Automated DNA fragment collection by capillary array gel electrophoresis in search of differentially...
-
Upload
takashi-irie -
Category
Documents
-
view
221 -
download
2
Transcript of Automated DNA fragment collection by capillary array gel electrophoresis in search of differentially...
��������� � ��� ���� ���������� �� �������������� �� ��������������� �� ������ �� ����������������������� ����
�� �������� �� � ������ ������ ����� ������ � � �� ��� ���� ���� ���� ������� ���������� � ������ ���� �������� �� ���� �� ��� ���� �������� ��� ���� ��������� �� �� � �������� �� � ������ ���� ���� ��� �� � ������� ���� ���� �� �� ������� ��� ���� ������������� ���� � ��������� �������� ������ ���� �� � ����� ������ ������� �� �� �������� � ��� ��� ��� �������� � �� �� ��� ������� ��� ��� �� ����������� ������ ��� �� ����� ��� ������� ���� �� � �������� !� ���� �� � �������� � ������������ �� ��� �� ��� ������ ��� �������� �� ��� �������� � ��� �� ������ ��� ������� � �� ��� ������� �� ������ �"�� ��������� ���� ���� ��� ��"�� �� �������� ��� ���� ������ #$!%& � �����' ��� � ��� �� �� ����� ����� ����� ��� ��(��#���� ������� � �� ��� �� )�*& �� ���+ ��� ��� ���� � ��� �� �� � ����� ������ �������� #& ������ ���� �� � �������� !������� �� � ������� � � ��������� ��$!% ��� ����� �� �� ���� ���� ����� �� � ������� ���� ���� ������ ����� ���� ����� #���� ������� ,�, ��� ,�-& �� � ���������� ���� ����� � ���� ���� �� � ������� � �� ��� ������ ��� ���� ���������� ��������� �� ��������� ����� ���������"� ����� �� � ������� �� � ������������ �� ��� �� ���� ����� ��������� �� ������� ������ �� � ������ � ����� ������� �� ��� ����� ��� ���� ���� ��� ������������� � �����(�� �� ��� ���� ���������� ������ �� ���� ������ ���� ���� ��� ���������� � ������ ������ �� ������ �� ���� ������� �� ���� � ������ ��� �� � �� ������� � ��� �� �����������
��������� !������ � � �� ��� ���� ���� ���� . / ����� ������ . ���� ������ ������� ����
������� 01 ,�23
������� �����
�������� ������
!����� !��� ����
"������ #��������
��� $��
"���� ���
������ ������%
&�'�� ���(�����)
!����� ��������
�!��� �� %���� �1��� ��� �� 4������5�6����7�� �6��� 8����*9���" %���� �� ��6��:���� ���� ;�����������!���� � 5�����6��5�������� 8����,��� ����� �� <������ ��� !������ $�� ��������<�� :���� ���� =���� ��<������� ��� <��� 8����-��� ����� �� <������ !��� $�� ���������������� !���� ��>� <�����%���� � !���� �=��������6�� �6��� 8����
� ������������
�� ��� ������ � �7�� � �� ������ ���� �"� ������ ��������� �� ������� ��� �� ��� ��7� ���7��� �� �� ���������� /� ������ ������������ ��� �� �� ������������� � �� ������ �� �� ��� ����� � ��������� �� �� ����� ����� �������� #�� �"����� ��� �� ������������ ���� ��� ������ ��������& � � ����� ������������"��� �� �� ���� ��� ���� �"� ������ � ������ �� �� ����� �������� ?� ���� ������� #�������� ����� ������ �������� #& @�� *A ��� ��������� � ������ ������ ������ ������� #�/1$& @,A �� ��� ���� �"� ������ � ������� ������� ��� ���� ���� ���� ���� ���� ���������� 4����� ������ ������� ���� ��� ����������� ��7� ��������������B�� �� ��� �� �� ����� �� ������ � ����� �� �� ������(��� /� �"������ �� ��� ������� �� � ���� -)C����������� �� � ��� � �� ������ ��� ���� ������
#$!%& � � ������ � �� � �� �� ������� � ����� ������#��� �) CCC& �� �"� ����� ����� @*A� �� ���� �� ��������� �"� ����� �� �� � ������� � ��������� �� ��� ������ �������� �"� ����� ����� �� ������ ��� ������� ���� ������� �� ��� � ������� �� ���� ��� ����� �� �� ������������ �� � ��������� �� � ������� ���� �� �"����� �� � ��� ����� ��� �� ������ ��� �� ������������� ������� ����������� � ������� ������� ��� �������� ��� ������ ������ �� ��� ��� � ���� ����� D� ����6 ���������� � � �� ��� ���� ���� ���� ������ ���� ���������� �������� @-A �� �� � �������� �� ��� �������� ��������� �� ��� �� � �������� �� �� � ������� ������� �� � ���������� ������ � ���� ��� ������ ���� �� �� �������� ������ ������� ����� ���� ��� ���� ���� �����
=��� �� ������� �� �� � ������ ������ � ����� ������� � ��� ���� ���� ���� ���� �� ���� ���� ��������� @)A���� ��� ��� ������ � ������ � ������ ������ � ����������� ���� ���� ����� ������ ��� �� �������� ������ ��� ������ �� �������� �� ����� ��� ��� �� � ��������� � ������� 4����� � ���� �� ��� �� ���������� ���������� �� ��� �������� ���� �������� ������ ���������� �� � ���� ��� ���� �� �� � ������� � � �������� �������� �� ��� ������� 4����� � ���� � ����� � ������� �� ��� ������ � � ����� �������� �"�
*�������������� � �6���� � ��� ;��������� ��� ������!��� �� %���� � 1��� ��� �� 4������ ��*3C� 4�������5����6����5�6����7������ �6��� �3)�3�C�� 8����+,����� ��6�� ��E �����������7�-��� F3��-*�,*G�GG)�
�����.�������� �-$/� ��������� � ������ ������ ������ �����+� ����� ������ �������
���������� � *CCC� ��� ,�GH,G- ,�G
I D�10J�?!4 ?� ��� 9��4� �2-)� D�������� *CCC C�G,�C3,).CC.C*C*�C,�G K�G�)CF�)C.C
*+��
�*+*
� ����� ���� ����� � � �� ���� ���� !������������ �� ������������ � � ����� ������ �� ������������ ����� ����� ���� �� � ������� �� ��������
#�������� ��� �������
0� ����������
�� ���� ����� ��� �������� �� �� � �� � ������������ ��� �� � ���� �"� ������ � ������� ���� �� ����� � � �/1$ ���� ��� ���� �������� �"� ����� ��� ������� ������ �� �"� ���� �� �������� �������� ����� �� ���������� �� ����� �� ����� �� � �������� �� � ���� �� ������� ���� ��� �"��� �����+ ��� ���� �� �� ������� ���� ��� ��"���� ����� �� �� ��� � �������� �� �� ��� ����� ��� ������ �� ����� ������ ���� ���� ����� ���� �� �� �� �� �� ��������+ ������� � ��� ���� ����� ��6� ��� ������ �����"� D���� ��� � ���� ��"���� ����� �� ��� ������� /��� � ������������ ������ ���� ��� �������� �� � ������ ������� � �� ������ � � �� ��� ���� ���� ���� ���� ��������� �� ���� ����� ��� � ���� ��� ������� ������ ������ ��� � �������� ��� ���� ������ @-A� 0��� ���� ���� ����� �� ��� �� G) �� �� *CC �� B� ����������� ������ ���� #$����� � ����������� $�����"� �L� :=�& ����� ���6 ��������� ������� �� ���J�9 ���� #),* ����C �D+ !��� ��� 8����� �6��� 8����& ��� ���� �� � �������� ���� ���� �� ������� �� ��� �� � �������� �� ���� ����� ������ �� � ������� �� � ����� !!����� #=GC�� �� ���� �C*-#4& � �*-#?& ��"���� *- � *-�� ��"�� ��(�+ 4�������� $�������� 4���������8����&� <������� ����������� �� � ������� ��� � ��) �
���� �� ��������������� � ��� ��� ��������� ����� � �� ����������� �� ))C� )3C� ��� ��C ��� ���� � �������� ��� �������� ����������� �� ��� ���� ���� �� ����'4�"� �<%�� ��� %�"� �� ���������� �� ����� ����� ��� � ����� *C ��� 1��� ��� ������� ������ � #4����� =����� =������� ��� ���� 8����& ��� ���� �� ������� ����������� �������� �� ��� �� ������� � �� ��� ������ ������ �� ��� ������ ��� � ����� ������ � �� � ���������� ��� ���� ��� #������ ���� ���& �� �������� ��� ��������� �� � ������� �� ����� �� /��� *� =�"���� ���������������� ��� �� � � ����� �� � ����� ���� C�3 �� �������B�� ��� �� ��� ���������� ������ � �� ���� ��� �� � ���#C�*� �� �� �����& �� � ��� �( ���� ��� ��� ��� �� ��"����� �������� ������ ��� �� ���� ����� �� ��� ��� �� ������� ������� ������� ���� ���� �� � ��� ;��� 6���� �������� ��� � � ������� ���� ��� ����������� ���� ���� C�*�� #������� ������� �� ��� ������ �& �� � �� �� ���������� �������6 #������������ � �� ������� ��� ���������������� ���&� �� �������� ������ ��� � � ��� ���� ������� ���� �� ���� ���� ����� ;���� �������� ����� ��� ����� �� ��� ��� ����� ��� ���������� ������ ���� �� ��� ������� ���� ���� �� ��� ������ � ��� � � ������ � ����� ������ � ���� � ������� �� ��� ���� � ��� ���� �������� ��� � ��������� �������� ������ �� �� ������ �� � ������ ��"�� �� ������� �� ��� ����� ��� ���� ����� �� � � �������������� �����(�� �� ��� ���������� ������� �� D��� ��� ��������� ��� ����� ������� ��� ��� ����� ���� �� �"���� � � ����� ����� �� ������ ������ ��������� ������ � ���������� ���� ��� ����� ��� ��������� ��� � ����� ������ �� � �� �� ����� ��� � ���������� ������� ���� �� � �������� ��� �� ��������� ����� �������� �����
,�3 � � �� �� ��� ���������� � *CCC� ��� ,�GH,G-
-� ��� �0 =������ � ����� ����� �������� �� � ������������ � �� ��� ���� ��"�������������� ������ ��� �� ��(� ����� ����� �� �� � �������� ������� ���� ��� �� ����������� �������� �� � ����������� ��"���� �������� ������ ����� � ����� ���� ��� �� � �������� �� � � ����� ������ ���������� �� �������� ��"���� �������� � ������� ��� ��� �� ������������� ������ � � �� ��� ������ ��� ��� #������ ��� ��� &�� ��� ������ ���� ��� #����� ��� ��� & �� �������� � ��������� ���� �������� ��� � � �� ���� � ����� ��� � �� ��� ���������� ��� �� ��� ����� ��� �� ���
� ����� ������ �� ���� ��� �������� ������ �� ��� � ����� ������ �� �� �� ��� �� � ���� �� ��� ����� �������� ��������� �� ��� ����� ��� ��� �� ������ ���� �� � ������ <������� ���� ���� �� ������� �� ����� ��� �� � ������ � ���� � �������� �� ����� �� ��������������� � ��� ������� ���� ��������� ����� � ��� � ����� !! � �� ����� �
0 -������� ���������
�� � ����� ������ ������� �� �� �������� ��� � �� ��������� � ��� ��� � ��� ����� ����� ��������� � � ���� ����� �������������� �� �� ���� ���� ������ � #�C ���� �6�+ 5������ !��� �6��� 8����& ���� ��� ��������� �� �� �� �������� ��� �� �(����� �� ������� ������������ � ���� ��������� �� ����� ����� #,C �1 ������ ���&���� � -�) �� ���� #,3- ���� �� ����� ����� ���������&�� ����� �� ��� �������� � ��� 0�� ���� �� ������ ���� *C�1 �� ���� �� ���� D��� ��� � ����� ������ ������ ������ ����� ������� ��� �������� � �� �������� �� ��� ������� ����� �� �� � ��� ���� ��� �� ���� ����� ��� ��������� �� ������ ��� � ��������� � ��� ���� ��� ��� ���� ������ �� ��� �������� ������ � ���� ���� ��� ���� �� ����� ���� � ������� #C�) �� ������� & �� ��� ������ �� ���� ��� ����� �� ������� ���� ����� �������� �� ������� ����� ���� �� 6������ ��� �������� � �� �� �� � � ����� ������ ���� #�������� ����&� �� ������� ������ ����� �"������� � �1� �� �������� ������� �������� ����������� ��� ��� �������� ���� ��� ���� ����� �"�� ���������� �� �C � ��� *C �� ����������� ���� ���������� �� ������(�� ��������� �� ��� ��� ��� ���� ��������� ��� �������� ������ � ��� ��� ������ �� ��� �������������� �� �� �"������� ���� #=����� ,��&� �� ������ ����� �������� ������ � ������ �� �� ��� � �� ��������� ����� ��� �� �* �� ���� ��� ������� �� ��������� ���� ����� ������ ���� �� 3 � ������
0% /���������� �� ��,������ �����������
9��������� ������ ��� �� � � ��� �� �� ���� �� � ��������� ��� ���� � ���� �� @�� GA� �� �������6�� ����� �������� ��� ��� � ���������� �� -M � ������� ���� )M �������6� #-M � )M! ���&� �� �� �������6�� ������ # ��������� ���& �� ��� �������� �� ���� ���������������� ��� ������ ���� ���� ��� �������� ������ ������ ���� ��� �������� �� �� � ������ �� ����� ���� ��� ������� �������� ��� � ��� �� �� �� 32 �< ����� ���� *�) �< 0 � ����� ��� G < � �� #�4 3�,&� �������� �� ��� ���������� ������ � ��� *C � �� ������� ���������
0) +��������������
=����� ������� �� � ����� �� ����� �� � ������ � ���D��� ��� ������� �� � �� �� ���� ���� ������� ��7�������� ��� ���������� ������ ���� ��� ��7����� ���� �� ������ �� ��� ���� ��� ������ ���� ��� ������ �������� �������� �� *) ?.� �� ������� �� *C � �� ��� ���� ��������� �� ��� ������ �� ��� ������ ���� ��7������ ��� ��7������ ���� �� � ������ �� � �CC �1 ����� #32 �< ����� ���� *�) �< 0 � ����� � G < � ��� �4 3�,& ��� ��� ��������� � �������� �� � ���� ���� �� ������� ��� ��� ����� ���� �� ���� �� ����� ������ �� ���� �� ��� ������� � ���' *) ?.� �� �C ���� )C ?.� �� *) ���� ���� ���� ��� ��� ������ #,CH3C ?.�&� � ����� �������� #32 �<
����� ���� *�) �< 0 � ����� � C�C*M �����*C� �4
���������� � *CCC� ��� ,�GH,G- ��������� �� � ������ �������� ,�2
-� ��� 0 =������ � ������� ��� ������ ���� ��� ��� ������� ����� ��������� =�"�������������� ������ ��� � � � � ����� �� � ����� ���� C�3 �������� ��� ��� �� ���� ���� ������ ��� �� � ��� �� ��� ��� �(���� B�� ��� �� ��� �� ��"������������ ������ ��� �� ��������� �� ��� ��� �� ���� ����6���� �� ���� � � ������� ���6��� ���� ������� �� � ���=����� �� � ������� ��� ��� ��� ���� ������� �� ����� ���� ���� ���� �� � � �����(���������������� �� ��� ���� ���������� ������ �� �� �� � �������� � � ������ � �� ��� �����
�� � ����� ������� ������������ ���� ��� �������� ������ ��� �� � ������ ����� ��� � ����� ��� �� ��� ����� �� � ���� �� ����������� ������ ���� =��� � ��������������� ����� #��� ����� �� ���� ���� �& ����� ���� ��� ��� �( ��� �� � ������� ��� ������ �������� �������� �� ��� ��� �( ��� ��� ��� �������� ������ ��� �� ���� � ������� �� ��� �� ��� ���� ���� �� ��� ����� �������� �� ��� ��� �( ��� ��� ��� �������� ������ ��� � � ������ ���� ����� �� � ������ � �������� � ���� ��������������� ������� ��� �� � ������� ������� � �� ��� ���������� ������ ���� �� � �� �� �� � ����� �������� �"� ����� �� � ���������������� �� ��� ����� ����� �� ��� � ����� ������ �� � ���� �� ���� ��� ����� ������� ���� ����� ����������� ������� ��� ���� ���� �� �"���� � � ���� �� ������ ����� #���� ����� ��������&�
3�,& ��� ���� �� ��6��� ��� ������ ����� �� � �� �� ����� � ��� ����� ���� �� �� � ������ ������� ��(� ������ �#9������)CC� �<%�+ $0�������� ;���������� /���� !���� !�� :=�& ��� �����(�� ������� ���� ��� ������ ����� ���� ������ �� �� ����������� ������� ��� ��� ������ ������ ��� ��� ��� ����� ���� ��� ���� ������� ���������� � ������� ���� � ��� ��� �� ���������� ���������
01 2����� �����������
�� 6���� �� ���� ���� ��������� �� ������� �� ����� �� ���� ������ B�� �� � ��"�� � �� ����� $!% � ��������� ���� ������� �� ���� *C�� *G�� ,�,� ,�-� -*�� -32���� )�*� �� ������� �� � ���� ����� �� ������������� � ���� �"�� ������ �� ��������� �� $!% �� �#�& ��(���' ��� �� ������ ��� #��� ���� $�� ����;������ 1����� !�������� ;�6�� :5&+ #��& ������ ��"�� �#)C �1&' C�G) : �� ��� �� ������ ���� ) �1 �� �C � �������� � ��� �"������� C�, ���� �� � �������� ����C ���� �� %�"�������� �� �� � � ��� #)>�����������������,>&� �C ���� �� ��� �� � ��� #)>�����������������,>& ��� �� $ ��"�� � #�C ���� �� ����� $&+ #���& �������' 2-�! �� * ���� ,) � ��� ��� ���#2-�! �� ,C �� )G�! �� ,C �� ��� G*�! �� �C �� ��� ����G*�! �� , ���+ ��� #��& ���� ����' ;����� � :�B� �� ������6 #;����� �� 4���� �� 9� ����&� %������� � ���� �� ����� ����� ��� ����� �� � ������ � �� ��� ��"��� � ���� � N�����6 < $!% �� �������� 6�� #N������=���� !�� ���� !�� :=�& ��� ������� � ����������� ��������� �� $!% � ����� �� � ��������� � �� ������� ����� �� *�C �� �� ����� � :? ���� ����� ���� ������ #=�,-CC+ 4�����&� �� ���� ������ ��� � ��� �� ��� ������� �� ������ �� � ������ � ���� �� ���������� �� $!% ���� � ��� ���� �� �� �� ���� � ��� ��� �� � ��� � � � ��� #�C��� &� �� 6���� �� ���� � ���� � ���� ��� ���� ��������� ������� #)>���#�)&��,>&��� ����� ��� ������� ���� ���� �� #4�" ��� %�"& �� ������ �� � ��� � � � ��� ��� ��� ��������� �������� �� ��������� �� $!% �� � #�& ��(��� ����' 9��������� �������� �� ������ ���� #$0�������� ;����������&+ #��& ������ ��"�� � #�C �1&' C�*) : ��� �� 9������� ��� �������� �� ������ ����� � �1 �� �C ��C 9������ ����� � � �� �� ���� ) ���� �� ���� ����� ��������� ���� � ��� � ) ���� �� � ��� � � � ��� ���� * ���� �� ��� �� $+ #���& �������' 2-�! �� , ����-C�! �� ) ���� G*�! �� ) ���� ,C � ��� ��� ��� #2)�!�� �) �� -C�! �� * ���� ��� G*�! �� �C �� ��� ���� G*�!�� ) ���&+ ��� #��& ���� ����' �;� 2�CC #$0�������� ;����������&� �� $!% � ����� �� � �� ����� ���� � ���#=������"�9)C+ ��� ���� $�� ���� ;�����& ����� �$ �� �� ��7������ ������� �� � ��������� �� � �1 ��������� ����� #2CM �� ������� �C �< 0 �&� ������ ��2)�! �� ) ���� ��� ���� ����� �� ��� �� ���� ����
�� � ������� � �� ��� ������� �� � ��������� �������� ��� ���� � ���� �� �� ����� ��� ���� �������"��� ���� ���� �������� #*�):& ��� ����� ��� ������������ ��� �� ����� �� )C �1� ��� ��� ����� �� ������� *)�
03 2�4������
��������� �������� �� �������� �� � ������� � ����� ������ �� � �����(�� ���� � �� ��������� ����� �� ������ ��������� � ���" 6�� #��� ���� $�� �
,GC � � �� �� ��� ���������� � *CCC� ��� ,�GH,G-
-� ��� %0 #�& ������� ��� #�& ����� �� ��� �� � �������� ������� �� ��� �������� �� � ������� �� ��� ������� �������� ��� #& ��� ����� �� � ������� �� ������ ����� �������� ������ �� �� ������� �� ��� �������� ������� � � � #�& *C � ��� #��& �C �� ����� �� ��� �� � ������� �������� ��� ���� ����� ����� �� ���� ����� �������
���� ;�����& ��� �� �;� ,G, �� =������ #$0�������� ;���������&� �� ������ ��"�� � #*C �1& ��������� - �1 �� ��������� ������ � ���"� ��� �"��������)C ���� �� �������� ��� ��� ) ���� �� ��������� � ���� � ���� �� ��� ���� �� ��� � ��� � � � ��� � �� ��"��� � ��� ������ �� 2��! �� �C �� ��� �� ��� ������ ,C����� ����� ��� ��������� �������' 2��! �� ,C �� -C�!�� ,C �� ��� �C�! �� �C �� �� � ���� ��� ���� �� ��������� � ����������� �� ��� ��������� �� - �1 �� ���������� ��� ������� �� ��� 6�� ��� ������ �� GC�!�� ) ���� ���� ����� �� �� ���� � ������� �� ���������� �
% 5������ ��� ����������
%0� *��������� ����� ��� ��������
�� � ������� ������� �� ��� ����������� ��� ������ ���� ��� �������� ������ � ���� � � ���� ��������� ���������� ��� ����� �� �� � �� �� ���� ���� �������������� �� ��� � ����� ������ � �� ���������� ������ � ��������� ���� %�"�������� �� � ������� #���� ������ �� *3&�� ��������� ���� ���� ��� ��7������ �� �� � �������� �� � ������ � �� ��� ���������� ������ � �� ��������� ������� �� � ��� � ���� #O) �&� ��� ������ ���� ����������� ������ � ��� �� � ������� �� ���� �� ���������#������� �& ����� ��� �������� ������ � �� ������������ � ���������
��� ��������� �� ��� ���� ����� ��������� ��� ��� �"�������� 9�������� $��6 ������ #��& ��� ����� #-�' �������� � ���������& �� ��� 9������� ���6 � � ����� ��/��� ,� ��� �� ����������� �� �������� �� ��� ��� ����������� #��& �� ��� �������� ������ �� �� ���6 ������ ������ ����� � � ��� �"������� � ��� ������ �� ��
H� ��� ��H�.*�
����������� �� ����� �� ���� � ��� ������ �� ��.* ������� �� /��� ,� ���� ������ �� �� ���� ��� ���� �����
� ������� ���� ��� ���� �� ��� ����� �������� �� ��� ��������� ������ � �� ��� $��������� �����
4��� ���� ������� ��� ��� � ������ �� ��� �������� ������� � � � � ��� ���� �� � �� �� �� ���� �������� ������ ������ ��� �������� ������ � ���� �� ���� ������ �� ������� ������� ���� ����� �������� �� ��� �����+ ��� ��� �������� ������� �� ����� ����������� �� ��������� =��� ��������� ��� ��� ���� ������� �� � ��� �� �* � ��� 3 ��.�#C��G ��.� �� ��� ������ ���� ���&� ����������� ��� ���6������ #��& ��� ��� ����� #-�& �� � ��������� �� �� *C ���� �G �� �� ��� �� ��� �������� ������� ���� �� ������� ��� ������� �������� ��� �������� ��� � #��& ����� ����� #��& ��� ��� �� �C � #�� P �� H ��.*& ��� *C �#�� Q-�&� �����������
� ���� � ��� ������� �� �������� ������� � ��"�� � �� ����� � ������� ���� ����� ��� ���� ������� � �� ��� ��)�* �� � �����(�� #��� ��� ���� ���� �� �� �� ��� ��"��� �� /��� -�&� �� ����� ������ �� ����� �� � �������� �� ��� ������� ����� �� � ��� �"������� � �<� ��������� ������� ��� 3C ?.�� �������� ��� , � �� � ���������� �� �CC� �� ���� ����� ���� �� �� � ������� ����� ���� ������ ����� ��� �� ��� �� ������ ��� ���� �� �������� #-�& �� ��� ������� ������� �� 3C ?.�� �� ��� ����� �� � ������� ����� ��� �� /��� -� ���� �� ����������� ������ ���� �� ����� �� � ������� �������� ����� � ����� �� � ��������� �� $!%� 0�� �� ��� ��������� ���� �� ��� ����� �� /��� -� ������� ���� ��� � � ��������� �� � �������� ��� ����� �������� ���� ����� � ������� � � ���������� �� ��� ���� ��� ���������������
%0 2��������� ������������
�� ���� ����� ����������� �� ��� �� ����� �� � ��6���� �������� ������������� ��� �� � ������� ���� ����������� �� ,�, ��� ,�-� /��� � )� ����� � �� � �� /��� -�
���������� � *CCC� ��� ,�GH,G- ��������� �� � ������ �������� ,G�
-� ��� )0 �� ���� ���� �� ���� � ��"�� � �� ����� �� � �������� ���� #�& ���� �������� �� ��� �� )�* ��� #�& �� ������� � �������� �� � �� �� �������� �� � ������� � � ���� ������ �� ���� �� ��� ��� ���� ����� � ����� ������ �� ��� ���6������ ���� ��� ���6 ����������"���� � � ���� ������ ��� ����� ������ ����� ���� ����������� ��� ��� �� ����� #���� ���� �� =����� ,��& �� ����� ��� ��� ���� � ��� �� ��� ��� ������� �� � ��������� ��
$!%� �� ����� ���� ���� �� ��� �� #�& �� � ��� ���� ����� �� 6� ��� ����� �� �������������� �� ��� ���� ������ �� �� ������� ������� ��� 3C ?.�� �� �������� ���6 , � �� �� � ���� ������ �� �CC�
�� ��� ����� �� ���� ������ � ���� ,�C� �� ���� ����� ���� �� ��� ��� ���6� ��� ,C �� 0��� ���� �� ��� ����� ������� �� � ������� �� ��� �� ����� � � ����� ��/��� )� #,�- ���� ������& ��� /��� ) #,�, ���� ������&�� ��� �������� ������� #�� �����' *C �& �������� ��/��� )�� �� ���� ����� ����������� � � ��� �� ���� ��������� �������� �� ��� �� ������ �� �� ��� �� � �������� � � ���������� �� ��� ��7� ����������
�� ���� ����� ��������� ���� �� ��� ���� ���� ��� ��������� ������ �� �� ��� ���� ��� ������ �� ���6������ ��� �� ��� ���� ���� �� ��� � ���� � ���� � ��������� ��� �� � ������� ���� ���� ������� �� ,�, ���,�- �� � ������� �� ��� ������� ������� #,C ?.�&� ������ ����� ��� �� ��� ��� ���6� ��� GC �� �� ��������������� � � ��� �� �� ;� ��� ! #�� ����� �� /��� ��&� ������ ���� �� ��� �� ��� ������� �� � ������� � ������ �� /��� ��� �� �������� ������ ��� ��� �� ����������� �� ,�- #������' �& � ,�, #������' !& ��� � ���������� � ������� �� � ��������� ��� ��� �������������� ��� ��� ������� � ��� !� �� ���� ���� � ��������� � ��������� ���� ������ �� ��� ��������� �� ���������� �� � ������� ������� ���� �� � ����������� � ���� ������ ����� ��� �� ��� �� �� ������������� ���� �� ��� ��� ��������
�� � ����� ���� ��� ������� ������� ���� �� ���� ���� ����� ���� ���� ��� �� � ������� �� ���� ��� ���� ��������� ��� �� ����� ��������� ������� =��� �� �������� �� �� � ������� � � �� ���� ��� �� � ����������� ������ ���� ��� � ����� �� ���� ��� �������� �����
=����� � �����(��� ��� ��������� ������ �� ��� ���� ������ ������ ��� ������ �� ��� �� ������� �� ��� ������������ �������� ������ #�"� ����� �� �� � ��������� ���� ��� �� ������ � ���� ���& ���� ������� ��������� ����� � ����� ��� ���� �� �� ������ �� ������� ��������
%0% 2�4������ �� ��� ��������� ��� �����
� � ��� �� ��������� ������� �� � ������� ��� � � ��� ��� ���� ��� ������� /��� � G� ����� ��� ���� ����� �� �� �� ��� � ������ ������� �������� �� �� ����� ������ �� �CC ������ -�) �� �� ������� � ������������� ��� �� ��� �� � ������ #�������� ���� �� � ���� /��� G�& �� � ��7� �������� �������� ���� ����������� ���6� � � ���� ����� �� /��� G�� �� ����������� ����� ���������� ���6� ������� �� ��� �������� ���6 � �������� �� ��� ����� �� $!% ����� ��� �������� ������� $!% ������������ �� ��� ��7� �������� �� ����� ���� ��� ���� ��� ��"������ � ������� � � �������(���;� �������� ��� ��������� ��� ���������� ���6� ��������� #/��� G&� ��� �������� ��� ����� ��� �� ��� ����� �� ��� � ������ �� �� ������ ���� ��� ����� ��������� ��� ��� ������������ �� *)���� $!%� ��� �� ����� � ������� �� � �������� �� ���� #������� � ������� � ����&� �� ���� ������� �� � ���� ��� ���� ������ ������� � �� ,>��� ����� #������& �� ����� �� /��� 3� ���� ���� � � ���� ������ �� ���� ������������� ������ �������� ��� ��
,G* � � �� �� ��� ���������� � *CCC� ��� ,�GH,G-
-� ��� 10 #�& 0"������ ���� �� /��� -� ��� ,�C ���������� ����� ��� #�& ������� �� � ������ ���� ���������� ��� �� ����� �� ��� �� ��� �� � ������� ���� ����������� �� ,�- ��� #& ,�,� �� ��������� �� $!% ������� ���� ���� �� � �� �� /��� -�
-� ��� 30 =��� ����� �� �� � ������� ���� ����������� �� ,�- ��� ,�, �� ��� ������� #,C ?.�&� #�& !��������� ������� #�� ;� ��� !& � � ������ #�& 0��� ����� �� ��� �� ��� ������� �� � ������� ���� ���$!%������������� � � ������ �� ��� �� � ����������� � ���� ������ ����� ��� �� ��� �� � ��������� ����� ����� =��� ��� � � � ��� �� ���� �� � ������ ������� ���� ��� �� � ������ #������� �C �� ��� ����&� �������� ����� ���� ������ �� ���� �� �������� ���� �� ���������� �� ������ ��� ������� ������� ���� �� ��� ���� ������ ��� �� � ������� �� ���� ��� � � ������� #��������� ��������&�
%0) ��������� ������ ���� ���������.��������� ����
�� �"����� �� ��� ���� ����� �������� �� ��� �������� �� ����� �� /��� 2� ��� ������ ������� ��� ������ �� � ������ � ���� ������� �� ��� 4�" ��� %�" ����� ���� ��� ����������� �� ������� ������� ��� 3C ?.�� �� �������� �� � ���� ������ �� �CC ���6 , �� �� ���� ����� �� �� �� ��� 4�"�������� �� � ������� ������������ ��� %�"�������� ��� �"��� �� ��� ���6 �� ������� ������ �� ��� �"������� *�C� ��� ��� ����� ������� ���� ��� �� ��� ���� � �������� �������� �������������� �� ����� � ���� ��� ��� � ����������� ���� ������ ����� ����� ������� ��� 4�" ��� %�" ���� ����� ������������ �� ���� ���6 �������� �"���� 3CM� �� ��� �������� �� ���� ������ � � ���� ���� ,CM� �� ��� �� ������� ���6 �� � ���� ������ �� ��� �"������� *�C ���� ���� ��� ������������ �� ������� � �� ������ ����� �� )CM� �� �� ��� �� � ������� ������ ��� �� ��� � ������ ��� �������� ��������� �������� ���� ���������� ���6��� � ������� �� ���� ���� ���� ���� ����� ��������� ���������� �� ��� � ����� �������� �� ���� ������������ �������� �� ��� �� ��� �� � ������� � �������� ���� ����� �� ����� � ������ � ����� =��� ������� ����� ���� �� ��� ���� �� ����� ��� ��������� �������� �� ��� � ������� ��� �� �� ���� �������� �� ���������
) *�������� �������
�� ����������� ���� �� ���� ������� ����� �� �"� ������� ������ ��� ���� ����� �� �������� ���� ���� �� ���������� ��� � ��� ��� ��� �� ���������� ��������� �� �������� � ������ ������ �� ������ �� �������� ������� � ���� � ��� ���� ���� ��� �� 6 �� ������� �� ������ �"� ����� �� �� � ������� � �� ����������
���������� � *CCC� ��� ,�GH,G- ��������� �� � ������ �������� ,G,
-� ��� 60 0��� ���� �� ��� �� #�& ����� ������ ������������� ��� �� ���� ���� �� � �������� #�& ���� �� ����������� ��� #& ���� ����� ��������� � ��� ���������� �� ��� �� � �������� �� ������� ������� ��)C ?.�� �� �� ��� �� ������� �� � ������� ����� ���� �� �������� ��� �������� � �����
-� ��� 70 �� ������� ���� �� ��� �� ��� � ������ ����� �� /��� G� �� ���� ������ �� � ���� ��� ���� �� ����������� � �� ,>��� ����� #������& ��� � � ���� ������ �� ���� ������������� �� ���� �������� ��� ��
��� ������ ���� � �� � ����� ��� � ��� ��� �� �� ���� ���� �! ��� ������� �"#� ���� � ��� $%& � ��'�( �� ������ � ����� ���� ����� '�� '��� ������ �'�� '�� )� ����� ��� '�� *�� �+� ����� ���� � ��� �� ����� �! � ��� ������ � ��� ��� �������,���� �� ����� !��� ��� ��� ����� '�� '����� ���� � � � ����� � � ��������� � ������
%������ <�� *3� �222
1 5���������
@�A 1����� $�� $� ���� �� ;�� )� ����� �22*� �-.� 2�GH2G��
@*A ���� �� 5���� 5�� ������ ��� <������ J�� 4����� �� 4�� =�6�6��J�� ��/) ����� �22-� (-�� *,�H*,��
@,A ?��� $�� 4��� �� %�� ;���6� � <�� %��7���� <�� ��� �� 1��� ��4� ���� <�� / �7�� � ��� $��� 8�� $������� 8�� 5���� � <��"���� � #� �� &��� �22)� �(� --CGH--�)�
@-A �6������� =�� <� �6���� 5�� ���(���� �� 5���� �� 4��#���� %���� �22-� 00� �C*�H�C*��
@)A <R��� � B�� /� ��� /�� 5� �� � ;� 1�� #���� %���� �22)� 0.�*2G-H*23C�
@�A 5����� �� <�� 5���� �� 4�� ���������� � �22�� �.��-G�H�-3-�
@GA ������� 4�� 1�6��� 8� ��� 5�����6�� �� 8�� >!����� 8��=����� 1� <�� #���� %���� �22C� 0�� 2CCH2C,�
,G- � � �� �� ��� ���������� � *CCC� ��� ,�GH,G-
-� ��� 80 �� �"����� �� ��������� �� ���� �� � ����� ���������"� ����� �� � ������ #����� ����� �������� ���� ���� ��������� �� � ���� ������� ��4�" ��� %�" ���� ���� �� � ���� �� �� ��� ������&� 0���� ���� �� ��� �� #�& ��� � ������������ ��� #�& ��� ��������� � �������� ������������ � ������ �� ������� ��������� 3C ?.��