ANTYBIOTYKI. LEKOWRAŻLIWOŚĆ III

Część teoretyczna do ćwiczeń z Diagnostyki Zakażeń II

mgr Karolina Rudnickarudnicka@biol.uni.lodz.pl

Katedra Immunologii i Biologii InfekcyjnejPracownia Gastroimmunologii, p.278 tel. 42 635-45-41

Inne szybkie metody oceny antybiotykowrazliwości

2. Testy lateksowe – np. do oceny MRSA – MAST LATEX-MRSA; zawiesina bakterii podejrzanej o MRSA jest odpowiednio przygotowana (ekstrakcja w odpowiednim reagencie, gotowanie); supernatant jest badany na obecność białka PBP’ za pomocą kulek latexu opłaszczonych przeciwciałem monoklonalnym anty PBP’. Utworzenie aglutynatu = wynik dodatni. MAST DIAGNOSTICS.[Ryc.2]

1. MAST – ID –Pierścienie identyfikacyjne zawierające zestawy krążków z antybiotykiem dotowane do wykonania odpowiednich antybiogramów dla Haemophilus spp., S.pneumoniae, Staphylococcus, Micrococcus . MAST DIAGNOSTICS. [Ryc. 1]

Ryc. 1

Ryc. 2

Fot. P

.Skibińska/A

.Niew

iadomska

MRSAMSSA

3. CHROM-ID-Agar – podłoża chromogenne do identyfikacji mechanizmów u określonych gatunków bakterii. Pozwala na identyfikację drobnoustroju i mechanizmu oporności na podstawie uzyskanej barwy kolonii. Odczyt po 18-24h.Nie jest to metoda referencyjna. Może być metodą przeglądową. [Ryc 3]

- CHROM-ID MRSA (S.aureus) - CHROM-ID ESBL (Klebsiella, Proteus, E.coli)

Ryc. 3

Inne szybkie metody oceny antybiotykowrazliwości

4. Systemy ATB – test wrażliwości na antybiotyki (20-30 antybiotyków ) przeprowadza się na pasku ze studzienkami zawierającymi dany antybiotyk w dwóch krytycznych stężeniach (wysokim i niskem) . Do studzienek wprowadza się po 135ul mieszaniny zawiesiny drobnoustrojów w podłożu komercyjnym i inkubuje 18-24h. Odczyt polega na zaobserwowaniu zmętnienia w studzienkach dla każdego stężenia i każdego antybiotyku. DOSTĘPNE SĄ TESTY RAPID ATB (inkubacja 4-18h) ; oraz systemy automatyczne do odczytu pasków

5. Zautomatyzowane systemy – VITEC 2 – automatyczny system do identyfikacji drobnoustrojów i oznaczania ich lekowrażliwości.

• manualne przygotowanie inoculum • panele z substratami biochemicznymi (testy identyfikacyjne) i antybiotyki wraz z podłożem (testy

antybiogramowe)• system dokonuje odczytu każdej karty co 15 minut• otrzymywanie wyników tego samego dnia, średnio od 6-8 godzin.

Inne metody oceny antybiotykowrazliwości

MAST– ID –Pierścienie identyfikacyjne zawierające zestawy krążków z antybiotykiem dotowane do wykonania odpowiednich antybiogramów dla Haemophilus spp., S.pneumoniae, Staphylococcus, Micrococcus . MAST DIAGNOSTICS. [Ryc. 1]

• Podłoże przeznaczone do wykrywania i wstępnej identyfikacji izolatów bakteryjnych z rodziny Enterobacteriaceae o fenotypie ESBL.

• Zawiera mieszaninę antybiotyków (m.in. cefpodoksym).

• Kolonie E. coli koloru od różowego do koloru ciemnoczerwonego wina

• Pałeczki grupy KESC (Klebsiella spp., Enterobacter spp., Serratia spp., Citrobacter spp.) - kolonie barwy od zielone do niebieskiej

• Pałeczki grupy Proteus, Morganella - kolonie barwy brunatnej

Ocena ESBL przy pomocy podłóż typu ChromAgar

Inne szybkie metody oceny antybiotykowrażliwości

Zautomatyzowane systemy – VITEC 2 – automatyczny system do identyfikacji drobnoustrojów i oznaczania ich lekowrażliwości.

• otrzymywanie wyników tego samego dnia, średnio od 6-8 godzin.

• substraty są dobrane w zestawy odpowiednie dla rodzaju oznaczanego drobnoustroju. Każdy z testów zawiera 64 dołki, w których znajdują się substraty biochemiczne (testy identyfikacyjne) i antybiotyki wraz z podłożem (testy antybiogramowe).

• do każdej karty, umieszczonej w oddzielnym opakowaniu dołączone są rurki doprowadzające zawiesinę bakteryjną.

• przygotowanie inoculum odbywa się manualnie• napełnianie kart, ich inkubacja i odczyt odbywa się w aparacie• karty są umieszczane w komorze inkubacyjno-pomiarowej

aparatu. • system dokonuje odczytu każdej karty co 15 minut.• wyniki testów lekowrażliwości są podawane w postaci

najmniejszych stężeń hamujących (MIC) oraz kategorii (S,I,R).

AKTYWNOŚĆ ANTYBIOTYKU

FARMAKOKINETYKA (PK) – kinetyka dystrybucji leku w organizmie czyli profil absorbcji, stężenia w surowicy, dystrybucji do tkanek, eliminacji.

CZYLI TO „CO ORGANIZM ROBI Z LEKIEM”

FARMAKODYNAMIKA (PD)– biochemiczny i fizjologiczny efekt działania leku; odpowiedź organizmu na lek. Zależność od czasu, zależność od stężenia, efekt poantybiotykowy.

CZYLI TO „CO LEK ROBI Z ORGANIZMEM”

Model PK / PD

- zależność od stężenia i czasu- efekt poantybiotykowy

• Cel: maksymalny czas powyżej MIC

• Dawkowanie: powtórna wysoka dawka, skrócenie odstępów między dawkami lub ciągły wlew

• Grupa antybiotyków: β-laktamy, makrolidy, linezolid

MODEL PK/PD – ZALEZNOŚĆ OD CZASU

Parametry indeksów farmakodynamiki leku:

T>MIC – tj. czas pomiędzy dawkami, w jakim stężenie leku w surowicy jest wyższe od MIC.Cmax/MIC- maksymalne stężenie powyżej wartości MIC

MODEL PK/PD – ZALEZNOŚĆ OD CZASU

• Cel: maksymalne stężenie (iloraz Cmx/MIC)• Dawkowanie: jednorazowa,

wysoka dawka• Grupa antybiotyków: β-

aminoglikozydy