AKTIVITAS INHIBISI TIROSINASE DARI EKSTRAK ETANOL …repository.ump.ac.id/6676/1/Siti...

1

AKTIVITAS INHIBISI TIROSINASE DARI EKSTRAK ETANOL

BUNGA KEMBANG SEPATU (Hibiscus rosa-sinensis L)

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

SITI NURYANTI

0908010033

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2013

2

ii

Aktivitas Inhibisi Tirosinase..., Siti Nuryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2013

3

iii


4

PERNYATAAN

Yang bertanda tangan dibawah ini, saya :

Nama : Siti Nuryanti

NIM : 0908010033

Program studi : Farmasi

Fakultas/Universitas : Farmasi/Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses

penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian yang benar

dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan dari hasil karya

orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar

kesarjanaan disuatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak

terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain kecuali

yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Demikian pernyataan ini, apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur

penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggung jawabkan sesuai dengan ketentuan

yang berlaku.

Purwokerto, Agustus 2013

Yang menyatakan,

Siti Nuryanti

iv


5

ABSTRAK

SITI NURYANTI. Aktivitas Inhibisi Tirosinase Dari Ekstrak Etanol Bunga Kembang

Sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L)

Dibawah bimbingan BINAR ASRINING DHIANI dan INDRI HAPSARI

Latar Belakang: Paparan sinar UV yang berlebih dapat mengakibatkan efek awal

berupa pigmen kulit yang semakin gelap (pigment darkening) dan diikuti dengan

kerusakan struktur kulit yang menyebabkan premature photoaging (penuaan dini).

Pigmen gelap pada kulit disebabkan karena tubuh memproduksi melanin dalam

jumlah yang banyak. Proses pembentukan melanin dikatalisis oleh enzim tirosinase.

Penghambatan terhadap tirosinase dan senyawa antioksidan sangat diperlukan dalam

sediaan kosmetik. Ekstrak etanol bunga kembang sepatu telah diketahui memiliki

aktivitas antioksidan yang baik, tetapi belum pernah dilakukan penelitian terhadap

penghambatan tirosinase.

Tujuan Penelitian: Untuk menentukan aktivitas inhibisi tirosinase dan nilai dari

ekstrak etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L).

Metode Penelitian: Jenis penelitian ini adalah eksperimental dengan rancangan

randomized block design dengan menguji konsentrasi ektrak etanol 50, 100, 200, 400

dan 800 µg/mL yang terlarut dalam DMSO terhadap aktivitas tirosinase. Penurunan

aktivitas tirosinase ditandai dengan menurunnya intensitas warna coklat dari

pembentukan dopakrom. Penurunan intensitas warna coklat dapat diukur

absorbansinya menggunakan microplate reader pada panjang gelombang 490 nm.

Hasil: Uji penghambatan terhadap tirosinase menunjukkan bahwa ekstrak etanol

bunga kembang sepatu mempunyai aktivitas penghambatan yang rendah

dibandingkan dengan kontrol positif hidrokuinon. Nilai dari ekstrak etanol

bunga kembang sepatu yaitu 493,1 µg/mL sedangkan untuk hidrokuinon 16,34

µg/mL. Dari hasil uji analisis KLT menunjukkan ekstrak etanol bunga kembang

sepatu tidak mengandung senyawa kuersetin, arbutin dan asam galat yang merupakan

senyawa yang telah terbukti dapat menghambat aktivitas tirosinase.

Kesimpulan: Ekstrak etanol bunga kembang sepatu mempunyai aktivitas

penghambatan yang rendah dengan nilai yaitu 493,1 µg/mL sedangkan untuk

hidrokuinon 16,34 µg/mL

Kata Kunci : Bunga kembang sepatu, inhibisi tirosinase, L-DOPA.

v


6

ABSTRACT

SITI NURYANTI. Tyrosinase Inhibition Activity of Ethanol Extract Hibiscus Flower

(Hibiscus rosa-sinensis L)

Under Supervision ofBINAR ASRINING DHIANI and INDRI HAPSARI

Background:Excessive exposure to UV rays can lead to the early effects of a

pigment darkening and followed by structural damage which causes premature skin

photoaging (premature aging). Pigment darkening caused bymelanin production in

significant amounts. Melanin formationis catalyzed by the enzyme tyrosinase.

Tyrosinase inhibitorand antioxidant compounds isnecessary in the

cosmeticspreparation. Ethanol extract of Hibiscus flower has been known to be

antioxidant agent, but there was noscientific reportson its inhibition of tyrosinase

Objective: This research was aimed to determine the inhibitory activity of tyrosinase

and the value of the ethanol extract of hibiscus flower (Hibiscus rosa-sinensis L).

Methods: The study design was an experimental with randomized block design to

test the concentration of ethanol extract 50, 100, 200, 400 and 800 µg/mL dissolved

in DMSO ontyrosinase activity. Tyrosinase activity was by determined decreasing the

intensity of the brown color which represented dopachrom formation. Decrease in the

intensity of the color brown can be measured using a microplate reader with

wavelength 490 nm.

Result:The results showed that the inhibition of tyrosinase ethanol extracts of

hibiscus flowers have a low inhibitory activity compared to hydroquinone as positive

control. value of the ethanol extract of the hibiscus flower 493.1 µg/mL, while

for hydroquinone 16.34 ug / mL. TLC analysis showed that the ethanol extract of the

hibiscus flower did not containedquercetin, gallic acid, arbutin which was reported as

tyrosinase inhibitor.

Conclusion:The ethanol extract of the hibiscus flower has a low inhibitory activity

with the value of 493.1 µg/mL, while for hydroquinone 16.34 ug/mL

Keywords:Hibiscus flowers, inhibition of tyrosinase, L-DOPA.

vi


7

PERSEMBAHAN

Skripsi ini saya persembahkan kepada :

ALLAH SWT, atas segala kuasa dan kehendak_Nya skripsi ini dapat selesai pada

waktunya.

Ayah (abdul munir) dan ibu (Halimah), yang selama ini tak henti-hentinya

memberikan kasih sayang mereka, support dan dukungan baik moral maupun

materi.

Muhlisin, mba tanti, jiyan dan masitoh, trimakasih atas dukungannya selama ini.

Lita, anggun trimakasih atas dukungan dan doanya.

Teman seperjuanganku, oyi dan amel, trimakasih atas kerja

samanya,semangatnya selama penyusunan skripsi hingga skripsi ini selesai.

Untuk wina,trimakasih ya selama ini sudah mau mendengarkan keluh kesahku,

trimakasih juga telah ikut membantu mencarikan bahan-bahan untuk penelitian

skripsi.

Teman-teman farmasi angkatan 2009 dan juga teman-teman ASSASAINS yang

tidak bisa aku sebutkan satu persatu namanya. Trimaksih atas kebersamaannya

selama ini.

Untuk teman-teman fiumi kost, lisna, mba pipin, oyi, winda,nunu, rena, yuni

arbanga, yuni, winda, rina, marina, siska, nunung, mba otih, umu, inasa.

Trimakasih atas kebersamaanya di fiumi.

vii


8

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat ALLAH SWT atas segala rahmat,

hidayah serta inayahNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian (skripsi)

yang berjudul “AKTIVITAS INHIBISI TIROSINASE DARI EKSTRAK ETANOL

BUNGA KEMBANG SEPATU (Hibiscus rosa-sinensis L)”. Skripsi ini disusun

untuk memenuhi syarat dalam memperoleh gelar S1 di fakultas farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak

dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Oleh karena itu pada kesempatan ini

penulis mengucapkan terima kasih kepada :

1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. Rektor Universitas Muhammadiyah

Purwokerto

2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi

3. Binar Asrining Dhiani, M.Sc.,Apt selaku dosen pembimbing I, yang telah

memberikan bimbingan, arahan dan petunjuk dalam penyusunan skripsi ini

dengan penuh kesabaran, ketekunan, sehingga dapat diselesaikan dengan baik.

4. Indri Hapsari, M.Si.,Apt selaku dosen pembimbing II, yang telah memberikan

petunjuk dan motivasi yang tinggi, sehingga penyusunan skripsi ini dapat

terlaksana hingga selesai.

5. Seluruh dosen Fakultas Farmasi UMP yang telah memberikan ilmunya sehingga

dapat membantu penulis dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini.

6. Seluruh laboran Fakultas Farmasi terutama Mas Mamat, Mas Heri dan Bu Titi

terima kasih atas waktu, bantuan dan bimbingannya.

7. Bapak dan Ibu karyawan TU Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto yang telah membantu dalam hal administrasi.

8. Kedua orang tuaku tercinta yang telah memberikan dukungan moral, material dan

spiritual.

viii


9

9. Teman-teman satu angkatan farmasi 2009 dan juga teman-teman ASSASAINS

terimakasih atas do’a, dukungan serta kebersamaannya selama ini dalam suka

maupun duka dan untuk semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per

satu, terimakasih atas semua bantuannya.

Penulis telah berusaha semaksimal mungkin agar penyusunan skripsi ini dapat

tersusun dengan sempurna, namun penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari

berbagai pihak penyusunan skripsi ini tidak akan berjalan baik. Dengan segala

kerendahan hati dan lapang dada, penulis menerima kritik dan saran yang

membangun dari para pembaca untuk kesempurnaan di masa datang.

Purwokerto, 27 Agustus 2013

Penulis

ix


10

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL .......................................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN .......................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. iii

SURAT PERNYATAAN ................................................................................... iv

ABSTRAK ....................................................................................................... . .. v

ABSTRACT .............................................................................................. ........... vi

HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................... vii

KATA PENGANTAR ...................................................................................... .. viii

DAFTAR ISI ....................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ............................................................................................... xiii

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xv

...............................................................................................................................

BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah .................................................................. 1

B. Perumusan Masalah .......................................................................... 2

C. Tujuan Penelitian............................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ............................................................................ 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................... 4

A. Kembang Sepatu .............................................................................. 4

1. Sistematika Tanaman .................................................................. 4

2. Morfologi .................................................................................... 5

3. Kandungan Kimia Bunga Kembang Sepatu ............................... 5

4. Aktivitas Farmakologi ................................................................ 5

B. Melanin.......................................................................................... .. 6

x


11

C. Inhibitor Tirosinase .......................................................................... 7

D. Hidrokuinon ..................................................................................... 8

E. Senyawa Inhibitor Tirosinase .......................................................... 9

1. Asam Galat ................................................................................. 9

2. Arbutin ....................................................................................... 9

3. Kuersetin .................................................................................... 9

BAB III METODE PENELITIAN ................................................................... 11

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ....................................................... 11

B. Variabel Penelitian .......................................................................... 11

C. Definisi Variabel Operasional .......................................................... 11

D. Waktu dan Tempat ........................................................................... 13

1. Waktu ......................................................................................... 13

2. Tempat ....................................................................................... 13

E. Bahan dan Alat .................................................................................. 13

1 . Bahan ......................................................................................... 13

2. Alat ............................................................................................. 13

F. Cara Penelitian ...................................................................... .......... 14

1. Pengambilan Simplisia .............................................................. . 14

2. Determinasi Tanaman ................................................................. 14

3. Pembuatan Ekstrak ..................................................... ................ 14

G. Analisis Kualitatif dengan Menggunakan KLT ............................... 14

1. Identifikasi Senyawa Kuersetin.................................................. 14

2. Identifikasi Senyawa Arbutin.................................................. .. 15

3. Identifikasi Senyawa Asam galat.................................................. 15

H. Uji Penghambatan Melanin............................................................... 15

4. Pembuatan Buffer Fosfat 0,05M….......................................... … 15

5. Pembuatan Larutan Tirosinase ..................................………….. 15

6. Pembuatan Larutan L-DOPA ................................ ………......... 15

7. Pembuatan Larutan sampel .......................................................... 16

xi


12

8. Pembuatan Larutan Kontrol Positif……………………………. 16

9. Pengujian aktivitas Inhibisi Tirosinase………………………… 16

H. Analisis Data ..................................................................................... 17

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................... ........................ 18

A. Determinasi Tanaman ..................................................................... 18

B. Pengolahan Simplisia Bunga Kembang Sepatu ............................... 18

C. Pembuatan Ekstrak Bunga Kembang Sepatu .................................. 19

D. Organoleptis Ekstrak ....................................................................... 20

E. Analisis Kualtitaif Dengan Menggunakan KLT....... ....................... 20

1. Identifikasi senyawa kuersetin....... ............................................ 20

2. Identifikasi Senyawa Asam galat............................................... 21

3. Identifikasi Senyawa Arbutin..................................................... 21

F. Uji Penghambatan Melanin ....... ..................................................... 21

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ .... 28

A. Kesimpulan ....................................................................................... 28

B. Saran ................................................................................................ 28

DAFTAR PUSTAKA................................................................................. ......... 29

LAMPIRAN.......................................................................................................... 34

xii


13

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1 Persentase Inhibisi hidrokuinon dan ekstrak etanol bunga

kembang sepatu .................................................................................... 23

Tabel 2 Persentase rendemen ekstrak etanol bunga kembang sepatu ............... 38

xiii


14

DAFTAR GAMBAR

halaman

Gambar 1 Bunga kembang sepatu ..................................................................................... 4

Gambar 2. Skema pembentukan melanin ........................................................................... 7

Gambar 3. Hubungan log konsentrasi hidrokuinon dengan persen

inhibisi...............................................................................................................

25

Gambar 4. Hubungan log konsentrasi bunga kembang sepatu dengan

persen inhibisi ...................................................................................................

25

xiv


15

DAFTAR LAMPIRAN

halaman

Lampiran 1. Surat keterangan determinasi tanaman bunga

kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) .............................. 35

Lampiran 2. Jalannya penelitian ................................................................... 37

Lampiran 3. Perhitungan rendemen ekstrak .................................................. 38

Lampiran 4. Perhitungan pembuatan buffer fosfat pH 6,8 ............................ 39

Lampiran 5. Perhitungan pembuatan larutan L-DOPA ................................ 41

Lampiran 6. Perhitungan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Bunga

Kembang Sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) dan

Hidrokuinon .............................................................................. 42

Lampiran 7. Hasil absorbansi hidrokuinon dan ekstrak etanol

bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) .................. 46

Lampiran 8. Perhitungan persentase inhibisi ................................................ 48

Lampiran 9. Hasil perhitungan ............................................................ 59

Lampiran 10. Dokumentasi ............................................................................ 61

xv


AKTIVITAS INHIBISI TIROSINASE DARI EKSTRAK ETANOL …repository.ump.ac.id/6676/1/Siti...

Documents

Transcript of AKTIVITAS INHIBISI TIROSINASE DARI EKSTRAK ETANOL …repository.ump.ac.id/6676/1/Siti...