AULA PRÁTICA DE BIOQUÍMICA

PIPETAGEN

S

PIPETAGENS

FUNÇÃO DAS PIPETAS

Pipeta - é um pequeno tubo de vidro ou plástico usado para transferir quantidades passíveis de medição de um recipiente para outro.

O cientista francês Louis Pasteur desenvolveu uma variedade de pipetas, muitas das quais são utilizadas até hoje -- ainda que pipetas mais modernas sejam mais confiáveis e precisas.

Pipetas são utilizadas em diversas práticas científicas, geralmente quando é preciso transferir menos de 100 ml de uma solução.

Pipeta Pasteur

Tipos de Pipetas Pipetas volumétricas

Feitas para transferir volumes específicos, as pipetas volumétricas lembram simples tubos de vidro.

Usar um instrumento como esse envolve mergulhá-lo em uma solução e colocar um dedo sobre a extremidade de fora ou apertar uma pera de borracha para extrair o valor especificado.

Quantidades diferentes de solução, geralmente entre 1 e 100 ml, requerem pipetas volumétricas de tamanhos diferentes.

Pipeta volumétrica

Tipos de Pipetas Pipetas graduadas

Pipetas graduadas são calibradas em pequenas divisões para proporcionar uma melhor precisão e permitir que sejam demarcadas quantidades tão pequenas quanto um microlitro (um milionésimo de um litro).

Enquanto algumas pipetas graduadas usam tanto o método do dedo quanto o da pera para extrair líquido, micropipetas automáticas trazem maior precisão. Micropipetas usam um êmbolo ajustável, marcado com uma faixa entre os volumes mínimo e máximo, que deve ser demarcada com a quantidade necessária.

Pipetas graduadas

Uso da Pipeta Independente do tipo de pipeta, usá-las

requer cuidado. Para prevenir dano à pipeta ao extrair uma

solução, coloque o instrumento a 5 mm da borda do recipiente. Uma vez que o volume ou medida desejados estejam contidos na pipeta, um toque gentil no lado do béquer da solução removerá o excesso de gotas.

Quando transferir a solução, coloque a pipeta em um ângulo de 10º a 20º e, lentamente, deixe o líquido escorrer. Mais uma vez, um toque suave deve ajudar a remover as gotas extras.

Micropipetas Para medir rigorosamente volumes pequenos. Coloque a ponta na micropipeta (tem de

escolher a ponta certa). Pressione o êmbolo até à 1ª posição e mergulhe no líquido a pipetar.

Aspire de modo controlado (se for demasiado rápido, poderão entrar bolhas de ar e a quantidade medida pode estar errada).

Pressione o êmbolo até á 2ª posição para expelir todo o líquido.

Micropipetas

Cuidados Gerais Usar uma pipeta para cada reagente, a fim de evitar

contaminações entre um líquido e outro. Evitar a troca de rolhas entre os reagentes. Conferir os volumes desejados e cada pipeta a ser utilizada. Não devolver a solução pipetada para o frasco estoque. Antes de introduzir as pipetas nas soluções, verificar se estão

realmente limpas e, se as ponteiras, estão bem encaixadas. Visualizar e confrontar os meniscos nas pipetas graduadas e

volumétricas. Ao pipetar soluções cujo frasco contém depósito de soluto,

introduzir a pipeta no sobrenadante. Utilizar sempre pipetas e ponteiras secas.