زیستی هٌْذسی شًتيک ٍ ایوٌیISSN - چاپی

ISSN - الکتريویکی 77، بْار ٍ تابستاى 1، ضوارُ 7دٍرُ

31-23صفحِ

Genetic Engineering and Biosafety

Journal Volume , Number

ثیبٖ غٖ،

سٙظیٓ وٙٙسٜ ٔٙفی،

غٖ فبلس ػّٕىطز،

T-DNAالیٗ

چکيده

استریکتوسیدین شبه ژن کارکرد مطالعه در معکوس ژنتیک کاربرد

شوری تنش به پاسخ در تالیانا آرابیدوپسیس 6 -سینتاز

Reverse Genetic Application in functional study of Arabidopsis

thaliana strictosidine synthase Like- gene under salt stress

3ػبثسی أیٗ 2ٚ*ؾٛٞب٘ی ٟٔسی ٔحٕس ،1وٙبضی زضیب دٛضوطیٕی ٔحسثٝ

Mohadece Pourkarimi Daryakenari , Mohammad Mehdi Sohani

* and Amin

Abedi

وكبٚضظی ثیٛسىِٙٛٛغی ٌطٜٚ زوشطی اِشحهیُ فبضؽ -3 زا٘كیبض -2، اضقس وبضقٙبؾی اِشحهیُ فبضؽ -1 ایطاٖ ضقز، ٌیالٖ، زا٘كٍبٜ وكبٚضظی ػّْٛ زا٘كىسٜ

- M.Sc. graduate student, -Associate Professor, - PhD graduate student,

Department of Agricultural Biotechnology, Faculty of Agricultural Sciences,

University of Guilan, Rasht, Iran.

msohani@guilan.ac.ir mhdsohani@gmail.com :اِىشطٚ٘یىی دؿز ٔؿئَٛ، ٘ٛیؿٙسٜ*

(30/5/97:دصیطـ سبضید -3/2/97زضیبفز سبضید)

ّای شًی هَجَد در شًَم آرابيذٍپسيس ( از خاًَادSSLُّای ضبِ استریکتَسيذیي سيٌتاز )شى

( Catharanthus roseusّای ایي خاًَادُ در سایر گياّاى ًظير پریَش )ّستٌذ. اٍرتَلَگ SSLّای کليذی هسير بيَسٌتس ایٌذٍل آلکالَئيذّای هًََترپٌَئيذی ّستٌذ. شى آًسین

ّای پيام رساى بِ ّا ٍ هَلکَل، در پاسخ بِ اًَاع تٌصSSLآرابيذٍپسيس، از اػضاء خاًَادُ شًی ( T-DNAّای شًتيک هؼکَس )درج ضَد. در ایي هطالؼِ، از رٍشداری القاء هیصَرت هؼٌی

در پاسخ بِ تٌص ضَری استفادُ ضذ. آزهایص بِ صَرت SSLبرای تؼييي ًقص کارکردی شى فاکتَریل در قالب طرح کاهل تصادفی با دٍ فاکتَر ٍ در سِ تکرار اًجام ضذ. فاکتَرّا ضاهل دٍ

( بَد. در هقایسِ NaCl ( mM, mM, mMٍ سِ سطح تيوار ( Col- ٍsslشًَتيپ )-با گياُ تيپ ٍحطی، افسایص تجوغ پرٍليي ٍ هحتَای آًتَسياًيي ٍ کاّص هحتَای هالَى دی

هطخص کرد Real Time-PCRدار بَد. بررسی ( در پاسخ بِ تٌص ضَری هؼٌیMDAآلذئيذ ) 6ٍ 2ّای در زهاى NaClهيلی هَالر 151ار ضَری در پاسخ بِ تيو SOSّای کِ افسایص بياى شى

دار است. در هجوَع ایي ًتایج ًطاى داد هؼٌی -Colدر هقایسِ با sslساػت پس از تيوار در گياُ ًقص کٌترل کٌٌذُ هٌفی در پاسخ بِ تٌص ضَری در گياُ آرابيذٍپسيس بر SSLکِ احتواالً شى

ػْذُ دارد.

D کلیذیَای ياشٌow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

22 1397بهار و تابستان / 1ره / شماهفتم/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی

مقدمهثٝ یسٞبا٘سَٚ آِىبِٛئ ٔٛ٘ٛسطدٛئیس ٌیبٞی، یسٞبیٔیبٖ آِىبِٛئ زض

، يس (Quinine)يس ٔبالضیب وٛیٙیٗ زِیُ زاقشٗ ذٛال زضٔب٘ی وطیؿشیٗ( ٚ ٚیVinblastineٗثالؾشیٗ )ٚیٗ ؾطَبٖ

(Vincristine ) ٚ ٌطزاٖ ضٚاٖٕٞچٙیٗ یب يس ثیٕبضی لّجی ػطٚلی ثٝ ذٛز خّت وطزٜ ( سٛخٟبر ظیبزی ضا Reserpineضؾطدیٗ )وّیسی ٔؿیط ثیٛؾٙشع ٞبی ٔٙدط ثٝ قٙبؾبیی آ٘عیٓأط اؾز. ایٗ

یسیٗ ؾسطیذشٛفبٖ زوطثٛوؿیالظ ٚ اؾشطوشٛ ایٙسَٚ آِىبِٛئیسٞب قس.٘عیٓ وّیسی زض آزٚ (، STR) (Strictocidine synthase) ؾیٙشبظ

آ٘عیٓ . ( ,Kutchan)ایٗ سطویجبر ٞؿشٙس سِٛیس بٖ زاضٚیی دطیٛـاظ ٌیبٞ اؾشطیىشٛؾیسیٗ ؾیٙشبظ اِٚیٗ ثبض

(Catharanthus roseus( ضائٛٚاِفب ؾطدٙشیٙب ٚ )Rauvolfia serpentina قسٜ اؾز ( خساؾبظی(Kutchan, ) .

ِىبِٛئیسی ضا ٘ساضز، آ٘بیی سِٛیس سطویجبر دیچیسٜ آضاثیسٚدؿیؽ سٛادطیٛـ STRاؾز وٝ ِٕٞٛٛغی ثبالیی ثب غٖ ٞبییأب حبٚی غٖ

آضاثیسٚدؿیؽ قجٝ زض ٞبی فٛقِٕٞٛٛي غٖ ٚ ثٙبثطایٗ زاقشٝ .( .Fabbri et al) ( ٘بٔیسٜ قس٘سSSLاؾشطوشٛؾیسیٗ ؾیٙشبظ )

غٖ زاضای زٚٔیٗ 15سبوٖٙٛ ثط اؾبؼ ُٔبِؼبر ا٘دبْ ٌطفشٝ اؾشطیىشٛؾیسیٗ ؾیٙشبظ زض آضاثیسٚدؿیؽ قٙبؾبیی قسٜ اؾز وٝ

ٞب ٚ ٘یع زض ٞب زض دبؾد ثٝ سٙف٘مف ٚ ٘ٛع فؼبِیز ثؿیبضی اظ آٖ-دطٚسئیٗ. ( .Fabbri et al)ٔطاحُ ٕ٘ٛی ٔكرم ٘كسٜ اؾز

ٚ حكطار خب٘ٛضاٖٞبی حبٚی زٔیٗ اؾشطیىشٛؾیسیٗ ؾیشبظ زض زض SSLزٔیٗ حبٚی ٞبیدطٚسئیٗ ٘یع یبفز قسٜ اؾز. ُٔبِؼٝ

ٞبی ا٘ساْزض .غٖ زض ٔغع اؾز یٗا ثبالی یبٖث ا٘ؿبٖ ٘كبٖ زٞٙسٜضظضدیٗ ثٝ ٔحى سساذُ ثب ٘ظیط یسٞبایٙسَٚ آِىبِٛئا٘ٛاع ا٘ؿب٘ی

.Fabbri et al)وٙٙس ثب زٚدبٔیٗ ػُٕ ٔی ؾیٙبدؽ ا٘شمبِی ٚاؾُٝ ؾیؿشٓ زض ٚ ثٛزٜ ِىشیٗ دصیط٘سٜ یه ٕٞٛٔیٛؾیٗ دطٚسئیٗ .( ٚ ٕٞٛٔیٛؾیٗ غٖ ؾبظی ٕٞؿب٘ٝ. زاضز ٘مف ؾطوٝ ٍٔؽ ایٕٙی

یه دطٚسئیٗ ایٗ وٝ وطز ٔكرم آٖ ِٔٛىِٛی ثطضؾی زضٖٚ وٛسبٜ ٘بحیٝ یه زاضای ٚ ثٛزٜ غكبء ثٝ ٔشهُ ٌّیىٛدطٚسئیٗ

ٔكبثٝ ٘بحیٝ یه قبُٔ وٝ اؾز ؾِّٛی ذبضج ٘بحیٝ زٚ ٚ ؾِّٛی زض ٔیٛؾیٗ ثٝ ٔكبثٝ یٝ٘بح یه ٚ ٌیبٞی SSL ٞبی یٗدطٚسئ ثب

فیّٛغ٘شیىی ضٚاثٍ ثطضؾی. ( .Fabbri et al) اؾز ا٘ؿبٖ ایٗ وٝ زاز آضاثیسٚدؿیؽ ٘كبٖ SSL غ٘ی ذب٘ٛازٜ اػًبء اظ ثطذی

ؾطوٝ ٍٔؽ ٕٞٛٔیٛؾیٗ دطٚسئیٗ ثب سىبّٔی ضاثُٝ زاضای ٞبغٖ قجٝ SSL ٞبیغٖ اظ ذبل والؼ یه ثٙبثطایٗ ثبقٙس، یٔ

- AtSSLٞبی قس٘س وٝ قبُٔ غٖ ٘بٔیسٜ( HML) ٕٞٛٔیٛؾیٗAtSSL ثبقٙس ٔی(Sohani et al. ) .

AtSSL -AtSSLٞبی ُٔبِؼبسی وٝ ثط ضٚی اِمبء ثیبٖ غٖٞبی قجٝ آضاثیسٚدؿیؽ نٛضر ٌطفز ٔكرم وطز وٝ غٖ

ٚ لبضذ CMVظذٓ، سیٕبض ثب ٚیطٚؼ ٕٞٛٔیٛؾیٗ زض اثطAlternaria brassicicola َوٙٙسٜ دیبْ ٚ ٘یع سیٕبض ثب سطویجبر فؼب

زفبػی ٘ظیط ؾبِؿیّیه اؾیس، خبؾٕٛ٘بر ٚ اسیّٗ ثٝ نٛضر ٞب زض ٘مف احشٕبِی ایٗ غٖ ثیبٍ٘طیبثس وٝ زاض افعایف ٔیٔؼٙی

، ( .Sohani et al) زفبػی اِمبئی زض ٌیبٜ اؾز ٚاوٙفٞبی قٛضی، ٘ٛض ٞب زض دبؾد ثٝ سٙفٕٞچٙیٗ ٔیعاٖ ثیبٖ ایٗ غٖ

اِمبء. اؾزٔبٚضاءثٙفف ٚ ؾبِؿیّیه اؾیس چٙس ثطاثط قطایٍ قبٞس ٞبی ظیؿشی ٚ غیط ظیؿشی، زض دبؾد ثٝ ٔحطن SSLثیبٖ غٖ

ضا اظ خّٕٝ سٙف قٛضی احشٕبَ ایفبء ٘مف ایٗ غٖ زض قطایٍ سٙف . ( .Kibble et al) زٞسافعایف ٔی

)قٛضی ذبن اظ ػٛأُ ٟٔٓ ٔحسٚز وٙٙسٜ ػّٕىطز ٌیبٞبٖ اؾز Hanin et al. ). قٛز وٝ زض ؾُح خٟب٘ی، سرٕیٗ ظزٜ ٔی

30ٞب قٛض ثٛزٜ ٚ ثیف اظ ٔیّیٖٛ ٞىشبض اظ ظٔیٗ 900حسٚز زضنس اظ ٔحهٛالر آثیبضی قسٜ سحز سأثیط ٕ٘ه ٞؿشٙس

Schroeder et al. ).) غّظز ثبالیNaCl ٔب٘غ اظ خصة آةیشٛؾَٛ ؾزض -Na+ ٚClثٝ ٚؾیّٝ ٌیبٜ قسٜ ٚ ٕٞچٙیٗ ثب سدٕغ

ٞسض ٔٙدط ثٝ ؾٕیز یٛ٘ی ٚ زض ٘شیدٝ ثبػث وبٞف ٔیعاٖ فشٛؾٙشع، قٛز ٔی (ROS)ٞبی فؼبَ اوؿیػٖ ا٘طغی ٚ سدٕغ ٌٛ٘ٝ ضفز

(Deinlein et al. ; Golldack et al. ; Julkowska and Testerink, ; Zhu, ) .

ٞبیی ای اظ سحُٕ ثٝ قٛضی زض ٘شیدٝ ػّٕىطز غٖثرف ٌؿشطزٜاؾز وٝ ؾطػز خصة ٕ٘ه اظ ذبن ٚ ا٘شمبَ آٖ ثٝ ؾطاؾط ٌیبٜ

-ٞب ٚ ا٘ساْوٙس ٚ سؼبزَ اؾٕعی ٚ یٛ٘ی ضا زض ضیكٝضا ٔحسٚز ٔی. ( ,Greenway and Munns) وٙسٔی ٞبی ٞٛایی ثطلطاض

ٞبی ُٔبِؼبر ٘كبٖ زازٜ اؾز وٝ افعایف زض ؾُح ثیبٖ ثطذی غٖزذیُ زض قٛضی ٔٙدط ثٝ ثٟجٛز ػّٕىطز ٌیبٜ زض سٙف قٛضی قسٜ

ٞبی ض ؾُح ثیبٖ غٖافعایف ز. ( .Chinnusamy et al)اؾز

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

1397بهار و تابستان / 1/ شماره مهفت/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی 23

ٞبی ٞب زض ٔؿیطٞبی ضٚ٘ٛیؿی ٚ دطٚسئیٗ ویٙبظسٙظیٕی ٔب٘ٙس فبوشٛضُٕ ٌیبٜ ضا ٘ؿجز ثٝ قٛضی افعایف زازٜ حؾِّٛی س ضؾب٘ی یبْد

-قٙبؾبیی غٖ .( .Kasuga et al. ; Teige et al)اؾز سٛا٘س ٘ٛیس ٞبی زذیُ زض ٔمبٚٔز ٌیبٞبٖ ثٝ سٙف قٛضی ٔی

ایٗ سٙف اظ ( .Kovinich et al)زٞٙسٜ سِٛیس ٌیبٞبٖ ٔمبْٚ ثٝ َطیك ا٘شمبَ غٖ ٚ ٟٔٙسؾی غ٘شیه ثبقس.

اؾشفبزٜ اظ ضٚـ وّی اظ ؾٝ ٞسف، غٖ ثطای ُٔبِؼٝ ٘مف وبضوطزیفٛضٔبسیه، غ٘شیه ضٚ ثٝ ٞبی زازٜ غ٘ٛٔی ٚ ُٔبِؼبر ثیٛا٘دبیٍبٜ

( ٚ زض ٟ٘بیز غ٘شیه ٔؼىٛؼ Forward Geneticsخّٛ )(Reverse Geneticsٞبی زازٜدبیٍبٜ. اظ َطیك قٛز( اؾشفبزٜ ٔی-

آٔیٙٛ اؾیسی یب ٘ٛوّئٛسیسیسٛاٖ سٛاِی ٔیٞبی ثیٛا٘فٛضٔبسیىی، ٚ ثط ٔمبیؿٝٞبی زازٜ ٔٛخٛز زض دبیٍبٜ ٞبیثب سٛاِیغٖ ٞسف ضا

زضذز فیّٛغ٘شیىی اضسجبٌ ضؾٓاٖ قجبٞز ثیٗ سٛاِی ٚ اؾبؼ ٔیعسٛخٝ ثٝ ػّٕىطز سٛاِی ٔٛخٛز ثب زض ٟ٘بیززٚ سٛاِی ضا ٔمبیؿٝ ٚ

زض زؾز یبفز. ٞسفزض دبیٍبٜ زازٜ ثٝ ػّٕىطز احشٕبِی سٛاِی ٞبیی ثب یبفشٝ ضٚ ثٝ خّٛ ٞسف ایدبز خٟفغ٘شیه ٞبی ضٚـ

یخ ُّٔٛة ثب فٙٛسیخ ُّٔٛة ثٛزٜ ٚ دؽ اظ ضؾیسٖ ثٝ فٙٛسٚ ٔشبثِٛیىی زض دطٚسئٛٔیٞبی غ٘ٛٔی، سطا٘ؿىطیذشٛٔی، ثطضؾیآٖ ضا ػّٕىطز سٛاٖ غٖ ٔطثٌٛ ثٝ فٙٛسیخ ٔٛضز ٘ظط ٚ ٔیٟ٘بیز

ثب فطاثیبٖ ٞبی غ٘شیه ٔؼىٛؼ ضٚـ زض .وطزسؼییٗ (Overexpression( ٖیب ؾطوٛة وطز )Knokout) ٗسِٛیس الی ٚ-

افعایف ٚ ( Loss-of-Functionٞبی خٟف یبفشٝ فبلس ػّٕىطز )ٔشٙبظط ٚ ٘مف ثٝ فٙٛسیخ( ٚ ؾذؽ Gain-of-Functionػّٕىطز )

اظ غ٘شیه ضٚ ثٝ خّٛ . ایٗ ضٚیٝ ٞسفٕٙسسطغٖ ٞسف زؾز یبفزثب غ٘شیه ٔؼىٛؼ ثطای ثٛزٜ ٚ ٘یبظی ثٝ ایدبز خٟف فطاٌیط ٘ساضز.

ٞبی غ٘ی وٝ ػّٕىطز یه غٖ ٔٙفطز ٕٔىٗ اؾز زض ثطضؾی ذب٘ٛازٜثٛز اـ ثبقس، ٔفیس ذٛاٞس اػًبی زیٍط ذب٘ٛازٜ اضسجبٌ ثب

(Østergaard and Yanofsky, ). ػّٕىطز فبلسٞبی زض ضٚـ Kuromori)قٛز ثطای ؾطوٛة غٖ ٞسف اؾشفبزٜ ٔی T-DNAاظ

et al. ) .

ُٔبِؼٝ ٘مف غٖ قجٝ اؾشطیىشٛؾیسیٗ ؾیٙشبظ ٞسف دػٚٞف حبيط -6 (SSL آضاثیسٚدؿیؽ زض دبؾد ایٗ ٌیبٜ ٘ؿجز ثٝ سٙف )

وٝ اؾز( sslآٖ ) T-DNAیبفشٝ قٛضی ثب اؾشفبزٜ اظ الیٗ خٟف

ثط ثطذی اظ ذهٛنیبر SSLَی آٖ سأثیط ؾطوٛة غٖ ؿیساؾیٖٛ دطاوثیٛقیٕیبیی ٘ظیط ٔحشٛای آ٘شٛؾیب٘یٗ ٚ دطِٚیٗ،

ٞبی ٔؿیط فٛق حؿبؼ ثٝ ٚ ٕٞچٙیٗ اٍِٛی ثیبٖ غٖب ِیذیسٞ( زض دبؾد ثٝ سٙف قٛضی Salt Overly Sensitive, SOSقٛضی )

ثطضؾی قس.

َا ريش ي مًاد

اوٛسیخ وّٕجیب آضاثیسٚدؿیؽ (WT) زض ایٗ آظٔبیف اظ ٌیبٜ ٔبزضی

(Col- ) یبفشٝ ٚ الیٗ خٟفT-DNA ٖغSSL (ssl ) ضٜ قٕب ثب ظیؿشی ٔٙبثغ ٔطوع اظ وٝ اؾشفبزٜ قس ( -SALK)زؾشطؾی

,Arabidopsis Biological Resource Center) آضاثیسٚدؿیؽABRC )ٝیبفشٝ، زض الیٗ خٟفثٛز. قسٜ سٟیT-DNA یٝزض ٘بح

.زضج قسٜ اؾز UTR ʹ دطٚٔٛسطی ٚ زض ٘عزیه

اظ ٔحیٍ ( In vitro) ای یكٝثطای وكز ٌیبٞبٖ زض قطایٍ زضٖٚ قػفٛ٘ی ثصضٞب ثب % ؾبوبضظ اؾشفبزٜ قس. يس1حبٚی MS ½ وكز

ثبض آثىكی ثب آة زٚ 3زلیمٝ ٚ 10% ثٝ ٔسر 1ٞیذٛوّطیس ؾسیٓ ضٚظ زض سبضیىی 3ثبض اؾشطیُ قسٜ نٛضر ٌطفز. ثصضٞب ثٝ ٔسر

ٞب ٌطاز لطاض ٌطفشٙس سب ٚض٘بِیعاؾیٖٛ ثصضزضخٝ ؾب٘شی 4ٚ زض زٔبی ٔحیُی ضقس ٌیبٞبٖ زض وكز زضٖٚ قیكٝ، قطایٍ ا٘دبْ قٛز.

، قسر 16/8ٌطاز ٚ زٚضٜ ضٚقٙبیی/سبضیىی زضخٝ ؾب٘شی 22زٔبی ٞبیدؽ اظ ٌصقز زٚ ٞفشٝ ٌیبٞچٝ ثٛز. mol/m sec٘ٛضی

WT ٚssl ٝحبٚی ٔحیٍ ث½ MS 100 ٚ نفط ٞبیغّظز ثب ٚ ضٚظ چٟبض اظ دؽ قس٘س، زازٜ ا٘شمبَ NaCl ٔٛالض ٔیّی 200

.Yadav et al)ثؼسی ا٘دبْ قس ُٔبِؼبری ثطای ثطزاض ٕ٘ٛ٘ٝ .)

میسان آوتًسیاویه

ا٘دبْ ( .Lange et al)ٌیطی آ٘شٛؾیب٘یٗ ثٝ ضٚـ ا٘ساظٜ 4ٌطْ ثبفز ٌیبٜ زض اظر ٔبیغ ذطز ٚ ؾذؽ 02/0ٌطفز. ٔمساض

زضنس اؾیس وّطیسضیه زض ٔشبَ٘ٛ ثٝ آٖ افعٚزٜ 1َّٛ ٔح ِیشط یّیٔؾبػز زض یرچبَ لطاض زازٜ قس. ٔحَّٛ حبنُ ثٝ 24ٚ ثٝ ٔسر

ؾب٘شطیفیٛغ قس. خصة زض زلیمٝ زٚض 13000زلیمٝ زض 10ٔسر

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

24 1397بهار و تابستان / 1ره / شماهفتم/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی

٘ٛض زض فبظ ضٚیی ثب اؾشفبزٜ اظ ضٚـ اؾذىشطٚفشٛٔشطی زض ََٛ فبزٜ اظ فطَٔٛ ٘ب٘ٛٔشط ذٛا٘سٜ قس ٚ ثب اؾش 757ٚ 530ٞبی ٔٛج

A=A – ( A ) وٝ ٔیعاٖ ٘ؿجی آ٘شٛؾیب٘یٗ سؼییٗ قسثٝ سطسیت A ٚAٔیعاٖ ٘ؿجی آ٘شٛؾیب٘یٗ ٚ Aزض آٖ

٘ب٘ٛٔشط اؾز. 657ٚ 530ٞبی خصة ٘ٛض ٕ٘ٛ٘ٝ زض ََٛ ٔٛج

اپراکسیذاسیًن لیپیذَ

-دطاوؿیساؾیٖٛ ِیذیسٞبی غكبء، غّظز ٔبِٖٛ ثطای ؾٙدف ٔمساضٌیطی ٌیطی قس. ا٘ساظٜ سئیس حبنُ اظ ایٗ ٚاوٙف ا٘ساظٜآِزی

( ,Heath and Packer)آِسئیس ثٝ ضٚـ زی غّظز ٔبِٖٛثب ٌطْ اظ ثبفز سبظٜ ثطٌی 2/0 َجك ایٗ ضٚـ ا٘دبْ ٌطفز.

ذطز قسٜ ٚ ؾذؽ زض ٞبٖٚ چیٙی اؾشفبزٜ اظ اظر ٔبیغ ذطز قسٜ % ثٝ آٖ ايبفٝ ٚ ثٝ TCA) 1/0)اؾیس سطی وّطٚاؾشیه ِیشط یّیٔ 5

% TCA 20ِیشط ٔحَّٛ ٔیّی 5/4زلیمٝ ؾب٘شطیفٛغ قس. 5ٔسر ثٝ یه (ٌطْ 100زض (TBA)ٌطْ اؾیس سیٛثبضثیشٛضیه 5زاضای )ايبفٝ قس. ٔرٌّٛ ِیشط اظ ٔحَّٛ ضٚیی حبنُ اظ ؾب٘شطیفیٛغ یّیٔ

. قسؾب٘شطیفٛغ زض زلیمٝ زٚض 4000زلیمٝ ثب 10حبنُ ثٝ ٔسر قسر خصة ایٗ ٔحَّٛ ثب اؾشفبزٜ اظ اؾذىشطٚفشٛٔشط زض ََٛ ٔٛج

٘ب٘ٛٔشط ذٛا٘سٜ قس. ٔبزٜ ٔٛضز ٘ظط ثطای خصة زض ایٗ ََٛ 532ٞبی اؾز. خصة ثمیٝ ضٍ٘یعٜ MDA-TBA ٔٛج وٕذّىؽ لطٔع

.قس٘ب٘ٛٔشط سؼییٗ ٚ اظ ایٗ ٔمساض وؿط 600 ضغیطاذشهبنی ز

محتًای پريلیه

ٞب ثطای سرٕیٗ ٔحشٛای دطِٚیٗ َجك ضٚـ ثیشؽ ٔٛضز یبٞچٌٝیٗ بثطای سٟیٝ ٔؼطف ٘ . ( .Bates et alاؾشفبزٜ لطاض ٌطفشٙس)

اؾشیه ٌالقیبَ ِیشط ٔیّی 30 ثٝیٗ ٞیسضیٗ بٌطْ 25/1٘ٞیسضیٗ، ِیشط اؾیس ٔیّی 20ٚ زض حطاضر ٔالیٓ حُ قس . ؾذؽ ايبفٝ اؾیس

ٔٛالض ثٝ آٖ ايبفٝ ٚ وبٔالً ثٝ ٞٓ ظزٜ قس. ایٗ ٔحَّٛ 6فؿفطیه ثطای .اؾز دبیساض ؾبػز 24ٌطاز ثٝ ٔسر زضخٝ ؾب٘شی 4زض زٔبی

ِیشط ٔیّی 10ٌطْ ثبفز سط ٌیبٜ زض 5/0ٔحشٛای دطِٚیٗ ؾٙدفسب وبٔالً ٍٕٞٗ قس % زض ٞبٖٚ چیٙی 3ؾِٛفٛؾبِیؿیّیه یساؾ

نبف ٚ 2. ػهبضٜ حبنُ ثب وبغص ٚاسٕٗ قٕبضٜ قٛزیىٙٛاذز 2ِیشط اظ ػهبضٜ نبف قسٜ ثب ٔیّی 2حدٓ آٖ یبززاقز قس.

اؾشیه اؾیس ٌالقیبَ ِیشط ٔیّی 2یٗ ٞیسضیٗ ٚ بِیشط ٔحَّٛ ٘ ٔیّی 100ٌطْ ) ٔرٌّٛ قسٜ ٚ ثٝ ٔسر یه ؾبػز زض حٕبْ آة

یٞب ٌطاز( لطاض ٌطفز. دؽ اظ آٖ ثب لطاض زازٖ ِِٛٝزضخٝ ؾب٘شی 4ؾذؽ ٔشٛلف قس.آظٔبیف زض حٕبْ ید ٚاوٙف ٔصوٛض

ثب٘یٝ 15-20ِیشط سِٛٛئٗ ثٝ ٔحشٛیبر ٞط ِِٛٝ ايبفٝ ٚ ثٝ ٔسر ٔیّیثٝ قسر ثٝ ٞٓ ظزٜ قس. فبظ ضٚیی وٝ قبُٔ سِٛٛئٗ ٚ دطِٚیٗ ثٛز

آٖ ثٝ ٚؾیّٝ زؾشٍبٜ اؾذىشطٚفشٛٔشط زض اظ فبظ آثی خسا ٚ خصة . زض ایٗ ؾٙدف اظ سِٛٛئٗ ثٝ قس٘ب٘ٛٔشط سؼییٗ 520ََٛ ٔٛج

غّظز دطِٚیٗ زض ٞط ٕ٘ٛ٘ٝ ثط اؾبؼ خصة ٚ ثٛزٜ ٚ ػٙٛاٖ قبٞس ٌطْ یّیثط اؾبؼ ٔ ٔؼیٗ ٔٛخٛز زض ٔٙحٙی اؾشب٘ساضز یٞب غّظز

سط ٔحبؾجٝ قس. زض ٌطْ ٚظٖ

تجسيٍ ي تحلیل آماری

ٚ زض ؾٝ ؾُح سیٕبضی بی قطح زازٜ قسٜ ثب ؾٝ سىطاضٞآظٔبیفزض لبِت َطح وبُٔ سهبزفی NaClٔٛالض ٔیّی200ٚ 100نفط ،

سدعیٝ ٚ سحّیُٚ LSDا٘دبْ ٌطفز. ٔمبیؿٝ ٔیبٍ٘یٗ ثٝ ضٚـ ا٘دبْ قس. SAS ٚExcelافعاض ٞب ٚ ضؾٓ ثب ٘طْ زازٜ

NaClدر تیمار SOSَای شنبررسی الگًی بیان

زض سیٕبض SOSٞبی ٔبضوط قٛضی ثیبٖ ٘ؿجی غٖثطای ثطضؾی زض قطایٍ زضٖٚ قیكٝ WT ٚssl غ٘ٛسیخ ٞبی زٚثصض ،قٛضیسٙف ثطای اػٕبَ سیٕبض .ٞفشٝ ضقس زازٜ قس٘س ٚ ثٝ ٔسر زٚوكز یه زضنس حبٚی MS ½ٞبی ٚاسٕٗ زض ٔحیٍ ، وبغصقٛضی

ٚ ثٝ دشطی ٔٙشمُ اقجبع قسٜ NaClٔیّی ٔٛالض 150ؾبوبضظ ٚ ثٝ ٔحیٍ سیٕبض ٞب ثب احشیبٌ اظ ٔحیٍ وكز خسا ٌٚیبٞچٝ. ٘سقس

ؾبػز ثؼس اظ 6ٚ 3ٞبی نفط،زض ظٔبٖ یثطزاض ٕ٘ٛ٘ٝ .ا٘شمبَ یبفشٙسثؼسی زض فطیعض ُٔبِؼبرثطای ا٘دبْ ٞبسیٕبض ا٘دبْ ٌطفز. ٕ٘ٛ٘ٝ

.( ,Dong and Liu) لطاض ٌطفشٙس -70

ٚ قطوز ؾیٙب وّٖٛ ا٘دبْ RNXPlus ثب ویز سبْ RNAاؾشرطاج اؾشرطاخی ثب اِىشطٚفٛضظ ٚ ٘ب٘ٛزضاح RNAویفیز ٚ وٕیز

(Thermo scientific, USA ) .خٟز حصف آِٛزٌی ثطضؾی قس DNA ،غ٘ٛٔی احشٕبِی RNA اؾشرطاج قسٜ ثبDNaseI

(Thermo scientific ؾذؽ ثطای ؾٙشع( سیٕبض ٚ cDNA شفبزٜ ثب اؾ اؾشفبزٜ ( cDNA (Thermo scientific ٚ ویز ؾٙشع Oligo dTاظ

ثب اؾشفبزٜ اظ -SOS ،SOS ، SOS ٚ Actٞبی غٖ آغبظٌط. قس٘س)خسَٚ َطاحی قس٘س (/Primer (http://primer .ut.ee افعاض ٘طْ

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

1397بهار و تابستان / 1/ شماره مهفت/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی 25

Maxima SYBRثب اؾشفبزٜ اظ ویز qRT-PCRٚاوٙف (.1Green/ROX qPCR Master Mix وز قطThermo fisher ْا٘دب

ثٝ 1)ضلیك قسٜ cDNAٔیىطِٚیشط اظ 1ٔرٌّٛ ٚاوٙف قبُٔ قس. Master Mix qPCR)، 3/0)ٔؿشطٔیىؽ 25/6 ثٝ ٕٞطاٜ( 10

ٔیىطِٚیشط آة ػبضی اظ 65/4ٔیىطِٚیشط اظ ٞط آغبظٌط اذشهبنی ٚ ٔیىطِٚیشط ثٛز. 5/12٘ٛوّئبظ ٚ حدٓ ٟ٘بیی

ٖ سىثیط ثط اؾبؼ ٔٙحٙی ٚ دؽ اظ ا٘دبْ ٚاوٙف اذشهبنی ثٛز ٞبیزازٜ ؾبظی ٘طٔبَ خٟز -Act ٖغ .قسدیه شٚة ٔكرم

٘كسٜ( اظ یٕبضقبٞس )س Ct ٔمساض ٘طٔبَ قسٜ .قس اؾشفبزٜ ٚاوٙفسفبٚر ٘ؿجی ٕ٘ٛ٘ٝ ٞسف ٕٚ٘ٛ٘ٝ ٞسف وؿط Ct ٔمساض ٘طٔبَ قسٜ Livak) ٔحبؾجٝ قس ΔΔCT 2-یٕبض ٘كسٜ ثب ٔؼبزِٝ سزض ثطاثط ٕ٘ٛ٘ٝ

and Schmittgen, ) . .Real Time PCRِیؿز آغبظٌطٞبی ٔٛضز اؾشفبزٜ زض ٚاوٙف -1جذيل

Table . List of primers used in the Real Time PCR

( زٔبی اسهبَ ) (bpلُؼٝ )ََٛ دطایٕط ثطٌكز دطایٕط ضفز قٕبضٜ زؾشطؾی غٖSOS At g ACACCACCACGTAGCTCAAG TGCCGAAAATGCTGAGTTGC 166 2/57 SOS At g ACCGTGACCTAAAGCCAGAA TGCTGAACCATCGTAACCCT 176 2/57 SOS At g AGGTGTCTTCCATCCAAGCG GCACGAAAGCCTTATCCACC 188 2/57 Act At g CTTGTTCCAGCCCTCGTTTG CGATACCTGAGAACATAGTGG 149 2/57

ي بحثوتايج

ٌیبٞبٖ ٔیعاٖ سِٛیس وٙٙسٜ ٔحسٚز ػبُٔ یٗسط ٟٔٓ قٛضی سٙف

ٞبیوبضثطز ضٚـ .( ,Amirjani) ضٚز ٔی ثكٕبض ظضاػی ثٝ ٔمبْٚ ٌیبٞبٖ ٔٙظٛض سِٛیسثٝ یٛسىِٙٛٛغیث ٚ غ٘شیه ٟٔٙسؾی

افعایف حبَ زض غصایی خٕؼیز ٘یبظ وطزٖ فطاٞٓ ثطای قٛضی ثطای ٟٔٓ ضٚیىطز یه. ثطذٛضزاض اؾز ثبالیی إٞیز اظ خٟبٖ ثٝ سحُٕ ػبُٔ ٞبیٖغ ا٘شمبَ ثٝ قٛضی ٔمبْٚ ظضاػی ٌیبٞبٖ سِٛیس

.( .Hasegawa et al) ٞؿز ٌیبٞبٖ ظضاػی ثٝ ایٗ سٙفٞبی زذیُ زض دبؾد الظٔٝ ایٗ وبض قٙبؾبیی ٚ ُٔبِؼٝ وبضوطزی غٖ

ٞبی غ٘شیه دیكطٚ ٚ ٌیبٜ ثٝ سٙف قٛضی ثب اؾشفبزٜ اظ ضٚـٔٙظٛض ثطضؾی ٘مف وبضوطزی غٖ . زض ایٗ ُٔبِؼٝ ثٝاؾزٔؼىٛؼ

SSL دبؾد آضاثیسٚدؿیؽ ثٝ سٙف قٛضی اظ الیٗ ؾطوٛة زض ایٗ غٖ اؾشفبزٜ قس. T-DNAقسٜ

یٕبضس ٔٛضز زض ٔیعاٖ آ٘شٛؾیب٘یٗ ٘شبیح سدعیٝ ٚاضیب٘ؽ، اؾبؼ ثط(. 2)خسَٚ اؾز زاضٔؼٙی زضنس 1 ؾُح زض ٔشمبثُ ٚ اثطی قٛض

زض زاضٔؼٙی اذشالف نفط ؾُح زض وٝ زاز ٘كبٖ ٔیبٍ٘یٗ ٔمبیؿٝ ٚ 100 ٞبیغّظز زض زاضز، ٚخٛز ٞبغ٘ٛسیخ ثیٗ آ٘شٛؾیب٘یٗ ٔیعاٖ ثٝ سطسیت ثٝ ssl غ٘ٛسیخ زضٔیعاٖ آ٘شٛؾیب٘یٗ ٔٛالض ٔیّی 200

ٔمساض ثٝ سطسیت ثٝ -Col غ٘ٛسیخ زض ٚ 31/0 249/0ٚ ٔمساض

ٚخٛز زاضٔؼٙی اذشالف غ٘ٛسیخ زٚ ثیٗ ٚ ثٛزٜ 241/0 17/0ٚ-زاقشٝ ٚ ثب افعایف قسر سٙف ٔیعاٖ آ٘شٛؾیب٘یٗ افعایف ٘كبٖ ٔی

.(3خسَٚ) زٞس

در یسيًلًشيکیي ف یًضیمیايیصفات ب ازبرخی ياوسيار يٍتجس-2 جذيل

در پاسخ بٍ تىص ضًری sslاليه جُص يافتٍ ي -Col تیپ يحطیTable . Analysis of variance of biochemical and physiological

traits in wild-type Col- and ssl mutant line under salt stress.

MDA Proline Anthocyanin ٝطییسغ ٔٙبثغ یآظاز زضخ ** 82/16 75/6** 004/0ns 1 خیغ٘ٛس

**87/10 97/8ns 027/0** 2 ٕبضیس ** 96/2 67/1ns 007/0** 2 ٕبضیس*خیغ٘ٛس

ذُب 12 0002/0 27/0 09/0nsزضنس 1زضنس ٚ 5زاض ٚ ٔؼٙی زاض زض ؾُح ، * ٚ ** ثٝ سطسیت غیط ٔؼٙی

ns, * and ** indicating non-significant and significant at and

levels of probability, respectively

ٔیعاٖ (،2ٚاضیب٘ؽ )خسَٚ سدعیٝ اظ حبنُ ٞبیزازٜ اؾبؼ ثط ٚ غ٘ٛسیخ ٔشمبثُ اثط ٚ سیٕبض غ٘ٛسیخ، ٔٛضز زض آِسئیسٔبِٖٛ زی

ٔیبٍ٘یٗ ٔمبیؿٝ ٞبیزازٜ اؾز. زاضٔؼٙی ؾُح یه زضنس زض سیٕبضایف قسر سٙف ٔٛخت افعایف ٔیعاٖ اٌطچٝ افع وٝ زاز ٘كبٖقٛز أب قسر افعایف زض الیٗ خٟف یبفشٝ آِسئیس ٔیزی ٔبِٖٛssl .زی ٔبِٖٛ ٔیعاٖ ٕ٘ه، فبلس ٔحیٍ زض ثٙبثطایٗوٕشط اؾز. ٚخٛز ٘ساضز زاض ٔؼٙی سفبٚر ssl الیٗ ٚ ٌیبٜ ٔبزضیزض یسآِسئ

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

26 1397بهار و تابستان / 1ره / شماهفتم/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی

طای ث ٔٛالض ٔیّی100 ؾُح آِسئیس زضٕٞچٙیٗ ٔیعاٖ ٔبِٖٛ زیCol- ٚssl زاض ثٛزٜ ٚ سفبٚر ٔؼٙی 33/2ٚ 83/4ثٝ سطسیت٘یع زض الیٗ ٔٛالض ٔیّی200زض ؾُح آِسئیس . ٔیعاٖ ٔبِٖٛ زیزاض٘س

وٕشط ثٛزٜ ٚ سفبٚر ثیٗ ایٗ الیٗ ثب ٌیبٜ ٔبزضی sslخٟف یبفشٝ (.3خسَٚ) اؾززاض ٔؼٙی

وٝ زٞسٔی ٘كبٖ ٔحشٛای دطِٚیٗ ٞبیزازٜ ٚاضیب٘ؽ سدعیٝ ٘شبیح ثٛزٜ زاضٔؼٙی زضنس اذشالف 1ٔٛضز سیٕبض قٛضی زض ؾُح زضٔحشٛای وٝ زاز ٘كبٖ ؾبزٜ اثطار ٔیبٍ٘یٗ ٔمبیؿٝ ٚ( 2خسَٚ)

سفبٚر ٚ ثٛزٜ -Col غ٘ٛسیخ اظ ثیكشط ssl غ٘ٛسیخ زض دطِٚیٗ-ٔؼٙی اذشالف قٛضی سٙف ٔرشّف ؾُٛح ثیٗ زض. اؾز زاضٔؼٙی زاضز. ٚخٛز نفط ؾُح ثب ٔٛالضٔیّی 200 ٚ 100 ؾُٛح ثیٗ زاضی

دطِٚیٗ قسٜ ٔیعاٖ افعایف ثبػث سٙف قسر افعایف زض ٚالغ، (.4خسَٚ) اؾز

یطغٚ ذٙثی وٛچه، یٞب ِٔٛىَٛ اؾٕعی ٞبیوٙٙسٜ ٔحبفظز سبثیطار ٔرطة ثطاثط زض ضا غكبء ٞبی یٗدطٚسئ وٝ ٞؿشٙس یؾٕ

یساضدب آٚض یبٖظی ٞب ٔحَّٛ ؾبیط ٚ ثبال غّظز زض ٕ٘ه ٔحَّٛ ٔحَّٛ حٕبیز یٗسط ٟٔٓ ٌیبٞبٖ . زض( ,Munns)وٙٙس یٔ

ٞؿشٙس ٞب آَٚ دّی دطِٚیٗ ثشبئیٗ، ٌّیؿیٗ ؾبظٌبض اؾٕعی وٙٙسٜ(Rontein et al. ) .ٞبیوٙٙسٜ حٕبیز ؾُح ٔؼَٕٛ ثٝ َٛض

. ( .Bohnert et al)ثبالؾز اؾٕعیسٙف قطایٍ زض اؾٕعی آثی وٓ ثٝ افعایف ٔمبٚٔز ثب ٔؿشمیٓ ٚ ٔثجز ضاثُٝ دطِٚیٗ سدٕغ

Saneoka)زاضز ٌیبٜ قسٜ زض ایدبز قٛضی ٚ آثی وٓ یٞب سٙف زضet al. ) .اؾٕٛسیىْٛ یه ٔب٘ٙس زض ؾیشٛدالؾٓ دطِٚیٗ سدٕغ

یٛ٘ی سؼبزَ وٝ ٔحیُی زض ٞبؾبذشٕبٖ ٔبوطِٚٔٛىَٛ حفبظز زض افعایف دطِٚیٗ. ( ,Nayyar)وٙس یٔ ػُٕ اؾزثٟٓ ذٛضزٜ آٖ

. قٛز یٔ یبٞبٖزض ٌ غكبء ذؿبضر وبٞف ٚ سٛضْ حفظ ثٝ ٔٙدط قٛضی ٚ آثی وٓ سٙف ثٝ اؾٕعی، ؾبظٌبضی سٙظیٓ ثب سطسیت ثسیٗ

دطِٚیٗ ٕٞچٙیٗ . ( ,Pandey and Agarwal)یبثس یٔ افعایفٞب ضا حفٍ وطزٜ ٚ ٘یع ثؼٙٛاٖ ثؼٙٛاٖ یه چبدطٖٚ ؾبذشبض دطٚسیئٗ

(. ( .Liu et alٞب ُٔطح اؾزROSیه خٕغ آٚضی وٙٙسٜ یح ثٝ زؾز آٔسٜ ٔیعاٖ دطِٚیٗ زض قطایٍ سٙف زض ٘شبَجك

زض ٔمبٚٔز ثیكشط ثٙبثطایٗزاضی زاقشٝ ٚ افعایف ٔؼٙی sslغ٘ٛسیخ سٛا٘س ٘مف ٟٕٔی زاقشٝ ثبقس. ٙف قٛضی ٔیایٗ الیٗ ٘ؿجز ثٝ س

MDAٔمبیؿٝ ٔیبٍ٘یٗ اثطار ٔشمبثُ سٙف قٛضی ثط ضٚی ٔحشٛای -3جذيل ssl الیٗ خٟف یبفشٝ ٚ -Col سیخ ٚحكی ٚ آ٘شٛؾیب٘یٗ زض

Table . Mean comparison of interaction effect of salt stress in

MDA and anthocyanin content in wild-type Col- and ssl

mutant line

MDA

(nmol/g.FW) Anthocyanin

(μmol/g.FW) ؾُٛح قٛضی غ٘ٛسیخ e466/1 16/0c Col-

نفطde860/1 11/0d ssl

b 83/4 17/0c Col- 100 ٔیّی-

cd 33/2 24/0b ssl ٔٛالضa 70/5 24/0b Col- 200 ٔیّی-

c 73/2 31/0a ssl ٔٛالض-ٔؼٙی اذشالف LSD آظٖٔٛ اؾبؼ ثط ؾشٖٛ، ٞط زض ٔكشطن حطف زاضای ٞبییٗٔیبٍ٘

٘ساض٘س. زاضیMeans with similar letters in each column are not significantly

different using LSD test.

ٔمبیؿٝ ٔیبٍ٘یٗ اثطار انّی سٙف قٛضی ثط ضٚی ٔحشٛای دطِٚیٗ -4 جذيل ssl ٗ خٟف یبفشٝالی ٚ -Col زض سیخ ٚحكی

Table . Mean comparison of simple effect of salt stress in

proline content in wild-type Col- and ssl mutant line

ٔٙبثغ سغییط ؾُٛح (µmol/gFW) دطِٚیٗ b2660/2 Col- غ٘ٛسیخ a4910/3 ssl b4689/1 نفط

ٔٛالضٔیّی a507/3 100 سیٕبض قٛضیa660/3 200 ٔٛالضٔیّی

اذشالف LSD آظٖٔٛ اؾبؼ ثط ؾشٖٛ، ٞط زض ٔكشطن حطف زاضای ٞبیٔیبٍ٘یٗ ٘ساض٘س. زاضیٔؼٙی

Means with similar letters in each column are not significantly different using LSD test.

ٔیعاٖ نسٔبر ثطضؾی ثطای ٔؼطف یه ػٙٛاٖ آِسئیس ثٝٔبِٖٛ زی

.Jaleel et al)ٌیطز ٔی لطاض اؾشفبزٜ ٔٛضز سٙف قطایٍ زض غكبء ; Katsuhara et al. ) .ٔؼطو زض ٌیبٞبٖ وٝ ٍٞٙبٔی

ٌیط٘س، سِٛیس سطویجبر اوؿیػٖ فؼبَ ٔٛخت ٔی لطاض قٛضی سٙفٞب اظ َطیك سِٛیس آٖغكب ٚ آؾیت زیسٌی یذیسٞبیِ ؾبذشبض سغییط

. ( .Mittler et al)قٛز ضازیىبَ ؾٛدطاوؿیس ٔی سٙف قٛضی سٛؾٍ ِیذیسی غكبٞبی زض قسٜ اِمبء دطاوؿیساؾیٖٛ

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

1397بهار و تابستان / 1/ شماره مهفت/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی 27

آِسئیس زی ٔبِٖٛ ٚ ؾُح ثٛزٜ ؾِّٛی ؾُح زض تآؾی زٞٙسٜ ٘كبٖ آؾیت اظ قبذم یه ثٝ ػٙٛاٖ فطآیٙس ایٗ َی زض قسٜ سِٛیس

زض .( .Fadzilla et al) قسٜ اؾز٘ظط ٌطفشٝ اوؿیساسیٛ زضزض ٌیبٜ آِسئیس زی ٔمساض ٔبِٖٛ زض زاضی یٔؼٙ سفبٚر آظٔبیف ایٗ

زض MDAیبفشٝ ٔكبٞسٜ قس. ٔیعاٖ افعایف ٔبزضی ٚ الیٗ خٟفٞبی آٖ ٌیبٜ ٔبزضی ثیكشط اؾز وٝ ٘كبٖ زٞٙسٜ آؾیت ثیكشط ؾَّٛ

. اؾززض ٔمبیؿٝ ثب الیٗ خٟف یبفشٝ زض دبؾد ثٝ سٙف قٛضی

ٞبی غیط ظیؿشی ٘ظیط ذكىی، ٙفٞب زض دبؾد ثٝ سآ٘شٛؾیب٘یٗقٛضی، ؾطٔب ٚ قسر ٘ٛض ثبال زض ٌیبٞبٖ سدٕغ یبفشٝ ٚ

ٞبی دیبْ ضؾبٖ، حفبظز زض ثطاثط وبضوطزٞبی ٔشفبٚسی ٘ظیط ِٔٛىَٛ ثط ػٟسٜ زاض٘س ROSقسر ٘ٛض ثبال ٚ خٕغ آٚضی وٙٙسٜ

(Kovinich et al. .) سدٕغ آ٘شٛؾیب٘یٗ زض َی سٙف قٛضیٞبٖ ٘ظیط ٌٛخٝ فطٍ٘ی، شضر، ٘یكىط ٚ زض ثؿیبضی اظ ٌیب

آضاثیسٚدؿیؽ ٌعاضـ قسٜ اؾز. زض سٕبٔی ایٗ ُٔبِؼبر ٔكرم قسٜ اؾز وٝ سدٕغ آ٘شٛؾیب٘یٗ ثب ٔیعاٖ سحُٕ ٌیبٜ ػّیٝ سٙف

. زض ُٔبِؼٝ حبيط ( .Lotkowska et al)ضاثُٝ ٔؿشمیٓ زاضززاض آ٘شٛؾیب٘یٗ زض الیٗ ٔٛخت سدٕغ ٔؼٙی SSLؾطوٛة غٖ

-ثٝ ٘ظط ٔی ثٙبثطایٗبفشٝ ٘ؿجز ثٝ ٌیبٜ ٔبزضی قسٜ اؾز. خٟف یضؾس ثیٗ ایٗ غٖ ٚ ٔؿیط ثیٛؾٙشع آ٘شٛؾیب٘یٗ یه ضاثُٝ ٔٙفی

ٞبی ٟٔٓ دطِٚیٗ ٚخٛز زاقشٝ ثبقس. ثبیس سٛخٝ وطز اظ خّٕٝ ٘مفٕٞچٙیٗ ثٛزٜ ٚٞب زض قطایٍ سٙف ROSٚ آ٘شٛؾیب٘یٗ خٕغ آٚضی

ٞب ROSؼبِیز ثؼٙٛاٖ یه قبذم زض افعایف ف MDAٔیعاٖ SSLضؾس ؾطوٛة غٖ ثٝ ٘ظط ٔی ثٙبثطایٗقٛز. زض٘ظط ٌطفشٝ ٔی

سٛا٘س اظ َطیك وبٞف سِٛیس یب اِمبء ٔؿیطٞبی خٕغ آٚضی ٔیROS.ٞب ٔٛخت افعایف ٔمبٚٔز ٌیبٜ ثٝ سٙف قٛضی قٛز

Col- ٚssl، ٔیعاٖ حؿبؾیز SOSٞبی ثب ثطضؾی ثیبٖ غٖ SOS ، 3 غٖ طفز. ثیبٖ٘ؿجز ثٝ قٛضی ٔٛضز اضظیبثی لطاض ٌ

ٌیبٜ ثطای ٚ ssl 92/5یبفشٝ زض خٟف قٛضی سیٕبض اظ دؽ ؾبػزثیبٖ ایٗ غٖ قٛضی سیٕبض اظ دؽ ؾبػز 6. ثبقسٔی 59/2 ٔبزضی

ٚ یبفشٝ خٟف زض افعایف ایٗ. اؾز یبفشٝ افعایف غ٘ٛسیخ زٚ ٞط زض. ظٔبٖ نفط اؾز ثطاثط99/2ٚ 78/7 سطسیت ثٝ ٔبزضی ٌیبٜ

زض الیٗ SOSقٛز قسر اِمبء غٖ ٝ ٔكبٞسٜ ٔیو ٌٛ٘ٝ ٕٞبٖیبفشٝ ثیكشط ثٛزٜ، أب زض ٌیبٜ ٔبزضی غٖ ٔصوٛض اثشسا اِمبء خٟف

ثیبٖ غٖ ثٙبثطایٗزاضی ٘ساقشٝ اؾز. ؾذؽ افعایف ٔؼٙی ٚقسٜ SOS 3یبفشٝ ٘ؿجز ثٝ ٌیبٜ ٔبزضی زض ٞط زٚ ظٔبٖ زض الیٗ خٟف

ثطاثط ثیكشط اؾز 60/2ٚ 28/2ؾبػز دؽ اظ سیٕبض ثٝ سطسیت 6ٚ (.1)قىُ

قٛضی ثب اؾشفبزٜ اظ سٙف ثٝ دبؾد زض SOS غٖ ٘ؿجی ثیبٖ اٍِٛی -1 ضکل

qRT-PCR. RNA ٝای ٞبی زٚ ٞفشٝسبْ اظ ٌیبٞچCol- ٚssl سیٕبض قسٜ ثب -Actؾبػز اؾشرطاج قس. اظ غٖ 6ٚ 3ثٝ ٔسر نفط، NaClٔیّی ٔٛالض 150

ثؼٙٛاٖ وٙشطَ اؾشفبزٜ قس.Figure . The expression level of SOS gene in response to salt

stress was analysed by qRT-PCR. Total RNA was isolated from

tow week old Col , and ssl seedlings treated with mM NaCl

for h, h, and h. In all experiments, the expression of the

constitutive Act- gene was used as the control.

زض افعایف ایٗ قٛضی سیٕبض اظ دؽ ؾبػز ، SOS غٖ ثیبٖ ثٛزٜ ثطاثط 58/10ٚ 6/7 سطسیت ثٝ ٔبزضی ٌیبٜ ٚ یبفشٝ خٟف الیٗ

ٚ 08/7 یبفشٝ خٟف الیٗ ثطای قٛضی سیٕبض اظ دؽ ؾبػز 6 ٚ(. ثیبٖ ایٗ غٖ اٌطچٝ 2)قىُ اؾزثطاثط 60/3 ٔبزضی ٌیبٜ ثطای

زض الیٗ خٟف یبفشٝ ٚ ٌیبٜ افعایكی ٞؿز ثب ایٗ حبَ، اٍِٛی آٖ ؾبػز دؽ اظ سیٕبض زض ٞط زٚ 3ٔبزضی ٔشفبٚر اؾز. زض ظٔبٖ

ٌیبٜ ٔبزضی ٚ الیٗ خٟف یبفشٝ ثیبٖ اِمبء قسٜ اؾز. أب زض الیٗ زاضی ؾبػز دؽ اظ سیٕبض وبٞف غیط ٔؼٙی 6خٟف یبفشٝ ٚ

قٛز. زض ٌیبٜ ٔبزضی ایٗ اٍِٛ ٔشفبٚر ثٛزٜ ٚ زض ظٔبٖ ٔكبٞسٜ ٔی ثطاثط ؾطوٛة قسٜ اؾز. 3دؽ اظ سیٕبض ٘عزیه ثٝ ؾبػز 6

زض الیٗ SOS غٖ اِمب قسر قٛزٔی ٔكبٞسٜ وٌٝٛ٘ٝ ٕٞبٖخٟف یبفشٝ ثیكشط ثٛزٜ، أب زضٌیبٜ ٔبزضی غٖ ٔصوٛض اثشسا اِمب قسٜ

زض الیٗ خٟف SOSزٞس. ثیبٖ غٖ ٚ ؾذؽ وبٞف ٘كبٖ ٔی اظ دؽ ػزؾب 6ٚ 3یبفشٝ ٘ؿجز ثٝ ٌیبٜ ٔبزضی زض ٞط زٚ ظٔبٖ

(. 3ثطاثط ثیكشط اؾز )قىُ 33/5ٚ 4/1 ثٝ سطسیت سیٕبض قٛضی

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

28 1397بهار و تابستان / 1/ شماره مهفت/ دوره منی زیستیو ایژنتيک مهندسی

میلی 151تیمار ضذٌ با sslي -Colای َای دي َفتٍتام از گیاَچٍ qRT-PCR. RNAضًری با استفادٌ از تىص بٍ پاسخ در SOS شن وسبی بیان الگًی -2ضکل بعىًان کىترل استفادٌ ضذ. -Actذ. از شن ساعت استخراج ض 6ي 3بٍ مذت صفر، NaClمًالر

Figure . The expression level of SOS gene in response to salt stress was analysed by qRT-PCR. Total RNA was isolated from tow week

old Col , and ssl seedlings treated with mM NaCl for h, h, and h. In all experiments, the expression of the Act- gene was used as

the control.

0

2

4

6

8

10

12

0h 3h 6h

شن ی

وسبان

ن بمیسا

SO

S

(Fo

ld)

زمان ومًوٍ برداری

col

ssl6

ٔیّی ٔٛالض 150سیٕبض قسٜ ثب Col- ٚsslای ٞبی زٚ ٞفشٝسبْ اظ ٌیبٞچٝ qRT-PCR. RNAقٛضی ثب اؾشفبزٜ اظ سٙف ثٝ دبؾد زض SOS غٖ ٘ؿجی ثیبٖ اٍِٛی -3 ضکلNaCl ،ؾبػز اؾشرطاج قس. اظ غٖ 6ٚ 3ثٝ ٔسر نفطAct- .ثؼٙٛاٖ وٙشطَ اؾشفبزٜ قس

Figure . The expression level of SOS gene in response to salt stress was analysed by qRT-PCR. Total RNA was isolated from tow week

old Col , and ssl seedlings treated with mM NaCl for h, h, and h. In all experiments, the expression of the Act- gene was used as

the control.

ٞبی ٌیبٞی حفبظز قسٜ زض ثؿیبضی اظ ٌٛ٘ٝ SOSی ٔؿیط ٞب غٖ ; .Martínez-Atienza et al. ; Olias et al)ثبقٙس یٔ

Tang et al. ; Wu et al. ; Xu et al. ) ٖفطاثیب ٚٞب ٔٛخت افعایف سحُٕ ثٝ ٞب زض آضاثیسٚدؿیؽ ٚ ؾبیط ٌٛ٘ٝآٖ

; .Shi et al. ; Yang et al)سٙف قٛضی قسٜ اؾز Zhang and Blumwald, )SOS mRNA . قطایٍ ضقس زض

قٛزَجیؼی ٘بدبیساض اؾز، أب سٛؾٍ ٕ٘ه ٚ وٓ آثی سثجیز ٔی(Chung et al. ; Shi et al. ) سثجیز .SOS mRNA

زٞس، وٝ یه یٔضخ SOSٞب ثب ROSٕٞچٙیٗ سٛؾٍ ٔیب٘ىٙف ; .Chung et al) خع زض اؾشطؼ اوؿیساسیٛ ؾیٍٙبِیًٙ اؾز

Katiyar-Agarwal et al. ) . ٖفطاثیبٖ غSOS سحُٕ ثٝ سٙفٚ سٛسٖٛ ( .Shi et al)ٞبی آضاثیسٚدؿیؽ قٛضی زض سطاضیرشٝ(Yue et al. ) ٞبی آضاثیسٚدؿیؽ اؾز. ٌیبٞچٝ زازٜ افعایف

ٞبی وٙشطَ ضقس ظٚزضؼ ٌیبٞچٝ ٚ سطاضیرشٝ زض ٔمبیؿٝ ثب ٌیبٞچٝ. زض ( .Shi et al)ا٘س قشٝافعایف ضقس ضیكٝ سحز سٙف ضا زا

ظ٘ی ٘ؿت ثٝ زض سؿز خٛا٘ٝ SOSٞبی فطاثیبٖ سٛسٖٛ، سطاضیرشٝ

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

1397بهار و تابستان / 1/ شماره مهفت/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی 29

ٞبی وٙشطَ افعایف خٛا٘ٝ ظ٘ی ٕٚٞچٙیٗ افعایف زض ٔیعاٖ ٌیبٞچٝ، ٘ؿجز ٞبی سطاضیرشٝ ٘ؿجز ثٝ وٙشطَ زاقشٙسوّطٚفیُ زض ٌیبٞچٝ

ؾسیٓ ثٝ دشبؾیٓ ٘یع زض ٌیبٞچٝ ٞبی فطاثیبٖ ثیكشط اظ وٙشطَ ثٛز (Yue et al. ).

SOS ٕٔىٗ اؾز زض ٔؿیطROS قطوز وٙس(Verslues et al. ا٘دبْ PtSOS TD ای وٝ زض ٌیبٜ نٙٛثط ثط غٖ. زض ُٔبِؼٝ(

ٔیعاٖ وّطٚفیُ زض ٌیبٞبٖ فطاثیبٖ ٘ؿت ثٝ H Oقس، زض حًٛض ٘یع زض ٕ٘ٛ٘ٝ MDAیعاٖ زاضی زاقشٝ اؾز. ٔٚحكی وبٞف ٔؼٙی

ٚحكی افعایف زاقشٝ اؾز وٝ ٘كبٖ زٞٙسٜ سبثیط ٔثجز فطاثیبٖ غٖ SOS ثط ٔمبٚٔز نٙٛثط زض ٔمبثُ سٙف قٛضی اؾز (Yang et

al. ).

ٞبیٞبی ٔبضوط قٛضی زض غ٘ٛسیخٚ غٖ SOS ٚSOSٞبی غٖatmyb ko ٚatmyb eko .افعایف ثیبٖ زاقشٝ اؾز

AtMyb یه غٖ اذشهبنی زض قطایٍ سٙف قٛضی اؾز.دؽ اظزٚ غ٘ٛسیخ ٔٛسب٘ز فٛق زض ٔمبیؿٝ ثٝ NaClقف ؾبػز سیٕبض

زاقشٙس SOS ٚSOSٞبی ٌیبٜ ٔبزضی افعایف ؾُح ثیبٖ زض غٖ Kim et) اؾززض سٙف قٛضی AtMyb غٖٚ ثیبٍ٘ط ٘مف ٔٙفی

al. ).

وٝ ٘مف سٙظیٓ ٕٞٛؾشبظی یٛ٘ی ضا ثط ػٟسٜ SOSٔؿیط ؾیٍٙبِیًٙ یه آ٘شی SOSزاضز، سٛخٝ ظیبزی ضٚ ثٝ ذٛز خّت وطزٜ اؾز.

غكبیی اؾز وٝ ؾسیٓ ضا ثٝ ذبضج اظ ضیكٝ خطیبٖ Na/Hدٛضسط ,Munns)وٙس ٞبی ؾسیٓ ضا زض ظایّٓ ٞسایز ٔیزٞس ٚ یٖٛٔی

; Olias et al. ; Shi et al. ; Zhu, ). ٗزٚٔیاؾز ٚ ؾٛٔیٗ SOSدطٚسئیٗ خع ؾطیٗ/سطئٛ٘یٗ دطٚسئیٗ ویٙبظ

ثٝ ٚؾیّٝ SOS. ٔؿیط اؾز SOSدطٚسئیٗ اسهبَ زٞٙسٜ وّؿیٓ SOS قٛز ٚ وٕذّىؽ زضن ٔیSOS -SOS وٝ ثب فؼبِیزقٛز. فؼبَ قسٖ فؿفٛضیّیٝ ٚ فؼبَ ٔی SOSضسطی سطا٘ؿذٛ

ٞبی زضٌیط ٕٞچٙیٗ ثبػث اِمبء ؾبیط غٖ SOS -SOSوٕذّىؽ mRNAٚ سثجیز ؾُح ؾِّٛی SOSؾبظی ضٚ٘ٛیؿی ٚ فؼبَSOS قٛز ٔی(Ji et al. ; Zhu, ) ٖثیب .SOS ، SOS

ٚSOS زض غ٘ٛسیخssl ثیكشط اظ Col- ٚ سٛاٖ ٔی ثٙبثطایٗثٛزٌفز ٘مف ٔثجشی زض ٔمبٚٔز الیٗ خٟف یبفشٝ ثٝ سٙف قٛضی ایفب

SSLوٙٙس. ٕٞبٍ٘ٛ٘ٝ وٝ ٔكبٞسٜ قس ؾطوٛة غٖ ٔیٚ ٕٞچٙیٗ SOSٞبی فعایف ثیبٖ غٖآضاثیسٚدؿیؽ ٔٛخت ا

افعایف ٔحشٛای دطِٚیٗ ٚ آ٘شٛؾیب٘یٗ ٚ وبٞف دطاوؿیساؾیٖٛ سٛاٖ ٌفز غٖ ٔی ثٙبثطایِٗیذیسٞب زض الیٗ خٟف یبفشٝ قسٜ اؾز.

SSL ٘مف وٙشطِی ٔٙفی زض دبؾد آضاثیسٚدؿیؽ ثٝ سٙف قٛضی زاضز.

وتیجٍ گیری وُايی

دبؾد ثٝ سٙف قٛضی زض SSLزض ایٗ ُٔبِؼٝ ٘مف احشٕبِی غٖ ٌیطی یبفشٝ آٖ ثطضؾی قس. ا٘ساظٜ ثب اؾشفبزٜ اظ الیٗ خٟف

آ٘شٛؾیب٘یٗ ، ٔبِٖٛ زی آِسئیس ٚ دطِٚیٗ زض قطایٍ سٙف، ثیبٍ٘ط یبفشٝ ٘ؿجز ثٝ ٌیبٜ ٔبزضی ثٛز. زض ٚالغ ٚاوٙف ثٟشط خٟف

ثٛیػٜٞبی زفبػی ٌیبٜ ؾطوٛة ایٗ غٖ ثب فؼبَ وطزٖ ثرفٞب دبؾد ثٟشطی ROSغ آٚضی وٙٙسٜ ٞب ٚ سطویجبر خٕؾیؿشٓ

، SOSٞبی ٘ؿجز ثٝ سٙف قٛضی زاقشٝ اؾز. ٔیعاٖ ثیبٖ غٖSOS ٚSOS زض غ٘ٛسیخ خٟف یبفشٝ ثیكشط اظ ٌیبٜ ٔبزضیایٗ ؾٝ غٖ ٘مف ٟٕٔی زض دبؾد ٌیبٜ ثٝ سٙف قٛضی .ٞؿشٙس

ٞب ٔٛخت افعایف ٔمبٚٔز ٌیبٜ خٟف زاقشٝ ٚ افعایف ثیبٖ آٖ دػٚٞفقسٜ اؾز. ثب ٘شبیح حبنُ اظ ایٗ یبفشٝ زض سٙف قٛضی

آضاثیسٚدؿیؽ زض دبؾد SSLسٛاٖ ایٍٙٛ٘ٝ اؾشٙجبٌ وطز وٝ غٖ ٔیضؾس ایٗ ٌیبٜ ٘ؿجز ثٝ سٙف قٛضی ، سأثیط ٔٙفی زاضز. ثٝ ٘ظط ٔی

زض ثبالزؾز ٔؿیط دبؾد ثٝ سٙف قٛضی ٚ زض ضلبثز SSLوٝ غٖ بیی ٚ ثب آٖ ثبقس وٝ ؾطوٛة آٖ ٔٛخت ثٟجٛز دبؾد ثیٛقیٕی

ِٔٛىِٛی ٌیبٜ خٟف یبفشٝ زض دبؾد ثٝ سٙف قٛضی قسٜ اؾز. ٚ ثطضؾی ؾبیط SSLثطای زضن وبُٔ ٘مف ایٗ غٖ، فطاثیبٖ غٖ یبفشٝ غٖ ٞبی خٟفٔؿیطٞبی دبؾد ثٝ سٙف قٛضی زض الیٗ

SSL ٖٛٔ٘ظیط سأثیط ایٗ غٖ ثط ضٚی فؼبِیز ٞٛض ،ABA ٚ .سٛا٘س ٔفیس ثبقساوؿیسا٘شی ٔیؾیؿشٓ آ٘شی

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

33 1397بهار و تابستان / 1/ شماره مهفت/ دوره منی زیستیو ایژنتيک مهندسی

Amirjani M R. . Effect of salinity stress on growth,

sugar content, pigments and enzyme activity of rice.

International Journal of Botany : - .

Bates L, Waldren R, Teare I. . Rapid determination

of free proline for water-stress studies. Plant and soil

, - .

Bohnert HJ, Nelson DE, Jensen RG. . Adaptations

to environmental stresses. The plant cell : .

Chinnusamy V, Zhu J, Zhu JK. . Salt stress

signaling and mechanisms of plant salt tolerance. In:

Setlow JK (Ed.) Genetic engineering Principles and

Methods, Springer, Boston, - .

Chung JS, Zhu JK, Bressan, RA, Hasegawa PM, Shi H.

. Reactive oxygen species mediate Na+‐induced SOS mRNA stability in Arabidopsis. The Plant

Journal : - .

Deinlein U, Stephan AB, Horie T, Luo W, Xu G,

Schroeder JI. . Plant salt-tolerance mechanisms.

Trends in plant science : - .

Dong CJ, Liu JY. . The Arabidopsis EAR-motif-

containing protein RAP . functions as an active

transcriptional repressor to keep stress responses under

tight control. BMC plant biology : .

Fabbri M, Delp G, Schmidt O, Theopold U. . Animal and plant members of a gene family with

similarity to alkaloid-synthesizing enzymes.

Biochemical and biophysical research

communications : - .

Fadzilla NAM, Finch RP, Burdon RH. . Salinity,

oxidative stress and antioxidant responses in shoot

cultures of rice. Journal of Experimental Botany :

- .

Golldack D, Li C, Mohan H, Probst N. . Tolerance

to drought and salt stress in plants: unraveling the

signaling networks. Frontiers in Plant Science .

Greenway H, Munns R. . Mechanisms of salt

tolerance in nonhalophytes. Annual review of plant

physiology : - .

Hanin M, Ebel C, Ngom M, Laplaze L, Masmoudi K.

. New insights on plant salt tolerance mechanisms

and their potential use for breeding. Frontiers in plant

science .

Hasegawa PM, Bressan RA, Zhu JK, Bohnert HJ.

. Plant cellular and molecular responses to high

salinity. Annual review of plant biology : - .

Heath RL, Packer L. . Photoperoxidation in isolated

chloroplasts: I. Kinetics and stoichiometry of fatty

acid peroxidation. Archives of biochemistry and

biophysics : - .

Jaleel CA, GopiR, Sankar B, Manivannan P,

Kishorekumar A, Sridharan R, Panneerselvam R.

. Studies on germination, seedling vigour, lipid

peroxidation and proline metabolism in Catharanthus

roseus seedlings under salt stress. South African

Journal of Botany : - .

Ji H, Pardo JM, Batelli G, Van Oosten MJ, Bressan

RA, Li X. . The Salt Overly Sensitive (SOS

pathway: established and emerging roles. Molecular

plant : - .

Julkowska, M. M., and Testerink, C. . Tuning plant

signaling and growth to survive salt. Trends in Plant

Science : - .

Kasuga M, Liu Q, Miura S, Yamaguchi-Shinozaki K,

Shinozaki K. . Improving plant drought, salt, and

freezing tolerance by gene transfer of a single stress-

inducible transcription factor. Nature biotechnology

: - .

Katiyar-Agarwal S, Zhu J, Kim K, Agarwal M, Fu X,

Huang A, Zhu JK. . The plasma membrane

Na+/H+ antiporter SOS interacts with RCD and

functions in oxidative stress tolerance in Arabidopsis.

Proceedings of the National Academy of Sciences

: - .

Katsuhara M, Otsuka T, Ezaki B. . Salt stress-

induced lipid peroxidation is reduced by glutathione

S-transferase, but this reduction of lipid peroxides is

not enough for a recovery of root growth in

Arabidopsis. Plant Science : - .

Kibble NA, Sohani MM, ShirleyN, Byrt C, Roessner U,

Bacic A, Schmidt O, Schultz CJ. . Phylogenetic

analysis and functional characterisation of

strictosidine synthase-like genes in Arabidopsis

thaliana. Functional Plant Biology : - .

Kim JH, Nguyen NH, Jeong CY, Nguyen NT, Hong

SW, Lee H. . Loss of the R R MYB, AtMyb ,

causes hyper-induction of the SOS and SOS genes

in response to high salinity in Arabidopsis. Journal of

plant physiology : - . Kovinich N, Kayanja G, Chanoca A, Otegui MS,

Grotewold E. . Abiotic stresses induce different

localizations of anthocyanins in Arabidopsis. Plant

signaling & behavior : e . Kuromori T, Takahashi S, Kondou Y, Shinozaki K,

Matsui M. . Phenome analysis in plant species

using loss-of-function and gain-of-function mutants.

Plant and cell physiology : - .

Kutchan T. . The cDNA Clone for Strictosidine

Synthase from Rauwolfia serpentina: Nucleotide

Sequence Determination and Expression in

Escherichia coli. Planta Medica : - .

منابع

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

1397بهار و تابستان / 1/ شماره مهفت/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی 31

Lange H, Shropshire W, Mohr H. . An analysis of

phytochrome-mediated anthocyanin synthesis. Plant

Physiology , - .

Livak, K. J., and Schmittgen, T. D. . Analysis of

relative gene expression data using real-time

quantitative PCR and the − ΔΔCT

method. methods :

- . Liu R, Liu Y, Ye N, Zhu G, Chen M, Jia L, Xia Y, Shi

L, Jia W, Zhang J. . AtDsPTP acts as a

negative regulator in osmotic stress signalling during

Arabidopsis seed germination and seedling

establishment. Journal of experimental botany :

- .

Lotkowska ME, Tohge T, Fernie AR, Xue GP,

Balazadeh S, Mueller-Roeber B. . The

Arabidopsis transcription factor MYB promotes

anthocyanin formation during salinity and under high

light stress. Plant physiology, : - .

Martínez-Atienza J, Jiang X, Garciadeblas B, Mendoza

I, Zhu JK, Pardo JM, Quintero F J. .

Conservation of the salt overly sensitive pathway in

rice. Plant physiology : - .

Mittler R. . Oxidative stress, antioxidants and stress

tolerance. Trends in plant science : - . Mittler R, Vanderauwera S, Gollery M, Van

Breusegem F. . Reactive oxygen gene network

of plants. Trends in plant science : - .

Munns R. . Comparative physiology of salt and

water stress. Plant, cell & environment : - .

Munns R. . Genes and salt tolerance: bringing them

together. New phytologist : - .

Nayyar H. . Accumulation of osmolytes and osmotic

adjustment in water-stressed wheat (Triticum

aestivum) and maize (Zea mays) as affected by

calcium and its antagonists. Environmental and

experimental botany : - .

Olias R, Eljakaoui Z, Li J, DE MORALES PA,

MARÍN‐MANZANO MC, Pardo JM, Belver A. . The plasma membrane Na

+/H

+ antiporter SOS

is essential for salt tolerance in tomato and affects the

partitioning of Na+ between plant organs. Plant, Cell

& Environment : - .

Østergaard L, Yanofsky MF. . Establishing gene

function by mutagenesis in Arabidopsis thaliana. The

Plant Journal : - .

Pandey R, Agarwal R. . Water stress-induced

changes in proline contents and nitrate reductase

activity in rice under light and dark conditions.

Physiology and Molecular Biology of Plants : - .

Rontein D, Basset G, Hanson AD. . Metabolic

engineering of osmoprotectant accumulation in plants.

Metabolic engineering : - .

Saneoka H, Moghaieb RE, Premachandra GS, Fujita

K. . Nitrogen nutrition and water stress effects on

cell membrane stability and leaf water relations in

Agrostis palustris Huds. Environmental and

Experimental Botany : - .

Schroeder JI, Delhaize E, Frommer WB, Guerinot ML,

Harrison MJ, Herrera-Estrella L, Horie T,

Kochian LV, Munns R, Nishizawa NK. . Using

membrane transporters to improve crops for

sustainable food production. Nature : - .

Shi H, Kim Y, Guo Y, Stevenson B, Zhu JK. . The

Arabidopsis SOS locus encodes a putative cell

surface adhesion protein and is required for normal

cell expansion. The Plant Cell : - .

Sohani M, Schenk P, Schultz CJ, Schmidt O. . Phylogenetic and transcriptional analysis of a

strictosidine synthase-like gene family in Arabidopsis

thaliana reveals involvement in plant defence

responses. Plant Biology : - .

Tang J, Scarth R, Fristensky B. . Effects of

genomic position and copy number of Acyl-ACP

thioesterase transgenes on the level of the target fatty

acids in Brassica napus L. Molecular Breeding : -

.

Teige M, Scheikl E, Eulgem T, Dóczi R, Ichimura K,

Shinozaki K, Dangl JL, Hirt H. . The MKK

pathway mediates cold and salt stress signaling in

Arabidopsis. Molecular cell : - .

Verslues PE, Batelli G, Grillo S, Agius F, Kim YS, Zhu

J, Agarwal M, Katiyar-Agarwal S, Zhu JK. . Interaction of SOS with nucleoside diphosphate

kinase and catalases reveals a point of connection

between salt stress and H O signaling in Arabidopsis

thaliana. Molecular and Cellular Biology : -

.

Wu Y, Ding N, Zhao X, Zhao M, Chang Z, Liu J,

Zhang L. . Molecular characterization of

PeSOS : the putative Na+/H+ antiporter of Populus

euphratica. Plant molecular biology : .

Xu GY, Rocha PS, Wang ML, Xu ML, Cui YC, Li LY,

Zhu YX, Xia X. . A novel rice calmodulin-like

gene, OsMSR , enhances drought and salt tolerance

and increases ABA sensitivity in Arabidopsis. Planta

: - .

Yadav D, Ahmed I, Shukla P, Boyidi P, Kirti PB. . Overexpression of Arabidopsis AnnAt alleviates

abiotic stress in transgenic Arabidopsis and tobacco.

Plants : .

Yang Q, Chen ZZ, Zhou XF, Yin HB, Li X Xin XF,

Hong XH, Zhu JK, Gong Z. . Overexpression of

SOS (Salt Overly Sensitive) genes increases salt

tolerance in transgenic Arabidopsis. Molecular Plant

: - .

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html

و همکاران کناری دریا پورکریمی ....ضبِ شى کارکرد هطالؼِ در هؼکَس شًتيک کاربرد

32 1397بهار و تابستان / 1ره / شماهفتم/ دوره و ایمنی زیستیژنتيک مهندسی

Yang Y, Tang RJ, Jiang CM, Li B, Kang T, Liu H,

Zhao N, Ma XJ., Yang L, Chen SL. . Overexpression of the PtSOS gene improves

tolerance to salt stress in transgenic poplar plants.

Plant biotechnology journal : - .

Yue Y, Zhang M, Zhang J, Duan L, Li Z. . SOS

gene overexpression increased salt tolerance in

transgenic tobacco by maintaining a higher K+/Na

+

ratio. Journal of plant physiology : - .

Zhang HX, Blumwald E. . Transgenic salt-tolerant

tomato plants accumulate salt in foliage but not in

fruit. Nature biotechnology : - .

Zhu JK. . Salt and drought stress signal transduction

in plants. Annual review of plant biology : - .

Zhu JK. . Regulation of ion homeostasis under salt

stress. Current opinion in plant biology : - .

Genetic Engineering and Biosafety Journal Volume , Number

Reverse Genetic Application in functional study of Arabidopsis thaliana strictosidine

synthase Like- gene under salt stress

Mohadece Pourkarimi Daryakenari , Mohammad Mehdi Sohani

* and Amin Abedi

- M.Sc. graduate student, -Associate Professor, - PhD graduate student, Department of Agricultural Biotechnology, Faculty

of Agricultural Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran.

*Corresponding Author: msohani@guilan.ac.ir mhdsohani@gmail.com

Abstract

Strictosidine synthase-like (SSL) is a group of gene family in the Arabidopsis thaliana genome, which

their orthologous in other plants, such as Catharanthus roseus, are key enzymes in the monoterpenoid

indole alkaloid biosynthesis pathway. Arabidopsis SSL gene, a member of SSL family, has been induced

significantly by various stresses and signaling molecules. In this study, the reverse genetics approaches

(T-DNA insertion) are used to determine the function of the SSL gene in response to the salt stress. The

experiment was conducted using a factorial experiment based on the completely randomized design with

two factors and three replications. These factors were included two genotypes (Col- and ssl ) and three

NaCl treatments ( mM, mM and mM). Compared with the wild-type, the ssl mutant shows

significantly increased proline accumulation, anthocyanin content and reduced malondialdehyde (MDA)

content in response to the salt stress. Real-Time PCR analysis revealed that the expression levels of SOS

genes were upregulated significantly in ssl compared with the expression in Col- in response to

mM NaCl at h and h after the treatment. Totally, these results suggest that SSL might have a negative

regulatory role in response to salt stress in Arabidopsis.

Key words: Gene Expression, Negatively Regulator, Loss of Function Gene, T-DNA Line

Dow

nloa

ded

from

geb

sj.ir

at 4

:51

+03

30 o

n S

unda

y F

ebru

ary

23rd

202

0

http://gebsj.ir/article-1-247-fa.html