A mutagenezis célja, haszna
description
Transcript of A mutagenezis célja, haszna
A mutagenezis célja, hasznaA mutagenezis célja, haszna
Mutáció Az egyed megjelenése (fenotípusa) megváltozHAT
Ebből visszakövetkeztethetünk a mutációt szenvedett gén funkciójára
A TIP120 fehérje néhány jellemzőjeA TIP120 fehérje néhány jellemzője
1230 AS, szimpla polipeptid1230 AS, szimpla polipeptid
Affinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységévelAffinitást mutat a TBP-vel és az RNS Pol II Rpb5 alegységével
Az iniciációs komplex összeszerelődését serkentiAz iniciációs komplex összeszerelődését serkenti
A funkció betöltésében fontos a molekula N-terminális 1/3-aA funkció betöltésében fontos a molekula N-terminális 1/3-a
A TIP120 fehérjét kódoló gént kimutatták patkányban, A TIP120 fehérjét kódoló gént kimutatták patkányban, Coenorhabditisban, Drosophilában,Coenorhabditisban, Drosophilában, emberben, emberben, ArabidopsisbanArabidopsisban
I.I. A TIP120 fehérje A TIP120 fehérje szerepe a szerepe a
FehérjeszintézisbenFehérjeszintézisben
II.II. A TIP120 fehérje A TIP120 fehérje szerepe a szerepe a
fehérjedegradációs fehérjedegradációs folyamatokbanfolyamatokban
A génkifejeződésA génkifejeződés
Szakaszai Transzkripció = „átírás”
Transzláció = „fordítás”
DNS
Fehérje
mRNS
TFIIH
TFIIA
A transzkripciós iniciációs komplex A transzkripciós iniciációs komplex kialakulásakialakulása
TATA
TBP
POLIITFIIF
TFIIB
TIP120 TFIIE
Az ubiquitin-protein ligázokAz ubiquitin-protein ligázok
Fontos típusuk az SCF-komplex Fontos típusuk az SCF-komplex (ROC1-(ROC1-SSKP1-KP1-ccullin1/cdc53-ullin1/cdc53-FF box protein) box protein)
SCF targetjei különböző sejtciklus-kontroll és szignál-SCF targetjei különböző sejtciklus-kontroll és szignál-transzdukcióban fontos fehérjéktranszdukcióban fontos fehérjék
cul1rocSKP1
F
szubsztrát
E2Ub
Nd8
A CAND1 fehérje szerepe az SCF A CAND1 fehérje szerepe az SCF komplex működésébenkomplex működésében
Gátolja a cul1-SKP1 interakciótGátolja a cul1-SKP1 interakciót SKP1-cul1 komplexben nincs CAND1; SKP1-cul1 komplexben nincs CAND1;
CAND1-cul1 komplexben nincs SKP1CAND1-cul1 komplexben nincs SKP1 CAND1 kiütése RNS-CAND1 kiütése RNS-
interferenciával:SKP1-cul1 komplex interferenciával:SKP1-cul1 komplex mennyisége nőmennyisége nő
A CAND protein gátolja az A CAND protein gátolja az SCF komplex működésétSCF komplex működését
cul1
ROC
SKP1
CAND1
cul1 rocSKP1
F
szubsztrát
E2Ub
Nd8
Inszerciós mutagenezisInszerciós mutagenezis
Növényi gén
exon/intronpromóter 5' UTR 3' UTR
T-DNSLB RBT-DNS inszerció
Funkcióvesztéses mutációFunkcióvesztéses mutáció
A H911 vonalA H911 vonal
Columbia:normál
fenotípus
H911/4:törpe fenotípus
Növények magassága
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
cm
A normál növények átlagosmagassága
A törpe növények átlagosmagassága
T-DNS inszerció pozíciója a H911 T-DNS inszerció pozíciója a H911 vonalbanvonalban
Protein: feltételezett TBP kölcsönható fehérje (120 kD) (TBP Interacting Protein, TIP120)
T-DNS inszerció: 13. exon (3301bp)Gén: At2g02560
R L
2. Krom., BAC T8K22