AVALIAÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-HLA NO TCTH … Encontro SBTMO - 2017/6... · 100% DOADOR NO...
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AVALIAÇÃO DE ANTICORPOS ANTI-HLA NO TCTH COM DOADORES ALTERNATIVOS:
PARA QUEM, POR QUE, QUANDO E COMO?
III Reunião Educacional da SBTMO - 2017
Alberto Cardoso Martins Lima, MSc Laboratório de Imunogenética – HC/UFPR
PARA QUEM?
A pesquisa de anticorpos anti-HLA e avaliação da presença de anticorpos específicos contra o doador (DSA) deve ser solicitada:
Para os pacientes com indicação de TCTH que apresentarem doadores com incompatibilidades HLA, aparentados ou não aparentados
269 patients who underwent haplo BMT
In a multivariate binary logistic regression analysis, independent risk factors associated with graft failure:
A positive crossmatch for anti-donor lymphocytotoxic antibodies (RR = 2.3; 95% CI: 1.8 to 2.8; P = 0.0038)
“The majority of clinical studies employing solid phase immunoassays to date have demonstrated significant associations of DSA with engraftment failure (Table 4)”
The patients with a DSA MFI ≥2000 experienced a significantly higher incidence of Primary Poor Graft Function than those with a MFI <2000
(27.3 % vs. 1.9 % , P = 0.003)
QUANDO?
Pré-TCTH:
Quando o paciente apresentar doador com incompatibilidade HLA
Critérios HC/UFPR:
• Na presença de novo evento sensibilizante
• Antes e após protocolo de dessensibilização
• Antes da infusão das células-tronco (D-1), nos TCTH com DSA
QUANDO?
Pós-TCTH:
Monitoramento pós-transplante nos TCTH com DSA • Avaliar efeito rebote do DSA
Critérios HC/UFPR:
• D+5
• D+15
• D+30 (Se necessário)
COMO?
Ensaios de fase sólida em plataforma Luminex:
Single antigen beads (SAB)
Prova cruzada de linfócitos (XM):
Citotoxicidade Dependente do Complemento (CDC-XM) Citometria de Fluxo (Flow-XM)
Virtual Crossmatch & Análise de Epitopos HLA
DSA (MFI=1,140)
Eplet 76ESN/TerEp #216 (Bw6)
Foi realizada prova cruzada por citometria de fluxo com células HLA-B39 do doador
Gebel HM, Bray RA. Am J Transplant. 2014 Sep;14(9):1964-75
Flow T-Cell XM: 205 MCF (Cut Off - 180 MCF) Flow B-Cell XM : 312 MCF (Cut Off - 271 MCF)
XM POSITIVO
FORÇA COLETIVA DO EPITOPO Bw6 >25.000 MFI EFEITO DILUCIONAL DO DSA CONTRA O EPITOPO PÚBLICO
A análise detalhada dos padrões de reatividade epitôpica possibilita uma caracterização mais robusta dos anticorpos
anti-HLA, minimizando a ocorrência de tais situações
Ellis TM, Transplantation Reviews , 27 (2013) 108–111
Relatar um DSA que não existe: Resultado falso-positivo
Retira a chance do paciente realizar o TCTH ou exclui um doador adequado
Não detectar um DSA existente: Resultado falso-negativo
Risco de rejeição mediada por anticorpos específicos contra o doador
CASO – SELEÇÃO DE DOADORES ALTERNATIVOS:
PACIENTE COM LMA SECUNDÁRIA A ANEMIA DE FANCONI
SEM DOADORES HLA COMPATÍVEIS NO NÚCLEO FAMILIAR
AVALIAÇÃO DE TCTH HAPLOIDÊNTICO DEVIDO À GRAVIDADE DO CASO (PACIENTE PANCITOPÊNICA):
PESQUISA DE ANTICORPOS ANTI-HLA (SINGLE ANTIGEN BEADS - SAB)
ANÁLISE DE EPÍTOPOS HLA:
o HLA FUSION (TER EPS) o HLAMATCHMAKER (EPLETS)
CASO - SELEÇÃO DE DOADORES ALTERNATIVOS:
RESULTADO DA PESQUISA DE ANTICORPOS ANTI-HLA & VIRTUAL CROSSMATCH:
8 DSAs CONTRA A MÃE: ANTI-A1, B18, DR7, DR53, DQ2, DQA1*02:01,
DPB1*04:01 E DPA1*02:02
6 DSAs CONTRA O PAI E IRMÃO: ANTI-A1, DR7, DR53, DQ2, DQA1*02:01
E DPB1*04:01
TCTH HAPLOIDÊNTICO DESCARTADO:
RISCO ELEVADO DE REJEIÇÃO HUMORAL DO ENXERTO
CASO - SELEÇÃO DE DOADORES ALTERNATIVOS:
REALIZADA A AVALIAÇÃO DE UNIDADES DE SANGUE DE CORDÃO UMBILICAL E PLACENTÁRIO (SCUP) APÓS O TCTH HAPLOIDÊNTICO TER SIDO DESCARTADO:
BUSCA REALIZADA NO REDOME (BRASILCORD) & NMDP
REALIZADO VIRTUAL CROSSMATCH (vXM) ENTRE OS ANTICORPOS ANTI-HLA DA PACIENTE E AS INCOMPATIBILIDADES HLA DAS UNIDADES SCUP
REALIZADA VXM EM 12 UNIDADES SCUP DISPONÍVEIS NO REDOME 5 SCUP SEM TIPIFICAÇÃO PARA HLA-C
TODOS OS SCUP SEM TIPIFICAÇÃO DQA1, DQB1, DRB3/4/5, DPA1 E DPB1
DSA (VXM POSITIVO) CONTRA OS 12 SCUP DISPONÍVEIS NO BRASILCORD
REALIZADA VXM EM 38 UNIDADES SCUP DISPONÍVEIS NO NDMP
MAIORIA DOS SCUP SEM INFORMAÇÃO PARA HLA-C, DQA1, DQB1 E DRB3/4/5
TODOS OS SCUP SEM TIPIFICAÇÃO HLA-DPA1/DPB1
TNC/Kg = 3.3 x 107 (DESCARTADO)
TNC/Kg = 6.4 x 107
MM DR53 (DRB4)
DR4 (MFI ≈ 20.000) DR53 (MFI ≈ 21.000)
DSA
DESCARTADO
CASO - SELEÇÃO DE DOADORES ALTERNATIVOS:
AVALIAÇÃO DE DOADORES NÃO APARENTADOS NO REDOME & NMDP:
3 DOADORES DISPONÍVEIS COM COMPATIBILIDADE PARA HLA-A, B, C, DRB1, DQB1, MAS COM INCOMPATIBILIDADES (MM) PARA HLA-DPB1:
I. DV NMDP 1801-0516-5: DPB1*03:01, DPB1*04:02
II. DV REDOME 4.130.713: DPB1*04:01, DPB1*104:01
III. DV NMDP 1997-2637-3: DPB1*01:01, DPB1*04:01
REPETIÇÃO DO SAB COM DILUIÇÕES 1:4 & 1:16 PARA AVALIAÇÃO DA FORÇA DO ANTICORPO CONTRA O EPITOPO 56A
AVALIAÇÃO DA PERMISSIVIDADE DPB1 PELOS MODELOS TCE 2.0 & ∆FD
CASO - SELEÇÃO DE DOADORES ALTERNATIVOS:
TRANSPLANTOU COM O DV NMDP SEM DSA & MM DPB1 PERMISSIVO
APRESENTOU PEGA NEUTROFÍLICA NO D+17 SEM USO DE FILGRASTIM
100% DOADOR NO QUIMERISMO D+30
100% DOADOR NO QUIMERISMO D+89 (CÉL. TOTAIS, T, B & GRAN.)
100% DOADOR NO QUIMERISMO D+150 (CÉL. TOTAIS, T, B & GRAN.)
NÃO APRESENTOU DECH ATÉ O MOMENTO
RECEBEU ALTA DO HOSPITAL DIA COM ACOMPANHAMENTO AMBULATORIAL SEMANAL
RESUMO DO CASO: 1. TCTH HAPLOIDÊNTICO: DESCARTADO DEVIDO À PRESENÇA DE VÁRIOS DSA
2. TCTH COM SCUP: DESCARTADO DEVIDO À PRESENÇA DE VÁRIOS DSA
3. AVALIAÇÃO NAP: TRÊS DVMO 10x10 (HLA-A, B, C, DRB1, DQB1 EM ALTA RESOLUÇÃO)
RISCOS DE COMPLICAÇÕES PÓS-TCTH DISTINTOS ENTRE OS TRÊS DVMO, QUANDO O HLA-DPB1 É CONSIDERADO:
DV NMDP 1801-0516-5: SEM DSA & MM DPB1 PERMISSIVO
→ BAIXO RISCO
DV REDOME 4.130.713: COM DSA & MM DPB1 PERMISSIVO
→ RISCO INTERMEDIÁRIO (REJEIÇÃO HUMORAL DO ENXERTO)
DV NMDP 1997-2637-3: COM DSA & MM DPB1 NÃO PERMISSIVO GvH
→ RISCO ELEVADO (REJEIÇÃO HUMORAL DO ENXERTO + ALORREATIVIDADE NO VETOR GvH)
AGRADECIMENTOS
Equipe do Laboratório de Imunogenética do HC-UFPR
Unidade de Busca de Doadores Não-Aparentados
Equipe Médica do STMO-HC/UFPR
Equipes do Serviço Social e Enfermagem do STMO-HC/UFPR
OBRIGADO PELA ATENÇÃO
[email protected] Laboratório de Imunogenética – HC/UFPR
41 3360-1800 Ramal 6481