Lyme disease. Borrelia Borrelia burgdorferi sensu stricto Borrelia garinii Borrelia afzelii.
BBiilltteenn - GENuBiHkojeg je do danas opisano 18 vrsta. U Evropi, prisutne su tri vrste koje...
Transcript of BBiilltteenn - GENuBiHkojeg je do danas opisano 18 vrsta. U Evropi, prisutne su tri vrste koje...
ISSN 2566-2899
BBiilltteenn UUddrruužžeennjjaa ggeenneettiiččaarraa uu BBoossnnii ii HHeerrcceeggoovviinnii
Br. 11 | Septembar 2020.
Tema broja:
Krpelji - prenosnici spiroheta iz roda Borrelia
Str. 7
Prvi molekularno-genetički nalaz Borrelia u Kantonu Sarajevo
Str. 11
Iz arhive:
Pionirska antropološka i populacijsko-
genetička istraživanja u Bosni i Hercegovini
Str. 16
Izdvajamo:
International Union of Toxicology
(IUTOX)
Str. 4
2020 Bilten, 11
2 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Izdavač
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini (GENuBiH)
Urednik Prof. dr. Sanin Haverić, naučni savjetnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Urednički odbor Akademik Rifat Hadžiselimović, naučni savjetnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Stojko Vidović, Medicinski fakultet, Univerzitet u Banjoj Luci
Prof. dr. Kasim Bajrović, naučni savjetnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Naris Pojskić, naučni savjetnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Lejla Pojskić, naučni savjetnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Doc. dr. Jasmina Čakar, naučni savjetnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Adaleta Durmić Pašić, viši naučni saradnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Doc. dr. Anja Haverić, viši naučni saradnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Dr. Naida Lojo Kadrić, viši naučni saradnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Dr. Amra Kazić, naučni saradnik, Institut za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Semina Hadžiabulić, Agromediteranski fakultet, Univerzitet Džemal Bijedić
Prof. dr. Izet Eminović, Prirodno-matematički fakultet, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Slavka Ibrulj, naučni savjetnik Medicinski fakultet, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Emina Kiseljaković, Medicinski fakultet, Univerzitet u Sarajevu
Doc. dr. Mirela Mačkić Đurović, Medicinski fakultet, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Dunja Rukavina, Veterinarski fakultet, Univerzitet u Sarajevu
Prof. dr. Azra Skender, Biotehnički fakultet, Univerzitet u Bihaću
Mr. Radmila Malešević, Klinički centar, Banja Luka
Naslovna stranica: Ixodes ricinus – Laboratorija za molekularnu genetiku prirodnih resursa Instituta za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju Univerziteta u Sarajevu
URL: http://www.genubih.ba/Bilten.html
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 3
SADRŽAJ
International Union of Toxicology (IUTOX) ............................................................................. 4
Krpelji - prenosnici spiroheta iz roda Borrelia, uzročnika Lajmske bolesti ................................ 7
Prvi molekularno-genetički nalaz Borrelia u Kantonu Sarajevo .............................................. 11
Pionirska antropološka i populacijsko-genetička istraživanja u Bosni i Hercegovini ................ 16
Najave konferencija .............................................................................................................. 52
2020 Bilten, 11
4 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
International Union of Toxicology
(IUTOX)
Tamara Ćetković, MA, viša stručna
saradnica
Udruženje genetičara u Bosni i
Hercegovini (GENuBiH) je kroz svoj
dugogodišnji rad ostvarilo brojne uspjehe, a
2020. godina je donijela ostvarenje još
jednog – učlanjenje u Međunarodnu
toksikološku uniju (International Union of
Toxicology – IUTOX). Tako je IUTOX postalo
bogatije za još jednog člana, a Udruženje
genetičara u BiH napravilo veliki korak i
izazov u jačanju dosadašnje međunarodne
saradnje.
Međunarodna toksikološka unija
predstavlja organizaciju na globalnom nivou
koja nastoji povećati znanje o toksikološkim
problemima sa kojima se suočava
čovječanstvo i proširiti to znanje na društva
u razvoju i nacije. Historija toksikologije je
duga skoro kao i historija čovječanstva, ali
moderna toksikologija vuče korijene od
napretka hemijske industrije u 20. stoljeću.
Stoga, neophodno je razvijati metode i
kontrolisati sve veće hemijsko zagađenje
oko nas. Da bi se to lakše ostvarilo, IUTOX
ima važnu ulogu budući da nastoji proširiti
toksikologiju kao disciplinu i profesiju u svim
zemljama svijeta. Njihova misija se ostvaruje
i kroz kontinuirane obuke tj. pomoć u
obrazovanju i razvoju karijere mladih
toksikologa, izgradnjom kapaciteta u
toksikologiji, posebno u zemljama u kojima
je toksikologija nedovoljno zastupljena.
Osnovano je 6. jula 1980. godine u
Briselu, a prvi Izvršni odbor je bio sačinjen
od 13 predstavnika različitih organizacija iz
područja toksikologije. Veoma brzo, važnost
Međunarodne toksikološke unije je globalno
prepoznata pa se taj broj povećao i danas
broji 63 udruženja sa svih šest kontinenata i
preko 25.000 članova iz područja industrije,
akademske zajednice i vlade. Od 1996.
godine je član ISC-a (International Science
Council), a pored toga IUTOX ima i službeni
status nevladine organizacije (NVO) u
službenim odnosima sa Svjetskom
zdravstvenom organizacijom (World Health
Organization-WHO).
Njihov glavni cilj je poboljšanje ljudskog
zdravlja kroz nauku i praksu iz toksikologije
širom svijeta. Svoju viziju ostvaruje jačanjem
međunarodne naučne saradnje koja je od
globalne važnosti i upotrebom znanja iz
toksikologije za poboljšanje zdravlja ljudi i
njihove okoline. Vodstvo IUTOX-a ima
Izvršni odbor koji se mijenja svake tri
godine, a biraju se delegati imenovani od
strane člana društva.
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 5
Promovisanje toksikologije ostvaruju kroz
organizovanje naučnih skupova, kao i
edukativnih radionica. Svake tri godine
IUTOX je domaćin najvećeg i naprestižnijeg
„Međunarodnog kongresa toksikologije“
(International Congress on Toxicology - ICT)
pružajući priliku da se kroz naučne sesije i
kontinuirano obrazovanje najvećoj publici
toksikologa predstave najnovija dostignuća
na polju toksikologije, kao i da se ostvare
brojne saradnje. Također, pruža priliku za
društvene aktivnosti na konferencijama u
različitim dijelovima svijeta (Seattle 1995,
Pariz 1998, Brisbane 2001, Tampere 2004,
Montreal 2007, Barcelona 2010, Seoul 2013,
Merida, Mexico 2016, i Honolulu, Havaji
2019). Naredni, 16. Međunarodni kongres
toksikologije (ICT2022) je planiran da se
održi 18.–22. septembra 2022. godine u
Maastrichtu, Nizozemska.
Drugi kongres koji se održava pod
pokroviteljstvom Međunarodnog udruženja
toksikologa i zemlje domaćina je „Kongres
toksikologije za zemlje u razvoju“
(Congresses on Toxicology in Developing
Countries – CTDC), koji se također održava
svake tri godine, a koji ima za cilj
razmatranje problema s kojima se susreću
zemlje u razvoju. Prvi put je organizovan u
Argentini, a nakon toga u zemljama u
razvoju Afrike, Azije, Evrope i Južne
Amerike. Planirano je da se iduće godine u
periodu od 13.-16. juna održi 11. po redu
„Kongres toksikologije zemalja u razvoju“
(CTDC11), a mjesto održavanja je Kuala
Lumpur, Malezija.
Pored naučnih konferencija, IUTOX
ostvarenje svojih ciljeva realizuje kroz
edukativne radionice. Pa je tako 1995.
godine na ICT VII (Seattle) prvi put
predstavljen program „Kontinuiranih
edukativnih kurseva“ (Continuing Education
Courses – CECs) i od tada su sastavni dio
Međunarodnog kongresa toksikologije.
Obrazovne ciljeve ostvarili su i kroz
program RASS (Risk Assessment Summer
School), u kojem se prednost daje
studentima doktorskih studija, koji već
imaju praktično znanje, a evaluacijom na
kraju kursa uvidjeli su da je ostvaren veliki
uspjeh kroz zadovoljstvo učesnika.
International Union of Toxicology, kao
globalna organizacija, od svog osnivanja pa
2020 Bilten, 11
6 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
sve do danas nastoji da poboljša svoje
djelovanje i da se uveže sa što većim brojem
zainteresovanih organizacija koje imaju
slične ciljeve, kako bi uspjeh na polju
toksikologije kao nauke bio znatno
primjećen.
Budući da je u 2019. godini GENuBiH
uspješno realizovalo Prvi Kongres genetičara
u Bosni i Hercegovini sa međunarodnim
učešćem, sa pridruženom međunarodnom
radionicom „COMET workshop“, u skladu sa
glavnim ciljevima Međunarodnog udruženja
toksikologa, Udruženje genetičara u BiH će
nastojati da i dalje kroz svoju Sekciju za
toksikologiju i mutagenezu doprinosi razvoju
i popularizaciji toksikologije i srodnih nauka,
kako organizacijom naučnih skupova, tako i
održavanjem brojnih edukativnih radionica
te prezentacijom rezultata realizovanih
projekata.
Sve dodatne informacije o aktivnostima
Međunarodnog udruženja toksikologa
dustupne su na web stranici udruženja
http://www.iutox.org/.
Reference
1. History of IUTOX, International Union of Toxicology, 1977-2007.
2. http://www.iutox.org/
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 7
Krpelji - prenosnici spiroheta iz roda Borrelia, uzročnika Lajmske bolesti Lejla Ušanović, MA, stručni saradnik
Jasna Hanjalić, MA, viši stručni saradnik
Doc. dr. Lejla Lasić, naučni saradnik
Doc. dr. Belma Kalamujić Stroil, viši naučni saradnik
Zoonoze koje prenose krpelji (kao što su
Lajmska bolest, krpeljski meningoencefalitis,
anaplazmoze, babezioze i druge) su tokom
posljednje dvije decenije u porastu i
trenutno predstavljaju važan zdravstveni
problem u mnogim dijelovima Evrope.
Prema podacima Svjetske zdravstvene
organizacije, Bosna i Hercegovina, Srbija i
Crna Gora su žarišna područja u Evropi u
pogledu krpelja zaraženih spirohetama iz
kompleksa Borrelia burgdorferi sensu lato,
uzročnicima Lajmske bolesti. Krpelji vrste
Ixodes ricinus su glavni vektori B.
burgdorferi sensu lato kompleksa, u okviru
kojeg je do danas opisano 18 vrsta. U
Evropi, prisutne su tri vrste koje uzrokuju
Lajmsku bolest: B. garinii, B. afzelii, i B.
burgdorferi sensu stricto.
Krpelji su obligatni hematofagni zglavkari,
koji se kao ektoparaziti hrane na sisarima,
pticama, gmizavcima i vodozemcima
uzimajući relativno velike krvne obroke.
Shodno tome imaju prilagođen usni aparat
koji im omogućava probijanje kože
domaćina. Manji dio životnog ciklusa se
nalaze pričvršćeni za domaćina, dok ostatak
vremena provode nastanjeni na različitim
tipovima staništa: otvorenim travnatim
terenima, livadama, pašnjacima, mješovitim
šumama i staništima koja su pod uticajem
čovjeka (izletišta, parkovi, poljoprivredna
dobra).
Krpelj u toku životnog ciklusa prolazi kroz
četiri faze: jaje, larva, nimfa i adult. U toku
posljednje tri razvojne faze krpelj može
infestirati („ugristi“) domaćina. Najaktivniji
su u proljeće i jesen. Posmatrane golim
okom, larve izgledaju kao čestice prašine.
Nimfe su malo veće, otprilike veličine
sjemena maka. Ženka odraslog krpelja
prilikom hranjenja može dostići i veličinu
sjemena graška (Slika 1). Odrasli krpelji se u
zavisnosti od vrste razlikuju po boji tijela, od
crvenkaste do tamne smeđe ili crne
(Milutinović et al., 2012).
2020 Bilten, 11
8 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Slika 1. A: Nenasisani krpelj u stadiju adulta (ženka) B: Potpuno nasisani krpelj u stadiju adulta (ženka)
Krpelji – opasni ili ne?
Ubodi krpelja sami po sebi nisu opasni.
Međutim, neki krpelji su zaraženi
bakterijama, virusima ili parazitima koji
mogu prouzrokovati ozbiljne bolesti kod
ljudi. Zbog toga postoji opasnost da zaraženi
krpelji prenesu infekciju na čovjeka hraneći
se njegovom krvlju.
Posebno su opasne bakterije iz
kompleksa Borrelia burgdorferi sensu lato
kojee mogu dovesti do nastanka Lajmske
bolesti kod ljudi. To je najčešće oboljenje
koje prenose krpelji u Evropi i Sjevernoj
Americi. Lajmska bolest je sistemsko
oboljenje koje najčešće zahvata kožu,
zglobove, nervni sistem i srce. Javlja se u tri
faze. Prva faza se karakteriše pojavom
prstenastog crvenila koje se širi oko mjesta
uboda (Erythema migrans) nekoliko dana ili
sedmica nakon infekcije (Slika 2). U drugoj
fazi se borelije šire po cijelom organizmu,
što je praćeno bolovima u mišićima i
zglobovima, glavoboljom i povišenom
temperaturom. Ova faza nastupa nekoliko
sedmica nakon infekcije. Nakon više mjeseci
ili godina, ukoliko se ne prepozna na ranom
početku i ne liječi, Lajmska bolest u trećoj
fazi dovodi do trajnih oštećenja organizma
(Centers for Disease Control and
Prevention). Infekcija B. afzelii je, uglavnom,
povezana s kožnim manifestacijama kao što
su erythema migrans i acrodermatitis
chronica atrophicans, dok je nalaz B. garinii
u korelaciji s manifestacijama na nervnom
sistemu (lajmska neuroborelioza). Klinička
slika lajmskog artritisa je češća kada je
uzročnik infekcije B. burgdorferi sensu
stricto. Ono što Lajmsku bolest čini jako
opasnom jeste i manifestacija simptoma koji
uveliko podsjećaju na druge bolesti, pa tako
u većini slučajeva ostane nedijagnosticirana
ili pogrešno dijagnosticirana. Kada infekcija
pređe u hronični oblik, pacijenti se vrlo
često greškom upućuju specijalistima
interne medicine, fizijatrima, neurolozima,
koji im mogu dijagnosticirati bolesti poput
fibromijalgije, sindroma hroničnog umora,
multiple skleroze, Parkinsonove bolesti,
sistemskog lupusa i dr., iako u pozadini
svega zna ležati upravo hronična infekcija
borelijama (Veinović et al., 2015).
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 9
Slika 2. Prvi simptom infekcije borelijom – Erythema migrans
Odnos krpelj – domaćin
Bitno je riješiti se zabluda o načinu na
koji krpelji pristupaju domaćinu. On ne
skače, ne leti, niti pada s većih visina. Krpelji
imaju posebnu vrstu osjetila kojom
detektuju prisustvo potencijalnog domaćina
i kreću prema njemu. Mogu se popeti na
vršak trave, grančicu koja strši i tu čekati.
Kad osjete dolazak domaćina, podignu prvi
par nožica i čekaju. Kad domaćin dotakne
krpelja, krpelj prelazi na njega.
Krpelj, gmižući, traži mjesto gdje će
početi sisati krv, i to traje nekoliko sati. Za
mjesto uboda bira nježne i tanke dijelove
kože, koje je najlakše probiti rilicom
(hipostomom) dužine manje od jednog
milimetra. Pri probadanju kože krpelj kroz
rilice izlučuje slinu, koja sadrži anestetik te
je ubod bezbolan. Najčešća lokalizacija
uboda krpelja kod djece je glava, a kod
odraslih oko pojasa i genitalija (Lakošeljac,
2000).
U odnosu krpelj – domaćin, važno je znati
da:
a) samo određene vrste krpelja su
prenosioci borelije - nisu svi krpelji
inficirani;
b) jedini način da se čovjek inficira je ubod
zaraženog krpelja;
c) zaraženi krpelj prilikom uboda ne mora
uvijek prenijeti infekciju na čovjeka;
d) Lajmska bolest se uspješno liječi ukoliko
se otkrije na vrijeme.
Prevencija i preporuka za uklanjanje
krpelja
Najbolji način da spriječite Lajmsku
bolest jeste da spriječite ubod krpelja!
Ukoliko idete u prirodu, oblačite odjeću koja
vas štiti, majice s dugim rukavima i duge
hlače. Koristite sredstva za odbijanje
insekata koja sadrže DEET ili permetrin.
Svaki put nakon boravka u prirodi
preporučuje se detaljan pregleda kože
odraslih, djece i kućnih ljubimaca.
Ukoliko ga se uoči, krpelja treba što prije
ukloniti, jer se time smanjuje rizik od
infekcije. Preporuka za uklanjanje krpelja iz
tijela je data u prilogu (Prilog 1). U slučaju
uboda krpelja i pojave karakterističnog
prstenastog crvenila, preporučuje se
odlazak ljekaru.
2020 Bilten, 11
10 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Prilog 1. Preporuka za uklanjanje krpelja nastala kao rezultat projekta „Molekularno-genetička karakterizacija krpelja na prisustvo bakterija iz roda Borrelia u Kantonu Sarajevo“, finansiranog od strane Ministarstva za obrazovanje, nauku i mlade Kantona Sarajevo (broj projekta 11-05-14-26465-1/18) i sprovedenog na Univerzitetu u Sarajevu – Institutu za genetičko inženjerstvo i biotehnologiju, a u saradnji s JU Dom zdravlja KS i JU Zavod za hitnu medicinsku pomoć KS.
Reference
Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Emerging and Zoonotic Infectious Diseases, Division of Vector-Borne Diseases. https://www.cdc.gov/lyme/signs_symptoms/index.html Accessed: 21/9/2020.
Lakošeljac, D. (2000). Krpelji – opasnost iz prirode. Narodni Zdravstveni list.
Milutinović, M., Radulović, Ž., Tomanović, S., Petrović, Z. (2012) Krpelji (Acari:Ixodiadae, Argasidae) Srbije. Srpska akademija nauka i umetnosti. Beograd.
Veinović, G., Stojić Vukanić, Z., Antić Stanković, J. (2015). Lajmska borelioza: epidemiologija, klinička slika i terapija. Arhiv za farmaciju. 129-145.
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 11
Prvi molekularno-genetički nalaz Borrelia u Kantonu Sarajevo
Lejla Ušanović, MA, stručni saradnik
Jasna Hanjalić, MA, viši stručni saradnik
Doc. dr. Lejla Lasić, naučni saradnik
Doc. dr. Belma Kalamujić Stroil, viši naučni saradnik
Projekat „Molekularno-genetička
karakterizacija krpelja na prisustvo bakterija
iz roda Borrelia u Kantonu Sarajevo“,
finansiran od strane Ministarstva za
obrazovanja, nauku i mlade Kantona
Sarajevo (broj projekta 11-05-14-26465-
1/18), realiziran je 2019. godine na
Univerzitetu u Sarajevu - Institutu za
genetičko inženjerstvo i biotehnologiju u
saradnji s Javnom ustanovom Dom zdravlja
Kantona Sarajevo i Zavodom za hitnu
medicinsku pomoć Kantona Sarajevo.
Cilj projekta je bio testirati krpelje,
skinute s pacijenata, na prisustvo bakterija iz
kompleksa Borrelia burgdorferi sensu lato,
uzročnika Lajmske bolesti i na osnovu
prevalencije utvrditi postojanje rizika od
infekcije Borreliom u Kantonu Sarajevo.
Ranijim istraživanjima sprovedenim na
krpeljima na području Bosne i Hercegovine
su detektovani patogeni poput Rickettsia
monacensis, R. helvetica, R. raoultii, R.
slovaca, Anaplasma phagocytophilum i
Francisella tularensis subsp. holartica, no
međutim bakterije iz kompleksa B.
burgdorferi sensu lato nisu detektovane
(Hodžić et al., 2017). Prenosnici ovih
bakterija su krpelji vrste Ixodes ricinus, koji
su zabilježeni kao najrasprostranjenija vrsta
krpelja na području Bosne i Hercegovine
(Omeragić, 2011). Iako nije molekularno-
genetički dokazano prisustvo Borrelia u
Bosni i Hercegovini, prema statistikama
Zavoda za javno zdravstvo Federacije BiH i
Instituta za javno zdravstvo Republike
Srpske, u periodu od 2002. do 2018. godine
zabilježen je 1081 slučaj Lajmske bolesti
(uključujući i samo pojavu prvog znaka
infekcije erithema migrans).
U periodu sakupljanja uzoraka od aprila
do septembra 2019. godine, sakupljeno je
198 krpelja skinutih s pacijenata u obje
zdravstvene institucije. Pored potpisanog
pristanka, pacijenti su davali i podatke o
mjestu infestacije krpelja na tijelu,
potencijalnog lokaliteta na kojem su došli u
kontakt s krpeljom i da li su ga prije
uklanjanja tretirali nekim sredstvom. Uzorci
su pohranjeni u 1,5 ml tubice ispunjene 96%
etanolom. Koraci koji su uslijedili nakon
sakupljanja uzoraka su bili:
1. morfološka identifikacija krpelja prema
Estrada-Pena (2004), određivanje spola i
stepena nasisanosti;
2. izolacija ukupne genomske DNK
upotrebom komercijalnog kompleta;
2020 Bilten, 11
12 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
3. molekularno-genetička identifikacija
vrste I. ricinus korištenjem prajmerskog
para dITS678 i rITS184 te hemijskog i
temperaturnog režima prema Rumer et
al. (2011);
4. molekularno-genetička detekcija B.
burgdorferi sensu lato kompleksa
sprovođenjem nested PCR uz korištenje
dva prajmerska para (Cerrar et al., 2008;
Postic et al., 1994) ciljanjem intergenskog
regiona rrf(5S) – rrl(23S). Prvi PCR je
sproveden prema Cerrar et al.(2008), a
drugi prema Wang et al. (2014).
Obradom ispitaničkih listova objedinjeni
su podaci o najčešćim mjestima infestacije,
potencijalnim lokalitetima i proizvodima
kojima su krpelji tretirani prije vađenja.
Najčešća mjesta infestacije krpelja na tijelu
bili su: donji ekstremiteti (51), gornji
ekstremiteti (30), glava i vrat (18),
abdominalni region (18), leđa (16), grudni
region (13), spolni organi (4).
Lokaliteti koje su pacijenti, prema
slobodnoj procjeni, naveli kao moguće
lokalitete na kojima su došli u kontakt s
krpeljom su prikazani na slici 1.
Slika 1. Lokaliteti koje su pacijenti prijavili kao moguće lokalitete na kojima su infestirani krpeljom: a-Vlakovo, b-Ahatovići, c-Žuč, d-Donji Hotonj, e-Vodopad Skakavac, f-Buća Potok, g-Švrakino selo, h-Pofalići, i-Velešići, j-Vilsonovo šetalište, k-Ferhadija, l-Ilidža, m-Vojničko polje, n-Sedrenik, o-Bistrik and Hrid, p-Čobanija.
2020 Bilten, 11
13 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Prema navedenim iskazima, veliki broj
infestacija krpelja nije tretiran prije samog
vađenja krpelja iz tijela. Manji broj
infestacija krpelja je tretiran slijedećim:
alkohol (1), ulje (1), jabukovo sirće (1),
petrolej (2), kolonjska voda (2), rakija (1),
sprej ATIX (1) i tečni sapun (1). Za
molekularno-genetičku analizu, važnost ovih
podataka leži u činjenici da navedeni
proizvodi mogu inhibirati PCR reakciju
ukoliko ostanu na krpelju. Također, svakim
tretiranjem krpelja prije vađenja, dolazi do
iniciranja izbacivanja crijevnog sadržaja
krpelja u krvotok domaćina (pacijenta), čime
se povećava vjerovatnoća infekcije
patogenima, uključujući i borelije.
Od ukupno 132 uzorka pristigla iz JU
Zavoda za hitnu medicinsku pomoć KS, 129
uzoraka je determinisano kao vrsta Ixodes
ricinus, jedan kao Dermacentor reticulatus i
dva uzorka nisu imala morfološke
karakteristike krpelja. Od ukupnog broja
determinisanih krpelja, 83 jedinke su
determinisane kao ženke, a 46 jedinki kao
nimfe. Prema stepenu nasisanosti,
definisane su tri kategorije: nasisane (35
jedinki), djelimično nasisane (35 jedinki) i
nenasisane (57 jedinki).
Morfološkom determinacijom uzoraka
pristiglih iz JU Dom zdravlja KS, od ukupno
66 krpelja, 56 je determinisano kao I.
ricinus, jedan kao Hyalomma marginatum,
jedan nije imao morfološke karakteristike
krpelja, a osam je bilo u raskomadanom
stanju tako da u uzorku nije bilo
reprezentativnih dijelova tijela koji
predstavljaju karaktere za morfološku
determinaciju. U ovom uzorku krpelja, 46 je
bilo ženki, a 19 nimfi, te jedan uzorak nije
bilo moguće odrediti. Prema stepenu
nasisanosti osam jedinki je bilo nasisano, 11
djelimično nasisano i 36 nenasisano.
Genomska DNK je izolirana iz 79 uzoraka
krpelja, na kojima su dalje sprovedene
molekularno-genetičke analize.
Svi uzorci (79/79) su molekularnom
metodom, umnožavanjem ITS regiona,
pokazali pripadnost vrsti I. ricinus, što je
vizualizirano horizontalnom gel
elektroforezom, detekcijom amplikona
veličine 137 bp (Slika 2). Pri ovoj analizi
korištena je i negativna kontrola.
Molekularna metoda je potvrdila rezultate
klasične morfološke metode determinacije
vrsta.
Slika 2. Gel elektroforeza PCR produkata, veličine 137 bp, nastalih pri molekularnoj determinaciji vrste I. ricinus. Korišten je marker veličine 50 bp (BioLabs, New England)
2020 Bilten, 11
14 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Nakon uspješno optimiziranog nested
PCR-a za molekularno-genetičku detekciju
Borrelia u krpeljima, detektovani su slijedeći
rezultati: od ukupno 48 analiziranih krpelja
iz JU Zavoda za hitnu medicinsku pomoć KS,
32 krpelja (66,66%) su bila pozitivna na
prisustvo B. burgdorferi sensu lato, a od
ukupno 31 krpelja iz JU Dom zdravlja KS, 19
(61%) je bilo pozitivno na B. burgdorferi
sensu lato. Ukupni rezultat pokazuje da je
64,6% analiziranih krpelja bilo pozitivno na
prisustvo ovih spiroheta.
B. burgdorferi sensu lato je detektovana
metodom horizontalne gel elektroforeze,
vizualizacijom amplikona veličine oko 250
bp (Slika 3). Pri PCR amplifikaciji su korištene
negativna i pozitivna AMPLIRUN kontrola
(Vircell, Spain).
Slika 3. Gel elektroforeza PCR amplikona koji potvrđuju prisustvo Borrelia u krpeljima. Mjesta gdje nema vizualiziranog benda označavaju uzorke koji su negativni na prisustvo Borrelia. U predzadnjoj liniji se nalazi negativna kontrola, a u zadnjoj pozitivna.
Shodno raspoloživim finansijskim
sredstvima, sekvencirana su dva pozitivna
uzorka te su bioinformatičkom metodom
identifkovane vrste B. spielmanii i B.
lusitaniae. Prva navedena vrsta je patogena,
a druga je potencijalno patogena. Značaj
ovih rezultata ogleda se u tome da se radi o
prvom genetičkom dokazu prisustva Borrelia
na području Bosne i Hercegovine, što
predstavlja osnovu za nastavak istraživanja.
Rezultati ovog istraživanja su doprinijeli
boljem razumijevanju načina prenošenja
Borrelia s krpelja na domaćina. Evidentno je
da nerijetko krpelji infestiraju ljude, čime
postoji i mogućnost infekcije borelijama.
Ovim istraživanjem je pokazano da su
spirohete iz kompleksa B. burgdorferi sensu
lato veoma zastupljene u krpeljskim
zajednicama na području Kantona Sarajevo.
Zbog toga ubod krpelja ne treba smatrati
bezazlenim jer može uzorkovati ozbiljan
problem te svakako zahtjeva adekvatan
liječnički nadzor. Rezultati istraživanja su
objavljeni u časopisu Systematics and
Applied Acarology, koji pripada kvartili Q2
Web of Science (Lasić et al., 2020).
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 15
Reference
1. Cerar, T., Ružić-Sabljić, E., Glinsek, U., Zore, A., and Strle, F. (2008) Comparison of PCR methods and culture for the detection of Borrelia spp. in patients with erythema migrans. Clinical microbiology and infection: the official publication of the European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases, 14, 653-658. https://doi.org/10.1111/j.1469-0691.2008.02013.x.
2. Estrada-Pena, A., Bouattour, A., Camicas, J.L. and Walker, A.R. (2004) Ticks of domestic animals in the Mediterranean region: a guide to identification of species. University of Zaragoza, Zaragoza, Spain. 131pp.
3. Hodžić, A., Fuehrer, H. and Duscher, G. G. (2017) First Molecular Evidence of Zoonotic Bacteria in Ticks in Bosnia and Herzegovina. Transboundary and Emerging Diseases, 64, 1313-1316. https://doi.org/10.1111/tbed.12473.
4. Lasić, L., Ušanović, L., Ćakić, S., Hanjalić, J., & Kalamujić Stroil, B. (2020) First molecular detection of Borrelia burgdorferi sensu lato in Ixodes ricinus ticks collected from humans in the Sarajevo Canton (Bosnia and Herzegovina). Systematic and Applied Acarology, 25(1), 169-172. doi:10.11158/saa.25.1.13
5. Omeragić, J. (2011) Ixodid ticks in Bosnia and Herzegovina. Experimental & Applied Acarology, 53, 301-309. https://doi.org/10.1007/s10493-010-9402-8.
6. Postic, D., Assous, M.V., Grimont, P.A. & Baranton, G. (1994) Diversity of Borrelia burgdorferi sensu lato evidenced by restriction fragment length polymorphism of rrf (5S)–rrl (23S) intergenic spacer amplicons. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 44, 743–752. https://doi.org/10.1099/00207713-44-4-743.
7. Rumer, L., Sheshukova, O., Dautel, H., Donoso Mantke, O. & Niedrig, M. (2011) Differentiation of Medically Important Euro-Asian Tick Species Ixodes ricinus, Ixodes persulcatus, Ixodes hexagonus, and Dermacentor reticulates by Polymerase Chain Reaction. Vector-Borne & Zoonotic Disease, 11, 899-905. https://doi.org/10.1089/vbz.2009.0191.
8. The Institute of Public Health of the Federation of Bosnia and Herzegovina. https://www.zzjzfbih.ba/ (Last date accessed: 15/09/2019).
9. The Institute of Public Health of the Republic of Srpska. https://www.phi.rs.ba/(Last date accessed: 15/09/2019).
10. Wang, G., Liveris, D., Mukherjee, P., Jungnick, S., Margos, G. & Schwartz, I. (2014) Molecular Typing of Borrelia burgdorferi. Current Protocols in Microbiology, 34, 12C.5.1–12C.5.31. https://doi.org/10.1002/9780471729259.mc12c05s34.
2020 Bilten, 11
16 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Pionirska antropološka i populacijsko-genetička istraživanja
u Bosni i Hercegovini
Akademik Rifat Hadžiselimović
Historija genetike u Bosni i Hercegovini
započela je sa Himmelom, austrougarskim
vojnim ljekarom, koji je analizirao učestalost
nasljednih svojstava (visina, težina, boja
očiju, boja kose i druge antropološke
varijable) u grupi regruta mlade
hercegovačke vojske.
Augustin Weissbach, također austrijski
liječnik, Himmelov nadređeni
(„Obersturmarzt“ = štabni ljekar) nadovezao
se na njegov pionirski rad i uveo
populacijsku genetiku upoređujući nasljedne
osobine među glavnim etničkim grupama i
sa ostalim slovenskim populacijama u regiji.
Svoj rad pod naslovom „Die Bosnier“, dr.
Weisbach je objavio 1895. u Glasniku
Antropološkog društva u Beču
„Mittheilungen der Antropologischen
Gesellschaft in Wien“ (MAGW).
Uz saglasnost Antropološkog društva u
Beču, u nastavku prenosimo Weisbachov
izvorni rad „Die Bosnier“.
Napomena: Danas se kompleti MAGW-a
nalaze u najuglednijim svjetskim
bibliotekama, a volumen sa priloženim
radom slučajno sam našao u odbačenim
papirima za smeće, 1974., u holu „visoke
zgrade“, prilikom useljavanja. Zato vjerujem
u tezu da svaka knjiga ima svoj život i da niti
jedna nije višak, kao pouka kako treba pisati
ili šta se mora izbjegavati.
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 17
2020 Bilten, 11
18 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 19
2020 Bilten, 11
20 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 21
2020 Bilten, 11
22 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 23
2020 Bilten, 11
24 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 25
2020 Bilten, 11
26 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 27
2020 Bilten, 11
28 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 29
2020 Bilten, 11
30 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 31
2020 Bilten, 11
32 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 33
2020 Bilten, 11
34 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 35
2020 Bilten, 11
36 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 37
2020 Bilten, 11
38 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 39
2020 Bilten, 11
40 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 41
2020 Bilten, 11
42 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 43
2020 Bilten, 11
44 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 45
2020 Bilten, 11
46 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 47
2020 Bilten, 11
48 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 49
2020 Bilten, 11
50 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 51
2020 Bilten, 11
52 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
NAJAVE KONFERENCIJA
Pripremila: Maida Hadžić, MA, Viša stručna saradnica
28th World Congress of Psychiatric Genetics 2020
(WCPG 2020) October 16, 2020 Florence, Italy
Web: https://theconferencewebsite.com/conference-info/28th-world-congress-of-psychiatric-genetics-2020
Web: https://coursesandconferences.wellcomegenomecampus.org/our-events/exploring-human-host-microbiome-interactions-2020
The 6th International Conference of Quantitative Genetics
Two week virtual conference
Nov 2/3 – 12/13 2020
Web: https://icqg6.org
From Functional Genomics to Systems Biology
Virtual EMBL Conference
November 16-19, 2020
Web: https://www.embl.de/training/events/2020/OMX20-01
Bilten, 11 2020
Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH 53
Web: https://coursesandconferences.wellcomegenomecampus.org/our-events/single-cell-biology-2020
The Complex Life of RNA - Virtual
October 7-9, 2020
Web: https://www.embo-embl-symposia.org/symposia/2020/
EMBL Course: Metagenomics bioinformatics (Virtual)
November 2-6, 2020
Web: https://www.ebi.ac.uk/training/events/2020/metagenomics-bioinformatics-virtual
Web: https://plantscience.madridge.com
EMBL Course: Structural bioinformatics (Virtual)
November 23 – 27, 2020
Web: https://www.ebi.ac.uk/training/events/2020/structural-bioinformatics-virtual
2020 Bilten, 11
54 Udruženje genetičara u Bosni i Hercegovini – GENuBiH
Web: https://www.magnuswebinars.com/nutrition-research-virtual
Web: https://clinicalpharmaforum.com