Secuencia para el recuento de Zooplancton

Muestreo y transporte

Conservación

Concentración

Identificación

Lectura y cálculos

Expresión de los resultados

Control de calidad

Materiales y reactivos

Microscopio invertido con aumento de 100x Cámara de recuento de Sedgwick-Rafter de 1 mL de

capacidad Portaobjetos y cubreobjetosMalla de Nylon de 60 µm de poro y 45µm de poro Equipo de filtración Probeta de 1000 o 2000 mL Pipetas de 5 mL Embudo de cuello corto de 50 mm de diámetro Frascos de vidrio con tapa de 5 mL de capacidad Formaldehído concentrado

MUESTREO

Objetivo del estudio Frecuencia- Lugar Sitio de muestreoNaturaleza física del agua (aguas quietas-

corrientes- mareas) Volumen de la muestra – (nº de determinaciones y

la densidad estimada)

REDES DE PLANCTON

ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE

• Bidones de 5 litros • Muestras refrigeradas • Etiquetar los frascos (estación de muestreo, área

de estudio, tipo de muestra, profundidad, fecha y hora)

• Colocar conservantes, si no se realiza el procesamiento de la muestra inmediatamente.

CONSERVANTESSolución de Lugol: * Disolver 20 g de ioduro de potasio (KI) y 10 g de cristales de iodo (I) en 200 mL de agua destilada conteniendo 20 mL de ácido acético glacial.

Solución de Formalina: Disolver 20 g Borato sódico (Na2B2O4) + 1 L de formaldehido 37% . Concentración final 3 a 4 %

Formol concentrado

Agregar 0,3 ml de solución de Lugol a 100 mL de muestra

Concentración por filtración en malla de Nylon

• Volumen de muestra a prox. 5 L, que varia según la turbiedad presente.

• Homogeneizar la muestra suavemente.• Filtrar sobre una malla nylon de 60 um de poro

en un equipo de filtración, sin presión.• Enjuagar la probeta y equipo de filtración con

agua destilada al finalizar la filtración de la muestra

• Retirar la malla con una pinza sin tocar área de filtración y colocarla sobre la pared del embudo.

• Lavar la malla con 5 mL de agua destilada, con una pipeta hasta que se desprenda todo el material.

• Recoger el concentrado en un frasco con tapa, rotulado con la identificación de la muestra y el volumen de muestra y volumen concentrado,

• Fijar la muestra con 0,25 mL de formaldehido si no es agua clorada

• No fijar las muestras cloradas

IDENTIFICACION

El Nivel Taxonómico debe establecerse

previamente y estar de acuerdo a:

Disponibilidad de personal capacitado

Propósito del análisis

Tiempo disponible

IDENTIFICACIÓN

Ver organismos vivos en Cámara de Sedgwick Rafter y/o porta y cubre

Utilizar claves taxonómicas

RECUENTO

• Homogeneizar el concentrado por agitación manual.• Cargar la cámara de Sedgwick Rafter con 1 mL de

muestra• Antes de comenzar el recuento dejar sedimentar los

organismos aprox. por 10 min.• Comenzar la lectura desde la esquina superior

izquierda de la cámara y desplazarse hacia el borde derecho, Tomar una partícula como referencia y bajar un campo para contar otra transecta.

• Terminar de leer toda la cámara

Cámara de Sedgwick Rafter

Cámara de vidrio con capacidad de 1 mm

50 mm de largo20 mm de ancho 1 mm de profundidad

Si el número de organismos en 1 mL es menor a 200,contar todos los mL del concentrado o los mLnecesarios hasta llegar a 200 organismos deldominante

Cada vez que se cargue la cámara, lavar previamentecon cepillo y detergente para despegar cualquierorganismo o partícula adherida

Cálculos

Expresión de los resultados

Organismos Totales/L

Es igual a la suma de los organismos/L de cada género

Control de calidad interno Ensayos Duplicados

Cartas de rango mismo y distinto analistas