Antiseptik, Desinfektan Dan Thermal Death Time

LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI INDUSTRI

PRAKTIKUM

ANTISEPTIK DAN DESINFEKTAN

THERMAL DEATH TIME

Dibuat oleh:

Yesaya Reuben Natanael

(2313100146)

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI TEKNIK

JURUSAN TEKNIK KIMIA

FAKULTAS TEKNOLOGI INDUSTRI

INSTITUT TEKNOLOGI SEPULUH NOPEMBER

SURABAYA

2015

2

Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Teknik Kimia FTI-ITS

Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)

LAPORAN RESMI

ANTISEPTIK, DESINFEKTAN DAN THERMAL DEATH TIME

I. Tujuan

I.1. Antiseptik dan Desinfektan

Tujuan dari percobaan antiseptik dan desinfektan ini adalah untuk mengetahui pengaruh

antiseptik dan desinfektan terhadap pertumbuhan mikrooganisme

1.2. Thermal Death Time

Tujuan dari percobaan thermal death time ini adalah untuk mengetahui waktu terpendek

untuk membunuh mikroorganisme pada suhu dan kondisi tertentu.

II. Pengamatan

II.1 Antiseptik dan Desinfektan

Tabel II.1 Hasil Pengamatan Percobaan Antiseptik pada Media PDA

Jenis

Antiseptik

Waktu

Pengamatan

Jenis Jamur

Trichoderma viridae Rhizopus oligosporus

Dettol

Handwash

24 jam Blangko

Blangko

3



Keterangan:

- Diameter kertas saring

- Zona bebas bakteri

- Warna media

- Warna zona bebas

- Keterangan tentang

koloni bakteri

1,9 cm

2 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

Menyebar merata

1,9 cm

3,5 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

Menyebar merata

48 jam Blangko

Blangko

4



Keterangan:



- Warna media

- Warna zona bebas


koloni bakteri

1,9 cm

5 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

Tidak merata penyebaranya

1,9 cm

3,5 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

Menyebar merata

Tabel II.2 Hasil Pengamatan Percobaan Desinfektan pada Media PDA

Jenis

Desinfektan

Waktu

Pengamatan

Jenis Jamur

Trichoderma viridae Rhizopus oligosporus

24 jam Blangko

Blangko

5



Keterangan:



- Warna media

- Warna zona bebas


koloni bakteri

1,9 cm

4 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

Menyebar merata

1,9 cm

3 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

Menyebar merata

48 jam Blangko

Blangko

Keterangan:



- Warna media

- Warna zona bebas

1,9 cm

4,5 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

1,9 cm

2,8 cm

Kuning keputihan

Kuning keputihan

6




koloni bakteri

Menyebar merata Menyebar merata

II.2 Thermal Death Time

Tabel II.3 Percobaan Thermal Death Time pada Suhu 65C, t0 = 0

Run Kotak

Total Jumlah Sel

/ Kotak A B C D E

1 3 2 4 5 2 16 3.33

2 3 1 4 3 2 13 2.6

3 2 2 4 4 1 13 2.6

8.53

Jumlah sel bakteri rata-rata = 8,53/3 sel / kotak = 2,843 sel / kotak

Jumlah sel bakteri = 71,075 sel / mm2

= 710,75 sel / mm3

Jadi jumlah sel bakteri pada t0 =7,1075 x 105 sel / ml sampel

Tabel II.4 Percobaan Thermal Death Time pada Suhu 65C, t1 = 5 menit

Run Kotak

Total Jumlah Sel

/ Kotak A B C D E

1 2 1 5 3 1 12 2,4

2 1 1 5 2 1 10 2

3 2 1 4 2 1 10 2

6,4



=533.5 sel / mm3

Jadi jumlah sel bakteri pada t1 = 5,333 x 105 sel / ml sampel

7




Run Kotak

Total Jumlah Sel

/ Kotak A B C D E

1 1 0 1 1 1 4 0,8

2 0 1 0 0 0 1 0,2

3 1 1 1 2 0 5 1

2

Jumlah sel bakteri rata-rata = 2/3 sel / kotak = 0,66 sel / kotak


=166,67 sel / mm3



Run Kotak

Total Jumlah Sel

/ Kotak A B C D E

1 2 1 1 1 2 7 1,4

2 2 2 1 1 1 7 1,4

3 2 1 1 1 3 8 1,6

4,4



= 366,667 sel / mm3



Run Kotak

Total Jumlah Sel

/ Kotak A B C D E

1 1 0 1 1 2 5 1

2 1 0 1 1 1 4 0,8

3 1 2 1 0 1 5 1

8





= 233,3 sel / mm3

Jadi jumlah sel bakteri pada t4 = 2,33 x 105

sel / ml sampel

Tabel II.8 Data Percobaan Thermal Death Time sebagai Acuan Pembuatan Grafik

Waktu (menit) Jumlah sel bakteri Log (jumlah sel

bakteri)

% Kematian Rata-rata /

menit

0 7,1075 x 105 5,85 0

5 5,33 x 105 5,7267 0,422

10 1,667 x 105 5,222 1,0735

15 3,667 x 105 5,564 0,326

20 2,33 x 105 5,4674 0,4125

III. Pembahasan

III.1. Antiseptik

Tujuan dari percobaan antiseptik ini adalah untuk mengetahui pengaruh antiseptik pada

pertumbuhan mikroorganisme. Pada era sebelum ditemukan subjek mikrobiologi, bahan kimia telah

digunakan secara luas pada masa itu untuk mengontrol terjadinya infeksi pada luka terbuka dan

penyebaran penyakit menular. Penggunaan anggur dan cuka telah banyak digunakan untuk

penanganan terhadap luka. Kemudian pada tahun 1836, Wallace menggunakan iodin sebagai zat

antiseptik, namun iodin dapat menyebabkan iritasi sehingga pada 1847, Robet Clover menggunakan

iodoform. Namun hingga ini penggunaan iodin sebagai antiseptik banyak digunakan pada kegiatan

medis maupun aktivitas sehari-hari.

(Seth, 2008)

Desinfektan adalah zat antimikrobial yang membunuh mikroorganisme, namun tidak

membunuh sporanya dan digunakan pada benda mati. Antiseptik adalah suatu zat antimikrobial

yang banyak digunakan pada permukaan kulit makhluk hidup maupun membran mukus. Antiseptik

dibedakan dengan zat anti-microbial lain seperti desinfektan, sterilan, dan biosida. Antiseptik

9



merupakan zat yang membunuh dan menghambat pertumbuhan makhluk hidup pada jaringan hidup,

seperti kulit.

(Franklin, 2006)

Pada percobaan kali ini, langkah pertama ialah mengisi tabung reaksi dengan media yang

digunakan. Pada percobaan kali ini, media yang digunakan ialah media PDA. PDA, atau Potatoes-

Dextrose Agar adalah suatu media dari bahan dasar kentang dan dextrose. Media PDA sangat cocok

digunakan untuk mengembangbiakkan fungi dan molds. Secara umum PDA karena berbahan dasar

kentang, maka ia mengandung potato, dextrose, air dan juga agar.

(Prescott,2002)

Langkah berikutnya ialah mensterilkan semua peralatan beserta media yang akan digunakan.

Sterilisasi merupakan suatu metode untuk membunuh semua mikroorganisme agar didapatkan suatu

keadaan yang sterill. Tujuan proses sterilisasi adalah agar pada saat inokulasi, tidak terjadi

kontaminasi oleh mikroorganisme lain. Proses sterilisasi dapat dilakukan dengan berbagai metode,

namun pada percobaan kali ini digunakan metode uap panas, dengan bantuan autoklaf. Autoklaf

adalah alat sterilisasi, di mana alat praktikum dipanaskan dengan uap aquades jenuh pada suhu 121

oC dan tekanan 15 psi, selama 15 menit. Pemanasan dilakukan pada suhu 121

0C ditujukan agar

dapat membunuh semua mikroorganisme, karena pada suhu ini, bakteri akan mati dengan uap panas

dan juga pada suhu ini spora tidak dapat hidup, dengan demikian sterilisasi akan berjalan maksimal.

Pemanasan dilakukan selama 15 menit, karena mikroorganisme dan endospore hanya dapat

bertahan selama maksimum 13 menit, maka dengan waktu 15 menit dapat dipastikan bahwa alat

akan steril. Pada saat cawan petri disterilkan, sudah terlebih dahulu dibungkus dengan kertas

pembungkus coklat dan untuk tabung reaksi perlu untuk disumbat dengan kapas. Tujuan pemberian

kertas pembungkus dan kapas ialah agar dalam cawan petri maupun tabung reaksi tidak termasuki

oleh air kondensasi dari proses sterilisasi, hal ini untuk mencegah air mengganggu media inokulasi

yang disterilkan.

(Prescott,2002)

Setelah proses sterilisasi, 6 tabung reaksi, yamg berisi media PDA dan pada kondisi media

dalam fase cair, jamur diinokulasikan. Jamur yang diinokulasi adalah Rhizopus oligosporus dan

Trichorderma viridae. Masing-masing jamur diinokulasikan pada tiga tabung reaksi. Selama proses

inokulasi, semua kegiatan harus dilakukan di dalam in case, dengan tujuan untuk mengurangi

kontaminasi dari udara ke dalam media. Pada inokulasi dengan menggunakan tabung reaksi, tabung

reaksi dengan induk biakan dipegang diantara jari telunjuk dan jari tengah dan tabung reaksi yang

10



akan diinokulasikan dipegang di antara jari tengah dan jari manis. Selanjutnya, sumbat kapas

dibuka dengan menggunakan jari manis dan jari tengah. Ujung tabung reaksi dipanaskan, lalu

didinginkan sejenak, setelah itu loop inokulasi dimasukkan ke dalam tabung biakan induk untuk

mengambil mikroorganisme. Kemudian bakteri di loop inokulasi ditusukan pada media yang akan

digunakan untuk inokulasi. Seluruh proses penggoresan tidak boleh merusak media agar. Setelah

dilakukan penusukan, loop inokulasi dipanaskan kembali dengan api. Pada proses inokulasi, jarum

ose dan mulut tabung reaksi dipanaskan dengan api, dengan tujuan untuk mensterilkan peralatan

inokulasi dari mikroorganisme lainya. Namun pemanasan dengan api hanya dapat membunuh

mikroorganisme yang melekat pada alat inokulasi, maka dari itu tetap disarankan untuk tetap

menutup tempat media dan tempat inokulasi agar tidak terkontaminasi mikroorganisme dari udara.

(Reiss, 2011)

Setelah jamur diinokulasikan, isi tabung reaksi dituang pada cawan petri dan dibiarkan

memadat. Satu cawan petri dari tiap jenis jamur yang diinokulasikan digunakan sebagai blanko dan

untuk dua cawan petri lainya digunakan untuk menguji antiseptik dan desinfektan. Pada cawan petri

yang digunakan untuk menguji antiseptik dan desinfektan, setelah media mulai memadat,

ditambahkan antiseptik atau desinfektan pada media. Penggunaan antiseptik atau desinfektan pada

percobaan ini dengan metode disk-diffusion, yaitu kertas saring yang berbentuk lingkaran

dicelupkan ke dalam antiseptik atau desinfektan dan ditempatkan pada media yang telah diinokulasi

oleh biakan. Jika zat antiseptik atau desinfektan tersebut bekerja, terdapat daerah bebas bakteri

terlihat di sekitar kertas saring, yang menunjukkan bahwa antiseptik atau desinfektan menghambat

pertumbuhan dan perkembangbiakan mikroba.

(Tortora, 2013)

Zat antiseptik yang digunakan adalah Dettol Handwash dan desinfektan yang digunakan

ialah Superpel. Masing-masing zat antiseptik atau desinfektan diletakkan pada cawan petri yang

berisi media yang telah diinokulasikan, pada setiap variabel jamur yang diamati, sehingga akan

dipelajari pengaruh zat antiseptic atau desinfektan yang berbeda pada jamur yang berbeda.

Setelah zat antiseptik telah diletakan pada biakan, biakan dan blanko diinkubasikan pada

suhu 30 oC selama 24 jam dan 48 jam. Setelah 24 jam diinkubasikan, dilakukan pengamatan. Pada

jamur Trichoderma viridae dengan antiseptik Dettol Handwash, jamur tumbuh mengelilingi kertas

saring, dan disekeliling kertas saring terdapat zona yang tidak ditumbuhi bakteri dengan diameter 2

cm. Pada antiseptik yang sama dengan jamur berbeda, yaitu Rhizopus oligosporus, didapatkan

bakteri tumbuh mengelilingi kertas saring dengan zona bebas bakteri berdiameter 3,5 cm

11



mengelilingi kertas saring. Untuk yang menggunakan desinfektan Super pell, pada jamur T. viridae

terdapat bakteri mengelilingi kertas saring, dan disekeliling kertas saring terdapat zona yang tidak

ditumbuhi bakteri dengan diameter 4 cm. Pada desinfektan yang sama dengan jamur berbeda, yaitu

Rhizopus oligosporus, didapatkan bakteri tumbuh mengelilingi kertas saring dengan zona bebas

bakteri berdiameter 3 cm mengelilingi kertas saring. Pada pengamatan 24 jam, blanko Rhizopus

oligosporus dan T. viridae mulai terlihat pertumbuhan walaupun pertumbuhanya belum signifikan

dari jamur tersebut.

Setelah inkubasi selama 24 jam, inkubasi pada suhu 30 oC dilanjutkan sampai 48 jam. Hasil

pengamatan pada 48 jam, secara umum jamur mulai tumbuh lebih baik sehingga zona bebas dari

antiseptik maupun desinfektan lebih terlihat jelas. Untuk jamur Trichoderma viridae dengan

antiseptik Dettol Handwash, jamur tumbuh mengelilingi kertas saring, dan disekeliling kertas saring

terdapat zona yang tidak ditumbuhi bakteri dengan diameter 5 cm. Namun pada jamur ini

pertumbuhan dari jamur tidak maksimal. Hal ini dapat terjadi karena pengocokan yang belum rata

pada saat inokulasi dan juga pada saat inokulasi suhu dari media terlalu panas sehingga jamur tidak

dapat tumbuh secara maksimal. Pada antiseptik yang sama dengan jamur berbeda, yaitu Rhizopus

oligosporus, didapatkan bakteri tumbuh mengelilingi kertas saring dengan zona bebas bakteri

berdiameter 3,5 cm mengelilingi kertas saring. Pada jamur ini, tidak terjadi perubahan yang

signifikan hanya saja pertumbuhan jamur lebih pekat. Untuk yang menggunakan desinfektan, pada

jamur T. viridae terdapat bakteri mengelilingi kertas saring, dan di sekeliling kertas saring terdapat

zona yang tidak ditumbuhi bakteri dengan diameter 4,5 cm. Dimana terjadi pembesaran zona bebas

dari jamur tersebut, hal ini dapat terjadi karena zat dari antiseptik tersebut meresap melalui media

dan mematikan jamur pada zona sebelumnya sehingga zona bebas bakteri meningkat. Pada

desinfektan yang sama dengan jamur berbeda, yaitu Rhizopus oligosporus, didapatkan bakteri

tumbuh mengelilingi kertas saring dengan zona bebas bakteri berdiameter 2,8 cm mengelilingi

kertas saring. Hal ini dapat terjadi karena jamur lebih merambat pada zona yang sebelumnya zona

bebas, dengan demikian zona bebas menjadi lebih kecil. Pada pengamatan 48 jam, blanko Rhizopus

oligosporus dan T. viridae terlihat pertumbuhan signifikan dari jamur tersebut.

Pada percobaan kali ini dapat disimpulkan bahwa kehadiran zat antiseptik dan desinfektan

menghambat pertumbuhan mikroorganisme, dimana antiseptik Dettol Handwash dan desinfektan

Superpel dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Namun bila hendak dibandingkan mana

yang lebih baik, dari hasil percobaan antiseptik memberikan hasil yang lebih baik yang ditunjukan

12



dengan lebih besarnya zona bebas dari antiseptik bila dibandingkan dengan yang menggunakan

desinfektan.

Antiseptik yang digunakan pada percobaan inialah Dettol Handwash. Dettol handwash

memiliki suatu kandungan aktif yaitu chloroxylenol. Chloroxylenol meruapak zat aktif yang dapat

menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada suatu bahan. Secara umum cara kerja

chloroxyenol ialah ia bekerja seperti pengganggu proton dari suatu mikroorganisme.

Mikroorganimse mengsekresi proton untuk menghasilkan sumber energi berupa ATP. Ketika

proton ini diganggu, maka mikroba tidak dapat menghasilkan ATP sehingga ia menjadi mati.

(Khatun, 2005)

Gambar III.1 Kandungan Dettol Handwash

Desinfektan yang digunakan ialah Superpel. Superpel memiliki kandungan aktif berupa

alcohol ethoxylate yang merupakan zat aktif yang dapat membunuh mikroorganisme. Alcohol

ethoxylate mengandung rantai etilen oxida yang terdapat gugus alkohol di dalamnya. Adapun rantai

dari alkohol ethoxylate adalah

Gambar III.2 Rantai Alkohol Ethoxyate

Alkohol ethoxylate memiliki kemampuan untuk membunuh bakteri dan kuman. Hal ini mengapa

desinfektan dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme.

(HERA, 2009)

Gambar III.3 Komposisi Superpel

13



III.2. Thermal Death Time

Percobaan Thermal Death Time ini bertujuan untuk mengetahui waktu terpendek yang

diperlukan untuk membunuh bakteri pada suhu dan kondisi tertentu. Pada industri pemrosesan

makanan, diperlukan perlakuan pada makanan tersebut untuk membunuh mikroorganisme patogen

pada makanan atau minuman namun tidak merusak nutrisi pada makanan tersebut. Thermal Death

Time digunakan untuk mengetahui lama waktu yang dibutuhkan untuk membunuh bakteri pada

suhu perlakuan tertentu. Nilai waktu ini diperoleh dengan cara menjaga mikroorganisme pada

temperatur konstan dan menentukan nilai waktu yang dibutuhkan untuk membunuh semua

mikroorganisme pada suhu yang telah ditentukan tersebut.

(Garg, 2010)

Langkah pertama pada percobaan ini adalah sterilisasi alat dengan alkohol 70%. Alkohol

70% merupakan zat antiseptik yang dapat membunuh mikroorganisme sehingga alat menjadi steril

dari mikroorganisme.

(Presscott, 2002)

Setelah sterilisasi, membuat larutan isotonik sol (1000 ml aquades dan 90 gram NaCl) pada

beaker glass. Setelah itu menginokulasikan, pada beaker glass, 1 loop ose oleh bakteri Escherecia

coli. Selanjutnya larutan yang sudah terdapat biakan ini dipindahkan pada 5 tabung reaksi yang

sudah disterilkan. Pada setiap tabung reaksi diisikan 10 ml larutan hipotonik sol.

Inokulasi dilakukan dalam larutan isotonik sol untuk mencegah terjadinya plasmolisis

apabila sel berada pada larutan yang hipertonik di mana air akan keluar dari sel bakteri dan bakteri

akan mengkerut dan terjadi runtuhnya dinding sel. Selain itu, apabila keadaan larutan berupa

hipotonik dibandingkan dengan keadaan di dalam sel (misalnya pada air suling), maka akan terjadi

plasmoptisis di mana air akan masuk ke dalam sel sehingga sel akan menggembung dan pecah.

Larutan isotonik sol dibuat untuk menciptakan keadaan lingkungan yang isotonik terhadap sel

bakteri sehingga baik plasmolisis maupun plasmoptisis tidak terjadi.

(Meliawati, 2009)

Langkah berikutnya ialah memanaskan tabung reaksi yang berisi larutan dengan

menggunakan water bath. Setiap tabung reaksi memiliki variable waktu pemanasan yang berbeda,

untuk tabung reaksi A, pemansan dilkukakan selama 5 menit, 10 menit untuk tabung reaksi B, 15

menit pada tabung reaksi C, dan 20 menit pada tabung reaksi D, sedangkan tabung reaksi E tidak

dipanaskan namun langsung diamati. Pemanasan dilakukan pada waterbath dengan suhu konstan

pada suhu 65oC.

14



Setelah dilakukan pemanasan, setiap sampel dari kelima tabung reaksi dilakukan suatu

pengamatan. Teknik yang digunakan ialah menggunakan direct microscopic count (DMC). Direct

Microscopic Count, secara umum digunakan untuk menghitung jumlah keseluruhan bakteri

misalnya pada suatu sampel makanan, seperti susu atau makanan kalengan. Perhitungan

mikroskopis langsung ini dilakukan dengan menggunakan mikroskop pada suatu object glass

khusus yang dapat digunakan untuk menghitung jumlah mikroba dalam suatu sampel. Object glass

khusus ini disebut hemasitometer. Kekurangan dari metode ini adalah dibutuhkan sel bakteri yang

cukup banyak per ml sampel, sekitar 10 juta sel bakteri/ml sampel, agar metode ini dapat memberi

perhitungan jumlah sel mikroorganisme yang akurat. Keuntungan dari metode ini adalah tidak

diperlukan waktu inkubasi sehingga metode penentuan jumlah sel ini banyak digunakan untuk

menghitung sel mikroba dalam sampel jika kecepatan waktu menjadi pertimbangan utama.

(Tortorra, 2013;Benson, 2001;Hayes,1992)

Counting chamber yaitu suatu alat yang digunakan dalam perhitungan jumlah

mikroorganisme dimana penghitungannya harus menggunakan mikroskop. Hemasitometer adalah

suatu alat untuk menghitung sel secara cepat dan digunakan untuk konsentrasi sel yang rendah.

Selain hemasitometer, adapula alat lain yang dapat digunakan yaitu Petroff-Hauser counting

chamber yang secara umum prinsip kerjanya serupa dengan hemasitometer. Dinamakan

hemasitometer karena alat ini pada mulanya diciptakan untuk menghitung sel darah. Hemasitometer

yang digunakan pada percobaan ini adalah hemasitometer Neubauer dengan kedalaman 0,1 mm.

Pada Hemasitometer Neubauer terdapat 2 ruang hitung, masing-masing terdapat 9 kotak besar

dengan luas 1 mm2. Pada kotak dibagian tengah, kotak dibagi menjadi 25 kotak berukuran sedang

dengan luas 0,04 mm2, dan kotak-kotak ini kemudian dibagi kembali menjadi 16 kotak kecil

berukuran 0,05 mm x 0,05 mm. Metode direct microscopic count dengan hemasitometer ini

digunakan untuk menghitung jumlah bakteri dalam suatu sel, namun pada metode ini, populasi

minimal dalam suatu sampel ialah 600 dan jumlah bakteri per kotak nya 5 sampai 15 sel saja,

dengan tujuan menjaga agar perhitungan tetap akurat.

(Aneja, 2003;Laboffe,2010; Tortorra, 2013)

15



Gambar III.4. Hemasitometer dan Deck Glass

Gambar III.5. Pembagian ruang hitung pada hemasitometer Neubauer

Pada hasil pengamatan, dapat diamati bahwa secara umum pertambahan variable waktu

pemanasan akan berpengaruh terhadap adanya bakteri pada sampel yang diamati. Hal ini terjadi

karena secara umum, pemanasan akan membunuh bakter E. coli, sehingga dengan ditingkatkannya

variable pemanasan, maka jumlah E.coli pada sampel pun akan berkurang. Namun terjadi kesalahan

pada hasil pemanasan 10 menit, dimana hasil dari pengamatan menunjukan bahwa terjadi kematian

yang melebihi dari 15 menit dan 20 menit. Hal ini dapat terjadi karena tidak langsung diamatinya

sampel pada saat 10 menit setelah pemanasan. Setelah pemanasan masih adanya panas yang tersisa

di dalam larutan, dan berpotensi membunuh bakteri yang ada di dalam sampel, maka hal ini dapat

terjadi. Menurut literatur E. coli memulai kematian pada suhu 55oC, maka dengan pemanasan 65

oC,

dipastikan E. coli akan mati, maka akan dapat terlihat bahwa terjadinya penurunan jumlah mikroba

pada saat pemanasan dilakukan lebih lama, karena akan lebih banyak waktu untuk membunuh

mikroba tersebut.

(Usajerwick, 2006)

16



Grafik III.1 Grafik waktu pemanasan dan log jumlah sel

Pada grafik III.1, menunjukan bahwa waktu pemanasan akan berbanding terbalik dengan

jumlah sel, dalam artian bahwa jumlah sel akan semakin sedikit seiring bertambahnya waktu

pemanasan. Bila dari grafik kita interpolasikan hingga ke titik minimum dari adanya bakteri yaitu

dengan jumlah log sel 10-6

, maka akan didapatkan waktu yang dibutuhkan untuk mencapai jumlah

tersebut ialah sebesar 105,36 menit pemanasan. Digunakan jumlah bakteri berupa jumlah log sel 10-

6 karena pada proses sterilisasi, jumlah bakteri tersebut merupakan jumlah minimum bakteri sel

ketika di lakukan proses sterilisasi. Maka dapat dianggap bahwa jumlah tersebut merupakan jumlah

minimum dari sel mikroorganisme yang ditolerir untuk ada setelah dilakukanya proses sterilisasi.

Dari percobaan ini juga didapatkan bahwa persen kematian per menit dari E. coli dengan

pemanasan 65oC adalah 0,5585%. Hal ini didapatkan dengan melakukan perhitungan rata-rata dari

data yang didapatkan pada hasil percobaan untuk persen kematian pada 5 menit, 10 menit, 15 menit

dan 20 menit.

(Sutton, 2008)

y = -0.1128x + 5.8844

4.90

5.00

5.10

5.20

5.30

5.40

5.50

5.60

5.70

5.80

5.90

0 5 10 15 20

log

jum

lah

se

l

waktu pemanasan

Grafik waktu vs log jumlah sel

Series1

Linear (Series1)

17



IV. Jawaban Pertanyaan

IV.1. Antiseptik

1. Apakah yang disebut dan beri contohnya? (Antiseptik dan desinfektan)

Antiseptik adalah senyawa kimia yang digunakan untuk membunuh atau menghambat

pertumbuhan mikroorganisme pada jaringan yang hidup seperti pada permukaan kulit dan

membran mukosa. Contohnya ialah alkohol 70 % dan Dettol handwash

Desinfektan adalah bahan kimia yang digunakan untuk mencegah terjadinya infeksi atau

pencemaran oleh jasad renik atau obat untuk membasmi kuman penyakit. Pengertian lain dari

desinfektan adalah senyawa kimia yang bersifat toksik dan memiliki kemampuan membunuh

mikroorganisme yang terpapar secara langsung oleh desinfektan. Contoh desinfektan adalah

pembersih lantai.

(Seth, 2008)

2. Dalam hal apa saja antiseptik dan desinfektan digunakan?

- Antiseptik: Antiseptik digunakan pada kegiatan medis untuk menghentikan infeksi pada

luka, maupun membersihkan kulit sebelum kegiatan operasi maupun kegiatan medis lainnya.

Selain itu, penggunaan antiseptik banyak digunakan pada kegiatan sehari-hari seperti

penggunaan sabun cuci tangan maupun hand sanitizer dan antiseptik mouthwash.

- Desinfektan digunakan untuk sterilisasi alat kedokteran, maupun pada kegiatan sanitasi

sehari-hari seperti pembersihan lantai.

(Tortorra, 2013)

IV.2 Thermal Death Time

1. Apakah yang dimaksud dengan Thermal Death Time, Thermal Death Rate dan Thermal Death

Point?

- Thermal Death Time adalah periode terpendek yang dibutuhkan untuk mematikan suatu

suspensi mikroba pada suhu tertentu di bawah keadaan tertentu.

- Thermal Death Rate adalah lamanya waktu (dalam menit) untuk mengurangi populasi

sebesar 90% atau lamanya waktu (menit) yang dibutuhkan untuk kurva TDT untuk

mengalami penurunan logaritmik.

- Thermal Death Point adalah temperatur minimal yang dapat membunuh seluruh

mikroorganisme dalam suspensi liquid selama 10 menit.

(Tortorra, 2013)

18



2. Hal-hal apakah yang perlu diperhatikan dalam menentukan Thermal Death Time dan Thermal

Death Rate?

- Thermal death Time: temperatur konstan dan fungsi waktu

- Thermal death Rate: Daya tahan masing-masing bakteri, usia sel, dan ada tidaknya spora

(Garg, 2010)

3. Dalam hal apakah (bidang apakah) percobaan ini diterapkan, jelaskan?

Jawab:

Aplikasi thermal death time banyak digunakan pada industri pemrosesan makanan dan

minuman, sebagai contoh pasteurisasi menggunakan perhitungan thermal death time

untuk membunuh bakteri tanpa merusak nutrisi susu.

(Tortorra, 2013)

4. Metode apakah yang paling efektif untuk sterilisasi liquida yang mungkin mengandung bakteri

pembentuk spora?

Metode yang paling efektif untuk sterilisasi liquid yang mungkin mengandung bakteri

pembentuk spora adalah dengan metode pemanasan dalam autoklaf pada suhu 1210

C agar

bakteri sekaligus dengan sporanya ikut mati.

(Tortorra, 2013)

5. Bagaimana cara saudara melakukan suatu eksperimen untuk menentukan waktu TDT dari

Escheichia coli ? Mulailah dengan data-data yang telah saudara dapatkan dalam percobaan.

Cara melakukan suatu eksperimen untuk menentukan waktu TDT dari Escherichia coli adalah

Dengan menentukan jumlah bakteri setelah waktu pemanasan yang berbeda yaitu 5, 10, 15, dan

20 menit pada suhu konstan 65oC dan lalu dihitung sampelnya dengan menggunakan metode

counting chamber.

19



V. Kesimpulan

V.1. Antiseptik dan Desinfektan

Dari percobaan ini dapat disimpulkan bahwa baik antiseptik Dettol Handwash dan

desinfektan Superpel dapat menghambat pertumbuhan jamur Rhizopus oligosporus dan

Trichorderma viridae yang ditandai dengan adanya zona bebas jamur yang mengelilingi kertas

saring yang terkandung antiseptik maupun desinfektan.

V.2. Thermal Death Time

Dari percobaan dapat ditarik kesimpulan bahwa semakin lama waktu pemanasan maka

jumlah sel pada suatu zat akan mati. Pada percobaan ini didapatkan bahwa dibutuhkan waktu 52,16

menit untuk membunuh bakteri Escherichia coli pada suhu 65 oC dengan persen kematian per

menitnya ialah 0,5585 %.

Daftar Pustaka

Aneja, K.R. 2003. Experiments in Microbiology, Plant Pathology, and Biotechnology. New

Delhi: New Age International Publishers

Benson. 2001. Microbiological Application. New York: Mc. Graw Hill Publisher.

Franklin, J. Trevor., dan George Alan Snow. 2006. Biochemistry and Molecular Biology of

Antimicrobial Drug Action. United States of America: Springer

Garg, Neelima., et al. 2010.Laboratory Manual of Food Microbiology. New Delhi: I.K International

Publishing House Pvt. Ltd.

Hayes, P.R. dan Richard Hayes. 1992. Food Microbiology and Hygene. New York: Springer

Laboffe, Michael J & Burton E Pierce. 2010. Microbiology Laboratory Theory & Applications.

United State: Morton Publishing Company

Melliawati, Ruth. 2009. Escherichia coli dalam Kehidupan Manusia. Indonesia

Seth, S.D., dan Vimlesh Seth. 2008. Textbook of Pharmacology. India: Elsevier

Sutton, Scout. 2008. Sterility Assurance Level. USA: PMF Newsletter

Tortorra, Gerard. 2013. Microbiology: An Introduction, 11th

ed. United States of America: Pearson

Education Inc.

Usajewich, I dan Beetha Nalepa. 2006. Survival of Escherichia coli O157:H7 in Milk Exposed to

High Temperature and Pressure. Food Technology, Biotechnology.

Antiseptik, Desinfektan Dan Thermal Death Time

Documents

Transcript of Antiseptik, Desinfektan Dan Thermal Death Time