Post on 13-Sep-2018
Module transfusioncours IFSI
Dr SLIMANE MohamedIH/distri
EFS Dijon
Plan des cours
1 Collecte( à titre informatif)2 groupe ABO, technique 3 Les différents PSL,alternative à la transfusion4 Contrôle ultime,ED 5 Accident transfusionnel
1 Collecte et 2 groupe ABO, technique
A Le don du sangB Le groupage sanguin C Les différentes techniques de groupages( àtitre informatif)
A Le don du sang ( à titre informatif)
AnonymeVolontaireGratuitAvec entretien médicale avant donSuivi post don
L’entretien médicale( à titre informatif)
Une sécurité pour le donneur et le receveurSélection du donRéalisation systématique de bilan et sérologie à chaque donVérification d’absence de pathologie CI au don (ATCD, voyage, infection, médication …..)
Les différents dons de sang( à titre informatif)
« Matières Premières ou P.S.L. produits sanguins labils » :Au nombre de 3Le SANG TOTAL (ST)Les CONCENTRES de PLAQUETTES d’APHERESE (CPA)Le PLASMA d ’APHERESE
Du Donneur aux Patients( ( àà titre informatif)titre informatif)
Prélèvement+
QBDPT PREPARATION
Patients
Distribution PSL
L’EFS Bourgogne / Franche -Comté (EFS B/FC)
( à titre informatif)
9 sites de prélèvements9 sites de distribution1 Plateau Technique de Qualification Biologique du Don ( à Metz Tessy)1 Bioth èque (à Dijon)1 Plateau Technique de Préparation (àBesan çon)
L’ORGANISATION de l‘ EFS B/FC( ( àà titre informatif)titre informatif)
BesançonBelfort
AuxerreSens
DijonChalonMaconNevers
Plateau Technique QBD Metz Tessy
Plateau Technique Préparation Besançon
Tubes de qualificationPrélèvementsMatière premièreProduits finis
Plateau Technique de Préparation ( à titre informatif)
BESANÇONtraite les PSL prélev és sur les sites de prélèvement de la région Bourgogne Franche Comté soit plus de 150 000 prélèvements / anSupervise la logistique du transport des PSL
Le plateau de qualification( à titre informatif)
Metz-TessyGroupage sanguins ABODépistage des maladies transmissiblesSérologie virale + PaludismeSérothèque (Biothèque)
Distribution( à titre informatif)
Des PSL par des personnes qualifiés (techniciens ou infirmières)Vérification de la conformité de la prescriptionSélection des produits adaptésDélivrance selon le degré d’urgence
B Les groupes sanguins
Les groupes sanguins se répartissent en systèmes :ABO, Rh…
Chaque système est défini par:Un ensemble d’antigènes de la membrane du globule rouge génétiquement induits par une unité génétique.
Leur étude doit donc envisager les antigènes et les anticorps qui leur correspondent
Les antig ènes de groupes sanguins
Les antigènes de groupes sanguins sont portés par des glycolipides ou des glycoprotéines et sont exposés à l’extérieur de la membrane.
Les antig ènes de groupes sanguins
Leur classification se fait selon deux niveaux :
Premier niveauPremier niveau : les antigènes de groupes sanguins. plus de 650 actuellement(exemples : Ag A, B, D, Fya, M, Lea…)
DeuxiDeuxièème niveaume niveau : ces antigènes sont regroupés en 23 systèmes de groupes sanguins.
On appelle système de groupes sanguins l'ensemble des antigènes élaborés par les allèles d'une même unité génétique.
Les différents systèmes de groupes sanguins ( à titre informatif)
SYSTEME SYMBOLE
ABO ABO
MNSs MNS
P P1
Rh RH
Lutheran LU
Kell KEL
Lewis LE
Duffy FY
Kidd JK
Diego DI
Cartwright YT
Xg XG
Scianna SC
Dombrock DO
Colton CO
LW LW
Chido-Rodgers CH /RG
H H
ABO et associés
Rh et collègues
• Tissulaires • Pas propres à l'homme • Possèdent des
anticorps naturels • Problèmes en
transfusion et en transplantation
• Propres aux GR • Propres à l'homme • Ne possèdent pas
d’anticorps naturels • Problèmes en cours
de grossesse et lors des transfusions
ABO Hh et Sese Lewis Ii P Luthéran
MN
Rh Kell Duffy Kidd Ss
Deux familles de groupe sanguin (Très important)
Le plus important des groupes sanguinssystème majeur de l'immunologie transfusionnellerôle fondamental dans l'immunologie de greffe (peau ,
rein.)
Le système ABO( à titre informatif)
Découvert en 1900 par Karl Landsteiner
La structure biochimique: des sucres
A ���� Gal Nac transférase ���� N acétylgalactosamine ����AgAB ���� Gal transférase ���� Galactose ����Ag BO ���� enzyme inactive ���� substrat non converti ����Ag H
4 groupes sanguins définis :
Par les antigènes des globules rouges
Par convention , les groupes ABO sont définis par les antigènes présents sur les GR.A lorsque seul l'antigène A est présentB lorsque seul l'antigène B est présentAB si les antigènes A et B sont présentsO si ni l'Ag A ni l'Ag B ne sont présents
Le système ABO
A1
Ax Am
A3A2
Phénotypes Nombre de sites A
A1A2A3Ax
AendAmAyAel
800 000 à 1 000 000200 000 à 300 00030 0004 000
01. à 1 900< 200< 200
Les antig ènes ABH ( à titre informatif)
Enzyme H Enzyme BEnzyme A
Substance de base
Ag H Ag B Ag A
Gène H
Gène A
Gène B
ABO et associés
Les ph énotypes ABOPhénotypes ABO et leur fréquence
dans la population française
Groupessanguins
antigènesglobulaires
anticorpssériques
Fréquenceen France
AB
ABO
ABAB
Aucun
Anti-BAnti-AAucun
anti-A anti-B
45%9%3%43%
Génétique du système ABO( à titre informatif)
Couples Enfants possibles
O x OO x AO x BO x ABA x AA x BA x ABB x BB x ABAB x AB
OO, AO, BA, BO, AO, A, B, ABA, B, ABO, BB, A, ABA, B, AB
Génétique du système ABO( ( àà titre informatif)titre informatif)
Génétique du système ABO( ( àà titre informatif)titre informatif)
Génétique du système ABO( ( àà titre informatif)titre informatif)
Génétique du système ABO( ( àà titre informatif)titre informatif)
Génétique du système ABO( ( àà titre informatif)titre informatif)
Les anticorps de groupes sanguins
Ce sont des immunoglobulines :soit de nature IgM,soit de nature IgG.
Ils sont synthétisés en réponse àl'introduction d'antigènes dont l'organisme est dépourvu, selon les règles de la réponse immunitaire humorale
La réponse immunitaire humorale
IgG
IgM IgG
Taux d’Ig
temps
Période de latence Réintroductionde 7 à 21 jours de l’antigène
Introductionde l’antigène
Réponse Primaire Réponse Secondaire
Les anticorps de groupes sanguins
(Très important)
La classification des anticorps en transfusion se fait selon deux critères :
• naturel ou immun• régulier ou irrégulier.
Ils sont dits naturels lorsqu'ils apparaissent de façon apparemment spontanée
Ils sont dits immuns lorsqu'ils apparaissent après grossesse ou transfusion préalable
Constants –Thermolabiles - IgMSpontanément agglutinants
Les anticorps naturels ABO
réguliers :Correspondent à une réponse primaire constante .Sont toujours présentsApparaissent entre 2 et 6 moisaugmentent jusqu'à 10 ans, puis diminuent.
irréguliers :inconstants dangereux si actifs à 37°C .
Les anticorps de groupes sanguins
Les anticorps naturels sont réguliers, et parfois
irréguliers
• Ce sont habituellement des IgM..• Ils doivent toujours être pris en compte sous peine
de provoquer un accident transfusionnel gravissime.
Les anticorps immuns sont irréguliers,
• l'anti-RH1 (D) du système Rh. • Ce sont habituellement des Ig G.
Les anticorps de groupes sanguins
Anti-AAnticorps naturel régulier
IgM
Anti-DAnticorps immun irrégulier
IgG
Les problèmes transfusionnels
(Très important)Il faut éviter la rencontre d’un antigène avec son anticorps.
En transfusion, 2 situations peuvent se rencontrer :
• introduction d’antigènes (GR) chez un patient possédant l’anticorps correspondant
• introduction d’anticorps (plasma) chez un patient possédant l’antigène correspondant
Les problèmes transfusionnels(Très important)
Transfusion de globules rouges
A ���� A
O O AB AB
B ���� B
Les problèmes transfusionnels(Très important)
Transfusion de plasma
A ���� A
AB AB O O
B ���� B
Les circonstances de l’immunisation (Très important)
La cause des immunisations est double : • grossesse ou transfusion.
Les conséquences sont aussi doubles : • maladie hémolytique du nouveau-né et• accident transfusionnel.
Les anticorps naturels sont une exception àcette règle, et une exception apparente aux lois de l'immunologie.
Rh et collègues(Très important)
Propres aux globules rougesPropres à l’hommePas d’anticorps naturelsBien développés à la naissance Acs = immuns = IgGResponsables :
D’accidents transfusionnelsDe MHNN
Le plus immunogène des systèmes de groupes sanguins : transfusions, grossesses.
Le système Rh (RH)( à titre informatif)
Histoire du système Rh•Découverte de Levine en 1939 : allo anticorps
•Landsteiner et Wiener en 194O : hétéroanticorps
Le nouvel antigène découvert est appeléD ou Rhésus.
Actuellement le système Rhésus s'appelle Rh uniquement.
Le système Rh (RH)(Très important)
Les antigènes Rh (RH)
Les sujets qui :ont l'Ag D sont dits D+ ou Rh+ ou RH:1n’ont pas l'Ag D sont dits D- ou Rh– ou
RH:-1
L'Ag D (RH1)- en Europe : présent chez 85%
absent chez 15 %
- au Japon : présent chez 99,9%absent chez 0,1 %
Le système Rh (RH)( à titre informatif)
Les antigènes Rh (RH)
Puis découverte de 4 autres Ags : C, c, E, e.C et E souvent associés à Dc et e souvent associés à d
L'Ag C présent chez 70 %E 30 %c 80 %e 98 %
Les antigènes C et c, E et e sont antithétiques
Le système Rh (RH)( à titre informatif)
Le Phénotype Rh
Les Ags D, C, E, c et e définissent le phénotype Rh d'un individu.
5 antigènes définissent 18 phénotypesdifférents :
fréquents : 34,5% D+ C+ E- c+ e+
rares : < 0,001% D- C+ E+ c- e-
Ecriture du ph énotype ( à titre informatif)
D-C- E- c+ e+ RH:-1,-2,-3,4,5 dce/dce rr
D- C+ E- c+ e+ RH:-1,2-,3,4,5 dCe/dce r'r
D- C- E+ c+ e+ RH:-1,-2,3,4,5 dcE/dce r"r
D- C+E- c- e+ RH:-1,2,-3,-4,5 dCe/dCe r’r’
D- C- E+ c+ e- RH:-1,-2,3,4,-5 dcE/dcE r"r"
D+ C+ E- c- e+ RH:1,2,-3,-4,5 DCe/DCe R1 R1
D+ C- E+ c+ e- RH:1,-2,3-,4,5 DcE/DcE R 2R2
D+ C+ E- c+ e+ RH:1,2,-3,4,5 DCe/dce R 1 r
D+ C- E+ c+ e+ RH:1,-2,3,4,5 DcE/dce R 2r
D+ C+ E+ c- e- RH:1,2,3,-4,-5 DCE /DCE RZRZ
Le système Rh (RH)( à titre informatif)
Phénotypes Nombre de sites RH1
Dccee DCcee DccEe DCCee DCcEe DccEE
D+C-E-c+e+D+C+E-c+e+D+C-E+c+e+ D+C+E-c-e+D+C+E+c+e+D+C-E+c+e-
RH:1,-2,-3,4,5RH:1,2,-3,4,5RH:1,-2,3,3,5RH:1,2,-3,-4,5RH:1,2,3,4,5RH:1,-2,3,4,-5
10 000 à 14 00012 000 à 20 00014 000 à 16 00014 000 à 19 00023 000 à 31 00015 000 à 30 000
La densité antigénique est fonction du phénotype
Le système Rh (RH)
Comment reconnaître un antigène :D faible ?D Partiel ?
Le système Rh (RH)
Antigène D faible
Tous les épitopes sont présents
Déficit quantitatif en sites antigéniques (<10000)
L’agglutination des hématies « D faibles » est variable (- à3+) en fonction des anticorps anti-D et des techniques utilisés
Les sujets porteurs d’un antigène RH1 faible ne s’immunisent pas contre l’antigène RH1
Le système Rh (RH)
Les sujets possédant un Antigène D partiel peuvent s'immuniser par transfusions ou grossesses contre le morceau qui leur manque.
1 2 3
4 5 6
7 8 9
1 2 3
4 5 6
7 8 9
1 2 3
4 5 6
7 8 9
Antigène D Partiel
Ag D normal Ag D faible Ag D Partiel
Le système Rh (RH)
Les anticorps anti – Rh
Résultent tous d'une allo immunisation: anticorps immuns
par transfusionpar grossesse
Il existe des auto anticorps : auto anti-e
Le système Rh (RH)
Les anticorps anti – Rh
Les Acs anti-Rh sont des IgG qui traversent le placenta
Ils sont responsables:d'accident hémolytique post transfusionnelde MHNN sévères
Le système Rh (RH) (Très important)
Immunogénicité des Ags Rh :RH1 D +++ RH4 c +++ RH3 E + RH5 e + RH2 C +
Les spécificités :anti-D le plus fréquent:anti-c et anti-E moins fréquentsanti-e et anti-C rares isolés, fréquents en
association
Le système Kell (KEL) (Très important)
Pouvoir immunogène de l'antigène K(KEL1)
Fréquence ++ des allo immunisations par transfusions ou par grossesse.
Les antigènes du système Kell2 Ags principaux antithétiques
K (K1 ou Kell)k (K2 ou cellano)
Le système Kell (KEL)( à titre informatif)
Nombre de sites KEL1 (K) par GR:
2 à 5 000 sites pour les hétérozygotes KEL:1,2 ( Kk)
4 à 7 000 sites pour les homozygotes KEL:1,-2 ( KK)
Le système Kell (KEL)( à titre informatif)
GénotypePhénotype
Fréquenceen FranceAllèle 1 Allèle 2
k (KEL2) k (KEL2) K- k+ KEL:-1,2 91 %
K (KEL1) k (KEL2) K+ k+ KEL:1,2 8,8 %
K (KEL1) K (KEL1) K+ k- KEL:1,-2 0,2 %
Génétique du système Kell (KEL)
• 2 allèles principaux : K (KEL1) et k (KEL2)
Le système Kell (KEL)( à titre informatif)
Les anticorps du système Kell (KEL)
� anticorps immuns,� le plus souvent de nature IgG,� fixent le complément, � dépistés par le test indirect à
l’antiglobuline.
Immunog énicité des antig ènes (Très important)
L'immunogénicité d'un antigène est la probabilité avec laquelle il induit la synthèse de l'anticorps correspondant lorsqu'il est introduit dans un organisme qui en est dépourvu.
Certains antigènes sont fortement immunogènes, d'autres moins.
D > [c-K] > [C-E-e] > aux autresMais ce n'est pas parce qu'un antigène est faiblement immunogène qu'il n'est pas dangereux
C Examens biologiques
Généralité ( à titre informatif)Groupage sanguins TDA RAI (Très important)
L’agglutination
L’agglutination est un ph énom ène qui
conduit à la réunion en amas de cellules
telles que des globules rouges, des
bactéries et des virus.
Agglutination immunologique
+
Agglutination immunologique
En fonction des conditions
Hématies
Agglutinées
Hématies
« sensibilisées »
(mais non agglutinées)
Les différentes techniquesLes différentes techniques de groupage ABO
( à titre informatif)
Acs
Ags
groupe
La détermination d’un groupe sanguin ABO comporte obligatoirement :� La détermination des Ags globulaires
= épreuve globulaire ou de Beth Vincent
� la détermination des Acs sériques= épreuve sérique ou de Simonin.
Le goupage ABO
Le groupage ABO
Prélèvement sur anticoagulant centrifugé
Le plasma contient les anticorps
Les hématies portent les antigènes
Les techniques de groupage
MicroplaquePlaque jetableTubeMicrofiltation
Les r éactifs de groupage
Les hématies - tests : A1 et B pour l’épreuve plasmatiqueA2 en cas de difficultés à l’épreuve plasmatiqueO des panels de dépistage et d’identification
Les sérums tests :monoclonauxvégétauxhumains polyclonaux
Groupage ABO en microplaque
Sérums tests + hématies à grouper
Hématies tests + plasma à grouper
Groupage ABO en microplaque
A
AB
B
O
A B AB A1 B
Groupage ABO surmicroplaque précoatée
Hématies àgrouper
Plasma à grouper + hématies tests A1 et B
A B AB A1 B
Groupage ABO sur plaque(Très important)
anti-A anti-B anti-AB GR A1 GRB
Hématies à grouper Plasma à grouper
+++ +++ +++ - -
Groupage ABO sur plaqueTrès important)
anti-A anti-B anti-AB GR A1 GR B
Hématies à grouper Plasma à grouper
+++ - +++ - ++
Groupage ABO en tube
antti-A anti-B anti-AB GR A1 GR B
Hématies à grouper Plasma à grouper
Groupage ABO en tube
Après centrifugation
anti-A anti-B anti-AB GR A1 GR B
αααα-A αααα-B αααα-AB A1 B
+++ - +++ - +++
Groupage ABO en tube
Intensités d’agglutination
++++ +++ ++ + -
Groupage en microfiltration
Groupage ABO par microfiltration
Hématies à grouper
Plasma à grouper + hématies tests
A1 B
3+ - 3+ - - -
A1 B
- 3+
Sensibilité des différentes techniques
ÉpreuvesTechniques
globulaire plasmatique
Plaque jetable + +
Tube +++ ++++
Microplaque ++ ++
Microfiltration ++++ +
Les tests à l’antiglobuline ou tests de Coombs direct TDA ( à retenir)
Le test direct à l’AGH (TDA) = test globulaire
met en évidence les Acs fixés sur les GR “in vivo”
• sensibilisation des GR du nné dans les MHNN
MHNN ABO et MHNN de type RH• sensibilisation des GR par des auto acs dans les
AHA
• sensibilisation des GR par des acs anti médicament dans les AHIA
• sensibilisation des GR du donneur par les Acs du receveur dans les accidents transfusionnels
Passage trans placentaire des anticorps maternels
IgM anti-A
IgG anti-A
Enfant A Mère O
Répartition des antigènes A et B à la surface des GR selon l’âge
naissance
3 - 6 mois 2 ans
GR fœtaux A
IgG anti-A maternelles
Incompatibilité ABO : naissance
Incompatibilité ABO : 2-3 mois
Diagnostic d ’une MHNN
TDA
Elution
+ =�
GR sensibilisés lavés
Éluat + AcsGR détruits
Identification de l’anticorps élué
Principe de l’élution
Les tests à l’antiglobuline outests de Coombs
Le test indirect à l’AGH (TIA) = test sérique
met en évidence la présence d’anticorps dans un sérum en mettant celui ci en contact “in vitro”avec des GR
• RAI
• épreuves directes de compatibilités
• la détermination de certains antigènes
LA RECHERCHE D’ANTICORPS
ANTI-ERYTHROCYTAIRES RAI
(à retenir)
LA RECHERCHE D’ANTICORPS
ANTI-ERYTHROCYTAIRES
Analyse essentielle pour assurer la sécurité
immuno hématologique des transfusions et
des grossesses
Doit être réalisée conformément à la législation
• Dans le cadre de la prévention des accidents
hémolytiques transfusionnels
• En contexte de greffe ou de transplantation
• En contexte pré ou périnatal
LA RECHERCHE D’ANTICORPS
ANTI-ERYTHROCYTAIRESDoit être réalisée
• avec des hématies –tests d’origine humaine
• sur du sérum ou du plasma
Comporte 2 étapes
• Une étape de dépistage
• Une étape d’identification en cas de dépistage positif
Permet d‘identifier des anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B
La RAI : permet la mise en évidence
d’Acs naturels irréguliers :
préexistants à toute transfusion
dangereux si actifs à 37°C
anti- Lea, Leb, M, N, P1, Lua...
d’Acs naturels réguliers :
anti- H des sujets Bombay
anti - P, P1, Pk des sujets pp
La RAI : permet la mise en évidence
d’Acs d'allo - immunisation
anti - D, C, E, c, e, Kell
anti- Fya, Fyb, Jka, Jkb, S, s
anti- Lan, Vel
qui apparaissent après transfusions ou grossesses
Une RAI négative ne signifie pas "absence d'allo immunisation"
Les anticorps apparaissent et disparaissent : leur
concentration varie avec le temps selon le rythme des stimulations
Il faut toujours tenir compte d'un allo-Ac, même si on ne retrouve plus l’Ac
« UN ANTICORPS UN JOUR UN ANTICORPS
TOUJOURS »
Une RAI négative ne signifie pas "absence d'allo immunisation"
Importance +++ de la RAI
entre le 5ème et 15ème
jour après la transfusion
Taux d’Hb Titre d’Ac
Transfusion 5 10 jours
L'épreuve directe de compatibilitéau laboratoire : EDC
ANSM : indications : SI RAI +
Obligatoire chez tout
patient ayant une RAI +du
jour ou dans ses
antécédants
Obligatoire chez le Nné en
présence d’Acs d’origine
maternel
-Faite au laboratoire :
Test in vitro =
sérum patient +
échantillon de la
poche à transfuser
L'épreuve directe de compatibilitéau laboratoire : EDC
- Durée de validité : 3 jours
- les poches de sang compatibilisées pour un patient sont étiquetées :
Nom, prénom, date de naissance du patient
date de l'examen
date et heure de fin de validité.