Amostras utilizadas em Imunoensaios Profa. Alessandra Pardini Disciplina: Imunologia Clínica.
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Amostras utilizadas em Imunoensaios
Profa. Alessandra PardiniDisciplina: Imunologia Clínica
INTRODUÇÃO
- A validação dos imunoensaios é feita com base nos parâmetros de sensibilidade, especificidade, repetitividade, reprodutibilidade e estabilidade
- Problemas no imunoensaio = nova amostra = problema desaparece
- Os imunoensaios são objeto de padronização e normatização- Controle de Qualidade – pré analítico
PREPARO E INSTRUÇÕES AO PACIENTE
FATORES INERENTES AO PACIENTE:
Idade
Sexo
Etnia
Gravidez
Período de Ciclo Menstrual
Uso de medicamentos (anticoncepcional,
vitaminas, etc)
JEJUM
Não tem muita importância para Imunoensaios.
No entanto, concentração excessiva de lipídios pode interferir
em teste de imunoprecipitação e aglutinação.
Evitar coletar amostras até 2h após refeição (almoço, janta) –
pós-prandial.
Recomendável jejum padrão de 8h se for realizar também
outros exames.
Jejum de 4h, se somente for realizar exames de imunoensaios.
Beber água não invalida o jejum.
Evitar álcool, fumo (afeta os hormônios)
GRAVIDEZ
Geralmente ocorre resultados
falso-positivos devido mudanças hormonais e protéicos como
aumento de hCG, lactogênio, cortisol e hormônios tireoidianos.
Perguntar a data da última menstruação e a semana
gestacional, principalmente na determinação de hormônios.
EXERCÍCIO
Exercícios com perda de água e suor
alteram a concentração de parâmetros
bioquímicos e hormônios.
Fazer 30 minutos de repouso no
laboratório antes da coleta.
IDADE
Importante na determinação de hormônios, proteínas e
substâncias do metabolismo bioquímico.
CICLO MENSTRUAL E RITMO CIRCADIANO
Deve conter no laudo o dia do ciclo
menstrual.
Cortisol é o parâmetro mais afetado ao
longo do dia. Preconiza-se coletar entre 7:00 e
9:00h da manhã.
Laboratório de Análises Clínicas
Finalidades:Verificar estágios da condição biológica humanaVerificar ausência de patologias, como parte de algoritmos
médicosex.: Diabetes Mellitus (adulto)Estabelecer diagnósticosFornecer informações para diagnóstico e acompanhamento
de patologias agudas e crônicas
COLETA DE SANGUE
O tipo de amostra para cada analito é definido por protocolos
internacionais.
Evitar hemoconcetração: não deixar o torniquete por mais de
1minuto.
Evitar hemólise: ruptura de hemácias.
Coleta em tubo seco ou gel, e anticoagulantes (citrato,
heparina, EDTA e inibidor de glicose).
AMOSTRAS
COLETA -É o primeiro passo para TODAS as análises efetuadas no Laboratório Clínico
-Todas as etapas seguintes dependem da coleta do material
- É importante que o procedimento apropriado (indicado) seja seguido = para obtenção de resultados exatos
- Utilizar material completamente limpo para evitar falsos resultados
OBTENÇÃO DE SORO OU PLASMA
É necessário certo tempo para formação do coágulo e
retração ideal.
Não é aconselhável refrigerar a amostra.
Após centrifugação, obtêm o soro ou plasma.
OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS
URINA Determinação hormonal ou de drogas
Líquido Cefalorraquidiano (LCR) Pesquisa de antígenos bacterianos, virais e parasitários Pesquisa de Ac
LÍQUIDO AMNIÓTICO Amniocentese procedimento para obtenção de líquido após 16ª. Semana de gestação. Não deve conter sangue. Pesquisar presença de patógenos.
OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS
FEZES Pesquisar a presença de antígenos
SALIVA Determinação de hormônios livres: cortisol, progesterona, estradiol e testosterona; e as drogas teofilina, digoxina e diazepam.
SÉMEN Pesquisa de anticorpos antiespermatozóides. Manter 3 dias de abstinência sexual. Após ejaculação aguardar 30 min, e usar o material em até 2h
Agradecimento:Profa. Adriana Di Brito, pelo material gentilmente cedido
Bibliografia:VAZ et al., Imunoensaios – Fundamentos e Aplicações, Guanabara Koogan,
2007.
Internet:Pesquisa na internet agosto de 2011Cruz, CF, LACEN/PR