Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro ...2015 Anais do I Simpósio Cearense...
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Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle e Rafael Pereira
Organizadores
Anais do
I Simpósio Cearense de Microbiologia e
II Encontro de Microbiologia de Sobral
Micro-organismos emergentes e Reemergentes
1 ª edição Sobral, Ceará
2015
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
Reitor Fabianno Cavalcante de Carvalho
Vice-Reitora
Izabelle Mont`Alverne Napoleão Albuquerque
Diretora do Centro de Ciências Agrárias e Biológicas Cláudia de Castro Goulart
Coordenador do Curso de Ciências Biologias
Luiz Ferreira Aguiar Ponte
Coordenadora Geral do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
Comissão Científica Prof.ª Dr.ª Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
Prof.ª Dr.ª Erika Helena Salles de Brito Prof.ª M.Sc. Carolina Sidrim de Paula Cavalcante Prof.ª M.Sc. Francisca Lidiane Linhares de Aguiar
Prof. Esp. Antônio Carlos Nogueira Sobrinho
Membros Discentes
Andréa Maria Neves
Anny Sampaio Silva
Deisiane Fernandes
Francisca Mirla Alves de Araújo
Francisco Fábio Pereira de Souza
Layanne Mesquita Lopes
Marcilio Matos Ferreira
Maria Gleiciane Soares Coutinho
Marillyze Maria Nogueira Duarte
Rafael Pereira
Samuel Souza Oliveira
Priscilla Evelyn de Souza Silveiro
Maria Clara de Albuquerque
Naiani Oliveira Chaves Timbó
Capa
Fábio de Melo Magalhães
Bibliotecário Responsável
Francisco Ramos Madeiro Neto
CRB-3/1374
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
SUMÁRIO
APRESENTAÇÃO ................................................ .......... 05
RESUMOS EXPANDIDOS ............................................ 06
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
APRESENTAÇÃO
Neste livro estão reunidos os resumos expandidos dos trabalhos
aprovados no I Simpósio Cearense de Microbiologia (I SIMIC) e II Encontro de
Microbiologia de Sobral com o tema Micro-organismos Emergente e
Reemergentes, realizado no período de 26 a 27 de Novembro de 2015, na
Universidade Estadual Vale do Acaraú, localizada na cidade de Sobral- Ceará.
A programação foi composta de tal forma que abrange as mais diferentes
áreas da Microbiologia, com um total de duas mesas redondas intituladas
“Micro-organismos emergentes e reemergentes na área da saúde e alimentícia” e
“Produtos naturais com atividades antimicrobianas”, como cinco minicursos,
além dos vinte e nove trabalhos que foram aprovados pela comissão cientificas
do evento e apresentados nas seções orais.
O evento teve o objetivo de garantir o espaço para apresentação e
discussão de pesquisas na área de Microbiologia e em outras áreas afins para que
tenham como foco a melhoria da saúde, meio ambiente e educação.
Diante do exposto, o evento tem o prazer de realizar a publicação de
relevantes pesquisas nesses Anais. Vale ressaltar que, o conteúdo dos resumos
aqui publicados é de inteira responsabilidade dos seus autores.
Os organizadores
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ AANÁLISE DA MICROBIOTA FÚNGICA ANEMÓFILA EM AMBIENTES ABERTOS
E FECHADOS NO INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E
TECNOLOGIA DO CEARÁ, CAMPUS ACARAÚ
Tamires de Araújo Fortunato
Renan Vasconcelos da Graça Filho
Aline de Albuquerque Ferreira
Maria Gleiciane da Rocha
Carlos Eduardo Cordeiro Teixeira
Manoel Paiva de Araújo Neto
Elciane Maria do Nascimento Farias
INTRODUÇÃO: Na literatura científica, existem diversos trabalhos relatando a importância da
realização de estudos acerca da microbiota fúngica aérea, tanto como componentes da
microbiota normal, quanto causadores de enfermidades e degradadores e bens de consumo. Vale
ressaltar também que esses organismos são facilmente encontrados em qualquer ambiente,
destacando-se as espécies que se dispersam pelo ar, denominadas de anemófilas (MEZZARI et
al., 2002). A ocupação aérea desses microrganismos sofre variações, tanto em qualidade como
em quantidade. A microbiota aérea também é diversificada em ambientes abertos e ambientes
fechados (PEI-CHIN et al., 2002). OBJETIVO: Desse modo o conhecimento desses
organismos é extremamente necessário para o meio cientifico e industrial, cujo esses
conhecimentos são aplicados em novos estudos. Assim o presente estudo teve por objetivo
identificar e classificar a microbiota aérea fúngica de ambientes abertos e fechados do Instituto
Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará (IFCE) - Campus Acaraú. MATERIAL E
MÉTODOS: O estudo foi realizado no IFCE - Campus Acaraú, Ceará, Brasil, onde foram
utilizados três pontos para amostragem (P1, P2 e P3). Com relação aos pontos, (P1) esta
localizado em uma sala de aula já (P2) encontrasse situado no Laboratório de Biologia, ambos
locais são abertos com ventilação natural e grande incidência de luz solar durante o dia. Já o
ponto (P3) é um local fechado e acondicionado situado na sala de tecnologia de informação.
Para realização da coleta seguiu-se a metodologia proposta por Pantoja et al., (2007), com
modificações. Assim, para cada ponto foi utilizado o método de sedimentação passiva em placa
de Petri, contendo Ágar Sabouraud dextrose a 2% acrescido de cloranfenicol (0,05g/L). Cada
placa foi exposta por 12 horas em cada um dos cinco pontos de coleta selecionados, na altura de
2 m acima do solo. Após o período de exposição, as placas foram vedadas e incubadas à
temperatura de 25-28ºC durante sete dias, com observações diárias. Ao observar o aparecimento
de colônias fúngicas foi realizado à contagem das unidades formadoras de colônias (UFC) em
cada placa. Para a identificação de fungos filamentosos foi utilizado o microcultivo em lâmina,
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ em meio Ágar Batata. Para a identificação desses fungos foram utilizadas chaves de
identificação e testes fisiológicos referidos por De Hoog et al. (2002), para cada grupo. A
identificação das espécies foi baseada em características fenotípicas, como a descrição da
macromorfologia, mediante observação e da micromorfologia, obtida a partir da
realização de microcultivo, o que permite melhor visualização das estruturas fúngica
(DE HOOG et al., 2002). As colônias sugestivas de leveduras foram submetidas à
coloração de Gram e observadas ao microscópio óptico (40X) para verificar a presença
de blastoconídeos, hifas ou pseudohifas, assim como descartar a possibilidade de
contaminação bacteriana, bem como a presença de colônias mistas em meio Chromagar
Candida®. Em seguida, as leveduras foram identificadas quanto ao gênero e, sempre
que possível, quanto à espécie, por meio da realização de testes morfológicos e
bioquímicos específicos (KURTZMAN; FELL; BOEKHOUT, 2011). RESULTADOS
E DISCUSSÃO: Foram isolados 23 fungos, sendo 22 filamentosos e apenas uma
levedura. Isolaram-se os gêneros fúngicos Candida, Cladosporium, Curvularia,
Fusarium, Aspergillus e Penicilium, sendo esse último o mais representativo (7/23).
Segundo LACAZ et al. (2002), os gêneros Cladosporium, Fusarium, Aspergillus e
Penicillium são uns dos principais componentes fúngico do ar e da poeira, desse modo
os fungos isolados encontram-se dentro do esperado para esse habitat. O gênero
Aspergillus também teve uma quantidade de indivíduos representativa com 6/23. O
gênero Aspergillus é constituído por mais de 200 espécies, sendo somente 20 que têm
ligação direta com doenças que afetam o homem e os animais, podendo gerar sinusite,
asma e alergias. Esses fungos são ubíquos e podem ser encontrados em vários locais,
utilizando o ar como meio de veiculação de seus conídios (BATISTA et al., 2003). O
ponto de coleta acondicionado (P1) teve uma maior incidência numa relação de 10 dos
23 indivíduos. O estudo de fungos em ambientes fechados torna-se assim importante,
pois segundo Belo et al. (2009), o número de estudos que abordam o tema no Brasil é
escasso, logo existem poucos relatos sobre microbiota anemófila em ambientes internos,
climatizados artificialmente. CONCLUSÃO: A partir dos dados obtidos foi possível
observar que os gêneros Penicillium e Aspergillus foram os mais presentes, vale
destacar que esses podem ser produtores de micotoxinas, as quais, conforme a
quantidade ingerida, é nociva à saúde humana (RODRÍGUEZ-AMAYA; SABINO,
2002). Sendo dessa forma importante o estudo da microbiota fúngica anemófila,
sinalizando a importância da realização do aprofundamento dos estudos de forma mais
abrangente, tornando-se rotineiro o monitoramento do ar da instituição.
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA
BATISTA, R.S.; GOMES, A.P.; SANTOS, S.S.; ALMEIDA, L.C.; FIGUEIREDO, C.E.S.; PACHECO, S.J.B. Manual de infectologia. Rio de Janeiro: Revinter, 2003. p. 461. BELO, R. A. S.; SILVA, A. C. A.; GUIMARÃES, C. S. P.;SIQUEIRA, F. S.; ARAKAWA, N. S.; KHOURI, S.Caracterização e Controle de Fungos Anemófilos Obtidos de Ambientes Internos Climatizados Artificialmente In:XIII ENCONTRO LATINO AMERICANO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E IX ENCONTRO LATINO AMERICANO DE PÓS-GRADUAÇÃO. Paraiba -2006. DE HOOG, G.S.; GUARRO, J.; GEN, J. (eds) Atlas of Clinical Fungi. Centraalbureau voor Schinmelculture. Universitat Rovira i Virgilli, Delf. 2002. KURTZMAN, C.; FELL, J.W.; BOEKHOUT, T. The Yeasts, Fifth Edition: A Taxonomic Study. Elsevier Science; 5ª ed., 2011. 2354p. LACAZ, C.S.; PORTO, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS-VACCARI, E.M.; MELO, N.T. Tratado de micologia médica. 9. ed. São Paulo: Sarvier, 2002. p. 1104. MEZZARI, A.; PERIN, C.; SANTOS, Jr.S.A.; BERND, L.A.G. Airbornefungi in thecityof Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil. RevInstMedTrop S Paulo.2002; n°44, Vol.5, p.269 SIDRIM, J.J.C.; ROCHA, M.F.C. Micologia médica à luz de autores contemporâneos. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2004. p.388. RODRÍGUEZ-AMAYA, D.B.; SABINO. M. Mycotoxin research in Brazil: the last decade in review. Braz. J. Microbiol., 2002. n.33, p.1-11
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ANALISE DA MICROBIOTA FÚNGICA DE Ameivula ocellifera e Iguana iguana DO
MUNICIPIO DE ACARAÚ, CEARÁ
Gerlane Luziana de Maria
Renan Vasconcelos da Graça Filho
Aline de Albuquerque Ferreira
Jéssica Nayane da Silva
Carlos Eduardo Cordeiro Teixeira
Amaurício Lopes Rocha Brandão
Manoel Paiva de Araújo Neto
INTRODUÇÃO: Os fungos são organismos eucariotas, uni ou multicelular e são divididos em
filamentosos e leveduras (TORTORA et al., 2012) são abundantes na natureza sendo muito
importantes, tanto ecologicamente quanto economicamente, também são considerados os
lixeiros do mundo, pois degradam todo tipo de restos orgânicos e têm implicações em varias
áreas tais como na medicina humana e veterinária, farmácia, nutrição, fitopatologia, agricultura,
biotecnologia, entre outras (TEVA et al., 2010). Estima-se que cerca de 1,5 milhão de
espécimes fúngicas existam no planeta terra (SULLIVAN et al. 2005). Em média 250.000
espécies foram descritas, destes milhares 200 são catalogadas como agentes patogênicos, ou
seja, podem causar doenças em humanos e outros animais (DEACON 2006).São organismos
ubíquos encontrados até mesmo em animais que, são como hábitas para as comunidades
micológicas, incluído os répteis, nos quais muitos desses microrganismos fazem parte da sua
microbiota. Alguns trabalhos descrevem o isolamento fúngico em órgãos de lagartos selvagens
(Agama agama) e geckos (Hemidactylus sp.), e isolados micológicos em amostra de pele de
lagartos hígidos de cativeiro e em amostras de fezes de Terrapene carolina carolina. Contudo,
os relatos de isolados fúngicos de répteis da Caatinga ainda são escassos (NARDONI et al.,
2008). OBJETIVO: O objetivo do trabalho foi analisar a microbiota fúngica associada à
Ameivula ocellifera e Iguana iguana da Caatinga no município de Acaraú, CE. MATERIAL E
MÉTODOS: O município de Acaraú esta localizado na região Norte do Ceará, cerca de 198 km
da capital, Fortaleza. O clima da região é do tipo tropical quente semi-árido brando, a
pluviosidade anual é de 1139,7 mm, com temperaturas médias anual variando entre 26º e 28ºC e
período chuvoso entre os meses de janeiro a abril (IPECE, 2006). Para a colheita de animais foi
realizado o método de busca ativa (CAMPBELL; CHRISTMAN, 1982), foram duas investidas
a campo com intervalo de dois meses cada. Os animais foram manuseados de acordo com lei de
nº 11. 794 de 08 de outubro de 2008, seguindo todas as normas estabelecidas para manuseio e
experimento de animais vivos. Foram utilizados Swab estéreis para a coleta de amostras, cujo a
boca e cloaca dos lagartos foram amostradas. Após a coleta os animais foram soltos em seu
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ ambiente natural e o material colhido foi acondicionado e transportado em 2 mL de salina estéril
ao Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM) IFCE - Campus Acaraú, e
em seguida realizado o procedimento microbiológico. As amostras coletadas foram inoculadas
em placa de petri contendo Ágar Saboraud acrescido de cloranfenicol (0,05 g/L) . Depois de
inoculadas as placas foram mantidas em temperatura de 25-27 Cº por uma semana e observadas
diariamente. Depois do isolamento, foi feito o microcultivo de fungos filamentosos e leveduras,
além de testes bioquímicos específicos, como assimilação de carboidratos e cultivo em
Chromagar Candida® de acordo com Kurtzman, Fell e Boekhout (2011) e De Hoog (2002). Em
seguida, as leveduras foram identificadas quanto ao gênero e espécie sempre que possível.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Foram isolados sete gêneros de leveduras e fungos
filamentosos de Ameivula ocellifera e Iguana iguana . Em A. ocellifera foram isolados
dois gêneros de fungos filamentosos Mucor sp. e Hortaea sp., e dois em I. iguana,
Aspergillus sp. e Cladosporium sp. Foram isolados três gêneros de leveduras em
Ameivula ocellifera, Candida sp., Rhodotorulla sp. e Trichosporon sp., em I. iguana
apenas Candida sp., foi isolado. A. ocelllifera foi o animal com mais diversidade de
fungos. Leveduras e fungos filamentos dos gêneros Candida sp., Trichosporon sp.,
Rhodotorulla sp. e Mucor sp., são descritos como espécimes amplamente distribuídos
no meio ambiente o que facilita que sejam encontrados também em répteis (CARLOS,
2009). Já os isolados de Aspergillus sp. e até mesmo Candida sp. e Mucor sp. são
encontrados em répteis com pneumonia, algumas dessas doenças fúngicas são
associadas a todas as ordem da classe Reptilia,(ROSENTHAL; MADER, 1996). O
gênero Candida sp., foi isolado tanto em A. ocellifera quanto em I. iguana, isto pode
estar associado ao fato do gênero Candida sp., estar presente em varias partes do
ambiente como vegetais, ar, água, pele e trato gastrointestinal de animais
(BRILHANTE, et al., 2015). A identificação das espécies fúngicas presente na
microbiota de animais é importante para o conhecimento das espécies causadoras de
doença em humanos, principalmente para indivíduos imunocomprometidos, além do
monitoramento da saúde ambiental. CONCLUSÃO: O gênero Candida sp., foi o único
que foi isolado em Ameivula ocellifera e Iguana iguana. Mas todos isolados podem
representar risco para saúde humano, quando esses são imunossuprimidos ou
imunocormprometido. Com base nos resultados encontrados acredita-se que existe uma
diversidade específica de fungos para cada espécie da herpetofauna, contudo são
necessários mais estudos na área, tanto para comprovar esta diversidade fúngica como
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ para especificar se existem variações destes microrganismos em diferentes períodos do
ano.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICA
BRILHANTE, R.S.N. ; PAIVA, M.A.N.; SAMPAIO, C.M.S.; CASTELO-BRANCO, D.S.C.M.; ALENCAR, L.P.; BANDEIRA, T.J.P.G.; CORDEIRO, R.A.; PEREIRA NETO, A.W.; MOREIRA, J.L.B.; SIDRIM, J.J.C.; ROCHA, M.F.G. Surveillance of Azole Resistance Among Candida spp. as a Strategy for the Indirect Monitoring of Freshwater Environments. Water, Air and Soil Pollution, v. 226, p. 1-10, 2015. CAMPBELL, H.W.; CHRISTMAN, S.P. Field techniques for herpetofaunal community analysis. In: N.J. Scott Jr. (Ed.). Herpetological communities: a Symposium of the Society for the Study of Amphibians and Reptiles and the Herpetologists’ League. U.S. Fish Wildlife Service, Washington. 1982. DEACON, J. Fungal biology.4. ed.Oxford: Blackwell Science. 2006.372p. HECKMAN, D.S.; GEISER, D.M.; EIDELL, B.R.; STAUFFER, R.L.; KARDOS, N.L.; HEDGES, S.B. 2001. Molecular evidence for the early colonization of land by fungi & plants. Science 293: 1129-1133. DE HOOG GS, GUARRO J & GEN´ E J (eds) Atlas of Clinical Fungi 2nd edition. Centraalbureau voor Schinmelculture. Universitat Rovira i Virgilli, Delf. 2002 IPECE- Instituto de Pesquisa e Estratégia Econômica do Ceará. Perfil básico municipal Acaraú. Fortaleza-CE 2006. KURTZMAN, C.; FELL, J.W.; BOEKHOUT, T. The Yeasts, Fifth Edition: A Taxonomic Study. Elsevier Science; 5ª ed., 2011. 2354p. MORAIS, A. M. L . ; PAES,R. A.; HOLANDA,V. L . A Micologia. In: TEVA, A.; MORAIS, A. M. L.; RIBEIRO, F. C.; FERNADEZ, J. C. C.; NOGUEIRA, J. M. R.; CARNEIRO, L. A. D. ; MIGUEL, L. F. S.; OLIVEIRA, M. B. S. C.; STEPHENS, P. R. S.;PAES,R. A.; SILVA,V. L.; HOLANDA,V. L. Conceitos e métodos para formação de profissionais em laboratório. volume 4 / Organização de Etelcia Moraes Molinaro, Luzia Fátima Gonçalves Caputo e Maria Regina Reis Amendoeira.- Rio de Janeiro, EPSJV,IOC, 2009.p. 399-496. NARDONI, S.; PAPINI, R; MARCUCCI, G.; MANCIANTI, F. Survey on the fungal flora of the cloaca of healthy pet reptiles. Revue de Médicine Véterinaire, v. 159, n.3, p. 159-165, 2008. PESSOA, C.A. avaliação da microbiota bacteriana e fúngica presente na cloaca de jabutis (Geochelone carbonaria) criados em domicílio e analise do potencial risco á saúde humana. (dissertação ) São Paulo , 2009. MADER, D. R. Reptile medicine and surgery. Londres: W. B. Saunders Company, 1996. p. 61-78. TORTORA, G. J.; FUNKE,B. R.;CASE,C. L.Eucariotos: Fungos,algas, protozoários e helmitos. In TORTORA, G. J.; FUNKE,B. R.;CASE,C. L. Microbiologia- 10 ed. Porto alegre. Artmed.2012, p.329-366. SULLIVAN, D.; MORAN, G.; COLEMAN, D. 2005. Fungal Diseases of Humans; em Kavanagh K (2005) Fungi – Biology and Applications. John Wiley & Sons Ltd, Irlanda
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ANÁLISE DA MICROBIOTA FÚNGICA DE Rhinella jimi. E Leptodactylus latrans
(ANURA) DO MUNICIPIO DE ACARAÚ, CEARÁ
Renan Vasconcelos da Graca Filho
Aline de Albuquerque Ferreira
Maria Gleiciane da Rocha
Gerlane Luziana de Maria
Carlos Eduardo Cordeiro Teixeira
Amaurício Lopes Rocha Brandão
Manoel Paiva de Araújo Neto
INTRODUÇÃO: Os fungos são seres ecologicamente importantes, ubíquos, oportunistas,
patógenos e são divididos em filamentosos e leveduriformes (SIDRIM & ROCHA, 2004). Os
animais são como hábitats para as comunidades micológicas, destacando os componentes do
anuro fauna, nos quais muitos desses microrganismos fazem parte de sua microbiota. Estima-se
que cerca de 1,5 milhão de espécimes fúngicas existam no planeta (HECKMAN et al.,2001;
SULLIVAN et al.,2005). Em média 250.000 espécies foram descritas, destes milhares 200 são
catalogadas como agentes patogênicos, ou seja, podem causar doenças em humanos e outros
animais (LACAZ et al.,2002; CHARLIER et al.,2005; DEACON, 2006). OBJETIVO: O
presente trabalho teve como objetivo caracterizar a microbiota fúngica das seguintes espécies
Rhinella jimi e Leptodactylusl c.f. latrans do município de Acaraú, Ceará. MATERIAL E
MÉTODOS: O município de Acaraú, CE é caracterizado por forte insolação, com índices
elevados de evaporação, baixa umidade relativa do ar e temperaturas médias elevadas. Os
padrões vegetacionais predominantes são Caatingas arbustivas densas e a mata ciliar ou
ribeirinha conta com a presença marcante de carnaúbas e oiticica (SUCUPIRA et al., 2006). A
coleta de animais foi através do método de busca ativa (CAMPBELL; CHRISTMAN, 1982),
com duas investidas a campo. Os animais foram manuseados de acordo com lei de nº11. 794 de
08 de outubro de 2008, seguindo todas as normas estabelecidas para manuseio e experimento
com animais vivos. Para amostragem microbiológica foram utilizados Swabs estéreis para boca,
cloaca e pele de cada anfíbio amostrado. Após a coleta micológica, os animais foram soltos em
seu ambiente natural e o material colhido foi acondicionado e transportado em dois mL de
salina estéril ao Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM) IFCE- Campus
Acaraú. As amostras foram inoculadas em placa de petri contendo Ágar Sabourad acrescido de
cloranfenicola2%. A identificação das espécies foi baseada em características fenotípicas, como
a descrição da macromorfologia, mediante observação das colônias, e da micromorfologia,
obtida a partir da realização de microcultivo em meio Ágar Corn Meal Tween 80, o que
permitirá melhor visualização das estruturas fúngicas, bem como por meio da realização de
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ zimograma (fermentação de carboidratos) e de auxonograma (assimilação de carboidratos e
nitrogênio). Adicionalmente, será realizado, mediante observação das colônias em meio ágar
extrato de malte, o crescimento a 30°C e a 37°C, e a avaliação da produção de urease (DE
HOOG et al., 2002). RESULTADOS E DISCUSSÃO: Foram isolados os gêneros Candida,
Trichosporon, Rhodotorulla, Aspergillus e Fusarium para R. jimi e para L. latrans apenas
Aspergillus e Candida. R.jimi foi o animal que com uma maior diversidade/abundância de
fungos, sendo 19 fungos amostrados para a espécie. Foram isolados, sendo Aspergillus e
Candida os mais abundantes. Trabalhos descrevem para anfíbios como, Boreas Anaxyrus,
Regilla pseudacris, Taricha torosa e Lithobates catesbeianus os seguintes filos de bactérias
Bacteroidetes, Gammaproteobacteria, Alphaproteobacteria, Firmicutes, Sphingobacteria e
Actinobacteria (KEUENEMAN et al., 2014). Os trabalhos com existência de uma microbiota
fúngica relacionadas a anfíbios são escassos e/ou inexistentes. Há ocorrência de isolamento de
fungos parasita em anuros, como por exemplo, o Batrachochytrium dendrobatidis (Bd) que
acomete uma grande população de anfíbios com a quitridiomicose, e este parasita são os
principais responsáveis pelo declínio e extinção de anfíbios (DASZAK et al., 1999).
CONCLUSÃO: A partir dessa análise, acredita-se que existe uma diversidade específica de
fungos para cada componente da anurofauna, tornando necessários mais estudos na área, tanto
para comprovar esta diversidade fúngica em anfíbios, como para especificar se existem
variações destes microrganismos em diferentes períodos do ano e se esta fauna pode ser
carreadora de fungos patógenos ao ambiente antrópico, o que reforça a importância de estudos
da microbiota fúngica.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
CAMPBELL, H.W.; CHRISTMAN, S.P. Field techniques for herpetofaunal community analysis. In: N.J. Scott Jr. (Ed.). Herpetological communities: a Symposium of the Society for the Study of Amphibians and Reptiles and the Herpetologists’ League. U.S. FishWildlife Service, Washington. 1982. CHARLIER, C.; CHRETIEN, F.; BAUDRIMONT, M. MORDELET, E. LORTHOLARY, O.; DROMER, F. 2005. Capsule structure changes associated with Cryptococcus neoformanscrossing of the blood-brain barrier. Am.JPathol., 166: 421-432. DEACON, J. Fungal biology.4.ed.Oxford: Blackwell Science. 2006.372p. HECKMAN, D.S.; GEISER, D.M.; EIDELL, B.R.; STAUFFER, R.L.; KARDOS, N.L.; HEDGES, S.B. 2001. Molecular evidence for the early colonization of land by fungi & plants.Science 293: 1129-1133. DE HOOG GS, GUARRO J & GEN´ E J (eds) Atlas of Clinical Fungi 2nd edition. CentraalbureauvoorSchinmelculture.UniversitatRovira i Virgilli, Delf. 2002. HECKMAN, D.S.; GEISER, D.M.; EIDELL, B.R.; STAUFFER, R.L.; KARDOS, N.L.; HEDGES, S.B. 2001. Molecular evidence for the early colonization of land by fungi & plants.Science 293: 1129-1133.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ IPECE. Perfil básico municipal: Acaraú. 2014. Disponível em: <. Acesso em: 10 fev. 2015. LACAZ, C.S.; PORTO, E.; MARTINS, J.E.C.; HEINS - VACCARI E.M.; MELO, N.T. 2002.Tratado de micologia médica. 9 ed. São Paulo, Brasil: Sarvier. SULLIVAN, D.; MORAN, G.; COLEMAN, D. 2005. Fungal Diseases of Humans; em Kavanagh K (2005) Fungi – Biology and Applications.John Wiley& Sons Ltd, Irlanda SIDRIM, J.J.C.; ROCHA, M.F.G. Micologia Médica à Luz de Autores Contemporâneos. Ed. Guanabara Koogan, 1a Edição, 2004. SUCUPIRA, P. A. P.; PINHEIRO, L. S.; ROSA, M. F. Caracterização morfométricado Médio e Baixo Curso do Rio Acaraú – Ceará – Brasil. In: VI Simpósio Nacional de Geomorfologia, Goiânia, GO. Anais… 2006
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
ANÁLISE MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA DOS BEBEDOUROS DAS CRECHES DE
UM MUNICÍPIO DO INTERIOR DO CEARÁ
Deisiane Carlos Fernandes
Andrea Maria Neves
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
.
INTRODUÇÃO: A água é um elemento vital, necessária para a vida de qualquer organismo
vivo, seja no reino animal ou vegetal. Para o uso de forma saudável, a água deve apresentar-se
limpa, inodora, incolor e sem a presença de micro-organismos patogênicos, que oferecem riscos
à saúde humana (PEREIRA et al, 2009). Além da poluição direta das fontes de água, os
sistemas de distribuição e reservatórios também podem ser responsáveis pela transmissão de
agentes patogênicos, caso estejam em condições inadequadas de higiene e conservação
(MICHELINA et al., 2006). Em ambientes escolares, é muito comum que os alunos,
principalmente crianças, consumam a água de bebedouros, que na maioria das vezes está
imprópria para o consumo, devido à presença de bactérias, que ao serem ingeridas podem
provocar doenças no consumidor, prejudicando assim, seu desempenho escolar. Os grupos de
bactérias mais encontrados em águas contaminadas são os coliformes totais e coliformes
termotolerantes. O grupo dos coliformes totais é composto por bactérias de um número restrito
de gêneros e inclui basicamente Escherichia, Klebisiella, Citrobacter, Serratia, Erwinia e
Enterobacter (NOVAK & ALMEIDA, 2002). OBJETIVO: Diante do exposto, o presente
estudo teve com objetivo avaliar a qualidade microbiológica da água dos bebedouros das
creches do município de Groaíras, Ceará, de acordo com a quantificação de Coliformes Totais
(CT) e Coliformes Termotolerantes (CTT) presentes na mesma. MATERIAL E MÉTODOS:
Para o presente estudo, foram coletadas amostras de água de 02 bebedouros em uma creche
pública do município do interior do Ceará, nos meses de maio, junho e julho de 2014 de forma
mensal, totalizando 06 amostras. As amostras foram coletadas em frascos com 1000 mL
previamente estéril, acondicionados em caixas térmicas contendo gelo e após a coleta estes
foram vedados, identificados e posteriormente levados ao laboratório de Microbiologia da
Universidade Estadual Vale do Acaraú-UVA. As amostras foram avaliadas quanto á presença
de coliformes totais (CT) e coliformes termotolerantes (CTT) através da técnica dos tubos
múltiplos, método quantitativo que permite determinar o Número Mais Provável- NMP (APHA,
2012). Para a prova presuntiva, foram utilizados 03 séries de 05 tubos contendo 10 mL de Caldo
lactosado com tubos de Durham invertidos. O resultado positivo foi verificado através da
presença gás formado nos tubos de Durhan e turvação do meio. Os tubos positivos da prova
presuntiva foram inoculados em novos tubos de Caldo Bile Verdes Brilhantes (CBVB), e
incubados na estufa a 35° por 48 horas para enumeração de Coliformes Totais (CT). Ao final da
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ incubação aqueles com produção de gás no tubo de Durham foram considerados positivos para
coliformes totais. Para a enumeração de Coliformes Termotolerantes (CTT), foram retiradas
alíquotas de cada tubo positivo de caldo lactosado com auxílio de uma alça de inoculação e
inseridas em tubos contendo 5 mL de caldo EC (Caldo Escherichia coli) contendo tubos de
Durham invertidos. Dos tubos positivos para coliformes termotolerantes (CTT) foram retiradas
alíquotas, e com ajuda de uma alça de platina, foram estriadas em placas de Ágar Eosina Azul
de Metileno (EMB) e incubadas por 24 horas, a 37ºC. Após esse período as colônias foram
isoladas em tubos de ensaio contendo Ágar Triptose Soja (TSA) inclinado. Os tubos de TSA
foram incubados em estufa a 37ºC por 24 horas e após esse tempo, as cepas isoladas foram
identificadas em microscópio através de testes bioquímicos do IMViC (Indol, Vermelho de
Metila, Voges-Proskauer e Citrato). Para contagem de bactérias aeróbias mesófilas foi feita a
técnica do “Pour Plate. De cada amostra de água foi realizada três diluições (10-1, 10-2 e 10-3),
no qual foram retiradas 1 mL de cada uma das 3 diluições das amostras e adicionadas em Placas
de Petri esterilizadas. Posteriormente foram adicionados 15 mL de ágar padrão para contagem
(PCA), onde misturou o inóculo com o meio de cultura, logo depois homogeneizou-se através
de movimentos suaves, numa superfície plana em movimentos em forma de oito e deixou-se a
temperatura ambiente até a completa solidificação do Ágar, em duplicata. RESULTADOS E
DISCUSSÃO: Os valores do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e
Coliformes termotolerantes (CTT) obtidos das 06 amostras coletadas variaram de 2,0 a 2,4x10¹
NMP/100mL. Das 06 amostras (100%) de água oriundas de bebedouros para Coliformes Totais
(CT), 02 amostras (33,33%) não atenderam o padrão estabelecido pela portaria nº 2.914 do
Ministério da Saúde de 2011 que regulariza as regras de potabilidade das águas para consumo
humano e proíbe a presença de Escherichia coli, Coliformes Termotolerantes e coliformes
Totais em amostras de 100mL de água. Das 06 amostras de água analisadas (100%) oriundas
dos bebedouros para Coliformes Termotolerantes (CTT), 03 (50%) não atendeu as normas,
confrontando assim com os parâmetros estabelecidos pela Portaria nº 2.914 de 2011 do
Ministério da Saúde, que determina como padrão de potabilidade para a água destinada ao
consumo humano a ausência de bactérias do grupo dos coliformes termotolerantes. A
enumeração de coliformes totais e coliformes termotolerantes pode ser um indicador da
eficiência do tratamento do sistema de distribuição, tornando-se um mecanismo de utilidade
para vigilância da qualidade microbiológica da água tratada para consumo distribuída à
população, (BARBOSA.;LAGE.; BADARÓ 2009). A contagem de bactérias mesófilas
aeróbias encontradas em amostras de água potável deve ser < 500 UFC/mL (BRASIL, 2011).
Todas as amostras testadas não apresentaram contaminação por bactérias heterotróficas sendo,
portanto próprias para o consumo. A manifestação de micro-organismos mesófilos aeróbios em
índices elevadas podem dificultar a presença de bactérias do grupo dos coliformes, seja em
virtude da produção de fatores de inibição, ou por um desenvolvimento mais intenso
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ (MACEDO, 2005). Nascimento et al (2013), ao verificar a presença de coliformes totais e
termotolerantes em água consumida em bebedouros de escolas estaduais de Campo Mourão,
Paraná, observaram que da 15 amostras analisadas, cinco (33,33%) apresentaram contaminação
com coliformes totais e uma escola (6,66%) apresentou contaminação por Escherichia coli,
sugerindo contaminação fecal. Castro (2013) ao avaliar a qualidade da água de um campus
universitário de Ipatinga-MG verificou que 100% das amostras estavam próprias para consumo
humano, com relação ao número de bactérias aeróbias mesófilas, resultados estes semelhantes
aos encontrados na presente pesquisa, onde todas as amostras de água se encontram satisfatória
para este parâmetro. CONCLUSÃO: Os resultados aqui obtidos possibilitam concluir que as
amostras de água coletadas nos bebedouros da creche pesquisada podem ser consideradas
impróprias para consumo humano, segundo os critérios avaliados neste estudo. Faz-se
necessário um constante monitoramento e manutenção da água dos bebedouros em relação ao
controle microbiológico e outros parâmetros existentes, podendo assim garantir de forma segura
a todos que utilizam os bebedouros da creche uma água de qualidade.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS APHA-AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION. Standard methods for the examination of water and wastewater. 22 Ed. Washington DC, 2012. BARBOSA, D. A.; LAGE, M.M.; BADARÓ, A.C.L. Qualidade microbiológica da água dos bebedouros de um campus universitário de Ipatinga, Minas Gerais. NUTRIR GERAIS- Revista Digital de Nutrição. Ipatinga, v. 3, n. 5, p. 505-517, ago./dez. 2009. BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Portaria nº. 2914 de 12 de Dezembro de 2011. Diário Oficial da União, Brasília, 2011. CASTRO, A. Z.; SILVA, B.M.; FABRI, R.L. Avaliação da qualidade físico-química e microbiológica da água dos bebedouros de uma instituição de ensino superior de Juiz de Fora, Minas Gerais. NUTRIR GERAIS- Revista Digital de Nutrição. Juiz de Fora, v. 7, n. 12, p. 984-998, fev/jul. 2013 MACEDO, J. A. B. Métodos laboratoriais de análises físico-químicas e microbiológicas 3ª ed. Juiz de Fora: Jorge Macêdo (Venda direta do autor), 2005. MICHELINA, A. F.; BRONHAROA, T. M.; DARÉB, F.; PONSANOC, E. H. G. Qualidade microbiológica de águas de sistemas de abastecimento público da região de Araçatuba, SP. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 20, n. 147, p. 90-95, dez. 2006. NASCIMENTO, C. D.; SILVA, R. C.R.; PAVANELLI, M. F. Pesquisa de coliformes em água consumida em bebedouros de escolas estaduais de campo Mourão, Paraná. SaBios: Rev. Saúde e Biol, Paraná, v.8, n.1, p.21-26, jan./abr.2013. NOVAK, F. R. & ALMEIDA, J. A. G. Teste Alternativo Para Detecção De Coliformes Em Leite Humano Ordenhado. J. Pediatr (Rio J)., Porto Alegre, V. 78, N. 3, 2002. PEREIRA, M. C. et al. Estudo da potabilidade de água para consumo no bairro Triângulo e Vila Candelária, Porto Velho – Rondônia - Brasil. Saber Científico, v. 2, n. 1, p. 28-36,2009.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
ANÁLISE MICROBIOLÓGICA DE SALADAS DE FRUTAS COMERCIALIZADAS
EM UM MERCADO, NA CIDADE DE SOBRAL – CEARÁ
Layanne Mesquita A. Lopes
Anny S. Silva
Andréa M. Neves
Maria Gleiciane S. Coutinho
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: No Brasil e no mundo, dá-se cada vez mais ênfase à importância da
segurança na produção dos alimentos, devendo-se considerar os fatores que intervém sobre sua
qualidade. Alimentos dentro de padrões satisfatórios tornou-se uma das condições essenciais
para a promoção e manutenção da saúde, de modo que, tendo deficiência nesse controle, ocorre
transmissão de agentes patogênicos que podem levar à ocorrência de surtos de doenças
transmitidas por alimentos. Isso se deve, em parte, a um número cada vez maior de pessoas que
se alimentam fora de suas casas, em decorrência do aumento no número de mulheres atuantes
no mercado de trabalho e do ritmo acelerado da vida moderna (Galeazzi et al., 2002; Akutsu et
al., 2005). Essa mudança no comportamento do consumidor contribuiu para o desenvolvimento
do comércio de refeições e alimentos, mas trouxe uma preocupação a mais para profissionais
responsáveis pela Vigilância Sanitária e também para proprietários de estabelecimentos: garantir
qualidade higiênico-sanitária dessas refeições (Bellizzi et al., 2005). Diante do exposto, a
análise microbiológica dos alimentos, em especial os prontos para consumo, como o caso das
saladas de frutas, é fundamental para se conhecer as condições nas quais estes alimentos foram
inseridos, preparados e manipulados. OBJETIVO: O referido estudo visou caracterizar o perfil
de qualidade sanitária dos serviços de alimentação presentes em um mercado da cidade de
Sobral, CE. MATERIAL E MÉTODOS: Foram coletadas três amostras de saladas de frutas,
durante o mês de outubro de 2015, provenientes de três pontos localizados em um mercado da
cidade de Sobral, CE. Cada amostra equivalente a um ponto, identificados como A, B e C. As
amostras estavam acondicionadas em embalagens próprias dos estabelecimentos, sendo
posteriormente direcionadas em caixa isotérmica para o Laboratório de Microbiologia
(LABMIC) do Curso de Ciências Biológicas da Universidade Estadual Vale do Acaraú.
Executou-se a determinação do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais e
Termotolerantes através do método de fermentação em tubos múltiplos. Utilizou-se três
diluições das amostras com repetições de cinco tubos para cada diluição. Inicialmente, foram
pesados 25g da salada de fruta de cada ponto em balança analítica e posteriormente
homogeneizada com 225 mL de solução salina (0,85%) estéril, seguida de homogeneização,
sendo esta a diluição 10¯¹, em seguida 1 mL desta diluição foi diluída em 9 mL de solução
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ salina, constituindo a diluição 10-², procedendo assim, até a diluição10-³. Na primeira série de
tubos, foram inoculados 1 mL da diluição 10-¹ em 10 mL de Caldo Lactosado com tubos de
Durhan invertidos. A segunda série de cinco tubos foi inoculada com 1 mL da diluição 10-² e a
terceira com 1 mL da terceira diluição. Posteriormente, os tubos foram incubados em estufa
bacteriológica a 36ºC por 48h. Para enumeração de Coliformes Totais foram retiradas alíquotas
dos tubos positivos de Lactosado e inoculados em Caldo Bile Verde Brilhante (BVB),
incubados em estufa a 35ºC por 48h. A quantificação de Coliformes Termotolerantes foi feita
retirando-se alíquotas com auxílio de alça de cromo-níquel dos tubos de Lactosado positivos e
inoculando-os em tubos com Caldo de Escherichia Coli (EC) e tubos de Durhan invertidos,
sendo incubados posteriormente em banho Maria a 45ºC por 48h. Para isolamento e
identificação de E. coli, foram retiradas alíquotas dos tubos positivos de EC, semeados com alça
de cromo-níquel em placas contendo meio ágar EMB e incubados em estufa a 36ºC por 24h.
Procedeu-se também, a contagem padrão em placas utilizada para quantificar as bactérias
aeróbicas mesófilas sendo feita através da técnica “Pour Plate”, no qual foi retirado 1 mL de
cada diluição e adicionadas em 9 mL de solução salina. Em seguida, foi acrescentado 15 mL de
ágar padrão para contagem (PCA). Misturou-se o inóculo com meio de cultura movimentando-o
suavemente em superfície plana em forma de oito. Após a completa solidificação do meio, as
placas foram induzidas à estufa bacteriológica a 35ºC por 24h. O procedimento foi executado
em duplicata por todas as diluições. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Caldo Lactosado, nos
pontos A, B e C, apresentou manifestações de micro-organismos com produção de gás,
formação de bolhas no Durhan e turvação no referente meio de cultura. Em leitura do Caldo de
Bile Verde Brilhante para Coliformes Totais, o Número Mais Provável (NMP) variou de
1,6x10³ CT/100g a >1600, como também, para Caldo de Escherichia Coli, Coliformes
Termotolerantes, indicaram oscilações entre 1,6x10³ CTT/100g e >1600, também apresentando
contaminação. Leitura de meio ágar EMB apresentou-se positiva para E.coli. Na contagem de
colônias de micro-organismos, com ajuda do contador de células presentes nas placas de Petri,
após processo de PCA, podemos observar que houve variação de 2,7950x10⁴ a 5,092x10⁴
UFC/mL, assegurando assim, segundo a legislação vigente, que houve 100% de contaminação
das amostras (A, B e C) coletadas. Diante os resultados obtidos, as saladas de frutas para
consumo apresentaram contaminação oriunda da ausência de procedimentos operacionais
padronizados e falha na higienização dos utensílios durante sua comercialização. Os índices não
são considerados aceitáveis, pois apresentaram erros no condicionamento, temperatura elevada,
manuseio excessivo, aumentando assim, riscos de veiculação de micro-organismos patogênicos.
CONCLUSÃO: Podemos concluir que, desde a concepção das frutas utilizadas nas saladas até
o seu manejo no que diz respeito à condições higiênico-sanitárias, como também, em seu modo
de preparo e comercialização, foi executado de forma errônea, levando em consideração após
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ análises feitas, que em quase todas as amostras de cada ponto coletado houveram significantes
presenças de micro-organismos.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
AKUTSU, R. C.; BOTELHO, R. A.; CAMARGO, E. B.; SÁVIO, K. E. O.; ARAÚJO, W. C. Adequação das boas práticas de fabricação em serviços de alimentação. Revista de Nutrição, Campinas, v. 18, n. 3, 2005. BELLIZZI, A.; SANTOS, C. L.; COSTA, E. Q.; BERNARDINI, M. R. V. Treinamento de manipuladores de alimentos: uma revisão de literatura. Higiene Alimentar, São Paulo, v. 19, n. 13, 2005. BRASIL. RDC nº 12, de 2 de janeiro de 2001. ANVISA. BRASIL. Instrução Normativa (IN) n° 62, de 26 de agosto de 2003. MAPA. BRUNO, L. M. Avaliação microbiológica de hortaliças e frutas minimamente processadas comercializadas em Fortaleza (CE). Boletim CEPPA, v. 23, 2005. GALEAZZI, I. M. S.; GARCIA, L. S.; MARQUES, E. K. Mulheres trabalhadoras: 10 anos de mudanças do mercado de trabalho atenuam desigualdades. Porto Alegre: Fundação de Economia e Estatística Sieghried Emanuel Henser, 2002.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
ASSOCIAÇÃO ENTRE FATORES GENÉTICOS DO HOSPEDEIRO E A
MODULAÇÃO DA SINTOMATOLOGIA CLÍNICA EM PACIENTES COM DENGUE:
UMA REVISÃO SISTEMÁTICA
Thiago Nobre Gomes
Iara Alda de Fontes Góis
Rayssa Kawasaki Braga Freitas
Silveny Meiga Alves Vieira
Naiany Carvalho dos Santos
Gustavo Portela Ferreira
Anna Carolina Toledo da Cunha Pereira
INTRODUÇÃO: O Dengue virus (DENV), membro da família Flaviviridae e do gênero
Flavivirus, é um vírus envelopado, icosaédrico, de fita simples de RNA senso positivo,
classificado em 4 sorotipos antigenicamente distintos capazes de causar doença pela transmissão
por fêmeas de mosquito do gênero Aedes (COFFEY et al., 2009; FANG et al., 2012). Nas
últimas 3 décadas a dengue emergiu como importante arbovirose e se tornou um grave problema
de saúde pública, especialmente em áreas tropicais e subtropicais do mundo (CHATUVERDI,
NAGAR, SHRIVASTAVA, 2006; FANG et al., 2012). Estima-se que cerca de 50 a 100
milhões de infecções por DENV ocorram anualmente no mundo, 2,5 bilhões de pessoas vivem
em regiões endêmicas, e 2/5 da população mundial correm risco de infecção (HARAPAN et al.,
2013). O espectro de manifestações clínicas em indivíduos infectados por DENV varia desde
uma infecção assintomática, autolimitada e não letal, até a febre da dengue (DF) sem
manifestações hemorrágicas, podendo evoluir para formas mais severas com risco de vida,
como a febre hemorrágica da dengue (DHF) e a síndrome do choque da dengue (DSS)
(COFFEY et al., 2009, HARAPAN et al., 2013). A evolução da doença é determinada por
interações entre fatores relacionados ao mosquito vetor (distribuição, dinâmica de transmissão e
capacidade vetorial), ao ambiente (sazonalidade e mudanças climáticas), ao vírus (sorotipos,
genótipos e suas variantes, virulência e carga viral) e também ao hospedeiro humano (ativação
de células de defesa, expressão de citocinas e fatores genéticos) (COFFEY et al., 2009). A
imunidade do hospedeiro desempenha função relevante na modulação da resposta à infecção
pelo DENV, e a heterogeneidade genética das moléculas envolvidas neste processo tem sido
relacionada com a progressão da doença (FANG et al., 2012). Em estudos genômicos de
associação entre casos e controles, vários polimorfismos do hospedeiro foram descritos por
desempenharem papel importante nas variações interindividuais associadas à susceptibilidade,
proteção ou severidade em muitas doenças infecciosas, incluindo a dengue (CHAPMAN &
HILL, 2012). OBJETIVO: O presente trabalho objetivou analisar as publicações científicas
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ que abordassem a associação entre a prevalência de fatores genéticos do hospedeiro e sua
influência na modulação da sintomatologia clínica em pacientes com dengue. MATERIAL E
MÉTODOS: Trata-se de um estudo retrospectivo, com levantamento bibliográfico de
publicações indexadas em bases de dados como Scientific Electronic Library Online (SciELO),
Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) e PubMed. Foram utilizados como descritores os termos:
dengue, host e polymorphism. Como critérios de inclusão, foram consideradas as pesquisas
publicadas entre os anos de 2001 e 2015, nos idiomas inglês, português e espanhol, as quais
expusessem sobre a temática proposta. Como critérios de exclusão, não foram consideradas
publicações relacionadas com fatores genéticos do hospedeiro associados a outros tipos de
patógenos. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Após leituras dos títulos, resumos, metodologias
e resultados dos trabalhos encontrados inicialmente e exclusão daqueles que não se
enquadravam aos critérios propostos, foram selecionados 47 artigos científicos. O número de
estudos aumentou a partir de 2008, sendo que em 2015 houve o maior número de publicações
(8). A maioria das pesquisas foi desenvolvida na Ásia (57%) e na América do Sul (19%),
destacando-se os trabalhos desenvolvidos em populações na Índia e no Brasil, respectivamente.
Com base em estudos genômicos de associação entre casos e controles, dentre as alterações
genéticas em moléculas envolvidas com a resposta imune que foram avaliadas, destacaram-se os
polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) em genes não relacionados ao antígeno leucocitário
humano (HLA), como os associados à citocina pró-inflamatória fator de necrose tumoral alfa
(TNF-α) e à molécula não-integrina captadora da molécula de adesão intercelular-3 específica
das células dendríticas (DC-SIGN), assim como também as variantes nos genes relacionados ao
HLA de classes I e II do complexo principal de histocompatibilidade (MHC). Em 55% das
publicações lidas foi observada associação estatisticamente significativa dos polimorfismos
encontrados na população com susceptibilidade à infecção por dengue e o possível risco de
progressão da doença para formas clínicas mais graves (DHF/DSS), enquanto em 17% das
pesquisas os polimorfismos foram associados à proteção. Contudo, em 28% dos trabalhos se
verificou a presença de resultados ainda controversos ou sem associação estatisticamente
significativa quanto à existência de tais associações. Diversos SNPs encontrados na região
regulatória, como o -308 G/A (rs1800629) e o -238 G/A (rs361525) influenciam na transcrição
do gene envolvido com TNF-α e com seus níveis de circulação, e, portanto, podem ter
associação com o desenvolvimento de DHF/DSS por diferentes vias (COFFEY et al., 2009;
HARAPAN et al., 2013). DC-SIGN é uma importante lectina de tipo C utilizada como receptor
de entrada pelo DENV para infectar células dendríticas, e alguns SNPs no gene que codifica
este receptor (CD209) já foram descritos, com destaque para o SNP -336 A/G (rs4804803),
porém alguns estudos apresentam resultados contraditórios e sem poder de associação relevante
quanto à modulação da sintomatologia clínica em pacientes com dengue (COFFEY et al., 2009;
FANG et al., 2012; HARAPAN et al., 2013). Polimorfismos em alelos do complexo HLA de
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ classe I e II podem estar correlacionados com diferentes perfis de diferenciação de células T,
levando a variáveis respostas antivirais que estejam relacionadas à patogênese da DHF/DSS
(COFFEY et al., 2009; FANG et al., 2012). Dentre as limitações observadas no grau de
reprodução entre os diferentes estudos genômicos que possam detectar corretamente uma
verdadeira associação, são destacadas na literatura: os pequenos tamanhos amostrais, que
juntamente com a frequência alélica, a magnitude do efeito e o limiar de significância podem
acarretar em baixo poder de associação; a etnicidade e estratificação das populações estudadas,
onde as diferenças de ancestralidade sistemática entre casos e controles podem levar a
associações falsas ou confusas; e outras variações não identificadas na interação entre patógeno-
hospedeiro ou gene-ambiente (CHAPMAN & HILL, 2012; CHATUVERDI, NAGAR,
SHRIVASTAVA, 2006; COFFEY et al., 2009). CONCLUSÃO: A presença de diferentes
polimorfismos em moléculas envolvidas com a resposta imunológica pode acarretar em efeitos
significativos na modulação da sintomatologia clínica em pacientes com dengue, considerando
o papel da imunidade do hospedeiro no decorrer da patogênese. Apesar dos avanços nas
abordagens metodológicas empregadas, a determinação de fatores genéticos associados à
proteção, susceptibilidade ou severidade da infecção pelo DENV ainda é insuficientemente
definida em termo mundial, e tais achados indicam a necessidade de realização de novos
estudos genômicos de associação em diferentes populações, e com maiores números amostrais.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
CHAPMAN, S. J.; HILL, V. S. Human genetic susceptibility to infectious disease. Nature Reviews – Genetics, v. 13, n. 1, p. 175-188, 2012. CHATUVERDI, U. C.; NAGAR, R.; SHRIVASTAVA, R. Dengue and dengue haemorrhagic fever: implications of host genetics. Immunology & Medical Microbiology, v. 47, n. 1, p.155-166, 2006. COFFEY, L. L.; et al. Human genetic determinants of dengue virus susceptibility. Microbes and Infection, v. 11, n. 1, p. 143-156, 2009. FANG, X.; et al. Genetic polymorphisms of molecules involved in host imune response to dengue virus infection. Immunology & Medical Microbiology, v. 66, n. 1, p. 134-146, 2012. HARAPAN, H.; et al. Non-HLA gene polymorphysms and their implications on dengue virus infection. The Egyptian Journal of Medical Humans Genetics, v. 14, n. 1, p. 1-11, 2013.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
ATIVIDADE ANTIFÚNGICA E COMPOSIÇÃO QUÍMICA DO ÓLEO ESSENCIAL
DA ESPÉCIE Croton zenhtneri
Soraya Marques Ribeiro
Oriel Herrera Bonilla
Eliseu Marlônio Pereira de Lucena
Francisca Lidiane Linhares de Aguiar
Antonio Carlos Nogueira Sobrinho
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: O bioma Caatinga está inserido no domínio morfoclimático do semiárido
brasileiro, apresentando solos rasos e pedregosos com vegetações do tipo xerófila e
hiperxerófila adaptada a escassez hídrica anual, possuindo uma diversidade de espécies
endêmicas representantes da fauna e da flora do Nordeste brasileiro (SOUSA, 2010).
Amplamente distribuído na flora do Nordeste brasileiro, principalmente na Caatinga, o gênero
Croton, um dos mais numerosos da família Euphorbiaceae, pertence à subfamília Crotonoideae
e tribo Crotoneae. Das 700 espécies desse gênero, 350 são encontradas no Brasil, muitas das
quais, têm suas propriedades químicas e/ou farmacológicas conhecidas (BERRY et al, 2005). A
maioria das espécies de Croton são produtoras de óleos essenciais e possuem forte potencial
econômico devido aos metabólitos secundários produzidos pela planta (PALMEIRA; JUNIOR
et al., 2006). O interesse da indústria farmacêutica nas propriedades dos óleos essenciais vem
crescendo nos últimos anos, devido suas múltiplas funções, em especial, atividades
antioxidante, antimicrobiana e antitumoral (BAKKALI et al., 2008). Segundo Abdelgaleil et al.
(2008), diversos estudos comprovaram o efeito de compostos extraídos de óleos essenciais de
plantas, que atuam como fungicidas naturais, inibindo a atividade fúngica. Além disso, com o
aumento da incidência de infecções por fungos aliado à resistência que estes agentes têm
desenvolvido aos antimicóticos, bem como o elevado custo dos fármacos, tem levado a uma
busca constante por alternativas terapêuticas eficazes, dentre elas, a prospecção de plantas com
potencial fungicida que possam oferecer mais opções de tratamento (FONTENELLE et al.,
2007). OBJETIVO: Diante desse contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial
antifúngico e a composição química do óleo essencial da espécie Croton zenhtneri.
MATERIAL E MÉTODOS: Foram coletadas as folhas da espécie de Croton zenhtneri na
região serrana de Viçosa do Ceará, na comunidade de Cocalzinho, situada a 3º 33’ 44” de
latitude e a 41º 05' 32". As folhas foram coletadas no horário de 8h da manhã, tendo sido
confeccionado exsicata que foi depositadas no Herbário Prisco Bezerra da Universidade Federal
do Ceará, com os respectivo número, 46.721. O óleo essencial foi obtido através da técnica de
hidro destilação em aparelho do tipo Clevenger. A identificação dos constituintes do óleo
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ essencial foi realizada por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massa (CG/EM)
utilizando-se o aparelho Shimadzu. Para preparação do inóculo para o teste de susceptibilidade
antifúngica foram utilizadas cepas dermatofíticas cultivadas em ágar Sabouraud durante 15 dias
a 35 °C e cepas de levedura durante 35 h a 24 °C. Um fragmento de Microsporum canis,
Trichophyton rubrum e Candida albicans foi transferido para tubos de ensaio contendo 9 mL de
solução salina a obter uma turbidez equivalente ao padrão 5x104 UFC mL-1 ou 0,5 na escala
McFarland para obtenção das concentrações finais do inóculo de aproximadamente 2,5-5 x 103
UFC mL-1 de Candida albicans e 5 x 104 UFC mL-1 para os dermatófitos M. canis e T.
rubrum. Também foi realizado o método de microdiluição em caldo, usando-se a concentração
inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM) do óleo frente aos micro-
organismos dermatófitos e leveduriformes, foram determinadas pelo método de microdiluição
usando placas de 96 poços para microdiluição de acordo com o CLSI M27A3 (2008).
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os compostos majoritários identificados na folha de Croton
zenhtneri foram estragol (85,26%) e 4-metoxibenzaldeído (8,91%). Em relação ao fungo
Candida albicans, o óleo essencial apresentou CIM no valor de 5.000 e CFM no valor de
10.000. E já em relação ao T. rubrum apresentou CIM no valor de 2.500 e CFM de 5.000. O
Croton zenhtneri apresentou atividade antifúngica de maior representatividade em relação às
cepas de M. canis, tendo encontrado CIM nos valores de 156 µg mL-1 e CFM no valor de 312
µg mL-1, respectivamente. Estudos realizados por Fontenelle (2007), também demonstraram a
eficácia do C. zenhtneri frente a cepas de M. canis com valores de CIM variando de 620 a 1250
µg.ml-1 e CFM variando de 1250 a 2500 µg mL-1. Provavelmente, a atividade antifúngica
deve-se aos constituintes majoritários encontrados nas espécies de C. nepetaefolius e de C.
zenhtneri, sendo o eucaliptol e o estragol, respectivamente. Estudos prévios realizados por Lee
et al (2007) e Kishore et al (2007) demonstraram a atividade antifúngica de fenóis, como o
eugenol, estragol e monoterpenos alcólicos, como o eucaliptol, ambos presentes nas espécies de
Croton que inibiram o crescimento fúngico Alguns constituintes que também estão presentes
nas espécies de Croton, como o eucaliptol e o espatulenol foram descritos na literatura devido
sua ação antifúngica e antibacteriana, inclusive na atuação contra dermatófitos (FLASH et al.,
2002). Os óleos essenciais que possuem espatulenol como um dos principais constituintes,
como é o caso do C. zenhtneri, geralmente apresentam atividade bacteriana e fungicida
(TZAKOU; SKALTSA, 2003). CONCLUSÃO: A espécie Croton zenhtner presente no
Nordeste brasileiro apresenta elevado potencial farmacológico, possuindo atividade antifúngica
frente a cepas dermatofíticas, provavelmente devido aos constituintes químicos presentes no
óleo essencial dessa espécie.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
ABDELGALEIL, S. A. M. et al. Bioactivity of two major constituents isolated from the essential oil of Artemia judaica L. Bioresource Technology, v. 99, n. 13, p. 5947-5950, set. 2008. BAKKALI, F. et al. Biological effects of essential oils: a review. Food Chemical Toxicology, v. 46, n.2, p. 446 – 475, fev. 2008. BERRY, P. E. et al. Molecular phylogenetics of the giant genus Croton and tribe Crotoneae (Euphorbiaceae sensu stricto) using ITS and trnL-trnF sequence data. American Journal of Botany, v. 92, n.9, p.1520–1534, set. 2005. FLASH, A. et al. Chemical analysis and antifungical activity of the essential oil of Calea clematidae. Planta Medicinal, v. 68, n. 9, p. 836-838, set. 2002. FONTENELLE, R.O.S. et al. Chemical composition, toxicological aspects and antifungal activity of essential oil from Lippia sidoides Cham. Journal antimicrobial chemotherapy, v. 59, n. 5, p. 934-940, mai. 2007. KISHORE, G.K.; PANDE, S. Evaluation of Essential Oils and Their Components for Broad Spectrum Antifungal Activity and Control of Late Leaf Spot and Crown Rot Diseases in Peanut. Plant Disease, v. 91, n. 4, p. 375-379, abr. 2007. LEE, S.J. et al. Antifungal Effect of Eugenol and Nerolidol against Microsporum gypseum in a Guinea Pig Model. Biol. Pharm. Bull, v. 30, n. 1, p. 184-188, jan. 2007. PALMEIRA-JUNIOR, S. F.; ALVES, F. S. M.; VIEIRA, L. F. A.; CONVERSA, L. M.; LEMOS, R. P. L. Constituintes químicos das folhas de Croton sellowii (Euphorbiaceae). Revista Brasileira de Farmacognosia, v. 16, n.3, p.397-402, 2006. TZAKOU, O.; SKALTSA, H. Composition and bacterial activity of the essential oil of Satureja parnassica subsp parnassica. Planta medicinal, v. 69, n. 3, p. 282-284, mar. 2003.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
AVALIAÇÃO DA QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DE CARNES IN NATURA DO
MERCADO CENTRAL DE SOBRAL-CE
Lyvia Dutra Pacheco Marques de Almeida
Luciana Fujiwara Aguiar Ribeiro
Leiliane Teles Cesar
INTRODUÇÃO: Os alimentos de origem animal, especificamente a carne, pela sua
composição rica em nutrientes e sua elevada atividade de água são bastante susceptíveis à
deterioração microbiana. É um excelente meio de cultura para o desenvolvimento microbiano e
frequentemente está envolvida na disseminação de micro-organismos patogênicos causadores de
enfermidades ao homem e a outros animais. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi realizar
a análise microbiológica de coliformes totais, termotolerantes e Salmonella spp. em carnes in
natura de frango, bovina e suína, vendidas em bifes, no Mercado Central de Sobral-CE.
MATERIAIS E MÉTODOS: As análises foram realizadas, de forma asséptica, logo após a
recepção das amostras, que foram submetidas às seguintes análises: contagem de coliformes
totais ou a 35°C, contagem de coliformes termotolerantes ou a 45°C e detecção de Salmonella
spp. realizadas no Laboratório de Microbiologia de Alimentos do IFCE – Campus de Sobral, de
acordo com os métodos do Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos (1997)
e do Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos e Água (2010).
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Na contagem de coliformes totais para o peito de frango (F)
e coxão mole bovino (CB) obteve-se um valor maior ou igual a 2,4x10³ NMP/g, e para bisteca
suína (CS) de 2,4x10² NMP/g, ou seja, as amostras F e CB obtiveram contagens maiores do que
da amostra de CS. Na contagem de coliformes termotolerantes não houve crescimento
microbiano em nenhuma das três amostras de carne in natura, sendo um aspecto positivo para a
venda no Mercado de Sobral. A Resolução RDC n° 12 de 2001 estabelece um limite máximo de
10/g para coliformes termotolerantes apenas em carnes resfriadas, ou congeladas, "in natura", de
aves (carcaças inteiras, fracionadas ou cortes). Para coliformes termotolerantes as carnes estão
em condições sanitárias satisfatórias. CONCLUSÃO: Como não foi possível a realização dos
testes bioquímicos e sorológicos para a detecção de Salmonella spp. foi obtido reação típica de
salmonela nas três amostras de carne in natura. Sendo impróprias para o consumo humano,
segundo a legislação. É recomendado que carnes “in natura” fiquem em local adequado em
refrigeração a 10°C no mínimo, durante a comercialização, e após a compra deve ser feito o
cozimento a 100°C por no mínimo 15 minutos, para que atinja o centro térmico do alimento e
essas bactérias patogênicas não sobrevivam até o seu consumo. Sugere-se também, para os
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ locais de comercialização, realizar as Boas Práticas de Manipulação (BPM), apresentar o
certificado sanitário e condições de acondicionamento.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
AVALIAÇÃO DOS CASOS DE MENINGITE NOTIFICADOS PELO SINAN, NA
CIDADE DE SOBRAL E NO ESTADO DO CEARÁ, NO PERÍODO 2013-2014
Maria Gabriela Araújo Mendes
Alexandre Caldas Costa
Daniela Rocha Rafael
Mayck Silva Barbosa
Thiago Nobre Gomes
INTRODUÇÃO: A meningite é uma doença causada por diversos agentes infeciosos
(bactérias, fungos, vírus, protozoários e helmintos) e agentes não infecciosos, que conseguem
ultrapassar as barreiras do organismo e atacar as meninges. Uma vez que os exames
laboratoriais tenham comprovado a sua etiologia viral, a meningite é caracterizada pela presença
de manifestações clínicas mais leves, portanto seu tratamento se dá de forma similar a outros
casos de viroses (MINISTÉRIO DA SAÚDE, 2015). No entanto quando se trata de uma
meningite de etiologia bacteriana, é necessário que os casos sejam tratados imediatamente, já
que são caracterizados por apresentarem uma doença de sintomatologia mais grave (MASUDA
et al., 2015). As principais bactérias causadoras desta enfermidade são Neisseria meningitidis,
Streptococcus pneumoniae e Haemophilus influenzae, transmitidas principalmente por vias
respiratórias, além de outras vias (BROUWER et al., 2010). De acordo com os dados do
SINAN, de 2007- 2013 no Brasil foram reportados 155.703 casos de meningite, dos quais 60%
foram diagnosticados do (no) sexo masculino (MASUDA et al.,2015). Observou-se assim, que
essa doença ainda constitui um grave problema de saúde pública, devido principalmente a sua
magnitude de ocorrência e o seu alto potencial infecioso de produzir surtos (RODRIGUES,
2015). OBJETIVO: O presente trabalho objetivou analisar e correlacionar os dados de casos
notificados de meningite ocorridos na cidade de Sobral e no estado do Ceará, nos períodos
2013-2014, a fim de montar seu perfil epidemiológico. MATERIAL E MÉTODOS: Foi
realizado um estudo retrospectivo, descritivo e quantitativo, em que os dados foram obtidos a
partir dos registros de casos de MB notificados tanto em Sobral quanto no estado do Ceará em
sua totalidade, nos anos de 2013 e 2014, com registro no Sistema de Informação de Agravos de
Notificação (SINAN). RESULTADOS E DISCUSSÃO: Na cidade de Sobral, no ano de 2013
foram notificados 46 casos de meningite, dos quais 63% corresponderam ao sexo masculino e
37% ao sexo feminino. Em 2014 foram notificados 27 casos, dos quais 63% corresponderam ao
sexo masculino e 37% ao sexo feminino. Já no estado do Ceará, no ano de 2013 foram
notificados 448 casos de meningite, dos quais 63% corresponderam ao sexo masculino e 37%
ao sexo feminino. Em 2014 foram notificados 335 casos, dos quais 57% correspondem ao sexo
masculino e 43% ao feminino. Conforme observado no município de Sobral e no estado do
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Ceará, houve uma redução lenta e gradual no número de casos de meningite entre 2013 e 2014,
possivelmente justificada pelo fato que nos referidos anos o governo estadual intensificou as
campanhas de vacinação contra meningites promovidas pelo Ministério da Saúde, acarretando
em maior conhecimento da população que, uma vez mais informada, pode se prevenir melhor
contra a doença. Ao se analisar o grau de instrução dos pacientes acometidos por meningite em
Sobral, os dados revelaram que no ano de 2013 houve predominância de casos com ensino
fundamental incompleto - 5° ao 8 ° ano (50%), seguidos pelo casos com ensino médio completo
(20%) e incompleto (10%). Em 2014, a maior prevalência foi encontrada em pacientes com
ensino fundamental incompleto (43%), seguido pelo ensino médio completo (14%). Já no
estado do Ceará, quanto ao grau de instrução dos pacientes com meningite, os dados referentes a
2013 mostraram predominância de casos com ensino fundamental incompleto (5,6%), seguido
pelos casos com ensino médio incompleto (2,6%) e ensino fundamental completo (2,4%). Em
2014, observou-se que a maior prevalência foi verificada em pacientes com ensino fundamental
incompleto (11%), seguido pelos pacientes com ensino fundamental completo (5,6%) e ensino
médio completo (3,4%). Esse referido estudo comprova o que é observado na literatura, visto
que a meningite é caracterizada uma enfermidade que ocorre em maiores proporções em
pessoas que possuem o nível de escolarização baixo. Em relação à faixa etária, foi observado
que no município de Sobral e no estado do Ceará, no referido período de estudo houve maior
ocorrência da doença em indivíduos que possuíam entre 20-39 anos, já que na fase adulta o
aumento do número de casos pode estar associado à finalização do período de imunização,
considerando que o período vacinação destes pacientes ocorreu na fase de infância
(RODRIGUES, 2015). CONCLUSÃO: Conforme observado, tanto em Sobral quanto no estado
do Ceará em sua totalidade, houve uma redução lenta e gradual entre 2013 e 2014 no número de
casos de meningite entre os anos de 2013 e 2014. Dessa forma, conclui-se que é de grande valia
que ocorra de forma constante a promoção de campanhas de vacinação e atividades educativas
que informem à população sobre como se prevenir contra a meningite.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BROUWER, M. C.; et al. Epidemiology, diagnosis, and antimicrobial treatment of acute bacterial meningitis. Clinical Microbiology Reviews, v. 23, n. 3, p. 467-492, 2010. MASUDA, E. T.; et al. Mortalidade por doença meningocócica no município de são paulo, brasil: características e preditores. Cadernos de Saúde Pública, v. 31, n. 2, p. 405-416, 2015. MINISTÉRIO DA SAÚDE. Secretaria de Vigilância em Saúde. Portal da Saúde. Meningites. Disponível em: <http://portalsaude.saude.gov.br/index.php/o ministerio/principal/secretarias/svs/meningites>. Acesso em 28 out. 2015. RODRIGUES, E. M. B. Meningite: Perfil epidemiológico da doença no Brasil nos anos de 2007 a 2013. 16 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Curso de Bacharelado em Biomedicina). Centro Universitário de Brasília, Brasília, 2015.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
AVALIAÇÃO HIGIÊNICA SANITÁRIA DO PÓLEN
Maria Gleiciane Soares Coutinho
Andréa Maria Neves
Anny Sampaio Silva
Francisco Fábio Pereira de Souza
Layanne Mesquita Albuquerque Lopes
José Ribeiro do Nascimento
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: O pólen é um pó fino e colorido, característica obtida devido à diversidade
das espécies botânicas visitadas pelas abelhas, sua composição depende da origem botânica, da
época de colheita, do meio ambiente, das condições climáticas, dos métodos de extração e do
período de armazenamento. O pólen passa por processo de secagem com temperatura de até
42ºC, que é considerada branda, porque permite o crescimento microbiano, podendo assim, se
tornar um veículo de transmissão de doenças. É necessária a correta manipulação do pólen, pois
o mesmo é suscetível a contaminação ambiental e ao crescimento de microrganismo, devido ao
seu elevado teor de nutrientes, por está exposto a contaminação advinda do contato com
abelhas, materiais vegetais, insetos, animais e manipulação. OBJETIVO: O presente estudo
tem o objetivo de avaliar a qualidade microbiológica do pólen. MATERIAL E MÉTODOS:
Foram coletadas duas amostras de pólen (A e B), em seguida encaminhadas ao Laboratório de
Microbiologia da Universidade Estadual Vale do Acaraú, onde se realizaram as análises. Foram
pesadas 25 g de pólen e homogeneizada com 225 mL de solução salina (0,85%) estéril, sendo
esta a diluição 10-1, em seguida 1 mL desta diluição foi dissolvida em 9 mL de solução salina,
constituindo a diluição 10-2, procedendo assim até a diluição 10-3, processo realizado para os
duas analises. O Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e Coliformes
Termotolerantes (CTT) foi determinado através da técnica dos tubos múltiplos. O teste foi
realizado em três etapas distintas: prova presuntiva, prova para determinação de coliformes
totais e termotolerantes e prova bioquímica. Para o teste presuntivo utilizou-se o Caldo
Lactosado com tubos de Durhan invertidos, sendo utilizadas repetições de cinco tubos para cada
diluição. Na primeira série de tubos, foram inoculados 1 mL da diluição 10-1 em 10 mL de
Caldo Lactosado. A segunda série de cinco tubos foi inoculada com 1 mL da diluição 10-2 e a
terceira série com 1 mL da diluição 10-3. Em seguida, os tubos foram incubados em estufa
bacteriológica a 35° por 48 horas. Foram considerados positivos os tubos de Caldo Lactosado
que apresentaram produção de gás com formação de bolhas no Durhan e turvação do meio. Para
a identificação de Coliformes Totais foram retiradas alíquotas dos tubos positivos de lactosado e
inoculados em Caldo Bile Verde Brilhante (BVB) que foram incubados em estufa a 35ºC por 48
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ horas. A quantificação de Coliformes Termotolerantes foi feita retirando-se alíquotas com
auxílio de uma alça de níquel cromo dos tubos de lactosado positivos e inoculando-se em tubos
com Caldo Escherichia coli (EC) e tubos de Durham invertidos e posterior incubação em banho-
maria a 45ºC por 48 horas. Para isolamento e identificação de E. coli, foram retiradas alíquotas
dos tubos positivos de EC e semeados com alça de níquel cromo em placas contendo meio
Eosin Methylene Blue Ágar (EMB) e incubados em estufa a 35ºC por 24 horas. As colônias
com características positivas para E. coli, de coloração verde brilhante, foram isoladas em
Tryptic Soy Ágar (TSA) e identificados através do teste do ImVic. Para identificação de
bactérias aeróbias mesófilas utilizou-se a contagem padrão em placas, esta foi feita através da
técnica do Pour Plate, no qual, foram retiradas 1 mL de cada uma das 3 diluições das amostras e
adicionadas a 15 mL de Plate Count Ágar (PCA). O inóculo foi misturado ao meio de cultura
movimentando suavemente as placas numa superfície plana, com movimentos em forma de
oito. Após a completa solidificação do meio de cultura as placas foram incubadas em estufa a
35ºC, por 24 horas. O procedimento foi realizado em duplicata para todas as diluições. Foram
pesadas 25g de pólen em seguida homogeneizada em 225 ml Lactosado, depois inoculado em
estufa a 36°C por 24 horas. Foram feitas as análises de identificação de Salmonella sp. pelo
método convencional baseado no enriquecimento, isolamento e identificação. Para o preparo do
enriquecimento, 1 mL da amostra foi inoculada em tubos de ensaio contendo 9 ml de Caldo
Tretrationato (TT) e 9 ml de Caldo Rapapport, em seguida incubando em banho-maria por 42ºC
por 24 horas. Depois da incubação uma alíquota dos caldos foram semeados em placas contendo
os meios para crescimento: Salmonella Shigella Ágar (SS) e Bismuth sulfite ágar (BSA),
posteriormente incubando em estufa por 35ºC por 24 horas. Depois foram isoladas colônias e
semeadas em meio TSI (ágar ferro trípice açúcar) e LIA (ágar lisina ferro) em seguida levados
para a incubação em estufa a 35°C por 24 horas, depois foram observadas e identificadas. Para
identificação de bolores e leveduras foram pesadas 25 g de cada amostras de pólen adicionou-se
225 ml de salina a (0,85%) e homogeneizou-se, obtendo-se desta forma a primeira diluição (10-
1), para a segunda diluição (10-2), transferiu-se 1 ml da primeira diluição para 9 ml de salina, e
para a terceira diluição (10-3), foi utilizado o mesmo procedimento. Em seguida plaqueou-se 0,1
ml de cada diluição nas placas contendo o meio Ágar Batata e espalhou-se o inóculo por toda a
superfície com auxílio de um swab, procedimento realizado em duplicata para todas as
diluições, as placas foram incubadas à 37°C por 6 dias. Após a incubação, foi verificada a
presença de colônias de bolores e leveduras e realizada a contagem. RESULTADOS E
DISCUSSÃO: Os resultados obtidos para amostras de pólen foram ausentes para, coliformes
totais, coliformes termotolerantes, Salmonela e bolores houve presença apenas de leveduras e
bactérias aeróbias mesófilas. Para leveduras apresentou 7,5x10 UFC/g amostra A e 5x10 UFC/g
amostra B e os resultados obtidos para bactérias aeróbias mesófilas foram de 2,8x104 e 1,2x103
amostra A e B respectivamente. Como foi observado nos resultados, as amostras apresentaram
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ presença de leveduras e bactérias aeróbias mesófilas, porém a legislação brasileira não
especifica parâmetros microbiológicos para amostra de pólen. No entanto, levando em
consideração o Código Alimentario Argentino que considera limites máximos de 1,5x103
UFC/g para contagem de bactérias aeróbias mesófilas, as amostras de pólen encontra-se
contaminadas. Para contagem de leveduras o mesmo código Alimentario Argentino estabelece
valor máximo de 102 UFC/g, de acordo com este código as amostras encontram-se próprias
para o consumo. Outros trabalhos apresentaram resultados semelhantes ao encontrados nesta
pesquisa. CONCLUSÃO: Conclui-se que nas amostras testadas não foi detectada a presença de
microrganismos patogênicos, portanto, não apresentando riscos à saúde dos consumidores. A
presença de fungos e bactérias mesófilos, não apresenta perigo, mais merecem mais atenção em
futuras investigações científicas.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
AVALIAÇÃO DO PERFIL DE SENSIBILIDADE DE CEPAS DE Staphylococcus
COAGULASE POSITIVA ISOLADAS DE LINGUIÇAS MISTAS
COMERCIALIZADAS NO MERCADO PÚBLICO DE SOBRAL – CEARÁ
Francisco Fábio Pereira de Souza
Maria Gleiciane Soares Coutinho
Andréa Maria Neves
Anny Sampaio Silva
Naiani Oliveira Chaves Timbó
Raquel Oliveira dos Santos Fotenelle
INTRODUÇÃO: A Linguiça mista do tipo frescal é um derivado cárneo de grande
aceitabilidade no mercado consumidor brasileiro (CORREIA, 2008) e por não receber nenhum
tratamento térmico ou dessecação durante a sua elaboração bem como apresentar uma grande
quantidade de nutrientes e alta atividade de água é considerado um alimento de curto prazo
comercial e um excelente meio para o crescimento microbiano (SILVA, 2004). A contaminação
desse tipo de alimento por micro-organismos patogênicos como Staphylococcus aureus é um
problema grave e tem sido muito reportada como causa comum de inúmeros surtos de
toxinfecções alimentares (VERONESI; FOCÁCIA, 2009). Normalmente, as infecções
bacterianas são facilmente tratadas com antimicrobianos, porém o uso indiscriminado destas
substâncias pode ocasionar o surgimento de linhagens de bactérias mais resistentes. Uma forma
de avaliar o perfil de sensibilidade desses micro-organismos é através do teste de difusão em
ágar. Este método permite avaliar o grau de sensibilidade de alguns micro-organismos de
crescimento rápido frente a determinadas drogas e dessa forma é possível classifica-los como
sensíveis, intermediários ou resistentes às drogas testadas (OSTROSKY, 2008). OBJETIVO:
Diante do exposto, o presente estudo teve por objetivo avaliar o perfil de sensibilidade de cepas
de Staphylococcus coagulase positiva isoladas de linguiças mistas comercializadas no Mercado
Público da cidade de Sobral, no Ceará. MATERIAL E MÉTODOS: Para o teste foram
utilizadas 7 (sete) cepas de Staphylococcus coagulase positiva cedidas pelo Laboratório de
Microbiologia da Universidade Estadual Vale do Acaraú. As cepas foram identificadas como
C01, C02, C04, 05, C06 e C07 e avaliadas através do método de difusão em ágar com discos de
papel, frente aos antibióticos Ampicilina, Cloranfenicol, Norfloxacina, Gentamicina e Penicilina
G, que foi utilizada como controle positivo. As cepas foram diluídas em tubos com 9 mL de
solução salina (0,85%) estéril de acordo com a Escala de McFarland e em seguida foram
inoculadas de forma homogênea em placas com 15mL de Ágar Mueller Hinton. Posteriormente
foram colocados de forma equidistante os discos de papel impregnados com as drogas a serem
testados nas placas inoculadas que foram incubadas em estufa bacteriológicas à 36ºC por 24 a
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ 48 horas. Em seguida mediu-se os halos de inibição formados envolta dos discos de papel.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: De acordo com a análise do tamanho dos halos de inibição
as cepas foram classificadas como sensíveis, intermediária ou resistentes às drogas testadas. Das
7 (100%) cepas isoladas, 6 (85,7%) apresentaram-se sensibilidade para todos as drogas testadas
e apenas 1 (14,3%) apresentou resistência para a Ampicilina e sensibilidade intermediária para
Penicilina G. CONCLUSÃO: Diante dos resultados pode-se inferir que a maioria das cepas
analisadas apresentaram um perfil de sensibilidade semelhante mostrando-se sensíveis a todas
as drogas testadas, porém a variação nesse perfil, observada para uma das cepas, pode significar
a presença de uma linhagem de Staphylococcus coagulase positiva mais resistente o que pode
significar riscos ainda maiores para a saúde dos consumidores.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
SILVA, W. P. Listeria spp. no processamento de linguiças frescal em frigoríficos de Pelotas, RS, Brasil. Ciência Rural, v. 34, n. 3, p. 911-916, Junho de 2004. CORREIA, L. M. M. Multiplicação de microbiota autóctone e de Staphylococcus aureus inoculados em linguiças frescais com diferentes concentrações de sais de cura. Dissertação (Pós-graduação em Tecnologia de Alimentos) - Universidade Federal do Paraná, 85f, Curitiba, 2008. VERONESI, R.; FOCACCIA, R. Tratado de Infectologia. São Paulo, Ed Atheneu, pp. 966-970, 2009. OSTROSKY, E. A.; MIZUMOTO, M. K.; LIMA, M. E.L.; KANEKO, T. M.; NISHIKAWA, S. O.; FREITAS, B. R. Métodos para avaliação da atividade antimicrobiana e determinação da concentração mínima inibitória (CMI) de plantas medicinais. Revista brasileira de Farmacologia. v. 18(2), p. 301-307, Abr/Jun. 2008.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
AVALIAÇÃO MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA DE UMA ESCOLA DE ENSINO
FUNDAMENTAL DE SOBRAL CEARÁ
Ana Brena Kelly Carneiro
Ilca Marque Fontenele
Lucélia Saboia Parente
INTRODUÇAO: A água de consumo humano é um dos importantes veículos de enfermidades
diarreicas de natureza infecciosa, o que torna primordial a avaliação de sua qualidade
microbiológica (MARQUEZ et al., 1994). As doenças de veiculação hídrica são causadas
principalmente por micro-organismos patogênicos de origem entérica, animal ou humana,
transmitidas basicamente pela rota fecal-oral, ou seja, são excretados nas fezes de indivíduos
infectados e ingeridos na forma de água ou alimento contaminado por água poluída com fezes
(GRABOW, 1996). A importância do controle e da análise da qualidade da água é fundamental
a fim de que se eliminem os riscos de potencial de contaminação da população por via
alimentar. Coliformes são também encontrados rotineiramente em diversas fontes ambientais,
mas água potável não é um ambiente natural para eles. Sua presença neste tipo de amostra deve
ser ao menos considerada como possível ameaça ou indicativo de deterioração da qualidade
microbiológica da água (VAN NETEN et al., 2002). OBJETIVO: O presente trabalho teve
como objetivo avaliar a qualidade da água consumida por alunos e servidores de uma Escola de
Ensino Fundamental na cidade de Sobral- Ceará. A agua foi avaliada a partir da enumeração de
coliformes totais e Termotolerantes e contagem de bactérias mesófilas. MATERIAL E
METODOS: As coletas foram realizadas em três pontos diferentes: bebedouro, torneira da
cozinha e filtro de uma escola da rede Estadual na cidade de Sobral-Ceará. Foram realizadas 5
coletas em cada ponto, totalizando 15 amostras de água coletadas. O NMP de coliformes foi
feito pelo método dos tubos múltiplos (FENG,2015). Para a prova presuntiva foi utilizado o
caldo Lauril Sulfato em dupla concentração com incubação a 350C. Para a prova de coliformes
total (CT) e termotolerante (CTT) foram utilizados os caldos Bile Verde Brilhante incubado a
350C em estufa e E.C. incubado a 44,50C em banho-Maria, respectivamente. Para a pesquisa de
Escherichia coli foi utilizado os testes bioquímicos do IMViC.O método de Contagem Padrão
em Placas (CPP) estima o número de células viáveis contido num alimento qualquer. A técnica
utilizada para quantificar as bactérias foi o “Pour Plate” (VIEIRA E TORRES, 2004).
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados obtidos da água do bebedouro (ponto 1),
mostram ausência de coliformes totais(CT) e termotolerantes (CTT) e de bactérias mesófilas.
Segundo o Ministério da Saúde, a água potável deve apresentar qualidade adequada ao consumo
humano, respeitando os padrões de potabilidade. Para a qualidade bacteriológica da água a
Portaria 2914 de dezembro de 2011, recomenda que a água potável deve apresentar ausência de
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ bactérias do grupo coliformes em 100mL de amostra e para a Contagem Padrão em Placa um
limite de 5x102 UFC (BRASIL, 2015).Nenhum dos resultados encontrados para a contagem de
bactérias mesófilas nas águas coletadas no bebedouro excedeu este limite. Foi verificada
presença de CT e CTT em uma amostragem da água do filtro (ponto2) e a contagem de
bactérias mesófilas variou de 0 a 175 x101 UFC/100mL. Os resultados encontrados não estão de
acordo com os padrões microbiológicos estabelecidos pela Portaria 2914 de dezembro de
2011.Embora os níveis de CT e CTT tenham sido baixos, é importante que haja monitoramento,
pois estas bactérias podem atuar como patógenos oportunistas.A contagem de bactérias
mesófilas na água do filtro ultrapassou o limite estabelecido pelo Ministério da Saúde.Para as
amostras de água coletadas na torneira da cozinha (ponto 3), os níveis de CT variaram de 9,2 a
16,1 CT/100mL e de CTT o valor máximo encontrado foi de 1,1 CTT/100mL. O teor de
bactérias mesófilas variou de 0 a 106x101. De acordo com a Portaria mencionada, que
preconiza valores para águas destinadas ao consumo humano, os valores encontrados neste
trabalho se encontram fora dos padrões estabelecidos. Das cepas isoladas das amostras coletadas
no ponto 2 (água do filtro) e ponto 3 (torneira da cozinha),uma foi identificada como
Enterobacter e uma como E. colie duas cepas foram identificadas como E. coli,
respectivamente. As águas destinadas ao consumo podem ser contaminadas devido ao
fenômeno de aderência de bactérias às superfícies (canos, torneiras) que causam a formação de
um biofilme, a partir do qual estas mesmas bactérias podem regularmente ser liberadas nesta
água (OKURA E SIQUEIRA, 2005). CONCLUSÃO: Considerando-se que a água tratada deva
ser isenta de contaminação, pode-se inferir que a presença de bactérias do grupo coliformes seja
devido à sujidade proveniente da falta de limpeza desses reservatórios, como também dos
bebedouros.A presença de E. Coli nas amostras analisadas, embora em pequena quantidade,
sugere a necessidade de cuidados específicos com os reservatórios que, além da limpeza e
desinfecção periódicas.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BRASIL, Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Portaria - nº 2914, de 12 de Dezembro de 2011. Estabelece os procedimentos e responsabilidades relativos ao controle e vigilância da qualidade da água para consumo humano e seu padrão de potabilidade, e dá outras providência. D.O.U. - Diário Oficial da União; Poder Executivo, de 12 de dezembro de 2011. Disponível em: http://www.anvisa.gov.br/e-legis/. Out. 2015. FENG, P. & WEAGENT, S.D. DiarrheagenicEscherichia coli.inU.S. Food and Drugs Administration, Center for Food Safety & Applied Nutrition. Bacteriological Analytical Manual online.FDA/CFSAN. Out. 2015. GRABOW W. WATERBOME diseases update on Water quality assessment and control. Water S.A 1996, 22: 193-2002.
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Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
CÂNCER DE MAMA RELACIONADO AO PAPILOMAVÍRUS HUMANO (HPV) E
EPSTEIN-BARR (EBV) NA VISÃO DOS ALUNOS DE BIOMEDICINA
Sarah Sauha Alves de Lima
Laryssa Caroline Tavares Souza
Jamilly Florêncio Pereira
Joel Xavier Gomes
Rosângela Lima de Freitas
Maria Claudia Paiva dos Santos
Morgana Maria de Oliveira Barboza
INTRODUÇÃO: O câncer de mama representa a maior causa de mortalidade por câncer entre
as mulheres em todo o mundo. O câncer é uma doença crônica caracterizada pelo crescimento
celular desordenado resultante de alterações genéticas. Cerca de 5 a 10% das neoplasias
ocorrem em indivíduos predispostos (hereditariamente), no entanto, a maioria envolve danos ao
DNA, de origem física, química ou biológica, que se acumularam ao longo da vida. No entanto,
nos últimos anos, evidências têm surgido sobre o envolvimento de alguns vírus na etiopatologia
da doença, sendo alguns desses vírus indutores clássicos do processo carcinogênico, como o
Epstein-Barr (EBV) e o Papilomavírus humano (HPV). O EBV pertence à família
Herpesviridae e mais comumente esta associado à mononucleose infecciosa. No entanto, estes
vírus codificam a proteína LMP, e os RNAs EBER, e alguns transcritos com múltiplos splices
da região BamHI A do genoma viral BARF0 e BARF1, que imitam fatores de crescimento, de
transcrição e antiapoptóticos, desregulando o ciclo celular, no entanto, os mecanismos
oncogênicos do EBV ainda não estão totalmente esclarecidos. [onde na literatura constam
achados de 0 a 100% da presença do vírus na amostra utilizando-se a técnica de Reação em
Cadeia da Polimerase (PCR)]. O HPV pertence a família Papillomaviridae, são classificados em
subtipos de baixo e alto risco oncogênico. Os de baixo risco são principalmente 6, 11 e estão
associados ao condiloma, enquanto os de alto risco, especialmente os subtipos 16, 18, 31, 33 se
associam ao câncer. É reconhecido o papel carcinógeno do HPV no câncer de colo útero
principalmente, mas também a outros tipos de cânceres como câncer de ânus e câncer de mama.
O mecanismo patogênico do HPV compreende a ativação das oncoproteínas virais E6 e E7 que
desregulam o ciclo celular, inibindo a apoptose, com a supressão de p53 e pRB, e estimulam a
progressão do ciclo celular. O aumento progressivo do câncer de mama já se tornou um
problema de saúde mundial. A atenção ao paciente com câncer envolve vários profissionais de
saúde como, médicos, enfermeiros, farmacêuticos e biomédicos. O Biomédico pode atuar em
áreas diretamente ligadas à investigação e diagnóstico do câncer através das análises clínicas e
microbiológicas. Desta forma, surgiu preocupação quanto à interdisciplinaridade acerca destes
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ temas e como vêm sendo trabalhado junto aos alunos do curso de Biomedicina, importância do
conhecimento científico dos graduandos em Biomedicina acerca do câncer de mama, sua
correlação com vírus e seus fatores de risco. É indispensável para uma formação completa que
durante a vida acadêmica, o graduando de Biomedicina obtenha conhecimento suficiente que
lhe permita oferecer qualidade e excelência em sua área de atuação. Assim, a Liga Acadêmica
de Microbiologia da Faculdade de Tecnologia Intensiva (FATECI) avaliou o conhecimento dos
alunos do curso de Biomedicina de semestre diversos, quanto ao conhecimento dos estudantes
sobre o câncer de mama, seus fatores de risco, sua correlação com os vírus HPV e EBV e
prevenção. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi avaliar através da aplicação de um
questionário estruturado, o conhecimento dos graduandos do curso de Biomedicina, de
diferentes semestres, acerca da relação entre o câncer de mama e os vírus HPV e EBV,
identificando possíveis pontos que podem ser melhor trabalhados possibilitando melhorias na
formação desses profissionais. MATERIAL E MÉTODOS: A pesquisa foi realizada na
Faculdade de Tecnologia Intensiva - FATECI, com graduandos do curso de Biomedicina do 1°
ao 8° semestres. Os dados foram coletados através de um questionário contendo 16 questões
objetivas sobre o câncer de mama e os vírus HPV e EBV, diagnóstico e tratamento do câncer de
mama. Antes da aplicação do questionário, os acadêmicos foram esclarecidos sobre os objetivos
da pesquisa. O preenchimento do questionário foi de forma voluntária sem qualquer forma de
identificação dos participantes. Os dados coletados foram tabulados em Excel, e feita uma
análise descritiva. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Participaram da pesquisa 61 alunos, onde
40 (65,57%) eram mulheres e 21 (34,42%) eram homens. Com base nas respostas do
questionário, foi possível traçar o perfil de alunos e os semestres com maior ou menor fluência
sobre os temas. A análise de dados se mostrou da seguinte forma: Quanto conhecer ou não o
vírus HPV; boa porcentagem (92%) de alunos respondeu sim, porém uma pequena parcela (8%)
desconhecia o vírus. Quando perguntados sobre as doenças associadas ao vírus, a maioria (89%)
sabia relacioná-lo ao câncer de colo do útero, porém o número decaiu para aqueles que sabiam
identificar as manifestações clínicas do HPV (72%). Foi observado o conhecimento sobre
diferença dos tipos de HPV (77%). Um resultado preocupante foi quando perguntados se
conheciam o vírus EBV, apenas 44% dos alunos afirmou conhecer. 54% foram capazes de
identificar a Mononucleose Infecciosa como sendo uma doença relacionada, mas apenas 48%
conheciam as manifestações cínicas características do agente. Uma grande parcela sabia sobre a
Vacina contra o HPV (79%). Apenas 15% sabiam da relação do Câncer de mama com os vírus
apresentados. 62% conheciam os sexos afetados pelo CA de mama. Quanto ao diagnóstico
(97%), Prevenção pelo Sistema único de Saúde (SUS) (97%) e tratamento (95%), os resultados
se mostraram satisfatórios. A análise do desempenho geral mostrou que os alunos responderam
corretamente as questões em 70%, apontando a necessidade em reforçar o assunto ao longo da
graduação, dada a importância do mesmo, afim de um melhor índice. A análise de desempenho
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ individual entre os semestres, mostrou a necessidade de maior atenção o 3º período (59%), que
obteve menor índice em relação aos demais, já o 7º período se mostrou com melhores resultados
(87%), porém a preocupação é para com o 8º período, último da graduação, que o número decai
para 73%, onde o resultado deveria ser maior, já que o aluno está ao fim do curso.: É necessário
este tipo de pesquisa entre os graduandos de Biomedicina, para a possível identificação de
pontos que possibilitem a melhoria na formação dos profissionais de biomedicina, pelo fato de
eles estarem envolvidos com o diagnóstico de doenças como o câncer. Os estudos mostram que
eles são capazes de acordo com o semestre identificar os vírus HPV e EBV, mas a correlação
com câncer de mama se tornando uma questão difícil, pois o EBV é pouco conhecido até
mesmo pelos estudantes de biomedicina (44%). Contudo o HPV está na mídia, vinculado ao
câncer de colo de útero sendo relatada a importância da vacinação contra este câncer, outro
ponto com elevado percentual de conhecimento (79%). A relação dos vírus pesquisados com o
câncer de mama demonstra a fragilidade do conhecimento adquirido pelos graduandos de
biomedicina (15%), o nível decai de acordo com o semestre (7º- 87% e 8º- 73%), quanto as
manifestações clinicas há divergências quanto aos vírus, o HPV está acima da média (72%), e o
EBV está abaixo da média (48%). Outro ponto importante é o número de conhecedores, de que
o câncer de mama afeta tanto homens como mulheres sendo abaixo do esperado (62%). O
câncer de mama causado pelos vírus HPV e EBV ainda é pouco diagnosticado, por ser de difícil
detecção neste tipo de tecido se faz necessário o aprimoramento dos estudantes de graduação em
biomedicina6. CONCLUSÃO: Os estudantes de biomedicina demonstraram um conhecimento
abaixo da média sobre a relação do câncer de mama causado por vírus, considerando que é na
graduação que se adquire o conhecimento para aplicarmos no diagnóstico clínico, devem-se
promover reformas a fim de qualificar estes futuros profissionais biomédicos.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
INCA (Instituto Nacional de Câncer), 2014. Estimativa 2014: incidência de câncer no Brasil. Disponível em: http://www.inca.gov.br/estimativa/2014/index.asp. (Acessado em: 28 de outubro de 2015.) INCA: Controle do Câncer de mama - Fatores de risco. Disponível em: http://www2.inca.gov.br/wps/wcm/connect/acoes_programas/site/home/nobrasil/progra ma_controle_cancer_mama/fatores_risco (Acessado em: 28 de outubro de 2015.) ROCHA. Detecção molecular do Papilomavirus Humano (HPV) em amostras teciduais de tumores da mama. 2010. Dissertação (mestrado em doenças tropicais) – Universidade Federal do Pará. Belém, 2010. VÍRUS: uma possível associação em câncer de mama. Disponível em: http://www.uel.br/ccb/patologia/portal/pages/arquivos/Biosaude%20v%2011%202009/ BS_v11_n2_DF_20.pdf (Acessado em: 28 de outubro de 2015.)
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Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
CARACTERIZAÇÃO DA MICROBIOTA FÚNGICA DA LESMA DO MAR Aplysia
dactylomela Rang 1828
Maria Gleiciane da Rocha
Renan Vasconcelos da Graça Filho
Jéssica Nayane da Silva
Aline de Albuquerque Ferreira
Eugênio Pacelli Nunes Brasil de Matos
Carlos Eduardo Cordeiro Teixeira
Manoel Paiva de Araújo Neto
INTRODUÇÃO: A lesma do mar Aplysia dactylomela é um invertebrado marinho pertencente
ao filo mollusca, classe Gastropoda, e subclasse Opistobranchia (CAREFOOT, 1987). Estes
possuem um verdadeiro arsenal de diferentes compostos com atividades biológicas os quais
servem para a sua defesa (PRINCE; JOHNSON, 2013). Comumente, lançam uma tinta de cor
púrpura, no qual é uma fonte de compostos biologicamente importantes para a investigação
biomédica (CHERIF et al., 2015), e ainda é comum a produção da secreção opalina, no qual é
um acréscimo na defesa desses moluscos (DERBY, 2007). Sabendo da importância da busca
por novos compostos bioativos provenientes de produtos naturais, surge um grande interesse
voltado para os microrganismos marinhos. Os fungos, portanto, têm se mostrado uma fonte
promissora na descoberta destes compostos. Assim, a diversidade microbiana associada a
organismos marinhos passou a ser investigada (KENNEDY, 2010). Já foram descritos na
literatura várias espécies de fungos oriundos de ambiente marinho (MENEZES, 2010), no
entanto, para várias espécies de moluscos, os estudos sobre microbiota fúngica ainda são muito
restritos, como para a lesma do mar A. dactylomela. OBJETIVO: Com base neste contexto, o
objetivo do presente trabalho é caracterizar a microbiota fúngica da lesma do mar A.
dactylomela por fungos filamentosos e leveduras. MATERIAL E MÉTODOS: O estudo foi
realizado durante marés de sizígias de 0,0 – 0,2 na praia de Flexeiras, situada no município de
Trairi – CE, Brasil (S 03º 13,02’ 760”; W 039º 15,55’ 302”). De forma aleatória foram
selecionados 10 exemplares de A. dactylomela por coleta para o recolhimento de amostras
microbiológicas da cavidade oral e do ânus através do uso de swabs estéreis. Foram realizadas
quatro coletas nos meses de março, maio, junho e julho de 2015. As amostras foram levadas e
processadas no Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM), do Instituto
Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará – Campus Acaraú. Para cada amostra do
animal foi utilizado o meio de cultura ágar Sabouraud acrescido de cloranfenicol (0,5 g/L) e
água do mar. Os swabs das amostras obtidas do molusco foram semeados diretamente nas
placas, em seguida foram incubadas em temperatura ambiente, durante um período de até 10
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ dias. Inicialmente, as colônias sugestivas de leveduras foram observadas ao microscópio óptico
(400X), após coloração de Gram. Posteriormente, as leveduras foram identificadas por meio da
realização de testes macro e micromorfológicos e bioquímicos específicos (BRILHANTE et.
al., 2010). Para a identificação de Fungos filamentosos foi realizada a análise macromorfológica
baseada em aspectos de textura, cor, mudança na cor do meio de cultura, esporulação e
frutificação. A análise micromorfológica foi realizada de acordo com a técnica de microcultivo
e sua interpretação foi baseada nas chaves de identificação de De Hoog et al. (2000). Para as
espécies de Candida foi utilizado o meio cromogênico CHROMOAGAR Candida® (Himédia),
para seleção de espécies e isolamento de colônias puras. As análises estatísticas foram
conduzidas utilizando o softwere Graphpad Prism® 6.0. RESULTADOS E DISCUSSÕES: No
geral foram isolados 10 gêneros de fungos filamentosos, totalizando em 67 cepas. O gênero que
ocorreu com maior frequência foi Aspergillus (n = 30; 45%), seguido pelo Penicillium (n = 12;
18%), Cladosporium (n = 7; 11%), Chrysosporium (n = 6; 9%), Curvularia (n = 4; 6%),
Acremonium (n = 2, 3%), Fusarium (n = 2; 3%), Rhyzopus (n = 2; 3%), Alternaria (n = 1; 2%) e
Mucor (n = 1; 2%). Em relação as leveduras, foi isolado apenas um gênero, sendo ele Candida,
representado por três espécies, totalizando em 10 cepas. A espécie que ocorreu com maior
frequência foi a Candida guilliermondii (n = 4; 40%), seguida da Candida parapsilosis sensu
lato (n = 3; 30%) e Candida famata (n = 3; 30%). No estudo de Menezes (2010), realizado na
Costa Norte de São Paulo sobre a diversidade microbiana associada a algas, ascídias e esponjas,
foram obtidas 256 cepas de fungos filamentosos a partir das amostras desses invertebrados.
Loureiro et al. (2005) realizaram um estudo, no qual isolaram leveduras do solo e da água do
mar das praias de Bairro Novo e Casa Caiada, Olinda, Pernambuco, Brasil. Neste estudo, foram
obtidas 292 cepas de leveduras, em que o gênero Candida revelou maior número de espécies.
Ademais, os microorganismos associados com invertebrados marinhos são provados como
candidatos valiosos para o programa de descoberta de novas drogas (VASANTHABHARATHI;
JAYALAKSHMI, 2013). CONCLUSÃO: A partir destes resultados, nota-se que a quantidade
de fungos filamentosos é maior em relação as leveduras. E, que os fungos isolados da
microbiota da lesma do mar possuem potencial patogênico, principalmente as espécies do
gênero Candida.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BRILHANTE, R.S.; CASTELO-BRANCO, D.S.C.M.; SOARES, G.D.; ASTETE-MEDRANO, D.J.; MONTEIRO, A.J.; CORDEIRO, R.A.; SIDRIM, J.J.; ROCHA, M.F. Characterization of the gastrointestinal yeast microbiota of cockatiels (Nymphicus hollandicus): a potential hazard to human health. Journal of Medical Microbiology, v.59, p.718-723, 2010. CAREFOOT, T. H. Aplysia: Its biology and ecology. Oceanography and Marine Biology Annual Review, v. 25, p. 167-284. 1987.
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Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
CITOTOXICIDADE E SINERGISMO DO EXTRATO ETANÓLICO DA CASCA DE
Myroxylon peruiferum L.f
Rafael Pereira
Halisson Araújo de Sousa
Francisca Lidiane Linhares de Aguiar
Patrícia Silva Costa
Carolina Sidrim de Paula Cavalcante
Selene Maia de Morais
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: A utilização de plantas medicinais é um método antigo, predominante em
países subdesenvolvidos, como uma alternativa terapêutica aos problemas de saúde (ZAGO et
al., 2009). Muitas plantas, que já foram testadas cientificamente, são de grande importância à
contribuição da alopatia e fitoterapia, na qual podem prevenir, aliviar ou até mesmo curar
processos patológicos (VIEIRA, 2007). OBJETIVO: Diante do exposto, o objetivo deste
trabalho foi avaliar a citotoxicidade e atividade modulatória do extrato etanólico da casca de
Myroxylon peruiferum L. f. MATÉRIAIS E MÉTODOS: Casca de Myroxylon peruiferum L.f.
foi coletada no maciço de Uruburetama, secas à temperatura ambiente e trituradas utilizando um
moinho. Posteriormente, o material foi armazenado em um recipiente de 20 L com etanol por 4
dias. O extrato foi evaporado a vácuo usando o rotoevaporador. A atividade hemolítica do
extrato bruto foi determinada em células humanas centrifugadas por 10 min. Após a remoção do
plasma, o sedimento contendo os glóbulos vermelhos foi lavado com 50 µL de PBS gelado e
levado a centrifuga por 5 minutos, esse procedimento foi repetido por cinco vezes.
Posteriormente, foi colocado cerca de 100 µL de PBS em cada tubo eppendorf adicionando 40
µL do extrato diluído em DMSO e feitas diluições seriadas num intervalo de concentração de
0,03-2,5mg/mL. As suspensões resultantes foram incubadas em um agitador refrigerado por 60
min a 37 0C. Após o tempo de incubação, as amostras foram centrifugadas durante 2 min e os
sobrenadantes foram transferidos para placas de 96 poços para a realização da leitura por
absorbância de 540 nm. Foi utilizado o leitor multiplacas Bio tek Synergy HT. Serviram como
controle positivo e negativo o Triton X-100 a 1% e 4% (v/v) em PBS com hemácias não tratado,
respectivamente. O teste foi realizado em triplicata e a percentagem de hemólise foi calculada
utilizando a seguinte expressão: [(Abs540nm-tratados - Abs540nm não tratado)/(Abs540nm 1%
de Triton X-100 - Abs540nm não tratado)x100]. O ensaio de toxicidade contra Artemia salina
Leach foi realizado segundo o método proposto por Meyer et al. (1982). Os ovos de A. salina
foram incubados em uma salina artificial com 23 g/L de sal marinho e 0,7 g/L de bicarbonato de
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ sódio em água destilada, à temperatura ambiente entre 22-29 ºC, por um período de 48 horas em
uma aquário adaptado com um compartimento escuro e outro claro. Utilizando-se uma fonte de
luz em que os náuplios foram atraídos para a luz, recolhidas com pipeta Pasteur e transferidas
para um Becker com água salina. Foram preparadas diluições seriadas a partir de 20 mg da
amostra com clorofórmio (CHCl3) para a obtenção das concentrações finais de 1000, 100, 10 e
1 ppm. Foi utilizado um controle negativo contendo apenas 100 µL de DMSO e 4,9 mL de
solução salina e um controle positivo com dicromato de potássio (K2Cr2O7) e solução salina. Em
seguida foram adicionadas em tubos de ensaio 10 larvas contendo 5 mL de cada uma das
soluções testadas e do controle. Os ensaios foram realizados em triplicata e para a contagem do
número de náuplios foram considerados mortos aqueles que permanecerem imóveis por mais de
10 segundos após agitação suave dos tubos (LHULLIER et al., 2006). O efeito do composto
combinado com antifúngico padrão foi determinado pela técnica do checkerboard. A turbidez
das suspensões fúngicas foram preparadas e ajustadas para 0,5 na escala McFarland
(105UFC/mL). Nas soluções foram utilizados os produtos testados nas concentrações dos seus
respectivos valores de CIM. Inicialmente 50 µL do meio RPMI 1640 foram adicionados em
todos os 96 poços da placa de microdiluição. Adicionaram-se então, na primeira coluna 50 µL
do extrato bruto no qual foram realizadas diluições em série na placa até a 8ª coluna. Em linhas
verticais foram colocados 50 µL do antifúngico padrão, sendo o cetoconazol, em diferentes
concentrações variando entre 16 µg/mL até 0,5 µg/mL. Finalmente, 100 µL do inóculo foram
colocados em todos os poços. Foi utilizado como controle negativo o meio RPMI 1640 com o
inóculo. Como controle positivo foi utilizado as CIM do antifúngico padrão e do extrato. As
placas de dermatófitos foram incubadas a 36 ºC durante 6 dias. Os ensaios foram realizados em
duplicata. O sinergismo foi determinado como o índice de FICI< ou =0,5, efeito aditivo quando
o índice é de FICI= 0,5 a 1,0, indiferente com FICI> 1,0 e < ou =4,0 e antagonismo com FICI>
4,0. (WHITE et al., 1996) RESULTADOS E DISCUSSÃO: O teste para determinar a
atividade hemolítica in vitro do M. peruiferum L.f. mostrou que nas concentrações de 0,039;
0,078; 0,156; 0,312; 0,625; 1,25 e 2,5 mg/mL, a percentual de hemólise variou entre 0,19% até
40,88% . Com base nos resultados observados, podemos constatar os valores da hemólise e
estimar a IC50 de 11,85 mg/mL do extrato. No bioensaio de toxicidade do extrato de M.
peruiferum L.f com larvas de A. salina, a dose letal capaz de matar 50% das larvas (CL50) foi
de 403,16 µg/mL. Os ensaios com náuplios de A. salina são utilizados devidos o seu rápido
resultado na qual correlaciona com potenciais atividades biológicas, sendo assim um indicativo
de atividade biológica (MCLAUGHLIN et al., 1998). O valor de CL50 do M. peruiferum L.f
menor ou igual a 1000 µg/mL indica que ele possui atividade biológica considerada
significativa (MEYER et al., 1982). O ensaio de combinação do extrato de M. peruiferum L.f
com o antifúngico padrão cetoconazol mostrou que houve uma redução significativa nos valores
de CIM em ambas as cepas, além do expressivo aumento do CIM do cetoconazol da cepa de T.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ rubrum (05.1.034) de 1,0 para 4, enquanto para a cepa de T. rubrum (6753), o antifúngico
padrão variou entre 2,0 a 8,0. A partir destes valores, foi possível calcular o índice de
concentração inibitória fracionária (FICI) que mostrou um efeito antagônico com FICI de 4,06 e
4,03 no ensaio da atividade para as cepas de T. rubrum (05.1.034) e T. rubrum (6753),
respectivamente. CONCLUSÃO: Contudo, podemos constatar que em relação à atividade
hemolítica o extrato é citotóxico, já para o teste de toxicidade contra A. salina mostrou que o
extrato possui toxicidade ativa, sugerindo a utilização desse extrato para várias atividades
biológicas, como antileishmania e antitumoral. Em relação ao sinergismo, o extrato apresentou
atividade significativa. No entanto, são necessários outros estudos para comprovar a viabilidade
desse composto frente às atividades bem como comprovar a segurança toxicológica da mesma.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
McLAUGHLIN, J.L. Crown gall tumors on potato discs and brine shrimp lethality: two simple bioassays for higher plant screening and ractionation. In: Hostettmann, K., Ed. Methods in Plant Biochemistry. London: Academic Press, vol. 6, p.1-36, 1991. MEYER, B.N; FERRIGINI, N.R; PUTNAN, J.E; JACOBSEN, L.B; NICHOLS, D.E; MCLAUGHLIN, J.L. Brine shrimp: a convenient general bioassay for active plants constituents. Planta Med 45:31, 1982. VIEIRA, A. Efeito da simulação da hipergravidade na germinação e crescimento de sementes de Eruca sativa Mill. (rúcula). 2007. Trabalho de conclusão de curso. Faculdade de Farmácia, Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, 2007. WHITE, R.L.; BURGESS, D.S.; MANDURU, M.; BOSSO, J.A. Comparasion of three different in vitro methods of detecting synergy: Time-kill, checkerboard and E-test. Antimicrobial agents and chemotherapy. v. 40, p.1914-1918, 1996. ZAGO, J.A.A.; USHIMARU, P.I.; BARBOSA, L.N.; FERNANDES Jr., A. Sinergismo entre óleos essenciais e drogas antimicrobianas sobre linhagens de Staphylococcus aureus e Escherichia coli isoladas de casos clínicos humanos. Rev. bras. farmacogn. v.19, n.4, p. 828-833, 2009.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
DETERMINAÇÃO DA CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA MÍNIMA DE ISOLADOS
CLÍNICOS DE PACIENTES DO HOSPITAL SANTA CASA DE MISERICÓRDIA DE
SOBRAL, FRENTE AO DERIVADO AZÓLICO FLUCONAZOL
Samuel Souza Oliveira
Camila Gomes Virgínio Coelho
Izabelly Linhares Porto
Erika Helena Salles de Brito
Andréa Maria Neves
Maria Gleiciane Soares Coutinho
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: Os fungos, por apresentarem características diferentes dos vegetais, foram
classificados em um reino próprio – o reino fungi. Esses seres vivos não sintetizam o próprio
alimento, não possuem o amido como substancia de reserva e não possuem a clorofila como
pigmento. Dentre as espécies de fungos destacam-se as leveduras, essas são encontradas
normalmente na microbiota do ser humano, especificamente nas mucosas bucais e genitais. As
leveduras do gênero Candida são patógenos oportunistas quem podem ser encontrados nas
superfícies das mucosas (MORAGUES, M.D. et al., 2003). O delicado equilíbrio entre essas
espécies e os microrganismos da microbiota humana pode facilmente ser quebrado caso ocorra
alterações no pH ou em decorrência de um desequilíbrio entre o binômio parasita-hospedeiro,
isso pode levar ao aumento no número de colônias de leveduras levando ao estado clinico
conhecido como candidíase (GARCIA et al., 2007). Essas infecções fúngicas variam desde
lesões superficiais em pessoas sadias até infecções disseminadas em pacientes neutropênicos
(COTRAN, R.S et al., 2000). Segundo ZARDO, MEZZARI (2004, p. 137) a espécie albicans é
a mais frequente, responsável por 50 a 70% de todas as infecções invasivas pelo gênero
Candida. Para o tratamento dessas infecções tem sido comumente utilizado derivados azólicos
como fluconazol. Porém, estudos realizados com isolados clínicos tem mostrado o aparecimento
de cepas de C. albicans e C. tropicales resistentes a esse antifúngico bem como a outros
derivados como Cetoconazol e Itraconazol (BRITO et al., 2007; PFALLER et al., 2004).
Pesquisas com base nos mecanismos moleculares mostraram que essa resistência aos azólicos se
dá por conta de alterações na enzima alvo e aumento do efluxo da droga (PEREA et al., 2001).
Segundo CROCCO (2004), embora a susceptibilidade das leveduras do gênero Candida aos
antifúngicos disponíveis seja variável e previsível, nem sempre uma determinada amostra
isolada segue o padrão geral. OBJETIVO: Com base no exposto, este trabalho tem por objetivo
testar a susceptibilidade das espécies do gênero Candida isoladas da Santa Casa de
Misericórdia, localizada na cidade de Sobral frente ao antifúngico Fluconazol, a fim de verificar
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ se há um aumento na resistência a drogas antifúngicas padrão. MATERIAS E METODOS:
Para o ensaio microbiológico foi utilizada o método da microdiluição em caldo preconizado
pelo CLSI (2008). Foram testadas 5 cepas de C. albicans (LABMIC 0101, LABMIC 0102,
LABMIC 0103, LABMIC 0104, LABMIC 0105), 2 de C. Tropicalis (LABMIC 0201 E
LABMIC 0202) e 4 cepas de C. Parapsiloses (LABMIC 0301, LABMIC 0302, LABMIC 0303,
LABMIC 0304) que foram cultivadas em ágar sabourand a 35ºC por 48. Para preparo do
inóculo um fragmento de candida foi transferido para tubos de ensaio contendo 9 mL de
solução salina. Posteriormente as suspensões foram diluídas a 1:2000, com meio RPMI 1640,
para obtenção das concentrações finais do inoculo de aproximadamente 5 x 104 UFC/mL. Para
determinação do CIM o ensaio foi realizado em placas de 96 poços, com forma de “U” (Placa
Elisa). Inicialmente foram distribuídas 100 µL de meio RPMI 1640 em todos os poços e
posteriormente pipetados 100 µL da droga a uma concentração de 64 mg/ml, após isso foi
realizada a técnica de diluição seriada, à partir da retirada de uma alíquota de 100 µL da
cavidade mais concentrada para a cavidade sucessora. Nos orifícios de cada coluna foram
dispensadas alíquotas de 100 µL do inóculo correspondente a cada cepa ensaiada. Como
controle negativo, verificou-se a viabilidade das cepas através da inoculação da suspensão
fúngica em meio RPMI sem a adição de antifúngicos. Foram realizadas leituras para
determinação do CIM com 24h e 48h após o ensaio, onde foi considerado a formação ou não de
aglomerados de células no fundo dos poços da placa. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Nos
resultados obtidos as cepas de C. albicans e C. parapsiloses mostraram um CIM variando entre
0,0625 µg/ml e 4 µg/ml frente ao antifúngico Fluconazol, enquanto as cepas de C. tropicalis não
apresentaram inibição, mostrando uma resistência a concentrações de 16 mg/ml da droga. As
cepas de controle de qualidade ATCCs apresentaram um CIM de 0,5 µl/ml para C. parapsiloses
e 16 µl/ml para C. krusei, estando de acordo com o estabelecido pelo CLSI (2008). Segundo
CLSI (2008) as concentrações inibitórias do antifúngico Fluconazol para C. albicans devem
variar entre 0,25 µl/ml e 1,0 µg/ml, para C. parapsiloses deve variar entre 2 µg/ml e 8 µg/ml.
Contudo, os resultados das amostras examinada de C. albicans e C. tropicalis apresentaram uma
resistência ao antifúngico, com base nas concentrações estabelecidas pelo CLSI (2008).
CONCLUSÃO: Os resultados obtidos mostraram um aumento na resistência da espécie C.
albicans frente ao derivado azólico Fluconazol, que se enquadra nos antifúngicos mais usados
atualmente, demonstrando assim uma necessidade de buscar novas drogas para o tratamento das
infecções ocasionadas por esse fungo. Esta resistência pode estra sendo ocasionada por seleção
natural, o vasto uso desse antifúngico está selecionado as espécimes mais resistentes dentre as
mais susceptíveis. Isto tem influenciando o aumento das pesquisas por novos tipos de
tratamentos para infecções causadas por leveduras.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BRITO, E.H.S. et al. Phenotypic characterization and in vitro antifungal sensitivity of Candida spp. and Malassezia pachydermatis strains from dogs. Veterinary Journal, v.174, 2007. CLSI M27A3. Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts: Approved Standard. 3rd ed, 2008. COTRAN, R.S.; KUMAR, V.; COLLINS, T. Robbins. Patologia estrutural e funcional. 6 ed. Rio de Janeiro: Guanabara-Koogan, 2000. CROCCO, E.I. et al. Identificação de especies de candida s susceptibilidade antifungica in vitro de 100 pacientes com candidiase superficiais. Rio de Janeiro. Anais Brasileiro de Dermatologia. 2004. GARCIA, M.E. et al. Fungal flora in the trachea of birds from a wildlife rehabilitation centre in Spain. Veterinarni Medicina, v.52, 2007. MORAGUES, M.D. et al. A monoclonal antibody directed against a Candida albicans cell wall mannoprotein exerts three anti-C albicans activities. Infec Immun, v.71, p. 5273-79, 2003. PEREA S, LÓPEZ-RIBOT JL, KIRKPATRICK WR, McATEE RK, SANTILLÁN RA, MARTÍNEZ M, et al. Prevalence of molecular mechanisms of resistance to azole antifungal in Candida albicans strains displaying high-level fluconazole resistance isolated from human immunodeficiency virus-infected patients. Antimicrob. Agents Chemother. 45(10): 2676–84, 2001. PFALLER MA, MESSER SA, BOYKEN L, RICE C, TENDOLKAR S, HOLLIS RJ, et al. Cross-resistance between fluconazole and ravuconazole and the use of fluconazole as a surrogate marker to predict susceptibility and resistance to ravuconazole among clinical isolates of Candida spp. J. Clin. Microbiol. 42(7): 3137–41, 2004. ZARDO, Vanessa; MEZARRI, Adelina. Os antifúngicos nas infecções por candida sp. News lab. Rio Grande do Sul. ed-63. 2004.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ DIAGNÓSTICO DA QUALIDADE HIGIÊNICO-SANITÁRIA DE LEITE IN NATURA
COMERCIALIZADO NA CIDADE DE SENADOR SÁ-CEARÁ
Anny Sampaio Silva
Andréa Maria Neves
Maria Gleiciane Soares Coutinho
Francisco Fábio Pereira de Souza
Layanne Mesquita Albuquerque Lopes
Naiani Oliveira Chaves Timbó
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: O leite é usado como base na alimentação por ser um alimento completo. É
uma das principais fontes de cálcio disponível, composto de proteínas que auxiliam na
construção de tecidos, vitaminas que fornecem energia, sais minerais que favorecem o processo
de cicatrização e melhora o desempenho do sistema imunológico, além de apresentar um
elevado valor nutricional. O leite é produzido por células secretoras e sintetizado nos alvéolos
mamários. O mesmo é estéril, porém ao ser recolhido, manuseado, armazenado e distribuído de
maneira incorreta, pode ser contaminado por diversos microrganismos. O controle
microbiológico em amostras de leite é realizado principalmente através da presença de
microrganismos indicadores que, quando presentes, podem fornecer informações sobre as
condições sanitárias da produção e do armazenamento, assim como a possível presença de
patógenos. (TAMANINI et al., 2007). OBJETIVO: Esse trabalho objetivou avaliar a
qualidade higiênico-sanitária de três amostras de leite in natura comercializado na cidade de
Senador Sá – CE. MATERIAL E MÉTODOS: As 03 amostras de leite in natura foram
recolhidas de três diferentes estabelecimentos da cidade de Senador Sá. Logo após a coleta, elas
foram acondicionadas individualmente em recipientes estéreis, transportadas em caixas
isotérmicas com placas de gelo e encaminhadas para o Laboratório de Microbiologia da
Universidade Estadual Vale do Acaraú - UVA. As respectivas amostras foram submetidas aos
seguintes testes: coliformes totais, coliformes termotolerantes, contagem de aeróbios mesófilos,
bolores e leveduras e testes bioquímicos - IMVIC. Para o crescimento bacteriano
acondicionaram-se os seguintes meios: Lactosado, Verde Brilhante (BVB), Escherichia coli
(EC), Plate Count Agar (PCA) e Agar Batata Dextrose (ABP). Para a Determinação de Número
Mais Provável (NMP), foi realizada a diluição de forma asséptica de 1,0 ml da amostra para 9,0
ml de salina peptonada (10-¹). Para a preparação da segunda diluição (10-²), transferiu-se 1,0 ml
da diluição 10-¹ para 9,0 ml de salina. Em seguida, para a preparação da terceira diluição (10-³),
transferiu-se 1,0 ml da diluição 10-² para 9,0 ml de salina. Após esse processo, foram inoculados
1,0 ml das diluições 10-¹, 10-² e 10-³ em três séries de cinco tubos, contendo em cada um deles
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ um tubo de Duhran invertido em 10 ml de caldo Lactosado, logo após os tubos serem incubados
em estufa bacteriológica a 35ºC por 24 horas. Posteriormente ao período de incubação, a leitura
foi realizada observando a produção de gás nos tubos de Duhran ou turvação no meio. Para a
prova de coliformes totais (CT) e coliformes termotolerantes (CTT), inoculou-se uma alíquota
dos tubos positivos da prova presuntiva nos meios BVB e EC, contendo Duhran invertidos para
a verificação de presença de bolhas. O meio BVB foi incubado em estufa a 35ºC e o meio EC
em banho-maria a 45ºC, ambos analisados após 48 horas. A fim da contagem de colônias
bacterianas, foi utilizada a mesma diluição do teste anterior, no qual foi inoculado 1,0 ml de
cada diluição em 15 ml do PCA, previamente resfriado em placas de Petri estéreis, sendo as
mesmas incubadas de modo invertido a 35ºC por 24 horas. Depois do período de incubação, as
colônias formadas foram contadas. Para a contagem de bolores e leveduras, utilizou-se a
mesma diluição do teste presuntivo, porém foi inoculado 0,1 ml das diluições nas placas
contendo o meio solidificado ABP, utilizando-se um swab estéril para semear cuidadosamente o
inóculo por toda a superfície do meio. Além disso, as placas foram incubadas em estufa a 35ºc
por cinco a sete dias. RESULTADOS E DISCURSSÃO: Os coliformes são indicadores de
contaminação do meio ambiente e resíduos de fezes. Para a presença de coliformes, a Instrução
Normativa nº51 não estabelece limite de contagem para leite in natura, sendo utilizados pela
literatura valores de coliformes acima de 1,0 x 10³ UFC/ml como sendo indicativo de
deficiências de higiene na produção de leite (Brito et al., 2002). As três amostras avaliadas
apresentaram valores acima do permitido para coliformes. Ponto A: 3.5 x 10⁴ UFC/ml; Ponto B
e C: 1.6 x 10⁵ UFC/ml. As que s foram submetidas ao teste bioquímico para identificação de
Enterobactérias. Após o teste pode ser identificado as seguintes bactérias: Serratia liquefaciens,
Hafnia alvei, Enterobacter agglomerans e Enterobacter sakazakii. Segundo a Instrução
Normativa Nº 62 do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, o limite permitido
para Contagem Padrão em Placas (CPP) a partir de 01/07/2015 é de 3,0 x 10⁵. As amostras
avaliadas apresentam valores dentro do padrão permitido. As medias para aeróbios mesofilos foi
de 9,2 x 10⁴ UFC/ml, para as amostras A, B e C respectivamente. As médias de leveduras, em
UFC/ml, foi de 1,4 x 10⁵ na amostra A, 3,4 x 10⁵ na amostra B e 2,6 x 10⁶ para a amostra C,
enquanto que as médias para bolores foi de 5 x 10 para a amostra A, 5 x 10 para a amostra B, já
a amostra C não apresentou crescimento de bolores. CONCLUSÃO: Após a realização da
pesquisa, pode- se constatar que as amostras avaliadas encontram-se improprias para consumo
em sua forma in natura. Portanto é de suma importância o estabelecimento de medidas
preventivas para atender a necessidade da melhoria da qualidade microbiológica deste produto,
reduzindo assim a contaminação do leite.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
TAMANINI, R.; SILVA, L.C.C.; MONTEIRO, A. A.; MAGNANI, D. F.; BARROS, M. A. F. B.; BELOTI, V.. Avaliação da qualidade microbiológica e dos parâmetros enzimáticos da pasteurização do leite tipo “C” produzido na região norte do Paraná. Ciências Agrarias v. 28, n. 3, p. 449454, 2007. BRITO, M.A.V.P.; BRITO, J.R.F.; PORTUGAL, J.A.B. Identificação de contaminantes bacterianos no leite cru de tanques de refrigeração. Revista do Instituto Laticínio Cândido Tostes, v.57, p.47-52, 2002. BRASIL – Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento. Instrução Normativa Nº 61. Dispõe sobre os regulamentos técnicos aplicados ao leite cru e pasteurizados. Diário D.O.U., 30/12/2011 - Seção 1, aprovado em 29 de dezembro de 2011. Brasília, 2011.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
DIVERSIDADE DO GÊNERO FÚNGICO Aspergillus EM BIBLIOTECA DE UM
CAMPUS UNIVERSITÁRIO
Ana Lea de Oliveira Araujo
Karine Silva Pimentel
Jonas Felipe da Silva Araujo
Ane Teles Reis
Carolina Bonfim Andrade
Lydia Dayanne Maia Pantoja
Germana Costa Paixão
INTRODUÇÃO: A concentração de fungos anemófilos como biocontaminantes em um
ambiente está relacionada diretamente a diversos fatores, sobretudo a elementos antrópicos,
climáticos e vegetação. Existem dois tipos de microbiotas aéreas, ade ambientes fechados ou
abertos, também denominadas artificial ou natural, respectivamente. Sabe-se que a incidência de
determinadas espécies e gêneros fúngico de ambientes fechados pode estar associada à
ventilação, temperatura, umidade relativa do ar, uso ou não de carpetes, tipos de atividades
exercidas, número de transeuntes e totais de ocupantes em um espaço, dentre outros. Na
literatura encontram-se diversos estudos sobre o monitoramento aero micológico de bibliotecas,
bem como a investigação da qualidade do ar desses recintos vêm merecendo atenção devida
principalmente à grande quantidade de substratos favoráveis à ação de agentes biodegradadores,
como os fungos anemófilos sobre as obras físicas de bibliotecas (PANTOJA et al., 2012). A
reduzida circulação do ar em bibliotecas maximiza a concentração de biopoluentes e que
atrelado à decomposição dos acervos por meio da temperatura, umidade e iluminação
inadequada promovem a disseminação de bactérias e fungos (BRICKUS, 1999). A presença de
fungos anemófilos se torna preocupante para saúde pública e ocupacional, pois são apontados
como uma das principais causas de problemas respiratórios, interferindo no rendimento ou
ausência de trabalhadores, alunos, bibliotecários, por exemplo, em seus respectivos locais de
ocupação. A literatura especializada descreve que algumas espécies de fungos, frequentemente
encontradas no ar em bibliotecas, tais como Aspergillus nigere Aspergillus fumigatus, são
corriqueiramente associadas à alergias e micoses respiratórias(RÊGO; MAGALHÃES;
SILVEIRA, 2004; MUNOZ et al., 2015). Estudos liderados por PEI-CHI e colaboradores em
2000 mostraram que a exposição a fungos do ar parece estar associada ao desenvolvimento de
várias doenças respiratórias, em especial às asmas ditas “de clima”, às quais estão na
dependência ou em relação íntima com a microbiota micótica do ar. Ademais, fungos
anemófilos também podem estar ligados à gênese de aspergilose, pneumonite por
hipersensibilidade, rinite e algumas reações tóxicas (LACAZ et al., 2002). OBJETIVO:
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Monitorar a presença dos representantes do gênero Aspergillusem uma biblioteca de um campus
universitário e gerar aos seus gestores, elementos para aprofundar seus conhecimentos na área
de preservação e conservação. MATERIAL E MÉTODOS: As coletas mensais ocorreram em
uma biblioteca de um campus universitário de referência situado no município de Fortaleza- CE,
durante os meses de abril a agosto/2015. Adotou-se o método da sedimentação passiva em
placas de contendo meio de cultura Ágar Batata Dextrose (Himedia®). Essas placas foram
dispostas 1,5 m acima do solo, por 8 horas. Posteriormente, as placas de Petri contendo as
amostras biológicas foram encaminhadas ao Laboratório de Microbiologia (LAMIC) do Curso
de Ciências Biológicas da Universidade Estadual do Ceará. Ao chegarem ao LAMIC/UECE, as
placas de Petri permaneceram incubadas a temperatura de 25 –27 °C durante sete dias,
realizando-se observações diárias. Após a contagem global das colônias, realizou-se uma
triagem, através das características macroscópicas, depois de purificadas, as colônias foram
identificadas mediante a análise conjunta dos aspectos macro-morfológicos e micro-
morfológicos segundo metodologia preconizada por Sidrim e Rocha (2004) e Hoog e
colaboradores (2000). RESULTADOS E DISCUSSÃO: A contagem total das colônias foi
de926UFC/m3, sendo o gênero Aspergillus o mais frequente no ambiente da biblioteca, presente
em todas as coletas, três espécies foram descritas: Aspergillusflavus, A.nigere A. terreus, os
exemplares não identificados foram tratados como Aspergillussp. Destaque dado a espécie
A.nigerque esteve presente em100% das amostras seguido da espécie A.flavus (50%),A.
terreus(25%)e Aspergillussp.(25%). A variedade de representantes do gênero encontrada na
biblioteca coaduna-se a estudos anteriores realizados no estado do Ceará, como Menezes e
colaboradores (2006) expuseram 50 placas de Petri na sala de periódicos da Biblioteca das
Ciências da Saúde da Universidade Federal do Ceará e isolaram 13 gêneros fúngico, com
destaque para o Aspergillus sp., bem como, assemelha-se a estudo realizado por Pantoja e
colaboradores (2012) que ao analisar especificamente a distribuição dos fungos no ar de uma
biblioteca universitária, encontrou-seAspergillusflavus,AspergillusnigereAspergillussp.Lacaze
colaboradores(2002) afirmam que o gênero Aspergillus é considerado um dos principais fungos
anemófilos presente em ambientes fechados e o ar é uma importante via de dispersão de seus
propágulos. Algumas espécies deste gênero provocam a aspergilose, a mesma apresenta-se
como importante causa de mortalidade entre imunodeprimidos. CONCLUSÃO: Este trabalho
alerta para a incidência desse gênero, visto que, muitas espécies desse grupo comportam-se
tanto como patógenos primários, mas principalmente como patógenos oportunistas, sinalizando
a necessidade da realização de estudos mais aprofundados, tornando-se rotineiro o
monitoramento da qualidade fúngica do ar e o controle ambiental de fungos viáveis como
marcador epidemiológico da contaminação microbiana, o que poderá contribuir na diminuição
de impactos ambientais na vida das pessoas, bem como gerar aos seus gestores, elementos para
aprofundar seus conhecimentos na área de preservação e conservação.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BRICKUS LSR, AQUINO NETO FR. A Qualidade do Ar de Interiores e a Química. [S.l.]: Química Nova 22, 1999. p. 1-10. HOOG, G.S.; GUARRO, J.; GENÉ, J. Atlas of Clinical Fungi. 2. ed. Barcelona: Universitat Rovira i Virgilli, 2000. p.1125. LACAZ, C. S.; PORTO, E.; MARTINS, J. E. C.; HEINS-VACCARI, E. M.; MELO, N. T. de. Fungos e Alergia. In: ______. Tratado de Micologia Médica Lacaz. São Paulo: Sarvier, 2002. p. 810-828. MUNOZ, P.; VALERIO, M.; VENA, A.; BOUZA, E.; POSTERARO, B.; LASS-FLORI, C.; SANGUINETTI, M. Advances in the management of fungal infections. Mycoses 58, 1-2. 2015. PANTOJA, L. D. M.; RIZZO, R. S.; CARVALHO, B. S.; FERREIRA, V. C.; GALAS K. S.; FONSECA, F. R. M.; PAIXÃO, G. C. Constituição da microbiota aérea de bibliotecas públicas no município de Fortaleza, estado do Ceará, Brasil. Encontros Bibli: revista eletrônica de biblioteconomia e ciência da informação. v. 17, n. 34, p. 31-41. 2012. PEI-CHIN, W.; HUEY-JEN, S.; CHIA-YIN, L. Characteristics of indoor and outdoor airbone fungi at suburban and urban homes in two seasons. The Science of the Total Environment, v. 253, p. 111-118. 2000. RÊGO, R. S. M.; MAGALHÃES, K.; MELO, F.; SILVEIRA, N. S. S. Ocorrência de Aspergillus sp. em pacientes com sinusite crônica. In: Congresso Brasileiro de Micologia, 4., 2004, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto. Anais... Ouro Preto, [s.n.], 2004. p.135. SIDRIM J.J.C., ROCHA, M.F.G., Micologia Médicaà luz de autores contemporâneos. Rio de Janeiro: Guanaba Koogan p. 135-161. 2004.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
EFEITO SINÉRGICO ENTRE O ÓLEO ESSENCIAL DE Baccharis trinervis (Lam.)
Pers. (ASTERACEAE) E O CETOCONAZOL FRENTE A CEPAS DE Trichophyton
rubrum
Antonio Carlos Nogueira Sobrinho
Elnatan Bezerra de Souza
Maria Rose Jane Ribeiro Albuquerque
Soraya Marques Ribeiro
Rafael Pereira
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: Alguns fungos podem adquirir potencial patogênico, promovendo infecções
micóticas, quadros de hipersensibilidade e micetismo (LACAZ et al., 2002). Um agravante na
prevenção e diminuição de novos casos de micoses consiste na ausência quase total de vacinas
antifúngicas, limitadas ao campo animal, ainda de eficácia variável (GARCÍA; BLANCO,
2000). Em relação à descoberta de novas drogas antifúngicas, os produtos naturais são
amplamente utilizados, e os resultados apresentam grande utilidade contra infecções fúngicas.
Baccharis trinervis (Lam.) Pers. é uma planta perene rizomatosa, de porte ereto e arbustivo,
com pouca ramificação, medindo de 80 a 140 cm de altura (ALBUQUERQUE et al., 2004).
Conhecida popularmente no Brasil como “assapeixe-fino” e “assapeixe-branco”, apresenta
distribuição no continente americano do México até Argentina, tendo seu uso na medicina
popular como antisséptico, digestivo e para tratamento de picada de cobras (SHARP et al.,
2001). OBJETIVO: Este trabalho objetivou investigar o potencial sinérgico do óleo essencial
de B. trinervis e do derivado imidazólico cetoconazol contra cepas do dermatófito T. rubrum.
MATERIAL E MÉTODOS: As partes aéreas da espécie vegetal Baccharis trinervis foram
coletadas no período de floração na Serra da Meruoca, Sobral, Ceará-Brasil, no domínio
Caatinga. A exsicata da planta, correspondente à coleta, encontra-se depositada no Herbário
Prof. Francisco José de Abreu Matos (HUVA) da Universidade Estadual Vale do Acaraú,
autenticada pelo Dr. Elnatan Bezerra de Souza sob o registro 3651. As partes aéreas de B.
trinervis (271,36 g), foram acondicionadas em balão de 5 L, juntamente com 1,5 L de água e
submetidas ao processo de hidrodestilação em aparelho tipo-Clevenger por um período de 2 h.
As cepas fúngicas foram provenientes do estoque em ágar batata à -20 ºC, gentilmente cedidas
pelo Laboratório de Microbiologia da Universidade Estadual Vale do Acaraú (UVA). Foram
usadas duas cepas do dermatófitos Trichophyton rubrum (LABMIC 0101, LABMIC 0102)
mantidas em solução salina (NaCl a 0,9%), a 28 ˚C. O efeito do composto combinado com
antifúngico padrão foi determinado pela técnica do checkerboard, método usado para
determinar a interação das drogas através do cálculo do Índice de Concentração Inibitória
Fracional (FICI). O FICI é calculado pela adição da Concentração Inibitória Fracional (FIC)
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ para cada um dos compostos ensaiados, sendo definida como a adição dos valores de CIM de
cada fármaco na combinação e CIM do mesmo fármaco sozinho (WHITE et al., 1996). O
sinergismo foi definida como o índice de FICI < ou = 0,5, efeito aditivo quando o índice é de
FICI entre 0,5 e 1,0, indiferente com FICI > 1,0 e < ou = 4,0 e antagonismo com FICI > 4.0)
(WHITE et al., 1996; PYUN; SHIN, 2006). Todos os experimentos foram realizados em
triplicata e os resultados normalizados pelo cálculo da média geométrica. RESULTADOS E
DISCUSSÃO: No ensaio de atividade modulatória foram utilizados as cepas T. rubrum
LABMIC 0101 e T. rubrum LABMIC 0102, no qual a combinação do imidazólico cetoconazol
com o óleo essencial de B. trinervis propiciou uma redução dos valores de CIM para ambas as
cepas de T. rubrum. A redução mais significativa ocorreu nos ensaios com a cepa LABMIC
0102, cujo índice de concentração inibitória fracionária (FICI) foi menor (0,5) quando
comparado com a cepa LABMIC 0101, cujo valor de FICI foi de 1,0. Portanto, para a cepa
LABMIC 0102 a atividade modulatória foi sinérgica e para a cepa LABMIC 0101 a atividade
foi aditiva. Para a espécie B. trinervis este é o primeiro relato de atividade antifúngica do seu
óleo essencial contra dermatófitos e de potencialização do efeito em combinação do produto
natural com uma droga padrão. O dermatófitos T. rubrum é um dos principais fungos
responsáveis pela casuística de infecções dermatofíticas (HIRUMA et al., 2012, GUPTA;
NAKRIEKO, 2015). Inúmeros produtos naturais, tais como extratos e óleos essenciais de
plantas têm sido utilizados para modificar a atividade antibiótica de fármacos por meio da
técnica do checkerboard. Na literatura é reportada atividade modulatória de drogas antifúngicas
com produtos naturais, como atividade relatada para Zuccagnia punctata Cav. e Larrea nitida
Cav. (BUTASSI et al., 2015), Thymus vulgaris L. e Cinnamomum cassia L. (PEKMEZOVIC et
al., 2015). CONCLUSÃO: O teste de sensibilidade antimicrobiano revelou uma promissora
atividade antifúngica in vitro frente cepas de T. rubrum. O ensaio de atividade modulatória com
a combinação do antifúngico padrão cetoconazol e o óleo essencial demonstrou uma
potencialização de atividade antifúngica do produto natural combinado com o cetoconazol, o
que revelou uma redução significativa nos valores de CIM para todas as cepas testadas. Novos
estudos devem ser desenvolvidos com o óleo essencial de B. trinervis, ensaiando contra outros
micro-organismos patógenos além da investigação de outras possíveis atividades biológicas,
atividade anti-inflamatória e mecanismo de ação.
REFERÊNCIAS
ALBUQUERQUE, M. R. J. R.; SILVEIRA, E. R.; UCHÔA, D. E. A.; LEMOS, T. L. G.; SOUZA, E. B.; SANTIAGO, G. M. P.; PESSOA, O. D. L. Chemical Composition and Larvicidal Activity of the Essential Oils from Eupatorium betonicaeforme (D.C.) Baker (Asteraceae). Journal of Agricultural and Food Chemistry, v. 52, n. 22, p. 6708-6711, 2004. BUTASSI, E.; SVETAZ, L. A.; IVANCOVICH, J. J.; FERESIN, G. E.; TAPIA, A.; ZACCHINO, S. A. Synergistic mutual potentiation of antifungal activity of Zuccagnia punctata
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Cav. and Larrea nitida Cav. extracts in clinical isolates of Candida albicans and Candida glabrata. Phytomedicine, v. 22, n. 6, p. 666-678, 2015. GARCÍA, M. E.; BLANCO, J. J. Principales enfermedades fúngicas que afectan a lós animales domésticos. Revista Iberoamericana de Micología, v. 17, p. 2-7, 2000. GUPTA, A. K.; NAKRIEKO, K. A. Trichophyton rubrum DNA strain switching increases in patients with onychomycosis failing antifungal treatments. British Journal of Dermatology, v. 172, n. 1, p. 74-80, 2015. HIRUMA, M.; KANO, R.; SUGITA, T.; MOCHIZUKI, T.; HASEGAWA, A.; HIRUMA, M. Epidemiological aspects of Trichophyton rubrum var. raubitschekii in Japan. The Journal of Dermatology, v. 39, n. 12, p. 1000-1001, 2012. LACAZ, C. S.; PORTO, E.; MARTINS, J. E. C.; HEINZ-VACCARI, E. M.; MELO, N. T. Tratado de micologia médica. 6. ed. São Paulo: Sarvier, 2002. PEKMEZOVIC, M.; RAJKOVIC, K.; BARAC, A.; SENEROVIĆ, L.; ARSENIJEVIC, V. A. Development of kinetic model for testing antifungal effect of Thymus vulgaris L. and Cinnamomum cassia L. essential oils on Aspergillus flavus spores and application for optimization of synergistic effect. Biochemical Engineering Journal, v. 99, p. 131-137, 2015. PYUN, M. S.; SHIN, S. Antifungal effects of the volatile oils from Allium plants against Trichophyton species and synergism of the oils with ketoconazole. Phytomedicine, v. 13, n. 6, p. 394-400, 2006. SHARP, H.; BARTHOLOMEW, B.; BRIGHT, C.; LATIF, Z.; SARKER, S. D.; NASH, R. J. 6-Oxygenated flavones from Baccharis trinervis (Asteraceae). Biochemical Systematics and Ecology, v. 29, n. 1, p. 105-107, 2001. WHITE, R. L.; BURGESS, D. S.; MANDURU, M.; BOSSO, J. A. Comparison of three different in vitro methods of detecting synergy: time-kill, checkerboard, and E test. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, v. 40, n. 8, p. 1914-1918, 1996.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
ESTABELECIMENTO DA MENOR CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA DE
CIPROFLOXACINA SOBRE O CRESCIMENTO PLANCTÔNICO DE Staphylococcus
aureus
Maria Laína Silva
Yara Maria Vieira dos Santos
Humberlânia de Sousa Duarte
Rodrigo Maranguape Silva da Cunha
Victor Alves Carneiro
INTRODUÇÃO: Staphylococcus aureus é encontrada colonizando a flora natural,
principalmente da pele, podendo tornar-se patogênico em condições como a quebra da barreira
cutânea ou diminuição da imunidade (GELATTI et al, 2009). É responsável por uma grande
variedade de infecções, entre elas, infecções pós-cirúrgicas, osteomielites, pneumonias,
abscessos, endocardites e bacteremia (LOWY, 1998). É umas das causas mais comuns de
infecções nosocomiais, bem como de infecções comunitárias que podem apresentar altos índices
de morbidade e mortalidade (SALES et al, 2012). No combate a esse patógeno está a
ciprofloxacina (CIP) que faz parte de uma importante classe de antibióticos sintéticos,
conhecidos como fluoroquinolonas (APPELBAUM et al, 2000), que têm sido objeto de intensos
estudos. Esta classe de compostos, tem atualmente destacada importância no combate a
diferentes tipos de bactéria, sendo os únicos agentes antimicrobianos sintéticos a competirem
com os β-lactâmicos em uso clínico (APPELBAUM et al, 2000). Porém, o uso extensivo,
muitas vezes inapropriado dos antibióticos, aliado com as más condições de higiene, aos fluxos
contínuos de viagens, ao aumento de pacientes imunocomprometidos e a demora no diagnóstico
das infecções bacterianas favorece o aumento nos índices de desenvolvimento de resistência
(GUIMARÃES et al, 2010). OBJETIVO: Identificar a menor concentração de CIP capaz de
inibir o crescimento planctônico da bactéria Staphylococcus aureus ATCC 25923.
MATERIAL E MÉTODOS: Para o experimento realizado foram utilizados os métodos de
determinação da Concentração Inibitória Mínima e Bactericida (CIM) e (CBM) para avaliar a
eficácia da ciprofloxacina (CIP) sobre o crescimento planctônico de S.aureus ATCC 25923.
Logo, a partir de uma cultura estoque, 50µL do micro-organismo foram inoculados em 5 mL de
meio BHI (Brain Heart Infusion) e incubado por 24 h, a 37 °C, em condições de aerobiose.
Após 24 horas foi realizado um segundo repique, no qual uma alíquota de 50 µL da suspensão
bacteriana foi transferida para 5 mL de meio estéril. Após 18h de crescimento, deu-se início à
avaliação da atividade antimicrobiana da CIP. Por meio do teste de microdiluição em placas de
poliestireno de 96 poços de fundo “U”, foi realizada a diluição seriada da substância teste,
obtendo as concentrações finais (125 a 0.06µg/mL). Em seguida, os poços foram preenchidos
com uma alíquota de 100 µL da suspensão bacteriana em uma concentração previamente
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ ajustada de 1 x 106 UFC.mL-1, obtendo um volume final de 200 µL. As placas foram então
incubadas nos mesmo parâmetros descritos anteriormente e o crescimento bacteriano foi medido
pela densidade óptica a um comprimento de onda de 620 nm, através de um sistema
automatizado Elisa Reader, onde a análise dos dados ocorreu nos tempos 0 e 24 h. Para
determinação da CBM (Concentração Bactericida Mínima), após 24 horas de incubação a placa
foi analisada e dos poços que não apresentaram crescimento microbiano visível foram retirados
10 µL e inoculados em placas de petri contendo meio BHI Ágar e novamente incubadas.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Mediante os dados obtidos através dos testes de CIM e
CBM, evidenciou-se que a CIP demonstrou atividade antimicrobiana estatisticamente relevante
contra o micro-organismo S. aureus ATCC 25923, onde a CIP apresentou capacidade de
interferência no crescimento do micro-organismo em questão, nas concentrações de 125 até 0,48
µg/mL, considerando-se p<0,001 em relação ao controle negativo. Os valores da CIM e CBM
foram de 0,48 ug.mL-1, o que significa que a Concentração Inibitória Mínima não é apenas
bacteriostática, apresentando também efeito bactericida sobre o micro-organismo em estudo.
CONCLUSÃO: A busca por menores concentrações de antibióticos convencionais tem como
finalidade determinar quantidades reduzidas de determinada substância, as quais possam
apresentar a mesma eficácia na inibição do crescimento bacteriano, quando comparado a
concentrações padrão. Isso poderá promover uma menor exposição dos pacientes a esse tipo de
fármaco, o que vem a refletir na redução dos índices de desenvolvimento de resistência
provenientes da utilização exarcebada e indiscriminada destas medicações.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
APPELBAUM, P.C.; Hunter, P.A. The fluoroquinolone antibacterials: past, present and future perspectives. Int. J. Antimicrob. Ag, 16, 5-15, 2000 GUIMARÃES, D. O. et al. Antibióticos: importância terapêutica e perspectivas para a descoberta e desenvolvimento de novos agentes. Vol. 33, Nº. 3, 667-679. São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. GELATTI, L. C. et al. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus: emerging community dissemination. An Bras Dermatol.; 84(5):501-6. 2009 LOWY F. D. Staphylococcus aureus infections. N Engl J Med. 339:520-32. 1998 SALES L. M., SILVA T. M. Staphylococcus aureus meticilina resistente: um desafio para a saúde pública. Biomedica Brasiliensia. Vol. 3, Nº.1, 2236-0867. 2012.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
INCIDÊNCIA DE Aspergillus niger EM ESTACIONAMENTO DE UM CENTRO
COMERCIAL DE FORTALEZA-CE
Josiany Costa de Souza
Ane Teles Reis
Carolina Bonfim Andrade
Karine Silva Pimentel
Jonas Felipe da Silva Araujo
Lydia Dayanne Maia Pantoja
Germana Costa Paixão
INTRODUÇÃO: O grande aumento do número de poluentes oriundos, sobretudo das
atividades presentes em locais que há uma aglomeração maior de pessoas, como é o caso dos
centros urbanos, vêm ocasionando maior debilidade à saúde humana. Nesta perspectiva, a
Aerobiologia procura estudar a presença de micro-organismos presentes no ar que podem ou
não serem causadores de doenças alérgicas e respiratórias, assim como avaliar a interação que
surge entre estes agentes, o ambiente e o homem. Dentre os bioaerossóis destacam-se os fungos,
os quais podem obter seus substratos por meio da decomposição de seres mortos ou de modo
parasitário e por isso causando prejuízos ao seu hospedeiro, e há ainda aqueles que vivem numa
relação mutualística com outro organismo. O Aspergillus niger é um fungo ubíquo, comumente
citado pela literatura como um importante bioagente aéreo. Trata-se de uma espécie
caracterizada como um fungo filamentoso hialino, encontrado no solo, ar, plantas e no canal
auditivo de animais. Dentre as patologias causadas pelo A. niger, está a aspergilose,
enfermidade que pode acometer o homem e os animais debilitados imunologicamente, quando
estes estabelecem um contato contínuo ao ambiente contaminado. A transmissão se dá pela
inalação através das vias aéreas superiores, de conídios do fungo que estão dispersos no ar. Em
centros comerciais existem alguns ambientes propícios para a rápida evolução e disseminação
dos fungos, em especial, em estacionamentos, que apresentam taxas significativas de poluentes,
alta taxa de rotatividade de pessoas e ausência de sistemas de filtração de ar. OBJETIVO:
Monitorar a presença da espécie A. niger em estacionamento de um centro comercial de
referência no município de Fortaleza-CE. MATERIAIS E MÉTODOS: O local de coleta foi
em um estacionamento de centro comercial público de referência situado ao centro de Fortaleza-
CE, durante os meses de junho a setembro/2015, adotou-se o método da sedimentação passiva
em placas de contendo meio de cultura Ágar Batata Dextrose (Himedia®). Essas placas foram
dispostas 1,5 m acima do solo, por 8 horas. Posteriormente, as placas de Petri contendo as
amostras biológicas foram encaminhadas ao Laboratório de Microbiologia (LAMIC) do Curso
de Ciências Biológicas da Universidade Estadual do Ceará. Ao chegarem ao LAMIC/UECE, as
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ placas de Petri permaneceram incubadas a temperatura de 25 – 27 °C durante sete dias,
realizando-se observações diárias. Após a contagem global das colônias, realizou-se uma
triagem, através das características macroscópicas, depois de purificadas, as colônias foram
identificadas mediante a análise conjunta dos aspectos macro-morfológicos e
micromorfológicos segundo metodologia preconizada por Sidrim e Rocha (2004) e Hoog e
colaboradores (2000). RESULTADOS E DISCUSSÃO: A contagem total das colônias foi de
4.833 UFC/m³ presente no estacionamento durante todo o período de coleta, com uma média de
1.208 UFC/m³ mensalmente. A espécie Aspergillus niger esteve presente em todos os meses de
coleta, sendo responsável por 40% das unidades formadores de colônia mencionadas acima, os
demais representantes foram também fungos filamentosos hialinos, alguns representantes
demácios e raros gêneros de leveduras. A espécie A. niger destaca-se como fungo oportunista
provocando surtos de aspergilose, tento um espectro grande de doenças, indo de uma reação
alérgica a infecção pulmonar invasiva (SUGUI et al., 2015). Estudos comprovam que o contato
de fungos anemófilos com o ar atmosférico pode desencadear uma serie de doenças
respiratórias, seja as asmas ditas “de clima”, pneumonite por hipersensibilidade, rinite e
algumas reações tóxicas (LACAZ et al., 2002). As condições ambientais e espaciais de um
estacionamento favorecem a diversidade e abundância de fungos anemófilos, em especial do
Aspergillus niger. E podem receber influência de fatores para a sua disseminação como: a
estação, o vento, a temperatura, a umidade relativa do ar e de outros parâmetros que exibem
variação sazonal (SCHOENLEIN-CRUSIUS, 2001; BOWERS, 2009). CONCLUSÃO: Foi
observada uma grande variedade de fungos nesses estabelecimentos, porém com maior
prevalência do Aspergillus niger, que se fez presente no estacionamento monitorado de um
centro comercial de referência. Diante desse quadro se faz necessários estudos mais
aprofundados acerca dos fungos que estejam presente na microbiota aérea, procurando
desenvolver sistema de controle de qualidade ar nesses estabelecimentos mais especificamente
em estacionamentos, onde não se encontra muitas pesquisas.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BOWERS, R. M.; FIERER, N.; HORÁNYI, E.; HANNIGAN, M.; HALLAR, A. G.; MCCUBBIN, I. A contribuição das partículas biológicas às partículas observadas carbono orgânico em uma altitude elevada remoto. Atmos Environ, v. 43, p. 4278-4282, 2009. HOOG, G.S.; GUARRO, J.; GENÉ, J. Atlas of Clinical Fungi. 2. ed. Barcelona: Universitat Rovira i Virgilli, 2000. p.1125. LUNA, M. A. C. Efeitos do cobre em Aspergillus niger: aspectos morfológicos, estruturais e bioquímicos. Tese: Mestrado em Desenvolvimento de Processos Ambientais. Universidade Católica de Pernambuco, Pernambuco, Recife, Brasil., p.132, 2013.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ LACAZ, C. S.; PORTO, E.; MARTINS, J. E. C.; HEINS-VACCARI, E. M.; MELO, N. T. de. Fungos e Alergia. In: ______. Tratado de Micologia Médica Lacaz. São Paulo: Sarvier, 2002. p. 810-828. PANTOJA, L. D. M.; COUTO, M.S; PAIXÃO, G. C. Diversidade de bioaerossóis presentes em ambientes urbanizados e preservados de um Campus Universitário. Biólogo, São Paulo, v.69, n.1, p.41-47, jan./jun., 2007. SIDRIM J.J.C., ROCHA, M.F.G., Micologia Médica à luz de autores conteporâneos. Rio de Janeiro: Guanaba Koogan p. 135-161., 2004. SUGUI, J.; KWON-CHUNG, K. J.; JUVVADI, P. R.; LATGE, J. P.; STEINBACH, W. J. Aspergillus fumigatus and Related Species. Cold Spring Harb Perspect Med. v. 5, p. 87-95. 2015. XAVIER, M. O. Atividade ´´in vitro`` de três agentes químicos frente a diferentes espécies de Aspergillus. Universidade do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS, Brasil. Arq. Inst., São Paulo, v. 74, n.1, p.49-53, jan./mar., 2007.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ ISOLAMENTO DE FUNGOS FILAMENTOSOS E LEVEDURIFORMES DA ÁGUA DE
DOIS MANGUEZAIS DO ESTUÁRIO DO RIO ACARAÚ, ACARAÚ - CE
Aline de Albuquerque Ferreira
Renan Vasconcelos da Graça Filho
Jéssica Nayane da Silva
Maria Gleiciane da Rocha
Tamires de Araújo Fortunato
Manoel Paiva de Araújo Neto
Carlos Eduardo Cordeiro Teixeira
INTRODUÇÃO: O manguezal é um sistema ecológico costeiro característico de regiões
tropicais e subtropicais, ocupando terrenos baixos na foz dos rios e estuários, possui solo
inundado com variações em marés e em nível de salinidade (CORREIA; SOVIERZOSKI,
2005). Possui condições propícias para proteção, reprodução e alimentação de diversas espécies.
Dessa forma pode ser considerado um importante transformador de nutrientes em matéria
orgânica e de bens (QUINÕNES, 2000). A sociedade internacional, exige que se tenham
medidas de avaliar, controlar e desenvolver ferramentas que permitam determinar quali-
quantitativamente os riscos ao ecossistema e à saúde humana e animal. Um dos mais
importantes problemas enfrentados atualmente são os relacionados às crescentes contaminações
de ecossistemas aquáticos e o seu impacto sobre os seres vivos (MEDEIROS et al., 2008). Vale
ressaltar que os esforços de conservação de ambientes costeiros marinhos são bem inferiores ao
de ambientes terrestres, além do que o investimento em pesquisas sobre biodiversidade marinha
pode ser até dez vezes inferior em relação aos estudos de biodiversidade terrestre, fato que
demonstra a necessidade de se realizar estudos em ambientes costeiros visando apresentar
ferramentas para conservação da biodiversidade e saúde ambiental (HENDRIKS et al.,
2006).Assim, é necessário a busca por ferramentas que permitam um perfeito diagnóstico da
saúde de manguezais. OBJETIVO: Diante do exposto o presente trabalho teve como objetivo
avaliar os fungos presente em duas áreas de manguezais estuarinos do Rio Acaraú, Acaraú- CE.
MATERIAL E MÉTODOS: O trabalho foi desenvolvido em manguezais no estuário do Rio
Acaraú, na cidade de Acaraú – CE. Foram escolhidas duas áreas sujeitas às mesmas condições
ambientais, porém com diferentes níveis de perturbação antrópica. A primeira, próxima à região
portuária (02º52’32.70”S; 040º7’31.62”W), é fortemente perturbada pelo corte da vegetação e
pela grande deposição de resíduos sólidos provenientes das artes de pescas regionais. A segunda
região (02º50’59”S; 040º07’41W), apresenta perturbação ocasionada por efluentes de fazendas
de carcinicultura. As amostras de água foram coletadas imergindo tubos de rosca gordo,
previamente esterilizados, na água dos canais desses mangues e devidamente transportadas para
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ o Laboratório de Biologia Ambiental e Microbiologia (LABIAM) do Instituto Federal - Campus
Acaraú. No laboratório, uma alíquota de 20µL foi semeada em placa de Petri previamente
preparada com ágar Sabourand acrescido de cloranfenicol (0,05 g/L), sempre em duplicata,
incubadas a temperatura ambiente, por até 10 dias com observações diárias, para posteriores
análises micológicas. Após observação de crescimento essas foram isoladas em tubos com Ágar
Batata separadamente de acordo com suas características macroscópicas como textura, borda e
coloração visando melhor purificação da colônia. Em seguida foi realizado o teste de
micromorfologia através da técnica de microcultivo em lâmina para as colônias de fungo
filamentoso e utilizando ágar Corn Meal Tween 80 para as colônias de levedura. Os resultados
foram interpretados de acordo com De Hoog et al. (2000). A cepa C. parapsilosis ATCC 22019
foi utilizada como cepa controle para todos os experimentos. Os dados foram submetidos a
análises de variância (ANOVA). Todo o experimento foi realizado em duplicata.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Foram isolados 17 fungos, dos quais 10 são do ponto um,
sendo cinco leveduras e cinco filamentosos; e sete são do ponto dois, duas leveduras e cinco
filamentosos. No ponto 1, a salinidade era de 39, com temperatura da água de 31ºC e do ar com
36,6ºC e umidade de 76%. No ponto 2, a salinidade foi de 45, com temperatura da água de 28,2º
C e do ar de 32,1º C, com umidade 82%. Os gêneros que ocorreram com maior frequência
foram Aspergillus , Cladosporium , Hortaea , Mucor, Penicillium e Candida. Apesar de não ter
ocorrido variação de gênero fúngico salino em ambos os mangues, pouco se pode afirmar em
relação a esse estudo, entretanto sua continuidade pode apresentar maiores resultados e uma
visão mais segura em relação a microbiota desses locais assim como dos impactos da
carcinicultura e corte flora em manguezais. Araújo e Hagler (2010) já apresentam o gênero
Candida como muito frequente em manguezais, principalmente em sedimentos, o que pode
influenciar na presença dessa na água. Já Machado (2006) cita o gênero Penicillium e
Cladosporium como os mais abundantes em águas salinas. Pantoja 2007, apresenta Aspergillus
sp. e Mucor sp., como fungos anemófilos, fato que também pode ter influenciado na presença
desses na água. E, Uijithof et al (1994), cita o gênero Hortaea como presente no meio ambiente,
principalmente em locais com concentração salina. CONCLUSÃO: Os resultados aqui
apresentados, demonstram que o gênero de fungos filamentosos Aspergillus sp., Cladosporium
sp., Hortaea sp., Mucor sp., Penicillium sp. e leveduras do gênero Candida encontram-se na
água de estuários dos Manguezais do Rio Acaraú. É fato que estudos desse gênero nessas áreas
são necessários para avaliar melhor a microbiota de manguezais e o quanto esta é influenciada
por atividades antrópicas como carcinicultura e corte da flora nativa dos mangues.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
MONITORAMENTO MICROBIOLÓGICO DO AÇUDE HIDELBRANDO
LOCALIZADO EM SÍTIO ALEGRE, MORRINHOS-CE
Andréa Maria Neves
Maria Gleiciane Soares Coutinho
Marillyze Maria Nogueira Duarte
Derlânia Maria Saraiva de Sousa
Anny Sampaio Silva
Naiane Oliveira Chaves Timbó
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: Segundo Moura (2009), a maior parte da água utilizada pela humanidade é
proveniente de rios, mananciais, lagos e lençóis subterrâneos, esses recursos hídricos
representam uma pequena porção de água disponível para uso da população. No entanto, o
contato abusivo, direto e constante do homem com essas fontes acaba gerando poluição. No
semiárido brasileiro, a construção de reservatórios denominados regionalmente de açudes, foi de
crucial importância para o progresso da região. Estes são usados para inúmeras finalidades,
como abastecimento para uso doméstico e laser. Representando, portanto, em ecossistemas de
grande valor para a sociedade, cultura local e atividades econômicas (ARAÚJO et al.; 2014).
Embora importantes, os corpos de água estão rotineiramente contaminados por diversas fontes,
tais como lixo doméstico, industrial, e lançamentos de esgotos sem tratamento adequado (Lima;
2010). Para a manutenção da qualidade dos reservatórios de água é necessário o monitoramento
dos parâmetros físicos, químicos e biológicos, que por sua vez, permitam deduzir sobre
possíveis poluentes que possam comprometer o uso a que estes reservatórios são destinados
(MAGALHÃES et al., 2014). O açude Hidelbrando encontra-se na bacia hidrográfica do Acaraú
e Coreaú, na região onde se tem clima tropical com precipitação média de 979 mm com chuvas
concentradas de janeiro a maio, e é a única fonte de abastecimento do distrito que tem
aproximadamente sete mil habitantes. O mesmo apresenta um nível de água muito baixo e
recebe lançamento de águas servidas das residências próximas, bem como de um parque
aquático, os resíduos sólidos gerados nas proximidades são carreados para dentro do açude
ocasionando a poluição do mesmo o que pode tornar o consumo quase impossível, tendo em
vista as condições que a água apresenta. OBJETIVO: Diante da relevância da água para
consumo e sobrevivência da humanidade, o presente estudo tem como objetivo avaliar a
qualidade microbiológica do açude Hidelbrando que abastece a localidade de Sítio Alegre
localizada na cidade de Morrinhos-CE. MATERIAL E METODOS: Para este estudo foram
coletadas 03 amostras de pontos distintos do açude Hidelbrando nos meses de julho, agosto e
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ setembro de 2015 de forma mensal, totalizando 09 amostras onde foram submetidas à
Determinação do Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes (APHA,
2012). A contagem de micro-organismos mesófilos aeróbios foi realizada através da ténica do
Pour plate: contagem de Unidades Formadoras de Colônia. Os pontos avaliados foram: O ponto
A e B que ficam próximos a um parque aquático e o ponto C que fica próximo a uma vila de
casas. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados obtidos da quantificação dos valores do
Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e Coliformes Termotolerantes (CTT)
obtidos das nove amostras avaliadas foram comparados a uma tabela de número mais provável.
Para coliformes totais o número variou de 2,2x10 a 9,0x10² coliformes totais por 100 mL. Para
coliformes termotolerantes os números variaram entre 1,1x10 e 2,2x10² coliformes
termotolerantes por 100 mL da amostra. Conforme o Ministério da Saúde (MS) que determina
as regras de potabilidade das águas para consumo humano impede a presença de E.coli ou
coliformes termotolerantes em amostras de 100 mL de água, portanto, todas as amostras (100%)
tanto para coliformes totais quanto para coliformes termotolerantes apresentaram-se impróprias
para consumo humano. Foram isoladas das amostras de água do açude nas três coletas
realizadas 27 cepas da família Enterobacteriaceae, entre elas Providência alcalifaclens,
Escherichia coli, Serratia sp e Hafnia alvel. Estes patógenos estão entre os principais agentes de
infecção hospitalar e também constituem a principal razão de infecção intestinal para o homem.
Das nove amostras avaliadas, seis (66,5%) estavam acima dos valores máximos de bactérias
aeróbias mesófilas determinadas pala legislação vigente, que definiu valores máximos de 500
UFC/mL. Os valores encontrados variaram entre 1,175x10² a 8,05x10 UFC/mL. Sales, et al.
(2012) avaliaram os parâmetros microbiológicos da água do açude Cumbe no município do
Barro, Ce, com coletas em pontos diferentes, e verificaram que os valores de coliformes
encontrados apresentaram resultados satisfatórios em relação á qualidade microbiológica em
todos os pontos coletados. Estes resultados foram diferentes do observado no presente estudo,
no qual todos os pontos de coleta analisados estavam acima do permitido pela legislação em
relação a coliformes termotolerantes. Moura et al. (2009) verificaram resultados em amostras de
água coletadas de diferentes pontos do rio Cascavel utilizada como abastecimento para
população local, em que apresentaram uma alta taxa de contaminação por coliformes totais e
termotolerantes. Os altos níveis de contaminação estão associados à presença de um parque
aquático onde há liberação de resíduos diretamente na água através de uma estação de esgotos
desta forma, tornando o açude contaminado. Outro fator de relevância é a presença de resíduos
sólidos e líquidos oriundos das casas da circunvizinhança, comprometendo a potabilidade desse
reservatório. Outras causas associados à contaminação deste reservatório é a presença de
animais, como patos que podem eliminar fezes contaminadas por bactérias patogênicas e,
consequentemente, contaminar o meio aquático. CONCLUSÃO: Tendo em vista o exposto, é
possível afirmar que as amostras analisadas do açude Hidelbando- CE foram consideradas
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ impróprias para consumo humano de acordo com os padrões microbiológicos estabelecidos pela
legislação vigente. Portanto, considera-se de suma importância a implantação de um eficiente
sistema de saneamento básico para toda a população de Sítio Alegre, a fim de que todos tenha
acesso à água tratada para consumo, diminuindo o risco de contaminação.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
APHA-AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION. Standard methods for the examination of water and wastewater. 22 Ed. Washington DC, 2012. ARAÚJO, A.B.D. et al. Qualidade microbiológica e avaliação do estado trófico de amostras de água do açude Forquilha-Ce. ENCICLOPÉDIA BIOSFERA, Centro Científico Conhecer, Goiânia, v.10, n.18, p. 368-3379, set. 2014. BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância Sanitária. Portaria n°. 2914 de Dezembro de 2011. Diário oficial da União, Brasília, 2011. LIMA, W.S. Qualidade da água em Ribeirópolis SE: O Açude do Cajueiro e a barragem do João Ferreira. 2008. 119 f. Dissertação (Mestrado em Agroecossistemas)- Universidade Federal de Sergipe, Sergipe, 2008. MAGALHÃES, A.Y. et al. Qualidade microbiolpogica e físico-química da água dos açudes urbanos utilizados na dessedentação animal em Sobral, Ceará. Revista da Universidade Vale do Rio Verde, Três Corações, v. 12, n. 2, p. 141-148, ago./dez. 2014. MOURA. A.C.; ASSUMPÇÃO. R.A.B.; BISCHOFF. J. Monitoramento Físico-químico e microbiológico da água do rio Cascavel durante o período de 2003 a 2006. Arq. Inst. Biol, São Paulo, v.76, n.1, p.17-22, jan./mar. 2009. SALES, A.M.D.J. et al. Avaliação da qualidade da água do açude do Cumbe, no município do Barro– CE. Revista Verde de Agroecologia e Desenvolvimento Sustentável, vol. 7, n. 4, p.30 – 38, out-dez, 2012.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ PERFIL MICROBIOLÓGICO DE ÁGUA PARA CONSUMO HUMANO ATRAVÉS DE
METODOLOGIA SIMPLIFICADA: ESTUDO DE CASO EM MUNICÍPIO DO
INTERIOR CEARENSE
Francisco Bruno Monte Gomes
Eliel Albuquerque Aguiar
INTRODUÇÃO: A água é um recurso natural essencial à vida e ao desenvolvimento das
comunidades humanas. É direito de todos, independente das condições socioeconômicas em que
cada grupo social está inserido, devendo atender às necessidades humanas em seus diversos
aspectos: fisiológicos, econômicos e domésticos. Entretanto, para que este recurso se torne
utilizável, é necessário que atenda ao padrão de qualidade recomendado pelo Ministério da
Saúde (SILVA et al., 2013). Em decorrência disso, antes de ser consumida, a água precisa ser
tratada, passando por um processo de purificação e desinfecção, cujo intuito é destruir as
bactérias patogênicas e outros micro-organismos que podem infectar seus usuários. A etapa de
desinfecção da água, consequentemente, é uma das mais importantes medidas de saúde pública,
considerando que a sua prática tem reduzido significativamente doenças de veiculação hídrica,
refletindo assim sobre o aumento na perspectiva de vida da população (SILVA et al.,2009).
OBJETIVO: Diante disso, o objetivo do trabalho é de apresentar um levantamento da
qualidade microbiológica da água do município de Miraíma, no interior do Ceará sob análise
simplificada. MATERIAIS E MÉTODOS: O município está localizado no interior do estado
do Ceará, possui uma área de aproximadamente 699,588 km², altitude de 80 metros, clima
característico em tropical quente semiárido com chuvas de janeiro a abril, os recursos hídricos
são oriundos do açude São Pedro do Timbaúba e Missi (bacia do Litoral) e projeto São José.
(OPOVO, 2015). A população estimada para o ano de 2015, de acordo com o IBGE é de 13.428
habitantes (IBGE, 2015). O para o desenvolvimento do trabalho, além do embasamento teórico,
o estudo também se ofertará a partir da realização de quatro etapas, as quais se dividem em: 1)
caracterização da área de estudo, 2) Coletas das amostras de água em campo, 3) atividades de
laboratório e 4) monitoramento e integração dos dados e informações. RESULTADOS E
DISCUSSÃO Foram coletas 65 amostras no município de Miraíma-Ceará, no período de
Abril/15 a Setembro/15. Os coletores utilizaram os EPI´s necessários. Em seguida o material foi
encaminhando para análise no Laboratório de Controle da Qualidade de Água e Esgoto da
CAGECE, localizado na cidade de Itapipoca-Ceará. A execução das análises seguiram os
procedimentos do Standard Methods for the Examination of Water & Wastewater 22nd Edition,
2012. A análise de bactérias do grupo coliformes foi realizada em tempo hábil, menor do que 30
horas. Os materiais usados foram: cartela de contagem, seladora, lâmpada UV, caneta para
retroprojetor, papel toalha ou algodão, bico de bunsen, isqueiro ou fósforos, estufa incubadora a
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ 35°C ± 0,5°C, Álcool 70%, flaconete de substrato cromogênico. Os coliformes para os autores
Soares e Maia (1999) são considerados como a determinação mais importante do estudo
bacteriológico, fazem parte deste grupo os organismos aeróbios e também os facultativos
anaeróbios, os gram-negativos e bastonetes que produzem colônias escuras. De forma
simplificada nas estações de monitoramento da qualidade de água para consumo humano o
método do substrato cromogênico. O grupo coliforme está representado por dois grupos: os
coliformes totais e os coliformes termotolerantes. As termotolerantes indicam com maior
segurança se na água considerada potável está havendo algum mecanismo que possa trazer
riscos à saúde de seus usuários (SCURACCHIO, 2010). As bactérias do grupo coliformes são
formadas por bactérias que incluem os gêneros: Klebsiella, Escherichia, Enterobacter e
Citrobacter, porém, o grupo é mais heterogêneo e incluem uma ampla variedade de gêneros,
tais como Serratia e Hafnia (GUERRA et al., 2006). De acordo com os testes realizados,
93,8% apresentaram AUSÊNCIA de Coliformes Totais e E.coli. Com PRESENÇA o valor foi
de 6,2% em 100 ml. Mesmo com os longos períodos de estiagem e a queda da qualidade da
água dos açudes de abastecimento público do Ceará, os resultados apresentados mostram
eficiência na água distribuída para a população do município de Miraíma. Os testes
simplificados representam uma ação bem positiva na detecção tão minuciosa desses micro-
organismos. CONCLUSÃO: Conclui-se que a pesquisa foi satisfatória no sentido conhecer a
técnica do Subtrato Cromogênico e como a mesma é aplicado nas concessionárias de água,
representando eficácia e rapidez no processo. Das amostras analisadas a grande maioria
demonstrou própria para o consumo humano (cerca de 93,8%), atendendo as exigências da
portaria do ministério da saúde de n°2.914/2011.
REFERÊNCIAS BILIOGRÁFICAS
FRANCO, B.D.G.M. Métodos rápidos de análise microbiológica de alimentos: estudo crítico e avaliação de novas metodologias. 1994. 128f. Tese (Livre Docência) - Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, 1995. GUERRA, N. M. M.; OTENIO, M. H.; SILVA, M. E. Z.; GUILHERMETTI, M.; NAKAMURA, C. V.; NAKAMURA, T. U.; DIAS FILHO, B. P. Ocorrência de Pseudomonas aeruginosa em água potável. v.28, n.1, p.13-18, 2006. IBGE. Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística: Cidades 2010/2015. Disponível em: http://www.cidades.ibge.gov.br/xtras/uf.php?lang=&coduf=23&search=ceara. Acesso em: 02 set. 2015. OPOVO. Miraíma-Ceará: Dados do município. Disponível em: http://www.opovo.com.br/ceara/miraima. Acesso em: 20 de Out. 2015. SOARES, B. S. e MAIA. A. C. F. Água: microbiologia e tratamento. Fortaleza: EUFC, 1999.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ SCURACCHIO, P. A. Qualidade da água utilizada para consumo em escolas no município de São Carlos – SP. Dissertação (Mestrado), Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Araraquara, 2010. SILVA, L. M.; SOUZA, E. H.; ARREBOLA, T. M.; JESUS, G. A. Ocorrência de um surto de hepatite A em três bairros do município de Vitória (ES) e sua relação com a qualidade da água de consumo humano. Ciência e Saúde Coletiva, Espírito Santo, v. 14, n. 6, p. 2163-2167. 2009. SILVA, M. B; SANTOS, D.B; SILVA, G. P; BATISTA, R. O;. SILVA, S. C; Tratamento da Água armazenada em cisternas utilizando radiação solar. Centro Científico Conhecer, Goiânia, v. 9, N. 16, p.199-214, set/out. 2013.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Pseudomonas aeruginosa, ANTIBIOTICOTERAPIA E INFECÇÕES HOSPITALARES:
UMA REVISÃO SISTEMÁTICA SOBRE ESTA RELAÇÃO E OS IMPACTOS
DECORRENTES PARA A SAÚDE PÚBLICA
Léia Madeira Sabóia dos Reis
Alexandra Maria dos Santos Carvalho
Itamara Ávila Miranda
Francisco Carlos da Silva Júnior
Camila dos Santos Xavier
Thiago Nobre Gomes
INTRODUÇÃO: Pseudomonas aerugionosa é um bacilo Gram-negativo que se destaca como
uma dos principais agentes causadores de infecções hospitalares (IHs), vindo a se caracterizar
especialmente por adquirir uma ampla resistência a antimicrobianos e desinfetantes (STOVER
et al., 2000). Em termo de número de casos, dentre os microrganismos causadores de IHs, este
agente infeccioso fica atrás apenas de Staphylococcus aureus e dos Staphylococcus coagulase-
negativos (FIGUEIREDO et al., 2007). Quanto à importância clínica das infecções hospitalares
por P. auruginosa e a ocorrência de casos de resistência a antibióticos, este patógeno é
responsável por altos índices de morbidade e mortalidade em pacientes internados em Unidades
de Terapia Intensiva (UTIs), assim se tornando um grave problema de saúde pública e motivo
de estudo tanto no Brasil quanto no mundo (FIGUEIREDO et al., 2007; NEVES et al., 2011).
Devido ao uso de antibióticos de forma indiscriminada, este microrganismo apresenta
resistência natural e adquirida na comunidade, mas segundo a Organização Mundial da Saúde
(OMS), a aquisição de resistência à antibioticoterapia por P. aeruginosa também é
correlacionada a fatores como: falha ou deficiência de informações dos profissionais de saúde,
veiculação da mídia de forma incorreta, baixo nível educacional e socioeconômico das
populações, acesso inadequado aos antimicrobianos, globalização e por fim, deficiência da
vigilância epidemiológica e das comissões de controle em infecção hospitalar (NEVES et al.,
2011; OMS, 2008). Segundo Figueiredo e cols. (2007) e Neves e cols. (2011), os
antimicrobianos que se destacam por apresentarem sensibilidade reduzida são aqueles de maior
espectro de ação, como os carbapenêmicos (imipenem e meropenem) e as cefalosporinas.
OBJETIVO: O presente trabalho teve como objetivo analisar as produções científicas que
tratassem sobre a relação existente entre P. aeruginosa, antibioticoterapia e ocorrência de
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ infecções hospitalares, bem como elucidar os principais impactos causados na saúde pública a
partir desta associação. MATERIAL E MÉTODOS: Trata-se de um estudo retrospectivo, com
levantamento bibliográfico de publicações indexadas em plataformas como Scientific Electronic
Library Online (SciElo), Biblioteca Virtual em Saúde (BVS), PubMed e Google Acadêmico.
Foram utilizados como descritores os termos: Pseudomonas aerugionosa, infecção hospitalar,
antimicrobianos, prevenção e saúde pública. Como critérios de inclusão, foram consideradas as
pesquisas produzidas entre os anos 2000 e 2014, as quais abordassem a temática proposta.
RESULTADOS E DISCUSSÃO: Após leituras dos títulos, resumos e resultados dos trabalhos
encontrados inicialmente e exclusão daqueles que não se adequavam aos critérios propostos,
foram selecionados 15 artigos científicos. P. aerugionosa se caracteriza como um patógeno
oportunista responsável por causar uma variedade de infeções sistêmicas, assim se
caracterizando uma bactéria de difícil controle por estar presente na comunidade (NEVES et al.,
2011; BARROS et al., 2012). Segundo Ferrareze e cols. (2007), a P. aeruginosa é tida como um
patógeno global entre os pacientes mais debilitados, e as cepas multirresistentes são cada vez
mais isoladas das colonizações e infecções nas UTIs. A troca de material genético que ocorre
entre os bacilos Gram-negativos é indicada como um dos principais mecanismos causadores de
resistência (NEVES et al., 2011). Considera-se uma cepa multirresistente, aquela que apresenta
resistência a 4 ou mais classes de antibióticos diferentes (FUENTEFRIA et al., 2008). A forma
de resistência que P.aeruginosa adquire durante a antibioticoterapia é característico à sua
espécie, e muitas vezes tal processo não pode ser evitado (NEVES et al., 2011). Figueiredo e
cols. (2007) abordam que P. aerugionosa apresenta resistência a vários antibióticos, e também
pode vir a apresentar resistência cruzada. Alguns dos antibióticos mais utilizados na terapia são:
cefalosporinas (3ª e 4ª gerações) e carbapenêmicos (como meropenem e imipenem), os quais
apresentam amplo espectro de resistência (FUENTEFRIA et al., 2008). Estes apresentam
atividade bactericida no tratamento de infecções, acarretando um aumento da resistência e
produção de beta-lactamases e metallo-beta-lactamases em pacientes com maior tempo de
internação. Neste caso, os carbapenêmicos são antimicrobianos que devem ser administrados
como último recurso nos tratamento de IHs (NEVES et al., 2011). O uso indevido dos
antibióticos em infecções provocadas por cepas multirresistentes vem gerando um desafio
constante para a terapia antimicrobiana, assim perfazendo uma atenção maior para a
identificação dessas bactérias que apresentam multirresistência e que são consideradas um
problema de saúde pública. CONCLUSÃO: Pseudomonas aeruginosa se destaca no meio
hospitalar como um patógeno responsável pela ocorrência de casos de IHs em pacientes
debilitados, assim precisando ser encarada como uma ameaça à saúde humana. O uso
inadequado de antibióticos faz com que o microrganismo adquira resistência e o tratamento das
infecções não seja tão eficiente, sendo necessário o desenvolvimento de ações estratégicas
efetivas pelas comissões de controle de infecção hospitalar, visando a redução dos casos de IHs
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ provocadas por P. aeruginosa, assim como também pelos demais microrganismos
multirresistentes presente neste ambiente.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BARROS, L. M. et al. Prevalência de micro-organismo e sensibilidade antimicrobiana de infeções hospitalares em unidade de terapia intensive de hospital público no Brasil. Revista de Ciências Farmacêuticas Básica e Aplicada, v. 33, n. 3, p. 429-435. 2012. FERRAREZE, M. V. G. et al. Pseudomonas aeruginosa multirresistente em unidade de cuidados intensivos: Desafios que procedem?. Acta Paul Enfermagem, v. 20, n. 1, p. 7-11. 2007. FIGUEIREDO, E. A. P. et al. Pseudomonas aeruginosa: Frequência a múltiplos fármacos e resistência cruzada entre antimicrobianos no Recife/PE. Revista Brasileira de Terapia Intensiva, v. 19, n. 4, p. 421-427. 2007. FUENTEFRIA, D. B., FERREIRA, A. E., GRAF, T., CORÇÃO, G. Pseudomonas aeruginosa: disseminação de resistência antimicrobiana em efluente hospitalar e água superficial. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 41, n. 5, p. 470-473. 2008. NEVES, P. R. et al. Pseudomonas aeruginosa multirresistente: um problema endêmico no Brasil. Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial, v. 47, n. 4, p. 409-420. 2011. Organização Mundial da Saúde (OMS). Organização Pan-Americana da Saúde. Infecção Hospitalar. [Citado em 05 jul 2008] Disponível em: <http://www.opas.org/sistema/fotos/hospitala1.PDF>. STOVER, C. K. et al. Complete genome sequence of Pseudomonas aeruginosa PAO1, an opportunistic pathogen. Nature, v. 406, p. 959-964. 2000.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ QUALIDADE BACTERIÓLOGICA DE AMOSTRAS DE CAMARÃO CONGELADO E
IN NATURA COMERCIALIZADAS EM SOBRAL-CE
Antonia Jorgiane Rodrigues de Macêdo
Maria Alana Duarte Marinho
Lucas Diogo Rosa
Jailda de Araújo Chaves Campelo
Maria Janaína Paula Gomes
Theodora Thays Arruda Cavalcante
Renata Albuquerque Costa
INTRODUÇÃO: Dentre os produtos de pesca, o camarão é um crustáceo que se destaca por ser
apreciado pelos consumidores. Dessa forma, é crucial a manutenção da sua qualidade
microbiológica, a fim de garantir à saúde dos consumidores (BORN, 2012). Entretanto, a partir
do momento que é feita a captura do camarão, começam a ocorrer alterações que interferem na
sua qualidade e, consequentemente, podem impedir o seu uso para alimentação humana
(FARIAS, 2006). Além disso, os crustáceos são tidos como alimentos altamente perecíveis,
posto que apresentam características intrínsecas que propiciam a fácil instalação do ranço
oxidativo, a saber: alta atividade de água, pH próximo a neutralidade e elevada concentração de
gorduras insaturadas (VIERA, 2008). Considerando o exposto, quando a conservação dos
camarões não ocorre de forma adequada pode haver a proliferação de alguns micro-organinsmos
patogênicos e/ou deterioradores. Citam-se como indicadores de qualidade sanitária em camarão,
os seguintes gêneros bacterianos: Salmonella spp. e Staphylococcus spp. (BRASIL, 2001).
Além desses gêneros bacterianos também podem ser citados os coliformes termotolerantes, que
são indicadores de contaminação de origem fecal. Dentre as bactérias citadas acima, os
estafilococos e os coliformes termotolerantes são considerados mesófilos, e a contagem desses
micro-organismos é habitualmente aplicada para avaliar a qualidade sanitária dos alimentos
oriundos da pesca. OBJETIVO: O presente trabalho teve como objetivo analisar a qualidade
bacteriológica de camarão congelado e in natura comercializados na cidade de Sobral – CE, a
partir da quantificação de bactérias de interesse sanitário: Staphylococcus e coliformes
termotolerantes. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram obtidas 15 amostras de camarão
congelado e 15 amostras de camarão in natura no comércio varejista de Sobral - CE. Os
camarões pertenciam à espécie marinha Litopenaeus vannamei e cada amostra foi constituída
por um pool de 500 gramas. Para a quantificação de coliformes e Staphylococcus, foram
pesados, assepticamente, 25 g de cada amostra e homogeneizados em 225mL de solução salina
a 0,85%, correspondendo à diluição 10-1, a partir da qual foram produzidas diluições decimais
seriadas até 10-3. A quantificação de coliformes foi feita pela determinação do Número Mais
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ Provável a partir da técnica de fermentação em tubos múltiplos (FENG et al., 2002). Para a
prova presuntiva e de detecção de coliformes termotolerantes (CT) foram utilizados o Caldo
Lauril Sulfato e Caldo EC, incubados a 35°C e 45°C por 48 horas, respectivamente. Foi
utilizada a técnica de semeadura em superfície em Ágar Baird-Paker para Contagem Padrão em
Placas (CPP) de Staphylococcus (BENNETT; LANCETTE, 2001) com incubação a 35°C por
48 horas. O cálculo de CPP foi realizado pela multiplicação das contagens de colônias de
Staphylococcus pela diluição correspondente, sendo expresso em log10 Unidades Formadoras
de Colônias (UFC) por grama. RESULTADOS E DISCUSSÃO: As amostras de camarão
congelado (n=15) apresentaram índices de Staphylococcus variando de 2,43 a 5,28 log10 CFU
g-1, e 12 amostras (80%) apresentaram carga bacteriana acima do limite de 3,0 log10 CFU g-1
preconizado pela ANVISA (BRASIL, 2001). Observou-se uma variação de 2,19 a 5,39 CFU g-1
na contagem de estafilococos das amostras de camarão in natura (n=15), estando dez (66,7%)
unidades amostrais impróprias para o consumo, uma vez que apresentaram valores acima de 3,0
log10 CFU g-1. Os elevados índices de Staphylococcus em ambas as amostras de camarão
(congelado e in natura) servem de alerta para a qualidade de produtos de pesca destinados ao
consumo humano. Além disso, indicam práticas inadequadas de manipulação desde a captura
até a distribuição do produto para o consumidor, uma vez que esses micro-organismos fazem
parte da microbiota normal da pele humana. A ocorrência de Staphylococcus em camarão
congelado foi reportada por Noor et al. (2013), estando relacionada a falhas graves de
manipulação e contaminação cruzada. Costa et al. (2011) também detectaram amostras de
camarão in natura com índices de Staphylococcus acima do permitido pela legislação vigente e
chamaram a atenção para o controle da temperatura em todas as etapas da cadeia produtiva
desse produto. No que refere a quantificação de CT, não foi observado crescimento desses
indicadores em nenhuma das 30 amostras de camarão analisadas. Esse fato indica que nenhuma
amostra foi contaminada por fonte de origem fecal (KOONSE et al., 2005). CONCLUSÃO:
Os resultados obtidos sugerem que as amostras comercializadas de ambas as formas
(congeladas e in natura) podem ser veículos de transmissão de Staphylococcus. Além disso,
chama-se atenção para a necessidade de se estabelecer medidas treinamento acerca das Boas
Práticas de Manipulação em todas as etapas da cadeia produtiva de camarão.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ produção, higiene e tecnologia de alimentos de origem animal) – Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul,Porto Alegre, 2012. BRASIL. Ministerio da Saude. Resolução RDC no 12, de 02 de janeiro de 2001. Aprova o Regulamento Técnico sobre Padrões Microbiológicos para Alimentos. Diário Oficial [da] Republica Federativa do Brasil. Brasília, DF, 10 jan. 2001. Seção 1, no7-E. p.45-53. COSTA, R.A.; MOREIRA, B.A.B.; CARVALHO, F.C.T.; MENEZES, F.G.R.; SILVA, C.M.; VIEIRA, R.H.S.F. Staphylococcus coagulase-positiva e enterobactérias em camarão Litopenaeus vannamei comercializado in natura. Revista do Instituto Adolfo Lutz, v. 70, n. 4, p. 566-571, 2011. FARIAS, M. do C.A. Avaliação das condições higiênico – sanitárias do pescado beneficiado em indústrias paraenses e aspectos relativos à exposição para consumo em Belém. 2006. 67f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) - Universidade Federal do Pará. Pará, 2006. FENG, P.; WEAGENT, S.D.; GRANT, M.A.; BURKHARDT, W. Enumeration of Escherichia coli and the coliform bacteria. In: Bacteriological Analytical Manual. U.S. Food & Drug Administration Center for Food Safety & Applied Nutrition, 2002. KOONSE, B.; BURKHARDT, W. 3RD; CHIRTEL, S.; HOSKIN, G.P. Salmonella and the sanitary quality of aquacultured shrimp. Journal of Food Protection, v. 68, n. 12, p. 2527-2532, 2005. NOOR, G.M.U.; LARSEN, M.H.; GUARDABASSI, L.; DALSGAARD, A. Bacterial flora and antimicrobial resistance in raw frozen cultured seafood imported to Denmark. Journal of Food Protection, v. 76, n. 3, p. 490-499, 2013. VIEIRA, R.H.S.F. Microbiologia, higiene e qualidade do pescado: teoria e prática. São Paulo: Varela, 2004. 380 p.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DA ÁGUA DO RIO CONTENDAS, NA CIDADE
DE MASSAPÊ, CEARÁ
Rosângela Maria Almeida Mouta
Andréa Maria Neves
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: Os mananciais urbanos são as fontes disponíveis de água no qual a população
pode ser abastecida nas suas necessidades. Devem possuir quantidade e qualidade de água
adequada ao seu uso. O uso mais nobre é o consumo de água pela população ou denominado de
consumo doméstico. O desenvolvimento urbano à medida que aumenta envolve duas atividades
conflitantes, aumento da demanda de água com qualidade e a degradação dos mananciais
urbanos por contaminação dos resíduos urbanos e industriais. (TUCCI, 2006). O consumo de
água global vem aumentando devido ao crescimento populacional, agrícola e industrial. Fatores
como o desflorestamento, despejo de resíduos e efluentes sem tratamento e ocupação
indiscriminada de áreas de mananciais contribuem para a contaminação e poluição das águas
(FERREIRA, 2005). Os indicadores geralmente utilizados incluem coliformes totais, coliformes
fecais, Escherichia coli e enterococci ( SHIBATA et al., 2004). Dentre os riscos de
contaminação, está presente o contato com as áreas de recreação, onde se encontra uma mistura
de microrganismos patogênicos e não patogênicos (ALVES, 2007). Além da poluição direta das
fontes de água, os sistemas de distribuição e reservatórios também podem ser responsáveis pela
transmissão de agentes patogênicos, caso estejam em condições inadequadas de higiene e
conservação (MICHELINA et al., 2006). OBJETIVO: Este trabalho tem como objetivo avaliar
a qualidade microbiológica da água do Rio Contendas em Massapê-CE. MATERIAL E
MÉTODOS: Foram coletadas amostras de três pontos, em locais diferentes do rio. As amostras
foram transportadas em caixas térmicas e levadas para o laboratório de Microbiologia da
Universidade Estadual Vale do Acaraú onde as mesmas foram submetidas à Determinação do
Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes. A contagem de micro-
organismos mesófilos aeróbios foi realizada através da técnica do Pour plate: Unidades
formadoras de colônias. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Em relação à análise microbiológica
o NMP de coliformes termotolerantes nas amostras nos três pontos, durante o mês que foi
coletado variou de 1,4x10 a 2,6x10 CTT/100 ml. Na coleta realizada, os três pontos analisados
apresentaram presença de Escherichia coli, Providência alcalifaciens, Proteus vulgaris e
Hafnia alvel. O NMP de coliformes totais, variou de 280 a > 1600 CT/100 mL. De acordo com
a portaria n°518/2004 do Ministério da Saúde (MS) que regulamenta as normas de potabilidade
das águas para consumo humano que proíbe a presença de E. coli ou coliformes termotolerantes
em amostras de 100 mL de água, todas as amostras apresentaram-se impróprias para consumo
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ humano. O número de bactérias aeróbias mesófilas nas amostras analisadas variou de 2,701x10³
a 5,131x10³ UFC/ml. A portaria 518/2004 do MS estabelece um limite de 500 UFC/mL estando
100% das amostras fora dos padrões exigidos. Araújo, et al. (2014) ao avaliarem os parâmetros
microbiológicos da água do açude de Forquilha- CE, de forma semestral, com coletas feitas em
três pontos distintos do açude, verificaram que o número de coliformes e de bactérias aeróbias
mesófila apresentaram valores insatisfatórios em relação à qualidade microbiológica em todos
os pontos coletados. Estes resultados corroboram com o presente estudo, no qual todos os
pontos de coletas analisados estavam acima do permitido pela legislação vigente.
CONCLUSÃO A partir da realização deste trabalho, observou-se que o Rio Contendas está
sofrendo grande impacto em sua qualidade, principalmente através de resíduos domésticos,
representados por altas concentração de coliformes encontrados. Os resultados obtidos mostram
que a água representa um fator de risco à saúde humana, pois os microrganismos encontrados
são a causa de inúmeras doenças infecciosas. Dessa forma, existe a necessidade de alertar a
população sobre as causas que o consumo desta água pode trazer a saúde, além de conscientiza-
los sobre a importância da preservação do rio.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ARAÚJO, A.B.D. et al. Qualidade microbiológica e avaliação do estado trófico de amostras de água do açude Forquilha-Ce. ENCICLOPÉDIA BIOSFERA, Centro Científico Conhecer, Goiânia, v.10, n.18, p. 368-3379, set. 2014. BOMFIM, M. V. J.; SOEIRO, G. de O.; MADEIRA, M.; BARROS, H. D. Avaliação físico- química e microbiológica da água de abastecimento do laboratório de bromatologia da UERJ. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 21, n. 152, p. 99-103, jun. 2007. FERREIRA, M. M. Impactos ambientais da ocupação urbana na bacia hidrográfica do Igarapé Batista Rio Branco - Acre. Rio Branco. 2005. 93 p. Dissertação (Mestrado em Ecologia e Manejo de Recursos Naturais)- Universidade Federal do Acre – UFAC, Rio Branco, 2005. MICHELINA, A. de F.; BRONHAROA, T. M.; DARÉB, F.; PONSANOC, E. H. G. Qualidade microbiológica de águas de sistemas de abastecimento público da região de Araçatuba, SP. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 20, n. 147, p. 90-95, dez. 2006. SOUSA, P. P. R.; CUNHA, A. R.; CONCEIÇÃO, M. L. Monitorização da qualidade microbiológica da água empregada em serviços de alimentação em empresas privadas da cidade de João Pessoa – PB. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 17, n. 104-105 (Encarte), p. 202-203, jan./fev. 2003. SHIBATA, T.; SOLO-GABRIELE, H.M.; FLEMING L.E.; ELMIR. S. Monitoring marine recreational water quality using multiple microbial indicators in an urban tropical environment. Water Research, v.38, p.3119-3131, 2004. http://dx.doi.org/10.1016/j.watres.2004.04.044 TUCCI, C. E. M. Água no meio urbano. In: REBOUÇAS, A. C.; BRAGA, B.; TUNDISI, J. G. Águas Doces no Brasil:Capital Ecológico, Uso e Conservação. 3. ed. São Paulo: Escrituras, 2006. cap. 12, p. 399-432.
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QUALIDADE MICROBIOLÓGICA E FÍSICO-QUÍMICA DA ÁGUA DO RIO
BATOQUE DA CIDADE DE HIDROLÂNDIA-CE
Naiani Oliveira Chaves Timbo
Andrea Maria Neves
Francisco Fábio Pereira de Souza
Danielle Rodrigues Maciel
Anny Sampaio Silva
Murilo Sérgio da Silva Julião
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: A água é o recurso natural mais utilizado em todo o mundo, ela é essencial
para o desenvolvimento em várias atividades sobre a terra, sejam urbanas, industriais ou
agropecuárias (STERZ, C.2011). A poluição do meio aquático através principalmente de dejetos
de esgotos, de hospitais, residências, e indústrias é um problema alarmante, pois a qualidade da
água tornou-se uma questão de saúde pública, devido à compreensão entre a relação da água
contaminada e doença. Para que a água seja caracterizada como potável após o tratamento
convencional, os parâmetros físico-químicos e microbiológicos deverão estar de acordo com a
Portaria de nº 36, do Ministério da Saúde, de 19 de janeiro de 1990 (BRASIL, 1990). Os
indicadores microbiológicos capazes de verificar a contaminação de água por resíduos humanos
são os coliformes totais e os termotolerantes. Este grupo incluem diversos organismos que se
diferem nas características bioquímicas, sorológicas e no seu habitat. Podemos classificar em:
Escherichia, Aerobacter, Citrobacter, Klebsiela e alguns gêneros que quase nunca apresenta em
fezes, como é o caso da Serratia. O rio Batoque é um rio intermitente, isto é, seca durante um
determinado período do ano. Seu nome significa pequena peça de madeira roliça, usada pelos
índios, como adorno no lábio inferior. Sua extensão e de aproximadamente 100 Km de
extensão. A nascente do rio em estudo está localizada dentro do território do município de
Hidrolândia, na Fazenda Amarante, há uma distância de aproximadamente 40 km da sede. No
passado, abastecia a população da cidade por meio das águas que eram retiradas das cacimbas e
cacimbões, localizados no leito do rio. O maior índice de contaminação da água do rio, ocorre
na cidade, quando os domínios do rio entram no perímetro urbano, os dejetos hospitalares da
população que vive nas margens ou nas proximidades delas, por não apresentarem um sistema
de esgotamento adequado, são despejados dentro do rio, gerando grandes problemas de
contaminação da água que é utilizada por animais que serão posteriormente consumidos pela
população. Segundo Rebouças et al. (2001), em virtude da grande capacidade de dissolução e
transporte do mais variados tipos de materiais, a água representa um veículo de impurezas,
como por exemplo, de micro-organismos patogênicos. OBJETIVO: Desta forma, o presente
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ trabalho tem por finalidade avaliar a qualidade microbiológica, quanto à presença de coliformes
totais e fecais, em diferentes pontos de águas do rio batoque, localizado na cidade de
Hidrolândia/CE. MATÉRIAS E MÉTODOS: Para o presente estudo foram coletadas 03
amostras de água de pontos diferentes do rio onde foram submetidas à Determinação do
Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes. Os pontos avaliados
foram: O ponto A, fica próximo a margem do rio; o B, em frente a uma criação de animais; e o
C, situado nas proximidades de uma rocha. Os resultados obtidos da quantificação dos valores
do Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e Coliformes Termotolerantes
(CTT) obtidos das 03 amostras avaliadas, detectou-se que 100% das amostras encontravam-se
dentro da categoria “imprópria” quanto a sua balneabilidade segundo a resolução do CONAMA.
Na análise bioquímica foi possível identificar bactérias como Klebsiella pneumoniae,
Escherichia coli, Providencia alcalifaclens e Hafnia alvei. As análises físico-químicas foram
realizadas seguindo as normas analíticas do Instituto Adolfo Lutz (IAL, 2005) e foram
determinados os seguintes parâmetros: nitrato, nitrito, pH, condutividade, cloreto, alcalinidade e
dureza. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados das análises de coliformes totais
(CTT) e coliformes termotolerantes (CTT) variou de 3,4 x 10 a >1600 CTT/100mL. O Número
Mais Provável (NMP) de coliformes totais variou de >1600 a >1600 CTT/100mL.
Apresentando 100% (A, B, C) das amostras contaminadas. Com relação a concentração de
nitrato, nitrito, pH, condutividade, cloreto, alcalinidade e dureza, nas amostras de água coletadas
foi verificado, que todos os parâmetros apresentam valores aceitáveis pela legislação, segundo o
Ministério da Saúde, 2011. Sales, et al. (2012) avaliaram os parâmetros microbiológicos da
água do açude Cumbe no município do Barro, Ce, com coletas em pontos diferentes, e
verificaram que os valores de coliformes encontrados apresentaram resultados satisfatórios em
relação à qualidade microbiológica em todos os pontos coletados. Lima e Garcia (2008) ao
avaliarem a qualidade da água de açude e barragem, atribuírem elevados valores de pH a menor
quantidade de água em períodos de estiagem. Estes resultados não corroboram com os
encontrados nesse estudos. O mesmo foi observado por Damiani et al (2013) ao avaliar a
qualidade física e química da água provenientes de bebedouros consumidos por estudantes de
Goiânia-GO. CONCLUSÃO: Pode-se concluir por meio das análises realizadas, que as águas
que abastecem o rio Batoque estão sofrendo impactos em sua qualidade. Uma vez que, no grupo
de micro-organismos avaliados, são encontrados agentes infecciosos envolvidos em
enfermidades como diarreia e infecções urinárias. Portanto é necessário o desenvolvimento de
ações preventivas com intuito de esclarecer a população local sobre os riscos à saúde, que a
presença do esgoto doméstico, do despejo de lixo e dejetos de animais representa.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BRASIL. Portaria 36, de 19 de janeiro de 1990. Dispõe sobre a água para o consumo humano. Brasília, DF: Governo Federal, 1990. CONAMA. Resolução Nº 274, de 29 de novembro de 2000. Define os critérios de balneabilidade em águas brasileiras. Diário Oficial da União. Brasília, DF, 2001 LIMA, W.S.; GARCIA, C.A.B. Qualidade da água em Ribeirópolis: o açude do Cajueiro e a barragem do João Ferreira. 2008 119 f. Dissertação (Mestrado em Agroecossistemas) – Universidade Federal de São Cristovão - UFS, Sergipe, Brasil, 2008. REBOUÇAS, A. C.; BRAGA, B.; TUNDISI, J. G. Águas doces do Brasil: Capital ecológico, uso e conservação. São Paulo: Escrituras, 2001. 717p. STERZ ,C. ;GOMES, M. F. R. ; ROSSI, E. M. Análise microbiológica e avaliação de macroinvertebrados bentônicos como bioindicadores da qualidade da água do Riacho Capivara, município de Mondaí, SC-REV.Unoesc & Ciência – ACBS, Joaçaba, v. 2, n. 1, p.7-16, jan./jun. 2011;
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
TESTES PARA COLIFORMES A 35ºC E A 45ºC EM MELANCIAS MINIMAMENTE
PROCESSADAS COMERCIALIZADAS EM SUPERMERCADOS DA CIDADE DE
SOBRAL
Francisca Shely Oliveira Lima
Mateus Martins Cruz
Mariana Santiago Silveira
Leiliane Teles César
INTRODUÇÃO: A crescente busca por hortaliças e frutas frescas, associada à conveniência da
vida atual e praticidade, tem incentivado o interesse em produtos minimamente processados por
muitos consumidores (SANTOS, 2007). Esses produtos são pré-preparados por meio de
operações como descascamento, corte, sanitização, centrifugação e acondicionamento em
embalagens apropriadas à manutenção do produto em seu estado fresco (GOMES et al, 2005).
Os produtos minimamente processados são mais perecíveis do que os in natura, e a injúria nos
tecidos, em função da manipulação e cortes, pode diminuir a qualidade e o tempo de vida útil do
produto, por acelerar mudanças de degradação durante a senescência. Portanto, a segurança
microbiológica de produtos minimamente processados precisa ser garantida em adição à
manutenção da qualidade sensorial e nutricional deles (VANETTI, 2002). Uma das frutas que
mais facilmente se encontra minimamente processadas é a melancia, com essa grande oferta é
aberta uma discussão, se o que está sendo comercializado está seguro microbiologicamente, pois
a melancia é uma das frutas com maior atividade de água livre facilitando assim a proliferação
de micro-organismos deteriorantes e patogênicos. Segundo a RDC n° 12 (ANVISA, 2001) o
fruto minimamente processado é dito seguro se apresentar ausência de coliformes
termotolerantes e Salmonella em 25g da amostra. OBJETIVO: Este trabalho teve por objetivo
avaliar a qualidade microbiológica de melancias minimamente processadas adquiridas em
mercado local da cidade de Sobral no estado do Ceará e melancias manipuladas em laboratório
no Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará-Campus Sobral, seguindo os
critérios das Boas Práticas de Fabricação (BPF’s) e da seleção da matéria-prima. MATERIAL
E MÉTODOS: No presente estudo foram utilizadas duas amostras onde a Amostra 1 foi a
Melancia processada em laboratório que passou por seleção da matéria-prima antes da aquisição
in natura, posteriormente foi higienizada, minimizada, pesada até peso total de 400 gramas,
armazenada sobre refrigeração em material estéril e encaminhada para as análises
microbiológicas de coliformes totais e fecais. Já a Amostra 2 foi a Melancia comercial,
adquirida em comercio local da cidade de Sobral, já minimamente processada e então foi pesada
as 400g respectivas, armazenada a frio e encaminhou-se para as análises de Coliformes que
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ foram realizadas de acordo com o proposto por SILVA e colaboradores (2001) no Manual de
métodos de analises microbiológicas em alimentos. As análises foram feitas acompanhando a
vida de prateleira do fruto durante 8 dias sendo realizadas em dias alternados a partir do dia 0,
com espaçamento de 3 dias entre o dia 4 e o dia 7, acompanhou-se o crescimento microbiano e a
perda de peso do fruto com o passar dos dias. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Com os
resultados obtidos pode-se perceber que o crescimento microbiano deu – se a partir do dia 1
para as duas amostras na análise de Coliformes a 35°C. Porém até o dia 4 a amostra processada
em laboratório demonstrou contaminação menor com 75 NMP/g que a máxima permitida e
obtida pela amostra comercializada de ≥ 2400 NMP/g, sendo observada no mesmo período. E
ambas obtiveram o resultado máximo para á analise realizada no dia 7. Já os resultados para
Coliformes fecais (a 45°C) percebeu-se um número mais provável por grama (NMP/g) menor
que 0,3, ou seja, ausência ou presença muito pequena de microrganismos patogênicos tanto para
a melancia comercializada quanto para a processada em laboratório em todos os dias de vida de
prateleira acompanhados, estando assim de acordo com a legislação vigente para tal patógeno.
A contaminação por Coliformes a 35°C são relacionados á deterioração do fruto, o que já era
esperado com o passar dos dias de armazenamento mesmo com a cadeia de frio, pois obteve
resultado semelhante ao encontrado na literatura. Já os índices reduzidos de crescimento de
Coliformes termotolerantes (45°C), em todas as etapas, indica possivelmente que as amostras
foram processadas com base nas boas práticas de fabricação e higiene dos manipuladores e da
matéria-prima. O estudo de Nunes e colaboradores (2010) que também analisavam produtos
minimamente processados mostraram resultados semelhantes, com baixa contaminação por
coliformes a 35°C e ausência de coliformes termotolerantes (45°C). A partir dos resultados
obtidos pode – se concluir que houve diferença de crescimento microbiano entre as duas
amostras de melancia analisadas nos 8 dias, tanto a processada seguindo as normas das Boas
Práticas de Fabricação (BPF) quanto à amostra adquirida em comércio local, com relação à
qualidade microbiológica a partir do segundo dia de análises (dia1) para coliformes a 35°C e
não houve crescimento microbiano considerável de coliformes termotolerantes, assim como é
exigido pela legislação vigente. CONCLUSÃO: Portanto através dos resultados deste trabalho,
permitiu-se assegurar a segurança microbiológica para tais patógenos em melancias
minimamente processadas adquiridas em comercio local da cidade de Sobral e elaboradas em
laboratório, e sugerir a necessidade de controle de qualidade para as mesmas, observando as
boas práticas de fabricação e outros métodos eficientes para se assegurar um produto saudável e
seguro para o consumidor. Abrindo também a possibilidade da observação do crescimento de
microrganismos deteriorantes que reduzem a vida de prateleira do fruto minimamente
processado.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
REFERÊNCIA BIBBLIOGRAFIA
ANVISA. RESOLUÇÃO RDC Nº 12, DE 02 DE JANEIRO DE 2001. D.O.U. - Diário Oficial da União; Poder Executivo, de 10 de janeiro de 2001. GOMES, C.A.O., ALVARENGA, A.L.B., JUNIOR, M.F., CENCI, S.A. HORTALIÇAS MINIMAMENTE PROCESSADAS. EMBRAPA. Coleção Agroindustria familiar. Brasília, DF. 2005. NUNES, E.E., VILA BOAS, E.V.B., XISTO, A.L.R.P., LEME, S.C., BOTELHO, M.C. AVALIAÇÃO DE DIFERENTES SANIFICANTES NA QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DE MANDIOQUINHA-SALSA MINIMAMENTE PROCESSADA. Ciência agrotécnica. vol.34 n. 4. Lavras. Jul/Aug. 2010. SANTOS, T. B. A. QUALIDADE MICROBIOLÓGICA DE FRUTAS E HORTALIÇAS MINIMAMENTE PROCESSADAS COMERCIALIZADAS NA CIDADE DE CAMPINAS - SP. Dissertação de Mestrado. Faculdade de Engenharia de Alimentos. Universidade Estadual de Campinas. Campinas-SP. p.110, 2007. SILVA, N., JUNQUEIRA, V.C.A., SILVEIRA, N.F.A. MANUAL DE MÉTODOS DE ANÁLISE MICROBIOLÓGICA DE ALIMENTOS. Revista Ampliada. Editora Varela. 2ª Edição. 2001. VANETTI, M. C. D. ASPECTOS MICROBIOLÓGICOS DE PRODUTOS MINIMAMENTE PROCESSADOS. In: Anais do Seminário Internacional de Pós-Colheita e Processamento Mínimo de Frutas e Hortaliças, Brasília DF. 2002.
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________
TOXICIDADE DO ÓLEO ESSENCIAL DE Lippia alba L. (VERBENACEAE) FRENTE
A Artemia salina L
Patrícia Silva Costa
Rafael Pereira
Halisson Araújo de Souza
Elnatan Bezerra de Souza
Raquel Oliveira dos Santos Fontenelle
INTRODUÇÃO: O conhecimento e uso de plantas medicinais são corriqueiramente
empregados na medicina popular por apresentarem efeito sobre diversas enfermidades devido a
presença de uma variedade de compostos bioativos. Esses compostos ou metabólitos
secundários, são produzidos naturalmente pelas plantas durante seu crescimento em resposta a
predadores ou sob condições de stress. A espécie Lippia alba L. ou erva-cidreira, é uma fonte
abundante desses metabólitos especiais. Seu óleo essencial é reportado na literatura por
apresentar amplo espectro de atividade antimicrobiana, cuja eficácia varia em função da sua
composição, que sofre influência de fatores bióticos e abióticos (MACHADO et al., 2014).
Todavia, a utilização desses vegetais pode resultar em efeitos adversos (LIMA et al., 2006), por
essa razão, há a necessidade de promover pesquisas no intuito de compreender tais efeitos.
Diante disso, segundo Barbosa e colaboradores. (2009), o ensaio de toxicidade sobre a Artemia
salina L. é um método viável, prático e econômico para determinar a toxicidade geral dos
compostos de produtos naturais, sendo considerado um bioensaio preliminar no estudo de
derivados vegetais utilizados na medicina popular e para indicação de uma grande variedade de
compostos biologicamente ativos em extratos (MACIEL et al., 2002). OBJETIVO: Esse
trabalho teve como objetivo investigar a toxicidade do óleo essencial de Lippia alba L. frente
aos náuplios de Artemia salina L., apresentando a concentração letal capaz de matar 50% desses
microcrustáceos. MATERIAIS E MÉTODOS: A espécie vegetal foi coletada no Sítio Santa
Cruz, no município de Meruoca, Ceará e identificada no Herbário da Universidade Estadual
Vale do Acaraú-UVA, sob o tombo 18716. O óleo essencial foi extraído através do método de
arraste a vapor, utilizando folhas frescas. Para realização do teste de toxicidade, utilizou-se a
metodologia proposta por Mc Laughlin (1991), na qual os ovos de A. salina são postos em água
salina artificial e eclodem após 48 horas, em seguida coleta-se as larvas para os bioensaios. As
dissoluções das amostras e do teste em branco são realizadas com 3,9 mL de água salina, 1mL
de água salina com artêmias e 0,1 mL de DMSO concentrado. Procedimento realizado sempre
em triplicata nas concentrações de 1000, 100, 10 e 1 ppm, e adicionadas 10 artêmias em cada
frasco, sendo a contagem das sobreviventes realizada após 24 horas. Após a análise dos
Anais do I Simpósio Cearense de Microbiologia e II Encontro de Microbiologia de Sobral ____________________________________________________________________________ resultados, o procedimento é repetido em concentrações intermediárias na tentativa de encontrar
a concentração que mata 50% dos microcrustáceos. Para o cálculo das CL50 utilizou-se o
Programa Microsoft Excel através do cálculo de regressão linear com a seguinte fórmula: 5 - b /
a, onde, a e b são valores da equação de primeiro grau y = ax + b, sendo considerado ativo
quando CL50 < 1000 µg/ mL. RESULTADOS E DISCUSSÃO: A toxicidade do óleo
essencial de L. alba L., mediante às larvas de A. salina, mostrou que a concentração letal capaz
de matar 50% das larvas (CL50) foi de 53,01 µg/mL indicando forte atividade de toxicidade por
estar abaixo do limite padrão de 1000 µg/mL, proposto por Mc Laughlin (1991). Os resultados
encontrados aqui corroboraram com os achados no trabalho de Costa et al. (2009), onde
utilizaram o OE de Lantana camara, também pertencente à família Verbenaceae, frente aos
mesmos microscrustáceos, porém seguindo a metodologia de Meyer et al. (1982), revelando a
concentração letal (CL50) de 14 µg/ mL, no entanto, os autores aplicaram em seu estudo
concentrações de 100; 50; 25 e 10 µg/mL, valores inferiores aos utilizados nesse estudo.
CONCLUSÃO: O teste de toxicidade mostrou que o óleo essencial de L. alba possui alta
toxicidade frente a A. salina, sugerindo que os constituintes presentes nesse óleo têm atividade
antifúngica e larvicida. Porém, conforme informado anteriormente, esse teste é um experimento
simples e preliminar, gerando a necessidade de realizar estudos aprofundados que indiquem a
viabilidade desse OE diante dessas atividades, levando a comprovar sua segurança toxicológica.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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