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23 y 24 de Agosto 2011; Monterrey, N.L., México Revista Salud Pública y Nutrición Edición Especial 3-2012 RESPYN

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23 y 24 de Agosto 2011; Monterrey, N.L., México

Revista Salud Pública y Nutrición Edición Especial 3-2012

RESPYN

Questions?!

PRUEBAS

PRETRANSFUSIONALES Y SU

CONTROL DE CALIDAD

Pruebas Pre-transfusionales?

Es un conjunto de procedimiento

in vitro que nos permiten conocer

si hay afinidad inmunológica entre

el hemocomponente a transfundir

de un donador hacia un receptor

( paciente).

OBJETIVO

SELECCIONAR COMPONENTES SANGUÍNEOS QUE

UNA VEZ TRANSFUNDIDOS TENDRÁN

UNASOBREVIVENCIA ACEPTABLE, CON EL MENOR

RIESGO ASOCIADO PARA EL RECEPTOR POTENCIAL

OBJETIVO

COMPATIBILIDAD ABO

ENTRE COMPONENTE

Y

RECEPTOR

OBJETIVO

DETECTAR LA MAYORIA DE ANTICUERPOS

INESPERADOS CLINICAMENTE SIGNIFICATIVOS

(ACTIVOS A 37 °C)

SOLICITUD

OP

ER

AD

OR

PRUEBAS

PRETRASFUSIONALES

RASTREO

PCM / PCm

AUTO

CONTROL

MU

ES

TR

A

METODO

ABO / Rh

PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES

PRUEBA MAYOR

PRUEBA MENOR

AUTOTESTIGO D R A

PRUEBAS

PRETRANSFUSIONALES

R Prueba Menor

AC Autocontrol

D Prueba Mayor

GR receptor +

Suero donador

GR donador +

Suero receptor

GR receptor +

Suero receptor

PRUEBAS SEROLOGICAS

TIPIFICACIÓN SABO

TIPIFICACION Rh

DESARROLLO DE LA

PRUEBA DE

COMPATIBILIDAD

SOLICITUD

Datos del Hospital, Instituto o unidad medica que solicita

Datos generales del paciente ( nombre, edad, sexo, cama, número de ingreso etc.)

Diagnóstico ( legible y sin iníciales)

Tipo de transfusión (urgente, ordinario, programada)

Datos previos de transfusión.

SOLICITUD

Medicamentos que este recibiendo ( antibióticos )

Datos clínicos ( Hb. Hto. TP, TPT, Plaquetas)

Unidad o componente sanguíneo solicitado ( Qué? y Cuántos?, características

requeridas)

Fecha y Hora en que se realizara la transfusión

Nombre completo y firma del médico que solicita la transfusión

SOLICITUD

UNIDAD MEDICA

PACIENTE

DATOS

CLINICOS

UNIDAD A

TRANSFUNDIR

DATOS DEL

RESPONSABLE

SOLICITUD DE PRODUCTOS SANGUÍNEOS

NOMBRE Y APELLIDOS

No. DE REGISTRO

FECHA DE

EXTRACCION

SOLICITUD DE PRODUCTOS SANGUÍNEOS

TIPO Y CANTIDAD DEL PRODUCTO

SOLICITADO (CE, PL, 250 ml,100ml)

DIAGNOSTICO O TIPO DE CIRUGIA

(LES, BYPASS)

GRADO DE URGENCIA

SOLICITUD DE PRODUCTOS SANGUÍNEOS

ANTECEDENTES TRANSFUSIONALES

ANTECEDENTES DE REACCIONES TRANSFUSIONALES Y TIPO DE REACCION

SOLICITUD DE PRODUCTOS SANGUÍNEOS

EN MUJERES No DE EMBARAZOS Y ABORTOS

MEDICO SOLICITANTE, SERVICIO

HORA Y FECHA DE LA SOLICITUD

PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES

ROTULADO ADECUADO DE LA MUESTRA

NOMBRE Y APELLIDOS

No. DE REGISTRO

FECHA DE EXTRACCION (ISO9000)

CONFIRMACION DE LA IDENTIDAD DE LA

MUESTRA

CONFIRMACION DE LA

IDENTIDAD DE LA

MUESTRA

CHECAR ROTULADO DEL

TUBO CON LA SOLICITUD

MEDIDAS DE SEGURIDAD Y CONTROL DE CALIDAD

REACTIVOS EMPLEADOS

DE LA MUESTRA PROBLEMA

DEL PILOTO DEL DONADOR

DE LA PRUEBA CRUZADA

HEMOCOMPONENTE

LAS UNIDADES A TRANSFUNDIR DEBERÁN DE CUMPLIR CON

LOS REQUISITOS DE SEGURIDAD NECESARIOS:

1.- GRUPO SANGUÍNEO Y Rh

2.-SEROLOGÍA NO REACTIVA.

3.-IDENTIFICACIÓN DEL DONANTE.

4.-FECHA DE EXTRACIÓN Y CADUCIDAD.

5.-DATOS DE HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITO.

6.-TIPO DE HEMOCOMPONENTE.

7.-VOLUMEN Y CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y/O

TRATAMIENTO ESPECIAL.

El inciso 10 de la NOM-003-SSA2-1993 par la disposición de la sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos que

corresponde a la sección de Hemocompatibilidad y Receptores, establece las características pertinentes de la prueba cruzada. 10.15 Las pruebas cruzadas de compatibilidad sanguínea, Deberán incluir aquéllas que permitan demostrar la ausencia de anticuerpos específicos regulares o irregulares de importancia clínica en el suero del receptor, contra los eritrocitos del disponente (prueba mayor)

PRUEBA DE

COMPATIBILIDAD

PRUEBA DE COMPATIBILIDAD

Asimismo, es recomendable demostrar la ausencia de

anticuerpos iregulares de importancia clínica en el suero del

disponente, contra los eritrocitos del receptor (prueba menor)

Las pruebas cruzadas incluirán pruebas de aglutinación en

medio salino, así como, en algún medio facilitador de la

reacción, rutinariamente se empleará la prueba de

antiglobulina humana (prueba de Coombs)

Las pruebas cruzadas deberán incluir un control que

permita detectar la presencia de autoanticuerpos.

A manera de control del procedimiento y del reactivo, en

cada prueba de Coombs interpretada como negativa, es

recomendable agregar células sensibilizadas con

inmunoglobulina G

PRUEBA DE COMPATIBILIDAD

La prueba cruzada presentará de una tres fases, dependiendo del medio en el que desarrolle. La más común emplea medio salino, por ende se divide en tres fases:

Salina rápida: descarta incompatibilidad ABO. Puede presentar aglutinación cuando hay presencia de Roleaux, presencia de autoanticuerpos o aloanticuerpos, tubo de muestra contaminado.

Salina a 37ºC: Incubación a 37ºC al menos 1 hora. Detecta anticuerpos de tipo IgG. Puede haber aglutinación en presencia de autoanticuerpos o aloanticuerpos. Permite diferenciar la presencia de anticuerpos fríos de los calientes.

Salina Coombs Fase final en la que se agrega el suero de Coombs (poliespecífico o monoespecífico).Detecta anticuerpo clínicamente significativos.

PRUEBA DE COMPATIBILIDAD

Existen diferentes tipos de reactivos de

Coombs.

– Gel-Coombs poliespecífico (anti-IgG +

anti-C3d)

– Gel- Coombs monoespecífico

– ( anti-IgG)

PRUEBA DE COMPATIBILIDAD

Potenciadores

LISS (Low Ionic Strength Saline): Incrementa la captura de anticuerpos , disminuye el tiempo de incubación.

ENZIMAS PROTEOLITICAS: (papaína, ficina, tripsina, bromelina) amplifica detección de anticuerpos anti-Rh, Kidd, Lewis, autoanticuerpos calientes y frios (excepción de Pr)

SOLUCIONES DE POLICATIONES (Polibrenos, sulfato de protamina) Induce agragación reversible, genera complejos Ag-Ab intactos, altamente sensible.

RASTREO

● Dentro de el protocolo de pruebas PRETANSFUSIONALES y de

REACCIÓN TRANSFUSIONAL se sugiere la búsqueda de

anticuerpos diferentes al sistema ABO para aquellos pacientes que

reporten dentro de la historia clínica un factor de riesgo.

SE REALIZA A PACIENTES:

POLITRANSFUNDIDOS

MUJERES EMBARAZADAS Rh NEGATIVO

REACCION HEMOLITICA TRANSFUSIONALES

● 10.16 No se ha comprobado que el rastreo rutinario de

anticuerpos irregulares, en el suero del receptor y del

disponente, pueda sustituir a la prueba cruzada de

compatibilidad.

RASTREO

10.9 Los plasmas, incluyendo el contenido en las unidades de

concentrados de plaquetas o leucocitos…….. Es

recomendable practicar una prueba menor o haber

comprobado, mediante pruebas de rastreo, la ausencia de

anticuerpos irregulares de importancia clínica,

particularmente cundo el plasma provenga de disponente con

antecedentes propiciadores de aloinmunización.

Pruebas Pretransfusionales

NEONATOS

NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO

INMUNOLOGICAMENTE

INMADUROS

RARA ALOINMUNIZACIÓN

CONTRA AGS

ERITROCITARIOS DURANTE

PERIODO NEONATAL

NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO

PRUEBAS REITERADAS

INCREMENTAN PERDIDA DE

SANGRE IATROGÉNICA

NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO

ESTANDARES DE LA

AABB LIMITADAS PRUEBAS

SEROLÓGICAS

EN NEONATOS MENORES DE

4 MESES

TIPIFICACIÓN ABO, Rh ,

RASTREO DE ANTICUERPOS

(SUERO,PLASMA DE

NEONATO O MAMA.)

NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO

RASTREO DE ANTICUERPOS

NEGATIVO

OMITIR PRUEBAS DE

COMPATIBILIDAD Y

TIPIFICACIÓN ABO,

Rh

NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO

TRANSFUNDIR C.E. GRUPO O y PL DEL

GRUPO ABO DEL NEONATO.

PRESENCIA DE Ac: DAR C.E. CARENTE DEL AG CORRESPONDIENTE

TECNOLOGIA ACTUALIZADA EN B. S.

MICROPLACAS

FASE SOLIDA

Metodologías Aplicadas a Banco de Sangre

TECNOLOGIA DE

GEL

VENTAJAS

MAYOR SENSIBILIDAD

MAYOR ESPECIFICIDAD

USO EN URGENCIAS

20´ PARA ENTREGAR

SANGRE

SOLUCION A LOS PROBLEMAS MAS COMUNES

Interpretación de los resultados de la detección de Acs y pruebas

de Compatibilidad

PRUEBA DE

COMPATIBILIDAD

RASTREO DE

ANTICUERPOS

COMPATIBLE NEGATIVO

S/R INCOMPATIBLE NEGATIVO

S/C INCOMPATIBLE

NEGATIVO

COMPATIBLE POSITIVO

INCOMPATIBLE

POSITIVO

INTERPRETACION

RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS

INCOMPATIBLES

1.- Presencia de aloanticuerpo con autotestigo negativo

La especificidad del Ac o los Acs debe ser identificada.

Confirmar las unidades compatibles carezcan del Ag correspondiente. (anti-c)

RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS

INCOMPATIBLES.

Si hay presentes mezclas de Acs.

Un Ac que reacciona con un Ag de alta incidencia.

( los hermanos son la opción para sangre compatible)

El Ac está presente en concentraciones muy bajas

ENVIAR LA MUESTRA A UN LABORATORIO

DE REFERENCIA

RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS

CRUZADAS INCOMPATIBLES.

2.- Aloanticuerpo presente y control

autologo positivo.

Pacientes que han recibido sangre en los 2 o

3 meses precedentes.

Pacientes con reacción transfusional.

(Historia transfusional y Dx)

RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS

INCOMPATIBLES

3.- Los autoanticuerpos frios Anti-I.

(Crioautoanticuerpos potentes)

Incubar a 37°C 30-60 minutos.

RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS

INCOMPATIBLES

4.- Los autoanticuerpos calientes

Rara vez ocasionan discrepancia en las pruebas ABO.

AAC presente en suero

Coombs Directo

Autoadsorcion en caliente

RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS

INCOMPATIBLES

5.- La formación de Rouleaux

La adición de 1-3 gotas de SSI.

La aglutinación por Acs permanece

sin cambios.

RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS

INCOMPATIBLES

6.- Problemas relacionados

con los reactivos

Los anticuerpos contra drogas

y aditivos.

CASO CLINICO 1

Paciente Guadalupe Alarcón Pérez

- Dx. Anemia Hemolítica en estudio

- Embarazos (el último) fue hace 3 años

- AT= 0

- 2 Hermanas fallecen por LES

- Grupo Sanguíneo O Positivo

CASO CLINICO 1

Paciente Guadalupe Alarcón Pérez

- Coombs Directo PositivoTítulo 32

- Autotestigo S/C Positivo

- Eluído Positivo (todas las células)

- Se cruzaron 37 Unidades de C. E. (varias unidades dieron compatibles)

Problema

Anti-A Anti-B Anti-

AB

Aut

o

Cel

A1

Cel

A2

Cel

B

Cel

O Anti-D

Control

Rh

4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+

●Que grupo sanguíneo es?

●Paciente Con 5 g/dL de Hb

●Dx Anenia Hemolítica en estudio

Prueba de compatibilidad

Unidad Gel D Gel R Gel

A

Tubo

D

C. mono

Tubo

R

C. mono

Tubo

A

C. mono

103732 2+ 4+ 4+ + 2+ 2+

103777 2+ 4+ + 2+ 2+

103841 2+ 4+ - 2+ 2+

Panel de Ac Irregulares

Técnica Cel

1

Cel

2

Cel

3

Cel

4

Cel

5

Cel

6

Cel

7

Cel8 Cel

9

Cel

10

Auto

S/r - - - - - - - - - - -

S/22° + - - - - - - + + - -

S/37° - - - - - - - - - - -

S/C

mono

+ + - 2+ - + 2+ 2+ 2+ - 3+

CAGH 2+ 2+ 2+

Gel poli 2+ 2+ 1+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 1+ 3+

Panel de Ac Irregulares en

Eluido

Técnica Cel

1

Cel

2

Cel

3

Cel

4

Cel 5 Cel 6 Cel 7 Cel8 Cel 9 Cel

10

S/r - - - - - - - - - -

S/22° - - - - - - - - - -

S/37° - - - - - - - - - -

S/C

mono

2+ 2+ + 2+ 2+ 3+ 2+ 3+ 2+ 2+

CAGH

A/C 2+ 3+ 2+ 2+ 2+ 3+ 4+ 3+ 2+ 1+

Panel de Ac Irregulares en

Eluido

Técnica Cel

R1R1

Cel

R2R2

Cel

rr

Auto

S/r - - - -

S/22° - - - -

S/37° - - - -

S/C

mono

2+ 2+ + 2+

CAGH

GEL/C 2+ 3+ 2+ 2+

Cel C D E c e P S K k Jka Jkb Dia

1 + + -

-

+ + - - + - + +

2 - + + + -

-

+ -

+ - + -

3 -

-

-

+ + + - - + + - -

4 + + -

+ + -

+ + + + - -

5 + + -

-

+ + - - + - + -

6 + + + + + + + -

+ - + -

7 + -

+ + + + - - + - + -

8 -

+ + + + -

+ + + + + -

9 -

+ + + -

+ + -

+ + + +

10 + + + + + + - - + + - -

CASO CLINICO 1

FENOTIPO R2r, S(-)

C c E e

Neg. 4+ 4+ 3+

CASO CLINICO

PANEL DE ANTICUERPOS POSITIVO

PROBABLE ANTI-c + ANTI S

ELUIDO DE ANTICUERPOS POSITIVO

PROBABLE ANTI-SISTEMA Rh