À PROPOS DE DEUX OBSERVATIONS D'HELMINTHOSES HÉPATIQUES SUR DES MARMOTTES, MARMOTA MONAX,

INFECTÉES PAR LE VIRUS DE L'HÉPATITE VIRALE (WHV)G EVREY J .* , BEU G N ET F.* & JAM ARD C .**

Summary : No tes on tw o hepatic helminthosis o f Marm o ttaMONAX INFECTED BY THE WOODCHUCK HEPATITIS VIRUS

Autopsy of two Woodchuck Hepatitis Virus (WHV) infected Woodchucks, Marmota monax, revealed the presence of two parasites in an hepatic localization, Taenia mustelae (Larvae) and Calodium hepaticum. The authors present the identification of the two parasites, based on the observation of cysticerci of Taenia mustelae, or on the observation of the eggs of C.hepaticum. They discuss the probable interaction between hepatic parasites and W H V infection.

KEY WORDS : Marmota monax, viral hepatitis, Taenia mustelae, Calodium hepaticum.

R é su m é :

Deux autopsies de marmottes américaines, Marmota monax, servant de modèle expérimental d'hépatite virale, ont permis l'identification de deux parasites à localisation hépatique, Taenia mustelae (larvae) (Cestoda : Taeniidae), et Calodium hepaticum (Nematoda : Enoplida : CapillarUnae). Les auteurs présentent l'identification de ces parasites, basée sur l'observation des cysticerques dans le cas de Taenia mustelae, et sur celle des œufs dans le cas de l'infestation par C . hepaticum. Le problème de l'inter-action possible entre l 'infestation parasitaire à localisation hépatique et l'infection virale par le Woodchuck Hepatitis Virus reste posé.

MOTS CLÉS : Marmota monax, hépatite virale, Taenia mustelae, Calodium hepaticum.

IN TR O D U C TIO N

La marmotte américaine, M arm ota m onax, est uti­lisée comme modèle animal d’hépatite virale. Elle est en effet réceptive au virus WHV (W ood­

chuck Hepatitis virus), alors que la marmotte euro­péenne, M arm ota m arm ota , présente en France, ne l’est pas. A ce titre, des marmottes, séropositives ou séronégatives, sont importées à l’École Nationale Vété­rinaire de Lyon, Unité Associée INSERM U-271. Elles proviennent du Northeastern Wildlife, une société spé­cialisée dans la commercialisation des marmottes (Nor­theastern Wildlife. PO Box 1000. South Plymouth, NY 13844).Lors de l’autopsie de deux marmottes infectées par le WHV, des lésions parasitaires ont été notées. Les para­sites identifiés sont C alod iu m h ep a ticu m (syn. Capil- la r ia h ep a tica ) et la larve d e T aen ia m ustelae. Ces observations indiquent que les animaux proviennent de captures dans le milieu sauvage, et posent le pro­blèm e de la spécificité des lésions hépatiques obser­vées.

* Unité d'Écologie Microbienne et Parasitaire, Département de Santé Publique Vétérinaire, École Nationale Vétérinaire de Lyon, 1, Av. Bourgelat, BP 83, Marcy-L’Étoile, F-69280.** INSERM U-271, École Nationale Vétérinaire de Lyon, 1, Av. Bour­gelat, BP 83, Marcy-L’Étoile, F-69280.

MATÉRIELS ET MÉTHODES

D eux marmottes infectées par le WHV sont a u to p s ié e s , la p re m iè re est m orte en décem bre 1994, du fait de l’infection virale

ayant induit un hépatocarcinome, la seconde a été euthanasiée en octobre 1995.Les viscères sont observés macroscopiquement. Les foies sont incisés, des fragments de 3 mm3 sont écrasés et dilacérés dans du chloral-lactophénol, puis observés à la loupe binoculaire, en vue de rechercher la pré­sence de parasites, et particulièrement de C alod iu m hepaticum .Des prélèvements de foie et de rein de 0,5 cm3 sont fixés dans le formol commercial dilué à 10 % en vue de la réalisation de coupes histologiques. Une colora­tion Hémalun-Éosine est effectuée.

RÉSULTATSM a r m o tte n ° 1 ( d é c e m b r e 1 9 9 4 )

Le foie présente un aspect et une consistance nor­maux. Une dizaine de « nodules » blanchâtres de

1 à 3 mm de diamètre sont observés en super­ficie et au sein du parenchyme hépatique. Ils sont formés d’une adventice renfermant une vésicule de 1,7 à 2 mm de diamètre. L’observation de cette vésicule indique qu’il s’agit d’un cysticerque : larve vésiculaire possédant une seule invagination céphalique. La dila­

Parasite, 1996, 3, 175-178Note de recherche 175

Article available at http://www.parasite-journal.org or http://dx.doi.org/10.1051/parasite/1996032175

GKVKKYJ.. RKUGNET F. & JAMAR1 ) C.

cération d’un cysticerque permet d’en effectuer la men­suration : le scolex est armé, muni d’un rostre d’environ 250 pm de diamètre. Ce rostre est constitué de deux couronnes concentriques de crochets de petite dimen­sion, en forme de poignards, 27 crochets pour la grande couronne, 23 pour la petite (photo 1). Ils mesurent 18 à 20 pm de longueur pour ceux de la petite couronne, contre 20 à 22 pour ceux de la grande couronne. Ils ont un manche et une lame de tailles égales et une garde très épaisse. Des cysticerques sont également retrouvés dans les reins de ces marmottes. La taille des cysticerques et la morphologie des cro­chets est caractéristique de la larve de T aen ia m ustelae (Abuladze, 1970).L’examen histologique permet l’observation d’un paren­chyme hépatique normal et de coupes de cysticerques (photo 2). Les corpuscules calcaires, caractéristiques des cestodes, sont nettement visibles au sein des cys­ticerques après coloration. Dans les coupes histolo- giques, ils apparaissent sous forme de granules colorés en noir. L’épaisseur de la réaction conjonctive d’enkys- tement formant l’adventice doit être notée. La péri­phérie de l’adventice est formée par un infiltrat riche en plasmocytes et en polynucléaires éosinophiles.

M a r m o t t e n ° 2 ( o c t o b r e 1 9 9 5 )

Le foie est décoloré et présente une consistance très ramollie. La dilacération, l’éclaircissement, puis l’obser­vation du parenchyme mettent en évidence l’envahis­sement du tissu par des œufs de capillaires. Les néma- todes ne peuvent être individualisés du parenchyme. Les œufs ont une coque striée, épaisse, et claire. Ils présentent à chaque extrémité un bouchon polaire aplati. Ils mesurent 48,4-55,8 x 29,2-31 pm (photo 3). La localisation hépatique et l’aspect des œufs est carac­téristique d’une infestation par C alod iu m h ep a ticu m (Bancroft, 1893; Gevrey et Chirol, 1978; Singleton et al., 1991).L’exam en histologique montre la présence de nom­breux œ ufs de C alod iu m h ep a ticu m au sein d’un parenchyme hépatique altéré (photo 4). Ce dernier est en partie lysé. Des zones riches en œufs alternent avec des plages de tissu sain, et des plages mal délimitées constituées d’hépatocytes ayant une disposition trabé- culaire ou tubuleuse. Ces derniers présentent une ani- socaryose, une anisocytose, et un nucléole volumineux. L’ensem ble est évocateur d’un adénocarcinome, viro- induit dans le cas présent. En ce qui concerne les capil­laires, seuls les œufs sont observés, les tissus et organes parasitaires, tels que les cordons génitaux, ont disparu.

DISCUSSION

Les parasites hépatiques de la marmotte ne sont pas fréquents (Anderson et al., 1990; Rausch, 1977; Roth

et al., 1991 ; Sabatier, 1989). Ils n’avaient pas encore été identifiés sur des marmottes importées et utilisées comme modèle de laboratoire.

La prévalence de l’infestation par T aen ia m ustelae, dont les hôtes définitifs sont divers Mustélidés, semble faible (Roth, King et Tennant, 1991). Roth, en 1991, a trouvé que 10 marmottes américaines séronégatives vis- à-vis du WHV sur 128 présentaient des granulomes hépatiques d’origine parasitaire (Roth, King et Tennant, 1991). Seuls trois ont été identifiés : un était dû à C alo­d iu m hepaticu m , un autre à T aen ia m ustelae, le der­nier à A ckertia m a rm o ta e ( N em atod a : F ila r io id ea ). Deux autres parasites peuvent être observés dans le foie de marmottes : T aen ia crassiceps et E ch in ococcu s m u ltilo cu la r is (Albert, Chapman et Pursley, 1981 ; Albert et al., 1972; Anderson et al., 1990; Fatzer, Hor- ning et Fankhauser, 1976 ; Logachev et Bat’kaev, 1979). T aen ia crassiceps est un parasite fréquent de la mar­motte, avec une prévalence moyenne de 2,6 à 7,3 % selon les auteurs, mais la localisation habituelle des cys­ticerques est sous-cutanée (Albert, Chapman et Pursley, 1981; Albert et a l., 1972; Anderson et al., 1990; Fatzer, Horning et Fankhauser, 1976). Les cysticerques peu­vent cependant avoir des localisations viscérales : intra- hép atiques (A nderson e t a l ., 1990), pulm onaires ( Anderson et al., 1990), ou nerveuses (Fatzer, Horning et Fankhauser, 1976). E ch in ococcu s m ultilocularis a été observé dans le foie de marmotte du Kazaksthan, M arm ota bobac , à 6 reprises au cours de 130 autop­sies (Logachev et Bat’kaev, 1979). La diagnose diffé­rentielle entre les larves de T aen ia m u stelae et d’E ch i­n o co ccu s m u ltilo cu laris repose essentiellem ent sur l’observation d'un cysticerque ou de vésicules conte­nant plusieurs protoscolex dans le cas de l’échino- coque. La diagnose ne doit pas uniquement reposer sur l’observation des crochets, lesquels sont de taille et d’aspect semblables chez ces deux parasites. L’exten­sion de l’échinococcose multiloculaire aux États-Unis (Hildreth, Jonhson et Kazacos, 1991), et la réceptivité probable de M arm ota m o n a x à ce cestode, nécessi­tent la recherche de ce parasite lors de la réalisation des autopsies.

C alod iu m h ep a ticu m est un parasite peu spécifique, de répartition cosmopolite (Gevrey et Chirol, 1978 ; Sin­gleton et al., 1991). La prévalence de l’infestation des marmottes par ce nématode n’est pas connue. Les marmottes parasitées s ’infestent en consommant les œufs présents dans le milieu extérieur. Ces derniers sont le plus souvent éliminés et dispersés, de façon passive, par les carnivores, tels les Mustélidés, qui ont consommé des rongeurs parasités. Par conséquent, ce parasitisme est uniquement observé chez des animaux sauvages capturés. C alod iu m h ep a ticu m est un para­site zoonosique, qui peut se localiser chez l’homme, comme chez ces hôtes habituels, dans le parenchyme

176 Note de r e c h e rche Parasite, 1996, 3, 175-178

H e lm jn th o se s h ép a tiq u es c h e z M ìrmota monâx

Photo 1 : Scolex de Taenia mustelae. Examen direct (obj. Photo 2 : Coupe d’un cysticerque de T. mustelae au sein du parenchyme hépa- x 10). tique. Coloration HE (obj. x 10).

Photo 3 : Œ uf de Calodium hepaticum Photo 4 : Coupe histologique du parenchyme hépatique. Œufs de Calodium hepaticum. Colo- (obj. x 40). ration HE (obj. x 40).

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GEVRJEY .T., BEUGNET F. & JAMARD C.

hépatique, jamais dans le tractus digestif. L’infestation se fait par consommation d’œufs embryonnés pré­sents dans le milieu extérieur. A l’instar des carnivores, sans héberger le parasite, la consommation de rongeurs parasités peut entraîner l’élimination d’œufs de C. b ep a- ticum dans les selles humaines. Ces derniers sont alors à distinguer d’autres œ ufs capillaires pouvant s’y trouver, notamment les œufs de E u coleu s a erop b ilu s (syn.C ap illa ria ae rop h ila ) (60-75 x 35-40 μ m) ou de C ap illa ria p h ilip p in en sis (40 x 20 μ m ).Ces parasitoses hépatiques, notamment la capillariose, induisent des lésions qu’il est nécessaire de connaître de façon à les distinguer, dans le cas des modèles expérimentaux d’hépatite virale, des lésions induites par le virus WHV.La question de l’inter-action entre les parasites à loca­lisation hépatique et l’infection par le WHV se pose, ce virus étant naturellement présent dans les popula­tions sauvages de marmottes. Les parasites pourraient favoriser l’installation du virus ou le passage d’un état de portage latent au déclenchem ent de l’hépatite. Inversement, les marmottes séropositives, développant ou non une hépatite viro-induite, pourraient être plus réceptives à l’infestation parasitaire que les marmottes séronégatives. Le recueil de données sur le parasitisme chez les marmottes, sauvages et utilisées en laboratoire, sera nécessaire pour pouvoir répondre à ces questions. Anderson, en 1991, n ’a pas mis en évidence d’inter­action entre l’infection par le WHV et l’infestation par T aen ia crassiceps, la prévalence de l’infestation para­sitaire n ’étant pas significativement différente entre les populations séronégatives et séropositives. De telles études méritent d’être conduites avec les parasites à localisation hépatique.

REMERCIEMENTS

Remerciements au Pr. J . Gastellu pour la réali­sation et l’interprétation des examens histolo- giques.

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