目　次

はじめに. . . . . . . . . . . . . . . . . . .独立行政法人国立病院機構　北海道がんセンター臨床検査科病理主任　平　紀代美

Ⅰ ...Liquid-based.cytology（LBC）とは. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1Ⅱ ...体腔液検体処理方法. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1Ⅲ ...固定液の違いによる標本の違い（BD.サイトリッチ™.レッド保存液 or.BD.サイトリッチ™.ブルー保存液）. . . . . . . . . . . . . 2Ⅳ ...BD.サイトリッチ™.レッド保存液による thin-layer 標本の細胞所見の特徴. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4Ⅴ ...LBC 標本と conventional 標本による細胞診判定結果の差異. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5Ⅵ ...LBC 法採用の留意点. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5

あとがき. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .独立行政法人国立病院機構　北海道がんセンター臨床研究部長　山城　勝重

Plate 1 NORMAL/BENIGN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6Plate 2 NORMAL/BENIGN - Washing - . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7Plate 3 LUNG CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8Plate 4 LUNG CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9Plate 5 LUNG CANCER squamous cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10Plate 6 LUNG CAMCER small cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11Plate 7 LUNG CANCER pleomorphic carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12Plate 8 BREAST CANCER invasive ductal carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13Plate 9 BREAST CANCER invasive ductal carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14Plate 10 BREAST CANCER invasive lobular carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15Plate 11 BREAST CANCER mucinous carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16Plate 12 ESOPHAGEAL CANCER squamous cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17Plate 13 ESOPHAGEAL CANCER squamous cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18Plate 14 THYROID CANCER papillary carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19Plate 15 THYMIC CANCER squamous cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20Plate 16 MALIGNANT MESOTHELIOMA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21Plate 17 GASTRIC CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22Plate 18 GASTRIC CANCER signet ring cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23Plate 19 GASTRIC CANCER poorly differentiated adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24Plate 20 COLON CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25Plate 21 COLON CANCER adenocarcinoma (mucinous) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26Plate 22 PANCREATIC CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27Plate 23 PANCREATIC CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28Plate 24 PANCREATIC CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29Plate 25 GALL BLADDER CANCER adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30Plate 26 UTERINE CERVICAL CANCER squamous cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31Plate 27 UTERINE CERVICAL CANCER serous adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32Plate 28 UTERINE CORPUS CANCER endometrioid adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33Plate 29 UTERINE CORPUS CANCER clear cell adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34Plate 30 OVARIAN CANCER clear cell adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35Plate 31 FALLOPIAN TUBE CANCER serous adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36Plate 32 CARCINOMA OF THE PERITONEUM serous adenocarcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37Plate 33 URINARY BLADDER CANCER urothelial carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38Plate 34 URINARY BLADDER CANCER urothelial carcinoma (micropapillary variant) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39Plate 35 CARCINOMA OF THE KIDNY renal cell carcinoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40Plate 36 NON-EPITHELIAL TUMOR neuroblastoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41Plate 37 NON-EPITHELIAL TUMOR Ewing sarcoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42Plate 38 NON-EPITHELIAL TUMOR malignant rhabdoid tumor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43Plate 39 NON-EPITHELIAL TUMOR rhabdomyosarcoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44Plate 40 NON-EPITHELIAL TUMOR malignant melanoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45Plate 41 TUMOR OF HEMATOLYMPHOID SYSTEM acute myeloid leukemia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46Plate 42 TUMOR OF HEMATOLYMPHOID SYSTEM diffuse large B-cell lymphoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47

【症例 42例】

1

Ⅰ. Liquid-based cytology（LBC）とは

conventional 標本 引きガラス塗抹法の引き止まり位置の 4 か所に腫瘍細胞集塊がみられる

LBC 標本直径 13mm の塗抹範囲に多数の腫瘍細胞がみられる（腫瘍細胞集塊のみにポイントされており、散在性の腫瘍細胞はさらに多くみられている）

写真 1：腹水（PLATE.24 症例）

Ⅱ. 体腔液検体処理方法

ることがわかる。

　しかし、BD サイトリッチ ™ レッド保存液により固定さ

れた細胞は Giemsa 染色には適しておらず、lymphoma な

どの血液系疾患の腫瘍細胞の出現が予想される場合では、

conventional 法による Giemsa 染色標本と併用して診断する

ことが必要となる。

　Liquid-based cytology（LBC）とは、採取した細胞を一度、

液体（固定・保存液）中に浮遊させて均一化した状態からス

ライドガラスに塗抹する方法を総称している。LBC は効率よ

く細胞を収集することのできる方法であり、婦人科検体をは

じめ多くの検体に利用することが可能である。また、固定液

や塗抹原理などの違いにより幾つかの方法が開発されており、

米国の FDA の承認を得て広く使用されているものから本邦で

開発された方法などがあり、それぞれの特徴がみられる。

　BD 社には非婦人科検体用の方法として、婦人科検体を対

象とした BD シュアパス ™ 法と塗抹原理は同一であるが、異

なった固定液である BD サイトリッチ ™ 保存液を使用し thin-

layer 標本を作製する方法が用意されており、尿、腫瘍穿刺針

洗浄液、擦過ブラシ洗浄液、その他の液状検体に LBC 標本を

作製することができるようになっている。塗抹の原理は、細

胞とスライドガラスの荷電によるとされており、詳細は BD 社

の説明書を参照されたい。

　体腔液細胞診は古くから行われており、体腔穿刺液の他

に最近では術中採取の洗浄液としても多く提出されるように

なってきている。体腔液は蛋白濃度が高いため、尿検体と比

較するとアルコールによる湿性固定時の細胞脱落が少ないも

のの、出血性の検体が多いために多数の赤血球が腫瘍細胞

の収集の妨げとなることがしばしば経験される。この体腔液

に、優れた溶血能を有する BD サイトリッチ ™ レッド保存液

を用いて thin-layer 標本を作製することにより、効率が良く

かつ精度の高い診断が可能となる。写真 1は同一検体の LBC

標本と引きガラス法により塗抹された conventional 標本の

Papanicolaou 染色標本であり、それぞれに腫瘍細胞にマーク

されているが、LBC 標本では多くの腫瘍細胞が塗抹されてい

　LBC 法は効率よく細胞を収集することのできる方法ではあ

るが、検体処理の方法に、その効力を発揮できるか否かがか

かっている。特に出血性の検体が多い体腔液ではその処理方

法により収集される細胞数が極端に異なり、処理方法を誤る

と conventional 標本より少ない細胞しか塗抹されないという

事態も起こり得る。基本的には BD 社のマニュアルに準じるが、

ここでは、特に高度の出血性検体の処理法を紹介する。

○高度出血性検体の処理方法　=二重溶血法=　高度の出血性の検体は、沈渣に BD サイトリッチ ™ レッド

保存液を加えそのまま放置するとゲル化してしまうため、そ

の後に遠心操作をしても細胞は収集できない。これを避ける

ためには、１次の溶血操作をした後に直ちに遠心し、上清を

捨てて再び BD サイトリッチ ™ レッド保存液を加えて２次溶血

を行うことを我々は推奨する。この二重溶血法によりきれい

に溶血が完了し、多数の細胞が収集できる。その手順を図1に示す。 また高度出血性検体に限らず、体腔液検体は腫瘍細

胞の由来（原発巣）などの解析のために免疫染色などが必要

となることがあるため、《手順》6 .の残り検体の保存は後の検

索に有用である。

6

conventional LBC

1b. 核小体有する活動性中皮細胞集塊とその周囲にリンパ球、上部に macrophage を 2 個認める。 （Pap . × 40）

1e. 活動性中皮細胞（1b と同一検体）。細胞がやや収縮ぎみになるため、胞体が厚ぼったくなり集塊の細胞間隙が開いてみえる。 （Pap . × 40）

1c. リンパ球、好中球、好酸球、macrophage。好中球と好酸球の区別がむずかしい。 （Pap . × 40）

1f. リンパ球、好中球、好酸球、macrophage （1c と同一検体）。LBC 標本では好酸球の顆粒が黄緑色に染色されてくるため、好中球との機別が容易になる。 （Pap . × 40）

1a. 中皮細胞と macrophage　 上 , 下（左）： 2 個の中皮細胞の間にいわゆる “mesothelial

window” がみられる（矢印）。 （Pap . × 40）　 下（右）： 中皮細胞の胞体が強い好塩基性に染まっている。

（MGG × 40）

1d. 中皮細胞と macrophage（1a と同一検体）　 上： LBC 標本では胞体にやや重厚感がみられ、中央 3 個

の中皮細胞の辺縁に “bleb” がみられる。　 下： 2 個の中皮細胞の間に “mesothelial window” がみら

れる（矢印）。 （Pap . × 40）

Plate 1 NORMAL/BENIGN

16

conventional LBC

11a. 多染性（orange/brown 〜 green）に染まる多量の粘液の背景に集塊状と散在性の腫瘍細胞が観察される。

（Pap . × 10）

11d. LBC では上皮性の粘液は Light green に染色されることが多いが、本症例では強い Orange G 好性を示している。厚い粘液内に取り込まれている細胞は染色性が悪く観察しづらい。 （Pap . × 10）

11b. 多染性の粘液に絡まるように、胞体内に粘液を有している腫瘍細胞がみられる。 （Pap . × 40）

11e. LBC ではエタノール主体の固定液で固定されてから塗抹されるため、粘液も収縮気味となり厚ぼったくみられる。

（Pap . × 40）

11f. 乳頭状の集塊も少数だがみられる。 （Pap . × 40）11c. 背景と胞体内に PAS 染色で強い陽性を示す粘液がみられる。 （PAS × 40）

Plate 11 BREAST CANCER mucinous carcinoma　胸水（50 歳代：女性）

31

conventional LBC

26a. 上： spindle な 細 胞 が み ら れ る。体 腔 液 中 の 細 胞 はadenocarcinoma との鑑別が難しい場合が多く、本例のように spindle な細胞が出現することは少ない

（Plate12,13 参照）。　 　 下： 濃染核（indian ink 状）を有する spindle cell。 （Pap . × 40）

26b. 核、胞体共に類円形の細胞の小集塊もみられる。 （Pap . × 40）

26c. MGG 染色では胞体の形態の保存が悪く、spindle な細胞は確認できない。 （MGG × 40）

26d. LBC では胞体の形態の保存が良く、spindle な形態がより明瞭に観察できる。chromatin の染色性は conventional標本と差があまりみられない。 （Pap . × 40）

26e. 上：濃縮状 chromatin の腫瘍細胞集塊　 　 下： 多型性の大型の核と広い多綾形の胞体を有する腫瘍

細胞集塊がみられるが、胞体に明らかな角化傾向は認められない。 （Pap . × 40）

Plate 26 UTERINE CERVICAL CANCER squamous cell carcinoma　 開腹時腹腔洗浄液（50 歳代：女性）