العلمي والبحث العالي التعليم وزارةالموصل جامعة

للبنات التربية كليةالحياة علوم قسم

الدهنية السكريات لعديد البايولوجية الفعالية

الخلوية المزارع على التربة بكتريا من المستخلصالطالبة قبل من مقدم تخرج بحث

حسين مالو حسين هالةإلى

وهو / الحياة علوم قسم للبنات التربية كلية مجلسعلوم في البكالوريوس شهادة نيل متطلبات من جزء

بإشرافالحياة

المساعد المدرسالرزاق عبد حازم علياء

يم- ح. الر0 ال0رح2من. الل.ه . .س-م يم- ب الر0ح. ال0رح2من. الل.ه . .س-م ب } } 4 د2ادا م. ر6 7ل-ب2ح- ا ك2ان2 ل0و- 4 ق6ل د2ادا م. ر6 7ل-ب2ح- ا ك2ان2 ل0و- د2 ق6ل ل2ن2ف. ب:ي. ر2 د2 ل>ك2ل.م0ت. ل2ن2ف. ب:ي. ر2 ل>ك2ل.م0ت.

ث-ل.ه. ب.م. ئ-ن2ا ج. ل2و- و2 ب:ي. ر2 ك2ل.م0ت6 د2 ت2نف2 أ2ن ب-ل2 ق2 ر6 7ل-ب2ح- ث-ل.ه. ا ب.م. ئ-ن2ا ج. ل2و- و2 ب:ي. ر2 ك2ل.م0ت6 د2 ت2نف2 أ2ن ب-ل2 ق2 ر6 7ل-ب2ح- ا4 د2دا د2دا4م2 }}( ( 109109)) م2

العظيم الله العظيم صدق الله صدق

الكهف الكهف سورة سورة

الخالصة الحديثة الطرق من الخلوية المعلقات خاليا زراعة طريقة تعد

خلوية تجمعات وإنتاج معين غذائي وسط على النسيجية للزراعةامكانيات الخلوية المعلقات وتوفر فيها كاملة نباتات ثم ومن

االيضية ) المختلفة النباتية العمليات لدراسة MetabolicجيدةProcesses )الخلية بها تقوم التي

فإن . ذلك عن فضال المختلفة للتأثيرات استجابتها وكذلك النباتيةالمواد انتقال كيفية حول دراسات بإجراء تسمح الطريقة هذه

في المتبعة والتقنية المختلفة، الخاليا بين وتضمينها الغذائيةالمستعملة تلك كبيرة لدرجة تشابه الخلوية المعلقات استحداثسائلة . غذائية اوساط في المجهرية االحياء من العديد نمو فيهو كما الخلية احادية خلوية مزارع على الحصول الصعوبة ومنخاليا على الحصول يمكن وانما المجهرية لالحياء بالنسبة الحال

هذه . اختيار تم ولذلك كبيرة او صغيرة خلوية تجمعات او مفردةلـ البيولوجية الفعالية لمعرفة LPSالطريقة

Lipopolysaccharides العالقة مراحل في المهم ودورهيحصل ال التي البقولية والنباتات الرايزوبيوم بكتريا بين تعايشية

بكتريا سطح بين ومتخصص مباشر غير ارتباط بواسطتهاالجذرية الشعيرات قمم عند المعزز النبات ولكتين الرايزوبيوم

المركب . فتال هذا تأثير متابعة ويمكن الخاليا LPSية علىالمعلقات زراعة تقنية خالل من الخلوية التجمعات او المفردة

الخلوية .

البحث : من البحث :الهدف من الهدفالزراعة معرفة الى البحث الزراعة يهدف معرفة الى البحث يهدف

وزراعة عام بشكل وزراعة النسيجية عام بشكل النسيجيةخاص بشكل الخلوية خاص المعلقات بشكل الخلوية المعلقات

دور دراسة ثم ومن خاص دور بشكل دراسة ثم ومن خاص بشكلالمستخلص الدهنية السكريات المستخلص عديد الدهنية السكريات عديد

بكتريا بكتريا من Sinorhizobium Sinorhizobiumمنmitietiemitietie المفردة الخاليا انقسام المفردة في الخاليا انقسام في

الخلوية . المعلقات زراعة من الخلوية .الناتجة المعلقات زراعة من الناتجة

الرايزوبيوم 2-12-1 الرايزوبيوم جنس RhizobiumRhizobiumجنسعصوية خاليا بكونها تمتاز الجنس هذا افراد جميع عصوية ان خاليا بكونها تمتاز الجنس هذا افراد جميع ان

ابعاد ذات ابعاد الشكل ذات ،( ((m 3.0x0.9m 3.0x0.9الشكل كرام لصبغة ،( سالبة كرام لصبغة سالبةاو محيطية باسواط متحركة للسبوات مكونة او غير محيطية باسواط متحركة للسبوات مكونة غيرللنمو المثلى الحرارة درجة قطبية تحت او للنمو قطبية المثلى الحرارة درجة قطبية تحت او قطبية

بين بين تتراوح البكتريا 3030 – – 2525تتراوح لهذه ، سليزية البكتريا درجة لهذه ، سليزية درجة ، واليوريا االمينية االحماض استخدام على ، القابلية واليوريا االمينية االحماض استخدام على القابلية

والكحوالت والسكروز نتروجينية كمصادر والكحوالت والنترات والسكروز نتروجينية كمصادر والنتراتكما . للطاقة مصادر المعقدة والكاربوهيدرات كما . السكرية للطاقة مصادر المعقدة والكاربوهيدرات السكرية

من مستويات تحمل على القدرة البكتريا لهذه من ان مستويات تحمل على القدرة البكتريا لهذه انوالحموضة . والحموضة .الملوحة الملوحة

النباتات على للعقد المكونة الرايزوبيوم بكتريا صنفت النباتات لقد على للعقد المكونة الرايزوبيوم بكتريا صنفت لقدالغذائي الوسط في نموها درجة على اعتمادا الغذائي البقولية الوسط في نموها درجة على اعتمادا البقولية

مجموعتين : مجموعتين :الى الىالنمو بطيئة الرايزوبيوم النمو مجموعة بطيئة الرايزوبيوم Slow-growing Slow-growingمجموعة

RhizobiumRhizobium ) ( بين الجيل زمن نموها مدة بين ) ( تتراوح الجيل زمن نموها مدة 88--66تتراوحجنس افراد المجموعة هذه وتضم ، جنس ساعات افراد المجموعة هذه وتضم ، ساعات

BradyrhizobiumBradyrhizobium-: االتية االنواع يضم االتية :-الذي االنواع يضم الذيB.japonicumB.japonicum العقد وتكوين باصابة العقد المتخصصة وتكوين باصابة المتخصصة

الصويا . فول نباتات الصويا .الجذرية فول نباتات الجذريةB.LupiniB.Lupini الجذرية العقد وتكوين بإصابة الجذرية المتخصصة العقد وتكوين بإصابة المتخصصة

اللوبيا . نباتات جذور اللوبيا .على نباتات جذور علىB.parasponiaB.parasponia . االستوائية االشجار باصابة االستوائية . المتخصصة االشجار باصابة المتخصصة

او قطبي واحد لسوط بامتالكها المجموعة هذه او وتمتاز قطبي واحد لسوط بامتالكها المجموعة هذه وتمتازللحركة . قطبي للحركة .تحت قطبي تحت

النمو- 22 سريعة الرايزوبيوم النمو- مجموعة سريعة الرايزوبيوم Fast-growing Fast-growingمجموعةRhizobiumRhizobium ) ( بين الجيل زمن نموها مدة بين ) ( تتراوح الجيل زمن نموها مدة --22تتراوح

جنس 44 افراد المجموعة هذه وتضم جنس ساعات افراد المجموعة هذه وتضم ساعاتRhizobiumRhizobium-: اآلتية االنواع يضم اآلتية :-الذي االنواع يضم الذي

R.trifoliiR.trifolii العقد وتكوين اصابة في العقد المتخصصة وتكوين اصابة في المتخصصة. البرسيم نباتات جذور على .الجذرية البرسيم نباتات جذور على الجذرية

R.phaseoliR.phaseoli العقد وتكوين اصابة في العقد المتخصصة وتكوين اصابة في المتخصصةالفاصوليا . نباتات جذور على الفاصوليا .الجذرية نباتات جذور على الجذرية

R.LeguminosarumR.Leguminosarum وتكوين اصابة في وتكوين المتخصصة اصابة في المتخصصة. والحمص والعدس الباقالء نباتات جذور على .العقد والحمص والعدس الباقالء نباتات جذور على العقد

الدهنية 2-22-2 السكريات الدهنية عديد السكريات عديدLipo-Poly Saccharides (LPS)Lipo-Poly Saccharides (LPS)

طبيعة ذات متخصصة جزيئية دالئل الرايزوبيا بكتريا طبيعة تنتج ذات متخصصة جزيئية دالئل الرايزوبيا بكتريا تنتجالعقد بعوامل تعرف العقد كاربوهيدراتية بعوامل تعرف Nodulation Nodulation . . ((NFSNFS))كاربوهيدراتية

FactorsFactors الدهنية السكريات عديد باسم الدهنية المعروفة السكريات عديد باسم -Lipo-Lipo( ( LcosLcos))المعروفةchitooligosaccharidicchitooligosaccharidic او او Lipo-poly sacchrides (LPS)Lipo-poly sacchrides (LPS)

هذه من تتكون البقولية النباتات مع التعايشية عالقتها هذه اثناء من تتكون البقولية النباتات مع التعايشية عالقتها اثناءمن ) من )المركبات الكلوكوز( 55--44المركبات سكر من متكررة الكلوكوز( وحدات سكر من متكررة وحدات

Tetra or penta meric N-acetyl glucosamineTetra or penta meric N-acetyl glucosamineاالميني االميني معوضات تحمل مختزلة االولى ، نهايتين ذات سلسلة معوضات لتكوين تحمل مختزلة االولى ، نهايتين ذات سلسلة لتكوين

المتخصصة العقد تكوين في اهميتها لها الرايزوبيا بنوع المتخصصة خاصة العقد تكوين في اهميتها لها الرايزوبيا بنوع خاصةبشكل اما تكون فقد البقوليات بشكل على اما تكون فقد البقوليات أو أو --N-acetyl-tofucosylN-acetyl-tofucosylعلى

كبريت مجموعة كبريت بشكل مجموعة مختزلة Sulfate groupSulfate groupبشكل غير مختزلة والثانية غير والثانيةرقم الكاربون ذرة عند الدهني الحامض سلسلة رقم تحمل الكاربون ذرة عند الدهني الحامض سلسلة 22تحمل

رقم AcetylAcetylومجموعة ومجموعة الكاربون ذرة رقم عند الكاربون ذرة لجزيئة لجزيئة 66عندGlucosamineGlucosamine . .(Cullimore and Bono , 2001)(Cullimore and Bono , 2001)

العقد تكوين عوامل العقد توجد تكوين عوامل الرايزوبيا ((NFSNFS))توجد بكتريا الرايزوبيا في بكتريا فيهي : رئيسية انواع هي :بثالثة رئيسية انواع بثالثة

((Exo-poly saccharides EPSsExo-poly saccharides EPSs-)-)11 -: -:

(KPSs )Capasular Poly Saccharides-2-:

Lipo-polysaccharides (LPS)-3-:

الخلوية المعلقات الخلوية أنظمة المعلقات أنظمة

نمو لدراسة جيدا نظاما الخلوية المعلقات مزارع نمو توفر لدراسة جيدا نظاما الخلوية المعلقات مزارع توفرمن كبيرة اعداد وجود بسبب وتخصصها النبات من خاليا كبيرة اعداد وجود بسبب وتخصصها النبات خاليا

المستخدم السائل الغذائي الوسط في المفردة المستخدم الخاليا السائل الغذائي الوسط في المفردة الخالياكبيرا مجاال توفر انها كما المزارع هذه انشاء كبيرا في مجاال توفر انها كما المزارع هذه انشاء في

. وتخصصها وتوسعها المفردة الخاليا انقسام .لمتابعة وتخصصها وتوسعها المفردة الخاليا انقسام لمتابعة

الى الكالس من قطعة بنقل الخلوية المعلقات الى تستحدث الكالس من قطعة بنقل الخلوية المعلقات تستحدثباستعمال تحريكه يمكن مناسب سائل غذائي باستعمال وسط تحريكه يمكن مناسب سائل غذائي وسط

الهش الكالس ويفضل مختلفة الهش وسائل الكالس ويفضل مختلفة غير غير FriableFriableوسائلالخلوية . المزارع انشاء في القوام الخلوية .المتماسك المزارع انشاء في القوام المتماسك

الخلوية 2-42-4 المعلقات زراعة الخلوية احتياجات المعلقات زراعة احتياجات

النسجية 2-4-12-4-1 الزراعة النسجية مختبر الزراعة مختبر

االنسجة زراعة مختبر االنسجة مكونات زراعة مختبر مكونات

التحضيرات 1 حجرةالزراعة- 2 Cultiration Roomحجرة

النمو- 3 Growth Roomحجرة

التفريد- 4 Mist Roomحجرة

المعلقة- 2-4-22-4-2 الخاليا لزراعة الغذائي المعلقة- الوسط الخاليا لزراعة الغذائي الوسط

الخلوية 2-4-3 المعلقات المزارع تنمو متابعة

الخلوية 77-- المعلقات مزارع في الدهنية السكريات عديد الخلوية تاثير المعلقات مزارع في الدهنية السكريات عديد تاثيرالمعلقات مزارع في االنقسام على المفردة الخاليا قابلية المعلقات تدل مزارع في االنقسام على المفردة الخاليا قابلية تدل

وسط في وسط الخلوية في بـ MSMSالخلوية المدعم بـ السائل المدعم –– Chita Chitaأو أو LPSLPSالسائلOligosaccharid GLCNACOligosaccharid GLCNAC هذه امتالك على مختلفة هذه وبتراكيز امتالك على مختلفة وبتراكيز

االوساط من الخاصية هذه وزيادة التكوين اعادة لخاصية االوساط الخاليا من الخاصية هذه وزيادة التكوين اعادة لخاصية الخالياعلى العالية وحساسيتها صحيحة بنسب السكر على الحاوية على الغذائية العالية وحساسيتها صحيحة بنسب السكر على الحاوية الغذائية

بوجود بوجود االنقسام تكوين GLCNACGLCNACاالنقسام لعوامل االقل بالحساسية تكوين قياسا لعوامل االقل بالحساسية قياساوعلى االنقسام على الخلوية المعلقات خاليا دور لتفعيلها وذلك وعلى العقد االنقسام على الخلوية المعلقات خاليا دور لتفعيلها وذلك العقد

لمركب االيجابي لمركب الرغم االيجابي على LPSLPSالرغم الكيمياوي تركيبه ضمن على الحاوي الكيمياوي تركيبه ضمن الحاويسكر LIPIDALIPIDAسلسلة سلسلة من المتكررة الوحدات لسلسلة سكر المرتبطة من المتكررة الوحدات لسلسلة المرتبطة

المحفز لالوكسين المناظر تأثيره الى غالبا تعزى والتي امين المحفز الكلوكوز لالوكسين المناظر تأثيره الى غالبا تعزى والتي امين الكلوكوزلسلسلة السلبي التأثير ان اال ، الخلوية المعلقات لخاليا االنقسام لسلسلة على السلبي التأثير ان اال ، الخلوية المعلقات لخاليا االنقسام على

الدهني الدهني الحامض مركب LIPIDALIPIDAالحامض من مركب المعزولة من انقسام LPSLPSالمعزولة انقسام على علىمزارع في الخلوية االكسدة عملية لتثبيطه تعزى قد الخاليا مزارع هذه في الخلوية االكسدة عملية لتثبيطه تعزى قد الخاليا هذه

الخلوية الخلوية المعلقات البقولية . المعلقات البقولية .للنباتات للنباتات

االصغاء لحسن n االصغاء شكرا لحسن n شكرا