ASPECTE DE GENETICĂ FUNCŢIONALĂedu.asm.md/sites/default/files/raport iasi1 M.pdf ·...
Transcript of ASPECTE DE GENETICĂ FUNCŢIONALĂedu.asm.md/sites/default/files/raport iasi1 M.pdf ·...
ASPECTE DE GENETICĂ FUNCŢIONALĂ
LA PLANTE
Maria DUCA
profesor universitar, academician
organite celule ţesuturi organe caractere proteine metabiliţi ARN ADN
Citogeneză Transcriere
Translare
Funcţie
Organogeneză
Histogeneză
Autoreglare
Diferenţierea
celulară
Replicare
Autoasamblare
Processing
UNIVERSITATEA
ACADEMIEI DE ŞTIINŢE A
MOLDOVEI
Organizat în baza Hotărârei CSŞDT
nr. 38 din 26.03.2009
Acreditat în baza Hotărârei Comisiei de acreditare a CNAA
nr. AC-2/3 din 24 martie 2011
GENOMICĂ FUNCŢIONALĂ ŞI BIOINFORMATICĂ
CENTRUL UNIVERSITAR
DE CERCETARE ȘI FORMARE PROFESIONALĂ
BIOLOGIE MOLECULARĂ
52% cu vârsta
până la
35 ani
72%
în formare
Genomică Bioinformatică
14,5 unităţi
Proteomică
POTENŢIALUL UMAN 2016
doctori
habilitați
doctori în
științe
doctoranzi studenți,
masteranzi
alte
categorii
1. Port Angela “Factori şi procese de semnalizare retro- şi anterogradă la floarea
- soarelui”
2. Abdușa Daniela “Identificarea și evaluarea unor gene potențial implicate în
bolile cardiovasculare.”
3. Acciu Adriana “Variabilitatea genetico-moleculară și distribuția rasial-
geografică a populațiilor de Orobanche cumana Wallr. din Republica Moldova ”
4. Nechifor Victoria “Acţiunea AG3 asupra microsporogenezei la floarea-
soarelui”
5. Mutu Ana “Diversitatea structurală și funcțională la Origanum”
6. Tabără Olesea “Estimarea modificărilor fiziologice și genetico-moleculare ale
răspunsului defensiv în sistemul gazdă-parazit (Helianthus annuus L. -
Orobanche cumana Wallr.) ”
1. Șestacova Tatiana “Controlul genetico-molecular al rezistenţei florii-soarelui la
mana (Plasmopara halstedii F. Berl et de Toni)” 2015
2. Martea Rodica “Variabilitatea genetico-moleculară la genotipurile de Salvia
sclarea L.” 2016
TEZE ÎN CURS DE REALIZARE
T E Z E S U S Ț I N U T E
RESURSE FINANCIARE, 2016
Alocaţii BUGETARE – 1154,6 mii lei cercetări fundamentale 75%
Alocaţii EXTRABUGETARE – 380,4 mii lei 135, 0 – proiecte bilaterale
150,0 – grant internațional
95,4 – venituri colectate
25%
instituţional
bilateral,
moldo-român
CERCETĂRI FUNDAMENTALE
CERCETĂRI APLICATIVE
1254,6 mii lei
60,0 mii lei
75,0 mii lei
Direcția strategică: Biotehnologie
15.817.05.03F. Rezistența florii – soarelui (Helianthus
annuus L.) la lupoaie (Orobanche cumana Wallr.):
mecanisme genetico-moleculare și fiziologice Conducător științific: acad. Duca Maria
Direcția strategică: Biotehnologie
16.80013.5107.20/Ro. Evaluarea unor hibrizi de floarea
soarelui, privind rezistența la stresul hidric și termic, în
Romania și Republica Moldova Conducător științific: acad. Duca Maria
Direcția strategică: Sănătate şi biomedicină
15.820.1804.10/B. Screening-ul proteinelor alergene, prin
metode proteomice și genomice, în soiurile de mere create
în Belarus și Republica Moldova Conducător științific: dr. Port Angela
bilateral,
moldo-belorus
PROIECTE DE CERCETARE REALIZATE ÎN 2016
7
GENOMICA FUNCTIONALĂ MULTIDISCIPLINARĂ PENTRU
PROCESE BIOLOGICE DE BAZĂ
BIOINFORMATICA
RAPD-PCR
MARKERI SSR
PCR
RT-PCR
ELECTRFOREZA PROTEINELOR
ANALIZĂ HIBRODOLOGICĂ
ANALIZA MORFOFENOTIPICĂ
BIOCHIMIE
GENETICĂ MOLECULARĂ
GENETICĂ CLASICĂ
FIZIOLOGIE VEGETALĂ
IDENTIFICAREA GENELOR
INTERACŢIUNEA GENELOR
EXPRESIA GENELOR
P R O T E O M I C A
M E T A B O L O M I C A
CARACTER AGRONOMIC
G
E
N
O
M
I
C
A
Conexiuni de semnalizare la
nivelul FT
Conexiuni de semnalizare
la nivelul protein-kinazelor
ASPECT
FUNDAMENTAL
ASPECT
APLICATIV
METABOLISM
Nucleu Citoplasmă
FT
FENOTIP
Rezistenţă, compoziţie biochimică şi dezvoltare
modificată
Ameliorarea caracterelor
cantitative şi calitative
Proteine
FUNCŢIE
Factori de creştere,
stres biotic şi abiotic
Procese redox,
fosforilare, transport etc.
METODOLOGIA CERCETĂRILOR
9
Iraida Ciobanu
Floarea-soarelui
Audieri parlamentare, februarie 2010 ©
10 SUNFLOWER CULTIVATION IN RM
First documentation about sunflower in RM. 1845
First evidence of oil production from sunflower seeds 1867
RM place regarding world sunflower seeds production.
19th
RM place regarding world sunflower oil export.
17th
Total agricultural land 65%
Place after wheat and corn 3th
+AG3
Fenotipul plantelor fertile , cu androsterilitate citoplasmatică şi androsterilitate indusă de giberelină
Sistemul genetic ASC-Rf și ASI-
AG3 SISTEME GENETICE MODEL
ASC-Rf și ASI-AG3
SISTEMUL M O D E L ASC – Rf
>>>> 11-kb-inversion >>>>
atpA orfH873 orfH708 cob
F
5-kb-insertion <<<< 11-kb-inversion <<<<
atpA
orfH873
3` orfH708
cob
S
orfH522
Rf – Gena nucleară reastauratoare
de androfertilitate
în genotipurile cu ASC.
La floarea-soarelui genele restauratoare
au fost identificate în H. petiolaris Nutt.
de către M. L. Kinman în 1970.
Ulterior ele au fost descoperite şi în alte
specii din flora spontană.
ASC
Androsterile A.V. Anaschenco, 1972 Androfertile
G I B E R E L I N E
Androfertile J.N.R. Kasembe, 1969
S I S T E M U L M O D E L ASC-ASI
GA3
Sterilă Fertilă
0
2
4
6
8
10
12
Cotyledons First leaves Blossoming Active growth Flowering
IAA/GA3 F1 MB514 MB514 ASC RW637 Rf
14
IDENTIFICAREA GENELOR ASC
0,5_
0,3_
321pb
B
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
C
321pb A
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
321pb
321pb
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
A. 1-14 – forma ♀; 15 - Xenia F1; 16 – forma ♂;
B. 1-11 – forma ♀; 12 - Drofa F1; 13 – forma ♂;
C. 1-9 - forma ♀; 10 - Valentino F1; 11 - forma ♂
• A FOST IDENTIFICATĂ GENA ANDROSTERILITĂŢII
• METODA DE DETERMINARE A GRADULUI DE STERILITATE
15
IDENTIFICAREA UNUI NOU CADRU DE
CITIRE LA APLICAREA EXOGENĂ A GIBERELINELOR
M 1 2 3 1 2 3 M
1 - SW501
2 – SW501ASC
3 – Sambred
1 2 3 1 2 3
+GA3 -GA3 +GA3 -GA3
321 400 800
Gena orf H 522 la linia SW501 ASC cu primerul sens
CTNGGGGGTGGGTGTGCAACCCTCACGCAAGGGACGGATCCCGCGCTCGGGCTAAAATTTCAAGAACGAGTTGCCGG
AGTAAACTCACGGCTGCGGTTGCAGTGTCCTTAGACACAGGGACTTTCTTTCTATTTGGGTCATCGCCGGATCCACCA
GGGAGGGGGAGAATGCTTTGAGCATTTGGACCAGAAATACTTCGGCCTTTATAGGGCGTGATCTGTTCCATAAACACG
GAACAGGCTACTAATATCAAAAAAATAAAAAGACAGAAAAAGAGGAGTGCGCCACACGTCGNAAAGGCNTCNCCNCTG
CNATTCTGGA
Gena orf H 522 la linia SW501 ASC cu primerul antisens
NGGNNNTATNTNAACAGATGCNTGACTNGNTAAATTANCANTATNTANACANGTTCGTANCTGGTTTATGCGCTTTTNT
NCTTGANGGCAGTCNCCTCCCCCTNCCTGGGTGGATCCGGCGATGACCCAAATAGAAAGAAAGTCCCTGTGTCTAAGG
ACACTGCAACCGCAGCCGTGAGTTTACTCCGGCAACTCGTTCTTGAAATTTTANCCCGAGCGCGGGATCCGTCCTTGC
GTGAGGGTTTGCACAACCCAACCACCCAAGCGTGGAATAGGGCCATCACCACTGCCATTCAAGATCCGGCAACTCGTT
CTTGAAATTTTAGCCCGAGCGCGGGATCCGTCCTTGCGTGAGGGTTTGCACAACCCAACCACCCAAGCGTGGAATAGG
GCCATCACCACTGCCATTCAAGA
Gena orf H 522 la linia SW501 ASI cu primerul sens
CTNNCGTGGGGTGGNTGTGCAACCCTCAGGCGAGGGACGGATCCCGCGCGTCGGGCNAAAATTTCANCCANTTNAGT
TGNCGGAGNAAACTCANGGCTGNGGTTGNNGATGCCNTTTANACACAGGGACTTTCTTTCTATTTGGGTCATCGCCGG
ATCCACCAGGGAGGGGGAGAATGCTTTGAGCNTTTGGACCANAAATACTTCGGCCTTTATAGGGCGTGATCTGTTCCA
TAAACACGGAACAGGCTACTAATATCAAAAAAATAAAAAGACCGAAAAAGAGAGTGCGCCACAAGTNGAAAAGGCNTA
ACCANAAGAATTGTGNNAAANAAAGTGAATTTNTCCNGTTNAGGNATNTTGATCANAGAATAANAGGATNTNCCCCCCC
NNCNCAAAAAAAAAGGGCGCCCANAACAANGTNAATCGNCTCANNGTNNCNCAANNCTTTTTTGGGNGGGGGGGAACC
ATNTCCNC
Gena orf H 522 la linia SW501 ASI cu primerul antisens
NTTTGATAGNGCCTGTTCGTGTTATGGAACAGATCACGCCCTATAAAGGCCGAAGTATTTCTGGTCCAAATGCTCAA
AGCATTCTCCCCCTCCCTGGTGGATCCGGCGATGACCCAAATAGAAAGAAAGTCCCTGTGTCTAAGGACACTGCAAC
CGCAGCCGTGAGTTTACTCCGGCAACTCGTTCTTGAAATTTTAGCCCGAGCGCGGGATCCGTCCTTGCGTGAGGGTT
TGCACAACCCAACCACCCAAGCGTGGAATAGGGCCATCACCACTGCCATTCAAGAAA
GIBERELINELELE
APLICATE EXOGEN
INDUC SINTEZA
TRANSCRIPŢILOR
IDENTICI CELOR
IMPLICAŢI ÎN
ANDROSTERILITATEA
CITOPLASMATICĂ
16
SEGREGAREA MOLECULARĂ A GENELOR Rf1 ÎN ASC PET 1
pb
-207 -165
-101
Produsele de digestie enzimatică la genotipul Drofa F2 M- marker molecular; ♀- rf1rf1 ; ♂- Rf1Rf1; F- Rf1rf1
M F F F ♂ ♂ ♂ F F ♂ F ♀ ♀ F F F ♀ F
Kb
0,5–
0,3_
0,2_
0,1 -
M F F ♀ ♂ F ♀ ♂ ♀ ♀ F F ♀ F ♀ F ♂ ♀
Kb
0,5–
0,3_
0,2_
0,1 -
pb
-207 -165
-101
METODA DE
DETERMINARE
A GRADULUI DE
HIBRIDARE
Electroforeza produsului de amplificare cu
primerul H 13 la liniile materne (A), paterne (B),
formele hibride F1 (C)
308 pb
308 pb
308 pb
A
B
C
17
Indexul liniei Generaţie
Segregare
fertile : sterile X2 Numărul
de gene
Tip
de interacţiune
Număr
de
familii real teoretic
SI 3376-3 F1
F2
FB
57:64
31:10
125:18
1:1
3.1
1:1
0,52
0,02
1,12
1 - 11
SI 2986-2 F1
FB
F2
78:0
45:15
30:5
-
3:1
15.1
-
0:00
2,98
2 Polimerie
necumulativă
12
VIR 199 F1
F2
FB
80:0
19:18
13:30
-
9:7
1:3
-
0,23
0,60
2 Interacţiune
complementară
4
K 2288-287 F1
FB
F2
65:0
13:24:17
26:18:3X
-
1:2:2
9:6:1
-
1,09
0,36
2 Polimerie
cumulativă
8
VIR 160-352 F1 62:8 7:1 0,06 3 Polimerie
necumulativă
3
X2 0,05 = 3,84
RESTAURAREA ANDROFERTILITĂŢII LA HIBRIZII
DE FLOAREA-SOARELUI PE BAZĂ DE ASC
18
MOŞTENIREA ŞI INTERACŢIUNEA GENELOR NUCLEARE Rf
Rf1 - Horn R., 2002
Rf2 - Horn R., 2003
Rf3 - Jan C.C., 2007
Rf4 - Feng J., 2008
VIR 199-1
RfPRfPrf1rf1
SL 2986-2
rfPrfPRf1Rf1
F1
RfPrfPRf1rf1
X
X X
X
F2
100% FERTILE
ASCP ASC1
(Fa)
1 fertile : 1 sterile
RfPrfPrf1rf1 rfPrfPRf1rf1
RfPrfPrf1rf1 rfPrfPrf1rf1
(Fa)
3 fertile : 1 sterile
RfPrfPRf1rf1 rfPrfPRf1rf1
RfPrfPrf1rf1
rfPrfPRf1rf1
IDENTIFICAREA GENEI Rfl în ASCl
A FOST IDENTIFICATĂ O GENĂ NOUĂ Rf l
X X
F1
ASC1
RfprfpRf1rf1
ASCp ASC1
Fa 33:35
1 : 1
1 RfprfpRf1rf1 1rfprfpRf1rf1
1 Rfprfprf1rf1 1rfprfprf1rf1
Fa 32:10
3 : 1
1 RfprfpRf1rf1
1 Rfprfprf1rf1
1 rfprfpRf1rf1 1rfprfprf1rf1
X
F2
44:5
15 : 1
9 Rfp- Rf1- 1rfprfprf1rf1
3 Rfp- rf1rf1
3 rfprfpRf1-
A1813
ASC1
VIR200-328
RfpRfpRf1Rf1
X
IDENTIFICAREA ŞI TIPIZAREA SURSELOR DE ASC
21
Eleonora Romanescu
Casa bătrânească, 1978
? REORGANIZEAZĂ GENOMUL
MITOCONDRIAL CONTRIBUIND
LA APARIŢIA UNUI
NOU CADRU DE CITIRE
ACTIVEAZĂ O ZONĂ
REARANJATĂ, DEJA
EXISTENTĂ ÎN
GENOMUL MITOCONDRIAL
321
+GA3 -GA3
>>>> 11-kb-inversion >>>>
atpA orfH873 orfH708 cob
F
5-kb-insertion <<<< 11-kb-inversion <<<<
atpA orfH873 3` orfH708 cob
S
orfH522
0
20
40
60
80
100
120
0.1
1
0.4
2
0.7
4
1.0
6
1.3
8
1.6
9
2.0
1
2.3
3
2.6
6
2.9
8
3.3
1
3.6
3
3.9
5
4.2
4.5
8
4.9
RF
Heig
ht
Citoplasmic fraction Mitochondrial fraction
TRANSDUCEREA SEMNALELOR DE AG3
NIVELUL DE EXPRESIE A GENEI orf H522
LA DIVERSE LINII IZOGENE
GA3 induce expresia genei orfH522
asociată cu ASC la plantele liniei
fertile, fapt ce demonstrează
similaritatea funcțională la nivel
molecular între ASC și ASI-GA3
codul GSE
denumirea GSE
codul GPL
denumirea GPL
sumarul experienţei
referinţe bibliografice
cuvinte cheie
codul GSM
numele GSM
sumarul GSM
GEO
Analiza
seturilor de
date
BD
Extragerea
seturilor
de date
Stabilirea cuvintelor
cheie/specia/condiţiile şi
durata experienţei etc.
Investigarea profilurilor de
expresie microarray pentru
Arabidopsis thaliana
Extragerea informaţilor necesare
utilizând limbajul de programare
R şi pachete suplimentare
Investigarea profilurilor
referitoare la dezvoltarea
florii pentru Arabidopsis
thaliana
Elaborarea
tabelului analitic
cu informaţiile
extrase asupra
seturilor de date
Completarea tabelului pentru analiza ulterioară
Prelucrarea
statistică a
probelor după
replicările
biologice Verificarea datelor
pentru analiza ulterioară
Calcularea valorii medii
Elaborarea
listelor de
gene
selectate
Clasificarea
genelor după
anumite criterii
Compararea
listelor obţinute
Determinarea filtrelor pentru
selectarea datelor
Valoarea
coef-lui
p:
p ≤ 0,05
p ≤ 0,001
p ≤ 0,0001
Coeficienţi
de corelaţie
r ≥ 0,9
r = |(0; 0,3]|
r = |(0,3; 0,7]|
r = |(0,7; 1]|
Rapoartele
de
expresie
dintre
probe:
1:2
1:3
1:10
Determinarea filtrelor pentru
selectarea datelor
Expresie
diferenţiată
Adnotări KEGG
GA
22810 sonde
100 gene
Filtrare statistică
Adnotări GO
681 gene
1653 gene
281 gene
59 căi metabolice
KEGG PATHWAY
• 27 gene expresie ↑
• 80 gene expresie ↓
• 70% - ABA, MJ, AUX și ET
ANALIZA MICROARRAY
GENE ONTOLOGY
• Replicarea și repararea genetică
• Atașarea la ATP și a ribonucleotidelor
• Procese metabolice
• Remodelarea peretelui celular
• Determinarea presiunii osmotice
F
E
G
H
A - metabolismul SRO
B - metabolismul energetic
C -activitatea și biogeneza mitocondriilor
D - dezvoltarea organelor reproductive, meioza
E - căile de semnalizare a AG și AJ
F - procese de reparație și recombinare a ADN-lui
G - semnalizare și transducția semnalelor
H - apoptoză
A
B
C
D
S E M N A L I Z A R E A C E L U L A R Ă
MITOCONDRII – NUCLEU
0
0,5
1
1,5
2
2,5
B1 B2 B3 B4
Gena MEE 58, GE489951.1
Номер цикла
4136312621161161
Фл
уо
ре
сц
ен
ци
я
3 500
3 000
2 500
2 000
1 500
1 000
500
0
Gena EXP, GE514022.1
0
0,1
0,2
0,3
0,4
B1 B2 B3 B4
Martor Tratat
0
0,5
1
1,5
2
2,5
B1 B2 B3 B4
Gena ASK2, D849086.1
0
0,005
0,01
0,015
0,02
0,025
0,03
0,035
B1 B2 B3 B4
Gena DYAD, GE489553.1
Gena H1, CD856124.1
0
1
2
3
4
B1 B2 B3 B40
0,1
0,2
0,3
0,4
B1 B2 B3 B4
Martor Tratat
NIVELUL DE EXPRESIE A GENELOR LA PLANTELE
CU ASI
Exp
resia
rela
tiv
ă, u
n. c.
Exp
resia
rela
tiv
ă, u
n. c.
B1- microspor; B2 – tetrade; B3 – diviziuni; B4- leptoten-pahiten
EFECTUL AG3 ASUPRA ACTIVITĂŢII A 13 GENE
IMPLICATE ÎN MEIOZĂ
30
22
Stimulare
Inhibare
32
20
Stimulare
Inhibare
3
8
10
9
Leptoten-pahiten Diviziuni
Tetrade Microspori
5
9
7
11
Leptoten-pahiten Diviziuni
Tetrade Microspori
Linia B Linia A
Expresie stimulată faţă de martor
Expresie inhibată faţă de martor
10
5
3
4
Leptoten-pahiten Diviziuni
Tetrade Microspori
8
4
6
2
Leptoten-pahiten Diviziuni
Tetrade Microspori
SPECIA PROTEINA LOCALIZAREA PROTEINELOR ASC-Rf
Noncitoplasmatică Transmembranară Citoplasmatică
ASC
Petunia
proteină ASC 402 aa 38–46; 112–402 47–67; 88–111 68–87
Rf proteina genei Rf–PR591 – – 1–591
proteina genei Rf–PR592 – – 1–591
ASC Brassica
napus
proteina genei orf222 28–89 7–27; 90–108 1–6; 109–222
Rf proteina genei Rfo – – 1–667
ASC
Oryza
sativa
ORF 79 1–19 20–38 39–79
Rf
proteina genei Rf1a – – 1–791
proteina genei Rf1b – – 1–506
proteina genei Rf1c – – 1–794
ASC Raphanus
sativus
ORF 125 1–23 24–44 45–125
Rf proteina genei orf687 – – 1–687
LOCALIZAREA PROTEINELOR SISTEMULUI ASC-Rf
29
DISTRIBUŢIA SPAŢIALĂ A PRODUSULUI DE EXPRESIE A
GENEI orfH522
0
20
40
60
80
100
120
0.1
1
0.4
2
0.7
4
1.0
6
1.3
8
1.6
9
2.0
1
2.3
3
2.6
6
2.9
8
3.3
1
3.6
3
3.9
5
4.2
4.5
8
4.9
RFH
eig
ht
Citoplasmic fraction Mitochondrial fraction
Polipeptida 16 kDa
Fracţia citoplasmatică
Fracţia mitocondrială
Mr, kDa
Rf
23 Domeniu
noncitoplasmatic
132 Domeniu
citoplasmatic
17 Domeniu
transmembranar
ORFH522
1 - SW501 N
2 - SW501 T
3 - SW501ASC N
4 - SW501ASC T
5 - RW637Rf N
6 - RW637Rf T
ASC - ASI
CITOPLASMA
Ereditară Indusă de AG3
SW 501 ASI
MITOCONDRII
Fracţiunea salinoextractibilă
SW501ASC
Gena mitocondrială orf H522
APEX
Polipeptida 16 kDa
FRUNZE
CALATIDII CALATIDII
FRUNZE
APEX
Gena mitocondrială orf H522
A S C - R f
(ADNm) (ADNn)
Gena mitocondrială orf H522
Genele nucleare Rf
? Proteine 16 kDa
Concentraţie redusă a giberelinelor
Concentraţia sporită de gibereline
Concentraţie înaltă a auxinelor
Concentraţie redusă a auxinelor
Raport înalt
AIA/AG3
Raport redus
AIA/AG3
Intensitatea
redusă a
proteosintezei
rH
reducător
Activitatea redusă a
peroxidazei
Activitate înaltă a
catalazei şi peroxidazei
SISTEMUL ASC - Rf LA FLOAREA - SOARELUI
Semnale metabolice
MSH1 RecA
Familii de gene
[ATP]:[ADP]
H+ H+ H+
H2O O2
H2O O2 CAT
NO
BER
Kinaze / fosfataze/ adenilat ciclaze
MARK
Alterarea funcţiei
?
LTE
1O2 OH.
H2O2
mtAOX
MADS
TD/SPL/MYB
FADH2
NDH
NDH
UC
CII
CIII CIV
SOD, APX, CAT
ADP+Pa ATP
P
P
P
?
?
? ?
Stoichiometrie modificată
a reactanţilor
FT Amplificarea semnalului
? Stres oxidativ
? Semnal ? Semnal
?
Alterarea transcripţiei
Bcl 1/Bax inhibitor
Reducerea potenţialului membrnar
ONOO-
Fitohormoni Receptor
NADH+H
[Ca2+]
Citocrom C
orfH522
1- Leclercq P., 1966; 2 - Kinman M.L., 1970; 3 - Vranceanu A.V., Stoenescu F.M., 1976, 1978; 4 - Анашенко А. В., Дука М. В., 1985;
5 - Horn R., Kohler R.H., 1991; 6- Kohler R., Horn R., Lossl A., 1991; 7- Laver H., Reynolds S., Moneger F, 1991;
8 - Smart C., Moneger F., Leaver C.J., 1994; 9 - Gagliardi D., Leaver C., 1999; 10 - Balk J., Leaver C., 2001;
11- Duca M., 1998.
Rf1
Degenerarea celulelor tapet - MCP
[1-4]
[8-10] orfH522
[5-7]
[11]
[10]
[Ca2+]
orfH522
33
Valentina Rusu-Ciobanu
Floarea-soarelui
34
Xenia
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
p
b
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
♂ F
1
M ♂ ♀ F
1
4
p
b
M ♂ ♀ F1 M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F1 M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
p
b
M ♂ ♀ F1 M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
M ♂ ♀ F
1
p
b
AFLP
ISSR
SSR
RAPD
METODE DE DETERMINARE A POLIMORFISMULUI
GENETIC
c i c i c i
♀ ♂ F1
A
B
C
D
68
45
25
13,4
68
45
25
13,4
kDa
68
45
25
13,4
SPECTRELE POLIPEPTIDICE DIN RĂDĂCINILE (A, B) ŞI
FRUNZELE (C, D) DE HELIANTHUS ANNUUS L. ♀ ♂ F1 ♀ ♂ F1 ♀ ♂ F1 ♀ ♂ F1 ♀ ♂ F1
kDa
c i c i c i c i c i c i c i c i c i c i c i c i c i c i c i
68
45
25
13,4
c – control, i – infectat
15 zile 20 zile 30 zile 40 zile 50 zile 60 zile
ANALIZA CANTITATIVĂ A POLIPEPTIDELOR UTILIZÂND
TEHNOLOGIA PROTEIN LAB CHIP
783.15
marto
r
783,15 ng/μl
infectat
91,22 ng/μl
1496
ng/μl
463,14
ng/μl
kDa
1314,13 ng/μl
500
ng/μl
1638,99
ng/μl*
♀
150,
0
95,0
63,0
46,0
15,0
28,0
7,0
4,5
♂ martor
infectat
1638,55 ng/μl*
1122,7
ng/μl
887,38 ng/μl
62,85
ng/μl 64,81 ng/μl
kDa
F1
infectat
1674.52 ng/μl*
martor
954 ng/μl
kDa
B
kDa
♀
infectat
111,9 ng/μl
martor
389,8 ng/μl*
martor
2327,8 ng/μl*
♂
infectat
12,61 ng/μl
kDa
infectat
300 ng/μl*
martor
165 ng/μl
F1
kDa
A
ANALIZE DE TIP CLUSTER DIVIZIV ŞI AGLOMERATIV
Dendrograma interpopulaţională realizată în baza distanței Euclidiene dintre
valorile medii ale caracterelor morfologice ale semințelor de Orobanche cumana
Dendrograma UPGMA generată pe baza distanţelor
genetice Jaccard conform secvenţelor microsatelite SSR
între populațiile de Orobanche cumana
Reprezentarea bidimensională a rezultatelor
analizei morfometrice a semințelor ale populațiilor
studiate de Orobanche cumana
Modul de moştenire Frecvenţa Masa moleculară, kDa
♂ ♀ F1
+ + + 77 122; 98; 89; 59; 57; 53; 49; 46; 38; 36; 35; 29; 28; 24;
22,8; 22,3; 21,5; 17,6; 16,3; 15,3
+ + - 12 88; 80; 70; 49; 20,5; 18,7
- - + 30 117; 74; 62; 43; 34,2; 32,8; 27; 26; 20,1; 19
+ - + 6 34,2; 26; 23,7; 16,3
- + + 4 49; 46; 26; 16,3
+ - - 2 88; 18,7
- + - 5 88; 80; 28; 20,5; 18,7
ELUCIDAREA BAZELOR MOLECULARE ALE
FENOMENULUI DE HETEROSIS
67
43
30
20,1
14,4
94
-βME +βME
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9
M – markerul maselor moleculare, kDa; 1 – Xenia ♀; 2 – Xenia ♂; 3 – Xenia F1; 4 – Valentino
♀; 5 – Valentino ♂; 6 – Valentino F1; 7 – Drofa ♀; 8 – Drofa ♂; 9 – Drofa F1. -βME –
electroforeza în lipsa β-mercaptoetanolului; +βME - electroforeza în prezenţa β-
mercaptoetanolului
EVALUAREA POLIMORFISMULUI GENETIC ÎN BAZA
HELIANTININEI LA FLOAREA-SOARELUI
Spectrul polipeptidic tipic (T) şi netipic (Nt)
al heliantininei la genotipul Xenia♀
Grupa II
Grupa III
Grupa I
15
20
14
16 17
18 19
1
2 3 4 5
6 7 8 9 10
11 12
21
16 17
18 19
1
2 3 4 5
6 7 8 9 10
11 12 13
21
T Nt
• METODA DE DETERMINARE A PURITĂȚII GENETICE A MATERIALULUI
SEMINCIER DE FLOAREA SOARELUI , brevet nr. A20060194 din 21.07.2006
Elena Bontea
Natură statică cu fructe
și floarea-soarelui, 1984
Însuşirile biologice ale parazitului Însuşirile biologice ale gazdei
Mecanisme fiziologice ale rezistenţei
Afinitatea
Virulenţa
Agresivitatea
Gene specifice
Gene nespecifice
S R O P R
INTERACŢIUNEA GAZDĂ-PATOGEN
Evaluarea polimorfismului genetic și amprentarea
genotipurilor valoroase de floarea-soarelui • Analiza SSR
Evaluarea potențialului de rezistență specifică
• Screening-ul genei Pl1 cu marker CAPS
• Screening-ul genei Pl6 cu marker STS
Elucidarea mecanismelor de rezistenţă nespecifică
• Colorarea cu DAB şi NBT • Expresia genelor asociate
cu rezistenţa
IDENTIFICAREA GENELOR DE REZISTENŢĂ LA RUGINĂ
(Puccinia helianthi) R1 şi R2
IDENTIFICAREA GENEI DE REZISTENŢĂ LA MANA
(Plasmopara halstedii) Pl1
Markerul CAPS pentru locusul Ha-4W2 lincat cu
gena Pl1 (rezultatul restricţiei cu Tsp509I)
Audieri parlamentare, februarie 2010 ©
43 43 SCRININGUL MOLECULAR AL REZISTENȚEI LA LUPOAIE
OPB 10 OPK 17
OPA 02 OPA 11
R E S T R I C T I O N
A N A L Y S I S
SCAR (rasa E) RAPD
DUCA, M., A. GLIJIN, A. ACCIU, M. GORCEAG and I. GISCA. 2014.
Identification of RAPD markers associated with sunflower resistance
to Orobanche cumana Wallr. In: Proc. 3rd Int. Symp. Conserv. of
Plant Diversity, Chisinau 22-24 May, 2014. p. 87.
DUCA M., GLIJIN A., ACCIU A. and GISCA I. 2013. Use of RAPD
markers in molecular screening of sunflower resistance to broomrape.
In: Proc. Int. Symp. Modern Agriculture – Achievements and
Prospects. Chisinau. p. 168-172.
DUCA M., GLIJIN A., LUPASCU V. and ROTARENCO V. 2009.
Molecular screening of sunflower resistance to broomrape (Orobanche
cumana Wallr.), race E. Journal of the Academy of Sciences, Life
Sciences. 3(309): 81-88.
Audieri parlamentare, februarie 2010 ©
44
FIELDS
FENOTIPIC SCREENING OF THE RESISTANCE
TO BROOMRAPE
POTS
GREEN HOUSES
PETRI DISHES
MSU
UnASM
UnASM
AMG-Agroselect
AMG-Agroselect
SELECTIA
UnASM
AMG-Agroselect
NOVASEM
DUCA M., GLIJIN A., PACUREANU-JOITA M., ACCIU A. and GISCA I. 2013. Impact
of Orobanche cumana on sunflower cultivars on natural infested fields in Republic of
Moldova. p. 282. In: Proc. Int. Plant Breeding Congress. Antalya, Turkey.
DUCA M., GLIJIN A., LUPASHCU V., ROTARENCO V., TELEUTA A., ROTARU T.
2011. Phenotypic screening of broomrape resistance at sunflower genotypes cultivated
in Republic of Moldova. p. 20. In: Proc. Int. Symp. on Broomrape (Orobanche
spp.) in Sunflower, Chisinau.
BUCIUCIANU, M., I. PETCOVICI, E. LUNGU et al. 2009. Crearea materialului initial si
ameliorarea in baza lui a hibrizilor semitardivi de floarea-soarelui, toleranti la atacul
principalelor patogeni. p. 200-202. In: Proc. Int. Conf. Integrated protection of field
crops, Balti.
PETCOVICI I. P. 2008. Sozdanie ishodnogo materiala podsolnecinika, imunnogo k
bolezniam. p. 94-103. In: Proc. Int. Conf. Crops in modern agriculture. Balti. (in
Russian).
SHAROVA P. G. 1969. Selectia podsolnecinika na imunitet k agresivnim rasam
moldavskoi populiatii zarazihi. p. 28-31 In: P. G. Sharova, Trudi V Vsesoiuznogo
sovescianiia po imunitetu rastenii. Kiev. (in Russian).
Resistant
Tolerant
Susceptible
19%
9%
72%
10 Rezistente
FS9, FS12,
FS17, FS21,
FS26, FS27,
ASC1,
Alcazar F1,
Favorit F1, Turbo F1
5 Tolerante
FS4, FS8,
FS11, ASC2,
Xenia ♂
Sensibile
FS10
37 Foarte sensibile
FS: 1-3, 5-6,
13, 15, 18-20, 22,
23, 25; ASC: 3-6, 8-11;
Xenia: ♀, F1;
Valentino: ♂, ♀, F1;
Drofa: ♂, ♀, F1;
Hibrizii: Olea,
Oxana, Performer
CLASIFICAREA GENOTIPURILOR DE FLOAREA-SOARELUI
DUPĂ FRECVENŢA ATACULUI CU LUPOAIE
Sistemul rasicul la
genotipul reziztent ASC1
Dezvoltarea fitoparazitului pe rădăcinile
Helianthus annuus L.
(hibrizii Xenia (A) şi Valentino (B)
6 Susceptibile (Drofa ♀; ASC7; FS7; FS14; FS16; FS24)
VARIAŢIA GRADULUI DE INFECTARE CU LUPOAIE ÎN FUNCŢIE DE
PARTICULARITĂŢILE FIZICO-CHIMICE ALE SOLULUI
Localităţile
Parametrii solului
Intensitatea atacului,
% Frecvenţa
atacului, % pH
% mg/100 g me/
100 g
>10 5-10 1-4 Humus N total NH4 NO3 P2O5 K2O Ca
Telenesti, Verejeni - 20 80 10 7.50 2.25 0.24 0.6 18.1 5.9 60.6 22.00
Telenesti, Cazanesti 1 15 84 10 8.00 1.85 0.31 0.7 3.7 9.3 64.0 22.90
Telenesti, Brinzeni 30 20 50 25 7.80 2.95 0.28 0.9 7.4 2.7 51.6 21.60
Orhei, Ciocilteni 8 17 75 40 7.80 3.65 0.26 0.9 1.8 1.5 29.0 22.60
Mun. Chisinau - 50 50 30 7.30 3.70 0.20 0.6 1.6 1.2 28.2 21.10
Hincesti, Buteni 5 20 75 30 8.00 3.05 0.19 0.6 4.9 1.5 30.2 27.60
Hincesti, Sarata-
Mereseni - - 100 10 7.40 2.65 0.26 1.1 1.0 3.8 26.6 16.80
Hincesti, Fundul-
Galbenei - - 100 5 7.40 2.65 0.16 0.6 5.8 1.4 25.8 20.25
Straseni, Rassvet - - 100 10 7.90 4.05 0.16 0.5 3.9 1.9 50.0 15.10
Localitatile
Parametrii solului
Intensitatea atacului,
% Frecventa
atacului, % pH
% mg/100 g me/
100 g
>10 5-10 1-4 Humus N total NH4 NO3 P2O5 K2O Ca
Leova, Cazangic - 30 70 70 7.45 3.30 0.15 0.6 1.4 1.3 21.4 13.25
Stefan-Voda, Ermoclia - 20 80 10 8.20 3.45 0.22 1.1 29.3 3.7 24.6 27.90
Comrat, Chirsova - - 100 10 8.30 2.30 0.18 0.6 4.3 1.6 24.6 19.10
Comrat, Besalma - - 100 20 8.20 2.50 0.18 0.9 24.4 4.0 29.4 18.00
Comrat, Svetlii - - 100 10 8.25 2.30 0.18 0.7 3.9 1.8 23.4 18.50
Basarabeasca,
Carabetovca
60 30 10 60 8.30 2.80 0.18 0.7 11.4 1.4 19.0 16.90
Cahul, Alexanderfeld 50 50 - 70 7.75 3.45 0.16 0.9 2.0 4.2 32.0 23.10
Cahul, Manta 10 30 60 80 7.75 3.25 0.24 0.9 2.3 3.9 19.0 23.10
Cahul, Slobozia-Mare 40 30 30 80 7.90 3.25 0.24 1.0 2.1 8.0 25.0 19.25
Cahul, Crihana-Veche - - 100 30 7.80 2.10 0.21 0.8 7.4 4.8 59.4 17.75
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
20 30 40 50 60 20 30 40 50 60 20 30 40 50 60 20 30 40 50 60 20 30 40 50 60 20 30 40 50 60
Xenia m Xenia t Xenia F 1 V alentino m V alentino t V alentin F 1
s eminţe ataş ate tuberculi tuberculi cu rădăc ini adventive lăs tari s ubterani lăs tari aerieni
Nr.
ata
şam
ente
per
pla
ntă
♂ ♂ ♀ ♀
zile
DINAMICA DEZVOLTĂRII Orobanche cumana Wllar
30 zile 40 zile D
E
B
C
A 15 zile
50 zile F
G
H
60 zile
48
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100FS
1FS
2FS
3FS
4FS
5FS
6FS
7FS
8FS
9FS
10
FS 1
1FS
12
FS 1
3FS
14
FS 1
5FS
16
FS 1
7FS
18
FS 1
9FS
20
FS 2
1FS
22
FS 2
3FS
24
FS 2
5FS
26
FS 2
7
ASC
1A
SC2
ASC
3A
SC4
ASC
5A
SC6
ASC
7A
SC8
ASC
9A
SC10
ASC
11
Tur
bo F
1A
lcaz
ar F
1Fa
vori
t F1
Ole
a F1
Oxa
na F
1Pe
rfor
mer
F1
Dro
fa ♀
Dro
fa ♂
Dro
fa F
1V
alen
tino
♀V
alen
tino
♂
Val
enti
no F
1X
enia
♀X
enia
♂X
enia
F1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
o
%
F R E C V E N Ţ A A T A C U L U I
0
2
4
6
8
10
12
14
FS1
FS 2
FS 3
FS 4
FS 5
FS 6
FS 7
FS 8
FS 9
FS 1
0FS
11
FS 1
2FS
13
FS 1
4FS
15
FS 1
6FS
17
FS 1
8FS
19
FS 2
0FS
21
FS 2
2FS
23
FS 2
4FS
25
FS 2
6FS
27
ASC
1A
SC 2
ASC
3A
SC 4
ASC
5A
SC 6
ASC
7A
SC 8
ASC
9A
SC 1
0A
SC 1
1
Turb
o F1
Alc
azar
F1
Favo
rit F
1O
lea
F1O
xana
F1
Perf
orm
er
Dro
fa ♀
Dro
fa ♂
Dro
fa F
1V
alen
tino
♀V
alen
tino
♂
Val
entin
o F1
Xen
ia ♀
Xen
ia ♂
Xen
ia F
1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 1 6 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
I N T E N S I T A T E A A T A C U L U I
240 de secțiuni
Analiza histochimică a prezenței ligninei (A) și calozei (B)
A.
B.
540 probe, congelate și stocate pentru studiul
expresiei genelor
Genotipuri
Cod
genotip
Creșterea pe fundal de infecție cu O. cumana (zile)
Stadiu imediat de apărare a
plantei gazdă
Stadiu de apărare activă a
plantei gazdă
Stadiu de
stabilizare și
acomodare a
plantei gazdă
Etapa de penetrare a
rădăcinilor gazdei de
haustoriul lupoaiei
Etapa de
formare a
tuberculilor
Etapa de
formare a
lăstarului
subteran de
lupoaie
Etapa de
dezvoltare a
lăstarului
aerian de
lupoaie
18 21 35 53 63
C1 I1 C2 I2 C3 I3 C4 I4 C5 I5
RE
ZIS
TE
NȚ
I
Favorit (Or6)
F1
(rasa F) R1 R1C1 R1I1 R1C2 R1I2 R1C3 R1I3 R1C4 R1I4 R1C5 R1I5
LC-1093A
(♀Favorit)
(rasa F) R2 R2C1 R2I1 R2C2 R2I2 R2C3 R2I3 R2C4 R2I4 R2C5 R2I5
Pioner F1
(PR64 LE20)
(rasa G-H) R3 R3C1 R3I1 R3C2 R3I2 R3C3 R3I3 R3C4 R3I4 R3C5 R3I5
LC-5542
(rasa H) R4 R4C1 R4I1 R4C2 R4I2 R4C3 R4I3 R4C4 R4I4 R4C5 R4I5
SE
NS
IBIL
Performer F1
(sensibil) S1 S1C1 S1I1 S1C2 S1I2 S1C3 S1I3 S1C4 S1I4 S1C5 S1I5
LG5525
(LMD1)
(sensibil) S2 S2C1 S2I1 S2C2 S2I2 S2C3 S2I3 S2C4 S2I4 S2C5 S2I5
Teza de doctorat drd. Olesea Tabără
STIDIUL PARTICULARITĂŢILOR MORFO-ANATOMICE ALE
SISTEMULUI H. ANNUUS L. - O. CUMANA WALLR.
50
Specificitatea interacţiunii dintre gazdă şi
parazit, în baza testului de germinație
PRECONDIȚIONARE
45 populații
colectate din diferite
regiuni geografice
ale Moldovei
4 repetiții
biologice, cîte 70
semințe
GERMINAREA, cu utilizarea exudatelor a 5
genotipuri de floarea soarelui cu diferit grad de
afinitate pentru lupoaie:
genotipul sensibil de floarea-soarelui (LMD1)
şi exudate ale liniilor diferențiatoare pentru:
rasa E (LMD2);
rasa F (LC 1093A);
rasa G (LMD3);
rasa H (LG5661).
Analiza microscopică și fotodocumentarea în
3 puncte de creștere – a 8-a, a 10-a și a 13 zi
de contact exudat-semințe de lupoaie
Cca 2500 de foto
Cca 50 de probe, congelate și stocate
pentru studiul expresiei genelor
AFINITATEA POPULAȚIILOR DE LUPOAIE COLECTATE DE PE
TERITORIUL REPUBLICII MOLDOVA
Audieri parlamentare, februarie 2010 ©
51 RESEARCH OF BROOMRAPE FROM DIFFERENT REGIONS
Moldavian VNIIMK Station
Edinet, Balti, Chisinau,
Slobozia, Causeni, Vulcanesti 6
5
12
14 AMG-Agroselect
Soroca, Anenii-Noi (RM) ,
Tulcea (Romania)
SHAROVA P. G. 1977. Zaraziha – opasnii parazit
podsolnecinika. Chisinau. (in Russian).
GLIJIN A., ACCIU A. and MITA E. 2011. Effect of
root exudation from different sunflower
genotypes on broomrape seeds germination. p.
23. In: Proc. Int. Symp. on Broomrape
(Orobanche spp.) in Sunflower, Chisinau,
Republic of Moldova.
GLIJIN A., ACCIU A. and GISCA I. 2014.
Molecular analysis of Orobanche cumana
Wallr. from different geographical regions. In:
Proc. 3rd Int. Symp. Conserv. of Plant
Diversity, Chisinau 22-24 May, 2014, p. 16.
GISCA I., ACCIU A., GLIJIN A. and DUCA M.
2013. Highly virulent races of sunflower
broomrape in the Republic of Moldova. In:
Proc. Biotech. Congress. Current Opinion in
Biotech. 24(1):S132.
Audieri parlamentare, februarie 2010 ©
EVOLUTION OF Orobanche cumana WALLR. IN THE RM
Third Symposium on Broomrape (Orobanche spp.) in Sunflower,
June 3 – 6, 2014, Córdoba, Spain
B C
E F-H
Race B,
Sharova P. G.
Moldavian VNIIMK
Station
Race C,
Burlov, 1976,
Antonova, 1978,
VNIIMK
Race E,
Popescu V.
Moldova State
University
Races D, E, F and G,
Gisca I., Duca M.,
Glijin A., Pacureanu-
Joita M.
University of ASM,
AMG-Agroselect,
NARDI
1968 1970
2004
2005 - 2014
41 populații O. cumana
Nord Centru Sud
5 7 9
1 2 1
1 1 2
1 - 3
- 1 2
- 1 2
< E
E
F
G
G+
H
Rase:
STUDIUL PARTICULARITĂŢILOR MORFO-ANATOMICE ȘI FIZIOLOGICE
ALE SISTEMULUI H. ANNUUS L. - O. CUMANA
Teza de doctorat drd. Acciu Adriana
54
Elena Bontea
Floarea-soarelui, 1965
IDENTIFICAREA TRANSGENELOR Atesatarea prezenţei transgenelor la liniile de tutun
242 pb
`(bar)
2 7A 13 14 19A 24 6 25 5 8 10 30
A
B
44 kDa
(CsLFY)
23 kDa
(PAT)
44 kDa
(CsLFY)
23 kDa
(PAT)
56
MOŞTENIREA GENEI bar
57
Promotorul CaMV 35S
Transgena întrodusă
NOS poly-A
Gena hpt II Gena α lacZ
NOS poly-A
Exemplu de secvenţă de T-ADN inclusă în genomul tutunului
200 pb
100 pb
Rezultatul screening-ului după secvenţa NOS-teminator
M – marker, 1 – test negativ, 2 – GA-21 (test pozitiv), 3 – porumb,
4 – tomate „Gloria”, 5 – tomate “Băcioi”, 6 – tomate “Ialoveni”,
7 – cartofi „Irga”
M 1 2 3 4 5 6 7
Primer Secvenţa nucleotidică Concentraţia Tm % GC
Sens GAATCCTGTTGCCGGTCTT 30 pmol/µl 60,07 52,63
Antisens TTGCGCGCTATATTTTGTTTT 30 pmol/µl 59,78 33,33
Primer sens şi antisens pentru secvenţa NOS-terminator
SCREENING-UL OMG
DUPĂ SECVENŢA NOS-TERMINATOR
• GENE ŞI REŢELE DE GENE IMPLICATE ÎN TRANSDUCŢIA
SEMNALELOR IN SILICO
Laboratorul BIOINFORMATICĂ
• SEMNALIZAREA RETRO- ŞI ANTEROGRADĂ LA
INTERACŢIUNEA NUCLEU-MITOCONDRII
Laboratorul GENOMICĂ
• MECANISME GENETICO-MOLECULARE DE INTERACŢIUNE
ÎN CADRUL DIFERITOR PATOSISTEME
Laboratorul PROTEOMICĂ
• POLIMORFISMUL GENETIC LA DIVERSE CULTURI AGRICOLE ȘI
PLANTE DIN FLORA SPONTANĂ A RM
Temă nefinanţată, Catedra BIOLOGIE
DIRECŢII NOI DE CERCETARE ÎN DOMENIUL
GENETICII FIZIOLOGICE
C E L U L A R Analize citologice și histologice
Microscopie optică și electronică
O R G A N I S M Integrarea datelor
Rețele de gene, rețele proteice
CBM, UnAŞM Cercetări fundamentale
biochimice
genetice
fiziologice histologice
sociologice observații
PRODUCĂTORI Recomandări obținere de hibrizi rezistenți;
startegii de prevenire a infecției
morfologice
AGROSELECT
M O L E C U L A R Profile genetice SSR, ISSR
Expresia genelor Real-Time PCR
O R G A N Activitatea enzimatică
SOD, PAL, PPO
P O P U L A Ț I O N A L Distribuția geografică a raselor O.
cumana Wallr.
Variabilitatea intra- și
interpopulațională
LIMAGRAIN
60
Mulţumesc
pentru atenţie !