Actualizacion diagnostico distemper canino 2012

Diagnóstico del Distemper Canino

Claudia López A., M.V., M.ScAlejandro Flores A., T.M

SIMPOSIO DE ACTUALIZACION EN DISTEMPER 2012

• CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS DE LA ENFERMEDAD Y RESPUESTA INMUNE

• CARACTERÍSTICAS DEL AGENTE

• DIAGNÓSTICO:• EXAMEN CLÍNICO• EXÁMENES DE LABORATORIO


Enfermedad viral altamente contagiosa, producida por un Morbillivirus de la familia Paramyxoviridae, pantrópico, que genera por lo usual un cuadro neumoentérico y nervioso.

VIRUS

Tej linfoide focal

Tej linfoide sistémico (Desarrollo R.I)

Tractos respiratorio, alimentario, urogenital

(Signos clínicos)

Encefalitis

Recuperación Muerte

0

1 semana

1-2 semanas

2-3 semanas

2-12 semanas

Viremia

Viremia


Exámenes de Laboratorio

1. HEMATOLOGÍA Y BIOQUÍMICA SANGUÍNEA

INESPECÍFICOS ¡¡¡¡ Sólo tienen valor para el monitoreo y el pronóstico de la enfermedad.

• Anemia normocítica –normocrómica, regenerativa

• La linfopenia absoluta x necrosis del tejido linfoide.

• Trombocitopenia moderada

Monocitosis relativa o absoluta es el cambio más constante en el leucograma .


FORMAS DE PRESENTACIÓN

• AGUDA

P.I: 7-14 días

Entre los 3-7 primeros días fiebre + leucopenia

Segunda fase febril va acompañada de rinitis, conjuntivitis, anorexia y cuadro neumoentérico agravado si hay infección secundaria


• SUBAGUDA

Encefalomielitis

• CRÓNICA

Encefalomielitis mulfifocalEncefalitis crónica del perro viejo


Características del agente

H y N: Adhesión

F: Fusión de membranas

IgG

IgM

La eliminación del virus depende de la capacidad del SI (Ig) para reconocer las proteínas de la envoltura viral, especialmente H y N


Diagnóstico

• HISTORIA CLÍNICA

• EXAMEN FÍSICO

EXÁMENES DE LABORATORIO‘ Todos los métodos usados pueden dar falsos negativos ‘


• Leucocitosis neutrófila con o sin desviación a la izquierda, en cuadros con infección bacteriana secundaria.

• Proteínas totales normales. Pueden aumentar en cuadros que cursan con deshidratación (↑ albúminas)

• Las globulinas suelen estar aumentadas en pacientes inmunocompetentes.


2.- DETECCIÓN DE ANTÍGENO VIRAL

Las partículas virales (antígenos) se pueden encontrar en los leucocitos, eritrocitos y células epiteliales tempranamente en el curso de la infección, a menudo antes de la aparición de los signos clínicos.

Luego de la aparición de estos signos, el antígeno CDV puede desaparecer de la sangre, conjuntiva y epitelio genital antes de una semana


La detección de antígenos virales de Distemper (acúmulos de cápsides intracitoplasmáticas) puede realizarse mediante métodos serológicos o citológicos

INMUNOCROMATOGRAFIA



MICROSCOPÍA DE CUERPOS DE INCLUSIÓN CDV EN CÉLULAS SANGUÍNEAS Y CONJUNTIVALES



2.- SEROLOGÍA

De todos los métodos diagnósticos para Distemper, el serodiagnóstico es el más utilizado.

Si bien las pruebas son confiables EL PROBLEMA SE PRODUCE AL INTERPRETAR LOS RESULTADOS


La IgM puede ser detectada en perros infectados no vacunados, entre los 6 y 8 días post infección. La IgG aparece entre los 10 y 20 días. la IgM en perros infectados persiste por 5 semanas a 3 meses dependiendo de la cepa y la respuesta del huésped. En perros vacunados la IgM persiste por aprox. 3 semanas.

La IgG se produce en forma local en SNC en perros con encefalitis

Ningún examen serológico en la actualidad permite discernir entre los anticuerpos maternales, vaccinales y por infección


0 5 10 150

80

160

240

320

400

480

560

640

720

Niveles de anticuerpos anti-CDV post vacunación (Warner T. et al)

Ac IgG MATERNOS

Ac IgG

Ac IgM

Días post vacunación

Títulos aproximados (1:)


INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA


[Ac]

Ag- CDV purificado

Control positivo Formación del complejo [Ag CDV]-[Ac CDV]

FA

Conjugado marcado anti IgM ó IgG canino

FA

Unión del conjugado anti IgM ó IgG canino

FAReacción enzimática de color

ELISA EN FASE SÓLIDA (INMUNOCOMB)



La reacción coloreada positiva en la fase sólida puede cuantificarse, comparando la intensidad del color de la reacción en una escala cromática incluida en el kit (Comb Scale) e interpolando en el gráfico adjunto para estimar los títulos de anticuerpos anti-CDV.


Escala de valor Resultado ¿Previamente

Vacunado? Interpretación

0 Negativo Sí o No No hubo respuesta humoral (anticuerpos). Puede indicar estado agudo de la infección. Retestear en 10-14 días, si el perro sobrevive.

1-2 Levemente positivo

Sí No

Titulo de anticuerpos no protector; retestear en 10-14 días. Poca respuesta humoral a la infección o vacunación. Puede perdurar el título en perros maduros.

Poca respuesta humoral a la infección o puede haber anticuerpos maternales en cachorros de no mas de 4 meses.

3-4 o Mayor Medio-alto positivo

Sí

No

Protector – alto titulo protector de anticuerpos.

Respuesta a la vacunación o infección.

Respuesta a la infección.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

IgG (+) en FCE permite establecer un diagnóstico definitivo los Ac. se producen in situ


3.- DIAGNÓSTICO MOLECULAR

Reación de la Polimerasa en Cadena por transcripción reversa (RT-PCR) método diagnóstico antemortem, altamente sensible y específico, temprano y seguro

Utiliza muestras de sangre, suero y fluido cerebroespinal, independiente de los hallazgos clínicos, histopatológicos; de los títulos de anticuerpos y de la distribución del antígeno viral, en casos agudos y crónicos.SIM

POSIO DE ACTUALIZACION EN DISTEMPER 2012

Generalmente se amplifican fragmentos del gen que codifica la nucleoproteina (NP), una región conservada dentro del genoma viral.


MUESTRA: SANGRE CON EDTA > 0,7 mL


ELECTROFORESIS EN GEL DE AGAROSA (CDV 287 pb)


En animales enfermos, CDV se excreta por la orina hasta por 50 días post-infección


Toma de muestra para PCR según los síntomas.

Síntomas Muestra a analizar

Fiebre (Viremia) Sangre (EDTA) o Suero

Conjuntivitis Hisopado o escobillado conjuntival

Rinitis con catarro Escobillado nasal

Problemas neurológicos LCR

Problemas digestivos Heces

Traqueo bronquitis, tos, bronconeumopatía Secreciones respiratorias



4.- INMUNOHISTOQUÍMICA

Técnica que se aplica en tejidos. Se basa en la detección del antígeno viral mediante un sistema especializado de inmunocomplejos


Técnica de InmunohistoquímicaAc. Primario Anti CDV Ac. Secundario

Biotinilado

Complejo Streptavidina-Peroxidasa

Diaminobenzidina


MUESTRAS LABORATORIO DE PATOLOGÍA

• PULMÓN• HÍGADO• LINFONÓDULOS• CEREBRO• VEJIGA• BAZO• PIEL• INTESTINO

Encefalitis desmielinizante no supurativa

Cuerpos de Inclusión intracitoplasmáticos o intranucleares eosinofílicos


DISTEMPERSIMPOSIO DE ACTUALIZACION EN DISTEMPER 2012


Diagnóstico del Distemper Canino

Claudia López A., M.V., M.ScAlejandro Flores A., T.M


Actualizacion diagnostico distemper canino 2012

Lifestyle

Transcript of Actualizacion diagnostico distemper canino 2012