المجهراإللكتروني تقنيةElectron Microscopy technique

الشائق إعداد / مشاعل - العلوم أقسام المركزي المختبر

الطبية والدراسات

الطرق هذه ذكر إلى نتطرق أن قبلفيما النقاط بعض على التأكيد يجب

اإللكتروني المجهر يخص

العينة المراد رؤيتها ستفحص تحت تفريغ عالىHigh vacuum لذا يجب أن التحتوى العينة على أية نسبة

من الماء حتى ال تعوق مرور تيار األكترونات .

تعتمد فكرة الرؤية على المنظر المتكون على اللوحةالفوتوغرافية التي يمكن تحميضها .

1924

. األجسام ومشاهدة الخلوية التراكيب لفحص الضوء مصدر بدل االلكترونات باستخدام التفكير بدأ مرة ألول

قطبين عن عبارة أنه لمبة أي خالل من نراه الذي الضوء نتخيل عندمااللمبة = فمثال ذاته الضوء هي كهربائية أشعة عن صادر وسالب موجب

عن عبارة النيون األبيض الضوء ذاتاللمبة) + & - ( بينما األبيض اللون ليعطي النيون غاز بينهما يوصلفينتج ) + / - ( بعضهما مع سلكين بتوصيل شبيه األحمر الضوء ذات

معالج غير لكنه الضوء فتعطي شرارة = جدا خاص معدني سلك أستخدم االلتماس هذا في لذلك منه ومستفاد

الكهرباء مرور عند ويلتهب الفولتات من ومقدار العالية الحرارة يتحملمفرغ محيط في خاصة الضوء ثم الحرارة ليعطي فيه

) ليرى ) بااللكترونات يفكر بروجلي دي لويس العالم جعل ما وهذاالدقيقة األجسام

1955

-له العينات تحضير وطرق بسرعة يتقدم الجهاز هذا تطور بدأكبيرة تغيرات ونجم الحيوية التراكيب خبايا من الكثير لنا فكشفت

الحيوية العلوم تاريخ في الخلية ومعرفة والفيروسات واألوليات البكتريا ودراسة فاكتشاف

الكروموسومات ومعرفة والحيوان للنبات أساسية بنائية كوحدةباكتشاف ثم الله بفضل كان الوراثية الصفات نقل في ودورها

وبواسطته االلكترونية وباألخص المجاهر هذه .E.Mوتطويرو الصغيرة الخلوية السيتوبالزمية التراكيب من كثير أكتشف

مضى وقت أي من أكثر الدقيقة النفاذ للمجهر التحضيرات طرق تطوير في االهتمام فترة كانت

المجهر على الستينات نهاية حتى والتطوير العمل واستمرالنفاذ االلكتروني

الماسح استخدام بداية السبعينات أول في وكان

1980

كان تطور المجهر االلكتروني الماسح

1986ماسح الكتروني مجهر (SEM)أفضل

مثل (35JSM)أستخدم

تصنيف المجاهر و أنواعها

L.M

ضوئية E.M

إلكترونية

L.Mضوئية E.Mإلكترونية

1-Transmission Electron Microscopy

2- Scanning Elect Microseopy

3 -Enery Dispersiv X-ray Spectroscop

4 -Field Emission Scanning Electron Microscopy

5- Electron Probe Micro- Analyzer.

1 -Inverted L.M

Compound L.M

2 -Dark field L.M

3 -Phase Contrast Microscop

4 -U.V.M.

5 -Immuno flourecent I.F.L.M.

6 -Descetting L.M attaching

7 -Camera L.M

8 -Cooliscop L.M

(TEM)

(SEM)

(F E.SEM)

(EPMA( =)SEM&EDS)

Simple L.M

Single lenses

االلكتروني المجهر أهمية معرفة على يساعد ممابينه مقارنة عمل

ومن الفيزيائية الناحية من الضوئي المجهر وبينالتركيب ناحية

. المشتركة واألجزاء هذه من كل وأنواع للتصنيف أخرى ومقارنة

المستخدمة المجاهر. تستخدم وفيما

: بين تتراوح الضوئي المجهر عند التكبير قوة1500x , الجودة عالي الضوئي المجهر 25xللمجهر أو البسيط للمجهر

التشريحي

وهيMagnification power )M.P.( × الشيئية العينية ضرب حاصل وتساوي

تعطي أن إلى تصل فلن الضوئي عند التكبير قوة بلغت مهما لذلكداخل واضحة تفاصيل

غيرها و البكتريا مثل الحية الدقيقة الكائنات مع خاصة ومكوناتها الخلية التبيين و التمييز قوة على التكبير قوة وتعتمد التمييز قوة أو التبيين بقوة يعرف ما بسبب Resolution powerوذلك

)R.P.(

إلى الحين ذلك في وصلت النفاذ االلكتروني المجهر عند التكبير قوة عن أمامرة 600,000

مما جزء مائتي من جزء من أقل إلى الصفر من تصل = أجساما يظهر أن فيمكنهأحسن تظهره

قوة عن أضعاف وهي التمييز بقوة يعرف ما بفضل وذلك الضوئية المجاهرالمجهر في التمييز

ضعف ألف = تقريبا وتساوي الضوئي

- ؟: – اإلظهار التبيين قدرة أو التمييز قوة في السر هو ما إذن

التبيين قوة أو التمييز :(Resolving power)أو (Resolution power)قوةتام بوضوح نراهما أن يمكن متقاربين جسمين أصغر بين مسافة أصغر هي

= تماما مفصولينتداخل أي غير من بعضهما عن

كبيرة زيادة االلكتروني المجهر اكتشاف حقق لقدتغلبت حيث الوضوح قوة في

اإلظهار قوة في الضوئية على االلكترونية المجاهرإلى إضافة والتمييز والتبيين

علي يعتمد الذي العالي تمرير .(R.P)التكبير عندخالل االلكتروني الشعاع

) ( لوحة على لنراها العينة فحصه المراد الجسمثم ومن حساسة ضوئي تصوير

بالمجهر متصل كمبيوتر إلى أو أفالم إلى نقلهاااللكتروني

1m = 1000mm 1mm = 1000um

0,1mm = 100um1nm = 10 um 1um = 1000nm

0,1um = 100 nm 1nm = 1000A

و التمييز قوة على = كليا اعتمادا تعتمد التكبير قوةالتبيين

في التكبير قوة الضوئية لذلك العدسات المجاهر على تعتمد) ملموسة) زجاجية عدسات الشيئية

في- التكبير قوة االلكترونية بينما على المجاهر تعتمدملموسة ) ( غير الكترونية عدسات

تصميمها مكان في تحصل وإنما الواقع في موجودة غيرالكهربائي التيار يمر عندما

) االلكتروني ) أو الضوئي في العدسة نوع يحددها ال التبيين قوةالموجي ) الطول يحددها لندا wave length (=)وإنما

)

: الضـوئي يساوي المجهر الذي و الضوء لشعاع الموجي الطول (500 ) = تقريبا نانومتر

(0,5 um) األزرق أو العادي للضوءالضوئي: عند التبيين قوة (um 0,2)مثال

بعض: في البنفسجية فوق األشعة استخدام عند مثالالموجي .U.V.Mالمجاهر الطول فيكون

W.L.=0,3um يكون R.P.=0,1umوكلما وقصر الموجي الطول قل كلما أنه المثالين من نالحظ

أكثر والوضوح التبيين قوة كانت

: االلكتروني وهو المجهر بالنانومتر يقاس الذي و االلكتروني للشعاع الموجي الطول = جدا قصير

الضوئي للمجهر بالنانومتر مقارنة

R.P

105

V=

؟ رؤيته المطلوب للجسم الصورة دقة عليها يعتمد الذي والتبيين التمييز قوة لنعرف االلكتروني للشعاع الموجي الطول كم

موجة أقصر ذو الكتروني شعاع إلطالق المستخدمة الكهربائية الفولتات كم على يعتمد هذا

: التالية بالمعادلة االلكتروني للمجهر االلكتروني للشعاع الموجي الطول ويقاس

لندا ) ( حيث الموجي الطول V للمجهر الداخلة الفولتية

إلطالق الكتروني .(60K.v) فولت 60,000فعند استخدام طول موجته...........؟

نحسب:1,5

V=

تساوي تمييز قوة على (0,05um)أو (0,5nm)نحصل

القيمتين بين الشاسع الفرق نرى الضوئي المجهر مع التبيين قيمة مع القيمة هذه مقارنة وعند

ال فإنه العادي المجهر باستخدام أنه المعروف منتبعدان نقطتين بين التمييز يمكن

نصف عن قطرها يقل بمسافة البعض بعضهما عن. للضوء الموجي الطول

أي لنا يميز ال الضوئي المجهر أن يعني هذاإلى يصل قطريهما بين البعد جسمين

من (250nm)أقل: أخرى بعبارة

تمييزهما يمكن نقطتين بين بعد أصغر إنهو الضوء هذا (250nm)باستخدام

القدرة ليس العادي للمجهر الشيئية العدسة أن أيتقل التي األشياء إظهار على

عن جزيئاتها بين نانومتر 250المسافة

المجهر في التكبير لقوة المحدد العامل أن عرف لذلكهو الضوئي

ذاته للضوء الموجي الطول

حد لها الضوئي للمجهر التبيين وقوة الموجي الطول لذلكمعين

ثابت وهو للضوء الموجي بالطول مرتبطة محددة قيمة ذا

االلكتروني المجهر عليها تغلب السلبية هذهللشعاع الموجي للطول باستغالله

p بدال لإلضاءة كمصدر العالية السرعة ذات االلكترونيالمرئي الضوء من

يعتمد متغير الموجي الطول ذات االلكترونات أن حيثالفولتات قوة على

العدسات خالل االلكترونات إرسال في المستخدمةما عادة ،لذلك االلكترونيةبين يتراوح تيار فولت 60.000يستخدم

المجاهر (180K.V)إلى ( 60K.V)أي بعض وهناكشدته تيار تستخدم

فولت ( 1000K.V)مليون

بين ما التكبير قوة وصلت (600,000X)ووصلت وحتى (1,600,000X)إلى

ما تصل االلكترونية المجاهر لهذه التمييزية والقوة 0,1nm-0,2بين

المجاهر ألقوى التمييز لقدرة ضعف ألف حوالي أيالضوئية.

الذي األجزاء نفس من االلكتروني المجهر ويتركبالمجهر منها يتركب

فتيلة من هو الضوء مصدر في االختالف أن إال العاديالتنجستن

. التيار فيه يمر الذي المهبط وهومحلها فيحل والعينية الشيئية والعدسات المكثفات أما

كهرومغناطيسي ملف من كل. المهبط لشدة مساوية شدته متغير تيار فيه يمر

يتم حتى الفحص بدء قبل الشدة هذه تغيير ويمكنالجسم على االلكترونات بؤرة تركيز

اللوحة على واضحة صورة على والحصول المفحوصالفلورنسية.

المجهر بين الفروق أهم يوضح التالي الجدولالضوئي والمجهر االلكتروني

L.ME.M

إذاp فكرة المجهر اإللكتروني

أنه على الصورة تكوين تعتمدإلرتطام نتيجة يحدث

العينة بسطح اإللكتروناتمتفاوت تشتت ومنها

لإللكترونات.

فإن الضوئي المحهر في أمايرجع الصورة تكوين

للضوء . اإلختياري إلمتصاصغزالة إلى يعود التباين أن أى

الفوتونات من Photonsعددطولها حيث من المختلفة

Differentالموجي wavelengths الشعاع من

للمنظر المكون

اإللكتروني المجهر فكرة pإذا

Electron microscope divided into the following Basic components-:

1 -Illumination system.

2 -Imaging system.

3 -Specimen stage.

4 -Vacuum pump system.

5 -Image recording system.

Basic structure

1 -Illumination system.

1 -Cathode housing.

Electron gun

Cathode )filament(

Anode

2 -Electromag Alignment system

الشعاع مصدر أو اإلضاءة نظامتكوين عن المسؤول اإللكتروني

الصورة:أوال المهبط بيت من الذي Cathodeيتكون

) ويحتوي ) العمود الجهاز أعلى يوجدعلى:-

1 -االلكترونات التي Electron gunمدفعهالفتيل على Filamentتحتوي

المهبط على Cathodeوهي وهوحرف .Vشكل

/ سلك من عادة يصنع الفتيل المهبطااللكترونات تحرير بسهولة يمتاز معدني

تسخينه عند ( سلكها تسخين عند اللمبة مبدأ تذكر

الضوء ( تعطي حيث التنجستن بمعدن خاص وهذا

حرارة درجة يتحمل ( من أكثر إلى مئوية ( 3000تصل درجة قوة هو الحرارة بدرجة يتحكم والذي

. االستخدام عند فيه المار التيار مقدار البيولوجي المجال في pفمثال

المستخدمة الفولتية بين ( 40000 – 12000وحتى K.V 40ما

K.Vفولت( فيها يصل حديثة مجاهر وهناك

. فولت ) ( مليون حتى التيار شدة الفولت

2 -المصعد(wehneltyl cylinder )Anode وهي

مخروطية معدنية قطعةصغير ثقب بها الشكل

قطره مركزها 1mm )فيDia). يمر الثقب هذا خالل من

االلكتروني الشعاع جهد فرق تيار مرور عند

تسخن الفتيل في عاليفتحرر المهبط الفتيلة

ذات االلكترونات فتجذب السالبة الشحنة

الشحنة ذو المصعد نحوالمضادة

الشعاع مصدر أو اإلضاءة نظامتكوين عن المسؤول اإللكتروني

الصورة

-:pثانيا Electromagnetic Alignment system

الكهرومغناطيسي المجال هوفيها يحدث التيار فيها يمر عندما كهربائية ملفات من ويتكون

مغناطيسي مجالمن ويمنعه بالوسط يتمركز االلكتروني الشعاع يجعل

الوسط مسار عن االنحرافThe electron beam can be focused by passing

trough a magnetic field

Lensesنظام تكوين الصورة:-

العدسات :-

يتكون المجهر االلكتروني النفاذ من أربع عدسات إلكترونية تعمل على تكوين الصورة المكبرة

والعدسات هي:

) .Objective lens ) O.L- العدسة المكثفة 1

) .Projector lens ) P.L- العدسة الشيئية 2

) .Intermediate lens ) I.L - العدسة المتوسطة 3

) .Condenser lens )C.L-العدسة العارضة 4

2 -Imaging system.

تصنع كل عدسة من معدن قابل للتمغنط وتتكون من:- - ملف كهربائي :1

وهو عبارة عن سلك ملفوف آالف المرات يشبه األنبوب ويمر فيه تيار كهربائي تصل قوته إلى واحد أمبير

و المجال المغناطيسي الناتج من مرور التيار الكهربائي يركز بواسطة محفظة حديدية ناعمة تحيط بهذه اللفات

بالقطع القطبية وهما: ويساعد في تركيز هذه الحزم االلكترونية قطع من الحديد تعرف - قطعتين إحداهما عليا يمكن تحريكها والسفلى مبرومة في علبة العدسة 2

ويعتمد البعد البؤري للعدسة االلكترونية على قوة التيار الكهربائي الذي يصل لهذه القطع

= يصل البعد البؤري للعدسات ويمكن أن نغير البعد البؤري بتغيير شدة التيار وغالبا (5mm-3) االلكترونية إلى عدة ملليمترات

العدسات مواقع تحديدووظائفها

1 -الفلوروسنتية الشاشة من القريبة العدسة على يطلق المجسمة العارضة projector lens العدسة. الضوئي المجهر في العينية العدسة تقابل التي وهي2 -المتوسطة العدسة Intermediate lensيليها3 -الشيئية العدسة Projector lensثم بالمجهر الشيئية وتشابه منها والقريبة للعينة المباشرة العدسة وهي

الضوئي / الشيئية بالعينية سميت ولذلك4 -المكثفة العدسة = Objective lensوأخيرا المهبط إلى شيء أقرب أي العمود في عدسة أعلى Cathodeوهي من صدورها حين االلكترونية الحزم بجمع العدسة هذه تقوم حيث

) المهبط ) الفتيل . معين ومسار معينة نقطة في االلكتروني الشعاع تكثف

يوجد حاجزان متحركان من البالتين يقعان بين العدسة الشيئية والعدسة المتوسطة ۞ (Aperture)ويعرف الحاجز بـ

ويوجد على هذا الحاجز ثالث فتحات أقطارها على الترتيب:-Apertune 1=25um, Apertune 2=50um & Apertune 3=100um

يستخدم حاجز العدسة الشيئية )العلوي( إليقاف األشعة االلكترونية المائلة والتي تمر من۞خالل العدسة الشيئية، وبذلك يمنع التباين في الصورة النهائية

( contrast diaphragm)لذلك يطلق عليه بعض األحيان حاجز التباين

ويستخدم حاجز العدسة الوسطى )السفلي( إليقاف األشعة االلكترونية المبعثرة ۞ حافة العدسة الشيئية ويسمح باختيار بعض األشعة الالزمة لتوضيح الصورة

(selective diaphragm) ولذلك يطلق عليه الحاجز المنتخب . I.Lوهو يقع في مستوى الصورة المتوسطة األولى فوق العدسة المتوسطة

والعدسة الشيئية مصممة بطريقة تسمح بوضع الجسم المراد فحصه ۞وكذلك حاجز التباين بين قطعتيها القطبيتين

تعريف جهاز التكبير Magnification instrument

التكبير §داة Magnification instrumentجهاز ا عن عبارةوبالذات = جدا الصغيرة العينات وتوضيح تكبير على القدرة لها علميةالمجردة بالعين رؤيتها يستحيل التي العينات تلك

الماسح اإللكتروني المجهر

المجهر اإللكتروني الماسح للمجهر الخطيطي الرسم توضح الصورة

الماسح المجهر في الموجود ذلك العمود يشبة

النافذ ألشعة المنتجة المواد على يحتوي

لمسح والمستعملة فقط اإللكتروناتفحصها المراد العينة

في كما المدفعه في المواد هذة تتمثلالنافذ . المجهر

تعمل التي المكثفة العدسات وجود كذلكاإللكترونات من ضيقة حزمة تكوين على

المسح لبقعة الحقيقي القطر يصل 5nmحوالي

دائرة مع الحارفة الملفات من ومجموعةالعينة يمسح الشعاع جعل في تتسبب

أم تماما مفرغ الماسح المجهر عمودوإمالة أجهزة من وملحقاته العينة مسرح

من العمود قاعدة عند فتوجد العينةالمجهر .

Resolvingقدرة التبيين

من العادي الضوئي المجهر يتكونمن أطقم وثالثة اإلضاءة مصدر

العدسات . المكثفة Condenser) فالعدسة

lens) الضوء تجميع على تعملتكبير بينما المفحوص الشئ على

طريقة عن يكون المفحوص الشئالشيئية العدستين بين التكاتف

والعينية (Objective & eye Piece lens)

موضح . هو كماالنسبة بأنها عنها التكبيريعبر وقوة

الجسم وطول الصورة طول بينالمجاهر , تكبير ويتراوح المفحوص

مابين عادة x1500و x25بأنهاالنقاب كشف على المجهر وقدرةللجسم pجدا الدقيقة التفاصيل عنبقدرة تعرف التي هى المفحوص

مسافة , أصغر بأنها وتعرف التبيينأن يمكن متقاربين جسمين بين

بعضهما عن مفصولين تراهماالبعض .

Resolvingقدرة التبيين

العدسات انواع التحدها هذه التبيين وقدرةالذي . ولكن التكبير في pدورا تلعب التي

موجة طول هو فيها الرئيسي الدور يلعبوكذلك , لإلضاءة pمصدرا المستخدم الضوء

الشيئية . العدسة فتحة العددية القيمة

إستخدام هو المجهر تبيين قدرة ولزيادةقصير موجة طول ذو . ضوء

الماسح اإللكتروني المجهر

فية تستخدم أنة المجاهر من النوع هذا فيلتمسح اإللكترونات من ضيقة حزمة

لألمام تتحرك اإللكترونات أن أى العينةالعينة سطح ماسحة والخلف

اإللكترونات عكس في تتسب العينة كذلكويمكن ثانوية الكترونات عليها يطلق

الصورة إلنتاج إستخدامها

وتجاري واسع نطاق على الماسح المجهر أستخدم هذا وعلىاألبحاث 1965 عمل في بارز دور لة أصبح الوقت ذلك ومنذ م

الماسح . المجهر ويعتبر والصناعية والجيولوجية الحيويةالنافذ لعمل مكمل

الماسح المجهر في التبيين قدرة وتعتمدResolving Power

أشعة نقطة حجمتمسح التي اإللكترونات

العينة

المفحوصة العينة طبيعةتتداخل التي والطريقة

اإللكترونات أشعة فيها

المسح خطوط. سرعة وعددالمتكون الخيال

إلى تصل الماسح في التبيين قدرة بأن العموم وعلى10nm

Tissue Processing

التثبيتFixation العينات Washingغسيل الماء Dehydrationنزع الحرجة بالنقطة Critical Pointالتجفيف

drying التجفيف بعد ما عملياتProcessing Specimens after drying العينات الحوامل على Specimen stubs التحميل

Fixation التثبيت

مرحلتين على يكون األول Primary Fixationالمثبت

الجلوالدهيد Bufferd glutraaldhyd% 3-2بمحلول

لمد الغرفة حرارة درجة ليلة – 3-2عند أو ساعاتالثالجة في كاملة

مادة تثبيت في مهم في glycogen & proteinوهووالخاليا النسيج

Fixation التثبيت

الثانوي Secondary Fixationالمثبت

األوزميوم حمض Bufferd Osmic acid% 1بإستخدام

Osmium tetroxid –OsO4

الغرفة حرارة درجة عندفي مهم وهو

الدهنية- 1 المادة والخاليا Lipidتثبيت النسيج فيالكيمياء- 2 وعينات اإللكتروني المجهر لعينات أولية كصبغة

النسيجية الحزم- 3 وشعاع العينة بين الكهربائي التوصيل عملية من يزيد

زيادة بسبب التباين زيادة إلى يؤدي وذلك اإللكترونيةالكهربائي التوصيل

العامة : التثبيت أهمية

. والتفسخ التفتتت من العينة على الحفاظ بفعل الذاتي التحلل من العينة على الحفاظ

والبكتيريا . اإلنزيمات وتويل والقسوة الصالبة من شئ العينة إعطاء

صلب . إلى السائل النسيج محتوى . اإلنكماش عيوب من النسيج حماية . والكحول المثبتات بين كوسيط يعمل . مصدرة في وحالتة طبيعتة على النسيج بقاء

التثبيت على تؤثر هامة عوامل

العينة أخذ قبل األولي المثبت تركيز ) ( صغيرة تكون العينة حجم مصدرها من العينة نقل سرعة العينة حجم مع تتناسب أن يجب التثبيت مدة التثبيت كمية – – – – ( لون بدون ال أم متاكسد قديم جديد المثبت جودة

أسود – ( أصفر المنظم المحلول نوع الحموضة درجة اإلسموزية

العينات Washingغسيل

بعد خاصة هام أمر وبعدها المثبتات بين العينة غسيلالثاني لفترة , O.Aالمثبت آثارة أو بقاءة حيث

النسيج على يؤثر طويلةتليها التي المادة مع المثبت مكونات تتغاعل قد وكذلكالنسيج مكونات في تغيرات التفاعل هذا عن فينتج

والخلية .: التالية الطرق بأحد الغسيل إلى نحتاج لذلك

dehydrationالتجفيف

العينة من الماء نزع عملية الماء جزيئات من التخلص عملية النسيج H2Oهي من

انواع احد بواسطة وذلك والنباتية الحيوانية والخالياواإليثانول الميثانول فقط الكحوالت

األقل من بالتركيز التدرج بشرط االسيتون مادة بواسطة أولألعلي

ذات للمادة الالحقة للخطوة النسيج تقبل اجل من مهم وهذاالمتصلبة العالية الكثافة

لمادة العينة تعرض وقت زاد كلما التالي الجدول وحسبالصالبة زادت كلما الماء نزع

االنكماش سلبية زادت كلما الماء نزع مدة قلت وكلما

الكحول تركيزالمستخدم

المرات الفترة عدد حلول

30% ETHANOL2X10 MIN

50% ETHANOL2X10 MIN

70% ETHANOL2X10 MIN

90% ETHANOL2X10 MIN

95% ETHANOL2X10 MIN

100% ETHANOL3X10 MIN

الماء نزع لعملية هامة عوامل

من 1. والبداية للكحوالت العينة تعريض الخفيف % 30التدرجمن نبدأ النباتات عينات بعض في بل الحيوانية % 5للعينة

لها% 100وحتى% 10ثم السيتوبالزم مكونات ان حيثقد التدرج عدم وكذلك الخلية خدران عن لالنفصال القابلية

للخلية والتشوة الإلنكماش الى يؤديبالترتيب- 2. االلتزام التتابعالماء 3. مع تحضيرة يتم الذي الكحوالت احد على االستقرار

المقطر.4) العينة ) نوع علي تعتمد والفترة الوقت

وقت ←الخاليا أقل. ) - - وقت ) اكثر قاسية طرية كبيرة االنسجة

بالمجهر العينات تحضير عند أخذه الواجب اإلحتياطات بعض هناكاإللكتروني

حجم العينةكبيرة تكون ال أن

التثبيت في أطول زمنالسوائل نزع صعوبة

تنظيف العينةالمحاليل في بغمرها وذلك

مناسبة التثبيتفسيولوجيةمباشرة التثبيت تتم أن البد

تنظيفها بعد

مجموعة من المسطبة الخاصة بحمل العينات النعدة للفحص بالمجهر اإللكتروني الماسح