Bacteriología Seminario 1 Introducción a la Microbiología ... · PDF...
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Bacteriología
Seminario 1
Introducción a laMicrobiología y a la
BacteriologíaMicrobiología 1
II CátedraFacultad de Medicina (UBA)
Introduccióna la
Microbiología
¿Qué es la MICROBIOLOGIA?La Microbiología se puede definir comola ciencia que trata de los seres vivosmuy pequeños, concretamente de aquelloscuyo tamaño se encuentra por debajo delpoder resolutivo del ojo humano:BACTERIAS, VIRUS Y HONGOS
PARASITOS: organismosunicelulares(microscópicos) ypluricelulares(macroscópicos)
Poder resolutivo del ojo: 0,1-0,2 mm.Por ejemplo: tamaño de unabacteria esférica 0.2 y 2um(micrómetros).
MICROORGANISMOSEs un conjunto de formas de vida agrupados por conveniencia delhombre; todos los organismos que no pueden observarse a simplevista. Es necesaria la ayuda de una lupa o de microscopios.Entre los microorganismos están:
FORMAS ACELULARES FORMAS CELULARESOrganismos unicelulares o pluricelulares de
dimensiones microscópicas.
ResumenCaracterísticas Virus Bacterias Hongos Parásitos
Célula NO si si si
Diámetroaprox. (um)
0.02-0.2 1-5 3-10(levadura)
15-25(trofozoito)
Ácido nucleico ADN ó ARNO ADN y ARN ADN y ARN ADN y ARN
Tipo de núcleo Ninguno Procariota Eucariota Eucariota
Naturaleza dela superficieexterna
Cápsideproteica yenvoltura
lipoproteína(virus
envueltos)
Pared celularde
proteoglicano
Pared celularde quitina
Membranaflexible
Mecanismo dereplicación
Parásitosintracelulares
obligados
Fisión binaria Gemacion omitosis
Cicloscomplejos
¿Qué estudia la microbiología?De los microorganismos se estudian sus:
ActividadesForma y estructuraReproducciónFisiología y metabolismoIdentificaciónDistribución en la naturalezaRelaciones con otros seresEfectos benéficos y perjudiciales
humanos
••••••••••
que ejercen sobre los
Alteraciones físicas y químicas que ejercen en el medio
¿Dónde se encuentran losmicroorganismos?
Los microorganismos son ubicuos
Se encuentran en el aire, en el agua, en el suelo,en los alimentos, sobre las superficies de los
losobjetos y sobre el exterior desus
todosorganismos y aún dentro de sistemasdigestivos, respiratorios y genitales.
En un cuerpo sano viven1 trillon de microbios
APLICACIONES DE LA MICROBIOLOGIA
1- Bancos de sangreLos bancos de sangre tienen por cometido la preparación eficiente yoportuna de componentes sanguíneos inocuos.
Funciones:-Captación, educación y registro de donantes.
-Extracción de sangre y separación de sus componentes.-Análisis inmunohematologico, serológico, distribución y almacenamiento
correspondiente de la misma.
Programas de seguridad en el laboratorio de forma tal que eldonante, el paciente y el personal del banco de sangre esténprotegidos contra posibles efectos nocivos de la exposicióna la sangre humana.
Normas preventivas y bioseguridad:-Toda muestra de sangre debe ser tratada y manipulada como si fuese Infecciosa
(aquellos materiales de alto riesgo para SIDA, Hepatitis B y/o C pueden demandarmedidas de seguridad especiales)
- Un buen programa de seguridad debe considerar todos los peligros que en el ambientelaboral pueden ser causales de accidentes y/o enfermedades profesionales.
- Implementar el uso de etiquetas y carteles y en las muestras.-El personal debe vacunarse contra Hepatitis B (excepto que se encuentre Inmunizado o
vacunado previamente)- Lavarse cuidadosamente las manos antes y después de cada procedimiento o si se tiene
contacto con material patógeno y después del contacto con pacientes o donantes.- Mantener los elementos de protección personal en óptimas condiciones de aseo, en un
lugar seguro y de fácil acceso.- Las mujeres embarazadas que trabajen en bancos de sangre (expuestas a riesgos
biológicos VIH/SIDA y/o Hepatitis B, C) deberán ser muy estrictas en elcumplimiento de las normas de bioseguridad.
- Realizar la desinfección y limpieza de las superficies, elementos y equipos de trabajo alfinal de cada procedimiento y al final de cada jornada.
Es de suma importancia una efectiva comunicación y la provisión y uso el uso deequipamiento de protección.
ACCIDENTE DE EXPOSICION A SANGRE 0 FLUIDOSCORPORALES (AES):
• Se denomina a todo contacto con sangre o fluidos corporales y que lleva unasolución de continuidad (pinchazo o herida cortante) o un contacto conmucosas o con piel lesionada (eczema, escoriación, etc.).El riesgo detransmisión depende de numerosos factores, fundamentalmente de:
-la prevalencia de la infección en una población determinada-la concentración del agente infeccioso-la virulencia del mismo-el tipo de accidente
Los agentes más frecuentes de AES son:-Virus de la Inmunodeficiencia humana (HIV)-Virus de Hepatitis B (HBV)-Virus de Hepatitis C (HCV)
¡RECORDAR!
Bioseguridad
Protección Peligro
Procedimientos a seguir frente a un accidente laboral.
INMEDIATAMENTE DECONTAMINAR LA PIEL CON AGUAY JABÓN, o CONSOLUCIÓN FISIOLÓGICA EN CASO DE MUCOSAS.CATEGORIZAR ELACCIDENTE: Debe haber ocurrido con material contaminado conSANGRE.Realizar control de serología para HIV, HBV y HVC inmediatamente, y tomar medidasadicionales urgentes en caso de obtener resultados positivos.
2-Análisis de Peligros y Puntos de Control Críticos(APPCC o HACCP )
Es un proceso sistemático preventivo para garantizar la seguridadalimentaria de forma lógica y objetiva, identificando, evaluando y previniendotodos los riesgos de contaminación de los productos a nivel físico, químico y
biológico a lo largo de todos los procesos dela cadena de suministro.
HACCP NO es un sistema de control de calidad. Su objetivo es asegurar laINOCUIDAD.
Concepto de Puntos de Control Criticos (PCC)Fase en la que puede aplicarse un control y que es esencial para prevenir o
eliminar un peligro relacionado con la inocuidad de los alimentos o parareducirlo a un nivel aceptable.
Concepto de Límite Crítico (LC)Son los valores mínimos o máximos de un parámetro físico, químico o
microbiológico que deben ser controlados en un PCC. Deben estar asociados avariables tales como: temperatura, tiempo, actividad de agua, pH, acidez, residuos deantibióticos entre otros, evaluados y monitoreados con métodos rápidos para que sea
expedita la toma de decisión y ajuste.
Ejemplos:
• Temperatura y tiempo necesarios para inactivarmicroorganismos patógenos en procesos depasteurización de leche.
• pH en producto final para asegurar que noexiste desarrollo de patógenos en conservasenlatadas.
• Residuos de antibióticos y plaguicidas enmaterias primas, mediante pruebas químicascarne de abasto y leche.
en
METODOS DE ESTERILIZACIÓN YDESINFECCIÓN
• ESTERILIZACION: Es la total destrucción o eliminación de todas lasformas de vida microbiana. Este proceso debe ser utilizado en losmateriales de categoría crítica.
• DESINFECCION: Es el proceso de eliminación de microorganismospatógenos, excepto las esporas bacterianas. En los bancos de sangre seutiliza un nivel medio de desinfección, inactivando a losmicroorganismos (hongos, virus y bacterias) en la forma vegetativa.
La responsabilidad sobre las normas de seguridad depende del EQUIPODE SALUD EN SU TOTALIDAD
ORGANISMOS EINSTITUCIONES
Food and drugadministration
Agencia del gobierno de los Estados Unidos dependientedel Departamento de Salud y Servicios Humanos
responsable de la regulación de: alimentos, fármacos,dispositivos médicos, vacunas, sangre y injertos
biológicos, productos veterinarios (alimentos, drogas,dispositivos médicos), cosméticos, productos que emiten
radiación y productos con tabaco.
www.fda.gov
Centers for Disease Controland Prevention
Agencia del Departamento de Salud y ServiciosHumanos responsable del desarrollo y aplicación de
políticas para prevenir y controlar enfermedades.
Cuenta con centros, institutos y oficinasespecializadas: Centro de inmunización y
enfermedades respiratorias, de enfermedadeszoonóticas, de transmisión sexual.
www.cdc.gov
OMS – WHO –Organización Mundial de
la Salud
- Lleva a cabo la Clasificación internacionalde enfermedades
- Determina la aplicación de MedidasSanitarias para detener una epidemia, o
profilácticas (como la vacunación)- Asiste a países menos avanzados en
vacunación, aprovisionamientos de aguapotable, protección maternal, etc.- Realiza estadísticas y estudios
epidemiológicos de los 193 estadosmiembros.
www.who.int
CIE – ICD – Clasificación deenfermedades
El objetivo actual es estandarizar diagnósticos por código yenfermedades para su fácil reconocimiento con finesestadísticos.
OPS – PAHO -Organización
Panamericana de lasalud
Organismo internacional de salud pública dedicada a mejorarla salud y las condiciones de vida de los países de América.
-Fijar políticas sanitarias en los países miembros.
-Cooperar técnicamente, incluyendo actividades educativas yde apoyo promoviendo la prevención de enfermedades.
-Promover la estrategia de atención primaria de la salud.
www.paho.org
ANMAT - Agencia nacionalde Medicamentos,
Alimentos y TecnologíaMédica
• Controlar, fiscalizar, vigilar la calidad y sanidad de losproductos, sustancias, elementos y procesos queinvolucren medicamentos, alimentos cosméticos ytecnología médica.
• Velar por el cumplimiento de las disposiciones legales,científicas y técnicas especificadas en reglamentos oleyes.
• Ambos a través del: Instituto Nacional de Medicamentos,Instituto Nacional de Alimentos, Dirección de Tecnologíamédica y Dirección de evaluación de medicamentos.
www.anmat.gov.ar
Código Alimentario Argentino(CAA)
Regula en todo el territorio de Argentina todos losalimentos, condimentos, bebidas, sus materias primasy aditivos. Respecto a su elaboración,fraccionamiento, conservación, trasporte, envasado,así como también el establecimiento que lo elabore
Alimentos que obligatoriamente deberán estar sujetos acontroles microbiológicos (según el CAA):
Alimentos lácteos: Leche (en todas sus formas), Queso(todos los tipos), Yogur, Cremas, Manteca, etc.
Productos cárnicos que se consumen sin tratamientotérmico: Chacinados, Embutidos, Fiambres, Salados,
Ahumados, etc.Alimentos refrigerados: Aves, Vegetales, Pescados y
mariscos, etc.Alimentos congelados: Platos preparados, Helados,
Pescados y mariscos, Vegetales, Hielo, etc.Pastas frescas (con y sin relleno)
Bebidas analcohólicas:Agua
Jugos de frutasCondimentos: salsas y aderezos
Frutas secas: maní, etc.
Tolerancia microbiológica dela carne cruda vacuna según
el CAADeberá responder a las siguientesexigencias:- Actividad de agua (aw): 0,83 - 0,88- Anaerobios esporulados, no mayor de:
100 por g- Bacterias mesófilas (recuento a 35°C),
no mayor de: 106 por g- Cloruro de sodio, Máx: 15% p/p- Enterobacterias, no mayor de: 10 por g- Humedad: 55 - 65% p/p- pH, no superior a: 5,2- Sorbato de potasio, (c/ácido sórbico),
Máx 0,12% p/p- Staphylococcus aureus coagulasa
positiva,no mayor de: 100 por gramo
INAL – Instituto Nacional deVigilancia Alimentaria
Identifican de forma temprana losalimentos que no cumplen con el Código
Alimentario Argentino
Retirar del mercado productoscontaminados
Realizar acciones de prevención y controlde la Enfermedades de Transmisión
Alimentaria
Denuncie siempre que:• Consumió o compró comida que no era segura. La comida es
considerada insegura cuando:
• - La comida que debe ser servida caliente no se encuentra caliente• - La comida que debe estar fría no está refrigerada• - Los alimentos contienen materiales extraños a su composición normal,
por ej: vidrio, insectos, pelos, etc.• - Los alimentos listos para consumir están en contacto con alimentos
crudos• - Los alimentos tienen olor o sabor desagradable
• Si la higiene de un restaurante o supermercado no es la adecuada.Se considera que la higiene es inadecuada cuando:
• - El negocio o restaurante se encuentra visiblemente sucio• - El personal del lugar manipula alimentos crudos y después cocidos y/o
listos para consumir sin lavarse las manos entre ambas operaciones
• Si se enfermó después de comer un alimento
• - Si usted sospecha que tiene una infección o una intoxicaciónalimentaria, es importante que consulte a su médico.
Denuncie a:
• Telefónicamente a 0800-222-6110 o 4340-0888 de lunes a viernes de 8 a 17 hs ysábados y domingos de 8 a 20 al 0800-333-1234
• De manera personal al Departamento devigilancia Alimentaria en Estados Unidos25 de lunes a viernes de 8 a 17 hs.
Administración Nacionalde Laboratorios e Institutos de
Salud• Es un organismo público dependiente del
Ministerio de Salud de la Nación Argentina quetiene como objetivo participar en políticascientíficas vinculadas en los aspectos sanitariodel ámbito público
• - Nuclea y coordina institutos, laboratorios y centros de saludlocalizados en distintos lugares del país.
- Actúa como institución nacional de referencia para la prevención,control e investigación de patologías
- Lleva a cabo investigaciones de específicos agentes patógenos.- Realiza estudios epidemiológicos
www.anlis.gov.ar
Informe epidemiológico de la ANLIS:
¿Que es la epidemiología?
Estudios de la distribución y los determinantesde estados o eventos (en particularenfermedades) relacionados con la salud y laaplicación de esos estudios al control deenfermedades y otros problemas de salud.(según la OMS)
•
Vías de transmisión
• Horizontal: Respiratoria, Salival, Fecal Oral,Cutánea, Sexual, Sanguínea, Oftálmica,Zoonótica
• Vertical: pasaje transplacentaria
Enfermedad y EpidemiologíaInteracción entre el cuerpo humano y los diversos gérmenes
Salud y enfermedad
Defensas humanas Mecanismos patogénicosde los gérmenes
ENFERMEDADPersona infectada Recuperación completa
Daño temporarioDaño permanenteMuerte
PATOLOGÌA Estudio científico de las enfermedades
ETIOLOGÌA Causa de la enfermedad
PATOGENIAProvoca cambios estructurales y funcionales causados porenfermedad y de sus efectos finales sobre el organismo.
la
INFECCIÓN Invasión o colonización de cuerpo pormicroorganismos patógenos. (OPORTUNISTAS?)
ENFERMEDAD Aparece cuando la infección producecambios en el estado de salud.
SALUD (Definición según OMS 1946): "Estado de completobienestar físico, mental y social y no solamente la ausenciaenfermedad"
de
• Síntomas: cambios en la función corporal (dolor omalestar).Cambios subjetivos.Signos: cambios objetivos, que se pueden observar ymedir (cuantificar). Lesiones, tumefacción, fiebre,parálisis, etc.Síndrome : conjunto específico de signos o síntomasque pueden acompañar una enfermedad particular.
•
•
El Diagnóstico de una enfermedad se logra a través dela evaluación de los signos y los síntomas, junto a losresultados de las pruebas de laboratorio.
Aparición de una enfermedadIncidencia: es el nº de casos nuevos que surgen en•un área geográfica y período de tiempo determinadoEs un indicador de la diseminación de la enfermedad.
• Prevalencia: esárea geográfica
la proporción de personas que en uny período de tiempo establecido,
sufren una determinada enfermedadnº de los que padecen el trastornonº total de los habitantes del área)
GRADO DE COMPROMISO DEL HUESPED
• Sepsis es una enfermedad inflamatoria tóxica que se originaen la diseminación de microorganismos o sus toxinas,de un foco infeccioso.
a partir
• Septicemia es una infección sistémica causada por lamultiplicación de patógenos en la sangre.
• Bacteriemia es la presencia de bacterias en la sangre
• Toxemia es la presencia de toxinas en la sangre
• Viremia es la presencia de virus en sangre
INFECCIONES HOSPITALARIAS(NOSOCOMIALES)
• 5-15% de pacientes hospitalizados adquierenalgún tipo de infección nosocomial.Microorganismos presentes en el hospitalHuésped comprometidoCadena de transmisión
•••
MECANISMOS DE PATOGENICIDADMICROBIANOS
• PatogenicidadCapacidad de causar enfermedad al
defensas del huéspedsuperar las
• VirulenciaGrado o magnitud del daño que puede provocar
Cantidad de Microorganismos Invasores
• DI 50 indica la virulencia de un microorganismo (indica ladosis infecciosa para el 50% de una población de muestra)Ej. Bacillus anthracis puede causar infección por tres puertas de entradadiferentes.––
DI 50 a través de piel (carbunco cutáneo) es de 10 a 50 esporas.DI 50 por inhalación (carbunco respiratorio) es por aspiración de10.000 a 20.000 esporas.DI 50 en el caso del carbunco gastrointestinal es por la ingestión de250.000 a 1.000.000 de esporas.
–
• DL50 (dosis letal para el 50% de una población de muestra).Esta nomenclatura se usa para la potencia de una toxina. ej.0,03 ng/kg es la dosis letal en ratones para botulismo.
BACTERIOLOGÍA
• Microorganismos unicelulares que presentan un tamaño dealgunos µm de largo y diversas formas
• Son procariontes y por lo tanto no tienen núcleo, ni organelascitoplasmáticas
• Poseen una pared compuesta de peptidoglicano
• Muchas de ellas poseen flagelos u otro sistema dedesplazamiento y son móviles
• Son organismos de vida libre (excepto Chlamydia y Rickettsia)
• Se dividen por fisión binaria
BACTERIAS
Diferencias entre Procariontes y Eucariontes
CLASIFICACIÓN DE LASBACTERIAS
• Fenotípica: (propiedades reales y expresadas)morfología microscópica, morfologíamacroscópica, biotipo, serotipo, antibiograma.
• Genotípica: (propiedades potenciales) hibridaciónADN, análisis de secuencias de nucleótidos,análisis plásmidos, análisis fragmentos de ADNcromosómico.
• Analítica: análisis pared celular, lípidos pared,proteínas de sostén, enzimas celulares.
TAXONOMÍA Y NOMENCLATURABACTERIANAS
• Taxonomía = Clasificar• Criterios genéticos:
- Homología ADN- Homología ARN
ribosómico desubunidad 16S
• Nomenclatura = Poner nombre• Criterios muy diversos• Primera palabra hace referencia
al Género (mayúsculas)• Segunda palabra hace referencia
a la especie (minúsculas)• Se escriben siempre en cursiva o
subrayado (Ej.: Staphylococcusaureus)
MORFOLOGÍA BACTERIANA
ULTRAESTRUCTURA BACTERIANA• Estructuras citoplasmáticas: ADN cromosómico, ARNm,
ribosomas y metabolitos.
• Envoltura Celular:Cápsula, matriz exopolisacaridaMembrana Externa (solo Gram -)Pared CelularEspacio Periplasmico (solo Gram -)Membrana Citoplasmática
• Otras estructuras: Flagelos, Pili, Fimbrias
RECORDAR!
Cromosoma Bacteriano: ADN doble cadena circular y superenrrollado quese encuentra en el nucleiode.
Tiene función de replicación, recombinación y expresión de genes.
LTA = Acido Lipoteicoico
COMPARACIÓN ENTRE LAS ENVOLTURAS DE Gram + y Gram -
Formas Bacterianas libres de pared
Cuando las bacterias se tratan1) con enzimas líticas que degradan la pared celular, por
ejemplo: lisozima, o2) con antibióticos que interfieren con la biosíntesis de
peptidoglicanos,se producen bacterias libres de pared celular.
Generalmente estos tratamientos generan organismos noviables, pero que son útiles en la experimentación in vitro.A las bacterias libres de pared que no pueden replicar se lesllama esferoplastos (cuando la membrana externa aún estapresente) o protoplastos (si la membrana externa ya no estápresente). Ocasionalmente estos tratamientos generanformas de bacterias libres de pared que pueden replicar (lasformas L).
RECORDAR
Las estructuras bacterianas pueden serproteicas, hidrocarbonadas o lipídicas, o
combinadas.Recordar cuál es la estructura bioquímicapermite entender su antigenicidad y su
resistencia al calor
BLANCO DE ACCIONDE LOS ANTIBIOTICOS
MECANISMOS DERESISTENCIA ANTIBIÓTICA
• Inhibición enzimática• Alteración del blanco ribosomal• Modificación de la permeabilidad de la pared• Extracción del antibiótico• Alteración de los sistemas de transporte• Modificación de los precursores de la pared• Mutación de las enzimas• Cambio de la estructura de las proteínas blanco
¿Es posible terminar con lasenfermedades infecciosas?
• La era antibiótica moderna se inició hace más de 60 años con eldescubrimiento de la penicilina y otras sustancias similares,capaces de eliminar las bacterias.
• Tras los primeros y extraordinarios resultados, la humanidadconcibió la idea de eliminar las enfermedades infecciosas
• Sin embargo, hoy en día, dicha meta sigue siendo una aspiracióndifícil de alcanzar e incluso poco probable a la luz de lassorprendentes estrategias desarrolladas por las bacterias parasobrevivir y hacerse resistentes a la acción de un gran número decompuestos antibacterianos.
¿Es posible terminar con lasenfermedades infecciosas?
• Mayor rapidez la aparición de cepas poco o nada sensibles, inclusoa los compuestos de última generación, como vancomicina.
• Los primeros reportes de resistencia fueron publicados, casisimultáneamente en 1940, por varios grupos de investigadoresindependientes.
• Para 1947, un alto porcentaje de las cepas de estafilococos aisladasen los hospitales de Estados Unidos y varios países europeos eraninsensibles a penicilina G.
• La respuesta de la comunidad científica al surgimiento de gérmenesresistentes, fue la acelerada producción y utilización de nuevosfármacos.
Bases genéticas de laresistencia bacteriana
Según la teoría de la selecciónnatural, la variabilidad genética delos organismos vivientes esesencial para su evolución y en elcaso de las bacterias, estefenómeno es el resultado de tresmecanismos
• las mutaciones puntuales• los cambios estructurales en el
material genético• la adquisición de fragmentos de
ADN procedentes de otrasbacterias.
GENETICABACTERIANA
• Clon: conjunto de bacterias que derivan de un ancestroen común, como resultado de una misma cadena dereplicación.
• Especie bacteriana: circunscribe un grupogenéticamente similar de cepas individuales (una especiebacteriana se compone de diferentes clones).
• Variación GenéticaFenotípicas: modificación de una o varias
características como respuesta a estímulos presentes enel medio ambiente (mecanismo de adaptación).Genotípicas: variación del material genético
(mutaciones).
Mecanismos de regulación de la expresiónde genes
Regulación por reordenamiento: amplificación, variaciónde fase, variación antigénica.Regulación transcripcional: activación y represión degenes.Regulación post transcripcional: modificación que haceactiva una molécula inactivada. Por ejemplo: activaciónpor proteolisis de proteínas.
Recombinación HomólogaSe produce entre secuencias de ADN estrechamente
relacionadas y que en general se sustituye una secuenciapor otra.
División Celular
PlásmidosADN circular extracromosomal, que se replica de forma
autónoma con respecto al cromosoma bacteriano.Su función es contener información para la adaptación de labacteria al medio y para su evolución (Ej: resistencia a ATB)
Transposones: segmentos deADN con capacidad demovilizarse de forma autónomaen el genoma y que contienegenes estructurales (Ej: factoresde virulencia y para adaptaciónal medio). Mutan y se integrana cromosomas o plasmidos.
Las bacterias puedenintercambiar material genético
mediante tres mecanismos:
• Transformación (DNA desnudo)
• Conjugación (Contacto bacteriano)
• Transducción (Bacteriófago)
TRANSFORMACIÓN
CONJUGACIÓN
Bacteriófagos
Conocidos también como "fagos", son parásitosintracelulares (virus) de bacterias.Están constituidos por DNA o RNA y proteínas. Si lisan ala bacteria infectada se habla de una infección lítica; si seintegran al genoma bacteriano y se encuentran en estadoquiescente (profagos con el potencial de producir fagos)se habla de una bacteria en estado lisogénico.
TRANSDUCCION
RELACIÓN HUÉSPED – BACTERIA
CONCEPTOS BÁSICOS SOBRE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS
MODO DE ENTRADA DE LOS ORGANISMOS ENUN HUESPED
• Mucosas
• Piel
• Vía Parenteral
Entrada, Transmisión y Salida
Entrada, Transmisión y Salida
Los patógenos se pueden clasificar en:• Primarios: producen enfermedad en individuo sano• Oportunistas: necesitan de una condición predisponente• Componentes flora normal del huésped
Flora normal y patógena
Patogenicidad Bacteriana
• Adherenciaadhesinas o ligandos que se fijan especificamentea receptores de superficie.fimbrias
• Mecanismos de evasión de las defensas delhuésped
• Mecanismos de los patógenos bacterianospara dañar las células huésped
Patogenicidad BacterianaMecanismos de evasión de las defensas delhuésped
Cápsulas: resiste las defensas del huésped porque altera lafagocitosis.
Componentes de la pared celular: ej. proteína M en Streptococcus pyogenescontribuye a resistencia bacteriana a la fagocitosis leucocitaria.
Enzimas: exoenzimascoagulasas : coagulan el fibrinógeno en la sangre.quinasas: degradan la fibrina (fibrolisina)hialuronidasa: hidrolizan el ácido hialurónico (polisacárido que une células del tejido
conectivo).colagenasa: degrada el colágeno del tejido conectivo de los músculos.IgA (algunos patógenos producen IgA proteasa)
Variación antigénica
Penetración del citoesqueleto de la célula huésped Invasinas, modificanlos filamentos de actina cercanos al citoesqueleto celular (usan también una glucoproteínacadherina como puente entre células)
Patogenicidad BacterianaMecanismos de Daño de las células del huésped
• Utilización de los nutrientes del huésped: Sideróforos
• Daño directo en la cercanía inmediata de la invasión
• Producción de toxinas
• Inducción de reacciones de hipersensibilidad
Factores: toxinas, exoezimas
Producidos por la bacteria
DAÑOEvasión Signos y síntomas
Producidos por el huésped
Inflamación
Hipersensibilidad
Autoinmunidad
ENFERMEDAD
Infección vs. Enfermedad Infecciosa
FISIOLOGÍABACTERIANA
Requerimientos nutritivos
Macronutrientes:Carbono, Nitrógeno, Fósforo, Azufre,Potasio, Magnesio, Hierro, Agua
Micronutrientes:Cobalto, Zinc, Cobre, Manganeso
Factores de crecimiento:Aminoácidos, Vitaminas y Bases
nitrogenadas
GRUPOS NUTRICIONALESGrupo
nutricionalFuente decarbono
Fuente deenergía
Fotoautótrofos CO2 Luz
Fotoheterótrofos Compuestoorgánico Luz
Quimioautótrofos CO2Sales
inorgánicas
Quimioheterótrofos Compuestoorgánico
Compuestoorgánico
TIPOS DE REACCIONES METABÓLICAS
Reacciones energéticas
Reacciones de biosíntesis
Reacciones de polimerización
Reacciones de ensamblaje
REACCIONES ENERGÉTICAS:FASES
Digestión extracelular
Paso a través de la envoltura: Difusión simple Difusión facilitada Transporte activo
Degradación y obtención de energía
REACCIONES ENERGÉTICAS
Vía glucolítica de EmbderMeyerhof
Vía pentosa fosfato Ciclo de Krebs
Vía de Entner Doudoroff
REACCIONES ENERGÉTICAS
Fermentación: Aceptor final de e- compuesto orgánico 1 glucosa/2 ATP
Respiración: Aceptor final de e- compuesto inorgánico 1 glucosa/38 ATP
Tipo debacteria
Crecimiento ProducciónCatalasa
Superoxidodismutasa
(SOD)
VíametabólicaAerobio Anaerobio
Aerobiaestricta
+ - + Respiración
Anaerobiaestricta
- + - Fermentación
Facultativo + + +Respiración/Fermentación
Indiferente/Aerotolerante
+ + + Fermentación
Microaerófilo (+) + (+) Fermentación
REACCIONES DE BIOSÍNTESIS
Formación de elementos estructurales:
Ácidos grasos
Azúcares
Aminoácidos
Nucleótidos
REACCIONES DE POLIMERIZACIÓN YENSAMBLAJE
Formación de macromoléculas:ADN, ARN, proteínas,
peptidoglicano, fosfolípidos,LPS
Formación de las distintasestructuras celulares
REGULACIÓN DEL METABOLISMO
Regulación de la actividadenzimática
Regulación de la síntesisenzimática:
Represión Inducción
Supervivencia Bacteriana:por procesos de esporulación,motilidad y quimiotaxis
ESPORAS
• Más pequeñas quecélula vegetativa
• Metabolismo limitado• No se reproducen• Más resistentes a la
acción de agentesfísicos y químicos
ESPORULACIÓNBacteria
vegetativa
Septación
asimétricaENDOCITOSIS
FORMACIÓN DELA ENDOSPORA
Formación delcortex
Síntesis dela cubierta
Lisis célular.Liberación de
la espora
CRECIMIENTO BACTERIANO:TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
• Según su estado físico:- Líquidos o caldos- Sólidos (Agar al 1.5-2%)- Semisólidos
• Según crecimiento que permitan:- Enriquecidos- De enriquecimiento- Selectivos- Diferenciales
CRECIMIENTO BACTERIANO:FACTORES
1. Temperatura2. pH3. Medio de cultivo4. Inóculo
TEMPERATURA
pH
A. Acidófilos
B. Neutrófilos
C. Alcalófilos
ESTUDIO CUALITATIVO DELCRECIMIENTO BACTERIANO
• Medios líquidos:
Turbidez
• Medios sólidos:
Colonias
COLONIAS BACTERIANAS. TIPOS
Forma
Superficie
Bordes
CIRCULAR IRREGULAR FILAMENTOSA RIZOIDE
CONVEXA PLANA UMBILICADA CRATERIFORME
REDONDEADO ONDULADO FILAMENTOSO ESPICULADO LOBULADO
1: alfa-hemólisis
alfa-hemólisis
Cultivo cofluente
Colonias aisladas
beta-hemólisis
2: beta-hemólisis
Colonias aisladas
DIAGNOSTICOBACTERIOLOGICO
Para realizar un diagnostico microbiológico, sedeben seguir secuencialmente los siguientes pasos:
1- Toma de muestra
2- Microscopía
3- Aislamiento en cultivo del agente etiológico
4- Identificación
5- Prueba de sensibilidad a los ATB
TOMA DE MUESTRA• Muestra directa: se extrae directamente del órgano o
cavidad infectada. Son sitios que en condicionesnormales son estériles como pulmón, LCR, pleura.
• Muestra indirecta: orina, esputo, que se emiten demanera espontánea y que atraviesan una región quecontiene flora normal.
• Muestra en sitios con flora normal: intestino yfaringe. Se investigan bacterias que normalmente no seencuentran en personas sanas. Ej: Salmonella, Shigella,S.pyogenes.
Seleccionar medio de transporteadecuado y conservación de la muestra !!!
MICROSCOPIA
• Observación en fresco• Extendidos Teñidos
• Tinción de Gram• Tinción de Ziehl Neelsen
• Microscopio de fluorescencia• Microscopio de contraste de fase• Microscopio de campo oscuro
Tinción de Gram
Tinción de Ziehl Neelsen Microscopia de Fluorescencia
Microscopia de campo oscuroMicroscopia de contraste de fase
CULTIVO
• Medios sólidos (agar)• Medios líquidos (caldos)
El objetivo es recuperar y aislar elmicroorganismo responsable de la patogenia
Tener en cuenta los siguientes parámetros:temperatura, pH, Oxigeno
Identificación por pruebasbioquímicasConsiste en baterías de pruebas bioquímicas que determinan lacapacidad de un aislamiento bacteriano de utilizar determinadossustrato, de producir un metabolito particular, de fermentar
azucares,descarboxilar, hidrolizar o desaminar aminoácidos
• Prueba de oxidasa• Prueba de catalasa• Prueba de manitol• Reacción de CAMP• Prueba de ureasa• Prueba de coagulasa
Identificación por pruebasserológicasConsiste en detectar antígenos especificos de las bacterias
Permiten diferenciar entre especies microbianas y entrecepas dentro de una misma especie
Cepas con diferentes antígenos se denominanSEROTIPOS,
SEROVARIEDADES (serovares) o BIOVARIEDADES(biovares)
Se puede detectar por ELISA, Aglutinación, Western Blot
Identificación por Fagotipia
Consiste en enfrentar la bacteria aislada adiferentes bacteriófagos
Se producen áreas de lisis
• Perfiles de ácidos grasos• Citometria de flujo• Composición de bases del ADN• Huellas del ADN (Fingerprint) Microbiología forense• PCR• RFLP (polimorfismo de longitud de fragmentos de restriccion)• Hibridación del acido nucleico (Southern Blot)• Micromatrices (chips) del ADN• Ribotipificacion y secuenciación del ARN ribosómico (rRNA)• Hibridación fluorescente in situ (FISH)• Claves dicotómicas• Cladogramas• Bioinformatica
Pruebas de sensibilidad a ATB(Antibiograma)
• Métodos de difusión en agar (Método Kirby Bauer)(Cualitativo)
• Métodos de dilución de antimicrobiano(cuantitativo)
Concentración Inhibitoria Minima (CIM): minimaconcentración de ATB que inhibe el crecimiento bacteriano
Concentración Bactericida Minima (CBM): minimaconcentración de ATB para eliminar el 99.9% de bacterias en24hs.
Kirby Bauer
CIM
SEROLOGIA
La serología nos permite determinar el título deanticuerpos presentes en el suero del paciente
Se emplea generalmente cuando:• El agente etiológico no es cultivable• Requiere cultivos específicos no disponibles en la
mayoría de los laboratorios• El paciente se encuentra en una etapa de la infección
en la cual el agente etiológico no es viable.
Bioseguridad
Bioseguridad“doctrina de comportamiento encaminada a lograr actitudes yconductas que disminuyan el riesgo del trabajador de la salud deadquirir infecciones en el medio laboral”
Puntos Clave
• Compete a todas las personas que seencuentran en el ambiente sanitario.
• Práctica Rutinaria• Deben ser cumplidas por todo el
personal de salud.• Independiente del riesgo.
Principios de la Bioseguridad1) Universal: Aplicadas a todas las personas independiente de presentar o noenfermedad.
Involucra a todos los pacientes, independiente de conocer o no suserología.
Todo el personal debe seguir las precauciones estándares para prevenirla exposición de la piel y de las membranas mucosas, en todas las situaciones quepuedan dar origen a accidentes, estando o no previsto el contacto con sangre ocualquier otro fluido corporal.
2) Uso de Barreras: evitar la exposición directa a sangre y otros fluidos orgánicospotencialmente contaminantes, mediante la utilización de materiales adecuados.
3) Medios de eliminación de material contaminado: conjunto de dispositivos yprocedimientos.
InfeccionesAsociadas a losCuidados de la
Salud(IACS)
IACS:
1.Infección Intrahospitalaria
2. Hemodiálisis
3. Hospital de Día
4. Rehabilitación
5. Internaciones Domiciliaras
6. Geriátricos
30 díasposteriores alinicio de la
terapia
Infecciones Hospitalarias/NosocomialesToda infección adquirida durante la internación y que no estuviese presente oincubándose al momento de la admisión del paciente (…) En el caso de lasheridas quirúrgicas la infección puede manifestarse luego del alta del paciente,hasta 30 días o un año dependiendo de la colocación o no de prótesis.
2°guias prácticas, OMS, 2002
Afecta 10% de lospacientes internados
Ejemplos de Infecciones Nosocomiales
ITU: Infección Tracto UrinarioISQ: Infección Sitio QuirúrgicoIRB: Infecciones RespiratoriasBajas
Prevención1.Lavado de Manos2.Guías de prevención3.Precauciones estándar4.Aislamiento5.Uso correcto de Antibióticos6.Inmunización del Personal7.Higiene Hospitalaria8.Educación.
Lavado deManos
¿Porqué es importante?Disminución del 30% de Infecciones Intrahospitalarias
Disminución de la Morbimortalidad
Disminución de la inversión pública para el tratamiento delas infecciones nosocomiales
2002,OMS
Día Mundial delLavado de Manos:
18 de octubre.
Flora Colonizante - Residente• Aislados en la piel de la mayoría de los individuos
• Residentes Permanentes
• NO REMOVIBLES por fricción mecánica
Microorganismos
Estafilococo coagulasa negativa,Corynebacterium spp.Propionibacterium spp.Enterobacterias
Flora Transitoria• No presente en todos los individuos (con respecto a sus especies)
• Transmisibles por contacto
• REMOVIBLES por fricción mecánica
• DESTRUCCIÓN con Antisépticos
Microorganismos
Staphylococcus aureus,Streptococcus pyogenesBacilos gram negativos (ej.E. Coli)Candida spp
Clasificación de Lavados de Manos
1. Lavado Social
• REMUEVE Flora Transitoria
• Remueve suciedad
• Material: Jabón de tocador o Detergente
• Duración: 10-15 segundos.
• Usos: inicio del día, salida de sala, alimentación, al estornudar y toser.
• NO PARA ATENCIÓN DE PACIENTES.
2. Antiséptico
• REMOVER y DESTRUIR Flora Transitoria
• Materiales: Jabón o Detergente antimicrobiano. Preparación alcohólica.
• Duración: 10-15 segundos.
• Usos: Antes y después de realizar procedimientos invasivos, curaciones,aspirar secreciones, manipuleo de catéteres o Asistencia MecánicaVentilatoria, extraer sangre, entrar en sala y aislamientos y al salir.
Procedimiento
2°guias prácticas, OMS, 2002
2°guias prácticas, OMS, 2002
Uso del “Alcohol en Gel”
Boletín Informativo N° 210 , Centro de Información de Medicamentos – CIM, Universidad de Rosario, 2014
3. Quirúrgico
• REMOVER y DESTRUIR Flora Transitoria
• REDUCIR Flora Residente
• Material: Jabón o detergente antimicrobiano + Esponja para friccionar
• Duración: > 120 segundos.
• Usos: Antes y después de cada cirugía.
• Retirar joyas.• NO usar uñas postizas.• Quirúrgico: mangas por encima del codo.
Usar agua tibia. Aplicar 5 cc de jabón antimicrobiano
Humedecer las manos
Siempre con las manos hacia arriba
Friccionar y hacer espuma sobre manos ymuñecasFrotar entre los dedos.Quirúrgico: Usar esponja estéril
Friccionar hasta encima delpliegue de codo
Enjuagar siempre con manos hacia arribaCon abundante agua
Secar a conciencia con toalla descartableQuirúrgico: A conciencia con papel otela estériles.
Cerrar la canilla sin tocarla con la mano,use la toalla de papel.Quirúrgico: cerrar con el codo.
PrecaucionesEstándares
Son las precauciones que deben aplicarse atodos los pacientes independientemente de sudiagnóstico, a fin de minimizar el riesgo detransmisión de cualquier tipo demicroorganismo, del paciente al trabajador de lasalud y viceversa.
Precauciones Estándares
HIGIENE de MANOS
SIEMPRE• Antes y después delcontacto con 1
paciente• Entre pacientes• Antes y después deluso de guantes.
CUBRA su TOS
• Si tose o estornudacubra su boca y nariz
con pañuelo descartable.
GUANTES
• Antes del contacto conmucosas, piel no intacta,
fluidos corporales.• Retirar inmediatamente luego
del uso.
CAMISOLIN
Usar duranteprocedimientos que
puedan causarsalpicaduras o
aerosoles.
BARBIJO QUIRURGICO YPROTECCION OCULAR
Usar durante procedimientos quepuedan causar salpicaduras o
aerosoles.
ISTRUMENTAL NO CRÍTICO
Manejar equipo no estéril con cuidado paraevitar contaminación del personal y de otros
pacientes. Retirar en forma inmediata yprocesar (según normas) los elementos
contaminados
SALUD DEL PERSONAL
No encapuchar ni manipularelementos punzo-cortantes.
Desechar endescartadores rígidos.
AISLAMIENTO
No indicadoSolo para pacientes enaislamiento específico.
NO USAR
Varios anillos,pulseras, relojes.
Uñas largas, postizas opintadas.
Pelo suelto.
Precauciones:Aislamientos
• Ayudan a prevenir la propagación de microorganismos en el hospital
• Basados en la Transmisión del patógeno
Precauciones: Aislamientos
Asilamiento de Contacto
Aislamiento Por Gotas
Aislamiento Por Aerosoles
1. Aislamiento por Contacto• Sospecha o certeza de infección por patógeno muy transmisible.
• Asociado a Patógeno Multiresistente:1. SARM de la Comunidad2. Klebsiella carbapenem resistente3. Acinetobacter4. Pseudomona5. Enterobacter kpc6. Virus sincial Respiratorio7. Herpes Virus8. Ébola.
• Procedimiento:Lavado de Manos ---- Camisolín ---- Guantes
• Material crítico solo para el uso de ese paciente.
• Habitación individual o cohorte.
2. Aislamiento por Gotas
• Patógeno que se transmite por hablar, toser, estornudar, procedimiento Vías Aéreas
• Microorganismos: H. influenzae, N. meningitidis, Neumococo B-láctamicoResistente, Nuemonia por Mycoplasma, Influenza, VSR, B. pertusis, C. diphterea,Parvo B19, Fiebres hemorrágicas.
• No Neumonía por Neumococo. Porque?
• Procedimiento:Lavado de Manos --- Barbijo quirúrgico --- Antiparras para procedimiento
• Habitación individual. Puerta cerrada.
3. Aislamiento por Aerosoles
• Patógeno se transmite por el aire, recorren grandes distancias por corrientes.
• Microorganismos: M. tuberculosis, Mycobacterias no tuberculosas, Varicela zóster,Sarampión, Herpes Zóster diseminado, Influenza H1N1 cuando aerosoliza.
• Patógeno < 1 micrón.
• Procedimiento:Antes de ingresar: Barbijo N95 --- Lavado de Manos --- Reutilizable con el mismo
paciente hasta su externación.
• Habitación individual
• Aire filtrado: EPA N95.
Sospecha para Aislamiento
-Infección respiratoria en niños(*)
-Meningitis
-Fiebre + petequias o equimosis.
-Tos persistente severa o paroxística en época de coqueluche
-Epiglotitis
Aislamiento de Gota Barbijo quirúrgico
-Vesículas (*)-Fiebre + erupción máculo-papular + catarro.
-Fiebre/tos/infiltrado pulmonar con antecedentes o contacto con TBC.
-Fiebre/tos/infiltrado pulmonar sugestivos de TBC.
-Infiltrados pulmonares en pacientes HIV (+).
-Patología respiratoria crónica sin diagnóstico.
Aislamiento de Aerosoles Barbijo N95
-Infección respiratoria en niño(*)
-Vesículas (*)
-Diarrea aguda.
-Infección o colonización por gérmenes multiresistentes.
-Abscesos cutáneos o heridas abiertas.
-Gripe
Aislamiento de Contacto
RESIDUOS
DESCARTADORES
• Se considera descartadores al recipiente donde sedepositan, con destino a su eliminación porincineración, todos los materiales corto punzantes. Nodeben ser reutilizados.
• Debe estar hecho con material resistente a lospinchazos y compatible con el procedimiento deincineración sin afección del medio ambiente.
RESIDUOSBOLSA ROJA
Guantes, algodón, gasa, venda.
Material descartable.
Contenedor de material punzo-cortante.
Frasco de remedio parenteral
Material con restos orgánicos.
Restos de quirófano y anatomía patológica.
Residuos de laboratorio.
Pañales.
Todo lo usado en aislamientos
BOLSA NEGRA(Residuos domiciliarios)
Toalla de papel.
Caja de remedios, blister
Papeles, cartones.
Material administrativo.
Latas, botellas.
Restos de alimentos.
DESECHO DE RESIDUOS LÍQUIDOS
Los residuos líquidos (sangre, heces, vómitos, orina,secreciones y otros líquidos corporales ) pueden desecharsepor el inodoro, Chatero y/o equipo sanitario similar. Esto esposible cuando los efluentes son vertidos a la red sanitaria: siel establecimiento no cuenta con conexión a la red sanitariadeben ser tratados previamente.
NO DEBEN DESECHARSE POR EL INODORO PORNINGÚN MOTIVO: materiales como: restos de suturas,gasas, algodón, agujas, papel, cartón, material de polietilenoetc. (Estos ocluyen las tuberías de desagote, impidiendo lanormal circulación de los efluentes)
Guía de prevención deinfecciones hospitalarias,2° edición, OMS, 2002
• ANTES O DURANTE EL USO : 15%
• DESPUÉS DEL USO, ANTES DE DESECHAR: 68%
• DURANTE O DESPUÉS DE DESECHAR: 14%
REENFUNDAR LA AGUJA ES LA CAUSA DE 2/3 DELOS ACCIDENTES
NO reencapuchar las agujas