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8/9/2019 aula_fotometria
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Fotometria
Karin A. Riske
kariske@unifesp.br
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Fotometria
estudo da difuso
experimento: determinao da concentrao de uma substnciaa partir de sua absoro de luz (fotometria ou colorometria)
- o que luz (radiao eletromagntica) ?
- absoro de luz
- fotometria
- medidas e erros
muito utilizada em anlises clnicas
ferramenta para: - caracterizao desubstncias
- determinao de concentrao
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radiao eletromagntica
variao dos campos eltrico e magntico
variao de variao de variao de ...
no depende de um meio material para se propagar
velocidade, comprimento de onda (frequncia), energia
c
E = henergia de 1 fton
O que luz?
energia depende s de
e no da amplitude
= hc /
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O que luz?
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O que luz?
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Absoro de luz tomos e molculas possuem nveis discretos de energia
Energy
nveis vibracionais
nveis rotacionais
nveis eletrnicos
Eo
E1
Vo
V1
V2V3V4
ro
r1
r2
rn
...
h2
h1
luz visvel
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Ab
sorb
nc
iaEspectro de Absoro
Absoro de luz
Energy
hv
espectro caracterstico para cada molcula
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Absoro de luz espectro caracterstico para cada molcula
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Absoro de luz medida de absoro de luz
Io I detetor
caminho ptico
concentraoc
d d d d
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Absoro de luz medida de absoro de luz
caminho ptico
concentraoc
transmitncia T
Lei de Lambert-Beer
deve depender de c,e propriedades da substncia
: coeficiente de extino molar A
x 100 T(%)
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Absoro de luz medida de absoro de luz
transmitncia absorbncia
linearizao
Lei de Lambert-Beer
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Absoro de luz
Lei de Lambert-Beer
condies de validade da lei de Lambert-Beer
- absorvedores independentes
- meio homogneo e no absorvente
- ausncia de espalhamento de luz
- concentrao baixa
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Absoro de luz
Lei de Lambert-Beer
curva padromenor sensibilidade
concentrao
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Absoro de luz
Lei de Lambert-Beer
regio de validade da lei
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Medidas e Erros
medidas experimentais esto sempre sujeitas a erros
erros
acidentais
sistemticos
estatsticos
tendenciosos
preciso
exatido
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Medidas e Erros
erros acidentais
+ precisa - precisa
mesma exatido
erros sistemticos
mesma preciso
+ exata - exata
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Medidas e Erros
exatido boa preciso boa
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Medidas e Erros
exatido boa preciso ruim
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Medidas e Erros
exatido ruim preciso boa
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Medidas e Erros
exatido ruim preciso ruim
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Medidas e Erros
erros acidentais
Ab
so
rb
nc
ia
concentrao
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Medidas e Erros
erros sistemticos
Ab
so
rb
nc
ia
concentrao
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Experincia
Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)
atravs de uma membrana de celofane
compartimento 1 compartimento 2
membrana de celofane
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Experincia
Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)
atravs de uma membrana de celofane
compartimento 1 compartimento 2
membrana de celofane
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Experincia
Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)
atravs de uma membrana de celofane
compartimento 1 compartimento 2
membrana de celofane
0,5 g/lKMnO4
medir A(t)
c(t)
J
ANTES:
construir curva padro do KMnO4
P
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Experincia
obteno da curva padro do KMnO4
preparar solues de diferentes concentraes de KMnO4
Tubo KMnO4(ml)
H2O
destilada(ml)
Concentraode KMnO4
(g/l)
1 1 9
2 2 8
3 3 7
4 4 6
5 5 5
soluo estoque [KMnO4] = 0,10 g/l
0,01
0,02
0,03
0,04
0,05
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Experincia
obteno da curva padro do KMnO4
medida da absorbncia de cada concentrao
Io I
= 525 nm
caminho ptico 1cm
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Tubo Concentraode KMnO4
(g/l)
Absorbncia Transmitncia
1 0,01 0,16
2 0,02 0.32
3 0,03 0,48
4 0,04 0,64
5 0,05 0,80
Experincia
obteno da curva padro do KMnO4
medida da absorbncia de cada concentrao
0,69
0,48
0,33
0,23
0,16
fazer o grfico A x c e T x c
achar
x 100 T(%)
69%
48%
33%
23%
16%
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Experincia
obteno da curva padro do KMnO4
= 2,54 x 103 M-1cm-1
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Experincia
Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)
atravs de uma membrana de celofane
0,5 g/lKMnO4
medir A(t)
c(t)
J
a cada 5 min medir absorbncia
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Experincia
Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)
atravs de uma membrana de celofane
0,5 g/lKMnO4
a cada 5 min medir absorbncia
5 min
10 min
15 min
20 min
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Experincia
Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)
atravs de uma membrana de celofane
0,5 g/lKMnO4
Tempo(min)
Absorbncia Concentraode KMnO4
(g/l)
5 0,1410 0,29
15 0,43
20 0,58
0,00850,0180
0,0270
0,0360
fazer o grfico c x tcalcular a permeabilidade P
assumindo estado estacionrio dados: rea da membrana 7 cm2
volume dos compartimentos 10ml
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Experincia
Estudo da difuso do permanganato de potssio (KMnO4)
atravs de uma membrana de celofane
P = 8,6 x 10-5 cm/s
J = 4,3 x 10-8 g/cm2s
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