ANALISIS TINGKAT KEMATANGAN GONAD, FEKUNDITAS DAN …
126
ANALISIS TINGKAT KEMATANGAN GONAD, FEKUNDITAS DAN DIAMETER TELUR CAKALANG (Katsuwonus pelamis) SECARA HISTOLOGIS YANG DIDARATKAN DI KEDONGANAN BALI LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN (PKL) Oleh: KIKI KURNIASARI 42.17.1064 PROGAM STUDI ILMU PERIKANAN FAKULTAS PERTANIAN DAN PERIKANAN UNIVERSITAS 17 AGUSTUS 1945 BANYUWANGI 2020
Transcript of ANALISIS TINGKAT KEMATANGAN GONAD, FEKUNDITAS DAN …
ANALISIS TINGKAT KEMATANGAN GONAD, FEKUNDITAS DAN
DIAMETER TELUR CAKALANG (Katsuwonus pelamis) SECARA
HISTOLOGIS YANG DIDARATKAN DI KEDONGANAN BALI
LAPORAN
PRAKTIK KERJA LAPANGAN (PKL)
Oleh:
KIKI KURNIASARI
42.17.1064
PROGAM STUDI ILMU PERIKANAN
FAKULTAS PERTANIAN DAN PERIKANAN
UNIVERSITAS 17 AGUSTUS 1945 BANYUWANGI
2020
LEMBAR PENGESAHAN
i Untag Banyuwangi
ANALISIS TINGKAT KEMATANGAN GONAD, FEKUNDITAS DAN
DIAMETER TELUR CAKALANG (Katsuwonus pelamis) SECARA
HISTOLOGIS YANG DIDARATKAN DI KEDONGANAN BALI
LAPORAN
PRAKTIK KERJA LAPANGAN (PKL)
Oleh:
KIKI KURNIASARI
NIM : 42.17.1064
Banyuwangi,
Mengetahui,
Dekan, Fakultas Pertanian dan
Perikanan
Fathurrahman,SP.,MP
NIP.196612172005011001
Menyetujui,
Dosen Pembimbing
Mega Yuniartik,S.Pi,MP.
NIDN.0724069101
KATA PENGANTAR
ii Untag Banyuwangi
Puji syukur ke hadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan
karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan Laporan
Praktik Kerja Lapangan (PKL) ini dengan judul “Analisis Tingkat Kematangan
Gonad Cakalang (Katsuwonus pelamis) Secara Histologis Yang Didaratkan di
Kedonganan Bali”.
Penulis menyadari dalam penyusunan laporan Praktik Kerja Lapangan ini
tidak akan selesai tanpa bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis
mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Fathurrahman, SP., MP selaku Dekan Fakultas Pertanian dan
Perikanan, Universitas 17 Agustus 1945 Banyuwangi.
2. Ibu Mega Yuniartik, S.Pi, MP selaku dosen Pembimbing Praktik Kerja
Lapangan yang senantiasa memberikan arahan dan motivasi.
3. Bapak Zulkarnaen Fahmi, S.Pi., M.Si selaku kepala Loka Riset Perikanan
Tuna yang telah memberikan ijin kepada penulis untuk melakukan PKL di
LRPT.
4. Ibu Hety Hartaty, S.Pi selaku pembimbing lapangan di LRPT yang
senantiasa memberi arahan serta bimbingan selama kegiatan PKL.
5. Seluruh pegawai LRPT, terkhusus kepada penyelia laboratorium
histologi yaitu Bapak Gussasta Levi A., S.S.T.Pi, dua orang analis yaitu
Mbak Indrastiwi Pramulati.,S.Si dan Mbak Desy Shintya Irene,S.Kel yang
telah banyak membantu saya pada saat kegiatan PKL berlanjut.
6. Mbak Mira selaku pelayanan teknis yang telah mengarahkan mulai dari
awal masuk sampai selesai akhir kegiatan dan yang memberikan evaluasi
sehingga penulis menjadi lebih baik lagi.
7. Teristimewa kepada kedua orangtuaku tercinta yang telah banyak
memberikan dukungan baik dari segi moral maupun materi dan
kasih sayangnya yang tak terhingga serta doa yang selalu mengalir
tiada hentinya.
8. Serta semua pihak yang telah membantu penulis dalam penyusunan
Laporan PKL ini.
iii Untag Banyuwangi
Pada penulisan laporan ini, masih terdapat banyak kekurangan bahkan
kekeliruan, sehingga kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan
demi perbaikan laporan untuk kedepannya. Penulis berharap laporan PKL ini
dapat memberi manfaat bagi para pembacanya. Apabila terdapat kesalahan kata
ataupun penulisan mohon untuk dimaklumi, terimakasih.
Denpasar, 11 Maret 2020
Penulis
iv Untag Banyuwangi
DAFTAR ISI
LEMBAR PENGESAHAN .........................................................................................i
KATA PENGANTAR ................................................................................................ ii
DAFTAR ISI............................................................................................................. iv
DAFTAR TABEL ..................................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................ vii
DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................................. ix
BAB I. PENDAHULUAN ........................................................................................... 1
1.1 Latang Belakang ........................................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah..................................................................................... 2
1.3 Tujuan ........................................................................................................ 2
1.4 Manfaat ...................................................................................................... 2
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................. 3
2.1 Ikan Cakalang (Katsuwonus pelamis) ........................................................... 3
2.1.1 Klasifikasi dan Morfologi Ikan Ikan Cakalang (Katsuwonus pelamis) .... 3
2.2 Penelitian Terdahulu ................................................................................. 4
BAB III. METODOLOGI ........................................................................................... 8
3.1 Waktu dan Tempat ......................................................................................... 8
3.2 Alat dan Bahan ............................................................................................... 8
3.3 Metode Praktik Kerja Lapangan ................................................................... 11
3.4 Teknik Pengambilan Data ............................................................................ 11
3.4.1 Data Primer ............................................................................................ 11
3.4.2 Data sekunder ....................................................................................... 12
3.5 Analisis Data................................................................................................. 12
3.5.1 Hubungan Panjang Bobot Ikan ............................................................. 12
3.5.2 Tingkat Kematangan Gonad ................................................................. 13
v Untag Banyuwangi
3.5.3 Fekunditas ............................................................................................. 19
3.5.4 Diameter Telur ....................................................................................... 20
BAB IV. HASIL PRAKTIK KERJA LAPANGAN ..................................................... 21
4.1 Keadaan Umum Lokasi PKL ........................................................................ 21
4.1.1 Sejarah Singkat Loka Riset Perikanan Tuna ........................................ 21
4.1.2 Peta Lokasi Praktik Kerja Lapangan ..................................................... 22
4.1.3 Visi dan Misi Loka Riset Perikanan Tuna .............................................. 22
4.1.4 Struktur Organisasi Loka Riset Perikanan Tuna ................................... 23
4.1.5 Sarana dan Prasarana Loka Riset Perikanan Tuna ............................. 24
4.2 Uraian Kegiatan ............................................................................................ 29
4.2.1 Pengambilan Sampel Cakalang (Katsuwonus pelamis) ....................... 29
4.2.2 Pembuatan Preparat Gonad Cakalang ................................................. 30
4.2.3 Hasil Analisis Data................................................................................. 39
BAB V. PENUTUP ................................................................................................. 48
5.1 Kesimpulan ................................................................................................... 48
5.2 Saran ............................................................................................................ 48
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 49
DAFTAR TABEL
vi Untag Banyuwangi
Tabel 1. Daftar Alat yang digunakan dalam Praktik Kerja Lapangan ...................... 8
Tabel 2. Daftar Bahan yang digunakan dalam Praktik Kerja Lapangan ................. 9
Tabel 3. Tingkat Kematangan Gonad Cakalang Betina Secara Visual ................ 13
Tabel 4. Tingkat Perkembangan Oosit Ikan Tuna Sirip Biru Selatan (Thunnus
maccoyii) menurut Farley & Davis (1999) ............................................... 14
Tabel 5. Kriteria Klasifikasi Histologi menurut Farley et al., (2013) ....................... 19
Tabel 6. Data Tingkat Kematangan Gonad Secara Visual.................................... 40
Tabel 7. Kelas Perkembangan Gonad Cakalang .................................................. 41
Tabel 8. Perbandingan TKG secara Visual dan Histologi ..................................... 43
Tabel 9. Diameter Telur Cakalang yang didaratkan di Kedonganan, Bali ............ 47
DAFTAR GAMBAR
vii Untag Banyuwangi
Gambar 1. Ikan Cakalang (Katsuwonus Pelamis) [Sumber : Collette & Nauen,
1998] ...................................................................................................... 4
Gambar 2. Preparat histologi menunjukkan POF pada ikan tuna sirip biru selatan
(Loka Riset Perikanan Tuna, 2019) .................................................... 17
Gambar 3. Preparat histologi menunjukkan Atresia alfa dan beta pada ikan tuna
sirip biru selatan ( Loka Riset Perikanan Tuna, 2019) ........................ 17
Gambar 4. Preparat histologi menunjukkan brown bodies pada ikan tuna
albacora (Loka Riset Perikanan Tuna, 2019) ..................................... 18
Gambar 5. Peta Praktik Kerja Lapangan di LRPT (Google earth, 2020) .............. 22
Gambar 6. Struktur Organisasi LRPT Tahun 2019 (Sumber: lp2t.kkp.go.id) ........ 23
Gambar 7. Perpustakaan LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id) ..................................... 25
Gambar 8. Laboratorium Histologi LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id) ....................... 25
Gambar 9. Laboratorium Otolith LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id) .......................... 26
Gambar 10. Laboratorium Genetika (Sumber: lp2t.kkp.go.id)............................... 27
Gambar 11. Laboratorium Data LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id) ........................... 28
Gambar 12. Identifikasi Ikan Cakalang (Dokumentasi pribadi) ............................. 29
Gambar 13. Alur Pengambilan Data ...................................................................... 29
Gambar 14. Alur Pembuatan Preparat Gonad ...................................................... 30
Gambar 15. Proses Pemotongan Sampel ............................................................. 31
Gambar 16. Proses Fiksasi Sampel Gonad .......................................................... 32
Gambar 17. Alur Tahapan Proses Dehidrasi ......................................................... 33
Gambar 18. Mesin ATP, saat dehidrasi berlangsung............................................ 33
Gambar 19. Proses Blocking Sampel Gonad ........................................................ 34
Gambar 20. Proses Sectioning .............................................................................. 36
Gambar 21. Tahapan Pewarnaan Preparat Gonad............................................... 37
Gambar 22. Urutan larutan pada proses staining di lemari asam ......................... 38
Gambar 23. Proses Covering ................................................................................ 38
Gambar 24. Grafik Hubungan Panjang Bobot ....................................................... 39
Gambar 25. Gonat betina yang di amati (Dokumentasi pribadi) ........................... 40
viii Untag Banyuwangi
Gambar 26. Tingkat Perkembangan Oosit Cakalang (unyolked, early yolked,
advanced yolked, atresia alfa, atresia beta, postovulatory follicle)
dan maturity marker (brown bodies) ................................................. 43
Gambar 27. Tingkat Perkembangan Gonad Cakalang Betina Secara Histologis,
(a) immature; (b) spawning capable; (c) spawning; dan (d)
regenerating ...................................................................................... 43
Gambar 28. Grafik Perbandingan TKG Secara Visual dan Histologi .................... 44
Gambar 29. Alur Proses Pengamatan Fekunditas ................................................ 45
Gambar 30. Perhitungan Fekunditas ..................................................................... 45
Gambar 31. Alur Perhitungan Diameter Telur Cakalang ....................................... 46
Gambar 32. Perhitungan Diameter Telur Cakalang .............................................. 47
ix Untag Banyuwangi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Dokumentasi Peralatan yang digunakan ........................................... 51
Lampiran 2. Dokumentasi Bahan yang digunakan ................................................ 54
Lampiran 3. Dokumentasi Kegiatan ....................................................................... 57
Lampiran 4. Surat Permohonan Izin PKL .............................................................. 58
Lampiran 5. Surat Persetujuan PKL ...................................................................... 59
Lampiran 6. Surat Keputusan Tentang Penetapan Dosen Pembimbing PKL ...... 60
Lampiran 7. Logbook Praktik Kerja Lapangan ...................................................... 61
Lampiran 8. Tugas Resume Jurnal ........................................................................ 91
Lampiran 9. Perhitungan Diameter Telur............................................................. 115
Lampiran 10. Surat Keterangan / Sertifikat.......................................................... 116
1
Untag Banyuwangi
BAB I. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Ikan cakalang (Katsuwonus pelamis Linnaeus, 1758) merupakan spesies
yang bermigrasi jauh (highly migratory species) dan bersifat kosmopolitan yang
tersebar di perairan tropis dan sub tropis (Arai et al.,2005). Menurut Dueri et al.
(2012), ikan cakalang terdistribusi secara merata di Samudra Hindia, termasuk di
wilayah Indonesia, yang meliputi Samudra Hindia barat Sumatra, selatan Jawa,
Bali dan Nusa Tenggara, serta perairan Indonesia bagian timur, meliputi Laut
Sulawesi, Maluku, Arafuru, Banda, Flores, Selat Makasar, dan Samudra Pasifik
(Uktolseja, 1989 dalam Rochman et al.,2015).
Ikan cakalang adalah nama dagang Indonesia. Wilayah pasar yang lebih
luas dipakai skipjack tuna sebagai nama dagang internasional. Nama ini diambil
dari bahasa Inggris, sedangkan nama ilmiah disebut Katsuwonus pelamis diambil
dari bahasa Jepang yang artinya ikan keras. Seperti halnya dengan sumber daya
perikanan laut lainnya sumber daya perikanan cakalang dapat pulih kembali
(renewable), namun demikian eksploitasi tanpa upaya pengendalian dapat
menyebabkan degradasi populasi ikan ini. Oleh karena itu diperlukan perhatian
yang sungguh-sungguh dalam pengelolaannya agar pengusahaan dan
potensinya tetap lestari (Mantjoro dkk., 2013).
Cakalang merupakan salah satu jenis ikan hasil tangkapan dominan setelah
tuna sirip kuning (Thunnus albacares) yang tertangkap dengan pancing ulur di
Pangkalan Pendaratan Ikan Kendonganan, Bali (Sulistyaningsih et al., 2017).
Pengetahuan dasar mengenai aspek biologi reproduksi merupakan salah satu
aspek untuk mendukung upaya pengelolaan sumberdaya ikan (Jatmiko et al.
2015). Penelitian tentang biologi reproduksi ikan dapat memberi data dan
informasi penting mengenai frekuensi pemijahan, keberhasilan pemijahan, lama
pemijahan, dan ukuran ikan ketika pertama kali mencapai kematangan gonad
(Mardlijah dan Patria 2012; Karman et al. 2014; Jatmiko et al. 2015).
Aspek biologi pada perikanan merupakan aspek penting dalam kajian ilmu
perikanan. Parameter yang biasanya diukur adalah tingkat kematangan gonad,
diameter telur, fekunditas dan beberapa parameter lainnya. Laboratorium
Histologi di Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT) merupakan laboratorium uji yang
sudah beroperasi sejak tahun 2011. Fokus pada kegiatan di histologi LRPT
menitik beratkan pada perkembangan gonad ikan dengan pengamatan tingkat
2
Untag Banyuwangi
kematangan gonad secara mikroskopis melalui jaringan gonadnya, diameter
telur, dan perhitungan fekunditas. Pengamatan morfologi gonad secara visual
sangat umum digunakan karena murah dan cepat. Namun hasil pengamatan
secara visual kurang akurat untuk jenis ikan yang meliliki pola perkembangan
oosit yang asynchronous (tidak seragam) seperti tuna dan cakalang. Metode
histologi merupakan metode yang paling tepat karena dapat menampilkan
analisis yang lebih rinci mengenai perkembangan oosit yang mendukung
penentuan kriteria perkembangan gonad ikan (Scheafer, 1998).
Karakteristik dari aspek biologi pada suatu stok ikan merupakan salah satu
faktor penting dalam menentukan kemampuan regenerasi suatu populasi ikan.
Dalam pengelolaan perikanan, informasi tersebut dapat digunakan untuk
melindungi stok dari penangkapan ikan yang berlebihan dan untuk
mempertahankan populasi pemijahan.
1.2 Rumusan Masalah
Rumusan masalah dari kegiatan praktik kerja lapangan ini yaitu: Bagaimana
analisis tingkat perkembangan gonad, fekunditas, dan diameter telur cakalang
(Katsuwonus pelamis) secara histologis yang didaratkan di Kedonganan, Bali?
1.3 Tujuan
Tujuan umum dari kegiatan praktik kerja lapangan ini yaitu sebagai salah
satu prasyarat yang harus dipenuhi dalam menempuh jenjang strata satu. Tujuan
khususnya adalah untuk mengetahui tingkat kematangan gonad, fekunditas, dan
diameter telur cakalang (Katsuwonus pelamis) secara histologis yang didaratkan
di Kedonganan, Bali.
1.4 Manfaat
Manfaat dari kegiatan praktik kerja lapangan (PKL) ini adalah untuk
mendapatkan informasi dan untuk memperluas wawasan, kompetensi keahlian
mahasiswa terkait aspek biologi cakalang (Katsuwonus pelamis) menggunakan
metode terkini.
3
Untag Banyuwangi
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Ikan Cakalang (Katsuwonus pelamis)
2.1.1 Klasifikasi dan Morfologi Ikan Ikan Cakalang (Katsuwonus pelamis)
Cakalang termasuk ikan perenang cepat dan mempunyai sifat yang rakus.
Ikan jenis ini sering bergerombol dan hampir bersamaan melakukan ruaya di 5
sekitar pulau dan jarak jauh. Gerombolan ikan cakalang dapat mencapai 300 ton,
cakalang dapat hidup pada kisaran suhu 9 - 13ºC, tetapi lebih menyukai suhu
antara 26 - 28ºC. Oleh karena itu, cakalang banyak ditemukan di daerah
khatulistiwa sepanjang tahun. Ukuran ikan cakalang maksimum dapat mencapai
108 cm dengan bobot 32,5 - 45,5 kg, sedangkan ukuran yang umum tertangkap
adalah 40 - 80 cm dengan bobot 8 - 10 kg (Collete dan Nauen 1983), dapat
dilihat pada Gambar 1. Klasifikasi ikan cakalang menurut Saanin (1984) adalah
sebagai berikut:
Subfilum : Vertebrata
Kelas : Pisces
Subkelas : Dercomorphi
Ordo : Percomorphi
Subordo : Scombroidea
Divisi : Perciformes
Subdivisi : Scombroid
Family : Scombridae
Genus : Katsuwonus
Spesies : Katsuwonus pelamis
4
Untag Banyuwangi
Gambar 1. Ikan Cakalang (Katsuwonus Pelamis)
[Sumber : Collette & Nauen, 1998]
Ciri-ciri ikan cakalang yaitu bentuk tubuh fusiform, memanjang dan agak
bulat, tapis insang (gill rakers) berjumlah 53 - 63 pada helai insang pertama. Ikan
cakalang mempunyai dua sirip punggung terpisah. Pada sirip punggung yang
pertama terdapat 14 - 16 jari-jari keras, jari-jari lemah pada sirip punggung kedua
diikuti oleh 7 - 8 finlet. Badan tidak bersisik kecuali pada barut badan (corselets)
dan lateral line terdapat sisik kecil. Bagian punggung berwarna biru kehitaman
(gelap), sisi bawah dan perut keperakan dengan 4 - 6 buah ban (garis-garis)
warna yang membujur.
2.2 Penelitian Terdahulu
a. Panjang bobot
Menurut Manik (2007) dan Karman et al. (2015), perbedaan pola
pertumbuhan dipengaruhi oleh perbedaan musim dan tingkat kematangan
gonad, serta aktivitas penangkapan. Aktivitas penangkapan yang cukup tinggi
pada suatu daerah akan memengaruhi kehidupan dan pertumbuhan populasi
ikan. Sedangkan hasil penelitian Jamal et al. (2011) menyebutkan pola
pertumbuhan ikan cakalang yang tertangkap di perairan Teluk Bone bersifat
isometrik. Faktor-faktor yang menyebabkan perbedaan pola pertumbuhan adalah
perbedaan jumlah dan variasi ukuran ikan yang diamati. Hasil yang sama
diperoleh pada cakalang yang tertangkap di laut Banda dengan pola
pertumbuhan isometrik (Sumadhiharga dan Hukom, 1987); di perairan sebelah
Barat Sulawesi tengah (Telusa, 1985), dan di Teluk Bone (Jamal et al., 2011).
Hal ini sama dengan yang dikemukankan oleh Uktolseja et al. (1981), bahwa
pertumbuhan cakalang di Sulawesi bersifat isometrik.
5
Untag Banyuwangi
Hasil berbeda diperoleh dari hasil penelitian yang dilakukan oleh oleh Manik
(2007) pada cakalang yang tertangkap di sekitar pulau Seram dan Nusa Laut
yang memperoleh nilai b>3 atau allometrik, artinya bahwa pertambahan panjang
tidak secepat pertambahan bobot. Berbedanya hubungan panjang bobot
cakalang yang diperoleh dari berbagai perairan mungkin disebabkan perbedaan
jumlah ikan yang dijadikan sampel, kisaran panjang ikan yang dianalisis serta
kecepatan pertumbuhan lokal yang berbeda (Sumadhiharga dan Hukom, 1987);
menurut Jamal (2011), berbedanya hasil analaisis tersebut mungkin karena
diferensiasi kisaran panjang ikan yang Dianalisis cukup besar, selain karena
pengaruh faktor-faktor biologis dan ekologis. Menurut (Moutopoulos dan Stergiou
2002 dalam Kharat et al., 2008) Perbedaan hubungan panjang bobot dari tiap
perairan kemungkinan disebabkan oleh perbedaan jumlah dan variasi ukuran
ikan yang dianalisis serta lokasi penangkapan yang berbeda.
b. Tingkat Kematangan Gonad
Kematangan gonad adalah tahap tertentu perkembangan gonad sebelum
dan sesudah ikan memijah, terutama untuk betina, sedangkan IKG merupakan
nilai dalam % sebagai hasil perbandingan bobot gonad dan bobot tubuh ikan
(Rachmawati & Hartati, 2017). Menurut Lagler et al. (1962) dalam Larasati (2011)
perbedaan ukuran pertama kali matang gonad dipengaruhi oleh beberapa faktor
antara lain kebiasaan makan, umur, ukuran, dan kondisi fisiologis dari ikan
tersebut. Menurut (Saputra et al., 2009. Widodo & Suadi 2008), kondisi tangkap
lebih (overfishing) secara biologi dapat digolongkan menjadi growth overfishing
dan recruitment overfishing. Growth overfishing terjadi apabila hasil tangkapan
didominasi oleh ikan-ikan kecil pada ukuran pertumbuhan, sedangkan
recruitment overfishing terjadi apabila kegiatan eksploitasi lebih banyak
menangkap ikan yang siap memijah (spawning stok) atau ikan dewasa matang
gonad. Menurut Allen et al. (2013), recruitment overfishing merupakan kondisi
lebih tangkap yang lebih parah dibandingkan dengan kondisi growth overfishing.
Kondisi seperti ini sangat membahayakan keberadaan stok sumberdaya ikan
cakalang, karena secara substansial merusak produktivitas stok ikan dan
menyebabkan runtuhnya stok sumberdaya ikan. Beberapa upaya yang
direkomendasikan untuk mencegah terjadinya recruitment overfishing adalah
proteksi terhadap penangkapan sejumlah stok induk yang memadai.
6
Untag Banyuwangi
Secara umum, tingkat kematangan gonad (TKG) cakalang yang tertangkap
di Samudera Hindia sudah dalam kondisi matang gonad (TKG III–V) sebesar
66,91%. Persentase terbesar adalah TKG IV sebesar 43,38% diikuti TKG III
(21,32%) dan TKG V (2,21%). Sedangkan cakalang yang belum matang gonad
sebesar 33,09%, yang terdiri dari TKG I (16,91%) dan TKG II (16,18%). Tingkat
kematangan gonad ikan dipengaruhi oleh faktor internal dan faktor eksternal.
Faktor internal antara lain spesies, umur dan ketersediaan hormon, sedangkan
faktor eksternal antara lain suhu perairan dan jenis makanan (Effendie,2002).
Pengamatan morfologi gonad secara visual sangat umum digunakan karena
murah dan cepat. Namun hasil pengamatan secara visual kurang akurat untuk
jenis ikan yang memiliki pola perkembangan oosit yang asynchronous (tidak
seragam) seperti tuna dan cakalang. Metode histologi merupakan metode yang
paling tepat karena dapat menampilkan analisis yang lebih rinci mengenai
perkembangan oosit yang mendukung penentuan kriteria perkembangan gonad
ikan (Scheafer, 1998).
c. Fekunditas
Fahriny dan Omar (2010), menyatakan bahwa fekunditas pada setiap
individu betina tergantung pula pada kondisi lingkungan, seperti ketersediaan
makanan (suplai makanan). Djuhanda (1981) menambahkan bahwa besar
kecilnya fekunditas dipengaruhi oleh makanan, Semakin banyak makanan, maka
pertumbuhan ikan semakin cepat dan fekunditasnya semakin besar.
Perbedaan fekunditas tersebut diduga dipengaruhi oleh perbedaan
lingkungan. Hal ini sejalan yang dikemukakan oleh Priyono (2002) bahwa telur
yang dihasilkan tergantung pada ukuran ikan. Selain itu, Manik (2007)
menambakan bahwa meskipun ukuran dan umur ikannya sama, namun
besarnya fekunditas akan tetap berbeda yang disebabkan oleh adanya pengaruh
berbagai rangsangan ekologis dan biologis.
d. Diameter Telur
Diameter ukuran oosit cakalang pada tingkat perkembangan oosit yang
berbeda, dari yang belum matang ketingkat yang matang, memiliki ukuran yang
berkelanjutan dari ukuran oosit terkecil hingga terbesar. Menurut Grande et al.,
(2012), frekuensi ukuran oosit cakalang yang terus menerus tanpa ada celah
dalam diameter antara oosit yang belum berkembang hingga yang matang dalam
tingkat maturitas yang berbeda serta dalam bulan yang berbeda telah dianggap
sebagai tanda perkembangan oosit yang tidak seragam (asynchronous) dan
7
Untag Banyuwangi
fekunditas tak tentu (indeterminate). Selanjutnya hasil penelitian Batts (1972)
menemukan bahwa beragam modus diameter oosit dan residu oosit ditemukan
pada kelompok ikan yang baru matang gonad yang menujukan bahwa cakalang
adalah pemijah berganda.
8
Untag Banyuwangi
BAB III. METODOLOGI
3.1 Waktu dan Tempat
Praktik kerja lapangan ini dilaksanakan pada tanggal 3 Februari 2020
sampai dengan tanggal 13 Maret 2020 bertempat di Loka Riset Perikanan Tuna
Denpasar Bali.
3.2 Alat dan Bahan
Adapun alat dan bahan yang digunakan pada waktu praktik kerja lapangan
yang digunakan untuk menentukan tingkat kematangan gonad, diameter telur,
dan fekunditas, dapat dilihat pada Tabel 1 dan 2:
Tabel 1. Daftar Alat yang digunakan dalam Praktik Kerja Lapangan
No. Nama Alat Fungsi
1. Mikroskop Zeiss
Trinokular
Digunakan untuk mengamati jaringan
2. Microtome Digunakan untuk memotong sampel block parafin
pada saat sectoining dengan ketebalan 5µm
3. Water Bath Digunakan untuk pemanaskan air pada saat
sectioning agar sampel dapat merenggang dan
mengurangi kerutan
4. Hot Plate Digunakan untuk memanaskan preparat
5. Parafin dispenser Digunakan untuk mencairkan parafin pada saat
proses embedding
6. Cold plate Digunakan untuk mempercepat proses pembekuan
parafin pada saat selesai blocking
7. Automatic Tissue
Processor
Digunakan untuk proses dehidrasi
8. Staining Jar Digunakan untuk meletakkan larutan kimia pada
saat dehidrasi dan staining
9. Staining Rack Digunakan untuk meletakkan object glass pada saat
melakukan prses staining
10. Base Mould Digunakan untuk wadah cetakan pada saat
penanaman sampel ginad
11. Digital Timer Digunakan untuk penanda waktu pada saat preses
sectioning
9
Untag Banyuwangi
12. Lemari Asam Digunakan untuk pelindung pada saat staining agar
aroma bahan kimia tidak menyebar
13. Kuas Digunakan untuk membersihkan microtom
14. Cawan Bogorov Digunanakan untuk tempat meletakkan telur pada
saat pengamatan
15. Cawan Petri Digunakana untuk tempat memisahkan butiran telur
dengan selaputnya pada saat pengamatan
fekunditas
16. Timbangan Analitik Digunakan untuk menimbang ikan dan gonad
17. Handtally Counter Digunakan untuk menghitung jumlah telur
18. Dissecting set Digunakan untuk membedah ikan dan mengambil
gonad
19. Rak/Kotak Preparat Digunakan untuk meletakkan object glass yang
telah berisi preparat
20. Mikroskop Stereo
Zeiss Stemi 2000-C
Digunakan untuk menghitung fekunditas
21. Mangkuk plastik
kecil
Digunakan untuk tempat meletakkan staining rack
yang berisi preparat pada saat proses pewarnaan
dalam urutan air mengalir
22. Diamond pen Digunakan untuk menulis kode sampel pada object
glass
23. Meteran Digunakan untuk mengukur panjang ikan dalam FL
dan TL pada waktu di lapangan.
24. Freezer Digunakan untuk membekukan sampel
25. Papan ukur Digunakan untuk mengukur panjang total dan
panjang cagak pada ikan pada saat identifikasi
Tabel 2. Daftar Bahan yang digunakan dalam Praktik Kerja Lapangan
No. Nama Bahan Fungsi
1. Gonad betina ikan
cakang
Digunakan untuk objek yang diamati
2. Formalin Digunakan untuk mengawetkan sampel gonad
3. Air Digunakan untuk menetralkan objek, dan untuk
mengurangi warna yang terlalu tebal pada saat
10
Untag Banyuwangi
staining
4. Alkohol 70% Digunakan untuk membersihkan dan mengurangi
cairan dalam irisan gonad dalam tissue cassette
pada saat dehidrasi
5. Alkohol 90% Digunakan ntuk membersihkan dan mensterilkan
sampel saat dehidrasi dan mengurangi kandungan
cairan pada sampel
6. Alkohol Absolut Digunakan untuk membersihkan dan mensterilkan
sampel saat dehidrasi dan mengurangi kandungan
cairan pada sampel
7. Aquadest Digunakan untuk cairan penetral pada saat staining
dan cairan untuk membantu memisahkan telur
dengan selaputnya pada saat pemangatan
fekunditas.
8. Parafin Digunakan untuk penanaman gonad pada base
mould
9. Xylen Digunakan untuk membersihkan dan mensterilkan
sampel serta menghilangkan cairan dalam sampel
agar parafin bisa masuk ke jaringan. Dan pada saat
proses clearing xylen digunakan sebagai bahan
untuk menggantikan media alkohol dalam jaringan
gonad yang telah mengalami proses dehidrasi
10. Hematoxilin Digunakan untuk memberikan warna ungu pada inti
sel
11. Eosin Digunakan untuk memberikan warna orange pada
preparat
12. Ettelan Digunakan untuk merekatkan object glass dengan
cover glass
13. Tissue Digunakan untuk membersihkan peralatan
14. Kertas kalkir Digunakan untuk menuliskan identitas ikan pada
saat pengambilan sampel
15. Tissue Cassette Digunakan untuk meletakkan sampel gonad yang
telah dipotong yang akan dilanjutkan ke proses
11
Untag Banyuwangi
dehidrasi
16. Pipet Tetes Digunakan untuk menggambil larutan etellan saat
propes covering, dan untuk memindahkan sampel
telur
17. Botol Sampel Digunakan untuk wadah penyimpanan sampel
gonad
18. Sarung tangan Digunakan untuk melindungi tangan dari larutan
kimia pada saat proses preparasi sampel
19. Masker Digunakan untuk menutup hidung agar terhindar
dari bau menyengat pada larutan
20. Object glass Digunakan untuk pemaparan preparat
21. Cover glass Digunakan untuk penutup preparat di object glass
22. Pisau microtome Digunakan untuk mengiris preparat hasil blocking
27. Alat tulis Digunakan untuk mencatat hasil pengamatan
28. Jas lab Digunakan untuk melindungi tubuh dari bahan kimia
29. Sandal lab Digunakan untuk melindungi kaki dari bahan kimia
3.3 Metode Praktik Kerja Lapangan
Metode praktik kerja lapangan yang digunakan secara deskriptif. Metode
deskriptif menurut Sugiyono (2005), merupakan suatu metode yang digunakan
untuk menggambarkan atau menganalisis suatu hasil penelitian tetapi tidak
digunakan untuk membuat kesimpulan yang lebih luas. Berdasarkan teori
tersebut, metode deskriptif kuantitatif merupakan data yang diperoleh dari hasil
sampel yang di analisa sesuai dengan metode yang digunakan.
3.4 Teknik Pengambilan Data
3.4.1 Data Primer
Data primer adalah data yang diperoleh langsung dari sumbernya (Sugiyono,
2012). Sumber data primer yang digunakan dalam praktik kerja lapangan ini
meliputi:
Wawancara kepada pembimbing praktik kerja lapangan, dan pegawai
Loka Riset Perikanan Tuna, Bali.
Observasi terhadap tempat dan kegiatan berlangsungnya PKL
dengan cara mengamati dan mencatat hasil pengamatan dalam
pengambilan sampel, analisis tingkat perkembangan gonad,
12
Untag Banyuwangi
fekunditas dan diameter telur cakalang (Katsuwomus pelamis) di PPI
Kedonganan dan di Loka Riset Perikanan Tuna, Bali.
Partisipatif aktif dengan melibatkan diri langsung secara aktif dalam
melakukan kegiatan mulai dari pengambilan sampel gonad,
pembuatan preparat, dan analisa preparat di Laboratorium histologi
Loka Riset Perikanan Tuna, Bali.
Dokumentasi yang dilakukan untuk mendokumentasikan pada setiap
kegiatan yang dilakukan pada saat di lapangan maupun di
Laboratorium histologi Loka Riset Perikanan Tuna Bali.
3.4.2 Data Sekunder
Dalam praktik kerja lapangan ini adalah data yang diperoleh bukan secara
langsung dari sumbernya (Sugiyono, 2012). Sumber data sekunder yang dipakai
adalah sumber tertulis seperti sumber buku, majalah ilmiah, dan dokumen-
dokumen dari pihak yang terkait mengenai aspek biologi cakalang (Katsuwonus
pelamis)
3.5 Analisis Data
3.5.1 Hubungan Panjang Bobot Ikan
Panjang bobot ikan dianalisis dengan model persamaan Effendie (2002),
sebagai berikut:
Keterangan:
W = Bobot ikan (gr)
L = Panjang cagak ikan (cm)
a dan b = Konstanta
Untuk mengetahui apakah nilai b yang diperoleh lebih besar, sama dengan
atau lebih kecil dari 3, digunakan uji t (uji parsial) pada selang kepercayaan 95%
(Sparre dan Venema, 1998) dengan hipotesis :
b = 3 dinamakan pertumbuhan isometrik yaitu pertambahan panjang ikan
sebanding dengan pertambahan bobotnya.
b ≠ 3 dinamakan pertumbuhan alometrik yaitu pertambahan panjang lebih cepat
dari pada pertambahan bobot.
13
Untag Banyuwangi
3.5.2 Tingkat Kematangan Gonad
Tingkat Kematangan Gonad betina ditentukan secara visual dan histologis.
Tingkat Kematangan Gonad secara visual mengikuti kriteria menurut Schaefer
dan Orange (1956) yang pada ikan cakalang, dapat dilihat pada Tabel 3:
Tabel 3. Tingkat Kematangan Gonad Cakalang Betina Secara Visual
TKG Kategori Deskripsi
I Dara Berkembang
(Immature)
Gonad memanjang, ramping, tetapi kelamin
dapat ditentukan dengan pemeriksaan kasar.
Gonad jernih berwarna abu-abu hingga
berwarna kemerah-merahan, sel telur individu
tidak terlihat dengan mata telanjang.
II Perkembangan I
(Early maturing)
Gonad membesar, berwarna kemerah-merahan
dengan pembuluh kapiler, sel telur individu
belum dapat terlihat dengan mata telanjang,
ovari mengisi sekitar setengah ruang bawah.
III Perkembangan II
(Late maturing)
Gonad membesar, berwarna orange kemerah-
merahan, sel telur individu sudah dapat terlihat
dengan mata telanjang, gonad mengisi 2/3
ruang bawah.
IV Matang
(Ripe)
Gonad sangat membesar, sel telur individu
membesar dan berwarna jernih dan mudah
keluar dari lumen jika ditekan pada bagian
perut. Gonad mengisi penuh ruang bawah.
V Memijah
(Spawning)
Termasuk yang sudah memijah sekarang (salin)
dan telah memijah sebelumnya (post-
spawning), gonad sangat besar dan lunak. Telur
matang yang tertinggal dalam keadaan
terserap, telur berwarna jernih dan ada yang
masih tertinggal dalam ovari. Telur akan keluar
dengan sedikit penekanan pada perut. Sisa-sisa
telur matang berukuran diameter sekitar 1 mm.
14
Untag Banyuwangi
Penentuan kelas perkembangan gonad secara histologis yaitu dengan
memperhatikan keberadaan MAGO atau most advanced group of oocytes
(unyolked, early yolked, advanced, migratory nucleus, dan hydrated oocytes),
Postovulatory follicles, atresia alfa dan atresia beta (Farley dan Davis, 1999;
Farley et al., 2013). Penetuan tingkat perkembangan oosit untuk menentukan
MAGO menggunakan kriteria menurut Farley & Davis (1999) yang dikembangkan
pada ikan tuna sirip biru selatan (Thunnus maccoyii), yang dapat dilihat pada
Tabel 4:
Tabel 4. Tingkat Perkembangan Oosit Ikan Tuna Sirip Biru Selatan (Thunnus
maccoyii) menurut Farley & Davis (1999)
Kategori
Deskripsi
Gambar Preparat Histologi
Unyolked stage
(Belum
berkembang)
Sel telur berukuran kecil
dengan sitoplasma berwarna
ungu dan nukleus yang
berbentuk bulat. Peripheral
nucleoli mungkin bisa terlihat
di dalam nukleus,
bersamaan dengan
perbedaan warna dari
sitoplasma.
Early Yolked
stage
(Berkembang)
Butiran yolk yang berwarna
ungu pucat mulai terlihat di
sitoplasma. Butiran yolk
tersebut awalnya berada di
tepi oosit dan berpindah
kearah nukleus. Nukleus
telah terlihat. Keseluruhan
oosit berwarna merah muda
saat butiran yolk muncul di
tepi. Yolk yang berwarna
ungu masih terlihat dekat inti
sel. Zona radiata yang
berwarna ungu sangat
15
Untag Banyuwangi
terlihat dalam fase ini.
Advanced yoked
stage
(Permulaan
matang)
Butiran yolk yang berwarna
pink terlihat di sepanjang
oosit. Zona radiata melebar,
berubah menjadi merah
muda dan mengalami
penebalan. Nukleus terletak
di tengah-tengah.
Migratory
nucleus stage
(Hampir matang)
Nucleus berpindah ke tepi
dari oosit dan mulai muncul
bebrapa oil droplets
berukuran besar. Terkadang
bisa terlihat oosit dengan
butiran yolk dan oil droplets
saja. Jarang terlihat nukleus
terletak disudut oosit, tetapi
dengan mulai munculnya oil
droplets dibagian tengah
biasanya menandakan
adanya fase perpindahan
nukleus. Fase ini berumur
singkat dan hanya dapat
terjadi pada waktu tertentu.
Hydated stage
(Matang)
Butiran yolk bergabung
sepenuhnya (berwarna pink
keseluruhan). Oosit
mengalami perbesaran
ukuran yang signifikan dan
berbentuk tidak beraturan
(mungkin karena kehilangan
cairan selama proses
preparasi histologi) dengan
tidak atau tidak ada
16
Untag Banyuwangi
gelembung lemak (oil
droplets). Saat oosit meluas,
zona radiata merenggang
menjadi lebih tipis.
Postovulatory Follicle (POF)
Telur hydrate dikelilingi oleh folikel tipis yang tersusun atas lapisan dalam
dari sel granulosa dan satu lapisan luar sel teka. Ketika telur mengalami ovulasi,
telur lepas dari filikel ini. Folikel masih terdapat di tengah ovarium dan akan
berubah menjadi sebuah struktur yang disebut postovulatory follicle.
POFs dengan cepat menghilang dan diserap kedalam ovarium. Pada SBT,
proses penyerapan POF terjadi dalam kurun waktu 24 jam. POF dapat
diklasifikasi berdasarkan tingkatan umur ( tingkat degenerasi).
New POFs (umur 0 jam) : Ciri POF baru yaitu banyak dan besar dengan
tidak ada tanda-tanda degenerasi. Memiliki ciri bentuk lipatan rapat
dengan lumen terbuka. Sel granulosa tersususn atas nudei. Lapisan teka
terpisah, tidak begitu berlipat dan jarang berdekatan dengan sel
granulosa. Karakter lumen berisi butiran eosinophilic.
POF < umur 12 jam : POF yang kurang berumur dari 12 jam lebih kecil
dan akan terlihat sedikit pada preparat. Menunjukkan tanda degenerasi
yang jelas. Lipatan berkurang tetapi lumen masih terlihat. Granulosa tidak
lagi berupa benang-benang putus dari sel akan tetapi lebih tersebar
(namun masih terdapat sedikit). Lapisan teka asih terhubung dengan
lapisan granulosa. Lumen masih mengandung butiran eosinophilic.
POF umur 12-24 jam : POF lebih kecil, lipatan berkurang dan umumnya
memanjang. Lumen sangat kecil dan tidak terlihat butiran eosinophilic.
Lapisan teka masih ada, tapi jauh lebih tipis dan masih terhubung dengan
sel granulosa. Sel granulosa memiliki lebih sedikit pynotic nuclei dan
vakuola. POF dapat dilihat pada Gambar 2.
17
Untag Banyuwangi
Gambar 2. Preparat histologi menunjukkan POF pada ikan tuna sirip biru selatan
(Loka Riset Perikanan Tuna, 2019)
Dalam praktek kerja lapang ini, pengamatan postovulatory follicle (POF)
hanya terbatas pada kemunculan POF di setiap sampel yang diamati tanpa
megklasifikasi umur POF.
Atresia
Atresia merupakan penyerapan dari semua oosit, yolk dan folikel-folikelnya
namun tidak dilepaskan selama pemijahan. Atresia dibagi menjadi alpha atresia
(tahap awal) dan beta atresia (tahap akhir) (Farley & Davis, 1999).
Alpha atresia, merupakan butiran yolk telah rusak/pecah dan granulosa
membesar/melebar. Oosit memiliki bentuk yang tidak beraturan. Oosit berwarna
pink muda, dibandingkan dengan oosit non-atresia.
Beta atresia, yolk lebih terpecah-pecah. Oosit terlihat seperti sebuah
jaring laba-laba. Oosit beta atresia tersusun atas sel-sel granulosa dengan
intraseluler vakuola. Dapat dilihat pada Gambar 3.
a. Alpha artresia
b. Beta atresia
Gambar 3. Preparat histologi menunjukkan Atresia alfa dan beta pada ikan tuna
sirip biru selatan (Loka Riset Perikanan Tuna, 2019)
18
Untag Banyuwangi
Cakalang betina diklasifikasi sebagai individu dewasa (mature) jika pada
ovarinya ditemukan yolked oocytes (advanced, migratory nucleus atau hydrated),
atresia (alfa atau beta) dan/atau maturity markers. Sementara pada individu yang
belum dewasa (immature) pada ovarinya hanya ditemukan unyolked atau early
yolked oocytes (Schaefer, 1998; Farley dan Davis, 1998), serta tidak
ditemukannya atresia serta maturity markers.
Maturity markers dapat membedakan ikan yang belum dewasa (immature)
sampai dengan saat ikan dewasa (mature) namun sedang dalam masa istirahat
reproduksi (inactive). Maturity marker yang digunakan dalam analisis histologi ini
yaitu brown bodies (Farley & Davis, 1999; Farley et. al.,2013). Brown bodies
merupakan kumpulan bercak pigmen kuning kecoklatan di struktur jaringan
preparat gonad yang mungkin berasal dari sisa oosit atresia. Keberadaan brown
bodies menjadi suatu tanda bahwa ikan telah memasuki aktivitas post-spawning
atau telah memijah (Farley & Davis, 1999; Farley et. al.,2013), dapat dilihat pada
Gambar 4.
Gambar 4. Preparat histologi menunjukkan brown bodies pada ikan tuna
albacora (Loka Riset Perikanan Tuna, 2019)
Setelah gonad diketahui perkembangan oositnya (MAGO, keberadaan POF,
atresia dan maturity marker), kemudian gonad diklasifikasi menggunakan kriteria
yang dikembangkan oleh Farley et al., (2013) pada ikan albakora pasifik selatan
(Thunnus alalunga) yang disajikan pada Tabel 5.
19
Untag Banyuwangi
Tabel 5. Kriteria Klasifikasi Histologi menurut Farley et al., (2013)
Kelas Status
Maturitas
Aktivitas Kelas
Perkembangan
MAGO dan
tingkat POF
Atresia α
dan β
Maturity
markers
1 Belum
dewasa
Tidak
aktif
Belum dewasa Unyolked, tidak
ada POFs
Absen Tidak
ada
2 Belum
dewasa
Tidak
aktif
Berkembang Early yolked,
tidak ada POFs
Absen Tidak
ada
3 Dewasa Aktif Mampu
memijah
Advanced
yolked, tidak ada
POFs
<50% atresia
α, atresia β
mungkin ada
Mungkin
ada
4 Dewasa Aktif Memijah Migratory
nucleus atau
hydrated
dan/atau POFs
<50% atresia
α, atresia β
mungkin ada
Mungkin
ada
5 Dewasa Tidak
aktif
Regressing-
potensial
reproduksi
Advanced
yolked, tidak ada
POFs
≥50% atresia
α, atresia β
ada
Mungkin
ada
6a Dewasa Tidak
aktif
Regressed 1 Unyolked atau
early yolked,
tidak ada POFs
100% atresia
α, atresia β
mungkin ada
Mungkin
ada
6b Dewasa Tidak
aktif
Regressed 2 Unyolked atau
early yolked,
tidak ada POFs
Tidak ada
atresia α,
atresia β ada
Mungkin
ada
7 Dewasa Tidak
aktif
Regenerating Unyolked atau
early yolked,
tidak ada POFs
Absen Ada
3.5.3 Fekunditas
Perhitungan fekunditas menggunakan metode sub contoh bobot gonad atau
disebut metode gravimetrik. Pendugaan fekunditas berdasarkan rumus (Bagenal,
1978) sebagai berikut:
Wg
F = x n
Ws
Keterangan:
F : Fekunditas (butir)
Wg : Bobot gonad (gr)
Ws : Bobot sampel (gr)
N : Jumlah telur dalam sub sampel (butir)
20
Untag Banyuwangi
3.5.4 Diameter Telur
Pada tiap tahap perkembangan sel telur (oosit), diameter diukur sebanyak
lima ulangan. Estimasi rata-rata diameter telur menggunakan pendekatan yang
dilakukan oleh Williams (1997) dengan rumus sebagai berikut:
D1 + D2 + D3 + D4 + D5
d =
5
Akan tetapi juga dikarenakan bentuk telur yang tidak bulat sempurna maka
pengukuran diameter telur diperoleh dengan mencari rata-rata diameter
terpanjang dan terpendek, dengan rumus sebagai berikut:
Dn=
Dx + Dy
2
Keterangan:
Dn = Diameter telur
Dx = Diameter terpanjang
Dy = Diameter terpendek
21
Untag Banyuwangi
BAB IV. HASIL PRAKTIK KERJA LAPANGAN
4.1 Keadaan Umum Lokasi PKL
4.1.1 Sejarah Singkat Loka Riset Perikanan Tuna
Loka Riset Perikanan Tuna atau disingkat LRPT merupakan Unit Pelaksana
Teknis Kementerian Kelautan dan Perikanan di bidang riset sumber daya
perikanan tuna dan sejenisnya (tuna like species) yang berada di bawah dan
bertanggung jawab kepada Kepala Badan Riset dan Sumber Daya Manusia
Kelautan dan Perikanan. Loka Riset Perikanan Tuna pertama dibentuk pada
tahun 2011 dengan nama Loka Penelitian Perikanan Tuna berdasarkan
Persetujuan Menteri Negara Pendayagunaan Aparatur Negara dan Reformasi
Birokrasi dalam Surat Nomor B-3677/M.PAN-RB/12/12 tanggal 2 Desember
2010. Kemudian pada tahun 2017, nama Loka Penelitian Perikanan Tuna
berubah menjadi Loka Riset Perikanan Tuna yang ditetapkan melalui PERMEN
KP No. 16/ PERMEN-KP/ 2017 tentang Organisasi dan Tata Kerja Loka Riset
Perikanan Tuna.
Dasar Hukum pembentukan Loka Riset Perikanan tuna yang disingkat
dengan LRPT meliputi Persetujuan Menteri Negara Pendayagunaan Aparatur
Negara dan Reformasi Birok rasi dalam Surat Nomor B-3677/M.PAN-RB/12/12
tanggal 2 Desember 2010 dan Peraturan Menteri Kelautan dan Perikanan
Republik Indonesia Nomor: PER.27/MEN/2010 tentang Organisasi dan Tata
Kerja Loka Penelitian Perikanan Tuna. Pada tanggal 27 Maret 2017, Loka
Penelitian Perikanan Tuna secara resmi berganti nama menjadi Loka Riset
Perikanan Tuna sesuai dengan Peraturan Menteri Kelautan dan Perikanan
Republik Indonesia Nomor 16/PERMEN-KP/2017 Tentang Organisasi dan Tata
Kerja Loka Riset Perikanan Tuna.
LRPT mempunyai tugas melaksanakan kegiatan riset sumber daya
perikanan tuna dan sejenisnya (tuna like species) di wilayah Republik Indonesia
di perairan Samudera Hindia. Dalam melaksanakan tugas melaksanakan
kegiatan riset sumber daya perikanan tuna dan sejenisnya (tuna like species),
LRPT menyelenggarakan fungsi:
Penyusunan rencana program dan anggaran, pemantauan, evaluasi dan
laporan.
Pelaksanaan kegiatan riset sumber daya perikanan tuna dan sejenisnya
(tuna like species) di wilayah Republik Indonesia pada perairan
22
Untag Banyuwangi
Samudera Hindia yang meliputi aspek biologi, lingkungan, dinamika
populasi dan eksploitasi.
Pelayanan teknis, jasa, informasi, komunikasi dan kerja sama riset.
Pengelolaan prasarana dan sarana riset.
Pelaksanaan urusan tata usaha dan rumah tangga.
4.1.2 Peta Lokasi Praktik Kerja Lapangan
Lokasi Praktek Kerja Lapang di lakukan di Kantor Loka Riset Perikanan
Tuna (LRPT) yang terletak di Jl.Mertasari No.140 Br.Suwung Kangin, Sidakarya,
Denpasar, Bali. Dengan Kode Pos 80223, Indonesia dengan titik koordinat 08°
42’ 18.54” LS dan 115° 14’ 00,23” BT, dapat dilihat pada Gambar 5.
Gambar 5. Peta Praktik Kerja Lapangan di LRPT (Google earth, 2020)
4.1.3 Visi dan Misi Loka Riset Perikanan Tuna
Visi
“Menjadi Institusi Utama Penyedia Data dan Informasi Perikanan Tuna di
Samudera Hindia”.
Misi
Sebagai langkah konkret untuk mewujudkan visi tersebut, telah
ditetapkan misi Loka Riset Perikanan Tuna Benoa yang dirumuskan
sebagai berikut:
Menyediakan data dan informasi terkini hasil penelitian perikanan
tuna.
Mengembangkan profesionalisme kelembagaan dan sumberdaya
penelitian perikanan tuna.
23
Untag Banyuwangi
4.1.4 Struktur Organisasi Loka Riset Perikanan Tuna
Adapun struktur organisasi dan pejabat struktural yang duduk dalam
organisasi Loka Riset Perikanan Tuna. Dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar 6. Struktur Organisasi LRPT Tahun 2019 (Sumber: lp2t.kkp.go.id)
Loka Riset Perikanan Tuna memiliki struktur organisasi yang dipimpin oleh
kepala Loka Riset Perikanan Tuna dan empat bagian dibawahnya yaitu: Urusan
Tata Usaha mempunyai tugas melakukan urusan tata usaha, keuangan,
kepegawaian, perlengkapan, dan rumah tangga, serta penyusunan laporan.
Subseksi Tata Operasional mempunyai tugas melakukan penyusunan rencana,
progam dan anggaran, penyebarluasan hasil riset serta pemantauan dan
evaluasi. Subseksi Pelayanan Teknis mempunyai tugas melakukan pelayan
teknis, pengelolaan saranadan prasarana , dan dan kerja sama riset. Kelompok
Jabatan Fungsional mempunyai tugas melaksanakan kegiatan penelitian
sumberdaya perikanan tuna dan sejenisnya (tuna like-species) dan kegiatan lain
sesuai dengan tugas masing-masing jabatan fungsional berdasarkan peraturan
perundang-undangan.
Laboratorium histologi merupakan laboratorium yang terdapat di Loka Riset
Perikanan Tuna dan mulai berproses pada tahun 2011. Di dalam Laboratorium
histologi terdapat 2 ruangan antara lain ruang Laboratorium Basah da
Laboratorium Kering (ruang analisa). Penelitian yang dilakukan di Laboratorium
Histologi yaitu tentang Pengamatan Tingkat Kematanagn Gonad ikan betina
secara mikroskopis, Penentuan Tingkat Kematangan Gonad ikan dilakukan mulai
dari pembuatan preparat gonad secara histologi hingga analisis. Pembuatan
24
Untag Banyuwangi
preparat gonad dilakukan di Laboratorium Basah, sedangkan proses analisa
dilalakukan di Laboratorium Kering.
Organisasi Laboratorium Histologi meliputi kepala Laboratorium yaitu Hety
Hartaty,S.Pi, penyelia Laboratorium yaitu Gussasta Levi A,S.S.T.Pi, dan dua
orang analis yaitu Indrastiwi Pramulati, S.Si dan Desy Shintya Irene,S.Kel.
Sampel yang dianalisa adalah sampel gonad ikan betina dari spesies tuna dan
sejenisnya yang berasal dari lokasi penelitian Loka Riset Perikanana Tuna.
4.1.5 Sarana dan Prasarana Loka Riset Perikanan Tuna
Adapun fasilitas yang disediakan di LRPT Denpasar Bali:
Ruang Kepala Loka Riset Perikanan Tuna
Ruang Tata Usaha
Ruang Tata Operasional
Ruang Pelayanan Teknis
Ruang peneliti
Ruang rapat
Mushola
Pantri
Parkiran
Guest House
Pura
Perpustakaan
Perpustakaan Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT) Denpasar memiliki 3
ruangan pada lantai 3 Gedung Loka Riset Perikanan Tuna yang antara lain terdiri
dari 1 ruangan khusus untuk koleksi bahan/buku perpustakaan, 1 ruangan untuk
tempat baca dan staf pengelola perpus, dan 1 ruangan lagi untuk gudang.
Prasarana ruangan perpus antara lain adalah 4 unit rak buku modern, 1 lemari
kaca, 1 filing cabinet besi, 1 unit meja baca kapasitas 6-8 kursi, 2 unit meja/kursi
staf pengelola dan 1 meja buku tamu dan 1 meja lagi untuk pajangan majalah-
malalah perikanan terbaru serta ada 1 unit komputer PC beserta printer untuk
pengelolaan dan pengolahan data dan bahan pustaka/buku perpustakaan.
Selain itu ruang perpustakaan LRPT juga difasilitasi dengan AC untuk
kenyamanan, telepon (jaringan lokal LRPT) untuk dapat mempermudah
berkomunikasi dengan staf LRPT di ruang lainnya, dan dispenser untuk air
minum. Dapat dilihat pada Gambar 7.
25
Untag Banyuwangi
Gambar 7. Perpustakaan LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id)
Laboratorium Histologi
Fokus Kegiatan histologi di Loka Riset Perikanan Tuna menitik beratkan
pada perkembangan gonad ikan dengan pengamatan tingkat/stadium
kematangan secara mikroskopis melalui jaringan gonadnya dan perhitungan
fekunditas. Jalur ini dipilih sesuai dengan keahlian staf laboratorium serta
ketersedian peralatan yang ada untuk fokus pada penelitian tersebut. Dapat
dilihat pada Gambar 8.
Gambar 8. Laboratorium Histologi LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id)
26
Untag Banyuwangi
Laboratorium Otolith
Laboratorium Otolith Loka Riset Perikanan Tuna merupakan laboratarium uji
yang sudah beropersi sejak tahun 2016. Fokus kegiatan uji otolith di Loka Riset
Perikanan Tuna menitikberatkan pada umur dan pertumbuhan ikan dengan
pengamatan lingkaran umur ikan menggunakan bagian keras dari ikan seperti
otolith, sisik dan tulang belakang. Metode ini dipilih sesuai dengan keahlian staf
labarotorium serta ketersedian peralatan yang ada untuk fokus pada penelitian
tersebut. Tenaga analis sebagai pendukung sumberdaya manusia yang sudah
terlatih dengan peralatan dan bahan dalam tahapan-tahapan analisis otolith ikan.
Dapat dilihat pada Gambar 9.
Gambar 9. Laboratorium Otolith LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id)
27
Untag Banyuwangi
Laboratorium Genetika
Laboratorium Genetik di Loka Riset Perikanan Tuna (LRPT) merupakan
salah satu laboratorium uji yang beroperasional mulai tahun 2016. Peralatan
pendukung yang dimiliki sejak tahun 2015 dan diupayakan seluruh peralatan
pendukung penelitian akan dilengkapi sampai tahun 2017 secara bertahap.
Fokus kegiatan penelitian yang dilakukan adalah menganalisis beberapa
parameter genetik populasi tuna dan sejenisnya di Samudera Hindia. Analisis
sampel genetik yang bisa dikerjakan di laboratorium genetik meliputi tahap
ekstraksi DNA, purifikasi, amplifikasi PCR dan elektroforesis. Penyediaan data
dan informasi tentang genetik (DNA) populasi baik itu keragaman, variasi
molekuler dan struktur populasi merupakan hal yang sangat penting diketahui
untuk melakukan pengelolaan sumber daya ikan tuna. Keragaman genetik
mempunyai dampak secara langsung maupun tidak terhadap populasi,
komunitas dan ekosistem. Selain itu pemahaman tentang struktur populasi
bertujuan untuk keberlanjutan dan efektifitas manajemen sumberdaya ikan.
Informasi genetik pada ikan dengan migrasi yang tinggi seperti tuna sangat
penting diketahui untuk pemanfaatan yang bersifat lestari dan berkelanjutan.
Dapat dilihat pada Gambar 10.
Gambar 8. Laboratorium Genetika (Sumber: lp2t.kkp.go.id)
28
Untag Banyuwangi
Laboratorium Data
Laboratorium Data Loka Riset Perikanan Tuna merupakan laboratorium
yang bertugas untuk mengumpulkan, menginventarisasi, menginput data dan
mempelajari tentang perikanan tuna di WPP 572 dan WPP 573. Data pada
laboratorium data LRPT adalah data yang berorientasi hasil port sampling-based
catch monitoring program, data biologi, survei darat dan survei observasi laut
sebagai dasar referensinya. Saat ini data perikanan khususnya tuna menjadi
media penting untuk perencanaan pembangunan dan pengelolaan sumber daya
perikanan yang berkelanjutan pada cakupan wilayah nasional, regional maupun
internasional dalam kaitanya menjadikan Indonesia poros maritim dunia. Dapat
dilihat pada Gambar 11.
Gambar 11. Laboratorium Data LRPT (Sumber: lp2t.kkp.go.id)
29
Untag Banyuwangi
4.2 Uraian Kegiatan
4.2.1 Pengambilan Sampel Cakalang (Katsuwonus pelamis)
Pengambilan sampel cakalang dilakukan di Pangkalan Pendaratan Ikan
Kedonganan, Bali pada tanggal 12-14 Februari 2020. Identifikasi cakalang
(Katsuwonus pelamis). Identifikasi cakalang dapat dilihat pada Gambar 12.
Gambar 12. Identifikasi Ikan Cakalang 9Dokumentasi pribadi)
Proses pengumpulan data yaitu sebagai berikut, pada Gambar 13.
Gambar 13. Alur Pengambilan Data
Dalam pengambilan sampel, yang pertama dilakukan yaitu identifikasi ikan
dan pengambilan gambar jika diperlukan. Pada saat pengambilan gambar, ikan
diletakkan di atas penggaris atau papan ukur kemudian di dokumentasikan.
Kemudian dilanjutkan pengambilan data panjang cagak (cm FL). Pengukuran
dilakukan dengan cara meletakkan ikan di atas papas ukur, kemudian diukur
mulai dari ujung mulut sampai pangkal ekor dan di catat hasilnya pada form
pengambilan sampel. Pengukuran bobot ikan dilakukan dengan cara ditimbang
Identifikasi cakalang
Pengambilan gambar
Pengukuran data panjang FL
Pengukuran data berat ikan
Pembedahan ikan dan pengambilan gonad
Penentuan TKG secara visual
Pengukuran data berat gonad ikan
30
Untag Banyuwangi
Pemotongan sampel gonad
ikan
Pengawetan (Fiksasi) Dehidrasi
Pewarnaan (Staining)
Pemotongan (Sectioning)
Penanaman sampel
( ) Blocking
Penutupan preparat
(Covering) Hasil Preparat
dan hasilnya dicatat dalam form pengambilan sampel. Kemudian dilakukan
pembedahan ikan untuk mengambil gonad dengan cara ikan di bedah dengam
menggunakan alat bedah atau dissecting set, di bedah mulai dari anus hingga
menuju dada dilakukan secara horizontal, kemudian gonad ikan di ambil secara
hati-hati, setelah itu gonad ditimbang pada timbangan analitik untuk menentukan
bobot gonad pada ikan, dan hasilnya dicatat pada form pengambilan sampel,
gonad tersebut juga diamati secara morfologi terkait dengan tingkat kematangan
gonad dan hasilnya dari pengamatan juga dicatat dalam form pengambilan
sampel. Kemudian gonad yang telah diambil dimasukkan ke dalam botol sampel
dan diberi larutan formalin 10% untuk diawetkan agar gonad tidak mudah rusak
sehingga gonad dapat digunakan dalam proses pengamatan selanjutnya.
4.2.2 Pembuatan Preparat Gonad Cakalang
Pembuatan preparat gonad dilakukan di Laboratorium Histologi Loka Riset
Perikanan Tuna Denpasar, Bali. Sampel yang digunakan untuk pengujian yaitu
sampel gonad ikan cakalang betina. Proses dalam pembuatan preparat sampel
gonad, sebagai berikut pada Gambar 14.
Gambar 14. Alur Pembuatan Preparat Gonad
31
Untag Banyuwangi
Prosedur dalam pembuatan preparat gonad ikan secara histologi, antara
lain:
1. Pemotongan Sampel Gonad
Pada saat pemotongan sampel gonad, pemotongan dilakukan dengan
menggunakan cutter atau pisau dan pinset untuk mengambil gonad. Pada gonad
yang utuh dibagi menjadi tiga bagian yaitu bagian pangkal, tengah, dan ujung,
akan tetapi pada analisis histologi gonad ikan cakalang ini diambil paga bagian
tengah, karena pada titik tersebut dapat mewakili seluruh gonad. Proses
pemotongan gonad dapat dilihat pada gambar 15.
Gambar 15. Proses Pemotongan Sampel
Pemotongan sampel gonad dilakukan secara hati-hati, dengan ketebalan ± 3
mm karena untuk menghindari kandungan air yang berlebihan pada irisan
sampel gonad tersebut, jika sampel irisan gonad terlalu tebal maka nanti yang
dihasilkan juga kurang bagus. Sampel yang masih tersisa disimpan lagi di botol
sampel yang berisi formalin 10% agar sampel gonad tersebut tetap awet dan
tidak mudah rusak, karena sampel gonad tersebut dapat digunakan untuk
pengujian ulang, dan dapat sebagai cadangan apabila terjadi proses yang gagal
selama pengamatan berlangsung, sehingga dapat dilakukan pengamatan ulang
dengan menggunakan sampel gonad yang masih tersisa.
2. Pengawetan (Fiksasi)
Sampel gonad yang selesai dipotong kemudian dimasukkan kedalam tissue
cassette yang sebelumnya tissue cassette telah diberi kode sesuai dengan
ketentuan yang telah ditentukan pada kode penerimaan sampel, penulisan kode
sampel di tissue cassette menggunakan pensil. Tissue cassette yang telah berisi
sampel kemudian ditutup dan dimasukkan ke dalam staining jar yang berisi
larutan formalin 10% dilakukan perendaman ± 24 jam, proses perendaman yang
32
Untag Banyuwangi
dilakukan disebut dengan proses fiksasi. Proses fiksasi dapat dilihat pada
gambar 16.
f
a. Sampel yang akan dipotong
b. Measukkan irisan gonad ke
dalam Tissue Cassate
c. Proses pengawetan dimasukkan ke dalam staining jar
Gambar 16. Proses Fiksasi Sampel Gonad
Proses fiksasi bertujuan untuk mempertahankan elemen-elemen yang
terdapat pada jaringan agar tetap sama dalam bentuk, warna dan ukurannya.
Dan juga proses fiksasi berfungsi untuk agar jaringan lebih mudah menyerap zat
warna.
3. Dehidrasi, Clearing dan Infiltrasi
Proses dehidrasi bertujuan untuk mengurangi cairan yang berada di dalam
sampel gonad, cairan tersebut adalah air karena air tersebut dapat mengganggu
proses pada tahap selanjutnya yaitu pada saat proses perendaman pada parafin
cair. Jika masih terdapat air di dalam sampel gonad, maka parafin tidak dapat
menembus pada jaringan gonad tersebut, sehingga akan bepengaruh pada
tahap selanjutnya, yaitu pada saat proses sectioning, sampel gonad tersebut
setelah blocking ketika diiris akan susah, mudah hancur, dan berkerut. Proses
dehidrasi dilakukan dengan menggunakan alat Automatic Tissue Processor
(ATP). Tissue cassette yang dimasukkan dalam keranjang kemudian dimasukkan
berturut-turut kedalam larutan yang telah diisi ke mesin Automatic Tissue
Processor, tahapan larutan dehidrasi dapat dilihat pada Gambar 17.
33
Untag Banyuwangi
Gambar 17. Alur Tahapan Proses Dehidrasi
Pada tahap larutan dehidrasi dibagi menjadi 3 fase yaitu pada alkohol 70%,
90%, dan absolu. Selanjutnya proses clearing atau penjernihan menggunakan
larutan xylene. Dilanjutkan dengan proses infiltrasi atau embedding dengan
parafin cair yang dipanaskan pada suhu 60 °C. Pada setiap larutan ditempatkan
pada wadah atau gelas yang berukuran besar, dan sampel gonad yang terdapat
di dalam tissue cassette dimasukkan ke dalam keranjang yang berbentuk tabung,
kemudian semua wadah yang telah berisi sesuai dengan urutan dipasang pada
alat Automatic Tissue Processor. Waktu yang diperlukan pada saat running
sampel ± 8 jam, jadi setiap larutan membutuhkan waktu selama 45 menit, dalam
proses running sampel berlangsung pada penggunaan alat Automatic Tissue
Processor tidak perlu memindahkan objek atau keranjang yang berisi tissue
cassette, dari larutan satu ke larutan yang lainnya, karena mesin Automatic
Tissue Processor bekerja secara otomatis sesuai waktu yang telah disetting.
Gambar mesin Automatic Tissue Processor dapat dilihat pada gambar 18.
Gambar 18. Mesin ATP, saat dehidrasi berlangsung
Alkohol 70%
Alkohol 70%
Alkohol 90%
Alkohol 90%
Xylene Xylene Alkohol Absolut
Alkohol Absolut
Parafin Parafin
34
Untag Banyuwangi
4. Penanaman Sampel (Blocking)
Tahapan selanjutnya yaitu pembuatan sampel Blok (Blocking). Blocking
merupakan proses dalam penanaman sampel dalam parafin yang bertujuan
untuk memudahkan dalam proses selanjutnya yaitu proses pemotongan
(sectioning). Dalam proses embedding, parafin yang digunakan adalah parafin
padat, parafin padat dimasukkan kedalam parfin dispenser dengan suhu 60ºC
agar mencair, kemudian setelah mencair menyiapkan cetakan yaitu base mould
yang akan dituangi parafin cair, setelah itu sampel gonad yang setelah melewati
proses dehidrasi, pada keranjang yang berisi sampel gonad dalam parafin cair
dikeluarkan dari mesin Automatic Tissue Processor dan diletakkan pada wadah
plastik, kemudian tissue cassette dibuka persiapan untuk pengambilan sampel
gonadnya. Base mould kemudian diisi dengan parafin cari hingga volume parafin
mencapai setengah wadah base mould, kemudian sampel gonad diambil dan
diletakkan pada base mould yang berisi parafin cair dengan posisi dan ditengah,
kemudian base mould ditutup dengan menggunakan tissue cassette yang
terdapat kode sampel gonad, setelah itu dialirin parafin lagi hingga volume pada
base mould penuh dan menutup seluruh area. Base mould kemudian diangkat
dan diletakkan diatas cold plate yang bertujuan agar parafin cair tersebut cepat
dingin dan mengeras, setelah membeku hasil block dimasukkan ke dalam freezer
yang bertujuan untu mempermudah membuka dari cetakan. Proses blocking
dapat di lihat pada gambar 19.
a. Penataan gonad pada base
mould
b. Pengisian parafin cair
Gambar 19. Proses Blocking Sampel Gonad
35
Untag Banyuwangi
Dalam proses blocking harus dilakukan secara hati-hati, karena pada saat
pemindahan sampel gonad pada tissue cassette yang dimasukkan ke dalam
cairan parafin dalam base mould harus dilakukan dengan cepat agar gonad tidak
cepat kering dan menempel pada tissue cassette, sehinnga susah untuk proses
pengambilannya.
5. Pemotongan (Sectioning)
Sectioning atau di sebut dengan pengirisan sampel gonad yang dilakukan
untuk mendapatkan irisan jaringan gonad yang sangat tipis dengan
menggunakan alat yang bernama rotary microtome dan terdapat pisau pemotong
(microtome blade) dengam ketebalan irisan sampel gonad yaitu 5µm. Blok
parafin yang mengeras dilanjutkan dengan proses trimming yaitu pada blok
parafin dibersihkan pada bagian pinggir tissue cassette dari parafin yang
berceceran pada saat blocking, dan juga dilakukan pemotongan parafin yang
tidak terdapat gonad di dalamnya dengan menggunakan pisau. Tujuan dilakukan
proses trimming yaitu agar dalam proses sectioning dapat dilakukan lebih efektif
dan efisien, sehingga irisan pita parafin yang dihasilkan bagus dan tepat pada
sasaran yaitu pada jaringan gonad.
Blok parafin yang sudah dilakukan trimming kemudian di pasang pada
microtome yang sudah diatur jarak antara block parafin dengan microtom blade
karena itu sangat berpengaruh pada hasil pengirisan pita parafin, standart
ketebalan pita parafin yaitu 5µm. Dalam pengaturan microtome perlu
diperhatikan pada saat penguncian engkol pemutar sampel, karena jika kita lalai
dalam pengoperasiannya dapat membahayakan jari kita terkena microtome
blade, maka dari itu perlu diperhatikan dan sangat berhati-hati pada saat
mengoperasikan. Pemutar sampel dilakukan dengan putaran konstan sampai
block yang berisi sampel gonad teriris, dan pilihlah irisan sampel gonad yang
baik yang sesuai dengan ketebalan yang ditentukan. Pita parafin yang berisi
irisan gonad selanjutnya diambil menggunakan piset di kedua ujung irisan,
selanjutnya irisan dicelupkan ke dalam water bath yg berisi air hangat dengan
suhu 45-50ºC, pada saat meletakkan sambil sedikit ditarik agar pita parafin
merenggang agar tidak terjadi kerutan pada irisan gonad tersebut. Kemudian pita
parafin di ambil menggunakan object glass yang sudah di beri kode sama
dengan kode yang terdapat di tissue cassette, pengambilan pita parafin
dilakukan secara berhati-hati agar pita parafin menempel pada object glass
dengan baik dan tidak pecah. Setelah itu object glass yang berisi irisan gonad
36
Untag Banyuwangi
dibersihkan dari air yang menempel dengan menggunakan tissue, kemudian
object glass di letakkan pada hot plate dengan suhu 50 ºC agar object glass
mengering dan irisan gonad dapat menempel dengan baik. Proses sectioning
sampel dapat dilihat pada gambar 20.
Gambar 20. Proses Sectioning
6. Pewarnaan (Staining)
Preparat yang sudah kering setelah proses sectioning, kemudian dilakukan
proses tahap selanjutnya yaitu proses pewarnaan (staining). Pewarnaan
berfungsi untuk memberikan warna pada jaringan agar dapat mempermudah
proses identifikasi menggunakan mikroskop pada saat analisa. Metode yang
digunakan pada saat pewarnaan adalah metode Harris Hematoxylin-Eosin dari
Luna (1968). Prinsip pewarnaannya itu memasukkan zat warna pada jaringan,
zat warna yang dipakai yaitu hematoxylin dan eosin. Hematoxylin berfungsi untuk
mewarnai inti sel, karena karena inti sel bersifat asam dan kandungan
hematoxylin bersifat basa, sedangkan eosin berfungsi untuk mewarnai
sitoplasma yang bersifat basa dan kandungan eosin sendiri asam. Urutan larutan
pada proses staining dapat dilihat pada gambar 21.
37
Untag Banyuwangi
Gambar 21. Tahapan Pewarnaan Preparat Gonad
Sebelum dilakukan proses pewarnaan, object glass yang berisi irisan gonad
yang sudah kering kemudian ditata pada staining rack, setelah itu staining rack
dimasukkan ke dalam larutan pewarna secara berurutan dan sesuai dengan
waktu yang telah ditentukan. Langkah pertama yang dilakukan yaitu staining rack
dimasukkan ke dalam xylene, karena berfungsi untuk melunturkan parafin yang
terdapat pada jaringan gonad, kemudian dimasukkan ke dalam alkohol absolut
dan alkohol 90% yang berfungsi untuk redehidrasi yaitu untuk memasukkan
cairan kembali ke dalam jaringan gonad, selanjutnya di masukkan ke dalam
aquadest yang berfungsi untuk menetralkan jaringan, kemudian dimasukkan ke
dalam pewarnaan yaitu hematoxylin, setelah itu diangkat dan di aliri air mengalir
agar zat warna yang terdapat pada jaringan tidak terlalu pekat, kemudian di
masukkan lagi ke dalam zat warna yaitu eosin yang berfungsi untuk mewarnai
sitoplasma, setelah itu diangkat dan di aliri air kembali. Setelah dimasukkan ke
dalam zat warna, cairan yang terdapat di jaringan harus dikurangi, agar preparat
tidak mudah busuk dan berubah warna, dengan cara memasukkan ke dalam
larutan pencuci yaitu alkohol 90%, alkohol absolut, dan yang terakhir larutan
xylene, agar jaringan menjadi kering dan dapat di identifikasi menggunakan
mikroskop. Setelah proses staining selesai, kemudian preparat diletakkan di atas
meja datar, dan preparat di bersihkan dari bekas warna yang menempel di object
glass selqain pada jaringan. Urutan larutan pada proses staining di lemari asam
dapat dilihat pada gambar 22.
Xylene (5 menit)
Alkohol Absolut
(1 menit)
Alkohol 90% (1 menit)
Aquadest (1 menit)
Aliran Air (1 menit)
Eosin (2 menit)
Aliran Air (1 menit)
Hematoxylin (4 menit)
Alkohol 90% (1 menit)
Alkohol Absolut (2 menit)
Xylene (4 menit)
38
Untag Banyuwangi
a. Lemari asam
b. Urutan larutan proses staining
Gambar 22. Urutan larutan pada proses staining di lemari asam
7. Penutupan Preparat (Covering)
Proses covering yaitu proses penutupan object glass dengan cover glass,
dalm proses penutupan ini menggunakan lem etelen yang ditetesi sebanyak 3
tetes, agar object glass dan cover glass dapat mengcover dan melekat dengan
baik. Pada saat proses covering harus dilakukan secara berhati-hati karena agar
tidak terdapat gelembung udara diantara object glass dan cover glass, hal
tersebut sangt penting dan perlu diperhatikan karena jika terdapat gelembung
udara objek tidak dapat diamati. Kemudian setelah covering selesai dilakukan
pelabelan preparat dengan menulis kode sampel yang sesuai dengan kode yang
terdapat di object glass, penulisan kode ditulis di kertas label, kemudian ditempel
di preparat gonad. Proses covering dapat dilihat pada gambar 23.
a. Ditetesi dengan etelen
b. Penutupan dengan cover glass
Gambar 23. Proses Covering
39
Untag Banyuwangi
4.2.3 Hasil Analisis Data
1. Hubungan Panjang Bobot
Hubungan panjang bobot dapat menunjukkan pola pertumbuhan cakalang.
Jumlah sampel cakalang yang didapatkan selama kegiatan sebanyak 74 ekor
dengan sebaran panjang antara 21,9 – 69,0 cmFL dan kisaran bobot antara 146-
7590 gram. Hasil analisis hubungan panjang dan bobot cakalang menghasilkan
persamaan W = 0,0088FL3,1819 Berdasarkan persamaan tersebut nilai konstanta
a = 0,0088 dan nilai konstanta b = 3,1819. Nilai b menunjukkan bahwa pola
pertumbuhan ikan cakalang yang didaratkan di Kedonganan, Bali bersifat
isometrik, yaitu bahwa pertambahan panjang ikan sebanding dengan
pertambahan bobot. Grafik hubungan panjang dan bobot ikan cakalang dapat
dilihat pada gambar 24.
Gambar 24. Grafik Hubungan Panjang Bobot
2. Tingkat Perkembangan Gonad Cakalang Secara Visual
Data sampel yang diambil untuk pengamatan tingkat kematangan gonad
betina secara visual dan histologi sama yaitu di ambil dari perwakilan dalam
setiap panjang kelas ikan, dan diperoleh 8 sampel gonad betina. Hasil dari
pengamatan secara visual menunjukkan bahwa terdapat 4 tingkat kematangan
gonad, yaitu terdiri dari TKG 1, TKG 2, TKG 4, dan TKG 5. Dapat dilihat pada
Tabel 6 dan Gambar 25.
Hubungan Panjang Berat Cakalang
8000
7000 L = 0.0088FL3.1819
6000 R² = 0.9856
5000 n=74
4000
3000
2000
1000
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Panjang cagak (FL cm)
Ber
at ik
an (
gr)
40
Untag Banyuwangi
Tabel 6. Data Tingkat Kematangan Gonad Secara Visual
Kode Sampel
Panjang cagak
(cm)
TKG
PSJ 003 69 4
PSJ 005 63 5
PSJ 009 33 2
PSJ 010 48 2
PSJ 011 28,3 1
PSJ 012 55 4
PSJ 014 53 4
PSJ 017 60 4
TKG 1
(Dokumentasi LRPT)
TKG 2
(Dokumentasi pribadi)
TKG 4
(Dokumentasi pribadi)
TKG 5
(Dokumentasi pribadi)
Gambar 25. Gonat betina yang di amati ( Dokumentasi pribadi)
41
Untag Banyuwangi
3. Tingkat Perkembangan Gonad Cakalang Betina Secara Histologis
Dan data sampel yang diambil untuk pengamatan tingkat kematangan gonad
betina secara histologi, diperoleh 8 preparat sampel gonad betina. Hasil dari
pembacaan secara histologi menunjukkan bahwa fase tingkat perkembangan
oosit sampai pada fase advanced yolked stage. Beberapa fase tingkat
perkembangan oosit yang ditentukan mengacu kepada kriteria Farley dan Davis
(1999).
Dari hasil penentuan tingkat perkembangan oosit (MAGO, POF, atresia alfa
dan beta) serta maturity marker dapat ditentukan kelas perkembangan gonad
sampel cakalang. Dari 8 sampel yang diamati, berikut adalah kelas
perkembangan gonad cakalang tersebut dapat dilihat pada tabel 7.
Tabel 7. Kelas Perkembangan Gonad Cakalang
No.
Sampel
Panjang
Ikan
(FL cm)
Kelas
Perkembangan
Gonad
MAGO POF Atresia
alfa
Atresia
Beta
Brown
Bodies
PSJ 003 69 Spawning
capable
Advanced
yolked
√ √ √
PSJ 005 63 Spawning
capable
Advanced
yolked
√ √ √
PSJ 009 33 Immature Unyolked
PSJ 010 48 Regenerating Unyolked √
PSJ 011 28,3 immature Unyolked
PSJ 012 55 Spawning Advanced
yolked
√ √ √ √
PSJ 014 53 Spawning Advanced
yolked
√ √ √
PSJ 017 60 Spawning Advanced
yolk
√ √ √ √
42
Untag Banyuwangi
POF
43
Untag Banyuwangi
Gambar 26. Tingkat Perkembangan Oosit Cakalang (unyolked, early yolked,
advanced yolked, atresia alfa, atresia beta, postovulatory follicle) dan maturity
marker (brown bodies)
(a) (b)
(c) (d)
Gambar 27. Tingkat Perkembangan Gonad Cakalang Betina Secara Histologis,
(a) immature; (b) spawning capable; (c) spawning; dan (d) regenerating
Berdasarkan hasil penentuan TKG cakalang secara visual sebanyak 37%
merupakan ikan yang belum dewasa, sementara ikan dewasa sebanyak 62,5%
dan diduga pernah memijah. Secara histologis sebanyak 25% immature, dan
75% mature atau diduga sudah pernah memijah, dapat dilihat pada tabel 8
gambar 28.
Tabel 8. Perbandingan TKG secara Visual dan Histologi
Kode
Sampel
Panjang
FL (cm)
TKG
secara visual
TKG
secara histologi
PSJ 003 69 Mature Mature
PSJ 005 63 Mature Mature
PSJ 009 33 Immature Immature
PSJ 010 48 Immature Mature
PSJ 011 28,3 Immature Immature
PSJ 012 55 Mature Mature
44
Untag Banyuwangi
PSJ 014 53 Mature Mature
PSJ 017 60 Mature Mature
Gambar 28. Grafik Perbandingan TKG Secara Visual dan Histologi
Berdasarkan hasil penentuan TKG secara visual dan histologi ditemukan
perbedaan komposisi antara ikan dewasa dan belum dewasa (Gambar 23). Hal
ini dikarenakan pada sampel PSJ 010 yang berukuran 48 cm FL secara visual
masuk dalam kategori TKG 2 (ikan yang belum dewasa) sedangkan secara
histologi masuk dalam kelas perkembangan regenerating (ikan dewasa). Pada
kelas perkembangan regenerating ditunjukkan dengan adanya oosit tingkat
paling tinggi unyolked, namun ditemukan banyak brown bodies, yang merupakan
maturity marker atau tanda-tanda bahwa ikan pernah memijah di masa lampau
atau sebelumnya.
4. Fekunditas Cakalang
Pada perhitungan fekunditas bertujuan untuk memprediksi berapa banyak
jumlah larva atau benih yang akan dihasilkan oleh setiap ikan. Yang dilakukan di
Laboratorium histologi LRPT perhitungan fekunditas menggunakan metode
gravimetrik yaitu perhitungan fekunditas berdasarkan perbandingan bobot gonad
total dan bobot gonad yang diamati. Proses dalam melakukan perhitungan
fekunditas dapat dilihat pada gambar 29.
100%
TKG Histologi Mature
TKG Histologi Immature
TKG Visual Mature
TKG Visual Immature
0%
28-33 33-38 43-48 48-53 53-58 58-63 63-68 68-73
Kelas panjang (cmFL)
Per
sen
tase
has
il p
emb
aca
an
45
Untag Banyuwangi
Menyalakan mikroskop stereo dan komputer
Dan telur di pindahkan ke
cawan bogorov
Ambil telur menggunakan
pipet tetes
Kemudian telur di cacah, dan di bersihkan dari selaput yang masih menempel
PSJ 017 / L = 60 cm PSJ 012 / L = 55 cm
Gambar 29. Alur Proses Pengamatan Fekunditas
Pada gonad betina ikan cakalang yang utuh diambil dan ditimbang bobot
totalnya (Wg) dengan menggunakan timbangan digital, dan dari gonad tersebut
diambil bobot sub-sampel gonad yang akan diamati, bobot sampel gonad
berkisar 0,5-1gr (Ws) dengan mengikuti penelitian sebelumnya yaitu oleh Farley
dan Davis (1999). Sampel gonad yang telah ditimbang diletakkan di cawan petri,
kemudian ditambahkan aquadest agar mempermudah pada saat pemisahan
telur ikan dengan selaput ikan yang masih menempel, pemisahan sampel gonad
menggunakan spatula. Setelah telur terpisah dari selaputnyan kemudian telur di
pindahkan ke cawan bogorov denan menggunakan pipet tetes, setelah itu mulai
perhitungan di bawah mikroskop. Perhitungan jumlah telur dengan menggunakan
mikroskop stereo yang disambungkan ke PC, perhitungan dapat dilakukan
dengan cara melihat pada layar monitor, dengan menggeser cawan bogorov,
dan menghitung jumlah telurnya dengan menggunakan handtally counter.
Perhitungan Fekunditas dapat dilihat pada gambar 30.
Gambar 30. Perhitungan Fekunditas
Hasil
fekunditas
Menghitung jumlah gonad
dengan menggunakan
handtally counter
Kemudian sampel gonad
di amati di bawah
mikroskop stereo
Ditambahkan
aquadest
Sampel gonad diletakkan di cawan petri
Penimbangan gonad sampel yang diambil
untuk pengamatan
Penimbangan gonad betina
utuh ikan cakalang
46
Untag Banyuwangi
Menetukan oosit stage
Mencari ukuran oosit stage yang
paling besar
Mengambil
gambar
Mengukur
diameter telur, secara vertikal dan horizontal
Dari 8 sampel gonad cakalang betina yang diamati tingkat perkembangan
gonadnya, hanya sampel dengan kondisi memijah atau spawning yang dapat
dianalisis fekunditasnya. Terdapat 3 sampel gonad yang memiliki tingkat
perkembangan oosit paling tinggi advanced yolked serta ditemukan POF. Dari 3
sampel cakalang dengan kisaran panjang antara 53-60 cmFL tersebut, hasil
perhitungan fekunditas diperoleh sebanyak 209.914 – 438.858 butir dengan
jumlah rata-rata 318.757 butir telur.
5. Diameter Telur
Pengukuran diameter telur yang dilakukan di bawah mikroskop yang
dilengkapi dengan mikrometer okuler yang sudah ditera sebelumnya dengan
mikrometer obyektif. Pembesaran yang dilakukan dengan pembesaran 10 x 0,25.
Proses dalam penghitungan diameter telur pada gambar 31.
Gambar 31. Alur Perhitungan Diameter Telur Cakalang
Tulis hasil
pengukuran dalam form reproduksi
Dalam pengukuran
dilakukan 5 kali pengulangan
dalam setiap stage
Menentukan rata-
rata diameter dengan rumus
47
Untag Banyuwangi
Gambar 32. Perhitungan Diameter Telur Cakalang
Tabel 9. Diameter Telur Cakalang yang didaratkan di Kedonganan, Bali
Rata-rata ukuran diameter telur ikan cakalang pada setiap perkembangan
oosit yaitu Unyolked stage 69,459 µm, Early yoled stage 105,059 µm, dan
Advanced yolked stage 226,853 µm.
PSJ 012 / L = 55cm TKG = UN, EY, AY
No. Tingkat Perkembangan Oosit Diameter Oosit
1. Unyolked stage 37,115 µm - 94,223 µm
2. Early yolked stage 144,293 µm - 206,627 µm
3. Advanced yolked stage 228,979 µm - 470,735 µm
48
Untag Banyuwangi
BAB V. PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil dari kegiatan yang dilakukan selama Praktik Kerja
Lapangan, dapat disimpulkan bahwa:
1. Proses penentuan TKG secara histologi terdiri dari: (1) preparasi gonad
meliputi: Pemotongan sampel gonad, Fiksasi, Dehidrasi, Blocking,
Sectioning, Staining, dan Covering; (2) penentuan perkembangan oosit;
(3) penentuan maturity marker; (4) klasifikasi perkembangan gonad.
2. Terdapat 3 sampel gonad yang memiliki tingkat perkembangan oosit
paling tinggi advanced yolked serta ditemukan POF. Dari 3 sampel
cakalang dengan kisaran panjang antara 53 - 60 cmFL tersebut, hasil
perhitungan fekunditas diperoleh sebanyak 209.914 - 438.858 butir
dengan jumlah rata-rata 318.757 butir telur.
3. Rata-rata ukuran diameter telur ikan cakalang pada setiap perkembangan
oosit yaitu Unyolked stage 69,459 µm, Early yolked stage 105,059 µm,
dan Advanced yolked stage 226,853 µm.
5.2 Saran
Adapun saran yang bisa disampaikan yaitu sebaiknya waktu pelaksanaan
Praktik Kerja Lapangan bisa diperpanjang lagi minimal waktu yang digunakan
selama 2 bulan, agar ilmu yang dipelajari selama kegiatan di Loka Riset
Perikanan Tuna lebih banyak dan lebih menguasai.
49
Untag Banyuwangi
DAFTAR PUSTAKA
Bagenal, T. B. (1978). Aspects of fish fecundity in ecology of fresh water fish
production. Methods for Assessment of Fish Production in Fresh water,
3rd Edition, Oxford, Blackwell Scientific Publications, 75–101.
Batts, B. S. (1972). Sexual Maturity, Fecundity, and Sex Ratios of the Skipjack
Tuna, Katsuwonus pelamis (Linnaeus), in North Carolina Waters.
Transactions of the American Fisheries Society, 101(4), 626–637.
Collette, B. B., dan C. E. Nauen. 1983. FAO species catalogue. Scombrids of the
Word. An Annotated and Illustrated Catalogue of Tunas. Mackerels,
Bonitos, and Related Species Known to Date. FAO. Rome. FAO Fis
Synop. 125 (2) : 137 pp
Effendie. 2002. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusantara. Yogyakarta.
Farley, J. H., & Davis, T. L. (1998). Reproductive dynamics of southern bluefin
tuna, Thunnus maccoyii. Fishery Bulletin, 96, 223–236.
Farley, J.H., Williams, A.J., Hoyle, S.D., Davies, C.R., Nicol, S.J., 2013.
Reproductive dynamics and potential annual fecundity of South Pacific
albacore tuna (Thunnus alalunga). PLoS One 8, e60577Schaefer, K.M.,
1998. Reproductive biology of yellowfin tuna Thunnus albacares in the
eastern Pacific Ocean. IATTC 21, 05–269.
Hartaty, H., & Arnenda, G.L. 2019. Penentuan Ukuran Pertama Kali Matang
Gonad (Lm) Cakalang (Katsuwonus pelamis Linnaeus, 1758) Di Samudra
Hindia Selat Bali. Jurnal Penelitian Perikanana Indonesia. 25(2) : 135 –
145.
Jatmiko, I., Hartaty, H., & Bahtiar,A. (2015). Biologi reproduksi ikan cakalang
(Katsuwonus pelamis) di Samudera Hindia bagianTimur. BAWAL Widya
Riset Perikanan Tangkap. 7(2) : 87–94.
Loka Riset Perikanan Tuna. 2019. Petunjuk Teknis Laboratrium Histologi. kkp.
Unpublished.
50
Untag Banyuwangi
Rocman, F., Nugraha, B., & Wujdi, A. (2015) Pendugaan parameter populasi ikan
cakalang (Katsuwonus pelamis, Linnaeus, 1758) di Samudra Hindia
Selatan Jawa. Bawal Widyariset Perikanan Tangkap, 7(2), 77-85.
Schaefer, M. B., & Orange, C. J. (1956). Studies of the sexual development and
spawning of yellowfin tuna, Neothunnus macropterus, and skipjack,
Katsuwonus pelamis, in three areas of the Eastern Pacific Ocean, by
examination of gonads. Inter-American Tropical Tuna Commission
Bulletin, 1(6), 281–349.
Sparre, P., Venema, S., C., 1998. Introduction to Tropical Fish Stock
Assessment. Part I: Manual, 306. FAO, Rome.
Sugiyono. 2005. Metode Penelitian Administrasi. Bandung : Alfabeta.
Sugiyono. 2012. Metode Penelitian Pendidikan Pendekatan Kuantitatif, Kualitatif,
dan R&D. Bandung: ALFABETA. 2012 (cet. 15)
Sulistyaningsih, R. K., Barata, A., & Siregar, K. (2017). Perikanan Pancing Ulur
Tuna du Kedonganan, Bali. Jurnal Penelitian Perikanan Indonesia, 17(3),
185–191. http://dx.doi.org/ 10.15578/jppi.17.3.2011.185-191
Williams, M. A. (1997). Quantitative Methods in Biology. In Practical Methodsin
Electron Microscopy, (Vol. 6, p. 234). Amsterdam and New York:
Elsevier/NorthHolland BiomedicalPress.
51
Untag Banyuwangi
LAMPIRAN
Lampiran 1. Dokumentasi Peralatan yang digunakan
Mesin ATP
Microtome
Water bath
Parafin dispenser
Cold plate
Lemari asam
52
Untag Banyuwangi
Base mould
Diamond pen
Disetting set
Timbangan
Digital Timer
Timbangan gonad
53
Untag Banyuwangi
Handly counter
Cawan petri
Cawan bogorov
Komputer
Microskop
Microskop stereo
54
Untag Banyuwangi
Lampiran 2. Dokumentasi Bahan yang digunakan
Alkohol 70%
Alkohol 90%
Alkohol Absolut
Hematoxylin
Eosin
Parafin
55
Untag Banyuwangi
Formalin 10%
Xylen
Tissue
Tissue Cassette
Object glass
Botol sampel
56
Untag Banyuwangi
Jas laboratorium
Sandal
Sarung tangan
Masker
57
Untag Banyuwangi
Lampiran 3. Dokumentasi Kegiatan
Lokasi pengambilan sampel
Pembelian ikan di pasar kedonganan
Cakalang akan dilakukan pemotongan
Pemotongan sampel gonad
Proses degidrasi
Proses staining
Proses covering
Proses blocking
58
Untag Banyuwangi
Lampiran 4. Surat Permohonan Izin PKL
59
Untag Banyuwangi
Lampiran 5. Surat Persetujuan PKL
60
Untag Banyuwangi
Lampiran 6. Surat Keputusan Tentang Penetapan Dosen Pembimbing PKL
61
Untag Banyuwangi
Lampiran 7. Logbook Praktik Kerja Lapangan
62
Untag Banyuwangi
63
Untag Banyuwangi
64
Untag Banyuwangi
65
Untag Banyuwangi
66
Untag Banyuwangi
67
Untag Banyuwangi
68
Untag Banyuwangi
69
Untag Banyuwangi
70
Untag Banyuwangi
71
Untag Banyuwangi
72
Untag Banyuwangi
73
Untag Banyuwangi
74
Untag Banyuwangi
75
Untag Banyuwangi
76
Untag Banyuwangi
77
Untag Banyuwangi
78
Untag Banyuwangi
79
Untag Banyuwangi
80
Untag Banyuwangi
81
Untag Banyuwangi
82
Untag Banyuwangi
83
Untag Banyuwangi
84
Untag Banyuwangi
85
Untag Banyuwangi
86
Untag Banyuwangi
87
Untag Banyuwangi
88
Untag Banyuwangi
89
Untag Banyuwangi
90
Untag Banyuwangi
91
Untag Banyuwangi
Lampiran 8. Tugas Resume Jurnal
92
Untag Banyuwangi
93
Untag Banyuwangi
94
Untag Banyuwangi
95
Untag Banyuwangi
96
Untag Banyuwangi
97
Untag Banyuwangi
98
Untag Banyuwangi
99
Untag Banyuwangi
100
Untag Banyuwangi
101
Untag Banyuwangi
102
Untag Banyuwangi
103
Untag Banyuwangi
104
Untag Banyuwangi
105
Untag Banyuwangi
106
Untag Banyuwangi
107
Untag Banyuwangi
108
Untag Banyuwangi
109
Untag Banyuwangi
110
Untag Banyuwangi
111
Untag Banyuwangi
112
Untag Banyuwangi
113
Untag Banyuwangi
114
Untag Banyuwangi
115
Untag Banyuwangi
Lampiran 9. Perhitungan Diameter Telur
116
Untag Banyuwangi
Lampiran 10. Surat Keterangan / Sertifikat
