6to. Sem-manual de Pract de an. Instrumental 2016-2017 c 1

7/25/2019 6to. Sem-manual de Pract de an. Instrumental 2016-2017 c 1

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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

2016-2017

Ciclo I

MANUAL DE PRCTICAS

DE LABORATORIO

ANALISIS INSTRUMENTAL

6to. Semestre


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Tabla de contenido

PORTADA1

PRESENTACION......................................................................................................................... 4

INTRODUCCION ........................................................................................................................ 5

REQUISITOS NORMATIVOS PARA LA EJECUCION DE LAS PRACTICAS ........................................... 6

INTENCIONALIDAD (OBJETIVO GENERAL) .................................................................................. 7

COMPETENCIAS ESPECIFICAS DE ASIGNATURA .......................................................................... 8

PRACTICA No. 1

EJERCICIOS PARA LA PREPARACIN DESOLUCIONES ESTANDARES Y DILUCIONES .................................................................... 9

PRACTICA No. 2USO DE LA BALANZAMEDICION DE VOLMENES CON PIPETAS AUTOMATICASY VOLUMETRICASEJERCICIO DE APLICACIN ESTADISTICA..10

PRACTICA No. 3METODOS INSTRUMENTALES DE ANALISIS

LA RADIACION ELECTROMAGNETICA EN EL ANALISISINSTRUMENTAL......................................................................................................................... 13

PRACTICA No. 4ESPECTRO DE ABSORCION PARA EL

ION PERMANGANATO (MnO4)............................................................................................. 14

TALLER No. 1.. 16

PRACTICA No. 5CURVA ESTANDAR DE CALIBRADO PARA ELION (MnO4)-A PARTIR DELPERMANGANATO DE POTASIO ............................................................................................ 17


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PRACTICA No. 6CURVA ESTANDAR DE CALIBRADO PARA EL ION (CrO4)=A PARTIR DEL CROMATO DE POTASIO ALCALINO....................................................... 20

PRACTICA No. 7

DETERMINACION CUANTITATIVA DE ION PERMANGANATOEN UNA SOLUCIN MUESTRA

DETERMINACION CUANTITATIVA DE ION CROMATOEN UNA SOLUCIN MUESTRA ............................................................................................. 22

PRACTICA No. 8CONTROL DE CALIDAD DE LA CURVA DECALIBRADO PARA EL ION CROMO (QC) ............................................................................. 26

PRACTICA No. 9VALIDACION DE METODOS DE ENSAYOREPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD ............................................................................ 28

TALLER No. 2............................................................................................................................... 30

PRACTICA No. 10DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DEVITAMINA B12 ........................................................................................................................... 31

PRACTICA No. 11 ADETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DEFLAVONOIDES (QUERCETINA) ............................................................................................ 33

PRACTICA No. 11 BDETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DEFLAVONOIDES (QUERCETINA) ............................................................................................ 35

BIBLIOGRAFIA ........................................................................................................................... 38


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PRESENTACION

La asignatura de Anlisis Instrumental comprende las generalidades de los mtodos

instrumentales de anlisis, estudio de la Radiacin electromagntica,

Espectrofotometra de absorcin de radiacin UV, VIS, IR, espectrofotometra de

Emisin de radiacin.

El Anlisis Instrumental tiene su aplicacin directa en la planificacin industrial, en el

anlisis y control de los Procesos de fabricacin y dems. Estos Mtodos de Anlisisse consideran como elementos o conjunto de elementos que abarcan procesos

anlogos a las diversas industrias qumicas y otros en general.


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INTRODUCCION

Las caractersticas generales de la qumica analtica, fueron establecidas a mediados

del siglo 20. Los mtodos gravimtricos eran preferidos, por lo general, a los

volumtricos y el empleo del soplete era comn en los laboratorios, autores comoHeinrich Rose1795-1864y Karl Fresenius 1818 -1897, publicaron influyentes obras

durante estos aos que establecieron las caractersticas generales de la disciplina, el

cual cre un importante laboratorio dedicado a la enseanza de la qumica analtica y

a la realizacin de anlisis qumicos para diversas instituciones estatales e industrias

qumicas.

El desarrollo de los mtodos instrumentales de anlisis qumico se produjo en el ltimo

cuarto del siglo 19, gracias al establecimiento de una serie de correlaciones entre las

propiedades fsicas y la composicin qumica. Los trabajos de Robert Bunsen y Gustav

Kirchhoff establecieron las bases de la espectroscopia e hicieron posible el

descubrimiento de numerosos elementos. Nuevos instrumentos pticos como el

colormetro y el polarmetro simplificaron e hicieron mucho ms rpido una gran

cantidad de anlisis de importancia industrial.

Las leyes electroqumicas establecidas por Michael Faraday 1791-1867 y los

medicamentos se basan en las investigaciones de autores como Oliver Wolcott Gibbs

1822-1908, y la creacin de laboratorios de investigacin como el de Alexander

Classen 1843-1934 que permitieron que las tcnicas de anlisis electroqumico ganen

importancia en los ltimos aos del siglo 19.

Otra de las tcnicas importantes que iniciaron su andadura en esos primeros aos del

siglo 20 fue la cromatografa que desarrollo enormemente en las dcadas posteriores.

El siglo 20 estuvo tambin caracterizado por la llegada de nuevos instrumentos como

el medidor de pH y el gran desarrollo de los mtodos espectroscpicos,

particularmente la espectroscopia infrarroja y la resonancia magntica nuclear, quetuvieron una gran aplicacin en muchas reas de la qumica especialmente en los

mtodos que emplea el anlisis qumico analtico.

Por lo tanto, la qumica analtica e instrumental moderna, trata de los mtodos para

determinar la composicin qumica de muestras de materia. Un mtodo qumico

cualitativo, proporciona informacin relacionada con la identidad de la especie

atmica, molecular o de los grupos funcionales que se encuentran presentes en la

muestra. En cambio un mtodo qumico cuantitativo proporciona informacin

numrica, como la cantidad relativa de uno o ms componentes. Este propsito se


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lleva a cabo mediante la utilizacin de instrumentos pticos, electrnicos y

computarizados que constituyen el anlisis instrumental moderno.

REQUISITOS NORMATIVOS PARA LA EJECUCION DE LAS PRCTICAS

1. Las prcticas de laboratorio se efectuaran segn horario establecido paralas mismas, fuera del cual ningn estudiante podr hacer uso del laboratoriosin permiso del profesor, por consiguiente la practica correspondientedeber realizarla en el grupo asignado.

2. No se permitir realizar la prctica al estudiante que llegue una vez iniciadala sesin de trabajo.

3. Dada la naturaleza de los materiales y aparatos que se usan en ellaboratorio se recomienda al estudiante el uso de mandil y de guantes, quedeber traerlos al momento de ingresar al laboratorio. El estudiante serresponsable del material y del equipo que vaya a emplear, por lo tantocualquier material daado o roto, ser repuesto por el estudiante.

4. La duracin de la prctica depender de las caractersticas de la misma.5. El Manual de prcticas ser enviado al correo electrnico del estudiante, el

mismo que deber imprimir y traer al laboratorio en cada sesin de trabajo.6. Durante la prctica el profesor aclarar dudas a los estudiantes y adems

ampliar la informacin de la misma, si todava no se logra el entendimientocompleto, al final de la experiencia el profesor dar o brindar mselementos de juicio.El objetivo es que el experimento se haga con el mayor rendimientodidctico, a fin de que el estudiante obtenga de toda sesin de laboratorioun aprendizaje que justifique la inversin del tiempo que exige cadapractica.

7. El estudiante tomara conciencia de que en toda practica existe una mayor o

menor posibilidad de no llegar a resultados exactos, el objetivo principal deuna prctica no es determinar con precisin absoluta ciertas propiedades deun sistema, sino de adquirir un conocimiento solido sobre el procedimientodel trabajo a seguir en la determinacin, esto no autoriza al estudiante parano trabajar cuidadosamente. Se le pide honestidad en el trabajo, ya quesolo la continua ejecucin de prcticas con esta actitud le dar unaexperiencia aceptable.

8. Es obligacin del estudiante hacer un reporte de la prctica de laboratorioque se ha realizado, dicho informe ser solicitado por el profesor al inicio

de la clase siguiente. Las normas o requerimientos del reporte sern de


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absoluta responsabilidad del estudiante, quedando a su criterio el contenidoy presentacin del reporte. No se receptar informes posteriores a lafecha de la revisin.

9. Se tomara en cuenta para su evaluacin: actuacin en clase, trabajo en

equipo, los reportes, el orden, rendimiento y comportamiento que elestudiante conserve durante la prctica.

INTENCIONALIDAD (OBJETIVO GENERAL)

a) Aplicar correctamente las propiedades bsicas de la radiacin electromagntica

en los diferentes mtodos de anlisis.

b) Diferenciar los componentes bsicos de un instrumento de medicin de una

propiedad fsica con la finalidad de aplicarlos eficientemente.

c) Aplicar los mtodos qumicos de tratamiento de muestras para su posterior

lectura en los diferentes instrumentos analticos con eficiencia.

d) Manejar adecuadamente las diferentes zonas de la radiacin electromagntica

en el anlisis qumico instrumental

e) Interpretar la informacin qumica generada del analito en estudio a travs de

los instrumentos manejados con destrezas.

f) Utilizar correctamente las diferentes herramientas matemticas y de estadstica

descriptiva para generar resultados confiables


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Competencias Especficas de Asignatura

Proceso Tipo Formulacin Descripcin Estndar Desempeo

Personal

Social

Intelectual Aplicacin dediferentesmetodologas

y tcnicasanalticas

Aplica mtodosestandarizados,de la USP,

StandardMethods,AOAC, NormasTULA.

Utiliza losinstrumentos demedicin y

softwareespecializados

Estudiar a nivelbsico losfundamentos de

los diferentesmtodosinstrumentales deanlisis

Aplicar conpertinenciaprincipios y leyesque permitenmodificar losmtodos ya

existentes

Desarrollarnuevos mtodoscon adaptacin conla distintainstrumentacin

Ejecuta tcnicasinstrumentalescon precisin

Utilizaeficientemente losdiversosinstrumentosempleados en lastcnicas modernasde anlisisinstrumentalmoderno

Laboral


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PRACTICA No. 1

EJERCICIOS PARA LA PREPARACIN DE

SOLUCIONES ESTANDARES Y DILUCIONES

OBJETIVO:

Reforzar los conocimientos adquiridos sobre los clculos a realizar para lapreparacin de soluciones estndares y preparacin de diluciones dediferentes concentraciones, para elaborar curvas de calibrado.

CONTENIDO:Soluciones ppm, ppb, Molaridad, Normalidad, Equivalente qumico, milimoles,

Porcentaje, P/V, P/P

MATERIALES: Tabla peridica Calculadora Pizarra acrlica Marcadores borraseco

ACTIVIDADES: Basndose en lo expuesto por el profesor, investigue y ample los conceptos

dados en el contenido. Realice 5 ejercicios relacionados con el tema.


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PRACTICA No. 2USO DE LA BALANZA

MEDICION DE VOLMENES CON PIPETAS AUTOMATICAS YVOLUMETRICAS

EJERCICIO DE APLICACIN ESTADISTICAOBJETIVO: Recordar los mtodos gravimtricos a travs del uso de la balanza y su

relacin con el anlisis qumico instrumental. Aplicar en el laboratorio el uso de la Estadstica como herramienta

primordial en el anlisis qumico.CONTENIDO:

1. Balanza analtica

2.

Estadstica descriptiva3. Calibracin de material volumtricoEQUIPOS Y MATERIALES: Balanza analtica Pipetas volumtricas (1 y 2 ml) Pipetas automticas y puntas (100 1000 L) Vasos de precipitacin

PROCEDIMIENTO: Realizar cada estudiante 5 mediciones de acuerdo al siguiente esquema:

Grupo 1: pipeta volumtrica 1 mlGrupo 2: pipeta automtica 500 LGrupo 3: pipeta automtica 100 LGrupo 4: pipeta volumtrica 2 mlGrupo 5: pipeta automtica 1000 L

Registrar los datos obtenidos.ACTIVIDADES: Con los datos obtenidos en las diferentes mediciones, realice los clculos

estadsticos respectivos (Promedio, Desviacin estndar, Coeficiente deVariacin) Incluya en el reporte:

1. Objetivo del equipo de trabajo2. Conclusiones del equipo de trabajo3. Recomendaciones


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TABLA DE DATOS:


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CALCULOS ESTADISTICOS (Promedio, Desviacin estndar, Coeficiente deVariacin)


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PRACTICA No. 3

METODOS INSTRUMENTALES DE ANALISIS YLA RADIACION ELECTROMAGNETICA EN EL ANALISIS INSTRUMENTAL

OBJETIVO: Reconocer mediante el uso de un Modular las partes fundamentales de las

que consta un instrumento de medicin de una propiedad fsica como laabsorcin de radiacin y que son comunes en todos los modelos.

Aplicar los conocimientos adquiridos sobre la Radiacin electromagnticacomo herramienta fundamental en los instrumentos, utilizados en el anlisisqumico cualitativo y cuantitativo.

CONTENIDO:Un instrumento para anlisis qumico no genera datos cuantitativos directos(resultado final), sino que en primera instancia convierte informacin qumica enuna forma ms fcilmente observable y que posteriormente podr ser cuantificada.Este objetivo se logra en varios pasos que son:1.- Generacin de una seal2.- Transformacin de la seal en una de naturaleza diferente, llamadatransduccin.

3.- Amplificacin de la seal transformada, y4.- Presentacin de la seal, la misma que vara de acuerdo a los diferentesmodelos existentes.

MATERIAL: Modular de enseanza Fotocolormetro LUMETRON

ACTIVIDADES: Basndose en lo expuesto por el profesor, investigue y ample los

conceptos dados en el contenido. Incluya en su trabajo, esquemas dediferentes modelos de instrumentos que sirvan para medir absorcinde radiacin. Radiacin electromagntica: concepto.- Divisin.-Propiedades: onda, partcula.

No olvide redactar un Objetivo y las respectivas Conclusiones yRecomendaciones del equipo de trabajo.


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PRACTICA No. 4

ESPECTRO DE ABSORCION PARA ELIN PERMANGANATO (MnO4)-

OBJETIVO: Demostrar su habilidad y destreza en el manejo de los instrumentos para

medir absorcin de radiacin. Identificar la longitud de onda ideal, de acuerdo al espectro de absorcin

obtenido de la especie absorbente.

CONTENIDO: Interaccin de la Radiacin Electromagntica con la materia Espectros de absorcin.

EQUIPOS Y MATERIALES:

EQUIPOS MATERIALES REACTIVOSGENESYS 20 Matraces Volumtricos MnO4K

Balanza Analtica Pipetas Volumtricas Agua destilada

PROCEDIMIENTO:1. Preparar 500 ml de una solucin estndar de Permanganato de potasio que

contenga 500 g de ION PERMANGANTO (MnO4)-/ml2. A partir de esta solucin tome una alcuota de:

SUBGRUPO ALICUOTA VOL. DILUCIONCONCENTRACIONg (MnO4)-/ml

1 2 ml 25 ml2 3 ml 25 ml3 4 ml 25 ml4 5 ml 25 ml5 6 ml 25 ml

PARTE INSTRUMENTAL:1. Encienda el instrumento (10 a 15 minutos) antes de ser utilizado.2. Seleccione las longitudes de onda, desde: 490 nm hasta 570 nm, con

variaciones de 10 en 10 nm.3. Configure el instrumento utilizando agua destilada como blanco.4. Coloque en el recipiente de la muestra la cantidad necesaria de la dilucin

preparada, lleve a la marcha de los rayos y realice las diferentes lecturas.

ACTIVIDADES:

1. Calcule Cuntos gramos de Permanganato de potasio se necesitan parapreparar la solucin estndar?


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2. Cul es la concentracin en g del ion permanganato/ml de la dilucin detrabajo?

3. Exprese con sus palabras lo que es un espectro de absorcin y para qusirve en el anlisis.

4. Con los datos obtenidos en una hoja milimetrada, haga el graficocorrespondiente:

ABSORBANCIA vs. Longitud de onda

5. Incluya en el reporte:a) Objetivob) Conclusionesc) Recomendaciones

CALCULOS:


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TALLER No. 1

TEMA:

MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN AREAS DE:FARMACIA, QUIMICA CLINICA Y CONTROL

DE CALIDAD EN ALIMENTOS


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PRACTICA No. 5

CURVA ESTANDAR DE CALIBRADO PARA ELION (MnO4)-A PARTIR DEL PERMANGANATO DE POTASIO

OBJETIVO: Comprobar el enunciado de la Ley de Lambert-Beer y su aplicacin en el

laboratorio.

CONTENIDO:Ley de Lambert-Beer: concepto y expresin matemtica


EQUIPOS MATERIALES REACTIVOSGENESYS 20 Matraces Volumtricos MnO4K

Balanza Analtica Pipetas Volumtricas Agua destilada

PROCEDIMIENTO:1. Preparar una solucin estndar de Permanganato de potasio que contenga

500 g ION (MnO4)-/ml2. A partir de esta solucin tome una alcuota y prepare una dilucin primaria:

SUBGRUPO ALICUOTA VOL. DILUCIONCONCENTRACIONg (MnO4)-/ml

1 6 ml 25 ml2 8 ml 25 ml3 10 ml 25 ml4 12 ml 25 ml5 15 ml 25 ml

3. Luego, de esta dilucin prepare 5 estndares de trabajo en matraces

volumtricos de 10 ml, enrase con agua destilada.Las concentraciones de los estndares de trabajo, sern escogidas deacuerdo al criterio del subgrupo:

Dilucin primaria ALICUOTA VOL. DILUCIONCONCENTRACIONg (MnO4)-/ml

Segn el subgrupo

de trabajo

ml 10 mlml 10 mlml 10 ml

ml 10 mlml 10 ml


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PARTE INSTRUMENTAL:1. Encienda el instrumento.2. Seleccione la longitud de onda ideal para el Permanganato de potasio.3. Configure el instrumento utilizando agua destilada como blanco.4. Coloque en el recipiente de la muestra la cantidad necesaria de cada una de

las diluciones preparadas, lleve a la marcha de los rayos y realice lasdiferentes lecturas.

ACTIVIDADES:1. Realice los clculos para la preparacin de la solucin stock, la dilucin

primaria y los estndares de trabajo.2. Con los datos obtenidos haga el grafico correspondiente utilizando el

programa de Excel, recuerde incluir como primer dato el valor de Cero,

tanto para la concentracin como para la absorbancia:ABSORBANCIA vs. CONCENTRACION3. Segn el grafico: Cul es la relacin que existe entre las variables?4. Detect alguna desviacin?5. En qu grado afectan a la linealidad fotomtrica y como se corrigen?6. Segn el trabajo realizado. Qu es una curva estndar de calibrado y para

qu sirve?7. Incluya en el reporte: Objetivo Conclusiones, las mismas que se escribirn de acuerdo al objetivo

planteado. Recomendaciones

PASOS PARA LA ELABORACION DE GRAFICOSEN EXCEL

a. Ingresar a Excelb. En la hoja de trabajo ingresar los valores de Absorbancia y

Concentracin de los estndares de trabajo, incluya el CERO como

primer valor de la curva, tanto para absorbancia como para laconcentracin.c. Seleccionar las columnas de datosd. Ir a INSERTAR y buscar DISPERSION (xy), escoger el primer

grfico.e. Verificar el rango de datosf. Dar formato al grfico: nombre de las variables, titulo, etc.g. Colocar el cursor sobre uno de los puntos de la curva y hacer CLICK

derechoh. Escoger agregar LINEA DE TENDENCIA, click, ir a opciones


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i. Marcar: ECUACION EN EL GRAFICO y el VALOR DE Rj. Click en ACEPTARk. Anotar la frmula de la ecuacin.

CALCULOS:


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PRACTICA No. 6CURVA ESTANDAR DE CALIBRADO PARA EL

ION (CrO4)=A PARTIR DEL CROMATO DE POTASIO ALCALINO

OBJETIVO: Elaborar la curva de calibrado utilizando como herramienta el programa de

Excel de su computadora

CONTENIDO:Desviaciones de la Ley de Lambert-Beer.


EQUIPOS MATERIALES REACTIVOSGENESYS 20 Matraces Volumtricos Cromato de potasio

Balanza Analtica Pipetas Volumtricas Hidrxido de potasioAgua destilada

PROCEDIMIENTO: Preparar 1000 ml de una solucin 0.05 N de Hidrxido de potasio Preparar 1000 ml de una solucin estndar de Cromato de potasio que

contenga 70 g de ION CROMATO /ml. Utilice como disolvente la solucin

0.05 N de hidrxido de potasio. A partir de esta solucin prepare 5 estndares de trabajo, tome las

siguientes alcuotas de:

ALICUOTAVOL. DILUCION

(Sol. 0.05 N KOH)CONCENTRACION

g/ml0,6 ml 10 ml1,2 ml 10 ml1,8 ml 10 ml2,4ml 10 ml

3 ml 10 ml

PARTE INSTRUMENTAL:1. Encienda el instrumento2. Seleccione la longitud de onda, 370 nm.3. Configure el instrumento utilizando la solucin 0.05 N de Hidrxido de

potasio como blanco.4. Coloque en el recipiente de la muestra la cantidad necesaria de la dilucin

preparada, lleve a la marcha de los rayos y realice las diferentes lecturas.


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ACTIVIDADES:1. Realice los clculos para la preparacin de las soluciones y para cada uno de

los estndares de trabajo.2. Con los datos obtenidos haga el grafico correspondiente:

ABSORBANCIA vs. CONCENTRACION3. Incluya en el reporte: Objetivo Conclusiones, las mismas que se escribirn de acuerdo al objetivo

planteado. Recomendaciones

CALCULOS:


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PRACTICA No. 7 (leccin)

DETERMINACION CUANTITATIVA DE ION PERMANGANATOEN UNA SOLUCIN MUESTRA

OBJETIVO: Demostrar las habilidades y destrezas adquiridas durante su proceso de

enseanza-aprendizaje.

CONTENIDO:Curva de calibrado: concepto, descripcin, usos, importanciaAplicaciones de la Curva de calibrado en el Control de calidad.EQUIPOS Y MATERIALES:

EQUIPOS MATERIALES REACTIVOSGENESYS 20 Matraces Volumtricos Muestra problema

Pipetas Volumtricas Agua destilada

PROCEDIMIENTO: A partir de la solucin entregada, determine la concentracin de in

permanganato presente en la muestra. Utilice todas las herramientas que estn a su alcance, tales como:

preparacin de diluciones, curva de calibrado (realizada en la claseanterior), herramientas estadsticas y dems clculos necesarios para llegarel resultado final.

Recuerde trabajar la muestra por triplicado:

REPLICAS CONCENTRACIONg/ml muestra

PROMEDIO DESVIACIONESTANDAR

COEFICIENTE DEVARIACIN (5%)

A

BC

PARTE INSTRUMENTAL:1. Encienda el instrumento 15 minutos antes de ser utilizado.2. Seleccione la longitud de onda para el permanganato de potasio3. Configure el instrumento utilizando agua destilada como blanco.4. Coloque la muestra en el recipiente y lea en el instrumento, realice el mismo

procedimiento con las rplicas preparadas.


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ACTIVIDADES: Con la curva de calibrado para el Ion permanganato de la clase anterior

obtenga la concentracin aproximada de cada una de las dilucionespreparadas (tres replicas) que llevo al instrumento.

Realice los clculos para obtener la concentracin de la muestra entregada,en microgramos de Ion permanganato por ml de muestra. Aplique susconocimientos sobre estadstica.

Investigue el contenido de la practica Segn el trabajo realizado: considera importante el uso de la curva de

calibrado en el laboratorio? Sustente su respuesta. Qu otras aplicaciones tiene una curva de calibrado, en el laboratorio? Incluya en el reporte:

Objetivo (uno) Conclusiones Recomendaciones

CALCULOS:


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DETERMINACION CUANTITATIVA DE ION CROMATOEN UNA SOLUCIN MUESTRA

OBJETIVO: Demostrar las habilidades y destrezas adquiridas durante su proceso de

enseanza-aprendizaje.


EQUIPOS MATERIALES REACTIVOSGENESYS 20 Matraces Volumtricos Muestra problema

Pipetas Volumtricas Solucin 0.05 N KOH

PROCEDIMIENTO:

A partir de la solucin entregada, determine la concentracin de inCROMATO presente en la muestra.

Utilice todas las herramientas que estn a su alcance, tales como:preparacin de diluciones, curva de calibrado (ecuacin de la recta),herramientas estadsticas y dems clculos necesarios para llegar elresultado final.

Recuerde trabajar la muestra por triplicado:

REPLICASCONCENTRACIONg/ml muestra PROMEDIO

DESVIACIONESTANDAR

COEFICIENTE DE

VARIACIN(5%)

ABC

PARTE INSTRUMENTAL:5. Encienda el instrumento 15 minutos antes de ser utilizado.6. Seleccione la longitud de onda para el Cromato de potasio alcalino.7. Configure el instrumento utilizando la solucin 0,05 N de KOH como blanco.8. Coloque la muestra en el recipiente y lea en el instrumento, realice el mismo

procedimiento con las rplicas preparadas.

ACTIVIDADES: Con la ecuacin obtenida en la curva de calibrado, calcule la concentracin

para el Ion Cromato de cada una de las diluciones preparadas (tres replicas)que llevo al instrumento.

Realice los clculos para obtener la concentracin de la muestra entregada,

en microgramos de Ion Cromato por ml de muestra. Aplique susconocimientos sobre estadstica.


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Incluya en el reporte: Objetivo (uno) Conclusiones Recomendaciones

CALCULOS:


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SEGUNDO PARCIAL

PRACTICA No. 8CONTROL DE CALIDAD DE LA CURVA DE

CALIBRADO PARA EL ION CROMO (QC)

OBJETIVO: Aplicar el control de calidad QC en la elaboracin de la curva de calibracin

como herramienta para la posterior Validacin de mtodos de ensayo.CONTENIDO:Investigue sobre los parmetros del control de calidad en el anlisis qumicoinstrumental.


EQUIPOS MATERIALES REACTIVOSGENESYS 20 Matraces Volumtricos Dicromato de Potasio

Balanza Analtica Pipetas Volumtricas Agua destiladacido Sulfrico

PROCEDIMIENTO:

1. Preparar una solucin estndar de Dicromato de potasio que contenga 500g ION Cromo/ml2. De esta solucin prepare 5 estndares de trabajo en matraces volumtricos

de 25 ml, enrase con agua destilada.

ALICUOTA VOL. DILUCIONCONCENTRACIONg Ion Cromo/ml

25 ml 1025 ml 2025 ml 30

25 ml 4025 ml 50

NOTA: Antes de enrasar, adicione a cada una de las diluciones,aproximadamente 0,4 ml de cido Sulfrico concentrado y diluya a la marcacon agua destilada.

3. Prepare un estndar de trabajo (QC) adicional, que tenga una concentracinigual al punto medio de la curva de calibrado (30 g Cromo/ml)

PARTE INSTRUMENTAL:

Longitud de onda: 430 nm,


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Lea las absorbancias de los estndares de la curva de calibrado y del QCpreparado.

NOTA: Recuerde, no incluir en la curva el valor de absorbancia del QC

ACTIVIDADES:1. Con los datos obtenidos, grafique la curva de calibrado utilizando EXCEL.

Registre la ecuacin y el valor de R.2. Con ayuda de la ecuacin , calcule la concentracin real de su QC preparado

y determine el porcentaje de recuperacin, el mismo que debe estar entreel 80 y 120%

Valor calculado

------------------------ x 100 = % de RECUPERACION

Valor terico

3. Realice el informe correspondiente para la prxima clase considerandotodos los componentes que ha venido desarrollando en los Informesanteriores.

CALCULOS:


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PRACTICA No. 9

VALIDACION DE METODOS DE ENSAYOREPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD

OBJETIVO: Aplicar dos parmetros utilizados en la Validacin de Mtodos de Ensayo,

utilizando como base la curva de calibracin para el ion cromo a partir deDicromato de potasio.

CONTENIDO:Investigar sobre los dos parmetros que se estn aplicando.

EQUIPOS Y MATERIALES:EQUIPOS MATERIALES REACTIVOS

GENESYS 20 Matraces Volumtricos Dicromato de PotasioBalanza Analtica Pipetas Volumtricas Agua destilada

cido Sulfrico

PROCEDIMIENTO:1. Preparar 500 ml de una solucin estndar de Dicromato de potasio que

contenga 500 g ION CROMO/ml2.A partir de la solucin estndar prepare 9 rplicas de cada nivel de

concentracin de la curva, de acuerdo al siguiente orden:

SUBGRUPOALICUOTA

mlDILUCION

g Cromo /mlREPETICIONES

1 0,5 25 ml 10 92 1 25 ml 20 93 1,5 25 ml 30 94 2 25 ml 40 95 2,5 25 ml 50 9

PARTE INSTRUMENTAL:1. Trabaje en el mismo equipo y la longitud de onda de la practica anterior2. Lea las Absorbancias de cada una de las rplicas preparadas.

ACTIVIDADES: Con los datos obtenidos en las diferentes mediciones, calcule la

concentracin de cada uno, utilizando la ecuacin de la curva.


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Calcule el porcentaje de recuperacin de cada uno, con la frmula de la claseanterior.

REPLICASABSORBANCIAS CONCENTRACIONES

g/ml

PORCENTAJE DE

RECUPERACION

123456789

Con los porcentajes de recuperacin obtenidos, calcule el Promedio,Desviacin estndar y el Coeficiente de Variacin

Realice un anlisis de los valores obtenidos en el porcentaje derecuperacin.

PROMEDIO

DESVIACION ESTANDAR

COEFICIENTE DE VARIACION %

CALCULOS:


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TALLER No.2TEMA:

LA NORMA NTE INEN-ISO/IEC17025:2006, DE CALIBRACIN Y

ENSAYOS


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PRACTICA No. 10DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DE

VITAMINA B12OBJETIVO:

Comprobar por medios instrumentales (fotomtricos), la concentracin deun principio activo en un producto farmacutico.

Aplicar los conocimientos adquiridos al realizar una tcnica comn decontrol de calidad.

CONTENIDO: Consulte sobre la clasificacin de las vitaminas, importancia, fuentes de

origen, etc. Incluya en su trabajo la bibliografa correspondiente.


EQUIPOS MATERIALES REACTIVOSGENESYS 20 Matraces Volumtricos Solucin estndar de vitamina B12ug/ml

Balanza Analtica Pipetas Volumtricas Agua destiladaPipetas automticas Muestra de vitamina B12

PROCEDIMIENTO:o PREPARACION DE LA CURVA DE CALIBRADO:

Pesar directamente en un matraz de 25 ml, en balanza analtica, 20 mg deCianocobalamina (B12), adicione agua destilada, disuelva completamente yenrase con el agua destilada.A partir de esta solucin tome 5 alcuotas de:

ALICUOTA VOL. DILUCIONCONCENTRACION

g/mlNivel 1 10 ml 10Nivel 2 10 ml 20

Nivel 3 10 ml 30Nivel 4 10 ml 40Nivel 5 10 ml 50

o PREPARACION DE LA MUESTRA:De una muestra que contenga Vitamina B12 inyectable, que tenga unaconcentracin de 1000 g de vitamina B12/ml, tome una alcuota de la muestra

y transfirala a un matraz volumtrico de 10 ml, de tal forma que laconcentracin final de la dilucin preparada sea de 30 g/ml, enrase utilizando

agua destilada.


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o PARTE INSTRUMENTAL: Lea las Absorbancias de las diluciones de trabajo y de la dilucin de la

muestra preparada a una longitud de onda de 361 nm. Use agua destilada como blanco.

ACTIVIDADES: Con los datos obtenidos en las diferentes mediciones de los estndares de

trabajo, grafique la curva de calibrado y obtenga la Ecuacin de la recta y elvalor de R.

Realice los clculos necesarios para llegar a obtener la concentracin de lamuestra entregada. Aplique la estadstica (Promedio, Desviacin estndar,Coeficiente de Variacin)

CALCULOS:


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PRACTICA No. 11A

DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DEFLAVONOIDES (QUERCETINA) EN CEBOLLA COLORADA

OBJETIVO: Comprobarpor medios instrumentales (fotomtricos), la concentracin de

un principio activo en un alimento natural, de consumo humano. Aplicar los conocimientos adquiridos al realizar una tcnica de

cuantificacin de un principio activo.EQUIPOS Y MATERIALES:

EQUIPOS MATERIALES REACTIVOS

EspectrofotmetroGENESYS 20

Tubos plsticos 50 ml

Eppendorf Alcohol 80 %

Balanza Analtica Papel filtro Solucin 1 M de Acetato de potasio

SonicadorPipetas automticas y

puntasSolucin al 10% de Nitrato de

aluminioCentrifugarefrigerada

Matraces VolumtricosCEBOLLA COLORADA

Licuadora Pipetas VolumtricasVortex

PRIMERA PARTE:

PROCEDIMIENTOA.- PREPARACION DE LA MUESTRA: Extraccin del principio activo En un tubo plstico de 50 ml Eppendorf, pese por triplicado,

aproximadamente 10 g de la muestra, previamente licuada y dividida

finamente, agregar 20 ml del alcohol al 80% y sonicar por 20 minutos.

Centrifugar a 10000 rpm por 5 minutos y a 4 C.

El lquido sobrenadante, filtrarlo en el matraz volumtrico de 25 ml y luego

enrasar con el alcohol al 80%.

GUARDAR ESTAS DILUCIONES PARA LA SIGUIENTE SEMANA


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CALCULOS:


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PRACTICA No. 11B

DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DEFLAVONOIDES (QUERCETINA) EN CEBOLLA COLORADA

SEGUNDA PARTE

B.- PREPARACION DE LA CURVA DE CALIBRADO:

1) Pesar en la balanza analtica, directamente en un matraz volumtrico de 50 ml,

alrededor de 20 mg de Quercetina RS (Flavonoide) y diluya cuantitativamente

utilizando el alcohol al 80% (solucin stock).

2) De esta solucin, prepare una dilucin primaria, tomando una alcuota de 0,75 ml

y llvela a un matraz volumtrico de 25 ml.

3) Con esta dilucin primaria prepare los estndares para la curva, tomando

volmenes de:

ALICUOTASol. Acetatode potasio

Sol.Nitrato dealuminio

LLEVAR A VOL.FINAL con lasolucin deEtanol 80%

CONCENT.g/ml

0,200ml 200 uL 200 uL 4 ml

0,300ml 200 uL 200 uL 4 ml

0,400ml 200 uL 200 uL 4 ml

0,500ml 200 uL 200 uL 4 ml

0,600 ml 200 uL 200 uL 4 ml

4) Dejar en reposo por 40 minutos y leer en el espectrofotmetro.5) Prepare un blanco de reactivo, o utilice el alcohol al 80% como blanco.

C.- PREPARACION DE LOS EXTRACTOS (Muestra):

De cada una de las diluciones preparadas la clase anterior, mida 500 uL yllvela a un matraz vol. de 10 ml y adicione 400 uL de solucin de 1 M deAcetato de potasio, 400 uL de solucin al 10% de Nitrato de aluminio. Llevara volumen con el alcohol al 80%.

Dejar en reposo 40 minutos y leer en el espectrofotmetro junto con los

estndares de la curva de calibrado.


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NOTA: Al momento de adicionar los reactivos cromgenos, hgalo almismo tiempo en los estndares de trabajo y en las rplicas de lamuestra, los 40 minutos deben correr iguales.

3.- PARTE INSTRUMENTAL:

Encender el instrumento 15 minutos antes de hacer las lecturas.

Lea las absorbancias de los estndares para la curva y de la dilucin de la

muestra preparada utilizando como longitud de onda 415 nm.

Use el blanco de reactivo o el alcohol al 80% como blanco.

4.- ACTIVIDADES:

Con los datos obtenidos grafique en su computador, la curva de calibrado,obtenga la ecuacin de la recta y el valor de r

En la ecuacin de la recta, despeje la variable X y calcule las

concentraciones de las diluciones preparadas de la muestra, y finalmente

determine la concentracin de la muestra, segn la cantidad que pes.

Aplique la parte estadstica, y reporte sus resultados finales en:

mg de Quercetina/100 g de cebolla.

MARCO TEORICO: Realice la debida consulta bibliogrficamente e

investigue sobre los Flavonoides, importancia, y TODA la informacin que

exista sobre el tema.

Incluya informacin especial con respecto a la cebolla (ALLIUM cepa).

Consulte sobre los reactivos cromgenos y su comportamiento qumico.

No olvide incluir la bibliografa consultada y la utilizada.

RECUERDE ESTE TRABAJO DEMUESTRA SU EVOLUCIN EN ELPROCESO DE ENSEANZA-APRENDIZAJE, PONGA SU MEJOR

ESFUERZO PARA REALIZARLO.


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CALCULOS:


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BIBLIOGRAFIA

Skoog, D. A. (2008), Principios del Anlisis Instrumental,Cengage Learning

Editores, Mxico

Rubinson, K. A., Rubinson, J.F. (2001), Anlisis Instrumental, Pearson

Educacion, Madrid-Espaa.

Hernndez, L. Gonzlez Prez, C. (2002), Introduccin al Anlisis

Instrumental, Ariel ciencia, Barcelona.

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Redalyc. ORG

Scielo (Chile)

SCIRUS

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