Aplicação e comparação de diferentes metodologias de extração na determinação das atividades...
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Aplicação e comparação de diferentes metodologias de extração na determinação das atividades
antimicrobianas e antioxidantes de extratos vegetais da Campomanesia sessiliflora O. Berg.
Mestrando:Felipe Francisco Bittencourt Junior
• Graduado em Biomedicina pelo Centro Universitário da Grande Dourados (2010).
• Mestrando em Recursos naturais pela Universidade Estadual do Mato Grosso do Sul (Mar/2012-Mar/2014).
• Linha de pesquisa: Bioprospecção.
• Orientador: Prof. Dr. Euclésio Simionatto (UEMS).
• Co-orientador: Prof. Dr. Marcus Vinícius Pimenta Rodrigues (UNOESTE).
Bioprospecção:
“Método de localizar, avaliar e explorar sistemática e legalmente a diversidade de vida existente em
determinado local. Tem como objetivo principal a busca de recursos genéticos e bioquímicos para fins
comerciais”. (FARNSWORTH, N. 1997)
Genética: Manipulação gênica. Bioprodutos: hormônios vegetais. Química: biodiesel. Cosmetologia: Descoberta e manipulação de novas
substâncias em prol da estética. Bioquímica: princípios ativos. Farmacologia/microbiologia: síntese de novos
fármacos/tratamentos. “Cerca de 25% dos medicamentos existentes foram elaborados
com ingredientes ativos extraídos de plantas”. REID et al (1993)
Aplicações
Principais métodos de extração de substâncias:InfusãoMaceraçãoDestilaçãoUso de solventes
Antimicrobianos Antioxidantes Antinflamatórios Hipoglicemiantes Herbicidas: Curatella americana L. (Lixeira)“O extrato diclorometanólico da folha da lixeira apresentou um
elevado potencial fitotóxico, em concentrações semelhantes às utilizadas pelos herbicidas comerciais. (BARBOSA, Cecília.Soares et al.)
Propriedades comumente exploradas:
Popularmente conhecida como Guavira,Guabiroba.
Nativa do Brasil. Pouco exigente em relação
ao solo/clima. Consumida popularmente
“in natura”, em sorvetes ou na cachaça.
Campomanesia sessiliflora
AdstringenteAntidiarréica FrutosHipoglicemianteRelaxante muscularAntinflamatório FolhasAnalgésico
Propriedades conhecidas
Comparar a eficiência de extração dos solventes empregados.
Avaliar a atividade antioxidante e antimicrobiana dos extratos das folhas de Campomanesia sessiliflora O. Berg.
Fornecer base para futuras pesquisas.
Objetivos
Avaliação da atividade antimicrobiana (UNIGRAN)
Avaliação da atividade antioxidante (Unidade de Naviraí)
Bioautografia
Metodologia
Solventes empregados:
Hexano: (apolar)Acetato de etila: (apolar)Clorofórmio: (apolar)Metanol: (polar)
Metodologia
Preparação dos extratos
Evaporador rotativo
Método de difusão em ágarTeste Qualitativo
Reativação das bactérias. Semeadura e padronização (escala 0,5
mac Farland). Cobertura da superfície do ágar com
solução bacteriana padrão. Perfuração do ágar e inoculação do extrato
(concentrações de 200ug/mL e 100ug/mL).
Incubação em estufa (24h). Leitura dos resultados e comparação com
antibióticos padrão (gentamicina e ampicilina) e tabela.
Concentração Inibitória Mínima
Bactérias utilizadas:Concentrações de extrato
Escherichia coli Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Streptococcus pyogenes Proteus mirabilis Enterococcus faecalis
• 100 ug/mL• 50ug/mL• 25ug/mL• 12,5ug/mL• 6,25ug/mL• 3,12ug/mL• 1,56ug/mL• 0,75ug/mL• ...
Teste Quantitativo
Determinação da MIC
Baseados na espectrofotometria
•Diferença de absorbância
•Solução teste – solução padrão (controle)
Testes antioxidantes
Indica o grupo de substâncias com atividade antimicrobiana presentes no extrato.
Borifar substância com cultura bacteriana em placa cromatografada.
Incubar por 24h. Corar com eosina. Leitura do cromatograma. A inibição é indicada por
clareamento
Bioautografia
Resultados já obtidosExtrato hexânico:
Não ocorreu atividade inibitória
Extrato de acetato de etila:
Atividade inibitória perante:S. aureus: 35 mmP. aeruginosa: 37 mmE. faecalis: 32 mmP. mirabilis: 40 mm
OBS* Relativos à concentração de 200ug/mL
Resultados
Inibição do crescimento de Staphylococcus aureus após o mesmo ser confrontado com o extrato de acetato de etila da Campomanesia sessiliflora
O. Berg.
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MOKBEL, M.S.; HASHINAGA, F. Evaluation of the antioxidant activity of extracts from buntan (Citrus grandis Osbeck) fruit tissues. Food Chemistry, v. 94, n. 4, p. 529-534, 2006
Referências
Agradecimentos