeliling tanpa

mampu untuk dibalas, serta begitu banyak harapan, motivasi dan doa yang

menyertai penulis hingga skripsi ini dapat diselesaikan.

Dengan hal ini teristimewa, ditujukan sebagai wujud rasa terima kasih

yang tidak terhingga, serta teriring doa dan kasih sayang tiada henti atas segala

pengorbanan kepada Ayahanda tercinta Akram, SKM. dan Ibunda tersayang

Jalmiah Jamil yang selama ini melimpahkan cinta kasih sayangnya, doa dan

dorongan moril dan materi tidak terkira yang tak dapat terbalaskan. Penulis juga

menyampaikan terima kasih dan penghargaan tanpa batas kepada semua pihak

yang telah memberikan arahan, bimbingan dan petunjuk, motivasi dan doanya

dalam proses penyusunannya, antara lain :

1. Prof. Dr. dr. H. Idrus Paturussi selaku Rektor Universitas Hasanuddin

(UNHAS) Makassar

iv

2. Prof. Dr. H. Abd. Wahid Wahab. M.Sc Selaku Dekan Fakultas Matematika

dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Unhas Makassar beserta staf

3. Dr. Eddy Soekandarsih, M.Sc selaku Ketua Jurusan Biologi Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Unhas Makassar beserta

staf dosen dan pegawai

4. Prof. Dr. Hj. Dirayah R. Husain, DEA selaku pembimbing utama yang telah

dengan sabar meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan dan

pengarahan sehingga skripsi ini dapat terselesaikan

5. Drs. Asadi Abdullah, M.Si selaku pembimbing pertama yang telah dengan

sabar meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan dan pengarahan

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan. Serta sebagai penasehat akademik,

terima kasih atas arahannya, bimbingan dan motivasi selama perkuliahan

6. Tim penguji skripsi Drs. Muhtadin Asnady S., M.Si, Dody Priosambodo,

S.Si, M.Si, Dr. Eddy Soekandarsih, M.Sc, dan Dr. Rosana Agus, M.Si yang

telah membantu penulis dalam menyempurnakan skripsi melalui kritik dan

sarannya

7. Bapak Markus selaku analis laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran

yang telah membantu selama penelitian berlangsung

8. Terima kasih untuk kakakku Muh. Ikmal Akram dan adikku Nurfitriani

Akram yang telah banyak membantu penulis baik secara langsung maupun

tdk langsung

9. Terima kasih untuk teman penelitianku Yulinar Rajab, Hasriani Rahman,

Miladiarsi, St. Hatijah dan Yusdar M., serta teman – teman Bi09enesis

v

(Biologi 09 Generasi Eksis) terima kasih atas doa, bantuan dan

dukungannya selama ini

10. Saudara – saudariku mahasiswa Jurusan Biologi terima kasih atas doa dan

dukungan selama ini, semoga persaudaraan yang terjalin tidak berhenti

sampai disini dan kekal selamanya.

11. Rekan-rekan mahasiswa (i) MIPA 2009 dan keluarga besar KMF MIPA yang

tercinta, Terima kasih atas doa dan dukungannya. Semoga karunia-Nya selalu

tercurah kepada kita semua. Amin

12. Semua pihak yang telah membantu penulis baik secara langsung maupun

tidak langsung sehingga dapat menyelesaikan skripsi ini.

Penulis menyadari masih banyak terdapat kelemahan dan kekurangan

dalam penyusunan skripsi ini untuk itu penulis sangat mengharapkan kritik dan

saran yang membangun demi kesempurnaan skripsi. Tiada kata yang pantas

penulis ucapkan selain dari doa dan mengucap syukur, semoga apa yang telah

diberikan berkenan di hadapan Allah SWT. Penulis berharap semoga skripsi ini

dapat bermanfaat bagi pembaca pada umumnya dan bagi penulis khususnya.

Makassar, Mei 2013

Penulis,-

vi

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang bioaktivitas minyak atsiri rimpang

lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum. terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui bioaktivitas serta efektivitas dari minyak atsiri Rimpang Lengkuas

Merah Alpinia purpurata K.Schum. terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Pengujian daya hambat dilakukan

dengan metode difusi agar menggunakan empat konsentrasi (10%, 20%, 40% dan

80% b/v), ciprofloxacin sebagai kontrol (+) dan Dimetill Sulfoksida (DMSO)

sebagai kontrol (-) pada medium Muller Hinton Agar (MHA) yang diinkubasi

selama 2 x 24 jam. Hasil pengujian menunjukkan minyak atsiri mampu

menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli

dengan daya hambat terbesar masing – masing 18,2 mm dan 17,1 mm serta efektif

pada konsentrasi 20%.

Kata kunci : Bioaktivitas, Rimpang Lengkuas Merah Alpinia purpurata K.Schum,

Minyak atsiri, Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

vii

ABSTRACT

The research has done about essential oils bioactivity of red galanga

Alpinia purpurata K.Schum rhizome to the growth of bacteria Staphylococcus

aureus and Escherichia coli. The aims of this research was to determine the

bioactivity and effectivity of essential oils of red galanga Alpinia purpurata

K.Schum rhizome to the growth of bacteria Staphylococcus aureus and

Escherichia coli. Inhibition test did by agar diffusion method using four

concentrations (10%, 20%, 40% and 80% w/v), ciprofloxacin as a positive control

(+) and Dimetill sulfoxide (DMSO) as a negative control (-) in the Muller Hinton

Agar (MHA) medium were incubated for 2 x 24 hours. The test results showed

that the essential oil able to inhibit the growth of bacteria Staphylococcus aureus

and Escherichia coli with the greatest inhibition each 18.2 mm and 17.1 mm, and

effective in concentration of 20%.

Keywords: Bioactivity, Red galanga Alpinia purpurata K.Schum rhizome,

Essential oils, Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

viii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................ i

HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. ii

KATA PENGANTAR .............................................................................. iii

ABSTRAK ................................................................................................ vi

ABSTRACT .............................................................................................. vii

DAFTAR ISI ............................................................................................ viii

DAFTAR TABEL .................................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ................................................................................ xii

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xiii

BAB I PENDAHULUAN ......................................................................... 1

I.1 Latar Belakang .......................................................................... 1

I.2 Tujuan Penelitian ......................................................................... 2

I.3 Manfaat Penelitian ....................................................................... 3

I.4 Waktu dan Tempat Penelitian ..................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. 4

II.1 Gambaran Umum Lengkuas merah Alpinia purpurata K.

Schum ........................................................................................ 4

II.1.1 Deskripsi dan Klasifikasi .................................................... 4

II.1.2 Habitat ................................................................................ 6

II.1.3 Nama Daerah dan Nama Asing ........................................... 6

II.1.4 Kandungan Kimia Tanaman Lengkuas merah Alpinia

purpurata K. Schum ............................................................ 7

II.1.5 Khasiat Tanaman Lengkuas merah Alpinia purpurata

K. Schum ............................................................................ 9

II.2 Ektraksi ...................................................................................... 9

II.2.1 Definisi Ekstraksi ................................................................ 9

II.2.2 Destilasi Uap Air ................................................................. 10

II.3 Antimikroba ............................................................................... 10

ix

II.3.1 Mekanisme Kerja Antimikroba ........................................... 11

II.3.2 Metode Uji Antimikroba Secara Mikrobiologi ................... 14

II.4 Tinjauan Umum Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus

aureus ........................................................................................ 18

II.4.1 Bakteri Escherichia coli ..................................................... 18

II.4.2 Bakteri Staphylococcus aureus .......................................... 20

BAB III METODE PENELITIAN ......................................................... 22

III.1 Alat ........................................................................................... 22

III.2 Bahan ........................................................................................ 22

III.3 Metode Kerja .......................................................................... 23

III.3.1 Pengambilan Sampel ......................................................... 23

III.3.2 Pengolahan dan Destilasi Bahan ........................................ 23

III.3.3 Konsentrasi Bahan ............................................................. 23

III.3.4 Sterilisasi Alat .................................................................... 24

III.3.5 Pembuatan Medium Pertumbuhan Bakteri Uji .................. 24

III.3.5.1 Pembuatan Medium NA (Nutrient Agar) ................... 24

III.3.5.2 Pembuatan Medium MHA (Muller Hinton Agar) ...... 24

III.3.6 Penyiapan Bakteri Uji ........................................................ 25

III.3.6.1 Peremajaan Bakteri Uji ............................................... 25

III.3.6.2 Pembuatan Suspensi Bakteri Uji ................................ 25

III.3.7 Penyiapan Larutan Pembanding ........................................ 26

III.3.8 Uji Daya Hambat ............................................................... 26

III.3.9 Pengukuran Diameter Daerah Hambatan .......................... 27

III.3.10 Analisis Data .................................................................... 27

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................. 28

IV.1 Bioaktivitas Minyak Atsiri Rimpang Lengkuas merah Alpinia

purpurata K.Schum Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus

aureus dan Escherichia coli ...................................................... 30

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .................................................... 40

V.1 Kesimpulan ................................................................................. 40

V.2 Saran .......................................................................................... 40

x

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 41

LAMPIRAN ............................................................................................. 44

xi

DAFTAR TABEL

Tabel

Halaman

1. Hasil analisis kimiawi bubuk lengkuas ................................................ 8

2. Diameter zona hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah

Alpinia purpurata K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan masa inkubasi

24 jam hingga 48 jam .............................................................................. 30



Staphylococcus aureus dengan masa inkubasi 24 jam hingga 48 jam .... 32



Escherichia coli dengan masa inkubasi 24 jam hingga 48 jam .............. 35

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1. Habitus tanaman lengkuas merah Alpinia purpurata ............................. 5

2. Rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata .......................................... 5

3. Destilasi sederhana .................................................................................. 10

4. Struktur dinding sel bakteri ..................................................................... 12

5. Mekanisme kerja antibiotik ..................................................................... 13

6. Mekanisme kerja antibiotik melalui hambatan sintesis asam nukleat .... 14

7. Metode uji antimikroba cara Kirby Bauer .............................................. 15

8. Metode uji antimikroba cara sumuran .................................................... 16

9. Metode uji antimikroba cara pour plate .................................................. 17

10. Metode uji antimikroba cara dilusi ......................................................... 18

11. Escherichia coli yang diamati dengan menggunakan mikroskop

elektron scanning 8800x ......................................................................... 19

12. Staphylococcus aureus yang diamati dengan menggunakan mikroskop

elektron scanning 20000x ....................................................................... 21

13. Rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum yang telah

diolah ....................................................................................................... 29

14. Minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum ..... 29

15. Hasil uji daya hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia

purpurata K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus

aureus setelah masa inkubasi (A) 24 jam dan (B) 48 jam ...................... 31

16. Histogram zona hambat minyak atsiri terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus setelah masa inkubasi (A) 24 jam dan (B) 48

jam ........................................................................................................... 33

17. Hasil uji daya hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia

purpurata K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli

setelah masa inkubasi (A) 24 jam dan (B) 48 jam .................................. 34

18. Histogram zona hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah


Escherichia coli setelah masa inkubasi (A) 24 jam dan (B) 48 jam ....... 36

xiii

LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Pengolahan rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum ....... 43

2. Destilasi Rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum ........... 44

3. Pembuatan variasi konsentrasi ................................................................ 45

4. Pembuatan medium ................................................................................. 46

1

BAB I

PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Penelitian tentang kandungan senyawa kimia dari bahan alam seperti

tanaman, semakin banyak dilakukan untuk mendapatkan sumber bahan obat –

obatan herbal (Shaikh et al., 2012). Hal ini disebabkan karena keanekaragaman

struktur kimia yang dihasilkan dapat mengurangi efek samping dalam penggunaan

oleh manusia dan mudah didapatkan. Salah satu tanaman tersebut adalah lengkuas

merah Alpinia purpurata dari famili Zingiberaceae (Parwata dan Dewi, 2008).

Di Indonesia, lengkuas merah Alpinia purpurata sering dijadikan sebagai

bahan penelitian untuk melihat aktivitas antimikrobanya. Beberapa penelitian

yang telah dilakukan yaitu pengaruh lengkuas pada berbagai bakteri penyebab

panu (Hedy, 1980), mikroba penyebab sakit kulit (Pratiwi1992), penyebab

ketombe (Rahmawati, 1995) dan uji aktivitas antibakteri minyak atsiri rimpang

lengkuas (Parwata dan Dewi, 2008). Berdasarkan beberapa penelitian tersebut,

terbukti bahwa ekstrak lengkuas dapat menghambat pertumbuhan berbagai bakteri

patogen.

Itokawa dan Takeya (1993) menjelaskan bahwa tanaman lengkuas

mengandung golongan senyawa flavonoid, fenol dan terpenoid. Golongan

senyawa-senyawa ini sering dipergunakan sebagai bahan dasar obat-obatan

modern. Senyawa terpenoid asetoksicavikol asetat, merupakan senyawa yang

bersifat antitumor dari tumbuhan lengkuas. Selain itu, tanaman lengkuas juga

2

mengandung minyak atsiri yang terdiri dari senyawa eugenol, sineol, dan metil

sinamat (Buchbaufr, 2003).

Penelitian yang dilakukan oleh Kochuthressia et al. (2010), membuktikan

bahwa ekstrak etanol lengkuas merah Alpinia purpurata dapat menghambat

pertumbuhan berberapa bakteri, seperti Escherichia coli sebesar 11.4 mm ± 0,1

dan Staphylococcus aureus sebesar 10 mm ± 0,2. Demikian pula penelitian dari

Parwata dan Dewi (2008), menerangkan bahwa minyak atsiri lengkuas pada

konsentrasi 1000 ppm dapat menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli

sebesar 9 mm dan Staphylococcus aureus sebesar 7 mm. Penelitian yang

dilakukan oleh Sukandar et al. (2009) juga memperoleh hasil bahwa minyak atsiri

lengkuas merah Alpinia purpurata pada konsentrasi 20% dapat menghambat

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus sebesar 19.5 mm.

Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan pengujian bioaktivitas

minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata terhadap pertumbuhan

bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Escherichia coli yang

merupakan bakteri gram negatif sedangkan Staphylococcus aureus merupakan

bakteri gram positif, yang dapat menyebabkan penyakit apabila dalam jumlah

yang berlebihan.

I.2 Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini yaitu :

1. Mengetahui bioaktivitas minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia

purpurata K. Schum dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia

3

coli dan Staphylococcus aureus yang ditunjukkan oleh pembentukan zona

bening pada media pertumbuhan bakteri uji yang digunakan.

2. Mengetahui efektivitas dari ekstrak minyak atsiri rimpang lengkuas merah

Alpinia purpurata K. Schum dalam mempengaruhi pertumbuhan bakteri

Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

I.3 Manfaat Penelitian

Manfaat dari penelitian ini yaitu memberikan informasi kepada

masyarakat bahwa khasiat lengkuas merah Alpinia purpurata K. Schum yaitu

dapat dijadikan sebagai obat alternatif dalam pengobatan penyakit yang

disebabkan oleh bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli, selain

sebagai bumbu masakan,.

I.4 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini akan dilaksanakan pada bulan Desember 2012 – April 2013.

Lokasi pengambilan sampel rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata K.

Schum bertempat di Desa Tamasaju, Kecamatan Galesong Utara, Kabupaten

Takalar, Sulawesi Selatan. Analisis kandungan minyak atsiri rimpang lengkuas

merah Alpinia purpurata K. Schum dilakukan di Balai Besar Laboratorium

Kesehatan Makassar. Pengujian terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran,

Universitas Hasanuddin, Makassar.

4

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Gambaran Umum Lengkuas Merah Alpinia purpurata K.Schum

II.1.1 Deskripsi dan Klasifikasi

Tanaman lengkuas merah Alpinia purpurata K. Schum (Gambar 1) berupa

tanaman terna perenial dengan rimpang yang mengandung minyak menguap

hingga berbau aromatik (Tjitrosoepomo, 2000). Tanaman ini berumur panjang,

dapat mencapai tinggi 1-1,15 m, batang tertutup oleh pelepah – pelepah dan daun

yang tersusun berseling bangun lanset. Rimpang dengan sisik yang berwarna

kemerahan, keras mengkilap, dan sebelah dalam berwarna putih. Bunga putih

dalam tandan pada ujung batang seperti yang terlihat pada gambar 2

(Tjitrosoepomo, 1994).

Bunga lengkuas merah Alpinia purpurata terpisah – pisah tersusun dalam

bunga majemuk dan termasuk bunga banci. Hiasan bunga dapat dibedakan dalam

kelopak dengan 3 daun kelopak dan mahkota yang terdiri atas 3 daun mahkota

yang berlekatan pada bagian bawahnya membentuk suatu buluh, dengan bentuk

dan warna yang cukup aktraktif. Benang sari 1 dengan 3-5 benang sari mandul

yang kadang – kadang bersifat seperti daun mahkota. Bakal buah tenggelam,

beruang 3 dengan tembuni di ketiak. Tangkai putik di ujung, tidak terbagi, bebas

atau terdapat dalam suatu alur pada benang sari yang fertil, ada kalanya berbibir

atau bergigi 2. Bakal biji banyak. Buahnya buah kendaka yang berkatup 3, atau

5

berdaging tidak membuka. Biji bulat atau berusuk, mempunyai salut biji, dan

endosperm banyak (Tjitrosoepomo, 2000).

Gambar 1. Habitus Tanaman Lengkuas Merah Alpinia purpurata K.Schum

Gambar 2. Rimpang Lengkuas Merah Alpinia purpurata K.Schum

6

Menurut, Tjitrosoepomo (2000), sistematika bawang merah Alpinia

purpurata K.Schum. adalah :

Regnum : Plantae

DIvisio : Spermatophyta

Sub divisio : Angiospermae

Classis : Monocotyledonae

Ordo : Zingiberales

Familia : Zingiberaceae

Genus : Alpinia

Species : Alpinia purpurata

II.1.2 Habitat

Lengkuas merah Alpinia purpurata banyak tumbuh di hutan-hutan,

tegalan, dan pekarangan. Lengkuas dapat tumbuh dengan baik pada lahan yang

subur, gembur, tidak tergenang air, berupa tanah liat yang berpasir, banyak

mengandung humus, beraerasi, dan memiliki drainase yang baik. Umumnya

tanaman lengkuas dapat tumbuh pada lahan terbuka sampai di tempat yang agak

terlindung. Tumbuh pada ketinggian sampai dengan 1200 m diatas permukaan

laut dengan curah hujan 1500 – 2400 mm (Wardana et al., 2002).

II.1.3 Nama Daerah dan Nama Asing

Nama daerah dan nama asing dari Alpinia Purpurata K.Schum adalah

(Hembing dan Wijayakusuma, 2001) :

Nama Daerah

Jawa : laja (Sunda), laos (Jawa).

7

Sulawesi : laja, langkuwasa (Makassar), aliku (Bugis), lingkuwas(Manado),

lingkuboto (Gorontalo), ringkuwas, lingkoas (Minahasa).

Sumatra : langkueueh (Aceh), lengkues (Gayo), kelawas atau halawas

(Batak), lakuwe (Nias), lengkuas atau langkuwas (Melayu),

langkuweh (minangkabau), lawas (Lampung).

Kalimantan : langkuwas (Banjar).

Nusa Tenggara : kalawasan, laja, lahwas, isem (Bali), langkuwas (pulau Roti).

Maluku : lawase, lakwase, kourola (Seram), galiasa (Halmahera, Ternate),

laawasi, lawasi, lakuwase (Ambon), languase (Buru), lauwasel

(Saparua).

Nama Asing

Grote galanga (Belanda), Galanga de inde (Perancis), Groser galgant

(Jerman), Greater galangan, Java galangal, Siamese ginger atau Galangal

(Inggris), Khulanyan (Arab), Kong deng (Kamboja), Langkuas atau palia

(Filipina), Padagoji (Burma), Kulayan (Urdu India), Lengkuas atau Puar

(Malaysia), Padagoji (Burma), Kom deng atau Pras (Kamboja), Kha (Laos,

Thailand) dan Hong dou ku (Cina).

II.1.4 Kandungan Kimia Tanaman Lengkuas Merah Alpinia purpurata

Rimpang lengkuas mengandung karbohidrat, lemak, sedikit protein,

mineral (K, P, Na), komponen minyak atsiri, dan berbagai komponen lain yang

susunannya belum diketahui. Rimpang lengkuas segar mengandung air sebesar 75

%, dalam bentuk kering mengandung 22.44 % karbohidrat, 3.07 % protein dan

8

sekitar 0.07 % senyawa kamferid. Kandungan minyak atsiri lengkuas yang

berwarna kuning kehijauan dalam rimpang lengkuas ± 1 %, dengan komponen

utamanya metilsinamat 48 %, sineol 20-30 %, 1 % kamfer, dan sisanya d-pinen,

galangin, dan eugenol penyebab rasa pedas pada lengkuas (Darwis et al., 1991).

minyak atsiri pada rimpang lengkuas mengandung senyawa eugenol, sineol, dan

metil sinamat (Buchbaufr, 2003). Adapun hasil analisis kimiawi bubuk lengkuas

dapat dilihat pada Tabel 1 berikut ini (Robinson, 1995) :

Tabel 1. Hasil analisis kimiawi dari berbagai jenis lengkuas

Kandungan pada

bahan

Jenis Lengkuas

Merah Putih

Muda Tua

Kadar air 7,90 6,67 6,52

Kadar abu 11,63 7,74 8,20

Kadar abu yang

tidak larut asam 4,15 3,01 4,07

Kadar komponen

yang larut air 1,13 0,29 0,58

Kadar komponen

yang larut etanol 4,48 2,79 4,50

Kadar minyak atsiri 0,22 0,15 0,13

Kadar pati 35,77 32,45 32,71

Kadar lemak 5,38 3,39 3,22

Kadar protein 7,22 6,10 3,82

Kadar serat kasar 35,20 37,94 36,28

9

II.1.5 Khasiat Tanaman Lengkuas Merah Alpinia purpurata K.Schum

Sebagian besar komponen bioaktif pada tanaman rempah-rempah

mempunyai khasiat terutama dalam bidang kesehatan. Komponen bioaktif yang

menyebabkan aroma pedas menyengat pada lengkuas telah dibuktikan dapat

menghambat pertumbuhan beberapa jenis jamur. Komponen tersebut adalah

linalool, geranyl acetate, dan 1,8-cineole, yang dapat menghambat water molds,

seperti jenis Carassius auratus dan Xiphoporus maculates (Chukanhom et al.,

2005).

Khasiat lengkuas merah sebagai antimikroba juga telah diteliti oleh Hedy

(1980) yang mempelajari aktivitas lengkuas merah sebagai antimikroba penyakit

panu, Pratiwi (1992) yang menguji lengkuas merah terhadap mikroba penyebab

penyakit kulit, dan Rahmawati (1995) yang mengaplikasikan antijamur lengkuas

merah pada jamur penyebab ketombe.

Kegunaan rimpang lengkuas lainnya adalah untuk mengobati eksim,

bronkhitis, masuk angin, radang anak telinga, radang lambung, khlorela, dan

sebagai obat karminativ (obat yang dapat merangsang gerakan usus, memperbaiki

pencernaan, dan menghilangkan kembung) (Darwis et al.,1991).

II.2 Ekstraksi

II.2.1 Definisi Ekstraksi

Ekstraksi merupakan pemisahan senyawa aktif dari bagian tanaman

menggunakan pelarut selektif melalui prosedur standar. Tujuan ekstraksi adalah

10

untuk menarik semua komponen kimia yang terdapat dalam simplisia atau

menghilangkan senyawa yang tidak diinginkan (Handa et al., 2008).

II.2.2 Destilasi uap air

Salah satu jenis ekstraksi yaitu destilasi uap air (Gambar 3). Penyarian

minyak menguap dengan cara simplisia dan air ditempatkan dalam labu berbeda.

Air dipanaskan dan akan menguap, uap air akan masuk ke dalam labu sampel

sambil mengekstraksi minyak menguap yang terdapat dalam simplisia, uap air dan

minyak menguap yang telah terekstraksi menuju kondensor dan akan

terkondensasi, lalu akan melewati pipa alonga, campuran air dan minyak menguap

akan masuk ke dalam corong pisah, dan akan memisah antara air dan minyak

atsiri (Handa et al., 2008).

Gambar 3. Destilasi sederhana

(Sumber : http://3.bp.blogspot.com/-2ZGq0LG1n-

w/TwkhU2fwmSI/AAAAAAAAABU/ycRXIVPNiKw/s1600/destilasi+2.jpg)

II.3 Antimikroba

Antimikroba merupakan suatu bahan yang dapat menghambat ataupun

membunuh bakteri. Antimikrobia yang ideal menunjukkan sifat toksisitas selektif,

11

toksisitas yang selektif merupakan fungsi reseptor yang spesifik yang dibutuhkan

untuk melekatnya obat atau karena hambatan biokimia yang terjadi bagi

organisme namun tidak bagi inang. Berdasarkan tingkat toksisitas selektifnya

antimikroba terbagi atas (Ganiswarna, 1995) :

a. Bakteriostatik : Senyawa antimikroba yang mampu menghambat pertumbuhan

bakteri namun, jika pemberian senyawa ini dihentikan atau habis, maka

pertumbuhan dan perbanyakan dari bakteri akan kembali meningkat.

b. Bakteriosida : Senyawa antimikroba yang mampu membunuh dan

menghentikan aktivitas fisiologis dari bakteri, meskipun pemberian senyawa

tersebut dihentikan

II.3.1 Mekanisme Kerja Antimikroba

Mekanisme kerja dari suatu bahan antimikroba terjadi pada bagian sel

terutama pada bagian membran/dinding sel, oleh karena itu matinya sel karena

bahan antimikroba disebabkan oleh rusaknya membran sel. Menurut Pelczar dan

Chan (1988) kerusakan sel oleh bahan antimikroba adalah sebagai berikut:

1. Perusakan dinding sel bakteri

Fungsi dari dinding sel adalah mengatur pertukaran zat dari luar ke dalam sel

serta melindungi sel dari pengaruh dari luar yang tidak menguntungkan.

Kerusakan dinding sel dapat menyebabkan lisis atau menghambat sintesis

komponen dinding sel. Struktur dinding sel (Gambar 4) dapat rusak oleh zat

antimikroba dengan cara menghambat pembentukkannya atau dengan

mengbahnya setelah terbentuk.

12

Gambar 4. Struktur dinding sel bakteri

(Sumber : http://4.bp.blogspot.com/-4dXzKx36kIE/ThKr-

kENqMI/AAAAAAAAANM/RufGyGnPaEQ/s1600/bakteri-gram-negatif.jpg)

2. Perubahan permeabilitas sel

Membran sitoplasma mempertahankan bahan-bahan tertentu di dalam sel,

mengatur aliran masuk keluarnya bahan-bahan lain serta memelihara

integritas komponen-komponen selular. Perubahan membran sitoplasma akan

menyebabkan kebocoran zat-zat nutrisi dalam sel yang akan memungkinkan

keluarnya ion anorganik penting, seperti nukleotida, koenzim dan asam

amino. Kerusakan pada membran ini akan menyebabkan terhambatnya

pertumbuhan sel/matinya sel.

3. Perubahan molekul protein dan asam nukleat

Protein adalah komponen utama struktur sel, semua reaksi metabolisme sel

dikatalisis oleh enzim yang terbuta dari protein. Protein dan asam nukleat

memiliki peranan penting dalam kehidupan normal sel, sehingga bila terjadi

http://4.bp.blogspot.com/-4dXzKx36kIE/ThKr-kENqMI/AAAAAAAAANM/RufGyGnPaEQ/s1600/bakteri-gram-negatif.jpghttp://4.bp.blogspot.com/-4dXzKx36kIE/ThKr-kENqMI/AAAAAAAAANM/RufGyGnPaEQ/s1600/bakteri-gram-negatif.jpg

13

gangguan pada pembentukan fungsi dapat mengakibatkan kerusakan total

pada sel. Substansi bahan antimikroba dapat mengubah molekul protein dan

asam nukleat, yaitu mendenaturasikan protein dan asam nukeat yang dapat

merusak sel tanpa diperbaiki kembali. Suhu tinggi dan konsentrasi peka

bahan kimia dapat mengakibatkan koagulasi komponen-komponen sel.

4. Penghambatan kerja enzim

Setiap enzim yang ada pada sel merupakan sasaran potensial bagi bekerjanya

suatu bahan antimikroba. Banyak bahan antimikroba telah diketahui dapat

mengangu reaksi biokimiawi. Penghambatan ini dapat mengakibatkan

terganggunya metabolisme sel sehingga dapat mengakibatkan kematian sel

seperti yang terlihat pada gambar 5.

Gambar 5. Mekanisme kerja antibiotik

(Sumber : http://aguskrisnoblog.files.wordpress.com/2011/01/mekanisme-

resistensi-bakteri-terhadp-ant-biotk.gif)

http://aguskrisnoblog.files.wordpress.com/2011/01/mekanisme-resistensi-bakteri-terhadp-ant-biotk.gifhttp://aguskrisnoblog.files.wordpress.com/2011/01/mekanisme-resistensi-bakteri-terhadp-ant-biotk.gif

14

5. Penghambatan sintsesis asam nukleat

Asam nukleat yang berupa DNA, RNA dan protein memegang peranan amat

penting di dalam proses kehidupan normal sel. Hal ini berarti ganguan apapun

pada asam nukleat (Gambar 10) maupun protein dapat mengakibatkan

kerusakan total pada sel.

Gambar 6. Mekanisme Kerja Antibiotik Melalui Hambatan Sintesis Asam

Nukleat

(Sumber: Neuman and Maur, 1985)

II.3.2 Metode Uji Aktivitas Antimikroba Secara Mikrobiologi

Aktivitas antibakteri ditentukan oleh spektrum kerja (spektrum kerja luas,

spektrum kerja sempit), cara kerja (bakterisida atau bakteriostatik) dan ditentukan

pula oleh Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) serta potensi hambatan pada

KHM. Tingkat aktifitas suatu senyawa antimikroba dapat dilakukan dengan

beberapa metoda diantaranya (Rizki, 2012):

1. Agar Difusi

Media yang dipakai adalah Mueller Hinton. Metode difusi ini ada

beberapa cara, yaitu:

15

a. Cara Kirby Bauer

Beberapa koloni kuman dari pertumbuhan 24 jam diambil, disuspensikan

ke dalam 0,5 ml BHI cair, diinkubasikan 5-8 jam pada 37°C. Suspensi ditambah

akuades steril hingga kekeruhan tertentu sesuai dengan standar konsentrasi bakteri

108

CFU per ml. Kapas lidi steril dicelupkan ke dalam suspensi bakteri lalu

ditekan-tekan pada dinding tabung hingga kapasnya tidak terlalu basah, kemudian

dioleskan pada permukaan media agar hingga rata. Kemudian kertas samir (disk)

yang mengandung antibakteri diletakkan di atasnya, diinkubasi pada 37° selama

18-24 jam. Hasilnya diperoleh bahwa beberapa disk terbentuk zona bening seperti

yang terlihat pada gambar 7.

Zona radikal yaitu suatu daerah di sekitar disk dimana sama sekali tidak

ditemukan adanya pertumbuhan bakteri. Potensi antibakteri diukur dengan

mengukur diameter dari zona radikal.

Zona irradikal yaitu suatu daerah di sekitar disk dimana pertumbuhan

bakteri dihambat oleh antibakteri tetapi tidak dimatikan.

Gambar 7. Metode Uji Antimikroba Cara Kirby Bauer

(Sumber : http://4.bp.blogspot.com/_1P4VArZOoqQ/ KirbyBauer_1.jpg)

http://4.bp.blogspot.com/_1P4VArZOoqQ/S5MU0jKQZWI/AAAAAAAAABI/Ah5C4QQq1_k/s1600-h/10-09_KirbyBauer_1.jpg

16

b. Cara Sumuran


ke dalam 0,5 ml BHI cair, diinkubasikan 5-8 jam pada suhu 37°C. Suspensi

ditambah akuades steril hingga kekeruhan tertentu sesuai dengan standar

konsentrasi bakteri 108 CFU per ml. Kapas lidi steril dicelupkan ke dalam

suspensi bakteri lalu ditekan-tekan pada dinding tabung hingga kapasnya tidak

terlalu basah, kemudian dioleskan pada permukaan media agar hingga rata. Media

agar dibuat sumuran dengan garis tengah tertentu, ke dalam sumuran diteteskan

larutan antibakteri kemudian diinkubasi pada 37°C selama 18-24 jam. Hasilnya

terlihat sepert pada gambar 8.

Gambar 8. Metode Uji Antimikroba Cara Sumuran

(Sumber : http://1.bp.blogspot.com/-bkMzeo_KDYQ/T1hTVIHCkPI/s1600/s.jpg)

c. Cara Pour Plate


ke dalam 0,5 ml BHI cair, diinkubasi 5-8 jam pada suhu 37°C. Suspensi ditambah

http://1.bp.blogspot.com/-bkMzeo_KDYQ/T1hTVIHCkPI/s1600/s.jpg

17

akuades steril hingga kekeruhan tertentu sesuai dengan standar konsentrasi bakteri

108 CFU per ml. Suspensi bakteri diambil satu mata ose (Gambar 9) dan

dimasukkan ke dalam 4 ml agar base 1,5 % yang mempunyai temperatur 50°C.

Setelah suspensi kuman tersebut homogen dituang ke dalam media agar Mueller

Hinton, ditunggu sebentar sampai agar tersebut membeku, disk diletakkan di atas

media kemudian diinkubasi 15-20 jam dengan temperatur 37°C. Hasil dibaca

sesuai dengan standar masing-masing bakteri.

Gambar 9. Metode Uji Antimikroba Cara Pour Plate

(Sumber : http://3.bp.blogspot.com/-dKipOJYKq7I/T1hUfGGQtvI/s1600/1s.jpg)

2. Dilusi Cair atau Dilusi Padat

Pada prinsipnya antibakteri diencerkan sampai diperoleh beberapa

konsentrasi sperti yang terlihat pada gambar 10. Pada dilusi cair, masing-masing

konsentrasi obat ditambah suspensi kuman dalam media. Sedangkan pada dilusi

padat tiap konsentrasi obat dicampur dengan media agar lalu ditanami bakteri.

Metode dilusi cair adalah metode untuk menentukan konsentrasi minimal dari

suatu antibakteri yang dapat menghambat atau membunuh mikroorgansime.

Konsentrasi terendah yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri ditunjukkan

http://3.bp.blogspot.com/-dKipOJYKq7I/T1hUfGGQtvI/s1600/1s.jpg

18

dengan tidak adanya kekeruhan disebut Konsentrasi Hambat Minimal (KHM)

atau Minimal Inhibitory Concentration (MIC).

Gambar 10. Metode Uji Antimikroba Cara Dilusi

(Sumber:http://4.bp.blogspot.com/dWOOtWrMSLk/T1hR14NX6eI/s1600/imaes.j

pg)

II.4 Tinjauan Umum Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus

II.4.1 Bakteri Escherichia coli

Klasifikasi Escherichia coli (Jawetz et al., 1995):

Kingdom : Procaryotae

Phylum : Proteobacteria

Classis : Gammaproteobacteria

Ordo : Enterobacteriales

Familia : Enterobacteriaceae

Genus : Escherichia

Species : Escherichia coli

Escherichia coli (Gambar 11) merupakan bakteri Gram negatif berbentuk

batang pendek yang memiliki panjang sekitar 2 μm, diameter 0,7 μm, lebar 0,4-

http://4.bp.blogspot.com/dWOOtWrMSLk/T1hR14NX6eI/s1600/imaes.jpghttp://4.bp.blogspot.com/dWOOtWrMSLk/T1hR14NX6eI/s1600/imaes.jpg

19

0,7μm dan bersifat anaerob fakultatif. Escherichia coli membentuk koloni yang

bundar, cembung, dan halus dengan tepi yang nyata. Escherichia coli menjadi

patogen jika jumlah bakteri ini dalam saluran pencernaan meningkat atau berada

di luar usus. Escherichia coli menghasilkan enterotoksin yang menyebabkan

beberapa kasus diare. Escherichia coli berasosiasi dengan enteropatogenik

menghasilkan enterotoksin pada sel epitel (Jawetz et al., 1995).

Escherichia coli adalah anggota flora normal usus. Escherichia coli

berperan penting dalam sintesis vitamin K, konversi pigmen-pigmen empedu,

asam-asam empedu dan penyerapan zat-zat makanan. Escherichia coli termasuk

ke dalam bakteri heterotrof yang memperoleh makanan berupa zat oganik dari

lingkungannya karena tidak dapat menyusun sendiri zat organik yang

dibutuhkannya. Zat organik diperoleh dari sisa organisme lain. Bakteri ini

menguraikan zat organik dalam makanan menjadi zat anorganik, yaitu CO2, H2O,

energi, dan mineral. Di dalam lingkungan, bakteri pembusuk ini berfungsi sebagai

pengurai dan penyedia nutrisi bagi tumbuhan (Ganiswarna, 1999).

Gambar 11. Escherichia coli yang diamati dengan menggunakan Mikroskop

Elektron Scanning 8800x

(Sumber : https://dco.gl.ciw.edu/sites/dco.gl.ciw.edu/files/images/ecoli.jpg)

https://dco.gl.ciw.edu/sites/dco.gl.ciw.edu/files/images/ecoli.jpg

20

II.4.2 Bakteri Staphylococcus aureus

Klasifikasi Staphylococcus aureus (Jawetz et al., 1995):

Kingdom : Procaryotae

Phylum : Proteobacteria

Classis : Protophyta

Ordo : Eubacteriales

Familia : Micrococcaceae

Genus : Staphylococcus

Species : Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus (Gambar 12) merupakan bakteri Gram positif

berbentuk bulat berdiameter 0,7-1,2 μm, tersusun dalam kelompok-kelompok

yang tidak teratur seperti buah anggur, fakultatif anaerob, tidak membentuk spora,

dan tidak bergerak. Bakteri ini tumbuh pada suhu optimum 37 ºC, tetapi

membentuk pigmen paling baik pada suhu kamar (20-25 ºC). Koloni pada

perbenihan padat berwarna abu-abu sampai kuning keemasan, berbentuk bundar,

halus, menonjol, dan berkilau. Lebih dari 90% isolat klinik menghasilkan

Staphylococcus aureus yang mempunyai kapsul polisakarida atau selaput tipis

yang berperan dalam virulensi bakteri (Jawetz et al., 1995).

Sebagian bakteri Staphylococcus aureus merupakan flora normal pada

kulit, saluran pernafasan, dan saluran pencernaan makanan pada manusia. Bakteri

ini juga ditemukan di udara dan lingkungan sekitar. Staphylococcus aureus yang

patogen bersifat invasif, menyebabkan hemolisis, membentuk koagulase, dan

mampu meragikan manitol (Warsa, 1994).

21

Gambar 12. Staphylococcus aureus yang diamati dengan menggunakan

Mikroskop Elektron Scanning 20000x

(Sumber : http://www.healthhype.com/s aureuse lectron microscope.jpg)

http://www.healthhype.com/s%20aureuse%20lectron%20microscope.jpg

22

BAB III

METODE PENELITIAN

III.1 Alat

Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah cawan petri (Pyrex),

tabung reaksi, gelas kimia (Pyrex), erlenmeyer (Pyrex), corong pisah (Pyrex),

gelas ukur 50 ml (Pyrex), tabung pengenceran, mikropipet, pinset, pembakar

bunsen, jarum ose, batang pengaduk, sendok tanduk, spoit, pipet tetes, pencadang,

timbangan analitik (Mettler AE160), rak tabung, neraca ohaus (Harvard Trip

Balance), labu destilasi, otoklaf (Webeco), oven (Heraeus), inkubator (Imperial),

inkubator (Memmert), laminary air flow, lemari pendingin, jangka sorong,

rotavporator, blender dan kamera.

III.2 Bahan

Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah rimpang lengkuas merah

Alpinia purpurata K.Schum, biakan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli,

Nutrien Agar (NA) sintetik (Oxoid), Muller Hinton Agar (MHA) sintetik (BD),

DMSO (Dimetil sulfoksida), NaCl fisiologis 0,9%, Mc. Farland 0,5,

ciprofloxacin, Nacl, alkohol 70%, aquades steril, kertas label, aluminium foil,

kertas saring, kapas, swab steril dan tissue.

23

III.3 Metode kerja

III.3.1 Pengambilan Sampel

Lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum diperoleh di Desa Tamasaju,

Kecamatan Galesong Utara, Kabupaten Takalar, Sulawesi Selatan. Bagian

tanaman yang digunakan dalam penelitian ini yaitu bagian rimpangnya.

III.3.2 Pengolahan dan Destilasi Bahan

Rimpang lengkuas merah Alpinia purupurata sebanyak 1 kg yang telah

diperoleh dicuci bersih dan dipotong kecil-kecil, kemudian diblender hingga

halus. Selanjutnya didestilasi dengan menggunakan destilasi uap. Destilasi

dilakukan dengan cara rimpang lengkuas merah yang telah diolah dimasukkan ke

dalam tangki penyulingan. Hasil destilat berupa campuran air dan minyak

(Parwata dan Dewi, 2008). Kemudian ditambahkan pelarut kloroform untuk

memisahkan minyak dan air, dengan menggunakan corong pemisah. Selanjutnya

kloroform yang bercampur dengan minyak dievaporasi dan menghasilkan minyak

atsiri murni.

III.3.3 Konsentrasi Bahan

Hasil ekstrak minyak atsiri 3,2 ml ditambahkan NaCMC sebnyak 0,5%,

selanjutnya dibuatkan variasi konsentrasi yaitu konsentrasi 10%, 20%, 40%, dan

80% (b/v). Untuk stok 2 ml, Konsentrasi 10% dibuat dengan memasukkan 0,3 ml

minyak atsiri dalam botol sampel kemudian dicukupkan volumenya menjadi 2 ml

dengan menambahkan DMSO lalu dihomogenkan. Cara yang sama diperoleh

konsentrasi 20%, 40%, dan 80%.

24

III.3.4 Sterilisasi Alat

Semua alat yang akan digunakan disterilkan terlebih dahulu. Alat-alat

gelas disterilkan dalam oven pada suhu 180 oC selama 2 jam. Alat-alat non gelas,

medium dan alat-alat yang tidak tahan suhu tinggi disterilkan menggunakan

otoklaf pada suhu 121ºC tekanan 2 atm selama 15 menit, sedangkan ose dan alat-

alat logam disterilkan dengan cara pemanasan langsung pada nyala api spirtus

hingga memijar.

III.3.5 Pembuatan Medium Pertumbuhan Bakteri Uji

III.3.5.1 Pembuatan Medium NA (Nutrient Agar)

Medium yang digunakan adalah NA (Nutrien Agar) sintetik yang

dilarutkan dalam 1000 ml aquades. Cara pembuatannya yaitu bahan ditimbang

sebanyak 20 gram, kemudian dimasukkan ke dalam erlenmeyer dan dilarutkan

dengan menggunakan aquades. Selanjutnya medium tersebut diukur pH-nya

hingga 7, kemudian disterilkan di dalam otoklaf selama 15 menit pada suhu 121oC

dengan tekanan 2 atm.

III.3.5.2 Pembuatan Medium MHA (Muller Hinton Agar)

Medium yang digunakan adalah MHA (Muller Hinton Agar) sintetik yang

dilarutkan dalam 1000 ml aquades. Cara pembuatnya yaitu bahan ditimbang

sebanyak 38 gram, kemudian dimasukkan ke dalam erlenmeyer dan dilarutkan

dengan aquades. Selanjutnya medium tersebut diukur pH-nya hingga 7, kemudian

disterilkan di dalam otoklaf selama ± 15 menit pada suhu 121oC, tekanan 2 atm.

25

III.3.6 Penyiapan Bakteri Uji

III.3.6.1 Peremajaan Bakteri Uji

Sampel bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli berasal dari

biakan murni yang diperoleh dari Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin

Makassar. Masing-masing biakan diambil sebanyak satu ose, kemudian

diinokulasikan dengan cara digores pada medium NA (Nutrien Agar) miring.

Selanjutnya kultur bakteri dari masing-masing agar miring diinkubasi pada suhu

37oC selama 24 jam. Isolat tersebut kemudian disimpan di lemari pendingin dan

dijadikan sebagai stok bakteri uji. Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia

coli yang telah diinokulasikan pada medium NA (Nutrien Agar) miring, masing-

masing diambil satu ose lalu diinokulasikan kembali dengan cara digores pada

medium NA cawan petri untuk memperoleh koloni terpisah. Selanjutnya

diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam. Koloni yang terpisah sempurna dari

koloni yang lainnya selanjutnya diambil untuk diinokulasikan pada media NA

(Nutrien Agar) miring dengan cara digores. Bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli diinokulasikan pada medium NA (Nutrien Agar) miring

kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam.

III.3.6.2 Pembuatan Suspensi Bakteri Uji

Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli yang telah

diinokulasikan pada medium NA (Nutrien Agar), masing-masing diambil 1 ose

kemudian disuspensikan kedalam larutan NaCl fisiologis 0,9% steril. Selanjutnya

diukur serapan suspensi biakan dengan cara membandingkannya dengan Mc.

26

Farland 0,5 yang setara dengan 1,5 x 108 CFU/ml, yang bertujuan untuk

mengurangi kepadatan mikroba yang akan diujikan.

III.3.7 Penyiapan Larutan Pembanding

Larutan Kontrol Positif menggunakan ciprofloxacin, untuk konsentrasi 5 μ

sebanyak 0,0005 gram ciprofloxacin disupensikan dengan 200 ml aquades.

Sedangkan untuk larutan kontrol negatif dengan menggunakan 1 ml DMSO

(Dimetil sulfoksida).

III.3.8 Uji Daya Hambat

Pengujian dilakukan secara in vitro dengan metode difusi agar yang

menggunakan pencadang dengan diameter dalam 6 mm, diameter luar 8 mm, dan

tinggi 10 mm. Medium Muller Hinton Agar (MHA) steril dipanaskan hingga

mencair. Kemudian 6 buah pencadang diletakkan secara aseptis dengan pinset

steril pada cawan petri dengan jarak pencadang satu dengan yang lain 2 – 3 cm

dari pinggir cawan petri. Selanjutnya Muller Hinton Agar (MHA) dituang secara

aseptis ke dalam cawan petri sebanyak 20 ml sebagai lapisan dasar atau “based

layer” dan dibiarkan memadat. Setelah memadat dimasukkan suspensi bakteri uji

masing-masing sebanyak 1 ml yang telah disuspensikan ke dalam 10 ml medium

Muller Hinton Agar (MHA) kemudian dihomogenkan dan dituang di atas lapisan

base layer dan dibiarkan memadat sebagai lapisan pembenihan atau “seed layer”.

Kemudian pencadang diangkat dengan menggunakan pinset steril, hingga

membentu sumuran. Selanjutnya sumuran teresbut diisi dengan 0,25 ml ekstrak

minyak atsiri pada kadar konsentrasi 10%, 20%, 40%, 80%, serta larutan

ciprofloxacin sebagai kontrol positif dan DMSO sebagai kontrol negatif dengan

27

menggunakan mikropipet. Selanjutnya diinkubasi pada suhu 37o

C selama 24

jam.

III.3.9 Pengukuran Diameter Daerah Hambatan

Pengamatan dilakukan dengan mengukur diameter zona bening di sekitar

pencadang yang berisi ekstrak minyak atsiri dengan menggunakan jangka sorong.

Zona hambatan tersebut diukur untuk masing-masing konsentrasi minyak atsiri

rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata K. Schum yaitu pada konsentrasi

10%, 20%, 40%, 80%. Selanjutnya membaca skala utama dan skala nonius pada

jangka sorong untuk menentukan besarnya diameter daerah zona hambatan dalam

satuan milimeter (mm). Pengukuran dilakukan pada inkubasi selama 24 jam dan

dilanjutkan hingga 48 jam. Hasil yang diperoleh dicatat untuk proses analisis data.

III.3.10 Analisis Data

Data yang diperoleh dari hasil pengukuran dianalisis dengan cara

membandingkan diameter zona hambatan yang terbentuk pada pertumbuhan 24

jam ke 48 jam untuk semua konsentrasi. Bioaktivitas minyak atsiri rimpang

lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum dalam menghambat pertumbuhan

bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli diketahui berdasarkan ada

tidaknya pembentukan zona hambat yang terbentuk dari 24 jam sampai 48 jam.

Bioaktifitas tersebut dapat bersifat bakteriostatik atau bakteriosida.

28

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Dalam penelitian ini, bahan yang dijadikan sebagai sumber antimikroba

yaitu rimpang Lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum. Kandungan minyak

atsiri lengkuas yang berwarna kuning kehijauan dalam rimpang lengkuas ± 1 %,

dengan komponen utamanya metilsinamat 48 %, sineol 20-30 %, 1 % kamfer, dan

sisanya d-pinen, galangin, dan eugenol penyebab rasa pedas pada lengkuas

(Darwis et al., 1991).

Proses pengambilan minyak atsiri dilakukan dengan menggunakan alat

destilasi uap. Rimpang lengkuas merah Alpinia purupurata yang telah diolah

dengan cara diblender seperti yang ditunjukkan pada Gambar 13. Bahan rimpang

lengkuas tersebut kemudian dimasukkan ke dalam dandang dan dirangkai dengan

pendingin (kondensor), kemudian dipanaskan. Air dialirkan pada kondensor dan

temperaturnya dijaga agar tetap dingin sehingga minyak yang menguap semuanya

terembunkan dan tidak lepas ke udara. Distilat yang diperoleh merupakan

campuran minyak dengan air yang selanjutnya dipisahkan dengan corong pisah

dan ditambahkan pelarut kloroform (Parwata dan Dewi, 2008). Selanjutnya

kloroform yang bercampur dengan minyak dievaporasi dan menghasilkan minyak

atsiri murni seperti yang ditunjukkan pada Gambar 14. Kloroform digunakan

sebagai pelarut karena bersifat non polar sehingga tidak dapat larut dalam air

(Wulandari, 2008).

29

Gambar 13. Rimpang Lengkuas Merah Alpinia purpurata K.Schum yang telah

diolah

Gambar 14. Minyak Atsiri Rimpang Lengkuas Merah Alpinia purpurata

K.Schum

Adapun bakteri uji yang digunakan dalam penelitian ini yaitu bakteri

Escherichia coli yang merupakan bakteri gram negatif anggota flora normal usus

(Ganiswarna, 1999) dan bakteri Staphylococcus aureus merupakan bakteri gram

positif, flora normal pada manusia yang dapat menyebabkan penyakit apabila

dalam jumlah yang berlebihan (Warsa, 1994).

30

IV.1 Bioaktivitas Minyak Atsiri Rimpang Lengkuas Merah Alpinia purpurata

K.Schum Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Dan

Escherichia coli

Bioaktivitas minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata

K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia

coli dengan tingkat konsentrasi 10%, 20%, 40% dan 80% (b/v), ditunjukkan

dengan adanya zona bening disekitar konsentrasi minyak atsiri. Pengukuran zona

hambat dilakukan setelah inkubasi 24 jam dan dilanjutkan hingga 48 jam. Hasil

pengukuran dapat dilihat pada Tabel 2 berikut ini :

Tabel 2. Diameter zona hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia


aureus dan Escherichia coli pada inkubasi 24 jam hingga 48 jam.

Konsentrasi

Ekstrak

Diameter Zona Hambatan (mm) Pada Bakteri Uji

Staphylococcus aureus Escherichia coli

24 jam 48 jam 24 jam 48 jam

10% 13,4

12,8

11,9

11,8

13,5

11,9

12

11,3

20% 16

14,1

14,9

12

16,4

13,6

15,2

11,8

40% 17

14,8

15,9

12,5

16,6

13,9

16

12,3

80% 18,2

15,2

17,5

12,8

17,1

14,3

16,7

12,1

Kontrol (+) 29,1

28,7

29,9

28,5

30

31,4

31,5

32,1

Kontrol (-) -

-

-

-

-

-

-

-

Keterangan:

Kontrol (+) : Ciprofloxacin

Kontrol (-) : DMSO (Dimetil Sulfoksida)

Diameter pencadang : 8 mm

Hasil pengujian daya hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah

Alpinia purpurata K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus

31

dengan inkubasi selama 24 jam hingga 48 jam, dapat dilihat pada Gambar 15

berikut ini :

Ulangan I

a b

Ulangan II

a b

Gambar 15. Hasil uji daya hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia


aureus setelah masa inkubasi (a) 24 jam dan (b) 48 jam.

Keterangan:

A. Konsentrasi 10% B. Konsentrasi 20% C. Konsentrasi 40% D. Konsentrasi 80% E. Kontrol (+) : Ciprofloxacin F. Kontrol (-) : DMSO (Dimetil Sulfoksida)

Diameter Pencadang : 8 mm

32

Hasil pengamatan menunjukkan bahwa masing - masing konsentrasi

minyak atsiri lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum yaitu 10 %, 20 %, 40 %

dan 80 % mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus

dengan terbentuknya zona hambat disekitar sumur pada media. Selain itu, kontrol

(+) juga mampu mengambat pertumbahan bakteri dengan adanya zona hambat

yang terbentuk disekitar media, sedangkan untuk kontrol (-) tidak membentuk

zona hambat pada media. Adapun hasil pengukuran zona hambat pada masa

inkubasi 24 jam hingga 48 jam dapat dilihat pada Tabel 3 berikut ini :



aureus pada inkubasi 24 jam hingga 48 jam.

Waktu

inkubasi

Diameter zona hambat (mm)

10% 20% 40% 80% Kontrol (+) Kontrol (-)

24 jam 13,4 16 17 18,2 29,1 -

12,8 14,1 14,8 15,2 28,7 -

48 jam 11,9 14,9 15,9 17,5 29,9 -

11,8 12 12,5 12,8 28,5 -

Pada Tabel 3 diatas terlihat bahwa terjadi perubahan zona hambat dari 24

jam ke 48 jam. Setiap tingkat konsentrasi pada inkubasi 24 jam mengalami

penurunan zona hambat ketika melewati inkubasi 48 jam. Konsentrasi 10% pada

pengulangan I memiliki diameter zona hambat dari 13,4 mm menjadi 11,9 mm,

pada pengulangan II dari 12,8 mm menjadi 11,8 mm. Konsentrasi 20%

pengulangan I memiliki diameter zona hambat dari 16 mm menjadi 14,9 mm,

pada pengulangan II dari 14,1 mm menjadi 12 mm. Konsentrasi 40% pada


pada pengulangan II dari 14,8 mm menjadi 12,5 mm. Konsentrasi 80% pada

33


pada pengulangan II dari 15,2 mm menjadi 12,8 mm. Pada kontrol (+),


pada pengulangan II dari 28,7 mm menjadi 28,5 mm. Sedangkan untuk kontrol (-)

selama masa inkubasi 24 jam hingga 48 jam tidak terjadi perubahan atau tidak

menghambat pertumbuhan bakteri.

Hasil pengamatan juga menunjukkan adanya perbedaan zona hambat pada

tiap tingkat konsentrasi. Zona hambat tertinggi terlihat pada konsentrasi 80%

dengan besar diameter pengulangan I 18,2 mm dan pengulangan II 15,2 mm, serta

zona hambat terkecil terdapat pada konsentrasi 10% yaitu pengulangan I 13,4 mm

dan pengulangan II 12,8 mm. Perbedaan zona hambat pada tiap tingkat

konsentrasi untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada histogram berikut ini :

Gambar 16. Histogram zona hambat minyak atsiri terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus setelah masa inkubasi (A) 24 jam dan (B)

48 jam.

0

5

10

15

20

25

30

10% 20% 40% 80% Kontrol(+) Kontrol(-)

Dia

met

er r

ata

- ra

ta z

on

a h

amb

at (

mm

)

Konsentrasi minyak atsiri

24 jam

48 jam

34

Hasil pengujian daya hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah

Alpinia purpurata K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli

dengan masa inkubasi selama 24 jam hingga 48 jam, dapat dilihat pada Gambar

17 berikut ini :

Ulangan I

a b

Ulangan II

a b

Gambar 17. Hasil uji daya hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia


setelah masa inkubasi (a) 24 jam dan (b) 48 jam.

Keterangan:

A. Konsentrasi 10% B. Konsentrasi 20% C. Konsentrasi 40% D. Konsentrasi 80% E. Kontrol (+) : Ciprofloxacin F. Kontrol (-) : DMSO (Dimetil Sulfoksida) Diameter Pencadang : 8 mm

35

Hasil pengamatan menunjukkan bahwa masing - masing konsentrasi

minyak atsiri lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum yaitu 10 %, 20 %, 40 %

dan 80 % mampu menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dengan

terbentuknya zona bening disekitar sumur pada media. Selain itu, kontrol (+) juga

mampu mengambat pertumbahan bakteri dengan adanya zona hambat yang

terbentuk disekitar media, sedangkan untuk kontrol (-) tidak membentuk zona

hambat pada media. Adapun hasil pengukuran zona hambat pada masa inkubasi

24 jam hingga 48 jam dapat dilihat pada Tabel 4 berikut ini :



dengan masa inkubasi 24 jam hingga 48 jam.

Waktu

inkubasi

Diameter zona hambat (mm)

10% 20% 40% 80% Kontrol (+) Kontrol (-)

24 jam 13,5 16,4 16,6 17,1 30 -

11,9 13,6 13,9 14,3 31,4 -

48 jam 12 15,2 16 16,7 31,5 -

11,3 11,8 12,3 12,1 32,1 -

Tabel 4 menunjukkan adanya perubahan diameter zona hambat dari 24

jam ke 48 jam. Setiap tingkat konsentrasi pada inkubasi 24 jam mengalami

penurunan zona hambat ketika melewati inkubasi 48 jam. Pada Konsentrasi 10%,

pengulangan I memiliki diameter zona hambat dari 13,5 mm menjadi 12 mm,

pada pengulangan II dari 11,9 mm menjadi 11,3 mm. Konsentrasi 20%



pengulangan I memiliki diameter zona hambat dari 16,6 mm menjadi 16 mm,


36


pada pengulangan II dari 14,3 mm menjadi 12,1 mm. Pada kontrol (+),


pada pengulangan II dari 31,4 mm menjadi 32,1 mm. Sedangkan untuk kontrol (-)

selama masa inkubasi 24 jam hingga 48 jam tidak mengalami perubahan atau

tidak menghambat pertumbuhan bakteri.

Hasil pengamatan juga menunjukkan adanya perbedaan zona hambat pada

tiap tingkat konsentrasi. Semakin tinggi konsentrasi, semakin tinggi pula diameter

zona hambat yang terbentuk. Zona hambat tertinggi terlihat pada konsentrasi 80%

dengan besar diameter pengulangan I 17,1 mm dan pengulangan II 14,3 mm.

Zona hambat terkecil terdapat pada konsentrasi 10% yaitu pengulangan I 13,5 mm

dan pengulangan II 11,9 mm. Selengkapnya dapat dilihat pada histogram berikut

ini :

Gambar 18. Histogram zona hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah


Escherichia coli setelah masa inkubasi (A) 24 jam dan (B) 48 jam.

0

5

10

15

20

25

30

35

10% 20% 40% 80% Kontrol(+) Kontrol(-) Dia

met

er r

ata

- ra

ta z

ona

ham

bat

(m

m)

Konsentrasi minyak atsiri

24 jam

48 jam

37

Adanya zona hambat disekitar sumuruan media yang berisi berbagai

tingkat konsentrasi minyak atsiri dikarenakan minyak atsiri merupakan minyak

yang bersifat aktif biologis sebagai antibakteri dan antijamur (Parwata dan Dewi,

2008). Berdasarkan penelitian yang sudah dilakukan minyak atsiri pada rimpang

lengkuas mengandung senyawa eugenol, sineol, dan metil sinamat (Buchbaufr,

2003).

Berdasarkan hasil penelitian, diperoleh bahwa minyak atsiri rimpang

lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum lebih efektif menghambat

pertumbuhan bakteri gram postif yaitu Staphylococcus aureus (18,2 mm)

dibanding dengan gram negatif yaitu Escherichia coli (17,1 mm) yang terlihat

pada Tabel 2 tentang diameter zona hambat minyak atsiri terhadap bakteri

Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Hal ini disebabkan adanya

kemampuan biologis setiap bakteri yang berbeda dalam merespon bahan

antibakteri.

Pada Gambar 15 dan 17 tentang hasil uji daya hambat minyak atsiri,

terlihat adanya penurunan zona hambat minyak atsiri rimpang lengkuas merah

Alpinia purpurata K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus

dan Escherichia coli dari masa inkubasi 24 jam ke masa inkubasi 48 jam. Hasil

tersebut menunjukkan bahwa minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia

purpurata K.Schum bersifat bakteriostatik. Menurut Ganiswarna (1999),

bakteristatis merupakan senyawa antimikroba yang mampu menghambat

pertumbuhan bakteri namun, jika pemberian senyawa ini dihentikan atau habis,

maka pertumbuhan dan perbanyakan dari bakteri akan kembali meningkat.

38

Sedangkan bakteriosida merupakan senyawa antimikroba yang mampu

membunuh dan menghentikan aktivitas fisiologis dari bakteri, meskipun

pemberian senyawa tersebut dihentikan.

Pada penelitian ini menggunakan 4 tingkatan konsentrasi yaitu 10%, 20%,

40% dan 80% (b/v). Hasil penelitian menunjukkan adanya perbedaan diameter

zona hambat tiap konsentrasi minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia

purpurata K.Schum terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli. Peningkatan zona hambat seiring dengan kenaikan konsentrasi,

dimana semakin besar konsentrasi semakin besar pula komponen zat aktif yang

terdapat didalamnya, sehingga zona hambat yang terbentuk semakin besar pula

(Mustary, 2003).

Selain itu, penelitian ini juga menggunakan kontrol (+) berupa

ciprofloxacin dan kontrol (-) berupa DMSO (Dimetil sulfoksida). DMSO

digunakan sebagai Kontrol (-) karena digunakan sebagai pelarut serta tidak

berpengaruh terhadap bakteri, berdasarkan hasil terbukti bahwa tidak adanya zona

hambat yang terbentuk. Ciprofloxacin sebagai kontrol (+) memiliki diameter zona

hambat yang lebih besar dibanding dengan konsentrasi minyak atsiri. Diameter

zona hambat ciprofloxacin terhadap bakteri Staphylococcus aureus pada

pengulangan I inkubasi 24 jam sebesar 29,1 mm dan inkubasi 48 jam menjadi

29,9 mm, sedangkan pada pengulangan II inkubasi 24 jam sebesar 28,7 mm

menjadi 28,5 mm. Adapun diameter zona hambat ciprofloxacin terhadap bakteri

Escherichia coli pada pengulangan I inkubasi 24 jam sebesar 30 mm dan inkubasi

48 jam menjadi 31,5 mm, sedangkan pada pengulangan II inkubasi 24 jam sebesar

39

31,4 mm menjadi 32,1. Berdasarkan hasil tersebut, besar diameter zona hambat

ciprofloxacin selama masa inkubasi 24 jam mengalami perubahan yang sangat

tipis terhadap masa inkubasi 48 jam, sehingga ciprofloxacin bersifat bakteriosida.

Ciprofloxacin bekerja dengan menghambat enzim DNA-girase, dan aktivitas

enzimatik dari suatu bakteri ditentukan oleh jumlah lipid dan lipoprotein yang

dikandung oleh bakteri tersebut (Kumala dan Ameilia, 2009).

40

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

V.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh dapat disimpulkan bahwa :

1. Bioaktivitas minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata

K.Schum bersifat bakteriostatis terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli.

2. Minyak atsiri rimpang lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum. efektif

menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia

coli pada konsentrasi 20%

V.2 Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai uji kandungan senyawa

minyak atsiri lengkuas merah Alpinia purpurata K.Schum serta perbandingannya

dengan lengkuas putih Alpinia galanga.

41

DAFTAR PUSTAKA

Buchbaufr, G. 2003. Original Research Paper. Acta Pharm 53 : 73-81.

Chukanhom, K., Borisuthpeth P. dan Hatai K. 2005. Antifungal Activities of

Aroma Components from Alpinia galanga against Water Molds.

Biocontrol Science Vol. 10 No. 3 September 2005. Japan

Darwis, S.N., M. Indo dan S. Hasiyah. 1991. Tumbuhan Obat Famili

Zingiberaceae. Pusat Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri.

Bogor.

Ganiswarna. G. S. 1999. Farmakologi dan Terapi edisi 4 dan 5. Bagian

Farmakologi Fakultas Kedokteran UI. Jakarta

Handa, S.S., Suman P.S.K, Gennaro L., and Dev D.R. 2008. Extraction

Technologies for Medicinal and Aromatic Plants. ICS-UNIDO. Italia.

Hedy. 1980. Pemeriksaan Daya Anti Jamur dari Ekstrak Laos Dengan Air dalam

Berbagai pH dan Dengan Eter Terhadap Jamur Microsporum

gypseum, Microsporum camis dan Trichophyton violaceum. Famipa–

UNPAD. Bandung.

Hembing, H. M. dan Wijakusuma. 2001. Tumbuhan Berkhasiat Obat Indonesia:

Rempah, Rimpang dan Umbi. Milenia Populer, Jakarta.

Itokawa, H. adan Takeya, K. 1993. Antitumor Subtances from Higher Plants.

Heterocycles 35: 1467-1501.

Jawetz E., J. L. Melnick, E. A. Adelberg, G. F. Brooks, J. S. Butel, and L. N.

Ornston, 1995. Mikrobiologi Kedokteran ed. 20 (Alih Bahasa :

Nugroho dan R. F. Maulany) Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.

Kochuthressia, K. P., S. John Britto, M. O. Jaseentha, L. Joelri Michael Raj, and

S. R. Senthilkumar. 2010. Antimicrobial Efficacy of Extracts from

Alpinia purpurata (Vieill.) K.Schum Against Human Pathogenic

Bacteria and Fungi. Agriculture and Biology Journal of North America.

1(6): 1249-1252.

Kumala, Shirly dan Ameilia. 2009. Efek Pasca Antibiotik Ciprofloxacin Terhadap

Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC

25922. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia. 7(2): 99 – 103.

42

Mustary, M. 2003. Uji Daya Hambat Dan Analisis KLT Bioautografi Perasan

Buah Sawo Manila Achras Zapota Linn Terhadap Bakteri Uji

Salmonella Thyposa. Skripisi. Universitas Hasanuddin Makassar.

Neuman dan Maur, 1985. Useful and Harmful Interactions of Antibiotics . CRC

Press, Inc. Boca Raton, Florida.

Pelczar, M. J. dan E. C. S. Chan. 1988. Dasar-Dasar Mikrobiologi I dan 2. UI-

Press. Jakarta.

Pratiwi. 1992. Uji Daya Antimikroba Beberapa Sediaan Topikal yang

Mengandung Banyak Minyak Atsiri Rimpang Lengkuas Laos Merah

dan Putih Terhadap Beberapa Mikroba Uji. Famipa-UNPAD.

Bandung.

Parwata, O. A. dan F. S. Dewi. 2008. Isolasi dan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak

Atsiri dari Rimpang Lengkuas (Alpinia galanga L.). Jurnal Kimia. 2(2):

100-104.

Rahmawti, R. 1995. Formulasi dan Uji Mikrobiologis Sampo Antiketombe yang

Mengandung Minyak Atsiri Laos Alpinia galang L. Famipa-UNPAD.

Bandung.

Rizki. 2012. Uji Sensitivitas. http://mikrobiologi-indonesia.blogspot.com/.

Diakses pada tanggal 7 Oktober 2012.

Shaikh, Gazi, Sadath Ali, S. Y. Talmale, Ulhas.S.Surwase, Kadam Bhalchandra,

and Shaikh Luqman. Alternative Medicine For Psoriasis – Natural

Herbal Ayurvedic Treatment-A Review. International Journal Of

Ayurvedic And Herbal Medicine 2:3 (2012)455:463

Sukandar, D., N. Radiastuti, dan S. Utami. 2009. Aktivitas Minyak Atsiri

Rimpang Lengkuas Merah (Alpinia purpurata) Hasil Distalasi. Jurnal

Biologi Lingkungan. 3(2): 94-100.

Tjitrosoepomo, Gembong. 1994. Taksonomi Tumbuhan Obat-Obatan. Gadjah

Mada University Press, Yogyakarta.

Tjitrosoepomo, Gembong, 2000. Sistematika Tumbuhan Spermatophyta. Gadjah

Mada University Press, Yogyakarta.

Wardana, H.D., N.S Barwa, A. Kongsjahju, M.A. Iqbal, M. Khalid, dan R.R.

Taryadi. 2002. Budi Daya Secara Organik Tanaman Obat Rimpang.

Penebar Swadaya. Jakarta.

Warsa, U.C. 1994. Staphylococcus dalam Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran.

Edisi Revisi. Jakarta. Penerbit Binarupa Aksara.

http://mikrobiologi-indonesia.blogspot.com/

43

Wulandari. 2008. Uji Efektivitas Antipiretik Ekstrak Etanol Larut Kloroform

Herba Ceplukan Physalis angulata L. Pada Kelinci Oryctolagus

cuniculus. Skripsi. Universitas Hasanuddin. Makassar.

44

Rimpang Dibersihkan

Dipotong -

potong

Tanaman Lengkuas

Merah Alpinia

purpurata K.Schum

LAMPIRAN - LAMPIRAN

Lampiran 1. Pengolahan Rimpang Lengkuas Merah Alpinia purpurata

K.Schum

Ditimbang

Diblender Rimpang yang telah

diolah

45

Lampiran 2. Destilasi Rimpang Lengkuas Merah Alpinia purpurata K.Schum

Rimpang Lengkuas yang

telah diolah Didestilasi

Hasil

Ditambahkan

Klorofrom

Dipisahkan

Dievaporasi

Minyak Atsiri

46

Lampiran 3. Pembuatan Variasi Konsentrasi

Minyak atsiri

Rimpang Lengkuas Merah

Alpinia purpurata K. Schum

Na CMC 0,5%

DMSO

Konsentrasi Minyak atsiri Rimpang Lengkuas Merah

Alpinia purpurata K.Schum (10%, 20%, 40% dan 80% b/v)

47

Lampiran 4. Pembuatan Medium

NA (Nutrien Agar Sintetik) MHA (Muller Hinton Agar Sintetik)

20 gram 38 gram

Ditimbang

Ditambahkan Aquades

1000 ml

Disterilkan di dalam otoklaf

pada suhu 121oC dengan tekanan

2 atm selama 15 menit.

BIOAKTIVITAS MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS...

Documents

Transcript of BIOAKTIVITAS MINYAK ATSIRI RIMPANG LENGKUAS...