Bio-interakce polovodičových nanokrystalů
description
Transcript of Bio-interakce polovodičových nanokrystalů
![Page 1: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/1.jpg)
Bio-interakce polovodičových nanokrystalů
Jan Valenta, Anna Fučíková
katedra chemické fyziky & optiky, MFF [email protected]
Marie Kalbáčová, Antonín Brož
Ústav dědičných metabolických poruch1. lékařská fakulta UK
![Page 2: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/2.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Historie studia nanomatriálů v naší laboratoři
1992 – první křemíkový nanomateriál – porézní křemík (spolupráce s Teslou Rožnov, pro kterou I. Pelant a kol. vyvinuli v 80. letech speciální luminiscenční metodu charakterizace mělkých příměsí v krystalech Si)
– specifické vlastnosti PSi (vysoký výtěžek lumin. při pokojové teplotě a modrý posun) byly objeveny roku 1990: L. Canham a U. Gösele + V. Lehmann
2000 – první luminiscenční spektra jednotlivých Si nanokrystalů (spolupráce s Král. technikou ve Stockholmu, skupina prof. Linnrose)
2005 – začátek studia bio-interakce PSi nanočástic s koloniemi živých buněk – Anna Fučíková ve spolupráci s Ústavem fyzikální biologie JčU a AV ČR Nové Hrady
2009 – navázání spolupráce se skupinou Dr. Kalbáčové na 1.LF UK
2012 – A. Fučíková obhájila PhD. disertaci „Bioapplications of novel nanostructured materials“, za kterou získala cenu Česká hlava 2012 - Doktorandus
![Page 3: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/3.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Česká hlava - Doctorandus
bio-interakce nanomateriálů = velmi náročné téma na rozhraní fyziky/chemie/biologie
![Page 4: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/4.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Commercial CdS and CdSe NCs - Evidots produced by Evident Technologies (photo: J. Valenta)
Unique property of NCs = electronic, optical (chemical, mechanical,...) properties may be tuned by changing size, shape, surface states etc. (in contrast to bulk)
transmission in diffuse light
luminescence under UV lamp
Quantum dots – nanocrystals: Tuning energy by changing size
![Page 5: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/5.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Leigh Canham
- studied from 1990 - discovery of efficient luminescence
in porous silicon (electro-chemical etching)
Silicon nanocrystals
d ~5 nm
Basic properties of Si NC
- Indirect band-gap structure preserved
down to diam. of <1 nm
- Photoluminescence:
very efficient even at room temperature
PL spectrum = one broad band
with large blue-shift compare to bulk(can be UV, blue, green, yellow, red, NIR)
- Very slow decay (stretch exponential) ~0.1 ms at RT very low flux of photons - Relatively high quantum efficiency.
![Page 6: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/6.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
OBSAH
1. Výroba křemíkových nanokrystalůspolupráce s Fyzikálním ústavem AV ČRI. Pelant, K. Herynková, K. Kůsová a kol.
2. Studium bio-interakce nanomateriálůspolupráce s 1. LF UKM. Kalbáčová, A. Brož
3. Zobrazování a spektroskopie jednolivých nanokrystalůnaše specialita
![Page 7: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/7.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
A - Electrochemical etching of Si in HF solution (anodization)
additional treatment in H2O2
B - PSi layer removal, pulverization, dissolution, filtering, deposition
PSi powder
solvents: ethanol, iso-propanol
PSi colloidal suspension Deposition
10 l of thesuspension
substrate
Si NCs fabricated by the electrochem. etching & colloid treatment
![Page 8: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/8.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Organic capping of PSi particles
[ K. Kusova et al. ACS Nano 4 (2010) 4495. ]
Long-term treatment of oxidized PSi particles in dissolved in xylene – stirring and illuminating by cw UV light (He-Cd laser 325 nm, 3 mW)
NMR characterization by J. Lang et al.
![Page 9: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/9.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Polovodičové nanokrystaly v bio/medicíně fluorescenční značení (labelling, marking) – aktivace povrchu nanočástice specifickými molekulami- zobrazení lokalizace ve zkoumaném prostředí (tkáni, buňce ...) - náhrada za organická barviva, která mají nízkou fotostabilitu přenášení a uvolnění aktivních látek (carrier, cargo ...) - léčiva atd. lokální detekce specifických látek nebo stavu prostředí (pH
atd.) - přenos excitační energie (FRET) ... aktivace určitých procesů (např. světlem vyvolaná
generace singletního kyslíku – fotodynamická terapie rakoviny)
Potenciální výhody křemíku- biokompatibilta (nenarušuje přirozené procesy)- biodegradabilita (časem se rozloží a vyloučí z organismu) - fotoluminiscence v červené spektrální oblasti
![Page 10: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/10.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Zkoumané nanomateriály Si nanokrystaly – domácí výroba Nanodiamanty – koupené z Ruska komerční CdSe nanokryst. pro srovnání[A. Fučíková et al. to be
published]
zeta-potenciál
/ Rq náboj nanočástice ovlivňuje (mimo jiné) pronikání do buněk
![Page 11: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/11.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
SEM mikroskopie HeLa buňky kultivované s (a) SiNC, (b) ND – zde je vidět silné narušení
buněčné membrány
Scanning Electron Microscopy, Laboratoř elektronové mikroskopie, Biologické centrum AV ČR, Č. Budějovice [A. Fučíková et al. to be published]
![Page 12: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/12.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Vliv nanomateriálů na vývoj buněk - vitalita
[A. Fučíková et al. to be published, A. Fucikova et al. Chem. Papers 63 (2009) 704]
Buňky SAOS-2, Lactase-dehydrogenase test
24 hodiny 48 hodin
48 h
75 g/ml
control SiNC ND
![Page 13: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/13.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Konfokální fluorescenční mikroskopie – sledování pronikání nanočástic do buněk
3h Si –75μg/ml 3h NCD –75 μg/ml
colour coding: green = actin, red = SiNC, blue = ND,
A. Brož a M. Kalbáčová 1.LF UK
![Page 14: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/14.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
section : top center bottom
Buňky SAOS-2, koncentr. nanomater. 75 g/ml
SiNC, 2 h
SiNC, 24 h
ND, 2 h
ND, 24 h
![Page 15: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/15.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Princip pronikání nanočástic do buněk
[A. Fučíková et al. to be published]
![Page 16: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/16.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Far-filed micro-imaging-spectroscopy – our approachEpifluorescence excitation
![Page 17: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/17.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Reflectionimage
Slit opened
60
m
1
Sequence of measurement
[J. Valenta et al., J. Luminescence 98 (2002) 15]
PL image2
Slit closed0.3 mm
Turretgr
atin
g
grating
mirror
PL spectra
Emission spectrafrom two bright spots
3
Turret
gratin
g
grating
mirro
r
0
10
550 600 650 700 750 800 850
Wavelength [nm]
PL
inte
nsi
ty [
a.u
.]
Imaging spectroscopy
![Page 18: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/18.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Hyperspectral imaging
Analogous set-up is used e.g. for measurement of solar spectral images
– calculation of maps of magnetic field (from line splitting)
and mass movement (from Doppler shift) etc.
Complete hyperspectral imaging is not useful for low-density single objects
may be interesting for e.g. detection of local fields by introduced impurities
cross sections = monochromatic images
scanning slit position
![Page 19: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/19.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Spektra jednotlivých NK v živých buňkách
silná auto-fluorescence buněk v modro-zelené oblasti spektra
SingleNK PL spektra mohou sondovat lokální prostředí (pH, reakce atd.)
![Page 20: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/20.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
ZávěrPříprava Si nanokrystalůHlavní problémy jsou: - zlepšení produktivity výroby- separace velikostí nebo zúžení šířky distribuce velikostí
Bio-interakce nanomatriálů- lepší pochopení role média a náboje nanočástic na pronikání do buněk- přesnější lokalizace nanomat. v buňce- rychlost a mechanismus biodegradace (rozkladu)
Zobrazovací mikro-spektroskopie- spektrální rozměr umožní lépe rozlišit nanočástice od pozadí (autofluor.)
- spektrální posuny mohou detekovat lokální změny pH a pod.
- úzká distribuce vlastností je žádoucí
Aplikační možnosti- fluorescenční značky a nosiče léčiv etc.- generace singletního kyslíku prostřednictvím SiNCs – fotodynamická terapie rakoviny ...
![Page 21: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/21.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
AcknowledgementCollaboratorsI. Pelant, K. Luterová, K. Dohnalová, K. Kůsová, J. Kočka..Institute of Physics Czech Academy of Sciences, PragueF. Vácha , F. Adamec et al. Institute of Physical Biology, U. South Bohemia, BudweisJ. Humpoličková, M. Hof, et al. Heyrovsky Institute of Physical Chemistry, CAS
FUNDING : Grant Agency of the Czech R. and Czech Academy of Science, Ministry of Education:• LC510 - Research centre of nanotechnology and materials for nanoelectronics• Project Nanotechnology for Society: Functional hybrid nanosystems of semiconductors and metals with organic materials (FUNS)• GAUK
![Page 22: Bio-interakce polovodičových nanokrystalů](https://reader035.fdocuments.net/reader035/viewer/2022062410/5681546c550346895dc28480/html5/thumbnails/22.jpg)
MFiLF Jan Valenta, KCHFO, MFF UK
Have fun with Silicon
all photos: J. Valenta