ANEXOS

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Anexo 1 Propagación In Vitro De Las Accesiones: Se preparará Medio MS de acuerdo al protocolo establecido por Murashige and Skoog, 1962): -25 ml medio MS se dispensará en frascos de vidrio de 200 ml de capacidad. -la boca de los frascos se taparán con láminas de papel aluminio. -los frascos con el medio MS serán esterilizados por 15 minutos a una presión de 15 PSI -La propagación se realizará a partir de los brotes juveniles de los tubérculos de las papas recolectadas en campo previamente desinfectados en hipoclorito de sodio a una concentración de 0.1 % durante 20 minutos y aclarados dos veces en agua por 5 minutos cada uno. - los brotes juveniles pasarán por un proceso de desinfección en alcohol potable al 70 % durante 10 segundos y colocados en 25 ml de agua destilada estéril -En la cámara de flujo laminar los brotes juveniles se los colocará en hipoclorito de sodio a una concentración de 1.6% por 5 minutos y aclarado dos veces por 2 minutos respectivamente. -Luego los brotes juveniles son colocados en una servilleta estéril para eliminar el exceso de humedad, y proceder a eliminar con ayuda de un bisturí una pequeña parte de la base del brote por último colocar el brote juvenil en el medio MS. -Se realizará dos repiques una vez que los brotes juveniles de cada accesión ya presenten yemas apicales y laterales de dos a tres centímetros.

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Anexo 1Propagacin In Vitro De Las Accesiones:Se preparar Medio MS de acuerdo al protocolo establecido por Murashige and Skoog, 1962): -25 ml medio MS se dispensar en frascos de vidrio de 200 ml de capacidad.-la boca de los frascos se taparn con lminas de papel aluminio.-los frascos con el medio MS sern esterilizados por 15 minutos a una presin de 15 PSI-La propagacin se realizar a partir de los brotes juveniles de los tubrculos de las papas recolectadas en campo previamente desinfectados en hipoclorito de sodio a una concentracin de 0.1 % durante 20 minutos y aclarados dos veces en agua por 5 minutos cada uno.- los brotes juveniles pasarn por un proceso de desinfeccin en alcohol potable al 70 % durante 10 segundos y colocados en 25 ml de agua destilada estril -En la cmara de flujo laminar los brotes juveniles se los colocar en hipoclorito de sodio a una concentracin de 1.6% por 5 minutos y aclarado dos veces por 2 minutos respectivamente.-Luego los brotes juveniles son colocados en una servilleta estril para eliminar el exceso de humedad, y proceder a eliminar con ayuda de un bistur una pequea parte de la base del brote por ltimo colocar el brote juvenil en el medio MS.-Se realizar dos repiques una vez que los brotes juveniles de cada accesin ya presenten yemas apicales y laterales de dos a tres centmetros.

Anexo 2Determinacin de Ploida de las Accesiones recolectadas en campo: Segn el Protocolo de Citometra de Flujo (Orillo M, Bonierbale M, 2009), Se colectar aproximadamente 500 mg de hojas jvenes apicales Colocar en 0.5 ml de buffer de extraccin (Cystain UV ploidy) Picar muy suavemente y de arriba hacia abajo Adicionar 1.5 de Cystain UV ploidy e incubar por cinco minutos. Filtrar la muestra en filtros de 30m (Partec Cell Trics 30) Colocar la muestra en el Clitmetro de Flujo Citmetro de Flujo Ploidy Analyzer (PA) Partec I Se establece los parmetros para la lectura de la muestra para plodas 2, 4 y