4 Metodos Ensayo Emergencia

7/22/2019 4 Metodos Ensayo Emergencia

1/47

1

Dr.C. Mara Isabel Gonzlez GonzlezInvestigador Titular/ Profesor AuxiliarLaboratorio de Microbiologa de AguasINHEM, CubaEmail: [email protected], [email protected]

Guas de la OMS y mtodos de ensayo para la

evaluacin de la calidad microbiolgica del agua.Buenos Aires, Argentina

22-26 de septiembre, 2008

""""Nada en el mundo de las cosas vivientes esNada en el mundo de las cosas vivientes esNada en el mundo de las cosas vivientes esNada en el mundo de las cosas vivientes espermanentemente constante.permanentemente constante.permanentemente constante.permanentemente constante.""""

HansHansHansHans ZinnserZinnserZinnserZinnser, 1953, 1953, 1953, 1953


2/47

2

Las consecuencias de las infecciones causadas por losmicroorganismos patgenos han afectado seriamente ala humanidad por ej. la peste, el clera, la influenza.

En el 2001, una revisin cientfica identific 1 415especies de organismos infecciosos patgenos para elhombre que incluan:

217 viruses y priones538 bacterias y rickettsias

307 hongos66 protozoos287 helmintos

La emergencia de una enfermedad infecciosa es un complejoproceso que involucra factores sociales, biolgicos y ecolgicos(se han identificado 13 factores claves para esta emergencia:

1. Adaptacin microbiana y mutacin.

2. Vulnerabilidad humana.

3. Tiempo y clima.

4. Cambios en el ecosistema.

5. Desarrollo econmico y uso de la tierra.

6. Comportamiento humano y demogrfico.

7. Tecnologa e industria.

8. Viajes internacionales y comercio.

9. Deterioro de las medidas de salud pblica.

10.Pobreza y desigualdad social.

11.Guerras y hambrunas.

12. Prdida de voluntad poltica.

13. Intento de dao.


3/47

3

A pesar de la inherente complejidad de los sistemas biolgico ysocial involucrados en la emergencia, algunos estudios revelanlo siguiente:

Virus , priones, bacterias y protozoos estn ms asociados a laemergencia de enfermedades.

Patgenos zoonticos comprenden el 75% de las enfermedadesemergentes.

Patgenos que estn sujetos a una frecuencia relativa demutaciones o eventos asociados al genoma (por ej. RNA virus yvirus con segmentos de genoma).

Patgenos que infectan mltiples hospederos o que infectanespecies que pueden ser portadoras de agentes estrechamenterelacionados, proveen una oportunidad para la recombinacin(por ej. sndrome respiratorio agudo en gatos).

Agentes transmitidos por ms de una ruta o contacto indirecto(ej. agua, alimentos, contaminacin ambiental, vectores).

Ejemplos de enfermedades emergentes y reemergentes.

1973: Rotavirus (diarrea infantil)1975: Astrovirus (diarrea)1976: Crytosporidium parvum (diarrea aguda y crnica)1977: Legionella pneumophila (legionelosis)1977: virus de Ebola (fiebre hemorrgica con un 80% d e letalidad)1977: Campylobacter jejuni (diarrea)1982: virus HTLV-2 (virus causante de la tricoleucemia)1983: Helicobacter pylori (lcera pptica, cncer gstrico)1983: Escherichia coli O157:H7

1983: Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH): SIDA1988 y 1989: Virus de la hepatitis E y hepatitis C1991: Virus de Guanarito (fiebre hemorrgica venezolana)1992: Vibrio cholerae O1391994: virus Sabi (fiebre hemorrgica de Brasil)1995: virus del Herpes Humano tipo 81997: enterovirus 71 (encefalitis epidmica)1999: virus de la Influenza A (influenza


4/47

4

Factores en la emergencia de enfermedades infecciosas.

Cambios ecolgicos: agricultura, represas, cambios en ecosistemasacuticos, deforestacin, reforestacin, inundaciones, sequas, cambiosclimticos.

Ej. Schistosomiasis (represas), fiebre del Valle, hantavirosis pulmonar

Comportamiento humano: eventos sociales, crecimiento y migracinde la poblacin, guerras, hacinamiento, conflictos civiles, conductasexual.

Ej. Introduccin y diseminacin de VIH, brotes de dengue

Viajes y comercio internacional: viajes areos, transportacin depersonas y mercancas.

Ej. Malaria, diseminacin de vectores, roedores transmisores dehantavirus, clera, diseminacin de Vibrio cholerae O139.

Factores en la emergencia de enfermedades infecciosas (Cont)

Desarrollo tecnolgico e industrial:globalizacin de suministros dealimentos, transporte de tejidos y rganos, amplio uso de antibiticos,drogas inmunosupresoras.

Ej. Sndrome urmico hemoltico causado por Escherichia coli O157:H7 ,hepatitis asociada a transfusiones, enfermedades oportunistas enpacientes inmunodeprimidos.

Cambios y adaptaciones microbianas:evolucin microbiana como

respuesta de seleccin en el ambiente.Ej. Resistencia antimicrobiana, clulas viables pero no cultivables.

Crisis en las medidas de salud pblica:programas de prevencinreducidas o crticas, saneamiento y medidas inadecuadas en el controlde vectores.

Ej. Reemergencia de tuberculosis en E. U. , clera en campamentos derefugiados en frica, reemergencia de difteria en Rusia.


5/47

5

Base ambiental de la transmisin de agentesinfecciosos segn Feachem et al. (1983)

Propiedades relacionadasa la supervivencia ambiental

Concentracin LATENCIA Dosisde patgenos PERSISTENCIA Infectivaexcretados MULTIPLICACIN

IMPORTANTES PARA CONOCER EL MODO DE TRANSMISIN DEUN MICROORGANISMO PATGENO Y ESTABLECER EL CONTROL

AMBIENTAL

LATENCIA:El tiempo entre la excrecin del patgeno y eltiempo en que infecta a un nuevo hospedero.

DOSIS INFECTIVA:Dosis mnima requerida de un organismo paracausar la enfermedad.

SUPERVIVENCIA:Conservacin de la viabilidad del organismobajo condiciones adversas.


6/47

6

PERSISTENCIA:Capacidad de un patgeno de sobrevivir en elmedio por un perodo de tiempo.

VIABILIDAD:Propiedad que posee una parte de una

poblacin bacteriana capaz de multiplicarsecuando existan ptimas condiciones para sucrecimiento.

MULTIPLICACIN:Posibilidad de crecimiento microbiano bajodeterminadas condiciones.

Las enfermedades emergentes trasmitidas por elagua estn estrechamente asociadas con su calidadmicrobiolgica.

Ejemplos de infecciones entricas:

Cryptosporidium parvum yGiardia lambliaFoto: HDA Lindquist, USEPA

RotavirusFoto: FP Williams, USEPA


7/47

7

GastrointestinalGastrointestinalGastrointestinalGastrointestinal

BacteriaBacteriaBacteriaBacteria VirusesVirusesVirusesViruses Protozoos y helmintos Protozoos y helmintosProtozoos y helmintosProtozoos y helmintos

Ruta deRuta deRuta deRuta deinfeccininfeccininfeccininfeccin

Campylobacter jejuniCampylobacter jejuniCampylobacter jejuniCampylobacter jejuniEscherichia coliEscherichia coliEscherichia coliEscherichia coliSalmonella sp.Salmonella sp.Salmonella sp.Salmonella sp.Shigella sp.Shigella sp.Shigella sp.Shigella sp.

Vibrio choleraeVibrio choleraeVibrio choleraeVibrio choleraeYersinia enterocoliticaYersinia enterocoliticaYersinia enterocoliticaYersinia enterocolitica

Aeromonas sp.Aeromonas sp.Aeromonas sp.Aeromonas sp.Helicobacter pyloriHelicobacter pyloriHelicobacter pyloriHelicobacter pylori

AdenovirusAdenovirusAdenovirusAdenovirusEnterovirusEnterovirusEnterovirusEnterovirus

AstrovirusAstrovirusAstrovirusAstrovirusRotavirusRotavirusRotavirusRotavirus

NorovirusNorovirusNorovirusNorovirusSapovirusSapovirusSapovirusSapovirusVirus de Hepatitis AVirus de Hepatitis AVirus de Hepatitis AVirus de Hepatitis AVirus de Hepatitis EVirus de Hepatitis EVirus de Hepatitis EVirus de Hepatitis E

Crystoporidium parvumCrystoporidium parvumCrystoporidium parvumCrystoporidium parvumEntamoeba hystoliticaEntamoeba hystoliticaEntamoeba hystoliticaEntamoeba hystoliticaGiardia intestinalisGiardia intestinalisGiardia intestinalisGiardia intestinalisCyclospora cayetanensisCyclospora cayetanensisCyclospora cayetanensisCyclospora cayetanensis

Toxoplasma gondiiToxoplasma gondiiToxoplasma gondiiToxoplasma gondiiIsosporaIsosporaIsosporaIsospora bellibellibellibelliDracunculus medinensisDracunculus medinensisDracunculus medinensisDracunculus medinensisFasciolaFasciolaFasciolaFasciola sp.sp.sp.sp.

Vas de transmisin de algunos microorganismos patgenosen aguas.

Por ingestin de agua.

RespiratoriaRespiratoriaRespiratoriaRespiratoria

BacteriaBacteriaBacteriaBacteria VirusesVirusesVirusesViruses Algunos otros agentes enAlgunos otros agentes enAlgunos otros agentes enAlgunos otros agentes ensituaciones de alta exposicinsituaciones de alta exposicinsituaciones de alta exposicinsituaciones de alta exposicin


LegionellaLegionellaLegionellaLegionella pneumophilapneumophilapneumophilapneumophilaMycobacteriumMycobacteriumMycobacteriumMycobacterium sp.sp.sp.sp.(no tuberculoso)(no tuberculoso)(no tuberculoso)(no tuberculoso)

EnterovirusEnterovirusEnterovirusEnterovirusDiversas infeccionesDiversas infeccionesDiversas infeccionesDiversas infeccionesviralesviralesviralesvirales


Por inhalacin y aspiracin de bioaerosoles


8/47

8

Piel, membranas de las mucosas, heridas, ojosPiel, membranas de las mucosas, heridas, ojosPiel, membranas de las mucosas, heridas, ojosPiel, membranas de las mucosas, heridas, ojos

BacteriaBacteriaBacteriaBacteria VirusesVirusesVirusesViruses Protozoos ProtozoosProtozoosProtozoos yyyy helmintoshelmintoshelmintoshelmintos


BurkholderiaBurkholderiaBurkholderiaBurkholderia pseudomalleipseudomalleipseudomalleipseudomalleiMycobacteriumMycobacteriumMycobacteriumMycobacterium sp. (nosp. (nosp. (nosp. (notuberculoso)tuberculoso)tuberculoso)tuberculoso)

Aeromonas sp.Aeromonas sp.Aeromonas sp.Aeromonas sp.

Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosaLeptospiraLeptospiraLeptospiraLeptospira sp.sp.sp.sp.


Por contacto

AdenovirusAdenovirusAdenovirusAdenovirusEnterovirusEnterovirusEnterovirusEnterovirus

AcanthamoebaAcanthamoebaAcanthamoebaAcanthamoeba sp.sp.sp.sp.SchistosomaSchistosomaSchistosomaSchistosoma mansoniimansoniimansoniimansoniiNaegleriaNaegleriaNaegleriaNaegleria fowlerifowlerifowlerifowleri

Cianobacterias txicas de importancia actual en aguas de consumoCianobacterias txicas de importancia actual en aguas de consumoCianobacterias txicas de importancia actual en aguas de consumoCianobacterias txicas de importancia actual en aguas de consumo....

Especies txicasEspecies txicasEspecies txicasEspecies txicas

Microcystis , Anabaena , PlanktothrikMicrocystis , Anabaena , PlanktothrikMicrocystis , Anabaena , PlanktothrikMicrocystis , Anabaena , PlanktothrikNostoc, Hapalosiphon, AnabaenopsisNostoc, Hapalosiphon, AnabaenopsisNostoc, Hapalosiphon, AnabaenopsisNostoc, Hapalosiphon, Anabaenopsis

MicrocystinasMicrocystinasMicrocystinasMicrocystinasHgadoHgadoHgadoHgado

Fuente: Cyanosite

rgano primariorgano primariorgano primariorgano primario Tipo de cianotoxinasTipo de cianotoxinasTipo de cianotoxinasTipo de cianotoxinas

NodulariaNodulariaNodulariaNodularia HgadoHgadoHgadoHgado Nodularina NodularinaNodularinaNodularina

Anabaena, Planktothrik, AphanizomenonAnabaena, Planktothrik, AphanizomenonAnabaena, Planktothrik, AphanizomenonAnabaena, Planktothrik, AphanizomenonAnabaenaAnabaenaAnabaenaAnabaenaLyngbya, Schizothrix, PlanktothrikLyngbya, Schizothrix, PlanktothrikLyngbya, Schizothrix, PlanktothrikLyngbya, Schizothrix, PlanktothrikCylindrospermopsis, Aphanizomenon,Cylindrospermopsis, Aphanizomenon,Cylindrospermopsis, Aphanizomenon,Cylindrospermopsis, Aphanizomenon,

Umezakia, Raphidiosis curvataUmezakia, Raphidiosis curvataUmezakia, Raphidiosis curvataUmezakia, Raphidiosis curvataLyngbyaLyngbyaLyngbyaLyngbya

Anabaena, Aphanizomenon, Lyngbya,Anabaena, Aphanizomenon, Lyngbya,Anabaena, Aphanizomenon, Lyngbya,Anabaena, Aphanizomenon, Lyngbya,CylindrospermopsisCylindrospermopsisCylindrospermopsisCylindrospermopsis

Sistema nerviosoSistema nerviosoSistema nerviosoSistema nerviosoSistema nerviosoSistema nerviosoSistema nerviosoSistema nervioso

PielPielPielPielHgadoHgadoHgadoHgado

Piel, tracto intestinalPiel, tracto intestinalPiel, tracto intestinalPiel, tracto intestinalSistema nerviosoSistema nerviosoSistema nerviosoSistema nervioso

AnatoxinaAnatoxinaAnatoxinaAnatoxina----aaaaAnatoxinaAnatoxinaAnatoxinaAnatoxina----a (S)a (S)a (S)a (S)AplysiatoxinaAplysiatoxinaAplysiatoxinaAplysiatoxina

CylindrospermopsinaCylindrospermopsinaCylindrospermopsinaCylindrospermopsina

LyngbyatoxinaLyngbyatoxinaLyngbyatoxinaLyngbyatoxina----aaaaSaxotoxinasSaxotoxinasSaxotoxinasSaxotoxinas


9/47

9

Calidad del agua:

La calidad del agua se define con relacin su uso oactividad en que se emplee (por ej. aguas de consumo,aguas recreativas, aguas residuales y grises para laagricultura o acuicultura, aguas envasadas, aguasmineromedicinales para hidrologa mdica, aguas parahemodilisis).

Para evaluar los cambios que las diferentes aplicaciones del aguapueden originar en su calidad, se emplean parmetros fsicos,

qumicos y biolgicos, tambin llamados indicadores de calidad deagua.

Criterio de calidad de agua:

Es la relacin cuantificable de exposicin-efecto basada enevidencias cientficas entre el nivel de algn indicador de calidad deagua y los riesgos potenciales para la salud asociados con su uso.

Gua de calidad del agua:

Es una densidad mxima sugerida del indicador en el agua que estasociada con riesgos inaceptables para la salud.

Norma:Obtenida de los criterios y las guas nacionales e internacionales yes de obligatorio cumplimiento.


10/47

10

Organismos Valor guOrganismos Valor guOrganismos Valor guOrganismos Valor guaaaa

Toda agua de consumoToda agua de consumoToda agua de consumoToda agua de consumo

Escherichia coliEscherichia coliEscherichia coliEscherichia coli o bacterias No debe detectarse eno bacterias No debe detectarse eno bacterias No debe detectarse eno bacterias No debe detectarse encoliformescoliformescoliformescoliformes termotolerantes ninguna muestra de 100ml termotolerantes ninguna muestra de 100ml termotolerantes ninguna muestra de 100ml termotolerantes ninguna muestra de 100ml

Agua tratada que entra al sistema de distribucinAgua tratada que entra al sistema de distribucinAgua tratada que entra al sistema de distribucinAgua tratada que entra al sistema de distribucin

Escherichia coliEscherichia coliEscherichia coliEscherichia coli o bacterias No debe detectarse eno bacterias No debe detectarse eno bacterias No debe detectarse eno bacterias No debe detectarse encoliformes termotolerantes ninguna muestra decoliformes termotolerantes ninguna muestra decoliformes termotolerantes ninguna muestra decoliformes termotolerantes ninguna muestra de 100ml 100ml100ml100ml

Agua tratada en el sistema de distribucinAgua tratada en el sistema de distribucinAgua tratada en el sistema de distribucinAgua tratada en el sistema de distribucin

Escherichia coliEscherichia coliEscherichia coliEscherichia coli o bacterias No debe ser detectado eno bacterias No debe ser detectado eno bacterias No debe ser detectado eno bacterias No debe ser detectado encoliformes termotolerantescoliformes termotolerantescoliformes termotolerantescoliformes termotolerantes ninguna muestra de 100ml ninguna muestra de 100mlninguna muestra de 100mlninguna muestra de 100ml

Valores Guas en agua potable para verificar la calidad microbiolgica

Escherichia colipor 100 mL de agua = 0

Muy difcil en estas situaciones por lo que se aplica estaclasificacin segn el grado de afectacin a la salud. Por ejemplo:

0 Escherichia coli/100ml, valor aceptable

1-10 Escherichia coli/100ml, valor tolerable

10-100 Escherichia coli/100ml, requiere tratamiento>100 Escherichia coli/100ml, inadecuado para el consumo sin

tratamiento apropiado.

Valor gua recomendado para la evaluacin de lacalidad del agua en situaciones de emergencias y desastres.


11/47

11

Lmites permisibles para aguas dehemodilisis

Que son los indicadores microbiolgicos?

Microorganismos cuyas densidades o concentraciones en elagua pueden ser cuantitativamente relacionadas con el riesgoa la salud que implica sta.

Un indicador microbiolgico de la calidad del agua esgeneralmente (no necesariamente bacteria) el que ha entradoal agua al mismo tiempo que las heces, pero es ms fcil demedir que el amplio rango de microorganismos de riesgo parala salud.


12/47

12

Debe ser empleado para la evaluacin de la eficacia delos procesos del tratamiento.

Ej. indicador de un proceso, indicador de ladesinfeccin, turbiedad como un indicador de lafiltracin.

Debe ser usado con la finalidad que en sus orgenesjugaron los indicadores, como medida de la

contaminacin fecal.Ej. ndice de la contaminacin fecal, conductividad enaguas subterrneas como un ndice de deterioro.

Trmino Indicador

Trmino ndice

Caractersticas que debe tener un indicador:

Estar ausente en aguas no contaminadas y presentes cuando la fueEstar ausente en aguas no contaminadas y presentes cuando la fueEstar ausente en aguas no contaminadas y presentes cuando la fueEstar ausente en aguas no contaminadas y presentes cuando la fuente dente dente dente demicroorganismos patgenos est presente.microorganismos patgenos est presente.microorganismos patgenos est presente.microorganismos patgenos est presente.

No deben multiplicarse en el ambiente.No deben multiplicarse en el ambiente.No deben multiplicarse en el ambiente.No deben multiplicarse en el ambiente.

Estar presentes en mayor nmero que los microorganismos patgenoEstar presentes en mayor nmero que los microorganismos patgenoEstar presentes en mayor nmero que los microorganismos patgenoEstar presentes en mayor nmero que los microorganismos patgenos.s.s.s.

Responder a las condiciones del ambiente natural y a los procesoResponder a las condiciones del ambiente natural y a los procesoResponder a las condiciones del ambiente natural y a los procesoResponder a las condiciones del ambiente natural y a los procesos de tratamientos de tratamientos de tratamientos de tratamientode manera similar que los microorganismos patgenos.de manera similar que los microorganismos patgenos.de manera similar que los microorganismos patgenos.de manera similar que los microorganismos patgenos.

Fciles de aislar, identificar y enumerar por mtodos convencionFciles de aislar, identificar y enumerar por mtodos convencionFciles de aislar, identificar y enumerar por mtodos convencionFciles de aislar, identificar y enumerar por mtodos convencionales.ales.ales.ales.

Incrementar su nmero al aumentar el grado de contaminacin en eIncrementar su nmero al aumentar el grado de contaminacin en eIncrementar su nmero al aumentar el grado de contaminacin en eIncrementar su nmero al aumentar el grado de contaminacin en el medio.l medio.l medio.l medio.

Aplicables a cualquier tipo de agua.Aplicables a cualquier tipo de agua.Aplicables a cualquier tipo de agua.Aplicables a cualquier tipo de agua.

Mayor y ms predecible el tiempo de supervivencia que los patgeMayor y ms predecible el tiempo de supervivencia que los patgeMayor y ms predecible el tiempo de supervivencia que los patgeMayor y ms predecible el tiempo de supervivencia que los patgenos.nos.nos.nos.


13/47

13

Caractersticas que debe tener un indicador:

Actualmente se adicionan los siguientes:Actualmente se adicionan los siguientes:Actualmente se adicionan los siguientes:Actualmente se adicionan los siguientes:

Las pruebas para su determinacin deben ser baratas para el procLas pruebas para su determinacin deben ser baratas para el procLas pruebas para su determinacin deben ser baratas para el procLas pruebas para su determinacin deben ser baratas para el procesamiento deesamiento deesamiento deesamiento denumerosas muestras.numerosas muestras.numerosas muestras.numerosas muestras.

No deben ser microorganismos patgenos (reducir el riesgo a la sNo deben ser microorganismos patgenos (reducir el riesgo a la sNo deben ser microorganismos patgenos (reducir el riesgo a la sNo deben ser microorganismos patgenos (reducir el riesgo a la salud de losalud de losalud de losalud de losanalistas).analistas).analistas).analistas).

Los resultados negativos del indicador empleado en una muestra dLos resultados negativos del indicador empleado en una muestra dLos resultados negativos del indicador empleado en una muestra dLos resultados negativos del indicador empleado en una muestra de agua noe agua noe agua noe agua nogarantizan que la ausencia de microorganismos patgenos.garantizan que la ausencia de microorganismos patgenos.garantizan que la ausencia de microorganismos patgenos.garantizan que la ausencia de microorganismos patgenos.

La deteccin de un microorganismo patgeno no est normalmente aLa deteccin de un microorganismo patgeno no est normalmente aLa deteccin de un microorganismo patgeno no est normalmente aLa deteccin de un microorganismo patgeno no est normalmente asociado a unsociado a unsociado a unsociado a unindicador ni tampoco indica la ausencia o presencia de otros patindicador ni tampoco indica la ausencia o presencia de otros patindicador ni tampoco indica la ausencia o presencia de otros patindicador ni tampoco indica la ausencia o presencia de otros patgenos.genos.genos.genos.

Ejemplos de varios mtodos relacionados con el anlisis demicroorganismos.

Crecimientoselectivo en agar,conteo deunidadesformadoras decolonias

Filtracin pormembrana

Bacteria

Tincininmunolgica/conteode quistesfluorescentes

Filtracin porpor cartuchos/

Separacininmunomagntica

Protozoosparsitos

Viruses

Cultivo declulas/efectocitoptico, conteode unidadesformadoras deplaca

Deteccin/Enumeracin

Adsorcin-elucinConcentracin

Grupos de microorganismos

Mtodos


14/47

14

Mtodos para la identificacin y cuantificacin deindicadores y patgenos bacterianos en aguas.

MTODOS CONVENCIONALES

* CUALITATIVO Ausencia/ Presencia { Hisopo de Moore{ Cultivo directo a) Volumen/volumen

b) Dilucionesc) Concentracin

* CUANTITATIVO Tubos Mltiples: NMP { a) Diluciones decimalesb) Concentracin por

Filtro de membranaTierra de diatomeas

Filtro de membrana: UFC { Concentracin

10-1 10-2Peptonasalina

20 ml

Diluciones

0,01ml

0,1 ml1 ml10 ml100ml

1 ml1 ml 1 ml10 ml100ml

FILTRACIN POR MEMBRANA (FM)


15/47

15

Podra ser mejor el recobrado de microorganismosdaados o estresados en algunas circunstancias

El costo de los recursos es alto en algunos pasesLos recursos estn disponibles en la mayora de lospases

No es aplicable a aguas turbiasAplicable a todo tipo de agua

Capaz de ser adaptado en el campoNo se puede adaptar a trabajo de campo

Los resultados son obtenidos directamente porconteo de colonias (alta precisin)

Los resultados son obtenidos indirectamente poraproximacin estadstica (baja precisin)

Menos sensibleMs sensible

Requiere menos cristaleraRequiere ms cristalera

Requiere menos medio de cultivoRequiere ms medio de cultivo.

Menos laboriosoMs laborioso

Ms rpida, resultados cuantitativos o presuntivosalrededor de 8 horas.

Ms lenta, requiere 48 horas para observar lapositividad

Tcnica de Filtracin por membranaTcnica de tubos mltiples

Comparacin de dos mtodos de ensayo ms utilizados en lavigilancia de la calidad microbiolgica del agua.

Conteo totalde bacterias hetertrofas.

Bacterias que requieren el carbono orgnico para sucrecimiento. Incluyen la flora autctona y la alctona

presente.

Se utiliza fundamentalmente la efectividad del proceso detratamiento de agua.

Es una medida del nmero de organismos con posibleimportancia sanitaria por ej. en aguas de hemodilisis

Podra ser una medida de la interferencia posible a latcnica de coliformes fecales con medios de cultivo conlactosa.


16/47

16

Biofilm o biopeliculaColonias de bacterias asentadas sobre las superficies de loscircuitos hidrulicos, protegidas por un ecosistema de

precipitados minerales y una matriz polisacrida mucosaextracelular, que se reproducen y generan en lugares deestancamiento. Su presencia se asocia a fuertecontaminacin bacteriana >1000 UFC/ml. Es fuente activade endotoxinas y otros derivados bacterianosbiolgicamente activos. Es resistente a la mayora de los

desinfectantes.

Biofilm o biopelicula


17/47

17

Biofilm o biopeliculaSon comunidades bacterianas englobadas en una matriz deexopolisacridos producida por las bacterias y adheridas auna superficie viva o inerte.

En la naturaleza constituyen un modo de crecimientoprotegido que permite la supervivencia de las bacterias enun medio hostil.

Las estructuras que forman estas microcolonias contienencanales por los que circulan los nutrientes, y en las distintas

partes del biofilm las clulas expresan diferentes genes,como si fueran un tejido organizado.


18/47

18

Conteo de bacterias hetertrofasVerificar efectividad de los procedimientos delimpieza y desinfeccin.

Determinar el origen de la contaminacindurante el proceso de dilisis.

Verificar condiciones ptimas de almacenamientoy transporte del agua utilizada para alimentar el

sistema de dilisis.

Grupo Coliforme

El trmino coliforme fue usado por primera vez en losaos 1980 y descrito como bacilos curvos aislado de heceshumanas.

Pertenecen taxonmicamente a la familiaEnterobacteriaceae y comprende algunos gneros yespecies.

De los coliformes normalmente presentes en el intestino

de los animales de sangre caliente, las bacterias de laespecie E.coli son la mas numerosas y las que raramentecrecen en el ambiente.


19/47

19

Distribucin del grupo coliforme en

heces de humanos y animales.

4.0 (A)

7.4 (B)2.0 (A)94.0 (A)

92.6 (B)Heces animales

1.7 (A)1.5 (A)94.1 (A)

96.8 (B)Heces humanas

Enterobacter/Citrobacter

Klebsiella sp.E.coli

Porcentaje de coliformes totalesTipo de muestra

(A) Dufour(1977)

(B) Allen y Edberg(1995)

Coliformes totales

Representacin grfica del grupo coliforme

Coliformes fecales(actualmente termotolerantes)

Escherichia coli

(

95% de los coliformes en las heces)


20/47

20

Coliformes totales (CT)

No son un grupo taxonmico

Bacterias Gram Negativas

No esporulados

Anaerobios facultativos

Fermentadores de la lactosa con produccin de cido y

gas a 361 C en 24-48h

Hbitat: Tracto gastrointestinal de animales de sangre

caliente (son bacterias entricas,) adems son comunes enotros ambientes como en suelos, vegetales, etc.

Ej.: Escherichia coli, Enterobacter spp., Citrobacter spp.,

Klebsiella spp.

Coliformes termotolerantes o fecales (CF)

No son un grupo taxonmico (Subgrupo de lo CT)


No esporulados


Fermentadores de la lactosa con produccin de cido y gas

a 361 C en 24-48h y a 44.5 0.2 C en 24 h

Hbitat: bacterias entricas propias de las heces (E. coli,...)


21/47

21

Escherichia coli

Especie bien definida taxonmicamente


No esporulados


Fermentadores de la lactosa con produccin de cido y gas

a 361 C en 24-48h y a 44.5 0.2 C en 24 h

Caracterstica de heces de animales homeotermos

Crecimiento(Turbidez)

Crecimiento(Turbidez)

Caldo Dextrosaazida (Presuntiva)Medio de Pfizer(Confirmativa)

Enterococos(Incubar 35C 0.5C)

Produccin de gasy cido

Caldo EC(Confirmativa)

Coliformestermotolerantes(Incubar 44.5C 0.2C)



Caldo Lactosado oCaldo Lauril Sulfato(Presuntiva)

Caldo Bilis verdeBrillante

(Confirmativa)

Coliformes totales(Incubar 35C 0.5C)

Reaccin PositivaMedio de CultivoIndicador Bacteriano

Coliformes y enterococos-Tubos mltiples de fermentacin


22/47

22

100,10,1m-Enterococos(Slanetz Bartley)

Enterococos(Incubar 35C 0.5C)

24- 48 h

100,10,1m-FCColiformestermotolerantes

(Incubar 44.5C0.2C)

100,10,1Agar Endo LES oMedio m-Endo

Coliformes totales(Incubar 35C 0.5C)

Volumen inoculado(mL)

Medio de CultivoIndicador Bacteriano

Coliformes y enterococos-Filtracin por membrana

m-FC

m-Enterococos

m-Endo LES


23/47

23

Ejemplos de gnero y especies del Grupo Coliforme

dentro de la familia Enterobacteriaceae

Citrobacter diversus

Citrobacter freundii

Citrobacter

Enterobacter cloacaeEnterobacter aerogenes

Enterobacter

Klebsiella pneumoniaeKlebsiella oxytoca

Kebsiella

Escherichia coliEscherichia

EspecieGnero

Estreptococos fecales y Enterococos

No forman un grupo taxonmico bien definido

Incluyen especies de los gneros Enterococcus y Streptococcus

Ej.: E. faecalis, E. faecium, E. durans, E. hiriae, E. avium,

E.gallinarum, E. cecorum y Streptococcus bovis, S. equinus,

S.intestinalis, S. alactolyticus, S. hyointestinalis y S.acidominimus

Los Enterococos segn el criterio de Shermans

Crecimiento a 35-45 C en 48h en medios estandarizados

Capacidad de crecer a 10 y 45 C, a pH 9,6, en presencia de 6,5%

NaCl y de resistir a 60 C durante 30 min

Crecimiento a pH 9.6


24/47

24

Estn an en etapa de desarrollo.

La baja concentracin de patgenos en el agua dificultan lasensibilidad de los mtodos de deteccin.

Slo una pequea parte del gran nmero de patgenos presentesson detectados.

El anlisis de las muestras de aguas para patgenos requiere deun laboratorio especializado con personal altamente calificado y

entrenado y apropiadas medidas de bioseguridad.Aunque algunos patgenos pueden ser examinados rpidamente,la mayora de los mtodos de muestreo y deteccin necesitan variosdas para verificar el resultado.

Mtodos para deteccin de microorganismos patgenos.

1. Mtodos de filtracin.

Adsorcin/ elucin de virus

Ultrafiltracin

2. Mtodos inmunolgicos

Separacin inmunomagntica (IMS)

3. Floculacin.

Adsorcin de virus con hidrxido de aluminio.

Floculacin de quistes de Cryptosporidium con carbonato de calcio.4. Centrifugacin

Flujo continuo de centrifugado

Separacin/aislamiento por densidad de gradiente

5. Citometra de flujo.

6. Tcnicas de preenriquecimiento y enriquecimiento.

7. Otra tcnicas (hidroextraccin, extraccin por solventes).

Mtodos para el anlisis de microorganismos patgenos.


25/47

25

1. Cultivo de bacterias.

Tcnica del Nmero Ms Probable (NMP) en medio lquido.

Prueba de Presencia/Ausencia en medio lquido.

Placa vertida.

Filtracin por membrana.

Enriquecimiento en medio lquido +confirmacin o aislamientoen medio slido.

2. Cultivo en clulas hospederas.

Cultivo de fagos.

Cultivo de virus (ej. Enterovirus)

Cultivo de protozoos sobre medios artificiales (ej. Entamoeba

hystolitica y Giardia lamblia).

Tcnicas de cultivo de patgenos (ms convencionales).

Gnero Salmonella

Microorganismos pertenecientes a la familia Enterobacteriaceaeque tienen las siguientes caractersticas:

Bacilos Gram Negativos, catalasa y oxidasa negativo.

Anaerobios facultativos, usualmente fermentan la glucosa conproduccin de gas y de sulfuro de hidrgeno.

Citrato es utilizado como nica fuente de carbono.

Decarboxilan la lisina y la ornitina.

La mayora de los diferentes serotipos (ms de 2 000) estnpresentes en animales domsticos y salvajes y pueden serreservorios de la salmonelosis humana

Patgenos bacterianos ms frecuentes determinados en aguas.


26/47

26

Flujograma de la tcnica deSalmonella sp.

Muestra de agua

Siembra directa Hisopo de Moore Filtracin por membrana

Agua peptonada bufferada (APB)

18-24h/35-37 C

Caldo Rappaport Vassiliadis (RV) radio inculo: 1/100Caldo Tetrationato Muller Kauffmann radio inculo: 10/100

24h/42 C

Agar Verde BrillanteAgar Salmonella Shigella

Agar XLD

18-24h/37 C

Agar Kligler

18-24h/37 CCultivos con imagen presuntiva

Pruebas bioqumicas y serolgicas


Gnero Vibrio.

Microorganismos pertenecientes a la familia Vibrionaceae que

tienen las siguientes caractersticas:

Bacilos Gram negativos, no esporulados, rectos o curvos de

0.5-0.8 m de ancho y 1.5-3.0 m de largo.

Aerobios y anaerobios facultativos.

Mviles por flagelos monotricos o lofotricos.

La mayora de las especies son oxidasa y catalasa positiva y

fermentan la glucosa con produccin de cido (sin gas).

Generalmente haloflicos y su hbitat natural en ambientes

marinos y estuarinos.


27/47

27

Modelo hipottico de transmisin de Vibrio cholerae en la naturaleza.

Caractersticas fsicasy qumicas del agua

temperaturaluz solartensin de O2 disueltopHlluviasalinidad y otrosnutrientes qumicos

Caractersticas biolgicas

afloramiento de algasafloramiento de fitoplancton

Afloramiento de zooplancton(entra en los no cultivables ?)

V. choleraeV. choleraeV. choleraeV. cholerae viable pero no cultivable en lacolumna de agua adherido a partculas.(relacin de simbiosis o comensal?)

Transmisin de V. choleraeV. choleraeV. choleraeV. cholerae al hombre poringestin de agua con coppodoscolonizados u otros vectores.

Retorno de V. choleraeV. choleraeV. choleraeV. cholerae alagua por va fecal.

Caractersticas fsicasy qumicas del agua

temperaturaluz solar

tensin de O2 disueltopHlluviasalinidad y otros

nutrientes qumicos

Caractersticas biolgicas

afloramiento de algas

afloramiento de fitoplancton

Afloramiento de zooplancton

(entra en los no cultivables ?)

V. choleraeV. choleraeV. choleraeV. cholerae viable pero no cultivable en lacolumna de agua adherido a partculas.(relacin de simbiosis o comensal?)

Transmisin de V. choleraeV. choleraeV. choleraeV. cholerae al hombre poringestin de agua con coppodoscolonizados u otros vectores.

Retorno de V. choleraeV. choleraeV. choleraeV. cholerae alagua por va fecal.

La fisiologa y ecologa de Vibrio cholerae en aguas

est estrechamente ligada a tres factores principales:

(1)la relacin de temperatura y salinidad,

(2) adherencia a superficies

(3) colonizacin de la macrobiota con quitina.


28/47

28

Flujograma de la tcnica de Vibrio cholerae.

Muestra de agua

Siembra directa Hisopo de Moore Fi ltracin por membrana

Agua peptonada alcalina (APA)6-8 h y 18-24h/35-37 C

Agar TCBSAgar MacConkey

18-24h/37 C

Agar Kligler

18-24h/37 C

Cultivos con imagen presuntivaPruebas bioquas y serolgicas

Flujograma para el aislamiento de Vibrio cholerae en plantas acuticas.

Plantas acuticas

Pesar 10gr de la muestra (porcin apropiada) y

Homogeneizar con 90ml de solucin salina estril

Enriquecimiento de 10ml en 5ml de APA (3X)

Incubar por 6-4 horas

Estriar sobre agar TCBS y agar TTGA

Incubar por 18-24 horas a 37C

Picar colonias sospechosas y subcultivar sobre placas de AG

Identificacin preliminar por la prueba de oxidasa

Pruebas bioqumicas y serolgicas para Vibrio cholerae


29/47

29

Gnero Aeromonas (Familia Aeromonadaceae)

Bacterias en forma de bacilos Gram negativos, no esporulados, de


Aerobios - anaerobios facultativos.

Mviles por flagelos monotricos o lofotricos.


fermentan la glucosa con produccin de cido.

Tienen requerimientos nutricionales simples.

Su hbitat natural es en ambiente dulceacucola.


Infecciones asociadas al gnero Aeromonas

Causa infecciones en animales de sangre fra y caliente.

En humanos son agentes causales de infecciones intestinales(diarrea, la ms frecuente manifestacin clnica) yextraintestinales (infecciones en heridas).

En peces y algunos animales de sangre fra, pueden causarinfecciones severas tales como la furunculosis.


30/47

30

Taxonoma.Gnero: Aeromonas (Stanier 1943)Familia: Aeromonadaceae (Colwell et al. 1986)Orden: Aeromonadales (Martin-Carnahan y Joseph, 2005)Especies:Aeromonas allosaccharophila (Martinez-Murcia et al. 1992, sp. nov.)Aeromonas caviae (ex Eddy 1962, Popoff 1984, sp. nov.) A. punctata subsp.caviae (Scherago, 1936)Aeromonas culicicola (Pidiyar et al. 2002, sp. nov.) Aeromonas veroniibiovar sobria (Hickman-Brenner et al. 1988).Aeromonas encheleia (Esteve et al. 1995).Aeromonas enteropelogenes (Schubert et al. 1991 sp. nov.) Aeromonas trota(Carnahan et al. 1992).Aeromonas eucrenophila (Schubert y Hegazi 1988, sp. nov.)Aeromonas hydrophila (Chester 1901, Stanier 1943)

Aeromonas hydrophila subsp. anaerogenes (Schubert 1964)Aeromonas hydrophila subsp. dhakensis (Huys et al. 2002)AAeromonas hydrophila subsp. hydrophila (Chester, 1901)Aeromonas hydrophila subsp. proteolytica (Merkel et al. 1964)Aeromonas hydrophila subsp. ranae (Huys et al. 2003 subsp. nov.)Aeromonas ichthiosmia (Schubert et al. 1991, subsp. nov.)Aeromonas jandaei (Carnahan et al. 1992, sp. nov.)Aeromonas media (Allen et al. 1983, sp. nov.)Aeromonas molluscorum (Minana-Galbis et al. 200, sp. nov.)Aeromonas popoffii (Huys et al. 1997, sp. nov.)

Flujograma de la tcnica de Aeromonas sp.

Muestra de agua

Hisopo de Moore Filtracin por membrana

Agua peptonada alcalina

6-8h,18-24h/35-37CAgar BBGS segn Nishikawa o agar ADA

Agar MacConkey

18-24h/37C

Agar Kligler

18-24h/37CCultivos con imagen presuntiva

Pruebas bioqumicas


31/47

31

Gnero Plesiomonas

Bacterias en forma de bacilos Gram negativos, no esporulados, de


Aerobios y anaerobios facultativos.

Mviles por flagelo polar.


fermentan la glucosa con produccin de cido (sin gas)

Tienen requerimientos nutricionales simples.Su hbitat natural es en ambiente dulceacucola.


Taxonoma.

Plesiomonas shigelloides corrig. (Bader 1954) Habs y Schubert 1962

Anteriormente perteneciente a la familia Vibrionaceae, propuestaactualmente dentro de la familia Enterobacteriaceae como unmiembro del gnero Proteus o como un gnero solo con una nicaespecie (Plesiomonas shigelloides).

Conocida tambin como:

Pseudomonas shigelloidesAeromonas shigelloides

Fergusonia shigelloides


32/47

32

Algunas pruebas de diferenciacin de los gneros Vibrio, Aeromonas yPlesiomonas.

--NT+dddd6% de NaCl

++NT+++++3% de NaCl

++---dddCrecimientoen:

0% de NaCl

dR&NTSSSSSO/129 150g disco

+------dOrnitina decarboxilasa

+d---d-+Lisina decarboxilasa

++---++-Arginina dihidrolasa

++--+-++Nitrato

++-++-++Oxidasa

87654321PRUEBAS

GRUPOS

Simbolos: + todas las cepasson positivas,-todas las cepasson negativas, d diferentes caractersticasde cepa a cepa, S sensible, R resistente, NT no probada.Grupo1 : V. cholerae, V. mimicus, V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. harveyi, V. campbellii, V. fischeriy V. marinus.Grupo2: V. fluvialis, V. furnissii, V. anguillarum, V. diazotrophicus, V. splendidusbiovar 1, V. tubiashii, V. costicola, V. nereis, V. damsela, V. proteolyticus, V.orientalisy V. aestuarianus.Grupo3 : V. metschnikovii.Grupo4 : V. hollisae, V. natriegens, V. splendidusbiovar II, V. nigripulchritudoy V. logei.Grupo5 : V. ordalii.Grupo6 : V. gazogenes.Grupo7 : A. hydrophila, A. caviae, A. sobriay A. salmonicida.Grupo8 : P. shigelloides.& algunascepas de A. salmonicidason sensibles.Nota: Todaslas cepas de Aeromonasfermentanla glucosa.Fuente: Lee JV, DonovanTJ. Vibrio, Aeromonasand Plesiomonas. En: Isolation and Identification of Microorganisms of Medicaland Veterinary Importance. United Kingdom: Society for Applied Bacteriology, 1985:13-33.

Gnero Legionella

Bacterias en forma de bacilos.

Su hbitat natural es en ambiente dulceacucola.

Se multiplica entre 20-45C y se destruye a 70 C.

Comprende 40 especies, siendo Legionella pneumophila la

mas comn asociada a enfermedad.

Posee una caracterstica biolgica importante que es la de

crecer intracelularmente en protozoos y en macrfagos

humanos.


33/47

33

Caractersticas de la enfermedad de los Legionarios y la fiebre dePontiac.

No se conocen factores deriesgo

Factores de riesgo: fumadores,cncer, enfermedades renales,diabetes mellitus

Perodo de incubacin deaprox. 36 h

Perodo de incubacin de 2-10das

Similar a una influenza (noneumnica)

Neumona progresiva, algunasveces fatal

Fiebre de PontiacEnfermedad de los Legionarios

Mayor reservorio de Legionellasp.: AGUA

Medio de transmisin primario:

Inhalacin de bioaerosoles (en forma de gotas que deben ser de unamedida entre 1-5m)

Fuentes conocidas para la transmisin de Legionella sp. porbioaerosoles.

Condensadores de torres de evaporaciny enfriamiento, piscinas de recreacin yde hidroterapia, saunas, spasOrnamentales de agua ornamentales,humedificadores

No potable(incluidas lasaguasmineromedicinales)

Duchas, grifos, equipos de terapiarespiratoria

Potable

Medios de transmisinTipo de agua


34/47

34

Ejemplos de pruebas bioqumicas y serolgicas.

Caldo para la fermentacin de azcares(sacarosa, L-arabinosa y D-manosa; manitol e inositol)

Caldo de tolerancia a sales

Prueba serolgica con antisueroPrueba de la cuerda

Mtodo de concentracin por hisopo de Moore


35/47

35

Mtodo de concentracin por filtracin por membrana

XAgar Chromocult enterococos (Merck)

XAgar Chromocult coliformes ES (Merck)

XAgar Chromocult coliformes (Merck)XCaldo Fluorocult Lauril Sulfato (Merck)

XCaldo LMX segn Manafi y Ossmer(Merck)

XCaldo READYCULT enterococos (Merck)

XCaldo READYCULT coliformes (Merck)

XCaldo Enterolert (IDEXX)

XCaldo Colilert (IDEXX)

Estreptococosfecales/ enterococos

Coliformes totales/Escherichia coli

Medio de cultivo (Compaa)

Medios de cultivo cromognicos y fluorognicos tiles para laevaluacin de la calidad microbiolgica del agua en situaciones deemergencias y desastres


36/47

36

Mtodos moleculares para la deteccin e identificacin.Biologa molecular: disciplina bioqumica que estudia las molculasde cidos nucleicos: cido desoxirribonucleico (ADN) y cidoribonucleico (ARN)

Hibridacin del ADN.

Endonucleasas de restriccin.

Amplificacin de cidos nucleicos (ADN o ARN).

Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), la ms empleada en la deteccin debacterias y sus productos (ej. Escherichia coli, Vibrio cholerae, Legionella

pneumophila) y protozoos.

Clonacin molecular(fragmento de restriccin insertado en un vector ej fago)

Secuenciacin nucleotdica del ADN.

Fluorescencia por hibridizacin in situ (FISH) para deteccin de bacterias yprotozoos.

Fuente:www.udc.es Fuente:www.tododrogas.net Fuente:www.ciencia-hoy.retina.ar

Clulas viables y no cultivables de Vibrio choleraepor microscopa de epifluorescencia.


37/47

37

Mtodos novedosos para la deteccin e identificacin.Anlisis por lser escner con sustratos fluorognicos.

(ej. Deteccin de coliformes y E. colipor ChemScan, Chemunex, Colifast)

Biosensores.

(ej. poseen tres componentes primarios: pticos, tcnicas de inmunoensayo ypruebas qumicas para la deteccin de patgenos especficos).

Microchip de DNA.

(ej. para la deteccin de indicadores y patgenos con la deteccin de DNA porGeneChip).

Fuente:www.acg.no Fuente: sid.gsi.co.jp Fuente:www.consumaseguridad.com Fuente:privatewww.essex.ac.uk

Colifast ChemScan Biosensores Genechip

Microbiolgicas (coliformes totales y fecales)InglaterraDELAgua

Microbiolgicas (coliformes totales y fecales)Francia,Estados Unidos

Millipore Intertech

Fsico - Qumicas (Aluminio, Amonio, Calcio, Hierro,Fosfato, Manganeso, Nitrito, Nitrato, pH, conductividad,

turbiedad, oxgeno disuelto, etc.)

InglaterraHach Company

Fsico - Qumicas (Aluminio, Amonio, Calcio, Hierro,Fosfato, Manganeso, Nitrito, Nitrato, pH, conductividad,turbiedad, oxgeno disuelto, etc.)Microbiolgicas (coliformes totales y fecales)

InglaterraPotopak Limited

Fsico - Qumicas (Aluminio, Amonio, Calcio, Hierro,Fosfato, Manganeso, Nitrito, Nitrato, pH, conductividad,turbiedad, oxgeno disuelto, etc.)Microbiolgicas (coliformes totales y fecales)

InglaterraELE InternacionalLTD

Fsico - Qumicas (Aluminio, Amonio, Calcio, Hierro,Manganeso, Nitrito, Nitrato, pH, etc.)

InglaterraBDH Lab Supplies

DeterminacionesPasCompaa

Algunos equipo porttiles para el monitoreo de la calidad del aguamuy tiles en situaciones de emergencia y desastres


38/47

38

Qu es una norma?Es un documento establecido por consenso y aprobadopor un organismo reconocido que establece, para usos

comunes y repetidos, reglas, criterios o caractersticaspara las actividades o sus resultados, que procura laobtencin de un nivel ptimo de ordenamiento en un

contexto determinado.

Surge como resultado de la actividad de normalizaciny es un documento que establece las condiciones

mnimas que debe reunir un producto o servicio para quesirva al uso al que est destinado.

Fuente:www.crid.or.cr

Caractersticas de la norma:

Es un documento pblico, pueden ser referenciadas, consultadas y

utilizadas.

Su aplicacin es voluntaria pero en la mayora de los casos, las

autoridades pueden dictar leyes o reglamentos obligatorios que

exigen dichas normas.

Ayudan a mejorar la calidad, la seguridad y la competencia.

Una norma tcnica o estndar es un especificacin que reglamenta

los procesos y productos para garantizar la interoperabilidad.

Una norma de calidad es una regla o directriz para las actividades,

diseada con el fin de conseguir el grado ptimo de orden en el

contexto de calidad.

Las normas estn en constante revisin y este proceso se comienza

cada vez que existan observaciones slidas a incorporar.


39/47

39

Organismos internacionales que ms frecuentementese emplean sus guas y normativas para la calidad delagua y los mtodos de ensayo

Siglas empleadas:

ISO: International Standardization Organization (Suiza)

APHA: American Public Health Association (Estados Unidos)

SCA: Standing Committee of Analyst of Environment Agency (Reino Unido)

EPA: Environment Protection Agency (USA)

WHO: World Health Organization (Suiza)

CEE: Comisin Econmica Europea

Normas de mtodos de ensayo asociados a laevaluacin de la calidad microbiolgica del agua.

ISO 7899-1 (1984) Water quality-Detection and enumeration offaecal streptococci-Part 1: Method by enrichment in liquidmedium.ISO 7899-2 (1984) Water quality-Detection and enumeration offaecal streptococci-Part 2: Method by membrane filtration.

Estreptococos fecales

Estreptococos fecales

ISO 7899-2 (2000) Water quality-Detection and enumeration ofintestinal enterococci -Part 2: Membrane filtration method.

Enterococos fecales

ISO 7899-1(1998) Water quality-Detection and enumeration ofintestinal enterococci in surface and waste water-Part 1:Miniaturized method (Most Probable Number) by inoculation inliquid medium.

Enterococos fecales

ISO 9308-2 (1990) Water quality-Detection and enumeration ofcoliforms organisms, thermotolerant coliforms organisms andpresumptive Escherichia coli-Part 2: Multiple tube (mostprobable number) method.

Bacterias coliformes,termotolerantes yEscherichia coli

ISO 9308-1 (2000) Water quality-Detection and enumeration ofEscherichia coli and coliform bacteria-Part 1: Membranefiltration method.

Bacterias coliformes,termotolerantes yEscherichia coli

NormaMicroorganismos


40/47

40

Normas de mtodos de ensayo asociados a la evaluacin

de la calidad microbiolgica del agua (cont..)

ISO 8360-2 (1998) Water quality-Detection and enumeration of

Pseudomonas aeruginosa-Part 2: Membrane filtration method.

Pseudomonas

aeruginosaISO 8360-1 (1998) Water quality-Detection and enumeration ofPseudomonas aeruginosa-Part 1: Method by enrichment inliquid medium.

Pseudomonasaeruginosa

ISO 6461-1 (1986) Water quality-Detection and enumeration ofthe spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia)-Part 1:Method by enrichment in liquid medium.

Bacteriasesporuladasreductoras de sulfito(Clostridios)

ISO 6461-2 (1986) Water quality-Detection and enumeration ofthe spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia)-Part 2:Method by membrane filtration method.

Bacteriasesporuladasreductoras de sulfito(Clostridios)


Normas de mtodos de ensayo asociados a la evaluacinde la calidad microbiolgica del agua (cont..)

ISO 6340 (1995) Water quality-Detection and enumeration ofSalmonella.

Salmonella sp.

ISO 6222 (1999) Water quality-Enumeration of culturablemicroorganisms-Colony count by inoculation in a nutrientagar culture medium.

Microorganismoscultivables

ISO/DIS 11731-2 Water quality-Detection and enumeration ofLegionella-Part 2: Direct membrane filtration for waters withlow bacterial counts.

Legionella sp.

ISO 11731 (1998) Water quality-Detection and enumeration ofLegionella Legionella.

Legionella sp.



41/47

41

Normas de mtodos de ensayo asociados a la evaluacin

de la calidad microbiolgica del agua (cont..)

ISO 10705-4 Water quality-Detection and enumeration ofbacteriophages- Part 4: Enumeration of bacteriophagesinfecting Bacteroides fragilis.

Fagos deBacteroides fragilis

ISO/DIS 10705-3 Water quality-Detection and enumeration ofbacteriophages- Part 3: Validation of methods forconcentration of bacteriophages from water.

Concentracin debacterifagos

ISO 10705-2 (2000) Water quality-Detection and enumerationof bacteriophages-Part 2: Enumeration of somatic coliphages.

Colifagos somticos

ISO 10705-1 (1995) Water quality-Detection and enumerationof bacteriophages- Part 1: Enumeration of F-specific RNAbacteriophages.

Fagos F-RNA


Normas de mtodos de ensayo asociados a la evaluacinde la calidad microbiolgica del agua (cont..)

ISO/CD 17994 Water quality-Criteria for the establishment ofequivalence between microbiological methods.

Pruebas deequivalencia demtodos de cultivomicrobiolgicos

ISO 9998 (1991) Water quality-Practice for evaluating andcontrolling microbiological colony count media used in waterin water quality tests.

Evaluacin deconteo de colonias

ISO TR 13843 (2000) Water quality-Guidance on validation ofmicrobiological methods.Validacin demtodos de cultivomicrobiolgicos

ISO 7704 (1985) Water quality-Evaluation of membrane filtersused microbiological analyses.

Evaluacin de filtrosde membrana

CEN/TC 230 CEN/TC230/WG3/TG. Enterovirus (Nr.12), WorkingDocument, Draft Method, March 2000.

Enterovirus



42/47

42

Medios de cultivo normalizados ms utilizados para la determinacin decoliformes, coliformes termotolerantes y Escherichia coli (NMP).

XAgar nutriente

XAgar MacConkey

XCaldo manitol lauril triptosa

XMedio de glutamatomodificado con minerales

XXMedio A1

XXXXCaldo lactosa bilis verdebrillante

XXXMedio EC

XMedio de lactosa glutamato

XCaldo lactosado lauriltriptosa

XCaldo MacConkey

XXCaldo lactosado

NCEPASCAAPHAISO 9308-2

Medios de cultivo

Medios de cultivo normalizados ms utilizados para la determinacin decoliformes, coliformes termotolerantes y Escherichia coli(FM).

XAgar nutriente

XCaldo de lauril sulfato paramembrana

XXXAgua de triptona

XAgar nutriente con MUG

XAgar MI

XAgar mEndo

XAgar mTEC

XAgar lauril sulfatoXXAgar m-EndoLES

XXMedio mFC con 1% de cidoroslico

XCaldo Teepol conenriquecimiento demembrana

XAgar lactosa con Tergitol 7 oTeepol

XAgar TTC con Tergitol 7 oTeepol

EPASCAAPHAISO 9308-1Medios de cultivo


43/47

43

Medios de cultivo normalizados ms utilizados para la determinacin deestreptococos fecales (enterococos)(FM).

XXXAgar bilis esculina

XXCaldo de infusin de cerebro-corazn

XXAgar de infusin de cerebro-corazn

XAgar bilis esculina azida

XXAgar hierro esculina

XAgar mEI

XAgar Kanamicina esculinaazida

XXAgar m-Enterococcus

XXAgar m-E

XXAgar Slanetz-Bartley con 1%de TTC

XAgar KF con 1% de TTC

EPASCAAPHAISO 7899-2Medios de cultivo


44/47

44

Medios de cultivo normalizados ms utilizados para la determinacin dePseudomonas aeruginosa(NMP).

XXXXCaldo asparagina

XAgar leche con cetrimida

XXAgar King-F

XXAgar King-P

XCaldo malaquita

XXXCaldo acetamida

XCaldo asparagina conetanol

NCEPASCAAPHAISO8360-1

Medios de cultivo

Medios de cultivo normalizados ms utilizados parala determinacin de Pseudomonas aeruginosa(FM).

XAgar leche con cetyltrimetilamoniobromuro

XAgar Pseudomonas

XXXXAgar leche

XXXAgar m-PA

EPASCAAPHAISO8360-2

Medios de cultivo

Medios de cultivo ms recomendados para la determinacin deindicadores bacterianos con sustratos cromognicos y fluorognicos.

XAgar mTEC (Difco) (EPA)

XAgar Chromocult (Merck) (Oxoid)(ISO)

XAgar MI (EPA)

XAgar nutriente con MUG (EPA)

XCaldo LMX segn Manafi y Ossmer(Merck)

XCaldo READYCULT enterococos(Merck)

XCaldo READYCULT coliformes (Merck)

XCaldo Colilert (P/A) (EPA)

Estreptococos/enterococos

Coliformes/Escherichia coli

Medios de cultivo


45/47

45

Medios de cultivo ms utilizados en la determinacin de algunos patgenosbacterianos aislados en aguas. Salmonella sp y Salmonella typhi.

XXCaldo tretationato

XXXAgar tres azcares (TSI)

XXXCaldo urea

XAgar urea

XXXAgar hierro lisina

XAgar Kligler

XXXXAgar bismuto sulfito

XXAgar xilosa lisina desoxicolato(XLD)

XXXXAgar verde brillante con rojofenol

XXXCaldo selenito cistina

XXCaldo Rappaport Vassiliadis

XXXXAgua de peptona bufferada

EPASCAAPHAISO-6340Medios de cultivo

Medios de cultivo ms utilizados en la determinacin de algunos patgenosbacterianos aislados en aguas. Vibrio cholerae.

XXAgar nutriente

XXCaldo de decarboxilacin deaminocidos segn Moeller

XAgar Kligler

XXXAgar triptona soya

XAgar MacConkey

XXXAgar TCBS

XXXAgua de peptona

SCAAPHAOPSMedios de cultivo


46/47

46

Medios de cultivo ms utilizados en la determinacin de algunos patgenosbacterianos aislados en aguas. Aeromonas sp.

XXAgar nutriente

XAgar MacConkey

XAgar tres azcares

XMedio de Kaper

XAgar hierro lisina

XMedio de oxidacin fermentacinsegn Hugh & Leifson

XXXAgar ampicillin dextrina

XXXAgua de peptona bufferada

EPASCAAPHAMedios de cultivo

Dicen que el agua ser imprescindible

mucho ms necesaria que el petrleo,

los imperios de siempre por lo tanto

nos robarn el agua a borbotones,

los regalos de boda sern grifos,

agua darn los lauros de poesa,

el Nbel brindar una catarata

y en la bolsa cotizarn las lluvias,

los jubilados cobrarn goteras,

los millonarios dueos del diluvio

vendern lagrimas al por mayor,

un capital se medir por litros,cada empresa tendr su remolino,

su laguna prohibida a los forneos,

su museo de lodos prestigiosos,

sus postales de nieve y de rocos,

y nosotros los plidos sedientos

con la lengua reseca brindaremos

con el agua on the rocks

Neruda


47/47

Gracias

4 Metodos Ensayo Emergencia

Documents

Transcript of 4 Metodos Ensayo Emergencia