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EXAME DE URINA
EQUIPAMENTOS
URINA TIPO 1 OU EAS - EXAME QUÍMICO
TIRAS REATIVASMeios simples e rápido de realizar análises bioquímicas
importantes: pH, proteínas, glicose, cetonas, sangue, bilirrubina,urobilirogenio, nitrito, densidade e leucócitos.
Constituem-se em pequenos quadriculadas de papel absorventesimpregnados com substância químicas presos a uma tira suporte.
As cores resultantes das reações são interpretadas conformetabela de cores fornecidas pelo fabricante.
As tonalidades das cores podem inferir um valor semi quantitativo(traços; +;++;+++;++++). Há também uma estimativa em mg/dl paraalgumas áreas.
Cuidados com as tiras reativas- Mante-las com dessecante em um recipiente opaco e bem fechado.- Local fresco, não refrigerado.- Não as expor a vapores voláteis.- Não usar depois do período de validade.- Consumir no máximo em seis meses após abertas.- Não usar as tiras que tiverem perdido a cor.
URINA TIPO 1 OU EAS - EXAME QUÍMICO
CONTROLE DE QUALIDADE
- Testar os frascos abertos com controles positivos enegativos.
- Registrar todos o procedimentos de controle e númerosdos lotes das tiras reativas após abertura.
TÉCNICA:- Misturar bem a amostra;- Mergulhar a tira completamente, por breve tempo (3 seg);- Remover o excesso de urina na borda do recipiente ou em papel;
A composição química da urina varia conforme dieta alimentar, temperatura, exercícios e outras causas.
URINA TIPO 1 OU EAS EXAME QUÍMICO
1) GLICOSE (glicosúria)
- Fisiologia:
- Quase toda glicose filtrada pelos glomérulosó reabsorvida no túbulocontorcido proximaló urina contém quantidades mínimas de glicose;
- A reabsorção tubular ó transporte ativo ó mantém níveissangüíneos adequados. Hiperglicemia ó cessa a reabsaroção óaparece na urina = glicosúria;
- Limiar renal: 160 a 180 mg/dl (sangüíneo)ó cessa a reabsorção
- Significado clínico:
- A primeira urina da manhã ó nem sempre representa uma amostraem jejumó contaminates por alimentos do jantar. Instrução: Esvaziara bexiga e colher a segunda amostra.
- Tolerância a glicoseó exames de urina e sangue.
- Glicosúria sem hiperglicemiaó doenças que a afetam a reabsorçãotubular (hiperglicemia não diabética, lesões de S.N.C e nos distúrbiosda tiróide).
- Mulheres grávidas com glicosúria durante o terceiro trimestre dagestaçãoó risco de diabetes latentesómonitorização cuidadosa
Doenças associadas a glicosúria
- Diabetes mellitus - Reabsorção tubular deficiente- Lesões de S.N.C a) Sindrome de Fanconi- Gravidez com diabetes latente b) Doença renal avançada
Métodos de análises:
A) Tiras Reativas
Área do teste impregnada com uma mistura de glicose oxidase,peroxidase, cromógeno e tampão ó reação enzimática colorimétrica(iodeto de potássio ou tetrametilbenzidinaó cromogênios).
- Leitura: traços, 1+, 2+, 3+, 4+;- Tabelas de cores (quantitativo): de 100 mg/dl (0,1%) a 2 g/dl (2%)óAmerican Diabetic Association.
- Sensibilidade: entre 50 e 100 mg/dl ó não detecta pequenasquantidades de glicose na urina.
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Interferentes
- A glicose oxidase é específica para a glicose
- Não há reação falso positivo por processos fisiológicos.- Mesmo na presença de outros açucares;- Recipientes da coleta contaminados com peróxidos,
detergentes ou oxidantes fortesó falso positivo;
- Falso-negativo- Amostras mantidas à temperatura ambiente sem
conservantes ó rápida glicólise (erros técnicos: Maiores fontes de falsosnegativos!!!!)
- Presença de ácido ascórbico, ácido 5 hidroxi-indolacético,aspirina e levodopaó impedem a oxidação do cromógeno;
- Níveis elevados de cetonas + baixa concentração deglicoseó não há reação (cetonas vem acompanhadas por intensa glicosúria ónão gera problemas)
- Densidades acima de 1020 e pH elevado podem reduzira sensibilidade do teste quando baixa glicemia.
Reação de Benedict
Reagentes:- Reagente de Benedict (2,5ml);- Urina (5 gotas);- lamparina;
Resultado:Azul= negativoVerde= traçosAmarelo= +Laranja= ++Vermelho (telha)= +++
Técnica:- Colocar 2,5mL do reagente de Benedict em tubo de ensaio grande ;- Pingar 5 gotas da urina;- Homogeneizar;- Com auxílio de uma pinça de madeira, ferver a solução por 2 minutos;- Análise e leitura imediatas.
- Climitest- Contém hidróxido de sódioó reageó urina e águaó produz calor;- reage com citrato ó liberação de CO2 ó evita que o ar ambientalinterfira na reação de redução.- Ao fim da reação efervescenteó comparação entre as cores.
Fenômeno “Travessia” (pass through): a cor produzida passa rapidamente pelo estágio laranja e volta ao azul ou azul-esverdeado e uma glicosúria intensa pode ser
registrado com negativo.
-Interferência: ácido ascórbico, dos metabólicos de certas drogas como acefalosporina.
Outros açucares que podem ser encontrados na urina
- Galactosúria do recém-nascido: alteração matabólica ó ausência dagalactose-1-fosfato-uridiltransferase ó impede a degradação de galactoseingeridaó distúrbios de crescimento e outras complicações.
- Detecção precoce e restrição alimentaró controle da doença.- Lactose: Freqüente na urina de mães que amamentam;- Outros açucares redutoresó pouco significado clínico;
- CETONAS
Produtos intermediários do metabolismo das gorduras, que são:acetona, ácido acetoacético, ácido beta-hidroxibutirico.
A gordura normalmente não aparece quantidades mensuráveis naurina (toda gordura é decomposta em CO2+H2O
Quebra da gordura orgânica (ausência do carboidrato)ó cetonúria.Causas para aumento do metabolismo das gorduras:
- Incapacidade de metabolizar carboidratos (diabetesmellitus);- Aumento de perda de carboidratos por vômito;- Ingestão insuficiente de carboidratos associado a carênciaalimentar e redução de peso.
Significado Clínico- acidose diabética- controle na dosagem de insulina- carência alimentar
- CETONASTiras Reativas
Os três compostos de cetona não se apresentam em quantidadesiguais na urina:
78% de ácido beta-hidroxibutílico20% de ácido acetoacético2% de acetona
Reação: O ácido acetoacético em meio alcalino reage com onitroprussiato de sódioó Cor púrpura progressiva
O ácido beta-hidroxibutílico não é medido e a acetona é de baixa sensibilidade, sendo detectada se a glicina estiver presente. Estes compostos são derivados do ácido acetoacético,
não sendo necessário realizar testes específicos.
Resultados qualitativos: negativo, 1+, 2+, 3+.Nos casos de cetose aguda pode ser necessário realizar testes em diluições seriadas para
conseguir mais informações quanto ao grau de cetose.
- CETONAS
Significado Clínico da cetonúria
- Acidose metabólica
- Acompanhamento da dosagem de insulina
- Jejum
- Má absorção/Doenças pancráticas
- Exercícios extenuantes;
- Vômito
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Tiras Reativas
Substâncias Interferentes
A reação do nitroprussiato está sujeita a um mínimo de interferênciaexterna.
Falso-positivo:- Presença de levodopa e medicamentos com sulfidrila
(captopril) em grande concentração;- Após procedimentos diagnósticos que empregam corantes
de ftaleina ó produzem cor vermelha que interfere no meio alcalino doteste.
- Presença de fenilcetonas na urina também podem distorcera reação de cor.
Falso-negativos:- Conservação incorreta ó volatilização da acetona e a
degradação do ácido acetoacético por bactérias.
pH
- Pulmões e rinsó importantes reguladores do equilíbrio ácido-básico;- Regulação: Secreção do hidrogênio (íons amônio,fosfato de hidrogênio,ácidos orgânicos) e reabsorção de bicarbonatos.- Indivíduo normal:
- Primeira urina da manhã com pH ligeiramente ácido (5 e 6);- Demais amostras: pH entre 4,5 e 8, 0.- Devem ser considerados: valor do equilíbrio ácido-básico do
sangue, função renal, presença de infecção no trato urinário, ingestão dealimentos e tempo de coleta de amostra.
Significado Clínico
Urina ácida: sub-alimentação, diarréias graves, acidose diabética eapós o uso de medicamento acidificantes.
Urina básica: alcalose respiratória ou metabólica (hiperventilação ouperda do suco gástrico),uso de medicamentos alcalinizantes; dietavegetariana e
- Há formação de cristais urinários e cálculos renais pela precipitação desubstâncias químicas de natureza inorgânica dissolvida na urina óimportante na identificação de cristais presentes no sedimento.- O pH urinário pode ser controlado através de dieta e com medicamentos.
Alimentos, ricos em proteínas (ex: carnes) produz urina ácida.Frutas e vegetais pela formação de bicarbonatosó urina alcalina.
A manutenção de acidez urinária ó útil no tratamento das infecções do trato urinário causadas por microorganismos que não multiplicam em meio ácido, ou reduz a
eliminação de algumas drogas.
Fita ReativaIndicadores:
Vermelho de metila ó ativo na faixa de 4,4 à 6,2 e muda dovermelho para amarelo;
Azul de bromotimoló passa do amarelo para azul e a faixa de açãoé entre 6,0 à 7,6.
Assim: Leitura de 5 a 9 (Laranja pH= 5 passando pelo amarelo e overde, até o azul escuro final com pH= 9);- Não se conhece substâncias que interfira na medida de pH das tirasreativas. Margem de erro 0,2.
PROTEÍNAS
- A mais indicativa de doença renal é a determinação de proteínas.- Urina normal ó pequena quantidade (menor de 10 mg/dl ou 150 mg por24 horas).
Proteína séricas de baixo peso molecular, filtrada seletivamente pelos glomérulos e proteínas produzidas no trato urogenital. Proteína de Tamm-Horsfall produzida pelos
túbulos e a proteínas proveniente de secreção prostáticas, seminais e vaginais podem também estar presentes.
Significado Clínico
Principais causas:- Lesão da membrana glomerular,- Distúrbios que afetam a reabsorção tubular das proteínas filtradas;
Membrana glomerular lesada ó apresentam substâncias comomatéria amilóide, agentes tóxicos e complexos imunes encontrados nolúpus eritrematoso, na glomerulonofrite estreptocócica ó filtraçãoglomerular prejudicadaó Albumina sérica e globulina passam através dessamembrana e são excretadas na urina.
PROTEÍNAS
Significado Clínico
- Maior quantidade de albumina ó presente em distúrbios que afetam areabsorção tubular.- Lesão glomerularó elimina até 40 g/dia;- Ex.: Excreção da proteína de Bence Jones por pessoas com mielonamúltiplo ó diistúrbios proliferativo dos plasmócitos produtores deinumoglobulinas.
RESUMO DO SIGNIFICADO CLÍNICO DE PROTEINÚRIA1- Lesão da membrana glomerular
a- Distúrbios por imunocomplexob- Amiloidosec- Agentes tóxicos
2- Reabsorção tubular deficiente3- Mielona múltiplo4- Proteinúria ostostática ou postural5- Pré-eclampsia6- Doenças renais decorrentes de diabetes mellitus.
Tiras Reativas
-Reagente:- Azul de tetrabromofenol ou 3,3, 5,5 tetraclorofenol 3,4,5,6tetrabromossulfenolftaleina e um tampão para manter o pHconstante.
Leitura: negativo e traços, +,++,+++,++++ em valores semi-quantitativo em mg/dl. A cor vai passado por várias tonalidades deverde ficando finalmente azul.
-Sensibilidade: As tiras medem albumina, não as proteínas tubulares e aBence Jones.
- Sempre que houver leitura positiva ó confirmar com método térmicos osde precipitação de ácidos.
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Teste de Precipitação
- Os primeiros testes de precipitação utilizavam calor para desnaturar aproteína e produzir precipitação, porém outras substâncias não protéicasencontradas na urina também são precipitadas pelo calor.
- Atualmente: Substitui-se o teste do calor e ácido pelo ácidosulfossalícilico em várias concentrações. Pode ser feito uma curva padrãousando concentração conhecidas de proteínas, chegando assim a umprocesso quantitativo. A quantidade de precipitação produzida pode sermedida visualmente em comparação com um conjunto de parâmetros ou porespectrofotometria.
Outros métodos de pesquisa na proteína na urina:
- Reativo de Robert- Prova do ácido tricloroacético.
Teste de Precipitação
Substâncias interferntes
- Nas tiras:- Urina extremamente alcalina ó anula o tamponamento óelevação do pH ó mudança na cor sem relação com aconcentração de proteína.- Contato exagerado da urina com a fita ó remove o tampão ó
falso – positivo.- Contaminação do recipiente por compostos de amônio quaternário e
detergentesó falso – positivo.
-No teste de precipitação:-Substancias: corantes radiográficos, os metabólicos de talbutamidaas cefalosporina as penicilinas e as sulfonamidas.- Urina alcalinaó falso – negativos.
Centrifugar amostrasó remove turvação.
Exercícios avaliativos
PROTEINÚRIA
1- Qual a origem da PROTEÍNA DE BENCE JONES?
1a- Como se detecta sua presença? Descreva o princípio da técnica.
2- O que é a proteinúria ortostática?
2a – Qual o procedimento para se evitar um erro de diagnóstico?
EXAME MICROSCÓPICO DA URINA
- Objetivo: detectar e identificar materiais insolúveis presentesna urina;- Consome mais tempo na análise:
- Alguns laboratórios: triagem química:Correlação da triagem macroscópica
Cor Sangue
Aspecto Hematúria/Hemoglobinúria/mioglobinúria
Sangue Glóbulos vermelhos/Cilindos hemáticos
Proteína Cilindros/células
Nitritos Bactérias/Globulos brancos
Esterase Leucocitária Glob. Brancos/Cilindros leucocitários/Bactérias
Glicose Fungos
EXAME MICROSCÓPICO DA URINA
- Populações especiais:- Mulheres grávidas-Pacientes pediátricos;-Geriátricos;-Diabéticos;- imunocomprometidos;- Pacientes renais;
Preparo da amostra
- Frescas ou adequadamente conservadas;- Urinas alcalinas: desintegram GV, GB e cilindros hialinos;- Refrigeração: precipitação de urato, fosfato amorfo óaquecer até 36º = dissolve tais elementos;
- Volume: 12mL (padronizados). Informar se menor (pediátrico)ou fazer a correção (proporcional);- tubos tampados = risco biologico de aerossois
Preparo do sedimento
- Manter fator de concentração do sedimento uniforme:
- Vol. urina centrif. / Vol. de sedimento = FCSU
- Ressuspender cuidadosamente ó evita romper os elementos;- Volume para análise: 20 µL. Se extravasar ó perda doselementos mais pesados (principalmente cilindros);
Exame do sedimento
- Exame de 10 campos em pequeno (10X) e grande aumentos(40X). Inicialmente no pequeno aumento = detecta cilindros ecomposição geral. Cilindros identificados em 40X.
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Constituintes do sedimento
- Eritrócitos:- discos côncavos (40X)- Referidos pelo número médio observado em 10campos;- Hipertesnúrica (urina concentrada) = podem aparecercrenadas pela perda de água;- Hipostenúria = incham e lisam rapidamente = absorvemágua;
- Significado clínico:- Danos na membrana glomerular- Lesão vascular- Fontes:
-Traumas, infecção, inflamação, coagulopatias;- Doenças glomerulares, carcinomas e cálculos;- Hem. + cilindros hialinos, hemáticos ou granulares =exercício extenuante (desaparecem com o repouso).
Constituintes do sedimento
- Leucócitos:- Maiores que hemácias (40X)
- Neutrófilo = predominante- Relatado: Nº médio em 10 campos;
- Eosinófilo:- Nefrite intersticial, infecção e rejeição póstransplante- Coloração necessária (Hansel) = Mais que 1% =significância clínica;
Constituintes do sedimento
- Células epiteliais:- Derivadas do revestimento genito-urinário;- Descamação normal de células (renovação tecidual);- Tipos de acordo com a origem:
- Escamosas- De transição (ou uroteliais)- Tubulares renais
Epiteliais escamosas
- Maiores encontradas no sedimento;- Citoplasma abundante e irregular com núcleo pequeno (10X)- Relato: raras, poucas, algumas ou muitas;- Origem: Revestimento da vagina e uretra (masc e femin);
- Descamação regular normal = sem significado patológico.
Células Epiteliais Escamosas
Células epiteliais de transição (Uroteliais)
- Várias formas (esféricas, poliédricas, caudadas) = facilidadeem absorver água;- Núcleo distinto e central (40X)- Relato: raras, poucas, algumas ou muitas;- Origem: revestimento da pelve, cálice, ureteres, bexiga eporção superior da uretra masculina- Pequeno número = descamação normal;
- Sincícios (aglomerados) ou aos pares = procedimentosinvasivos = sem significado patológico
- Significado patológico:- Aumento do número com morfologia anormal (vacúolos enúcleos irregulares) = malignidade ou infecção viral
Encaminhar para exame citológico.Células neoplásicas
Alterações celulares = Vacúolos citoplasmáticos
Células epiteliais de transição ou Uroteliais
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Células epiteliais Tubulares renais
- Várias formas e tamanhos = depende da área dos tubulos;- Presentes como resultado de destruição tecidual (necrose);- identificadas 40X;
- Túbulo contorcido proximal (TCP) = maiores e retangulares (tbchamadas de colunares ou convolutas);
- Citoplasma grosseiramente granular (podemassemelhar-se aos cilindros = diferenciar pela presençado núcleo);
- TCD = menores, redondas ou ovais.- A localização do núcleo diferencia das transicionais (núcleocentral)
- Descrever a origem tubular ó não faz parte da rotina;
- Mais de 2 células = indica lesão tubular ó solicitar examecitológico da urina
Células epiteliais Tubulares renais
- Necrose tubular:- exposição a metais pesados, drogas, infecções virais(hepatite B), pielonefrite, reações alérgicas, intoxicações porsalicilato
- Tais células tem a função de reabsorção do filtrado glomerular= podem aparecer coradas (amarela nas hepatites)
Outros elementos
- Lipidúria: presença de corpos ovais gordurosos, gotículaslivres
- lesão glomerular (síndrome nefrótica), diabetes mellitus,traumas medulares;
- Bacteriúria: Contaminação ou infecção.- Multiplicam rapidamente- N º aumentado com leucócitos = indicativo de cultura
lipiduria
Espermatozoides e hemácias
Cilindros
- Únicos elementos que são exclusivos do rim;- Fornece uma análise das condições dos nefrons;- Exame em pequeno aumento ó principalmente bordas dalamínula e com pouca luz (baixo índice refratométrico);- Se dissolve rapidamente em urinas alcalinas e diluídas;
- Devem ser identificados quanto à sua composição ó maior aumento;
- Formação:- Principal componente: Proteína Tamm-Horsfall óglicoproteína excretada pelas células epiteliais dos túbuloscontorcidos;- Outras proteínas: albumina e imunoglobulinas- Excretada em ritmo constante pelos rins. Aumenta noscasos de estresse e exercícios.- Proteína gelifica: estase urinária, presença de acidez,cálcio e sódio.
Cilindros
- Quando se formamó diminui o fluxo urinário;-Formação: Influenciada por materiais presentes no filtrado etempo de permanência no túbulo;
Cilindros Hialinos
- Mais freqüente (zero ou dois = normal);- Composição: Prot. Tamm-Horsfall;- Incolores e índice de refração próximo ao da urina (luz baixa)- Aumento:
- Exercício extenuante, desidratação, exposição ao calor,estresse emocional.- Patologias: glomerulonefrite aguda, pielonefrite, doençarenal crônica, insuficiência cardíaca congestiva.
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Cilindros Hialinos
Cilindros Hemáticos
- Indica hemorragia no interior do néfron;- Visualização: pequeno aumento, cor laranja-avermelhada;- Causas:
- Prática de esportes com traumas constantes;- Patológico: glomerulonefrite (associados a proteinúria eeritrócitos disfórmicos), necrose tubular;
- Presença associada: Hemácias livres e sangue em fitareagente.
Cilindros Leucocitários
- Indica infecção ou inflamação no nefron;- Composição: neutrófilos (quase exclusivamente)- Causas:
- Pielonefrite (achado de diagnostico diferencial da infecçãodo trato urinário)
- Presença conjunta: Leucócitos livres- Pielonefrite: bactérias livres- Nefrite intersticial aguda (sem bactérias, mas com
eosinófilos na amostra)
Cilindros de células epiteliais
- Indicam avançada destruição tubular ó estase urináriae ruptura do revestimento tubular;
- Causas:- metais pesados, substancias químicas, infecçõesvirais e rejeição a enxertos;- Acompanham cilindros leucocitários naspielonefrites- hepatite: células coradas pela bilirrubina.
Cilindros Granulosos
- Podem ter significado patológico ou não:- Origem dos grânulos em condições não patológicas:
- lisossomos excretados palas ETR, durantemetabolismo normal, acumulam-se nos cilindroshialinos (1ou 2 granulos)
- Condições patológicas:- Desintegração de células tubulares- Agregados de proteínas filtradas pelo glomérulo.
- Quando permanecem por longos períodos nos túbulos:grânulos se desintegram, matriz se torna rígida, com matrizirregulares e diâmetro amplo.
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Cilindros Céreos
- Representam a estase urinária extrema ó insuficiência renalcrônica;- Origem: Degeneração da matriz do cilindro hialino, de outroselementos celulares e grânulos;
- Aparece fragmentado, com extremidades irregulares ouentalhes nas faces = baixa consistência da matriz
- Corante supravital (KOVA)ó rosa escuro, homogêneo.