2558 - miu.isit.or.th¸£ายงานการศึกษา... · สารบัญตาราง หน้า ตารางที่ 3.3 การวิเคราะห์
การวิเคราะห์ DNA
description
Transcript of การวิเคราะห์ DNA
การวเิคราะห์ การวเิคราะห์ DNA DNA
และการศึกษาจโีนมและการศึกษาจโีนม
การวเิคราะห์ การวเิคราะห์ DNA DNA และและการศึกษาจโีนมการศึกษาจโีนม
ในการวเิคราะห์ในการวเิคราะห์ DNA DNA ((DNA DNA analysisanalysis)) นัน้จะมกีารแยกนัน้จะมกีารแยกDNA DNA ขนาดขนาดต่างๆ ออกจากกันโดยอาศัยเทคนิคท่ีเรยีกต่างๆ ออกจากกันโดยอาศัยเทคนิคท่ีเรยีกวา่วา่ อิเล็กโทรโฟรซิสิ “อิเล็กโทรโฟรซิสิ “ ((electrophoresiselectrophoresis))” ” โดยให้โดยให้ DNA DNA ท่ีต้องการแยกท่ีต้องการแยก ((DNA DNA ท่ีท่ีขนาดต่างกันขนาดต่างกัน)) ออกจากกันวิง่ผ่านตัวกลางท่ีออกจากกันวิง่ผ่านตัวกลางท่ีเป็นแผ่นวุน้เป็นแผ่นวุน้ ((ตัวกลางท่ีเป็นแผ่นวุน้ เชน่ อะตัวกลางท่ีเป็นแผ่นวุน้ เชน่ อะกาโรสเจลกาโรสเจล ((agarose gel) agarose gel) หรอื พอลิอะคหรอื พอลิอะครลิาไมด์รลิาไมด์((polyacrylamide gelpolyacrylamide gel)) ท่ีอยู่ท่ีอยู่ภายในสนามไฟฟา้ ตามปกติภายในสนามไฟฟา้ ตามปกติ DNA DNA จะมปีระจุจะมปีระจุเป็นลบเป็นลบ
การวเิคราะห์ DN
A
((เทคนิคเจลอิเล็กโทรโฟรซิสิเทคนิคเจลอิเล็กโทรโฟรซิสิ))
ดังนัน้ดังนัน้ DNA DNA จะเคลื่อนจะเคลื่อนเขา้หาขัว้บวกของสนามไฟฟา้ เขา้หาขัว้บวกของสนามไฟฟา้ และและ DNA DNA ท่ีมขีนาดโมเลกลุท่ีมขีนาดโมเลกลุใหญ่จะเคลื่อนท่ีได้ชา้ใหญ่จะเคลื่อนท่ีได้ชา้กวา่กวา่ DNA DNA ท่ีมโีมเลกลุขนาดเล็ก ท่ีมโีมเลกลุขนาดเล็ก ทำาให้ทำาให้ DNA DNA ท่ีมโีมเลกลุขนาดท่ีมโีมเลกลุขนาดเล็ก เคลื่อนท่ีได้มากและอยูใ่กล้เล็ก เคลื่อนท่ีได้มากและอยูใ่กล้ขัว้บวก สว่นขัว้บวก สว่น DNA DNA ท่ีมโีมเลกลุท่ีมโีมเลกลุขนาดใหญ่จะเคลื่อนท่ีไปได้น้อย ขนาดใหญ่จะเคลื่อนท่ีไปได้น้อย จงึอยูใ่กล้ๆกับจุดเริม่ต้น ทำาให้จงึอยูใ่กล้ๆกับจุดเริม่ต้น ทำาให้แยกแยก DNA DNA ขนาดต่างๆ กันออกขนาดต่างๆ กันออกจากกันได้จากกันได้
เครื่องมอืท่ีเรยีกวา่ เครื่องมอืท่ีเรยีกวา่ ออโตเมตด์ ซเีควนซ ์ออโตเมตด์ ซเีควนซ ์
สำาหรบัการหาลำาดับนิวคลีโอไทด์ ต้องอาศัยเครื่องมอืที่เรยีกสำาหรบัการหาลำาดับนิวคลีโอไทด์ ต้องอาศัยเครื่องมอืที่เรยีกวา่วา่ ออโตเมตด์ ซเีควนซ ์ออโตเมตด์ ซเีควนซ ์ซึง่ยงัอาศัยเทคนิคและวธิกีารของเจซึง่ยงัอาศัยเทคนิคและวธิกีารของเจลอิเล็กโทรโฟรซิสิอยูแ่ละมกีารเพิม่และพฒันาเทคนิคทางลอิเล็กโทรโฟรซิสิอยูแ่ละมกีารเพิม่และพฒันาเทคนิคทางซอฟต์แวรค์อมพวิเตอร ์ทำาให้สามารถอ่านผลออกมาในรูปของซอฟต์แวรค์อมพวิเตอร ์ทำาให้สามารถอ่านผลออกมาในรูปของลำาดับเบสได้ลำาดับเบสได้
สารละลายท่ีมีสารละลายท่ีมี DNA DNA จะไมม่สีจีงึจะไมม่สีจีงึต้องอาศัยการยอ้มสเีพื่อตรวจต้องอาศัยการยอ้มสเีพื่อตรวจสอบสอบ DNA DNA ในเจลอิเล็กโทรโฟรซิสิ ซึง่นิในเจลอิเล็กโทรโฟรซิสิ ซึง่นิยมใชอิ้ธเิดียมยมใชอิ้ธเิดียมโบรไมด์โบรไมด์ ((ethidiumbromideethidiumbromide)) เป็นเป็นตัวยอ้มโดยอาศัยการจบักับตัวยอ้มโดยอาศัยการจบักับ DNA DNA และและเรอืงแสงฟลอูอเรสเซนต์เป็นสชีมพูได้เรอืงแสงฟลอูอเรสเซนต์เป็นสชีมพูได้เมื่อสมัผัสกับรงัสอัีลตราไวโอเลตเมื่อสมัผัสกับรงัสอัีลตราไวโอเลต
การศึกษาจโีนมการศึกษาจโีนม
นักวจิยัพบวา่ จโีนมของสิง่มชีวีติชนิดเดียวกัน มคีวามแตกต่างนักวจิยัพบวา่ จโีนมของสิง่มชีวีติชนิดเดียวกัน มคีวามแตกต่างกัน ซึง่สามารถตรวจสอบความแตกต่างนัน้โดยอาศัยการตัดกัน ซึง่สามารถตรวจสอบความแตกต่างนัน้โดยอาศัยการตัดด้วยเอนไซมตั์ดจำาเพาะแล้วนำาชิน้ด้วยเอนไซมตั์ดจำาเพาะแล้วนำาชิน้ DNA DNA ไปแยกขนาดโดยวธิีไปแยกขนาดโดยวธิีการเจลอิเล็กโทรโฟรซิสิ และตรวจสอบโดยวธิ ีจะได้รูปแบบของการเจลอิเล็กโทรโฟรซิสิ และตรวจสอบโดยวธิ ีจะได้รูปแบบของแถบแถบ DNA DNA ท่ีแตกต่างกัน ดังนัน้รูปแบบของแถบท่ีแตกต่างกัน ดังนัน้รูปแบบของแถบ DNA DNA ท่ีท่ีปรากฏขึน้หลังจากตัดด้วยเอนไซมตั์ดจำาเพาะจะสามารถเชื่อมปรากฏขึน้หลังจากตัดด้วยเอนไซมตั์ดจำาเพาะจะสามารถเชื่อมโยงถึงจโีนม ของสิง่มชีวีตินัน้โยงถึงจโีนม ของสิง่มชีวีตินัน้ เรยีกความแตกต่างของรูปแบบเรยีกความแตกต่างของรูปแบบของแถบของแถบ DNA DNA ท่ีเกิดจากการตัดของเอนไซมตั์ดจำาเพาะเหล่านี้ท่ีเกิดจากการตัดของเอนไซมตั์ดจำาเพาะเหล่านี้วา่ เรสทรกิชนั แฟรกเมนท์ เลจท์ พอลิมอรฟ์ซิมึ วา่ เรสทรกิชนั แฟรกเมนท์ เลจท์ พอลิมอรฟ์ซิมึ ((restriction fragment length restriction fragment length polymorphism:RELP) polymorphism:RELP) ซึง่สามารถใชเ้ป็นเครื่องหมายซึง่สามารถใชเ้ป็นเครื่องหมายทางพนัุกรรม ทางพนัุกรรม ((genetic markergenetic marker))ได้ได้
((จโีนมของมนุษย์จโีนมของมนุษย์))
ตั้งแต่ปี พตั้งแต่ปี พ..ศศ . 2533 . 2533 ได้มกีารรเิริม่โครงการจโีนมมนุษย ์ได้มกีารรเิริม่โครงการจโีนมมนุษย ์((Human Genome Project) Human Genome Project) เพื่อท่ีจะศึกษาลำาดับนิวคลีโอเพื่อท่ีจะศึกษาลำาดับนิวคลีโอไทด์ของมนุษยทั์้งจโีนมโดยการหาลำาดับนิวคลีโอไทด์ของออโทไทด์ของมนุษยทั์้งจโีนมโดยการหาลำาดับนิวคลีโอไทด์ของออโทโซมจำานวน โซมจำานวน 22 22 โครโมโซม และโครโมโซมโครโมโซม และโครโมโซม X X และและโครโมโซมโครโมโซม Y Y ซึง่เป็นโครงการนานาชาติ ในการดำาเนินโครงการดังซึง่เป็นโครงการนานาชาติ ในการดำาเนินโครงการดังกล่าวมกีารศึกษาแผนท่ียนี และแผนท่ีเครื่องหมายทางพนัธุกรรมกล่าวมกีารศึกษาแผนท่ียนี และแผนท่ีเครื่องหมายทางพนัธุกรรมควบคู่ไปกับการหาลำาดับนิวคลีโอไทด์ ซึง่นำามาสูก่ารพฒันาในเชงิควบคู่ไปกับการหาลำาดับนิวคลีโอไทด์ ซึง่นำามาสูก่ารพฒันาในเชงิเทคโนโลย ีและการประยุกต์ใชอ้ยา่งมากมายในปัจจุบนัเทคโนโลย ีและการประยุกต์ใชอ้ยา่งมากมายในปัจจุบนั
โครงการศึกษาจโีนมนัน้ไมไ่ด้ทำาเฉพาะมนุษยเ์ท่านัน้ แต่ยงัศึกษาจีโครงการศึกษาจโีนมนัน้ไมไ่ด้ทำาเฉพาะมนุษยเ์ท่านัน้ แต่ยงัศึกษาจีโนมของสิง่มชีวีติชนิดอ่ืนๆ ท่ีมคีวามสำาคัญในการศึกษาในเชงิโนมของสิง่มชีวีติชนิดอ่ืนๆ ท่ีมคีวามสำาคัญในการศึกษาในเชงิชวีวทิยาด้วย เชน่ จโีนมของชวีวทิยาด้วย เชน่ จโีนมของ E.coli E.coli จโีนมของยสีต์ จโีนมของยสีต์ ((Saccharomyces cerevisiae) Saccharomyces cerevisiae) จโีนมของแมลงหวี ่จโีนมของแมลงหวี ่((Drosophilia melanogaster) Drosophilia melanogaster) และหนู และหนู ((Mus Mus musculus) musculus) สำาหรบัการศึกษาในพชืนัน้นักวทิยาศาสตรไ์ด้รว่มกันสำาหรบัการศึกษาในพชืนัน้นักวทิยาศาสตรไ์ด้รว่มกันศึกษาจโีนมของพชืใบเลี้ยงคู่ในวงค์ผักกาด ศึกษาจโีนมของพชืใบเลี้ยงคู่ในวงค์ผักกาด ((Arabidopsis Arabidopsis thaliana L.) thaliana L.) ซึง่ถือวา่เป็นพชืต้นแบบในการศึกษาชวีวทิยาระดับซึง่ถือวา่เป็นพชืต้นแบบในการศึกษาชวีวทิยาระดับโมเลกลุของพชื เน่ืองจากมขีนาดจโีนมเล็ก ลำาดับนิวคลีโอไทด์โมเลกลุของพชื เน่ืองจากมขีนาดจโีนมเล็ก ลำาดับนิวคลีโอไทด์ท้ังหมดของจโีนมท้ังหมดของจโีนม Arabidopsis thaliana Arabidopsis thaliana ได้รบัการประกาศได้รบัการประกาศอยา่งเป็นทางการในปี อยา่งเป็นทางการในปี 25422542
สว่นขา้ว สว่นขา้ว ((Oryza sativa L.Oryza sativa L.)) ถือเป็นพชืต้นแบบของพชืใบเล้ียงเด่ียว ถือเป็นพชืต้นแบบของพชืใบเล้ียงเด่ียว เนื่องจากมขีนาดของจโีนมเล็ก เมื่อเปรยีบทียบในกลุ่มพชืใบเล้ียงเด่ียว การศึกษาเนื่องจากมขีนาดของจโีนมเล็ก เมื่อเปรยีบทียบในกลุ่มพชืใบเล้ียงเด่ียว การศึกษา
จโีนมจโีนมขา้วเป็นโครงการรว่มมอืนานาชาติท่ีมปีระเทศไทยเขา้รว่มในการศึกษาด้วย โดยขา้วเป็นโครงการรว่มมอืนานาชาติท่ีมปีระเทศไทยเขา้รว่มในการศึกษาด้วย โดยทำาการศึกษาลำาดับนิวคลีโอไทด์ของโครโมโซมแท่งท่ี ทำาการศึกษาลำาดับนิวคลีโอไทด์ของโครโมโซมแท่งท่ี 9 9 ปัจจุบนัการศึกษาจโีนมปัจจุบนัการศึกษาจโีนม
ของของสิง่มชีวีติท่ีสำาคัญดำาเนินไปมากกวา่รอ้ยละสิง่มชีวีติท่ีสำาคัญดำาเนินไปมากกวา่รอ้ยละ 99 99 แล้ว ทำาให้นักวทิยาศาสตรท์ราบแล้ว ทำาให้นักวทิยาศาสตรท์ราบ
คำาตอบคำาตอบเก่ียวกับโครงสรา้งจโีนม การควบคมุการแสงออกของยนีต่างๆ ท่ีสง่ผลถึงการเก่ียวกับโครงสรา้งจโีนม การควบคมุการแสงออกของยนีต่างๆ ท่ีสง่ผลถึงการเจรญิเติบโตและพฒันา ตลอดจนววิฒันาการของสิง่มชีวีติเจรญิเติบโตและพฒันา ตลอดจนววิฒันาการของสิง่มชีวีติ
บรรณานุกรบรรณานุกรมม
http://www.thaigoodview.com/node/46508http://www.ceted.org/webbio/http://www.ceted.org/webbio/
chapter08/index_l08_p15.phpchapter08/index_l08_p15.php
ขอบคณุค่ะขอบคณุค่ะ
จดัทำาโดยจดัทำาโดยนางสาววรรณภา ประทมุว ี ม.6/9 เลขท่ี 13ก (แต่งเอฟเฟก็)นางสาวพุทธะชาติ จนัทรส์ำาราญกลุ ม.6/9 เลขท่ี 21ก (รวบรวมเน้ือหา)นางสาวนิศารตัน์ เพช็รครุฑ ม.6/9 เลขท่ี 11ข (จดัเนื้อหาลงพาวเวอรพ์อ้ย)นางสาวณัฐธดิา หลำ่าโสภา ม.6/9 เลขท่ี 17ข (หาภาพประกอบ)นางสาวสดุาพร สมร ม.6/9 เลขท่ี 22ข (รวบรวมเน้ือหา)