Post on 19-Jan-2016
Controle do Crescimento Microbiano
Universidade Federal de Ouro Preto
Objetivos da aula:
• Terminologia do controle microbiano.
• Fatores que influenciam a efetividade dos tratamentos antimicrobianos.
• Métodos Físicos e químicos de Controle Microbiano.
• Características e controle microbiano.
Histórico
Experimentos de Pasteur.
O Controle do crescimento científico começou há cerca de 100 anos.
A vida microbiana pode ser destruída pelo calor, e que métodos podem ser elaborados para impedir o acesso dos microrganismos presentes no ar aos
ambientes nutritivos.Técnicas de Assepsia – que impedem a contaminação por microrganismos não-
desejados, prática rotineiras utilizada nos laboratórios e em muitos procedimentos médicos.
O médico húngaro Ignatz Semmelweiss e o inglês Joseph Lister utilizaram essa ideia em algumas das primeira práticas de controle microbiano para procedimentos
médicos e técnicas cirúrgicas assépticas.
Terminologia do controle microbiano
Definição Comentários
Esterilização-Calor
-Radiação-Filtração
Destruição de todas as formas de vida
microbiana, incluindo os endosporos
Normalmente feito com vapor sob pressão ou um gás esterilizante como o
óxido de etileno
Esterilização comercial
Tratamento de calor suficiente para matar os
endosporos de Clostridium botulinum nos alimentos
enlatados
Os endosporos mais resistentes das bactérias
termófilas podem sobreviver, mas não irão germinar e crescer sob condições de armazenamento normais.
Desinfecção
Destruição de microrganismos nocivos normalmente refere-se a
destruição dos patógenos vegetativos- não formadores
de endosporos
Pode fazer uso de substâncias químicas, radiação
ultravioleta, água fervente ou vapor.
Terminologia do controle microbiano
Anti-sepsiaQuando esse tratamento é dirigido ao tecido vivo.
O produto químico é denominado um anti-
séptico.
Tratamento é quase sempre por
antimicrobianos químicos
Degerminação Remoção mecânica, em vez da morte de
micróbios em uma área limitada.
Usa-se um algodão embebido em álcool.
Sanitização
Tratamento destinado a reduzir as contagens microbianas a níveis seguros de saúde pública e minimizar as chances de transmissão de doença de um usuário para o outro.
Normalmente é obtido por lavagem em altas
temperaturas ou mergulhando em um desinfetante químico.
Terminologia do controle microbiano
• Os nomes dos tratamentos que causam a morte direta dos micróbios possuem o sufixo – cida
• GERMICIDA – mata todos os microrganismos• FUNGICIDA – mata os fungos• BACTERICIDA – mata as bactérias• VIRICIDA – inativa os vírus.
A Taxa de Morte Microbiana
Fatores que influenciam a efetividade dos tratamentos
antimicrobianos1.O número de micróbios1.O número de micróbios
2. Influências ambientais:2. Influências ambientais:A presença de matéria orgânica frequentemente inibe a ação dos antimicrobianos químicos. Em hospitais, a presença da matéria orgânica como sangue, vômito ou fezes influencia a seleção de desinfetantes.Locais que apresentam gorduras e proteínas estas protegem os micróbios que terão uma taxa de sobrevivência maior.Os micróbios em biofilmes sobre superfícies, são mais difíceis de serem atingidos pelos biocidas com eficiência.
Staphylococcus aureus
3.Tempo de exposição3.Tempo de exposição: Os antimicrobianos químicos frequentemente requerem exposição prolongada para que os micróbios ou endosporos mais resistentes sejam afetados.
4. Características microbianas:4. Características microbianas: A estrutura que o micro-organismo apresenta.
Ex: Mycoplasma pneumoniae
Ações dos agentes de Controle Microbiano
Alteração na Permeabilidade da Membrana
Danos as proteínas e aos ácidos nucléicos:As enzimas são vitais para todas as atividades celulares.
A lesão aos ácidos nucléicos pelo calor, radiação ou substâncias químicas é frequentemente letal para a célula; essa não pode mais se replicar, nem realizar as funções metabólicas normais como a síntese de enzimas.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
CalorCausa a morte microbiana através da desnaturação das
proteínas (úmido) ou oxidação (seco).
Ex: Muitos meios, vidrarias de laboratórios e instrumentos hospitalares.
A resistência ao calor varia entre diferentes micróbios.
PONTO DE MORTE TÉRMICA (PMT):É A MENOR TEMPERATURA EM QUE TODOS OS MICRORGANISMOS EM UMA SUSPENSÃO LÍQUIDA SERÃO MORTOS.
TEMPO DE MORTE TÉRMICA (TMT): PERÍODO MÍNIMO EM QUE TODOS OS MICRORGANISMOS SÃO MORTOS EM UMA CULTURA LÍQUIDA, EM UMA DADA TEMPERTATURA.
TEMPO DE REDUÇÃO DECIMAL(TRD): TEMPO EM MINUTOS EM QUE 90% DE UMA POPULAÇÃO, EM UMA DADA TEMPERATURA SERÃO MORTOS.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
• O CALOR USADO NA ESTERILIZAÇÃO PODE SER APLICADO EM DUAS DIFERENTES
FORMAS:CALOR ÚMIDO: Mata os microrganismos principalmente pela
coagulação das proteínas, que é causada pela desnaturação destas. Ex: fervura, vapor de fluxo livre, autoclave, pasteurização.
CALOR SECO: chama direta e ar quente (incubadora).
Métodos Físicos de Controle Microbiano
CALOR ÚMIDO
- FERVURA
(100ºC – ao nível do mar)
Mata as formas vegetativas de
bactérias, quase todos
os vírus, fungos e seus
esporos em 10 minutos.
Normalmente muito mais rápido.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
CALOR ÚMIDO
-VAPOR DE FLUXO LIVRE - não pressurizado
(temperatura semelhante à fervura =100ºC ao nível do mar)
Os endósporos bacterianos e alguns vírus não são destruídos tão rapidamente.
Obs: Alguns tipos de vírus da hepatite, podem sobreviver a até 30 minutos de fervura, e alguns endosporos bacterianos podem resistir á fervura por mais de 20 horas.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
CALOR ÚMIDO- AUTOCLAVEMétodo preferencial deesterilização, usada amenos que o materialpossa ser danificado pelocalor ou umidade.Aumenta a pressão interna,e consequentemente atemperatura: 1 atm e121ºC.
A esterilização em uma autoclave é mais efetiva quando os organismos entram em contato com o vapor diretamente ou estão contidos em um pequeno volume de solução aquosa;
Sob estas condições, o vapor em uma pressão de cerca de 1 atm (15 psi) e 121ºC, matará todos os organismos e seus endósporos em cerca de 15 minutos.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
CALOR ÚMIDO- Pasteurização: é o processo utilizado em alimentos para
destruir microrganismos patogênicos ali existentes. Foi criado em 1864, levando o nome do químico francês que o criou: Louis Pasteur.
Produtos como leite, iogurte, sorvete e cerveja apresentam seus próprios tempos e temperaturas de pasteurização. Uma vez que o aquecimento é menos eficiente em alimentos mais viscosos, e as gorduras podem ter um efeito protetor para os microrganismos nos alimentos.
As indústrias de laticínios realizam o teste da fosfatase.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
Pasteurização lenta: em que se aplicam temperaturas mais baixas durante maior tempo (65°C por 30 minutos).
Pasteurização rápida: quando se aplicam temperaturas mais altas (75°C) durante alguns segundos - HTST (High Temperature and Short Time) ou "alta temperatura e curto tempo".
Pasteurização muito rápida, quando a temperatura vai de 130°C a 150°C, durante três a cinco segundos – UHT (Ultra High Temperature) ou "temperatura ultra-elevada".
Métodos Físicos de Controle Microbiano
Esterilização por calor seco:
O calor seco mata por efeitos da oxidação.
*Chama direta ou incineração - utilizado para esterilizar alças de inoculação. Método efetivo para esterilizar e eliminar papel, copos, sacos contaminadas, material hospitalar.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
Esterilização por calor seco:
* Em ar quente: Os itens a serem esterilizados por esse procedimento são colocados em um forno, geralmente á uma temperatura de cerca de 170°C mantida aproximadamente 2 horas
Métodos Físicos de Controle MicrobianoFILTRAÇÃO
Passagem de líquido ou gás através de um material semelhante a uma tela com poros pequenos o suficiente para reter os microrganismos.
Usada para esterilização de materiais sensíveis ao calor: meios de cultura, enzimas, vacinas, antibióticos.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
Nos dias atuais utilizam-se os filtros de membrana – compostos de substâncias como ésteres de celulose ou polímeros plásticos em uso industrial e laboratorial.
Apresentam 0,1mm de espessura
Os poros de filtro de membrana:
0,22 µm e 0,45 µm –Bactérias
0,01 µm – Bactérias como
os espiroquetas e os vírus
Métodos Físicos de Controle MicrobianoBaixas temperaturas:
O efeito depende do microrganismo e da intensidade da aplicação.
Temperaturas de 0 a 7ºC a taxa metabólica da maioria dos microrganismos é reduzida.
Psicótrofos-crescem lentamente em temperaturas de refrigerador alteram o aspecto e sabor dos alimentos.
Patogênicos não crescem em temperaturas de refrigerador.Temperaturas baixas (abaixo do ponto de congelamento) obtidas
RAPIDAMENTE tendem a tornar os micróbios dormentes – não
necessariamente os mata.O congelamento LENTO é mais nocivo – os cristais de gelo que
se formam e crescem rompem a estrutura celular e molecular dos microrganismos.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
Alta pressão:
É um método muito utilizado no Japão e nos Estados Unidos na conservação de sucos de fruta.
É aplicado uma pressão em suspensões líquidas e esta é transferida instantaneamente e uniformemente para a amostra, alterando as estruturas
moleculares das proteínas e dos carboidratos- inativação das células bacterianas vegetativas.
É aplicado uma pressão em suspensões líquidas e esta é transferida instantaneamente e uniformemente para a amostra, alterando as estruturas
moleculares das proteínas e dos carboidratos- inativação das células bacterianas vegetativas.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
Dessecação:Na ausência de água, os microrganismos não podem crescer ou
ser reproduzir, mas podem permanecer viáveis por anos.
A resistência das células vegetativas ao ressecamento varia com a espécie e o ambiente do organismo.
Ex: Neisseria gonorrhoeae Mycobacterium tuberculosis
Métodos Físicos de Controle Microbiano
PRESSÃO OSMÓTICAUso de altas concentrações de sais e açúcares.
Criam um ambiente hipertônico que ocasiona a
saída da água da célula microbiana
Métodos Físicos de Controle Microbiano
RadiaçãoTem vários efeitos sobre as células, dependendo de seu
comprimento de onda, intensidade e duração.
Há dois tipos de radiação:
- Ionizante: raios gama, raio X e feixes de elétrons
de alta energia
- Não ionizante: luz ultravioleta (UV)
Métodos Físicos de Controle Microbiano
RADIAÇÃO IONIZANTE
Comprimento de onda curto (menos de 1 nm)
altamente energético.
O principal efeito é a ionização da água, que forma
radicais hidroxila altamente reativos - estes radicais
reagem com os componentes orgânicos celulares,
especialmente DNA.
É utilizada na esterilização de produtos farmacêuticose materiais dentários e médicos.
É utilizada na esterilização de produtos farmacêuticose materiais dentários e médicos.
Métodos Físicos de Controle Microbiano
• RADIAÇÃO NÃO IONIZANTE (UV)
Métodos químicos de Controle Microbiano
São usados para controlar o crescimento de micróbios em TECIDOS VIVOS e OBJETOS INANIMADOS.
Infelizmente poucos agentes químicos obtêm a esterilidade; a maioria deles meramente reduz as populações microbianas em níveis seguros ou removem as formas vegetativas.
O grande problema é a seleção de um agente, pois nenhum desinfetante isolado é apropriado para todos as circuntâncias.
Princípios da desinfecção efetiva:
Ler o rótulo do produto: quais grupos microbianos é capaz de controlar e a concentração de uso;
Natureza do material a ser desinfetado (pH e matéria orgânica);
Contato microrganismo X desinfetante;
Temperatura de ação (quanto maior melhor a ação).
Métodos químicos de Controle Microbiano Tipos de desinfetantes: Fenol e compostos fenólicosFenol e compostos fenólicos
Agente QuímicoAgente Químico Mecanismo de AçãoMecanismo de Ação Uso PreferencialUso Preferencial ComentárioComentário
1- Fenol1- FenolRuptura da m. plásmática e
desnaturação das enzimas
Raramente utilizado Usa-se pouco devido à possibilidade de
causar irritação e odor desagradável.
2- Compostos 2- Compostos FenólicosFenólicos
Ruptura da m. plásmática e
desnaturação das enzimas
Superfícies ambientais,
instrumentos, superfícies cutâneas
São reativos mesmo em presença de
material orgânico
3- Bifenóis3- BifenóisProvável ruptura da
m. plásmática Sabonetes para as
mãos e loções hidratantes
Ampla utilização, porém mais eficaz
contra gram- positivos
Métodos químicos de Controle Microbiano
Agente QuímicoAgente Químico Mecanismo de AçãoMecanismo de Ação Uso PreferencialUso Preferencial ComentárioComentário
1-Biguanidas1-Biguanidas Ruptura da m. plásmática
Desinfecção da pele Bactericida contra Gram- positiva e
negativa
2-Halogênios2-Halogênios o iodo inibi a
função das proteínas, o cloro
altera os componentes
celulares
Utilizado para desinfectar
equipamentos de laticínios (Cloro)
3- Álcoois 3- Álcoois Desnaturação das
proteínas e dissolução dos
lipídios
Limpeza da pele antes das injeções e
de superfícies
Bactericida e fungicida, mas ineficaz contra
endosporos ou vírus não- envelopado.
4- Metais pesados e 4- Metais pesados e seus componentesseus componentes
Desnaturação das enzimas e de outras
proteínas
O nitrato de prata pode ser usado para prevenir oftalmia
gonorréica neonatal;
O mercúrio desinfeta a pele e as
membranas mucosas.
Cloreto de zincoAnti-séptico bucal
Mercúrio-biocida
Métodos químicos de Controle Microbiano
Agente QuímicoAgente Químico Mecanismo de AçãoMecanismo de Ação Uso PreferencialUso Preferencial ComentárioComentário
1- sabões e 1- sabões e detergentedetergente
Remoção mecânica dos micróbios
através da escovação
Limpeza da peleE remoção de
resíduos
Muitos sabões antibacterianos
contém antimicrobianos
2-Detergentes 2-Detergentes ácidos-aniônicosácidos-aniônicos
Incerto-Pode envolver a inativação
ou ruptura das enzimas
Sanitização em industrias de
processamento de laticínios e alimentos
São de ação rápida
3- Detergentes 3- Detergentes catiônicos catiônicos
(compostoss de (compostoss de amônio quaternário)amônio quaternário)
Inibição de enzimas, desnaturação das
protéinas e ruptura das membranas
plasmáticas
Anti-séptico para pele, instrumentos,
utensílios, objetos de borracha
Bactericidas, fungicidas e viricidas
contra vírus envelopados.
Agentes de superfície:
Métodos químicos de Controle Microbiano
Agente QuímicoAgente Químico Mecanismo de AçãoMecanismo de Ação Uso PreferencialUso Preferencial ComentárioComentário
Ácidos orgânicosÁcidos orgânicos Inibição metabólica, afetando
principalmente os bolores
Muito utilizado para controlar bolores e algumas bactérias
Aldeídos Aldeídos Desnaturação de
proteínasUtilizado para desinfecção de equipamentos
médicos
Antimicrobiano muito efetivo
Esterilizantes Esterilizantes gasososgasosos
Desnaturação de proteínas
Excelente esterilizante
especialmente para objetos que seriam danificados pelo
calor
PeroxigêniosPeroxigênios(agentes oxidantes(agentes oxidantes
Oxidação Ferimentos profundos
O peróxido de hidrogênio é um anti-séptico fraco,ma um
bom desinfetante.
Métodos químicos de Controle Microbiano
ANTIBIÓTICOS
Compostos químicos produzidos por microrganismos que inibem ou matam outros microrganismos.
Características e controle microbiano
Aula Prática
Vamos realizar a prática do “dedo sujo”
1°álcool;
2° hipoclorito de sódio
3° iodo
4° Lavar com sabão
5° nada
Exercícios
1) Qual dos seguintes não pode ser usado para esterilizar uma solução ao calor armazenado em um recipiente plástico?
a) Radiação gamab) óxidos de etilenoc) Radiação não –ionizanted) Autoclave
2) Quais são os principais modos de ação dos antibióticos sobre as bactérias?
Referências Bibliográficas
• Gerard J. Tortora ; Berbell R. Funke ; Christine L. Case. – Microbiologia. 8° edição-2005
• Michael T. Madigan, John M. Martinko, Jack Parker ; tradução e revisão técnica Cynthia Maria Kyaw. - Microbiologia de Brock .10° Edição- 2004
• Patrick R. Murray et al. ; traduzido por Eiler Fritsch Toros. - Microbiologia médica 4° Edição- 2004.
Obrigada