PauloAfonso Viana'Luciene Lanza Reis2

ADEQUAÇÃO DE MeTODOS PARA ESTIMAR A POPULAÇÃODE ELASMOPALPUS LlGNOSELLUS EM

CONDIÇOES DE LABORATORIO

RESUMO - Três métodos (extração de ovos, contagem direta de ovos e emergência de lagartas recém--eclodidas) para determinar o potencial de infestação de Elasmopalpus lignosellus, Zeller 1848 foramtestados em laboratório. Para o método de extração de ovos a amostra de solo foi tratada com hipoclo-rito de sódio a 1%, sendo posteriormente lavada em peneiras de 10, 20 e 100 mesh. Os resíduos retira-dos na peneira de 100 mesh fóram tratados com uma solução saturada de sulfato de magnésio e deixa-dos decantar; o líquido sobrenadante contendo os ovos foi filtrado em um filtro de organdi, e os ovosforam contados com o auxflio de uma lupa binocular. No método de contagem direta de ovos no solofoi utilizada uma lupa binocular, e, no método de emergência de lagartas utilizaram-se folhas de milhopara atrair lagartas recém-eclodidas, e efetuou-se a contagem destas. Os resultados indicaram que emcondições de laboratório o método de contagem direta de ovos é mais eficiente do que o método deextração de ovos; nas outras comparações, os métodos não foram estatisticamente diferentes. Utilizan-do o método de extração de ovos observou-se que os ovos postos pela lagarta diretamente no solo nãosão removidos com a mesma eficiência que os ovos misturados manualmente no solo.

ADEQUATlON OF METHODS TO ESTIMATE ELASMOPALPUSLlGNOSELLUS POPULATlONS IN THE LABORATORY

ABSTRACT - Three methods (egg flotation, direct counting of eggs and the newly hatched larvae) ofestimating Elasmopalpus lignosellus Zeller 1848 infestation potential were tested in laboratory. Theegg flotation method consisted of treating soil samples with a 1,0% sodium hypochlorite solution, rin-sing with water through a series of sieves (10, 20 and 100 meshl, The residue above the 100 meshsieve was treated with a saturated magnesium sulfate solution and left to rest for decantation. The li-quid phase containingthe eggs was passed through a nvlon organdy filter and the eggs were countedwith a binocular microscope. The eggs in the soil samples were counted directlv without anv soil pre-paration in the direct counting method. Corn leaves were used to attract newlv hatcned larvae whicliwere counted in the newlv hatched larvae method. The results indicated that in laboratory conditionsthe direct counting of eggs was statistically more efficient than the egg flotation method whereas theother comparisons were not significantly different. The eggs laid by the moth directlv in the soll werenot extracted with the same efficiency as eggs placed and mixed in the soil by hand in the egg flota-tion method.

INTRODUÇÃO

A lagarta-elasmo, Elasmopalpus lignosellusZeIler 1848 (Lepidoptera: Pyralidae) é uma espé-cie' polífaga e seus hospedeiros foram reportadospor Stone (1968) como sendo mais de 62 espéciesde plantas.

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Eng. - Agr., Ph.D., Centro Nacional de Pesquisa deMilhoeSorgo (CNPMS)/EMBRAPA,CaixaPostaI151,CEP 35700 Sete Lagoas, MG.Eng~-Agr~, Estagiária do PIEP, Centro Nacional dePesquisa de Milho e Sorgo (CNPMS) - EMBRAPA.

o dano causado por este inseto ocorre quandolagartas atacam plântulas logo abaixo do nível dosolo, perfurando uma galeria ascendente e descen-dente; causando murcha das folhas centrais, sobre-vindo, posteriormente, na maioria dos casos, amorte da planta. "-

Dentre os métodos de controle indicados paraeste inseto, o que mais se tem destacado é o quími-co, embora muitos pesquisadores (Arthur & Arant1956, Reynolds et al. 1957, Harding 1960,Chal-fant 1976) tenham enfatizado que a lagarta-elasmoé de difícil controle com inseticidas, por causa doseu hábito semisubterrâneo. Conseqüentemente, ocontrole tem sido recomendado preventivamente.

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No ataque inicial às plantas. lagartas até o se-gundo ínstar alimentam-se na epiderme de umafa-ce e no mesófilo das folhas, deixando a epidermeda outra face intacta (Luginbill & Ainslie 1917).Dupree (1965) demonstrou que lagartas até o ter-ceiro ínstar não atacaram a haste de ervilha, ocor-rendo o ataque somente após este ínstar larval.

A viabilização de um método eficaz para esti-mar a população de Elasmopalpus lignosellus seriavalioso para eliminar o controle químico preventi-vo deste inseto. Infelizmente são escassas as pes-quisas que procuram desenvolver um método quepermita estimar o seu potencial de infestação, prin-cipalmente porque a totalidade dos ovos do insetosão por ele postos isoladamente no solo, e lagartasrecém-eclodidas são difíceis de ser observadas. Osúnicos trabalhos, para conhecimento, são descritospor Smith et alo (1981) e Viana (1981) os quaisutilizaram diferentes metodologias para estimar apopulação de ovos do inseto presente no solo e/oude lagartas recérn-eclodidas (Viana 1981). O objeti-vo deste trabalho foi comparar em laboratório, aeficiência dos métodos desenvolvidos por Smith etal. (1981) e Viana (1981) para estimar a populaçãode Elasmopalpus lignosellus.

MATERIAIS E MÉTODOS

Colocaram-se dentro de uma caixa de acnlico(75,0 x 65,0 x 55,0 em) 30 vasos (13,3 x 8,0 em)com uma plântula de milho no estádio de duas fo-lhas para servir como substrato de ovoposição paramariposas de Elasmopalpus lignosellus. Os vasosforam distribuídos no interior de caixa em três tra-tamentos (métodos de levantamento populacio-nal), utilizando-se o delineamento de blocos aoacaso, com dez repetições. Nas laterais da caixa deacnlíco, foram abertos dois orifícios com 5,6 emde diâmetro na parte média de cada lado e sendoos mesmos telados. Isto facilitou a aeração e evitouescape das mariposas de dentro da caixa. Alimentopara adultos foi fornecido por conta-gotas inseri-dos nas paredes laterais da caixa. Sessenta maripo-sas (30« : 306) recém-emergidas, foram libertadasno interior da caixa. Após o quinto dia em que os30 vasos se encontravam no interior da caixa, estesforam substituídos por outros 30 vasos, e, após

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três dias, estes foram substituídos por outros 30,perfazendo no total 90 vasos, que foram considera-dos no total para efeito de análise estatística.

Três métodos foram utilizados para levanta-mento populacional de Elasmopalpus lignosellusem laboratório:

a) Método de extração de ovos (Smith et alo 1981)

Colocaram-se aproximadamente 2,0 cm da ca-mada superior do solo de cada vaso em um erlen-meyer (250 rnl), adicionando-se 100 ml de soluçãode hipoc1orito de sódio a 1,0%, levando-se a umagitador por dez minutos para dissociar os ovos dosolo. Em seguida, as amostras foram lavadas emuma bateria de peneiras (10, 20 e 100 mesh) pararemover o excesso de partículas. Utilizando-se umbecker, o resíduo na peneira de 100 mesh, foi mis-turado em uma solução saturada de sulfato demagnésio, deixando-se o resíduo decantar poraproximadamente uma hora. O líquido sobrena-dante que se encontrava no copo, foi retirado atra-vés de uma sonda de borracha com um tubo de vi-dro adaptado em sua extremidade, sendo a sucçãoefetuada por uma bomba elétrica. O líquido retira-do pela sonda foi passado em um filtro de organdiinstalado em um aro de 13 em de diâmetro, adap-tado a uma placa-de-petri para observação na lupa.Os ovos coletados no filtro de organdi foram sepa-rados e contados em uma lupa binocular ZeissMod. Standart JRKF.

b] Método de contagem direta de ovos (Viana1981)

Com o auxilio de uma lupa manual (8X) fo-ram contados os ovos postos pelas mariposas nosolo dos vasos retirados de dentro da caixa de acrí-lico. Em seguida, colocou-se uma camada de, apro-ximadamente, 2,0 em da parte superior do solo emuma placa-de-petri, e, com o auxflio de uma lupabinocular Zeiss Mod. Standart JRKF, fez-se a se-paração e contagem de ovos não identificados.

c) Emergência de lagartas (Viana 1981)

Nos vasos retirados da caixa de acnlico, elimi-naram-se as plantas de milho, passando-se poste-

riormente uma camada de vaselina nos bordos su-periores dos vasos para evitar escape de lagartas.Foram colocadas diariamente partes de folhas demilho nos vasos, objetivando atrair lagartas recém--eclodidas para as mesmas. A contagem de lagartasnas folhas de milho era efetuada diariamente, so-mando-se a estas as lagartas aderidas nos bordosdos vasos. Estas lagartas eram eliminadas junta-mente com as folhas de milho colocadas nos vasosno dia anterior. Utilizou-se este método até 12<.>dia após a retirada dos vasos da caixa de acnlico,

Paralelamente ao experimento, objetivandodeterminar a eficiência dos métodos testados, colo-cou-se uma quantidade conhecida de ovos (dez)em um volume de 56,09cm3 de solo, executando-se os métodos descritos anteriormente. Em todosos métodos utilizados, o técnico de laboratóriodesconhecia a quantidade de ovos colocados nosolo, evitando tendências e excessivo gasto de tem-po na procura dos ovos e/ou lagartas recérn-eclodi-das.

Para fins de análise estatística, os dados foramtransformados em ..J x + 1, e para apresentação emtabela utilizaram-se dados não transformados.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados da eficiência de três métodos pa-ra determinação do potencial de infestação deElasmopalpus lignosellus, em condições de labora-tório, estão apresentados na Tabela 1.

No teste em que a postura do inseto foi direta-mente no solo (número de. ovos desconhecido),constatou-se, estatisticamente, maior eficiência dométodo utilizando contagem direta de ovos, doque no método utilizando extração de ovos; po-rém, este não foi estatisticamente diferente do mé-todo de emergência de lagartas. A menor eficiênciafoi encontrada para o método utilizando extraçãode ovos, o qual não diferenciou estatisticamentedo método de emergência de lagartas. Smith et al.(1981), utilizando o método da extração de ovos,encontrou uma alta eficiência (90%) em removerovos de Elasmopalpus lignosellus de solo arenoso.A alta eficiência encontrada por estes autores pos-sivelmente pode ser explicado pelo fato de os ovosterem sido coletados e posteriormente misturadosmanualmente no solo. Ovos postos pela mariposasão envoltos por uma substância pegajosa que osfaz aderir às partículas do solo, dificultando a suaseparação.

No teste em que os ovos foram retirados dosubstrato de ovoposição em laboratório (papeltoalha) e misturados manualmente ao solo, não severificou diferença estatística entre a eficiênciados métodos considerados. Isto é um indicativo daimportância da metodologia utilizada para o méto-do de extração de ovos, em que, se não há aderên-cia dos ovos às partículas do solo, sua eficiênciacompara-se aos outros métodos. Também, a efi-ciência encontrada para o teste em que os ovos fo-ram misturados com o solo (amostra com númerode ovos conhecido) está aquém daquela encontra-da por Smith et al. (1981), o que leva a crer que

TABELA 1. Eficiência de três métodos para determinação do potencial de infestação de Elasmopalpus Iiçnosettus emmilho, em condições de laborat6rio.

Amostra com númerode ovos desconhecido

Amostra com númerode ovos conhecido

Método Número de ovose/ou lagartas!

(m ± s]

Tempo médiogasto no

método (rnin]Número de ovos

e/ou lagartas!(m ± s)

Contagem direta de ovosEmergência de lagartasExtração de ovos

8,60 ± 7,31 a6,50 ± 5;87 ab1,70±1,25b

4,00 ± 2,40 a5,30 ± 1,89 a5,20 ± 2,57 a

655686

Médias seguidas da mesma letra não diferem significativamente pelo teste de Duncan a 5%.

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a diferença na facilidade de desagregação do solopoderá ser importante parâmetro para a eficáciado método que usa a extração de ovos amostra-dos.

O tempo médio gasto para cada método testa-do em laboratório (Tabela 1), considerado paraamostras com ovoposição direta no solo (amostracom número de ovos desconhecido) e ovos mistu-rados manualmente no solo (amostra com númerode ovos conhecido) mostra que o método de emer-gência de lagartas consumiu menos tempo em la-boratório e foi o menos exaustivo, seguido pelosmétodos de contagem direta e extração de ovos.

A Tabela 1 mostra maior variabilidade para aamostra com número de ovos desconhecido do quepara a amostra com número de ovos conhecido. Aamostra .com número de ovos desconhecido foi su-jeita a livre escolha para ovoposição do inseto, e amaior variabilidade é explicada pela diferença emfecundidade intrínseca a cada mariposa. A ovipo-sição pode variar de algumas unidades até aproxi-madamente 120 ovos por fêmea, dependendo defatores genéticos e nutrição.

Em termos de praticabilidade e de potenciali-dade da utilização dos métodos testados paraamostragem no campo, o método de contagem di-reta de ovos se torna praticamente inviável, umavez que essas amostras envolveriam relativamentegrande volume de solo e a contagem de ovos seriaseriamente dificultada. A maior perspectiva para ométodo seria como suporte para pesquisa desenvol-vida em laboratório e em casa de vegetação, querequer maior índice de precisão.

Em condições de campo, o método de emer-gência de lagartas apresentaria vantagens sobre ométodo de extração de ovos no sentido de que esteindependeria da desagregação do selo e da aderên-cia de ovos às partículas do solo. E, ainda, apresen-ta a vantagem de ser mais realístico sobre a estima-tiva do potencial de infestação de lagartas que osoutros métodos, dada a possibilidade de ocorrênciade ovos não férteis e de ovos parasitados, que evi-dentemente influirá na emergência de lagartas. Nosmétodos de extração de ovos e contagem direta deovos, os ovos não férteis e os parasita dos não se-riam distinguidos dos ovos férteis e dos não parasi-tados. No método de emergência de lagartas, amos-tras de solo seriam coletadas no campo, sendo co-

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locadas em placas-de-petri (20,0 em de diâmetro),empregando-se a metodologia descrita anterior-mente.

CONCLUSÕES

1. Em condições de laboratório, o método decontagem direta dos ovos é mais eficiente do que ométodo de extração de ovos.

2. O método de emergência de lagartas apre-senta a mesma eficiência que os métodos de conta-gem direta de ovos e extração de ovos.

REFER~NCIAS

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